La Esclerosis Múltiple (EM) es una enfermedad desmielinizante inflamatoria crónica del sistema nervioso central (SNC) que afecta de forma típica a personas jóvenes, alrededor de la tercera década de la vida, suponiendo la segunda causa de discapacidad neurológica a esa edad. La paradoja de que las mujeres tengan un mayor riesgo de esclerosis múltiple pero que los hombres tengan una evolución peor de la enfermedad ha ayudado a descubrir un aspecto fascinante de la fisiopatología de la EM, aportándonos pistas para su conocimiento y para el desarrollo de opciones terapéuticas. Estas diferencias intersexuales así como la influencia en el curso de la enfermedad de las etapas de cambios hormonales como la menarquia, el embarazo y la menopausia, han llevado a determinar a las hormonas sexuales, principalmente a los estrógenos, como una de las responsables de esas diferencias. Los anticonceptivos hormonales combinados orales (AHCO) son una fuente exógena de estrógenos ampliamente utilizada por mujeres durante su etapa reproductiva, edad en la que es más prevalente la esclerosis múltiple, lo cual nos permite estudiar la influencia de éstos en el riesgo, la edad de debut y el curso clínico de la enfermedad. Hasta la fecha no ha sido demostrada la influencia de la toma de AHCO en el riesgo de desarrollar EM y no existen datos concluyentes sobre el efecto de la toma de estos fármacos en el curso clínico de la EM a largo plazo. En esta tesis se analiza la influencia de la toma de AHCO en el curso clínico de la EM en mujeres con tratamiento modificador del curso de la enfermedad. Se describe la enfermedad a largo plazo mediante tres variables clínicas: la tasa anualizada de brotes (TAB), la escala de severidad de la EM (MSSS) y la puntuación en la escala de discapacidad de Kurtzke (EDSS), y se divide a las pacientes en grupos en función de la toma o no AHCO y de la relación de la toma con el momento de debut de la enfermedad; se comparan las variables clínicas en los tres grupos y mediante una regresión múltiple estudiamos si la toma de AHCO y otras variables de la enfermedad y ginecológicas influyen en la MSSS, EDSS y TAB. Así mismo mediante un modelo de regresión logística se investiga si la toma de anticonceptivos después del debut de la enfermedad puede predecir un mejor pronóstico a largo plazo, finalmente y si la toma de AHCO antes de la EM podría influir en la edad de debut de la enfermedad. En nuestras pacientes la toma de AHCO durante al menos un año después del debut de la EM se asocia a una menor EDSS, a una menor severidad de la EM medida por la MSSS y aumenta la probabilidad de tener una EM benigna. Además tomar AHCO antes del primer síntoma de la EM durante al menos un año produce un retraso en la edad de debut de la enfermedad. / Multiple Sclerosis (MS) is a chronic inflammatory demyelinating disease of the central nervous system (CNS) that typically affects young adults at around the third decade of life, representing the second largest cause of neurological disability at that age. The paradox that women are at greater risk of multiple sclerosis but men have worse disease progression has helped in discovering a fascinating aspect concerning the physiopathology of MS, providing us clues for its knowledge and for the development of therapeutic options. These differences between the sexes, as well as the influence on the disease course of the hormonal changes in different stages of life such as menarche, pregnancy and menopause; has leaded us to determine sex hormones, mainly estrogens, as one of the factors responsible for those differences. Combined oral hormonal contraceptives (COHC) are an exogenous source of oestrogens widely used by women during their reproductive years, stage in which multiple sclerosis is more prevalent. This aspect allows us to study their impact on the risk, age of onset and clinical course of the disease. To date, the influence of taking COHC on the risk of developing MS has not been demonstrated, and there are no conclusive data on the long-term effects that taking these drugs may have on the clinical course of MS. This dissertation analyses the influence of COHC on the clinical course of MS in women undergoing a disease modifying treatment. The disease is described at a long term considering three clinical variables: the annualized relapse rate (ARR), MS severity score (MSSS) and the score in the Kurtzke disability scale (EDSS). Patients were divided into three groups depending on whether they were taking COHC or not, and on the relationship of the disease onset with the drug taking; clinical variables were compared between the three groups and, through a multiple regression it was studied if COHC and other disease and gynecological variables have an influence on the MSSS, EDSS and ARR. Furthermore, it was also analysed through a logistic regression model if taking contraceptives after the onset of the disease could predict a better long-term prognosis. Finally, it was considered if taking COHC before MS could have an influence in the onset age of the disease. In our patients, taking COHC at least during one year after MS onset is associated with a lower EDSS, less severity in MS measured by MSSS and a higher probability of benign MS. Moreover, taking COHC at least one year before the first symptom of the disease causes a delay in its onset age.

Objectivos: el objetivo principal de este estudio fue evaluar los efectos de la aplicación de melatonina y de un nuevo flavonoide (apigenina) sobre la neoformación y maduración ósea en un periodo de 30, 60 y 90 días mediante estudio histológico e histomorfométrico. Materiales y Metodos: En este estudio se han utilizado nueve perros de raza Beagle procedentes del Animalario de la Universidad de Murcia, con una edad comprendida entre los 14 y los 16 meses y con un peso aproximado de entre 16 y 18 kg. Los perros presentan mandíbulas intactas, dentición permanente totalmente erupcionada sin ningún tipo de trauma oclusal. Los especímenes mostraron buenas condiciones de salud general y oral. Resultados : Los resultados ponen de manifiesto, A los 30 dias. El hueso inmaduro en el grupo tratado con melatonina es inferior al del grupo control y la diferencia entre las medias es estadísticamente significativa (t(8)=16,222). El hueso inmaduro en el grupo tratado con apigenina es inferior al del grupo sin tratamiento y la diferencia de medias también ha resultado significativa (t(8)=19,167). Respecto a los grupos con tratamiento, el hueso inmaduro en el grupo tratado con melatonina es inferior al del grupo tratado con flavonoides y esta diferencia es estadísticamente significativa (t(8)=10,301). A los 60 dias, el hueso inmaduro en el grupo tratado con melatonina es inferior al del grupo control y la diferencia de las medias es estadísticamente significativa (t(8)=51,001). El hueso inmaduro en el grupo tratado con apigenina es inferior al del grupo sin tratamiento y la diferencia de medias que se obtiene también ha resultado significativa (t(8)=12,441. En cuanto a los grupos a los que se ha aplicado tratamiento, en el grupo tratado con melatonina el hueso inmaduro es inferior al del grupo tratado con flavonoides y la diferencia en el segundo mes también es estadísticamente significativa (t(8)=8,714). A los 90 dias , en el grupo tratado con melatonina, el hueso inmaduro es inferior al del grupo sin tratamiento. No obstante, la diferencia de las medias no es estadísticamente significativa (t(8)=2,201). En el grupo tratado con apigenina, el hueso inmaduro también es inferior al del grupo control y la diferencia de medias que se obtiene tampoco ha resultado significativa (t(8)=,619). Si comparamos los grupos con tratamiento, en el grupo tratado con melatonina el hueso inmaduro es inferior al del grupo tratado con flavonoides; sin embargo, la diferencia en el tercer mes no es estadísticamente significativa (t (8)=1,637). Conclusion: tras la aplicación de melatonina y/o apigenina se ha observado que se produjo una disminución significativa del porcentaje de hueso inmaduro a lo largo de los meses. En la apigenina la disminución es menor respecto a la melatonina. El tratamiento de melatonina favorece la neoformación y maduración ósea en mayor medida que el tratamiento con apigenina , tanto a los 30 como a los 60 días de la aplicación. La aplicación de melatonina y de apigenina en alvéolos postextracción a los 90 días no produce efectos diferentes en la neoformación y maduración ósea a la no aplicación de tratamiento. El tratamiento implantológico es una opción terapéutica y eficaz, muy demandada y con muy buenos resultados. La aplicación de melatonina, sola o combinada con otras sustancias mejora la osteointegración. Tanto la melatonina y apigenina demostraron sus ventajas en la maduración ósea, aunque El tratamiento de melatonina favorece la neoformación y maduración ósea en mayor medida que el tratamiento con apigenina. / Abstract Objectives: the main objective of this study was to evaluate the effects of melatonin and implementation of a new flavonoid (apigenin) on the new formation and bone maturation over a period of 30, 60 and 90 days by histological and histomorphometric study. Materials and Methods: in this study we have used nine Beagle dogs from the Animal Facility of the University of Murcia, with ages between 14 and 16 months and weighing approximately 16 to 18 kg. Dogs have intact jaws, fully erupting permanent teeth with no occlusal trauma. The specimens showed good general conditions and oral health. Results: the results show, 30 days. The immature bone in the group treated with melatonin smaller than the control group and the difference in means is statistically significant (t (8) = 16,222). The immature bone in the group treated with apigenin smaller than the untreated group and the mean difference has also been significant (t (8) = 19,167). With respect to the treatment groups, the immature bone in the group treated with melatonin smaller than the group treated with flavonoids and this difference is statistically significant (t (8) = 10,301). At 60 days, the immature bone in the group treated with melatonin smaller than the control group and the difference in means is statistically significant (t (8) = 51.001). The immature bone in the group treated with apigenin smaller than the untreated group and the mean difference obtained has also been significant (t (8) = 12,441. As for the groups to which has been applied treatment in the group treated with melatonin group the immature bone is less than the treaty with flavonoids and the difference in the second month group is also statistically significant (t (8) = 8,714). After 90 days, in the group treated with melatonin, the immature bone smaller than the untreated group. However, the mean difference is not statistically significant (t (8) = 2,201). In the group treated with apigenin, immature bone is also lower than the control group and the mean difference obtained did not prove significant (t (8) =, 619). Comparing the treatment groups in the group treated with melatonin immature bone smaller than the group treated with flavonoids; however, the difference in the third month is not statistically significant (t (8) = 1.637). Conclusion: after the application of melatonin and / or apigenin it has been observed that there was a significant decrease in the percentage of immature bone along months. In apigenin is decreased lower compared to melatonin. Melatonin treatment promotes neoformation of bone maturation and further treatment with apigenin, both 30 and 60 days after application. The application of melatonin and apigenin in extraction sockets 90 days does not produce different effects on the newly formed bone maturation and the non-application of treatment. Implant therapy is a therapeutic and effective, high demand and very successful option. The application of melatonin, alone or combined with other substances improving osseointegration. Both melatonin and apigenin showed its advantages in bone maturation, although melatonin treatment promotes neoformation and bone maturation greater extent than treatment with apigenin.

Durante la presente Tesis Doctoral se han estudiado los efectos inmunotoxicológicos de la exposición mediante baño a arsénico, cadmio y mercurio en la dorada (Sparus aurata L.), la cual es una especie que posee la mayor tasa de producción en la acuicultura mediterránea. Por otra parte, también se han estudiado los parámetros inmunológicos y físico-químicos del moco de la piel de cinco especies de peces teleósteos marinos. En el caso de la dorada los parámetros inmunológicos en el moco se compararon con los presentes en el suero. Por último, se evaluaron los efectos de estos metales pesados en la inmunidad de la mucosa de la piel de la dorada. Por otra parte, los peces ocupan una posición filogenética clave en la evolución de los vertebrados representando el primer grupo animal que tiene un sistema inmunitario innato y adaptativo bien estructurado, en este sentido, el estudio de la inmunología de este grupo de vertebrados tiene un doble interés científico y filogenético básico. En primer lugar, hemos evaluado los efectos de la exposición mediante baño a concentraciones sub-letales de arsénico (As), cadmio (Cd) y mercurio (Hg) en la dorada, con especial énfasis en la respuesta inmunitaria innata. En el caso del As, se observaron alteraciones histológicas en el hígado, así como acumulación de este metal en este órgano después de 30 días de exposición. Los parámetros inmunitarios humorales (niveles de IgM, actividades del complemento y la peroxidasa) no se vieron afectados, mientras que los parámetros innatos celulares del riñón cefálico (peroxidasa, explosión respiratoria y las actividades fagocíticas en los leucocitos) se incrementaron significativamente después de 10 días de exposición en comparación con los peces control. Del mismo modo, con respecto a la exposición a Cd, se observaron alteraciones morfológicas progresivas en el hígado y en el páncreas exocrino que se correlacionaron con la acumulación hepática de Cd, la reducción en la actividad del complemento en el suero y la explosión respiratoria en los leucocitos en un grado significativo después de 10 y 30 días de exposición. La actividad de la peroxidasa en el suero y la fagocitosis de los leucocitos aumentaron en diferentes momentos del muestreo, mientras que los niveles de IgM en el suero y la actividad de la peroxidasa en los leucocitos resultaron inalterados. Finalmente, se confirmaron los efectos toxicológicos del Hg porque los ejemplares de dorada expuestos mediante baño mostraron un aumento de las enzimas antioxidantes en el hígado después de 2 días, alteraciones histopatológicas en el hígado y la piel, así como la sobre-expresión de genes relacionados con el metabolismo de xenobióticos, el estrés celular y la apoptosis en la piel. Además, las actividades del complemento y la peroxidasa en el suero se incrementaron, así como la peroxidasa, la explosión respitaroria y las actividades fagocíticas en los leucocitos de riñón cefálico que se incrementaron en diferentes tiempos de exposición. En segundo lugar, se identificaron y caracterizaron los diferentes mecanismos de defensa humorales constitutivos de la mucosa de la piel de la dorada (Sparus aurata) y se compararon con los presentes en el suero. Por lo tanto, se demostró que el moco de la piel de la dorada contiene niveles más bajos de IgM, niveles similares de lisozima, fosfatasa alcalina y proteasas, y más altos en actividades como la esterasa, peroxidasa y antiproteasa que en el suero. Asimismo, el moco de la piel reveló una fuerte actividad bactericida contra bacterias patógenas de peces testadas en comparación con la actividad encontrada en el suero, mientras que las bacterias no patógenas pueden incluso crecer mejor en la presencia de moco. Además, se evaluaron los mecanismos de defensa humoral y parámetros físico-químicos en el moco de la piel de cinco especies de teleósteos marinos. Se observaron varias correlaciones entre los parámetros como el pH, la conductividad y el potencial redox, así como, entre la densidad y la osmolaridad. Centrándose en la respuesta inmunitaria, los resultados mostraron que mientras que algunas de las actividades inmunitarias fueron muy similares en los peces estudiados, otras, tales como las actividades de la proteasa, antiproteasa, fosfatasa alcalina, esterasa y peroxidasa variaron dependiendo de las especies de peces. Por último, se investigó si los parámetros de la inmunidad innata de las mucosas de la piel determinados en la dorada se ven afectados o no por los metales pesados ensayados anteriormente. De este modo, se detectaron algunos cambios en la composición del moco y en las funciones inmunitarias después de la exposición a estos metales. En general, el perfil de carbohidratos sufrió pequeñas variaciones y la mayoría de las actividades enzimáticas se incrementaron después de la exposición. Curiosamente, el Hg provocó los incrementos más importantes en la mucosa de la piel, mientras que los perfiles de proteínas obtenidos por SDS-PAGE y HPLC mostraron poca variación en el moco de la dorada después de la exposición a estos metales. En conclusión, estos resultados podrían ser útiles para una mejor comprensión de los efectos de la exposición a metales pesados en el sistema inmunitario de la dorada y como podrían afectar a la biología marina, la acuicultura o a los consumidores humanos. Por otra parte, el estudio de la función y el comportamiento de la inmunidad de las mucosas en la piel, como un componente clave del sistema inmunitario innato, podría ayudar a comprender la resistencia de los peces, así como la presencia y distribución de los patógenos y la magnitud de las infecciones y el uso de los parámetros como biomarcadores en la toxicología de los peces, los cuales serían los aspectos de mayor importancia para la acuicultura / During the present PhD Thesis, we have studied the immunotoxicological effects of waterborne exposure to arsenic, cadmium and mercury in the gilthead seabream (Sparus aurata L.), which is a species with the highest rate of production in Mediterranean aquaculture. Furthermore, the immunological and physico-chemical parameters of the skin mucus from five marine teleost fish species have been also studied. In the case of gilthead seabream the immunological parameters in mucus were compare with those present in serum. Finally, the effects of these heavy metals in the skin mucosal immunity of gilthead seabream were evaluated. Moreover, fish occupy a key phylogenetic position in the evolution of vertebrates representing the first animal group that has a well structured innate and adaptive immune system; in this sense, the study of the immunology of this group of vertebrates has a dual basic scientific and phylogenetic interest. Firstly, we have evaluated the effects of waterborne exposure to sub-lethal concentrations of arsenic (As), cadmium (Cd) and mercury (Hg) in the teleost fish gilthead seabream, with special emphasis in the innate immune response. In the case of As, we observed histological alterations in the liver as well as As-accumulation in this organ after 30 days of exposure. The humoral immune parameters (seric IgM, complement and peroxidase activities) were not affected while the cellular innate parameters of head-kidney (leucocyte peroxidase, respiratory burst and phagocytic activities) were significantly increased after 10 days of exposition compared to the control fish. Similarly, regarding Cd exposure, it was observed progressive deleterious morphological alterations in liver and exocrine pancreas that correlated with the hepatic Cd-accumulation, reduction in the serum complement activity and leucocyte respiratory burst to a significant extent after 10 and 30 days of exposure. The serum peroxidase activity and leucocyte phagocytosis were increased at different sampling times while serum IgM levels and leucocyte peroxidase activity resulted unaltered. Finally, toxicological effects were confirmed for Hg because waterborne-exposed seabream specimens showed increased liver antioxidant enzymes after 2 days, histopathological alterations in the liver and skin as well as up-regulation of the expression of genes related to xenobiotic metabolism, cellular stress and apoptosis in the skin. Further, serum complement and peroxidase activities were increased, as well as head-kidney leucocyte peroxidase, respiratory burst and phagocytic activities were increased in different exposure time. Secondly, different constitutive humoral defence mechanisms of the skin mucus of gilthead seabream (Sparus aurata) were identified and characterized and compared with those present in the serum. Thus, it was demonstrated that gilthead seabream skin mucus contains lower levels of IgM, similar levels of lysozyme, alkaline phosphatase and proteases, and higher esterase, peroxidase and antiprotease activities than serum. Skin mucus revealed stronger bactericidal activity against tested fish pathogen bacteria compared to the serum activity, whilst non-pathogen bacteria can even grow better in the presence of mucus. In addition, humoral defence mechanisms and physico-chemical parameters in the skin mucus of five species of teleosts were evaluated. Several correlations were observed between parameters as pH, conductivity and redox potential, as well as, density and osmolarity. Focusing on the immunological response, results showed that while some immune activities were very similar in the studied fish other such as protease, antiprotease, alkaline phosphatase, esterase and peroxidase activities varied depending on the fish species. Finally, we investigated whether the skin mucus innate immune parameters determined in the gilthead seabream are affected or not by the heavy metals assayed above. Thus, some changes in the mucus composition and immune functions after heavy metal exposure were detected. Overall, carbohydrate profile suffered little changes and most of the enzymatic activities were increased after exposition. Interestingly, Hg evoked the most important increments in the skin mucus and protein profiles obtained by SDS-PAGE and HPLC showed little variations in the seabream mucus after exposure to heavy metals. In conclusions, these results could be useful for better understanding the effects of exposition to heavy metals in the seabream immune system and as could interfere with fish biology, aquaculture management or human consumers. Moreover, the study of the role and behaviour of the mucosal immunity in skin, as a key component of the innate immune system, could help to understand the fish resistance as well as the presence and distribution of pathogens and magnitude of infections and use of parameters as biomarkers in fish toxicology, which would be aspects of major importance for the aquaculture industry.

El documento digital no refiere asesor / Revisa el procedimiento quirúrgico para la colocación de implantes. Siendo fundamental el conocer la anatomía del maxilar y mandíbula aplicada a la implantología. En las áreas donde el tejido óseo disminuye es importante realizar procedimientos quirúrgicos de colocación de implantes cortos, y en regiones posteriores es comparable a la de las regiones anteriores, además se pueden alcanzar la misma tasa de éxito clínico con implantes cortos si se compara con los de mayor longitud, siendo su uso una alternativa terapéutica predecible a corto y medio plazo. Es importante conocer los límites anatómicos para la colocación de implantes, a través de tomografía computarizada Cone Beam, puesto que el análisis volumétrico dará la certeza de los reparos anatómico. / Trabajo académico

Magíster en farmacología / Este proyecto de Tesis tipo Actividad Formativa Equivalente (AFE) comprendió la participación en un estudio clínico comparativo de Biodisponibilidad Bioequivalencia (BD/BE) in vivo entre dos formulaciones de Zopiclona, el objetivo general fue adquirir competencias en la elaboración y ejecución de ensayos clínicos. El estudio se desarrolló en Innolab, Organización de Investigación por Contrato (OIC) certificada, con un sistema de aseguramiento de la calidad implementado. Antes de iniciar la participación en las actividades del estudio se realizó la acreditación en “Protección de Participantes Humanos en la Investigación” y buenas prácticas clínicas (GCP). El protocolo del estudio se elaboró siguiendo las recomendaciones de la Norma Técnica Nº 57 para la regulación de la ejecución de estudios clínicos con fármacos en humanos, y los lineamientos GCP-ICH E6; fue aprobado sin modificaciones por el Instituto de Salud Pública (ISP) y el Comité de Ética en Investigación (CEI). El diseño de estudio, la metodología, el análisis estadístico a emplear y los criterios de BE especificados en el protocolo, se propusieron basados en guías nacionales e internacionales (G-BIOF 01, G-FDA). El Estudio se ejecutó cumpliendo con el protocolo; se respetaron los principios éticos de la investigación en humanos garantizando el bienestar de los voluntarios; y se emplearon GCP asegurando la fiabilidad de los resultados. Estuvo dividido en tres etapas: clínica, analítica y estadística; una vez concluidas se realizó un Informe Final de Resultados que fue presentado al ISP mediante el formulario BIOF 03 y un Informe de Finalización de estudio presentado al CEI. Toda la información del Estudio se registró en el Archivo Carpeta Maestra y estuvo disponible para auditorías. El ensayo fue cruzado, aleatorizado, dos periodos, dos secuencias, dosis única en ayuno, wash out 7 días, en 30 sujetos sanos. Los niveles plasmáticos de Zopiclona se midieron mediante Cromatografía Líquida de Alta Resolución con detección de Masa Tándem (LC-MS-MS). Para evaluar BE se determinaron los Intervalos de Confianza (IC) 90% para la razón de las medias de los parámetros farmacocinéticos logarítmicamente transformados concentración plasmática máxima (Cmáx), área bajo la curva de concentraciones plasmáticas hasta 24 horas (ABC0–24) y hasta tiempo infinito (ABC0→∞), del producto Test B respecto al Referente A; los límites preestablecidos de BE fueron: 80% a 125%. Todos los intervalos estuvieron dentro de los límites. Se concluyó que el medicamento Test era bioequivalente con el Referente. / This Equivalent Formative Activity (EFA) thesis project involved participation in a comparative Bioavailability/bioequivalence (BA/BE) in vivo clinical study between two formulations of Zopiclone, the aim was to acquire skills in developing and conducting clinical trials. The study was performed at Innolab, Contract Research Organization (CRO) certified with a implemented quality assurance system. Previously, starting activities a "Protecting Human Research Participants” and Good Clinical Practice (GCP) accreditation certificates were obtained. The study protocol was developed following recommendations of “Norma Técnica Nº 57”, the regulation for the execution of clinical studies with drugs in humans and the GCP-ICH E6 guidelines; it was approved without modifications by the “Instituto de Salud Pública” (ISP) and The Ethics Committee (CEI). The study design, the methodology, the statistical analysis to be used and the BE criteria were specified in the protocol based on national and international guidelines (G-BIOF 01, G-FDA). The study was conducting according to the protocol; the ethical principles of human research were respected and GCP were used to ensuring volunteers well-being and results reliability. It was conducted through three phases: clinical, analytical and statistical. After finishing each one a Final Results Report was submitted to the ISP through the BIOF 03 form, and a Final Study Report submitted to the CEI. All the study information was recorded in the Master Folder File and was available for inspections. The study was crossover, randomized, two periods, two sequences, single dose in fasting conditions, wash out 7 days, in 30 healthy volunteers. Plasma levels of Zopiclone were determined by Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry (LC-MS-MS). To evaluate BE the 90% Confidence Interval (CI) was determined for the ratio of the mean to the logarithmically transformed pharmacokinetic parameters maximum plasma concentration (Cmáx), area under the curve from time zero to 24 hours (AUC0→24) and until infinity (AUC0→∞), of the Test product B respect to Referential product A, the predetermined limits of BE were: 80 % to 125%. All CIs were within limits. As conclusion the Test product was bioequivalent with the Referent.

La infecció pel virus de la immunodeficiència humana (VIH) constitueix una de les epidèmies més importants actualment. El VIH es caracteritza per la seva elevada variabilitat genètica al llarg de la seva història natural. Les múltiples variants existents dins del mateix hoste, el que es coneix com quasiespècies, constitueixen una font d'adaptabilitat del virus, ja que permeten la disponibilitat d'una variant d'escapament davant una possible pressió selectiva en l'ambient (resposta immune, fàrmacs antiretrovirals, etc) . Malgrat els grans avenços en el desenvolupament de tractaments eficaços, actualment no ha estat possible l'eradicació de la infecció. El tractament antiretroviral de gran activitat (TARGA) ha disminuït significativament la morbi-mortalitat associada a la infecció pel VIH, però, no aconsegueix l'eliminació del virus. Conseqüència directa d'això és que, en suspendre'l, el virus reapareix en sang perifèrica, i caldrà mantenir el tractament de per vida, amb els seus costos tant a nivell d'efectes secundaris com econòmics. Davant aquesta situació, ha estat necessari el disseny de teràpies alternatives com les teràpies immunomediades (interrupcions estructurades del tractament o vacunes terapèutiques), enfocades a estimular el sistema immunològic del pacient per poder suspendre el TARGA de forma definitiva o, almenys, durant períodes variables de temps. Avui en dia no es coneixen amb exactitud els efectes que pugui tenir la variabilitat del VIH en les teràpies immunomediades, i l'interès del nostre estudi parteix d'aquesta premissa. Per això, l'objectiu d'aquesta tesi és analitzar, per primera vegada, l'evolució del virus en pacients sotmesos a vacunació terapèutica (en el nostre cas, una vacuna terapèutica de cèl•lules dendrítiques polsades amb el virus autòleg inactivat per calor). / La infección por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) constituye una de las epidemias más importantes actualmente. El VIH se caracteriza por su elevada variabilidad genética a lo largo de su historia natural. Las múltiples variantes existentes dentro del mismo huésped, lo que se conoce como cuasiespecie, constituyen una fuente de adaptabilidad del virus, pues permiten la disponibilidad de una variante de escape frente una posible presión selectiva en el ambiente (respuesta inmune, fármacos antiretrovirales, etc). A pesar de los grandes avances en el desarrollo de tratamientos eficaces, actualmente no ha sido posible la erradicación de la infección. El tratamiento antirretroviral de gran actividad (TARGA) ha disminuido significativamente la morbi-mortalidad asociada a la infección por el VIH, no obstante, no consigue la eliminación del virus. Consecuencia directa de ello es que, al suspenderlo, el virus reaparece en sangre periférica, siendo necesario mantener el tratamiento de por vida, con sus costes tanto a nivel de efectos secundarios como económicos. Frente esta situación, ha sido necesario el diseño de terapias alternativas como las terapias inmunomediadas (interrupciones estructuradas del tratamiento o vacunas terapéuticas), enfocadas a estimular el sistema inmunológico del paciente para poder suspender el TARGA de forma definitiva o, al menos, durante períodos variables de tiempo. Hoy en día no se conocen con exactitud los efectos que pueda tener la variabilidad del VIH en las terapias inmunomediadas, y el interés de nuestro estudio parte de esta premisa. Por ello, el objetivo de esta tesis es analizar, por primera vez, la evolución del virus en pacientes sometidos a vacunación terapéutica (en nuestro caso, una vacuna terapéutica de células dendríticas pulsadas con el virus autólogo inactivado por calor). / Human Immunodeficiency Virus (HIV) infection is one of the largest epidemics today. HIV is characterized by high genetic variability throughout its natural history. Multiple variants exist within the same host, which is known as quasispecies. These quasispecies are a source of adaptability of the virus, and allow the availability of alternative escape variants against a possible selective pressure in the environment (immune response, antiretroviral drugs, etc). Despite the great advances in the development of effective treatments, now has not been possible to eradicate the infection. Antiretroviral therapy (HAART) has significantly decreased morbidity and mortality associated with HIV infection, however, it fails to eliminate the virus. Direct consequence is that, when HAART is stopped, virus rebound in peripheral blood, being necessary to maintain treatment for life, with its costs both in terms of side effects and economic burden. Facing this situation, it has been necessary to design alternative therapies such as immune-mediated therapies (structured treatment interruptions or therapeutic vaccines), aimed to stimulate the patient's immune system to permanently remove HAART or, at least, for varying periods of time. Today, effects of the variability of HIV in immune-mediated therapies are not exactly known , and the interest of our study is based on this premise. Therefore, the objective of this thesis is to analyze, for the first time, the evolution of HIV in patients undergoing therapeutic vaccination (in our case, a therapeutic vaccine based on dendritic cells pulsed with autologous heat-inactivated virus).

Como objetivo de este trabajo, se plantea estudiar los factores que influyen sobre el conocimiento del paciente acerca de la medicación prescrita, analizando tanto las variables sociodemográficas y farmacológicas del paciente, así como las distintas fuentes de información (fuera y dentro del entorno asistencial) de las que el paciente dispone. Se propone así mismo, la evaluación del uso, la legibilidad y la comprensión de los prospectos. Para ello, se empleó como herramienta una encuesta diseñada a tal efecto que recogía variables sociodemográficas del paciente, datos sobre el tipo de medicación y duración del tratamiento, sobre la legibilidad del prospecto (calculada mediante el Índice Flesch-Szigriszt y el grado en al Escala Inflesz), así como el conocimiento del paciente acerca de la medicación (CPM). Se planteó un estudio observacional descriptivo transversal y con carácter prospectivo. El periodo de recogida de datos fue de enero a diciembre de 2011. La población de estudio estuvo compuesta por pacientes o cuidadores que acudieron a la farmacia con recetas prescritas por un profesional de Sistema Nacional de Salud. El tamaño de la muestra, compuesta por 450 usuarios, fue calculado para una precisión del 4% y un nivel de confianza del 95%. La muestra, con un 81,1% de pacientes y un 18,9% de cuidadores, presentó una media de edad de 54,21 años (SD: 16,86; Rango: 15-88), siendo el 66% mujeres. El 8,4% no tenía estudios, el 35,6% tenía estudios primarios, el 32% estudios secundarios y el 24% estudios superiores. Un 27,3% estaban polimedicados. El 51,1% de los encuestados no conocía el medicamento que le había sido prescrito, el 25,3% presentaba un conocimiento insuficiente, el 23,3% tenía un conocimiento suficiente, y un 0,2% (un paciente) presentó un conocimiento óptimo. Tras la evaluación del conocimiento por dimensiones: fue el Proceso de Uso lo más conocido por el paciente (64,4%), seguido de la Conservación (48%) y el Objetivo terapéutico (41,6%). Ningún paciente supo contestar correctamente a todas las cuestiones relativas a la Seguridad. Tras el análisis de regresión logística, se hallaron como factores asociados significativamente al CPM (Conocimiento del Paciente acerca de la Medicación), el nivel de estudios del paciente y la lectura del prospecto. Un 69,8% de los pacientes que repetían la medicación afirmó haber buscado información fuera del entorno asistencial, siendo el prospecto, con un 89,1% de los casos, la fuente más referida. Respecto a la legibilidad sintáctica de los prospectos analizados, la media del Índice de Flesch Szigriszt se situó en 57,38 (desviación típica de 4,93), correspondiendo a un nivel de legibilidad normal, según la Escala de Inflesz, si bien, un 27,5% de los prospectos se situaban en un nivel de legibilidad algo difícil y un 0,5% en un nivel de legibilidad muy difícil. A nivel global, podemos concluir con que 3 de cada 4 pacientes no presentan un conocimiento suficiente acerca del medicamento que le ha sido prescrito. Leer el prospecto (fuente de información principal referida por el paciente, fuera del entorno asistencial) disminuye 1,5 veces el riesgo de desconocer la medicación. Y en lo que respecta al nivel de estudios los sujetos sin estudios tienen 3,5 veces más riesgo de no conocer el medicamento en comparación con los pacientes con estudios universitarios. La dimensión de Seguridad es la menos conocida por el paciente, por lo que debiera ser puesta especial atención en la redacción óptima y efectiva de los prospectos en relación a precauciones, efectos adversos, contraindicaciones e interacciones. La figura del farmacéutico comunitario, como último profesional sanitario al que el paciente tiene acceso antes de tomar su medicación, debiera tomar un papel más activo como fuente de información al paciente. / The aim of this PhD research is to assess the factors which influence the patient knowledge of prescribed medication, analyzing sociodemographic and pharmacological variables of the patient, as well as different information sources ( in and outside the care environment) available to patients. It is therefore proposed the assessment of use, legibility and comprehension of the information package leaflet. A survey designed to that effect was used and it included sociodemographic variables of the patient, information of type of medication and length of the treatment, legibility of the information package leaflet (calculated by means of the Flesch-Szigriszt coefficient and Inflesz Scale degree), as well as patient prescribed medication knowledge. A prospectively observational, cross-sectional descriptive study was outlined. The data collection period was January- December 2011. The study population comprises patients and caregivers that went to the pharmacy with medical prescriptions issued by professionals of the Spanish Health Care System. The sample size, 450 users, was calculated for 4% accuracy and a 95% confidence level. The representative sampling of 81,1% patients and 18,9% caregivers, shows an average age of 54,21 years old (SD: 16,86; Range: 15-88), being 66% women. The 8,4% without studies, the 35,6% with primary education, 32% secondary studies and 24% with higher education. A 27,3% was multimedicated. The 51,1% of the respondent did not know the medication prescribed to him, and 25,3% had an unsatisfactory knowledge, 23,3% had a sufficient knowledge and 0,2% (just one patient) had a optimum knowledge. Following the assessment of knowledge by dimensions the Process of Using was the best well known by the patient (64,4%), followed by the Conservation (48%) and the Therapeutic Target. None of the patients answered all questions referred to Security correctly. Examined the regression analysis employed, the factors significantly associated to patient prescribed medication knowledge founded were: patient’s level of studies and reading of the package leaflet. 69,8% of the patients who repeated the medication treatment confirmed to have looked for information out of the care environment, being the information package leaflet, with 89,1%, the most referred source. Regarding package leaflet legibility, Flesch-Szigriszt coefficient was at 57,38 (standard deviation of 4,93%), corresponding to a normal legibility level according to the Inflesz Scale. Nevertheless, 27,5% of the package leaflet was in a level of little difficult legibility , and 1% of very difficult legibility level . On a global level, it can be concluded that 3 of 4 patients have insufficient knowledge about the prescribed medication. Reading the package leaflet (principal source of information referred by the patient, out of the care environment) decrease 1,5 times the risk to unknown the medication prescribed. Regarding level of studies, individuals without studies have 3,5 higher risk to unknown the medication prescribed if compared with individuals with university studies. Security scope is the least well–known by the patient, and therefore should be emphasized with an optimal and effective writing of the package leaflet as it refers to special precautions, adverse effects, contraindications and interactions. The figure of the Community Pharmacist, as the latest health professional before the patient takes the medication prescribed, should take a more active role as a source of information for the patient.

Objetivo Principal Evaluar la efectividad de una intervención mixta (con componentes educativos, de retroinformación, y de reformas organizativas) para reducir los errores de conciliación de la medicación al alta hospitalaria en las secciones de Cardiología y Neumología del Hospital General Universitario Reina Sofía de Murcia. Objetivos secundarios Cuantificar y clasificar los distintos tipos de error de conciliación, así como valorar la gravedad de los mismos. Identificar los factores asociados a los errores de conciliación al alta hospitalaria, así como desarrollar un modelo predictivo de los mismos en las secciones clínicas de estudio. Cuantificar y evaluar la fiabilidad de los registros electrónicos de medicación de Atención Primaria como fuente de información de la medicación crónica del paciente, así como identificar los factores asociados a la presencia de discordancias. Evaluar la adherencia y satisfacción de los prescriptores con el soporte electrónico de asistencia farmacoterapéutica al alta hospitalaria desarrollado. Metodología Estudio cuasi-experimental de series temporales interrumpidas de diseño secuencial con reversión simple. El estudio se desarrolló en las secciones de Cardiología y Neumología del Hospital General Universitario Reina Sofía de Murcia. Se realizó un muestreo consecutivo, incluyendo a todos aquellos pacientes con tratamiento farmacológico previo al ingreso que fueron dados de alta por las secciones clínicas de estudio durante los meses de Febrero a Abril de 2013, cuyo ingreso fue superior a 48 horas. El estudio se compuso de 3 fases: primera fase de medición, fase de implantación del programa y segunda fase de medición (pre-intervención, intervención y reversión), realizándose 23 observaciones (días) en cada una, lo que al final supuso 69 días de observación. La variable principal del estudio fue el error de conciliación de medicación. La historia farmacoterapéutica al ingreso se obtuvo mediante entrevista estructurada con el paciente/cuidador, conciliando la medicación al alta en todas las fases del estudio. La intervención consistió en la incorporación del farmacéutico en la provisión de la historia domiciliaria del paciente, así como las recomendaciones sobre dicho tratamiento, mediante el desarrollo de un soporte de asistencia farmacoterapéutica integrado en la historia clínica electrónica para facilitar la tarea de prescripción/conciliación al alta hospitalaria al médico responsable del alta, el cual podía visualizar la información al crear el informe, pudiendo incorporarla o solo consultarla. Su efectividad se evaluó mediante un análisis de regresión segmentada de la proporción media diaria de errores de conciliación por paciente en el informe de alta, utilizando el método de Prais-Winsten. Tanto para la identificación de factores asociados como para la predicción de errores de conciliación se realizó una regresión logística multivariante. Para éste último se determinó el punto de corte óptimo mediante una curva ROC. La validez interna del modelo se evaluó mediante bootstrapping. La evaluación de la fiabilidad de los registros de Atención Primaria se evaluó analizando la concordancia, mediante la identificación de discrepancias, entre la medicación activa en dichos registros y la registrada mediante entrevista. La adherencia y el grado de utilización de la herramienta por parte de los médicos de las secciones clínicas de estudio se calcularon utilizando los registros extraídos del programa que le da soporte (Selene®). La satisfacción se midió utilizando una encuesta con 17 preguntas a responder mediante una escala tipo Likert. Resultados Se incluyeron en el estudio 321 pacientes (119,105 y 97 respectivamente en cada fase). Se registraron 3966 medicamentos, identificándose 1087 errores de conciliación en el 77,9% de los pacientes. El porcentaje medio de errores de conciliación tras la aplicación de la intervención farmacéutica mostró una reducción progresiva (β3=-0,42;p=0,553), más acusada y estadísticamente significativa en el caso de los errores con daño potencial (β3=-0,54;p=0,029), experimentándose un aumento significativo de los errores tras la retirada de la intervención tanto en global (β4=29,06;p=0,003) como de los errores con daño (β4=10,8;p=0,002). La mayoría de errores fueron por omisión (46,7%) y prescripción incompleta (43,8%), considerándose un 35,3% clínicamente relevantes. Polimedicación al ingreso, alta firmada por un médico adjunto e ingreso urgente estuvieron asociados a presentar error de conciliación (Hosmer-Lemeshow=0,636 p=0,888; R2 Nagelkerke=0,439). Se eligió 0,855 como punto de corte óptimo, clasificando correctamente al 86,1% de los pacientes (sensibilidad=86,5%, especificidad=83,3%). El modelo desarrollado mostró una buena validez interna. La concordancia en principios activos entre la medicación crónica del paciente y los registros electrónicos de Atención Primaria fue del 83,7%, disminuyendo al 34,7% al tener en cuenta la posología. Ser mayor de 65 años (OR: 1,98 [IC 95%: 1,08-3,64]), pluripatológico (OR: 1,89 [IC 95%: 1,04-3,42]) y tener prescrito un estupefaciente o psicótropo (OR: 2,22 [IC 95%: 1,16-4,24]) fueron los factores asociados a la presencia de estas discordancias. El grado de utilización global de la herramienta fue del 93,3%. Los médicos reflejaron un alto nivel de satisfacción en todos los aspectos valorados en la encuesta. ABSTRACT Objectives Main objective To analyse the effectiveness of a pharmaceutical intervention to reduce reconciliation errors at discharge in the cardiology and pneumology departments. / To quantify and to characterise the type and seriousness of the reconciliation errors identified. To identify the associated factors to reconciliation error at discharge, and to develop a predictive model of reconciliation error in the clinical departments studied. To quantify and to evaluate de reliability of prescription drug electronic records in Primary Care. To evaluate user´s adherence to and satisfaction with an electronic pharmacological support tool to assistance in prescribing medication in the discharge reports completed. Methods A quasi-experimental interrupted time series study carried out in the cardiology and pneumology departments of Queen Sofia Hospital of Murcia from February to April 2013.The study consisted of three phases: pre-intervention, intervention and post-intervention, each involving 23 days of observations (69 days total). Home medication history was obtained by structured interview with the patient/caregiver, and we reconciliate the medication at discharge in all phases of the study. The intervention consisted of incorporating a pharmacist in the medical team, who included the patient’s pre-admission medication in a computerized tool integrated into the electronic clinical history of the patient. The main outcome measure was the reconciliation error at hospital discharge. The effectiveness was evaluated by a segmented regression analysis of the mean daily proportion of reconciliation errors per patient in the discharge report using the Prais-Winsten method. The association between reconciliation errors and possible predictors was measured by simple logistic regression. A multivariate logistic regression was performed to predict reconciliation errors .The optimal cut-off point was determined from a ROC curve. The model was internally validated using the bootstrapping method. The evaluation of the reliability of prescription drug electronic records in Primary Care was evaluated by analyzing the agreement, by identifying discrepancies, between the active medication in these records and the home medication history recorded by interview. Adherence and how the physicians had used the tool were calculated by records extracted from the program supporting it and by reviewing the discharge reports. Satisfaction with the tool was measured by a survey containing 17 items answered by a Likert scale. Results 321 patients (119,105 and 97 in each phase, respectively) were included in the study. For the 3966 medicaments recorded, 1087 reconciliation errors were identified in 77.9% of the patients. The mean percentage of reconciliation errors per patient when pharmaceutical intervention began showed to a gradual reduction (β3=-0.42; p=0.553). This reduction was more pronounced and statistically significant in the case of errors with potential damage (β3=-0.54; p=0.029). With intervention withdrawal, the number of reconciliation errors significantly increased again both in total (β4=29.06; p=0.003), and for harmful errors (β4=10.8; p=0.002). Most errors were due to omission (46.7%) or incomplete prescription (43.8%), and 35,5% of the reconciliation errors was clinically relevant. Polypharmacy at admission, discharge report signed by a specialist physician and emergency admission were associated with reconciliation errors (Hosmer-Lemeshow=0.636; p=0.888, Nagelkerke R2=0.439). 0.855 was chosen as the optimal cut-off point, which correctly classified 86.1% of patients (sensitivity=86.5%, specificity=83.3%). The model developed showed good internal validity. The concordance in the active ingredients between pre-admission medication and the active medication in electronic records in Primary Care was 83.7%, falling to 34.7% when considering the dosage. Being older than 65 years (OR: 1.98 [CI 95%: 1.08 to 3.64]), pluriphatology (OR: 1.89 [CI 95%: 1.04 to 3.42]) and have prescribed a drug or psychotropic (OR: 2.22 [CI 95%: 1.16 to 4.24]) were the associated factors with the presence of these discrepancies. The overall degree of use of the tool was 93.3%. The physicians reported a high level of satisfaction on all survey items.

Objetivo Valorar la eficacia del método Vojta en el progreso motor de los niños prematuros en los primeros 18 meses de edad corregida y comparar su eficacia frente a otros métodos de Fisioterapia, así como valorar el efecto del tratamiento con Vojta en la calidad del desarrollo motor grueso. Metodología Estudio longitudinal, con dos grupos de tratamiento fisioterápico en Atención Temprana. Grupo Experimental (GE) formado por 47 niños prematuros tratados con el método Vojta y Grupo Control (GC) con 37 niños prematuros de similares características tratados con otros métodos. La evaluación se realizó en el primer trimestre, a los 6, 12 y 18 meses de edad corregida, con las escalas motoras de la Bayley 3ª ed. (BSID-III). Además con los niños tratados con Vojta se administró la escala motora de Alberta (AIMS). Resultados Se encuentran diferencias significativas en la mejora motora gruesa y fina en los niños prematuros de riesgo alto y moderado, a favor del GE (p<0,001 y p<0,005 respectivamente). La mejora del percentil de desarrollo motor cualitativo a los 18 meses, en el grupo de niños tratados con el método Vojta, es significativa (p<0,001). Conclusiones El tratamiento Vojta resultó más efectivo que otros métodos en el progreso motor y en la mejora de la calidad de los patrones motores de los niños prematuros durante los primeros 18 meses. / Purpose To assess the efficacy of the Vojta Method in the motor progress of preterm children along their first 18 months of corrected age and to compare its efficacy to other methods of physiotherapy as well as to assess the effect of the treatment with Vojta in the quality of the gross motor development. Method It was a longitudinal study, with two groups receiving physical therapy treatment in an early intervention program. An experimental Group (GE) consisting of 47 preterm children treated with Vojta method and a Control Group (GC) with 37 preterm children of similar characteristics treated with other methods. The assessment was carried out during the first trimester, at 6, 12 and 18 months of corrected age with the Bayley motor scales 3rd edition (BSID-III). Besides, in the case of the children treated with Vojta, the Alberta Infant Motor Scale (AIMS) was also used. Results Significant differences are found in the fine and gross motor improvement in preterm children with high and moderate risk in favor of the GE (p<0,001 y p<0,005 respectively). The improvement of the qualitative motor development percentile at the age of 18 months in the group of children treated with the Vojta method is significant (p<0,001). Conclusions Vojta treatment proved to be more effective than other methods in the motor progress and in the improvement of the quality of the motor patterns of the preterm children during their first 18 months old.

La presente tesis trata del diseño y fabricación de un nuevo dispositivo para registrar la actividad eléctrica neuronal espontánea y estimulada farmacológicamente, en redes neuronales in vitro. La forma de operar esta herramienta es simple, su producción es de bajo coste y además, ofrece una interfaz neurona-electrodo estable a largo plazo más allá de lo posible con tecnologías electrofisiológicas basadas en micropipeta. El dispositivo es una pieza polimérica (polidimetilsiloxano) con dos compartimientos (zona de sembrado de los cultivos neuronales) comunicados entre sí a través de un microcanal de dimensiones comparables a las dimensiones de los axones y dendritas. La actividad eléctrica neuronal es registrable tras el crecimiento espontáneo de las neuritas dentro del microcanal (10 a 14 días de sembradas las neuronas). Un par de electrodos, ubicados de extremo a extremo del microcanal, aprovechan las propiedades conductoras del medio extracelular para registrar los potenciales eléctricos. La tecnología para microfabricar el dispositivo es una combinación de la técnica de fotolitografía (para crear los másteres) y de la técnica de elastomer casting (para fabricar las piezas poliméricas). El procesamiento de datos de las señales es un algoritmo matemático diseñado para analizar la información registrada por el dispositivo; este algoritmo es ejecutado con el software de “Matlab”. El procesamiento de datos asigna y contabiliza como potenciales de acción a las señales que sobrepasen el umbral predeterminado (170 μV) de los registros y presenta los resultados en gráficas de barras de número de potenciales de acción por unidad de tiempo (minuto) / The thesis describes the design and manufacturing of a new tool to support electrophysiological investigation of both individual neuronal electrical activity and neuronal networks electrical activity in vitro. The operation mode is simple, easy to learn and the device can be produced at low cost. Neuron-electrode interface stability is better than electrophysiology micropipette interface. The device is a two compartments polymeric (polydimetilsiloxane) structure (neurons are placed) interconnected by a microchannel. The microchannel aperture is comparable to axon and dendrites diameter. The neuronal electrical activity is recorded after spontaneous neurites grew inside the microchannel (10 to 14 days of neurons be culturated). Each compartment has an electrode and the conductivity electrical propriety of the extracellular medium supports to record electrical potentials end-to-end of the microchannel. The device microfabrication process is a combination of photolithography technique (to create masters) and elastomer casting technique (to manufacture the polymeric parts). Spike frequency analysis is a mathematical algorithm designed. The algorithm runs at Matlab software. Spike frequency analysis counts electrical activity higher than 170 μV as action potential. Results frequency are presented as graphic bars of spike amount per time (minute).