A colonização por microrganismos no sulco periimplantar ocorre muito precocemente, logo após a cirurgia de instalação dos implantes. Portanto, faz-se necessário um ótimo controle de higienização, que muitas vezes não ocorre durante as primeiras semanas, devido ao receio por parte do paciente em traumatizar a área cirúrgica. A terapia fotodinâmica ou PDT (Photodynamic Therapy) torna-se como uma alternativa de solucionar ou minimizar este problema, já que danifica ou destrói as células bacterianas, sem provocar formação de cepas resistentes ao procedimento. Com este intuito, o projeto foi proposto a fim de avaliar o efeito da terapia fotodinâmica na microbiota do sulco periimplantar. Após triagem (critérios de inclusão: normorreativos, com espaço intercalar superior, sem histórico de doença periodontal grave), 14 pacientes foram selecionados e reabilitados com implantes Standard Plus (Straumann® Dental Implant System), divididos em dois grupos, um grupo controle (GC) e um grupo submetido à terapia fotodinâmica (GPDT), cujo protocolo foi: irradiação contínua de 120J/cm2 de densidade de energia, numa potência de 40mW, associada ao corante azul de metileno a 0,005%. As aplicações foram realizadas no dia da instalação do implante, após 15, 30 e 45 dias. As coletas microbiológicas foram efetuadas no pós-cirúrgico imediato e na 6ª semana, nos dois grupos, utilizando cones de papel estéril. No GPDT, outras duas coletas foram realizadas após aplicação da terapia no dia da cirurgia e após 45 dias. Todo material coletado passou por diluições seriadas, semeado em meios de cultura e incubados em anaeróbiose para posterior contagem do número de unidades formadoras de colônias totais (UFCt) e pigmentadas de preto (UFCp). Os testes estatísticos aplicados foram os de Wilcoxon e MannWhitney. O número de UFCt e UFCp do pós-cirúrgico imediato para 6ª semana apresentou aumento, estatisticamente significante, nos dois grupos. No comparativo entre grupos não houve diferença, estatisticamente significante, entre a diferença do número de UFCt e UFCp do pós-cirúrgico imediato para 6ª semana. Quanto à eficiência da PDT, os resultados mostraram que houve uma redução, estatisticamente significante, tanto para as UFCt como UFCp nos dois momentos aplicados. Tendo como referência a mediana, a redução foi aproximadamente de 80% e 50% para as UFCt no pós-cirúrgico imediato e na 6ª semana, respectivamente. Para as UFCp, os valores foram de 100% e 90%. Conclusão: A terapia fotodinâmica é eficiente para redução das UFCt e UFCp, presentes no sulco periimplantar, durante a osseointegração. No entanto, essa terapia não impede a recolonização, nem o crescimento bacteriano ao longo do tempo. / The colonization by microorganisms in the peri-implant sulcus happens very early, right after the surgery to implant placement is finished. Therefore, a great hygienization control is required, such control does not occur in the first weeks due to the patients fear in traumatizing the surgical area. The photodynamic therapy (PDT) becomes an alternative to solve or to minimize such problem, since it damages or destroys the bacterial cells, without causing the formation of strains, resistant to the procedure. This project was proposed in order to evaluate the photodynamic therapy in the microbiota of the peri-implant sulcus. After the selection of patients (criteria: normoreactive patients, presenting intercalate superior space, with no history or signs of advanced aggressive periodontitis), 14 patients were seletected and rehabilitated via Standard Plus implants (Straumann® Dental Implant System), divided into two groups, a control group (GC) and a group subjected to the photodynamic therapy (GPDT), whose protocol was: continuous irradiation of 120J/cm2 of energy density, in 40mW of potency, associated to the Methylene blue dye at 0,005%. The applications were made in the implant placement day, after 15, 30 and 45 days. The microbiological collections were made in the immediate postoperative and in the 6th week, in both groups, by means of sterile paper points. In the GPDT, two other collections were made, one after the therapy application in the surgery day and one after 45 days. All the material collected passed through serial dilutions, plated in culture media and incubated in anaerobiosis to later counting of the total numbers of total colony-forming units (CFUt) and the numbers of black pigmented colony-forming units (CFUp). The statistical tests applied were the Wilcoxon and Mann-Whitney. The numbers of CFUt and CFUp in the immediate postoperative and in the 6th week, showed significant increase statistically in both groups. Comparing both groups, there was no statistically significant difference between the difference of the number of CFUt and CFUp in the immediate postoperative and in the 6th week. Regarding the PDT efficiency, the results showed a reduction, statistically significant, for CFUt and CFUp, in both application moments. Considering the median as a reference, the reduction was about 80% and 50% of CFUt in the immediate postoperative and in the 6th week, respectively. To CFUp, the values were 100% and 90%. Conclusion: the photodynamic therapy is efficient to CFUt and CFUp reduction, existent in the peri-implant sulcus, during the osseointegration. However, this therapy does not prevent the recolonization, neither the bacterial increasing over time.

Objetivo: Estudar o efeito das diferentes doses (5 J/cm² e 15 J/cm²) do Laser Diodo de 830 nm na cartilagem epifisária de ratos, analisando o comprimento do osso, a espessura e o número de condrócitos de cada camada da cartilagem epifisária. Materiais e Métodos: 30 ratos da linhagem Wistar, machos, pesando em média ± 280 g, com 23 dias de idade, divididos aleatoriamente em 3 grupos: Grupo Controle (GC), Grupo (G5) dose de 5 J/cm², grupo 15 (G15) dose de 15 J/cm². Foram realizadas 10 aplicações do Laser AsGaAl 830 nm em dias alternados. Os animais foram sacrificados 24 horas após a última aplicação, no 21º dia após a primeira aplicação, com dose letal de 200 mg/Kg de pentobarbital sódico. As lâminas foram coradas com H/E (Hematoxilina Eosina). Realizou-se a documentação fotográfica das lâminas em fotomicroscópio ZEISS e, posteriormente, análise histomorfométrica e análise histológica. Para a análise estatística utilizou-se o teste de variância fatorial One-Way ANOVA com nível de significância considerado significativo para < 0,05, seguido pelo teste de Tukey. Resultados: A cartilagem epifisária demonstrou através da análise histológica e pela imagem do RX aumento da espessura da cartilagem epifisária e aumento no número de condrócitos dos grupos G5 e G15. Conclusão: O Laser de AsGaAl 830 nm, dentro dos parâmetros utilizados nesta pesquisa, pode causar alteração na espessura da cartilagem epifisária, aumento no número de condrócitos, porém não é suficiente para causar qualquer alteração no comprimento final do osso. / Objective: To study the effect of an 830-nm GaAlAs diode Laser at two different energy densities (5 J/cm² and 15 J/cm²) on the epiphyseal cartilage of rats, by evaluating the bone length, and the number of chondrocytes and thickness of each zone of the epiphyseal cartilage. Materials and Methods: A total of 30 male Wistar rats with 23 days of age and weighing 280 g on average were randomly divided into 3 groups: control group (CG, no stimulation), G5 group (energy density, 5 J/cm²), and G15 group (energy density, 15 J/cm²). Laser treatment sessions were administered every other day for a total of 10 sessions. The animals were euthanized 24 hours after the last treatment session (21 days after the first application) with a lethal dose of sodium pentobarbitone (200 mg/kg). Histological slides of the epiphyseal cartilage were stained with hematoxylin-eosin (HE), photographed with a Zeiss photomicroscope, and subjected to histometric and histological analyses. Statistical analysis was performed using one-way analysis of variance (ANOVA) followed by Tukeys post-hoc test. All statistical tests were performed at a significance level of 0.05. Results: Histological analysis and x-ray radiographs revealed an increase in thickness of the epiphyseal cartilage and in the number of chondrocytes in the G5 and G15 groups. Conclusion: The 830-nm GaAlAs diode Laser, within the parameters used in this study, induced changes in the thickness of the epiphyseal cartilage and increased the number of chondrocytes, but it was not sufficient to induce changes in bone length.

O objetivo deste estudo foi avaliar por meio de análises clínicas, radiográficas e histológicas o efeito do Laser de Baixa Intensidade na resposta pulpar de dentes decíduos humanos após pulpotomia. Vinte molares decíduos inferiores de 16 crianças com idade entre 6 e 9 anos foram criteriosamente selecionados. Os dentes foram randomizadamente divididos nos grupos Formocresol de Buckley diluído a 1/5 (Grupo I - FC), Hidróxido de Cálcio (Grupo II - HC), Laser de Baixa Intensidade + Óxido de Zinco e Eugenol (Grupo III - LBI+OZE) e Laser de Baixa Intensidade + Hidróxido de Cálcio (Grupo IV - LBI+HC), e tratados pela técnica convencional de pulpotomia em uma única sessão. As avaliações clínicas e radiográficas foram realizadas nos períodos de 3 e 6 meses do pós-operatório. Os dentes que se apresentavam em período normal de esfoliação foram extraídos, processados para análise histológica e avaliados por sistema de escores. Os resultados clínicos e radiográficos não mostraram diferença estatisticamente significativa nos grupos estudados (p>0,05). A análise estatística da avaliação histológica revelou diferença estatisticamente significativa para inflamação pulpar entre os Grupos I (FC) e IV (LBI+HC), sendo que o Grupo IV(LBI+HC) apresentou menor grau de inflamação pulpar. Em relação à fibras colágenas, formação de barreira de tecido mineralizado e camada odontoblástica houve diferença entre os Grupos I (FC) e II (HC), e entre os Grupos II (HC) e III (LBI+OZE), sendo que o Grupo II (HC) apresentou fibras colágenas densas, barreira de tecido mineralizado e camada odontoblástica. Os Grupos I (FC) e III (LBI+OZE), e os Grupos I (FC) e IV (LBI+HC), apresentaram diferença estatisticamente significativa para reabsorção interna. O Grupo I (FC) apresentou maior índice de reabsorção interna. Não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos para vitalidade pulpar, quantidade de vasos, calcificação pulpar e tecido de granulação. Com base nos resultados obtidos foi possível constatar que o Laser de Baixa Intensidade com Hidróxido de Cálcio mostrou efeitos clínicos e radiográficos mais satisfatórios, e melhores resultados histológicos em comparação aos demais grupos estudados. Desta forma, sugere-se que o Laser de Baixa Intensidade com hidróxido de Cálcio pode ser considerado uma técnica alternativa para pulpotomia de dentes decíduos humanos. / The aim of this study was to evaluate through clinical, radiographic and histological analyses the effect of Low-Level Laser therapy (LLLT) on pulpal response of human primary teeth after pulpotomy. Twenty mandibular primary molars of 16 children aged between 6 and 9 years were criteriously selected. The teeth were randomly divided into the following groups: Buckleys Formocresol (diluted 1:5) group I (FC), Calcium Hydroxide - group II (CH), Low-Level Laser therapy + Zinc Oxide and Eugenol - group III (LLLT+ZOE), and Low-Level Laser therapy + Calcium Hydroxide - group IV (LLLT+CH), and treated by the conventional pulpotomy technique at a single appointment. The clinical and radiographic evaluations were performed at 3 and 6 post-operative months. The teeth underwent normal exfoliation period were extracted and processed for histological analysis and assessed through a score system. The clinical and radiographic results did not show statistically significant difference among groups (p>0.05). The statistical analysis of the histological assessment revealed statistically significant difference for pulpal inflammation between groups I (FC) and IV (LLLT+CH), with the least degree of pulpal inflammation for group IV (LLLT+CH). Concerning to the collagen fibers, hard tissue barrier and odontoblastic layer, there were differences between groups I (FC) and II (CH), and between groups II (CH) and III (LLLT+ZOE). Group II (CH) showed dense collagen fibers, hard tissue barrier and odontoblastic layer. Groups I (FC) and III (LLLT+ZOE), and groups I (FC) and IV (LLLT+CH), presented statistically significant difference for internal resorption. Group I (FC) displayed the greatest internal resorption rate. There was not statistically significant difference among groups for pulpal vitality, amount of vessels, pulpal calcification and connective tissue. Based on the results obtained, it was possible to know that Low-Level Laser therapy with Calcium Hydroxide exhibited clinical and radiographic effects more satisfactory, and the best histological effects compared with the other groups studied. Therefore, it is suggested that Low-Level Laser therapy with Calcium Hydroxide can be considered as an alternative technique for the pulpotomy of human primary teeth.

Avaliou-se o uso do laser de baixa intensidade e do Light-Emitting Diode (LED) no comportamento de fibroblastos e na redução da incidência da mucosite bucal em crianças sob tratamento quimioterápico. Para tanto, o estudo foi executado em dois períodos experimentais distintos. No primeiro período, foi realizada a análise da viabilidade de fibroblastos Balb/c 3T3 cultivados sob déficit nutricional irradiados com laser vermelho (660nm, 40mW), laser infravermelho (780nm, 50mW) e LED vermelho (637 ± 15nm, 40mW) por 4 e 8 segundos através dos ensaios de redução do MTT e captação do vermelho neutro. No segundo período experimental realizouse ensaio clínico randomizado duplo-cego para avaliar a eficácia do laser vermelho (660nm, 40mW) e do LED vermelho (637 ± 15nm, 40mW) na redução da incidência e da severidade da mucosite bucal e da dor relacionada em crianças portadoras de câncer submetidas a quimioterapia utilizando-se o sistema de graduação da mucosite bucal da Organização Mundial de Saúde e a Escala de Dor de Faces Revisada associada à escala analógica visual. A análise estatística foi realizada utilizando-se o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis e analise de variância do modelo linear geral com nível de significância de 5% (p = 0,05). Observou-se com a redução do MTT uma tendência de aumento da proliferação celular relacionado diretamente com o tempo de irradiação, no entanto, não significante estatisticamente. Após 72 horas, os grupos que apresentaram maior proliferação celular foram: grupo irradiado com laser infravermelho, grupo irradiado com LED, grupo irradiado com laser vermelho, grupo controle positivo e grupo controle negativo. Já através da captação do vermelho neutro, após 72 horas o grupo que apresentou maior proliferação celular foi o grupo controle positivo (cultivado sob condições nutricionais ideais) seguido pelo grupo irradiado com laser infravermelho, grupo controle negativo e grupos irradiados com LED e laser vermelho. Através da análise dos resultados obtidos e considerando os parâmetros e protocolo de fototerapia utilizados, pode-se concluir que a fototerapia com laser de baixa intensidade e diodo emissor de luz (LED) não apresentaram toxicidade em nível celular, vindo mesmo a estimular a proliferação dos fibroblastos cultivados sob déficit nutricional, sobretudo no grupo irradiado com o laser infravermelho (780nm, 50mW). A incidência e a severidade da mucosite bucal, assim como a dor associada, foram muito baixas nos grupos irradiados com laser vermelho (660nm, 40mW) e LED (637 ± 15nm, 40mW). Não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos; A coerência da luz não interferiu no resultado da fototerapia in vitro e in vivo. / The use of low-intensity laser and Light-Emitting Diode (LED) on the behavior of fibroblasts and in reducing the incidence of oral mucositis in children under chemotherapy were evaluated. The study was performed in two separate experiments. In the first moment, the viability of fibroblasts Balb/c 3T3 cultured under nutritional stress irradiated with red laser (660nm, 40mW), infrared laser (780nm, 50mW) and red LED (637 ± 15nm, 40mW) for 4 and 8 seconds was analyzed through the MTT and neutral red assays. The second experiment carried out was a double-blind randomized clinical trial aiming to assess the effectiveness of red laser (660nm, 40mW) and red LED (637 ± 15nm, 40mW) in reducing the incidence and severity of oral mucositis and related pain in children with cancer undergoing chemotherapy using the World Health Organization oral mucositis grading system and the Faces Pain Scale - Revised associated with a visual analogue scale. Statistical analysis was performed using the Kruskal-Wallis nonparametric test and ANOVA with a significance level of 5% (p = 0.05). It was observed with the MTT assay a trend of cell proliferation increase directly related to the irradiation time, however, not statistically significant. After 72 hours, the groups that showed higher cell proliferation were: infrared laser irradiated group, LED irradiated group, red laser irradiated group, positive control group and negative control group. By the neutral red assay, though, after 72 hours the group that showed higher cell proliferation was the positive control (grown under ideal nutritional conditions) followed by the group irradiated with infrared laser, the negative control group and groups irradiated with red laser and LED. By analyzing the results and considering the used parameters and phototherapy protocol, it is plausible to conclude that phototherapy with lowintensity laser and light emitting diode (LED) showed no toxicity at cellular level, even stimulating the proliferation of fibroblasts cultured under nutritional stress, especially in the group irradiated with infrared laser (780nm, 50mW). The incidence and severity of oral mucositis and associated pain, were very low in the groups irradiated with red laser (660nm, 40mW) and LED (637 ± 15nm, 40mW). There was no statistically significant difference between these groups, the coherence of light did not affect the outcome of phototherapy in vitro and in vivo.

O objetivo deste estudo foi investigar o efeito da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) sobre o Enterococcus faecalis (E. faecalis), in vitro, utilizando a clorofila (CL) como agente fotossensibilizador (FS) e o diodo emissor de luz (LED) como fonte de luz. A cultura pura de E. faecalis foi ativada em caldo de BHI a 37oC por 24h. O cultivo do microrganismo foi centrifugado a 3000rpm por 15min, e o pellet re-suspenso em 0,85% de solução salina. As concentrações da bactéria foram ajustadas para 107UFC mL-1 (unidades formadoras de colônias por mililitro). Diferentes tipos de solventes para a CL foram testados: éter, álcool de cereais, Tween 80 e P-123. 100l do inóculo e o mesmo volume da solução teste foram inseridos em cada poço da placa de microtitulação. A mistura foi agitada e aguardou-se 1min. 25l da suspensão foi removida e diluições seriadas foram realizadas. Alíquotas de cada diluição foram espalhadas na superfície da placa, armazenadas em microaerofilia e incubadas na estufa por 24h a 37oC. O número de UFC foi contado em cada placa. Para o experimento da TFDa, os grupos foram divididos em: controle (G1); TBO 1min (G2); CL+Tween 1min (G3); CL+Tween 5min (G4); CL+P-123 1min (G5); CL+P-123 5min (G6); CL+Tween 1min + LED 1min (G7); CL+Tween 1min + LED 5min (G8); CL+Tween 5min + LED 1min (G9); CL+Tween 5min + LED 5min (G10); CL+P-123 1min + LED 1min (G11); CL+P-123 1min + LED 5min (G12); CL+P-123 5min + LED 1min (G13); CL+P-123 5min + LED 5min (G14); TBO 1min + LED 1min (G15); TBO 1min + LED 5min (G16); LED 1min (G17); LED 5min (G18).Um volume de 100l da suspensão bacteriana foi inserido em poços da placa e o mesmo volume da solução do FS foi adicionado. A CL foi solubilizada em soluções aquosas de Tween ou P-123. Cada poço foi agitado e o tempo de préirradiação foi de 1 ou 5min. O LED foi acionado durante 1 ou 5min. 25l da suspensão foi submetida a diluições seriadas e as alíquotas de cada diluição foram espalhadas na superfície da placa em Ágar BHI. As placas foram armazenadas e colocadas na estufa a 37oC por 24h. Os experimentos foram realizados em triplicata e as UFC em cada placa foram contadas. As UFC foram transformadas em valores de Log10 UFC para normalizar os dados para análise estatística. A média e o desvio padrão (DP) de cada experimento foram calculados. Os resultados mostraram que o Tween e o P-123 foram os solventes mais eficazes para diluição da CL. A TFDa com utilização da CL diluída em Tween ou P-123 com tempo de pré-irradiação de 5min e com a ação do LED por 5min causou uma pequena diminuição na contagem bacteriana. A CL diluída em Tween com tempo de 1min teve uma redução significante da contagem bacteriana. O TBO quando associado ao LED durante 1min provocou uma leve redução no número de UFC. A irradiação pelo LED durante 5min foi capaz de causar uma diminuição significativa da quantidade de UFC. / The aim of this study was to investigate the effect of Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) against Enterococcus faecalis (E. faecalis), in vitro, using chlorophyll (CL) as photosensitizer (FS) agent and light-emitting diode (LED) as light source. Pure culture of E. faecalis was cultivated in BHI broth at 37oC for 24h. The culture was centrifuged at 3000rpm for 15min, and the pellets were resuspended in 0.85% saline solution. The bacterial concentrations were adjusted to 107CFU mL-1 (colony forming units per milliliter). Different types of solvents for CL were tested: ether, grain alcohol, Tween 80 and P-123. 100l of inoculum and the same volume of the test solution were inserted into each well of the microtitre plate. The mixture was mixed and 1 min was awaited. 25l of the suspension was removed and serial dilutions were performed. Aliquots of each dilution were spread on the surface of the plates, stored in microaerophilic conditions and incubated for 24h at 37oC. The number CFU was counted in each plate. For aPDT experiment, the groups were divided into: control (G1); TBO 1min (G2); CL+Tween 1min (G3); CL+Tween 5min (G4); CL+P-123 1min (G5); CL+P-123 5min (G6); CL+Tween 1min + LED 1min (G7); CL+Tween 1min + LED 5min (G8); CL+Tween 5min + LED 1min (G9); CL+Tween 5min + LED 5min (G10); CL+P-123 1min + LED 1min (G11); CL+P-123 1min + LED 5min (G12); CL+P-123 5min + LED 1min (G13); CL+P-123 5min + LED 5min (G14); TBO 1min + LED 1min (G15); TBO 1min + LED 5min (G16); LED 1min (G17); LED 5min (G18). A volume of 100l of bacterial suspension was inserted into the well of microtitre plate and the same volume of FS was added. CL was solubilized in aqueous solution of Tween and P-123. Each well was mixed and preirradiation time was 1 or 5min. LED was irradiated during 1 or 5 min. 25l of suspension was subjected to serial dilutions and aliquots of each dilution were spread on the surface of agar BHI plates. The plates were stored and incubated at 37oC for 24h. Experiments were performed in triplicate and CFU in each plate were counted. The results showed that Tween and P-123 were the most effective solvents for CL dilution. aPDT with diluted CL in Tween or P-123 with pre-irradiation time of 5min and with LED irradiation for 5min caused a small decrease in bacterial count. CL diluted in Tween with 1min time showed a significant reduction in bacterial count. TBO when associated with LED irradiation of 1min caused a slight reduction on CFU number. LED irradiation during 5min caused a significant reduction in CFU count.

Orientador: Edson Rosa Pimentel / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T11:50:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guerra_FlaviaDaRe_D.pdf: 2578763 bytes, checksum: 4d00d5fa99bb0b97be32b1a4af7e825a (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O tendão calcanear é o tendão mais acometido por ruptura, particularmente em atividades esportivas. O processo de cicatrização resulta em uma matriz extracelular (MEC) menos organizada o que reduz sua resistência à tensão e torna-o mais susceptível à recorrência de lesões. A terapia com o laser de baixa potência (LBP) tem se mostrado efetiva, porém existem resultados contraditórios com relação a seus protocolos. Propusemos-nos a avaliar os efeitos de diferentes terapias com o LBP em tendão calcanear parcialmente seccionado. Para tal foram utilizados ratos Wistar machos adultos, distribuídos em 7 grupos experimentais: G1- Tendão intacto; G2-Tendão seccionado; G3- lesão + LBP (4J/cm2-contínuo); G4- lesão + LBP (4J/cm2-20 Hz); G5- Tendão seccionado; G6- lesão + LBP (4J/cm2-contínuo); G7- lesão + LBP (4J/cm2-20 Hz até o 7º dia e 2 KHz do 8º ao 14º dia). G2, G3 e G4 foram eutanaziados no 8º dia após lesão, e G5, G6 e G7 no 15º dia. Foram realizadas as dosagens de proteínas não-colagênicas (PNC), glicosaminoglicanos (GAG) e hidroxiprolina (HOPro), além de eletroforese em gel de agarose, zimografia para MMP-2 e -9 e western blotting (WB) para colágeno I e III. O estudo estrutural foi feito por meio de lâminas coradas em hematoxilina-eosina (HE) e azul de toluidina (AT) além de análise e medidas de birrefringência por meio de microscopia de polarização. A análise funcional foi realizada por meio do Catwalk. Com relação à HOPro houve um decréscimo significativo em todos os grupos quando comparados ao G1, exceto G7. A dosagem de GAG revelou um aumento em todos os grupos exceto G5 e o gel de agarose mostrou um aumento no conteúdo de dermatan sulfado em todos os grupos transeccionados, sendo menos expressivo em G4 e G7. Nos cortes corados com AT os grupos transeccionados apresentaram maior metacromasia, em especial os grupos tratados. WB para colágeno I mostrou um aumento em G4 e G7. Quanto ao colágeno III G4 apresentou valores maiores quando comparado a G2. A zimografia para MMP-2 indicou maiores valores em G4 e G7. A MMP-9 aumentou em G3 e G4. A análise de birrefringência revelou acentuada desorganização em todos os grupos, com melhora significativa em G7. Os resultados do catwalk apontaram que, após a cirurgia os grupos que receberam o laser pulsado conseguiram apoiar melhor a pata quando comparado aos demais grupos. Nossos resultados mostram que o LBP contínuo e pulsado tem efeitos diferentes sobre o processo de reparo do tendão. O LBP pulsado atuou sobre o processo inflamatório possibilitando que o animal apoiasse melhor a pata ao caminhar e promoveu a síntese e organização do colágeno. Desta maneira acreditamos que este protocolo de tratamento pode ser adaptado para o uso em clínicas de reabilitação de maneira a acelerar o reparo e melhorar as características morfológicas, bioquímicas e funcionais deste tendão / Abstract: The Achilles tendon has a high incidence of rupture, particularly in sports activities. The healing process leads to a disorganized extracellular matrix (ECM) which reduces its tensile strength and lead to a high rate of injury recurrence. Low level laser therapy (LLLT) has been effective, but there are conflicting results regarding their protocols. Our purpose was to evaluate the effects of different therapies with LLLT in partially tenotomized Achilles tendon. Adult male Wistar rats were divided into 7 groups: G1 ? intact; G2 ? injured; G3 ? injured + LLL (4 J/cm2 continuous); G4 ? injured + LLL (4 J/cm2 ? 20 Hz); G5 ? injured; G6 ? injured + LLL (4 J/cm2 continuous); and G7 ? injured + LLL (4 J/cm2 ? 20 Hz until the 7th day and 2 kHz from 8?14 days). G2, G3 and G4 were euthanized 8 days after injury, and G5, G6 and G7 were euthanized on the 15th day. Quantification of non-collagenous protein (NCP), glycosaminoglycans (GAG) and hydroxyproline (HOPro) was performed, in addition to electrophoresis on agarose gel, zymography for MMP-2 and -9, western blotting (WB) for collagen types I and III. The structural analysis was done by hematoxylin-eosin (HE) and toluidine blue (TB) staines with in addition to birefringence measurements and analysis by polarization microscopy. Functional analysis was performed using the gait assessment of the animals in the Catwalk. Regarding HOPro there was a significant decrease in all groups when compared to the G1, except G7. The dosage of GAG showed an increase in all groups except G5 and agarose gel showed an increase in the content of dermatan sulfat in all transected groups, being less expressive in G4 and G7. In sections stained with TB the tenotomized groups showed metachromasia, particularly the treated groups. WB for collagen I showed an increase in G4 and G7. In G4 collagen III showed higher values when compared to G2. The zymography for MMPs-2 showed higher values for G4 and G7. MMP-9 increased in G3 and G4. Analysis of birefringence showed marked disorganization in all groups, with a significant improvement in G7. The catwalk results showed that after surgery, G4 had better results when compared to other groups. Our results show that the continuous and pulsed LLLT has different effects on the process of tendon repair. Pulsed laser acted on the inflammatory process improving the gait and promoting collagen synthesis and organization. Thus we believe that this treatment protocol can be adapted for use in rehabilitation clinics in order to accelerate the repair and enhance the morphological, biochemical and functional characteristics of the tendon / Doutorado / Anatomia / Doutora em Biologia Celular e Estrutural

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:30:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_Rodrigo_Varella_de_Carvalho.pdf: 598355 bytes, checksum: 322409e41faaa4fcdb65cd8f7b7e200d (MD5) Previous issue date: 2006-05-29 / The aim of the present study was to evaluate the gelatinase activity (MMP-2 and 9), and proliferation of human pulp fibroblasts in vitro, after irradiation with a low level diode laser (780nm). The activity was evaluated with zymography and the proliferation rate was obtained through growth curves made in SigmaPlot (8.0), after the counting in Neubauer chamber.in light microscope. Cells used to zimography were cultived in DMEM, 10% fetal bovine serum and incubated at 37ºC in atmosphere of 5% CO2 and 95% air, in 100% humidity. Cells used to proliferation rate were cultivated in nutritional deficit (5% SFB). Groups to zymography and cell proliferation were determined: zymography - Z1 = not irradiated, Z2 = 3J/cm2 e Z3 = 6J/cm2, cell proliferation: L1 = not irradiated, L2 = 3J/cm2 e L3 = 6J/cm2. The counting was made after 2, 4 and 6 days. Assays were performed in triplicate. The zymography showed that the MMP-2 activity was major with MMP-9, and, Z2 e Z3 produced a higher activity than MMP-2, when compared to Z1. Results of the zymography and proliferation test were compared by either ANOVA complemented by Tukey´s test. The level of significance was 5% (p<0,05). Statistical analysis demonstrate difference between the groups in different days. The L3 obtained higher proliferation in the finish of the six days. L2 demonstrated higher growth than L1. Irradiated fibroblasts with the low power laser expressed a higher amount of MMP-2 activity and 6J/cm2 produced a higher proliferation rate in the initial days / O objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade das gelatinases (MMP-2 e MMP-9), e a proliferação de fibroblastos pulpares humanos in vitro, após a irradiação com um diodo laser de baixa de baixa potência (780nm). A atividade foi avaliada com zimografia e as taxas de proliferação e contagem celular foram obtidas através de curvas de crescimento feitas com o software SigmaPlot (8.0), após a contagem em câmara de Neubauer ao microscópio óptico. As células usadas para a zimografia foram cultivvadas em DMEM, com SFB a 10% e incubadas a 37ºC em atmosfera de 5% CO2 e 95% de ar, em 100% de umidade. Já, as células usadas para a taxa de proliferação e contagem celular foram cultivadas em déficit nutricional (5% SFB). Os grupos para zimmografia e para a contagem e taxa de proliferação foram determinados: a) zimografia - Z1 = sem irradiação, Z2 = 3J/cm2 e Z3 = 6J/cm2 e b) proliferação e contagem celular - L1 = sem irradiação, L2 = 3J/cm2 e L3 = 6J/cm2. A contagem celular foi realizada em após 2, 4 e 6 dias. Os ensaios foram realizados em triplicata. A zimografia mostrou que a ativiidade da MMP-2 foi maior que a MMP-9, e Z2 e Z3 produziram uma grande atividade, quando comparados ao rupo Z1. Os resultados da zimografia e dos testes de contagem e proliferação celular foram comparados por análise de variância (ANOVA) e complementado pelo teste Tukey. O nível de significância utilizado foi de % (p<0,05). A análise estatística demonstrou diferença entre os grupos nos diferentes dias para a proliferação e contagem celular. O grupo L3 obteve a maior contagem celular ao final dos seis dias avaliados. O grupo L2 demonstrou maior proliferação que o grupo L1. Os fibroblastos irradiados com o laser de baixa potência expressaram uma alta atividade de MMP-2 e a dose 6J/cm2 produziu uma alta taxa de proliferação nos primeiros dias

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:54:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao completa Marcio Antonio Ferreira.pdf: 2322841 bytes, checksum: cd82ddbd6daf63101b474662a282ba16 (MD5) Previous issue date: 2006-10-27 / Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nïvel Superior / The rise of life expectation has brought forth many problems and others will come with the aging process including the cicatrization of aged tissues Therefore many researches with low potency laser (LPL) to enhance cicatrization are outstanding although tested in young tissues A comparative morphologic and morphometric study aimed at verifying the effects of the application of LPL 660 nm on cicatrization in young and old rats Forty male Wistar rats (Rattus norvegicus albinos) were separated into four similar groups 10 treated young rats (TYR) 10 young control rats (CYR) 10 treated old rats (TOR) and 10 old control rats (COR for the daily application of LPL 660 nm with 3 J/cm2 30 mW potency during 7 days The control groups were submitted to the same procedures but the laser apparatus was turned off After surgical excision with a metal punch a pachimeter was used to measure the wound in both frontal and sagittal axes (initial and final) Likewise the wound was photographed from top to bottom with a TEKPIX digital camera with 3.1 megapixels and the same distance of 15 cm was maintained without close-ups zoom or macro for all the groups The photos were captured by a specific software (ImageLab) where the area of the wound was duly demarcated in centimeters in the beginning and end of the experiment 1st and 7th day respectively Histological glass slides were prepared and sent to the Laboratory of Pathologic Anatomy of the Alzira Velano University Hospital wherethe percentage of the reepithelialization of the tissues was evaluated The data were submitted to the Student´s t-test and analysis of variance (ANOVA) - p< 0,05 with significant differences between the following variables and groups Longitudinal Axis TYRxCYR CYRxCOR TORxCOR Transversal Axis TYRxTOR TYRxCYR ImageLab TYRxTOR CYRxCOR CORxTOR CYRxTYR in reepithelialization TORxTYR TORxCOR TYRxCYR The treatment with low potency laser (660nm)with 3 joules during seven consecutive days was efficient in enhancing the reepithelialization of tissues in both young and old animals Therefore the aged tissues respond like the young ones to laser therapy The approximation of the wound borders is not always the only variable correlated to cicatrizacion No damaging effects occur in the aged tissues with low potency laser therapy / Com o aumento da expectativa de vida nos últimos anos muitos problemas surgiram e surgirão com o processo de envelhecimento inclusive a cicatrização de tecidos envelhecidos Assim sendo muitas pesquisas com uso do laser de baixa potência (LBP) para melhorar a cicatrização têm sido relevantes porém apenas testadas em tecidos jovens O propósito desta pesquisa foi verificar os efeitos da aplicação do LBP 660 nm na cicatrização em ratos jovens e idosos por meio de um estudo comparativo morfológico e morfométrico Quarenta animais ( Rattus norvegicus albinus Wistar machos) foram distribuídos aleatoriamente em 04 grupos iguais (10 ratos jovens tratados (RJT) 10 jovens controle (RJC) 10 idosos tratados (RIT) e 10 idosos controle (RIC) para aplicação do LBP,660 nm com 3 J/cm2 30 mW de potência durante 7 dias consecutivos Os grupos-controle foram submetidos aos mesmos procedimentos porém com o aparelho de laser desligado Após a excisão cirúrgica com o punch metálico a ferida foi mensurada através da paquimetria tanto no eixo longitudinal quanto transversal (inicial e final) Da mesma forma a ferida foi fotografada de cima para baixo usando uma câmara digital da marca TEKPIX com 3.1 megapixels considerando a mesma distância de 15 cm sem aproximação zoom ou macro para todos os grupos As fotos foram capturadas por um software (ImageLab) específico onde a área da ferida foi devidamente demarcada em centímetros no início e no final do experimento 1º e 7º dias respectivamente Após a confecção das lâminas as mesmas foram encaminhadas ao Setor de Anatomia Patológica do Hospital Universitário Alzira Velano onde ficou evidenciada a porcentagem da reepitalização das feridas Os dados coletados foram submetidos ao teste t-student bem como Análise de Variância - p<0,05 com diferença significante entre as seguintes variáveis e grupos Eixo Sagital RJTxRJC RJCxRIC RITxRIC Eixo Frontal RJTxRIT RJTxRJC ImageLab RJTxRIT RJCxRIC RICxRIT RJCxRJT Na reepitelização RITxRJT RITxRIC RJTxRJC O tratamento com a terapia laser de baixa potência (660 nm) com 3 joules durante 07 dias consecutivos foi eficiente para aumentar a reepitelização dos tecidos tanto em animais jovens quanto em idosos portanto o tecido envelhecido responde à terapia por laser da mesma forma que o tecido jovem A aproximação das bordas da ferida nem sempre pode ser a única variável correlacionada à cicatrização Não há efeitos lesivos no tecido envelhecido com a terapia laser de baixa potência

A cirurgia de terceiro molar é um dos procedimentos mais realizados na área de cirurgia e traumatologia bucomaxilofaciais, e buscando um aumento na velocidade da recuperação pós-cirúrgica, muitos recursos fisioterápicos são empregados, entre eles a laserterapia e o acompanhamento da evolução pode ser baseado em evidência clínica. Neste trabalho, foi proposto acompanhar a evolução pós-cirúrgica através da utilização do eletromiografia de superfície em dois grupos distintos: pacientes sem fisioterapia com laser no pós-operatório e pacientes tratados no pós-cirúrgico com laserterapia. Realizamos quatro tomadas, no pré-operatório, normalizando, e três no pósoperatório, 7, 14, 21 dias, em amostra de 60 pacientes. Observamos, que no sétimo dia no grupo onde houve a aplicação do laser de baixa intensidade 23,3% dos pacientes ja haviam recuperado sua atividade muscular do préoperatório contra apenas 3,3% do grupo controle, ja no décimo quarto dia 73,3% contra 6,7% do grupo controle e no vigésimo primeiro dia 80% contra 10% do grupo controle. Constatamos através da eletromiografia de superfície que a utilização do laser de baixa intensidade acelera significativamente a recuperação muscular pós-trauma cirúrgico / The surgery for extraction of the retained inferior third molar is one of the most commonly performed procedures in the field of maxillofacial surgery and traumatology. With the aim of accelerating the post-surgical recovery, many physiotherapy resources are employed, including laser therapy and its evolution was based on clinical evidence. In this study, we proposed to monitor the post-surgical evolution by using surface electromyography in two distinct groups of patients, treated or not with laser therapy postoperatively. In a sample of 60 patients, we held four evaluations: preoperatively, normalizing, and three times after surgery, at 7, 14, and 21 days postoperatively. On the seventh day, 23.3% of the patients in the group receiving low intensity laser had already regained their muscle activity as they presented preoperatively, versus only 3.3% of the control group. In the fourteenth day, this happened with 73.3% of treated patients versus 6.7% in the control group, and in the twenty-first day, 80% versus 10% in the control group. It was verified, by surface electromyography evaluation, that the use of low intensity laser significantly accelerates muscle recovery after surgical trauma

Objetivo: Investigar o efeito da laserterapia de baixa intensidade (LBI) e do alongamento estático, combinados ou não, em pessoas com osteoartrite de joelho (OAJ). Método: Foram randomizados 145 sujeitos de 50 a 75 anos com OAJ em cinco grupos de intervenção (n=29 cada): Laserativo+Along; Laserplacebo+Along; Along; Laserativo e controle. A laserterapia (GaAs; 904nm; 40mW; 3J/ponto; 27J/joelho) consistiu de nove sessões nos grupos de terapia combinada e 24 quando monoterapia. O alongamento foi composto por sete exercícios repetidos por 24 sessões. O controle recebeu uma cartilha educacional. A frequência de tratamento foi de 3x/sem. A variável primária foi a intensidade da dor medida pela Escala Visual Analógica e as variáveis secundárias incluídas foram domínios dor, função, rigidez e escore total do questionário Western Ontario and McMaster Universities Arthritis Index (WOMAC), funcionalidade avaliado pelo Lequesne, mobilidade pelo Timed Up and Go, amplitude de movimento do joelho (ADMJ) pela goniometria e encurtamento de isquiotibiais (IQT) pelo ângulo poplíteo. O nível de significância foi de ?=0,05. Resultados: Nos grupos de terapia combinada, não foi observada diferença entre o laser ativo e placebo (p>0,05). Ao final do estudo, os grupos demonstraram, em média, ganho relativo significativo na dor durante AVDs (50%), WOMAC total (39%), funcionalidade (30%) e mobilidade (20%) em comparação ao controle (p < 0,001). Houve melhora de 43% no encurtamento de IQT e de 9% no ganho de ADMJ nos grupos de terapia combinada em relação ao controle (p < 0,001 e p=0,02, respectivamente). Conclusão: LBI e alongamento estático, quando isolados, foram efetivos na melhora da dor, funcionalidade, mobilidade e nos domínios dor, função e escore total do WOMAC. A LBI nos grupos de terapia combinada não foi superior à aplicação placebo. Portanto, não devemos desconsiderar a contribuição do efeito placebo no resultado do tratamento isolado. A LBI combinada ao alongamento não promoveu benefícios adicionais em relação ao alongamento de forma isolada / Objective: To investigate the effect of low-level laser therapy (LLLT) and static stretching, in combination and as monotherapy, in people with knee osteoarthritis (KOA). Methods: 145 people aged 50-75 years with KOA were randomly allocated to five groups (each n=29): Laseractive+Stretch, Laserplacebo+Stretch, Stretch, Laseractive and control. The laser therapy (GaAs; 904nm; 40mW; 3J/point; 27J/knee) consisted of nine sessions in the combined treatment groups and 24 when used as monotherapy. Stretching consisted of seven exercises repeated for 24 sessions. The control group received an educational booklet. Treatment frequency was 3 times/week. The primary outcome was pain intensity measured by Visual Analogue Scale and the secondary outcomes included pain, function and stiffness\' domains and total score of Western Ontario and McMaster Universities Arthritis Index (WOMAC), function assessed by Lequesne, mobility by Timed Up and Go, knee range of motion (KROM) by goniometry and hamstring shortening by popliteal angle. Results: In the combined treatment groups, there was no difference between the laser active and placebo (p > 0.05). At the end of the study, the treatment groups demonstrated, on average, a significant relative gain in pain (50%), total WOMAC (39%), function (30%) and mobility (20%) when compared to control (p < .001). For the combined treatment groups there was a 43% improvement in hamstring shortening (p <.001) and 9% improvement in KROM (p=0.02) when compared to control group. Conclusion: LLLT and stretching exercises, as monotherapy, were effective in reducing pain and improving function, mobility and the domains pain and function as well as the total score of WOMAC. The LLLT in the combined groups was not superior to the placebo application. Thus, we should not discard the contribution of the placebo effect in the result of the LLLT as monotherapy. The LLLT combined with stretching did not promote additional benefits compared to stretching alone