Made available in DSpace on 2014-07-29T15:16:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mestrado Paula.pdf: 2508093 bytes, checksum: eaf6dc0cbce3c8dd66202b6bce9a4939 (MD5) Previous issue date: 2008-05-21 / The thiosemicarbazones are chemical compounds of considerable scientific interest due to their important biological properties, such as antitumoral, antibacterial, antiviral, and antiprotozoal, among others. The studied compounds have the natural monoterpene camphene in the R4 position and the benzaldehyde in R2, with the substitution in the ring for different (R) groups, making this work unique. In this way, thirteen different compounds were derived from the benzaldehyde camphene thiosemicarbazone: camphene isotyiocyanate, camphene thiosemicarbazide, benzaldehyde camphene thiosemicarbazone, p-metyl benzaldehyde camphene thiosemicarbazone, p-methoxy benzaldehyde camphene thiosemicarbazone, o-chloro benzaldehyde camphene thiosecarbazone, m-chloro benzaldehyde camphene thiosemicarbazone, p-chloro-benzaldehyde camphene thiosemicarbazone, o-nitrobenzaldehyde camphene thiosemicarbazone, m-nitro- benzaldehyde camphene thiosemicarbazone, p-nitrobenzaldehyde camphene thiosemicarbazone, p-dimetylamino benzaldehyde camphene thiosemicarbazone and p-hydroxy benzaldehyde camphene thiosemicarbazone. The experiments were conducted in vitro using human melanoma cells (SK-Mel-37), because the melanoma is the most serious type of skin cancer due to its high possibility to metastasize and its resistance to the induction of apoptosis by antineoplastic drugs. We first performed a visual screening to observe if there was detachment of more than 85% of the total number of cells, after treatment with the sole concentration of 100 μM. Thus, six compounds were selected: benzaldehyde camphene thiosemicarbazone, m-chloro benzaldehyde camphene thiosemicarbazone, m-nitro-benzaldehyde camphene thiosemicarbazone, p-dimetylamino benzaldehyde camphene thiosemicarbazone, p-hydroxy benzaldehyde camphene thiosemicarbazone e p-methoxy benzaldehyde camphene thiosemicarbazone. The morphological analysis of the treated cells, by inverted phase contrast microscope and Giemsa stain, showed intense cellular vacuolization and nuclear fragmentation. In the cellular viability test, through the MTT colorimetric assay, the compounds showed IC50 (inhibitory concentration for 50% of the cells) values between 12, 84 μM and 32, 18 μM, which are bellow of those described in the literature for compounds with antineoplastic action. The analysis of nuclear fragmentation by fluorescence microscopy was performed by the incorporation of propidium iodide, and it was observed, at different time points, a progressive increase of cellular damage and a pronounced nuclear fragmentation after the cellular detachment. The analysis of the DNA fragmentation by agarose gel electrophoresis revealed that the unequivocal cytotoxic action of the compounds occurred by apoptosis. Our results showed that six compounds derived from the benzaldehyde camphene thiosemicarbazones had cytotoxic activity in human melanoma cells (SK-Mel-37) in vitro, and constitute potential candidates for future analysis aiming its therapeutic application. / As tiossemicarbazonas são compostos de considerável interesse científico devido às suas importantes propriedades biológicas, tais como antitumoral, antimicrobiana, antiviral, antiprotozoária, dentre outras. Os compostos estudados apresentam o monoterpeno natural canfeno na posição R4 e o benzaldeído em R2, com substituição no anel por diferentes grupos (R), o que confere ao presente trabalho um caráter inédito. Dessa forma, foram apresentados para este estudo onze diferentes compostos derivados de benzaldeído canfeno tiossemicarbazona: benzaldeído canfeno tiossecarbazona, p-metil benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, p-metóxi benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, o-cloro benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, m-cloro benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, p-cloro benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, onitro benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, m-nitro benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, p-nitro benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, p-dimetilamino benzaldeído canfeno tiossemicarbazona e p-hidróxi benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, além de isotiocianato canfeno e canfeno tiossemicarbazida. Os experimentos foram realizados in vitro utilizando-se células de melanoma humano (SKMel- 37), visto que o melanoma é o tipo mais grave de câncer de pele devido à sua alta possibilidade de metástase e resistência à indução de apoptose por drogas antineoplásicas. Inicialmente, realizamos um screening visual observando-se o desprendimento de mais de 85% do total das células, após tratamento com a concentração única de 100 μM. Dessa análise, foram selecionados seis compostos: benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, mcloro- benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, m-nitro-benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, p-dimetilamino-benzaldeído canfeno tiossemicarbazona, p-hidróxibenzaldeído canfeno tiossemicarbazona e p-metóxi benzaldeído canfeno tiossemicarbazona. A análise morfológica das células tratadas e coradas com Giemsa e observadas através de microscópio óptico invertido em contraste de fase demonstrou intensa vacuolização celular e fragmentação nuclear. Na análise da viabilidade celular, através do ensaio colorimétrico do MTT, os compostos apresentaram valores de IC50 (Concentração Inibitória para 50% das células) entre 12,84 μM e 32,18 μM, valores que se encontram abaixo do descrito na literatura para compostos com ação antineoplásica. A análise da fragmentação nuclear através de microscopia de fluorescência foi realizada pela incorporação de iodeto de propídio. Observamos, em diferentes tempos, o aumento progressivo dos danos celulares e a fragmentação nuclear pronunciada após o desprendimento das células. A análise de fragmentação de DNA por eletroforese em gel de agarose revelou de maneira inequívoca que a ação citotóxica observada ocorre por apoptose. Os resultados obtidos demonstraram que seis compostos derivados do benzaldeído canfeno tiossemicarbazonas apresentaram atividade citotóxica em células de melanoma humano (SK-Mel-37) in vitro, e são candidatos promissores para as análises futuras visando à sua aplicação terapêutica.

Nas últimas décadas a medicina nuclear tornou-se uma grande aliada no auxílio ao diagnóstico de doenças e também para o tratamento do câncer. Parte deste sucesso está relacionada à constante pesquisa e desenvolvimento de novos radiofármacos. Uma classe de molécula que vem se mostrando promissora para o tratamento de tumores, tanto na sua forma orgânica quanto na forma de complexos organo-metálicos, é a tiossemicarbazona e seus derivados, os quais também podem formar complexos com radioisótopos metálicos dando origem a radiofármacos para diagnóstico e terapia. Neste trabalho foram preparados complexos com o ligante benzil-5-hidroxi-3-metil-5-fenil-4,5-diidro-1H-pirazol-1-carboditionato (H2bdtc) com os radioisótopos [99mTc]tecnécio, (67/68Ga)gálio e (111In)índio, e foram avaliados a pureza radioquímica, Log P e a estabilidade na presença de L-cisteína, L-histidina, soro albumina humana (SAH) e plasma de sangue humano; também foram avaliadas a taxa de captação dos radiofármacos in vitro em células de melanoma murino B16F10 e TM1M, além da avaliação da captação ex vivo e in vivo utilizando camundongos C57B/6 inoculados com as duas linhagens tumorais. Com o [99mT]tecnécio foram obtidos dois complexos diferentes, dependendo da concentração do PBS na solução, sendo que em um deles foi possível confirmar sua estrutura como [[99mTc]O(bdtc)(Hbdtc)] a partir do complexo de rênio [ReO(bdtc)(Hbdtc)], o outro complexo de [99mTc]tecnécio, bem como de (67/68Ga)gálio e (111In)índio não tiveram a estrutura caracterizada. A eficiência de marcação dos complexos foi superior a 90 %, com Log P maior que 1 para os complexos [[99mTc]O(bdtc)(Hbdtc)], [[99mTc]-bdtc] e [67/68Ga-bdtc] e 0,9 para [111In-bdtc]. Todos os complexos se mostraram com boa estabilidade na presença de L-cisteína e L-histidina, principalmente na primeira hora de incubação, mas não o foram na presença de SAH e plasma. A captação in vitro dos complexos em células B16F10 e TM1M variou entre 0,6 % e 1,8 %, e nos estudos de biodistribuição ex vivo foi obesrvada intensa e persistente captação hepática e no baço, superando 90 %, e captação no tumor variando de 0,2 % a 3 %, enquanto que nas imagens in vivo não foi possível observar de forma uma adequada captação nos tumores a ponto de permitir o uso como agente de diagnóstico. Os resultados permitem concluir que os complexos de derivados tiossemicarbazonas podem formar complexos com diferentes metais, mas novos derivados devem ser preparados para tentar melhorar o desempenho nos sistemas biológicos. Os experimentos com animais foram aprovados pela Comissão de Ética em Pesquisa da Faculdade de Medicina - USP, processo 372/12 / In recent decades, nuclear medicine has been used as diagnostic agent for disease and for the treatment of cancer. Part of this success is related to the constant research and development of new radiopharmaceuticals. Thiosemicarbazone and their derivatives have proven to be promising agent for the treatment of tumors, both in its organic form or as organo-metallic complexes. Also, they can to form complexes with metal radioisotopes giving radiopharmaceuticals for diagnosis and therapy. In this work we prepared complex of benzyl-5-hydroxy-3-methyl-5-phenyl-4,5-dihydro-1H-pyrazol-1-carboditionato (H2bdtc) with radioisotopes [99mTc]technetium (67/68Ga)gallium and (111In)indium and the radiochemical purity, Log P and stability in the presence of L-cysteine, L-histidine, human serum albumin (HSA) and human blood plasma were assessed; also were assessed the in vitro uptake rate of radiopharmaceuticals in murine melanoma cells B16F10 and TM1M, besides the evaluation of ex vivo uptake and in vivo using C57Bl/6 mice inoculated with both tumor lines. With [99mT] technetium two different complexes were obtained, depending on the concentration of the PBS in the solution, and one of them was had its structure to confirm as [[99mTc]O(bdtc)(Hbdtc)] from the standard rhenium complex [ReO(bdtc)(Hbdtc)], the other [99mTc] echnetium complex as well as (67/68Ga)gallium and (111In)indium not have characterized the structure. The labeling efficiency of compleos was higher than 90%, with log P higher than 1 for the complexes [[99mTc]O(bdtc)(Hbdtc)], [[99mTc]-bdtc] and [(67/68Ga)-bdtc] and 0.9 to [111In-bdtc]. All the complexes showed good stability in the presence of L-cysteine and L-histidine, especially in the first hour of incubation, but not in the presence of HSA and plasma. The uptake in vitro complexes in B16F10 and TM1M cells varied between 0.6% and 1.8%, and in ex vivo biodistribution studies was obesrvada intense and persistent liver uptake and spleen, exceeding 90%, and tumor uptake in changing from 0.2% to 3%, while in vivo imaging was not possible to observe a properly uptake in tumors, not allowing to use these molecules as a diagnostic agent. The results indicate that the thiosemicarbazone derivative complex can give complexes with different metals, but new derivatives should be prepared to try to improve performance in biological systems. The animal experimentation was approved by Comissão de Ética em Pesquisa da Faculdade de Medicina - USP, proccess 372/12

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-11-09T17:58:22Z No. of bitstreams: 1 2017 - Mariana de Albuquerque Almeida.pdf: 2619920 bytes, checksum: 48c00262629bac9a7779fc4ea9ec94a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-09T17:58:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Mariana de Albuquerque Almeida.pdf: 2619920 bytes, checksum: 48c00262629bac9a7779fc4ea9ec94a6 (MD5) Previous issue date: 2017-05-10 / CAPES / This dissertation presents the evaluation of four thiosemicarbazones, from extracts of species of vegetables Talinum triangulare, Physalis angulata e Theobroma cacao L. besides formulation obtained from the combination extract of thiosemicarbazones vegetables as corrosion inhibitor in the presence of carbon steel AISI 1020. Thiosemicarbazones were obtained with good level of purity, satisfactory throughput and identified by NMR of 1H and 13C. The watery extract of Talinum triangulare was obtained using ultrasound device. The extracts of Physalis angulata species were obtained by maceration in water and the other one in ethyl acetate. The watery extracts of Theobroma cacao L. species were obtained using ultrasound device and decoction and hydroalcoholic extract was obtained by maceration in ethanol:water (80:20). The thiosemicarbazones, the vegetable extracts and their formulation were tested in the presence of corrosion of carbon steel AISI 1020 in solution 1 mol. L-1 of HCl. For this evaluation it was used the gravimetric techinique of weight loss and electrochemical techiniques of potentiodynamic polarization and electrochemical impedance spectroscopy. The results showed that the presence of thiosemicarbazones, as well as, the formulation increased significantly the resistence of carbon steel AISI 1020 in acidic medium. The results obtained in different used essays (weight loss, potentiodynamic polarization and electrochemical impedance spectroscopy) show that these techniques are complementary in relation to the evaluation of corrosion inhibition. The best anti-corrosion efficiency was observed for thiosemicarbazone chloro and hydroxy-substituted and its formulations with the extract of T. triangulare achieving 88% and 87% of efficiency, by electrochemical impedance spectroscopy, respectively. / Nesta Tese ? apresentada a avalia??o de quatro tiossemicarbazonas, dos extratos das esp?cies vegetais Talinum triangulare, Physalis angulata e Theobroma cacao L., al?m de formula??es obtidas pela combina??o extrato vegetal:tiossemicarbazonas, como inibidores de corros?o frente ao a?o carbono AISI 1020 em meio de ?cido cloridr?co. As tiossemicarbazonas foram obtidas com bom grau de pureza, em rendimentos satisfat?rios e, caracterizadas por IV, RMN de ^1H e ^13C. O extrato aquoso de Talinum triangulare foi obtido em aparelho de ultrassom, os extratos da esp?cie Physalis angulata, foram obtidos sob macera??o em ?gua e o outro em acetato de etila; j? os extratos aquosos da esp?cie Theobroma cacao L. foram obtidos em aparelho de ultrassom e decoc??o e, finalmente, o extrato hidroalco?lico foi obtido por macera??o em etanol:?gua (80:20). As tiossemicarbazonas, os extratos vegetais e suas formula??es foram testadas frente ? corros?o de a?o carbono AISI 1020 em solu??o 1mol.L-1 de HCl. Para tal avalia??o foi utilizada a t?cnica gravim?trica de Perda de Massa e as t?cnicas eletroqu?micas de Polariza??o Potenciodin?mica e Espectroscopia de Imped?ncia Eletroqu?mica. Os resultados mostraram que a presen?a de tiossemicarbazonas, bem como, das formula??es aumentam significativamente a resist?ncia do a?o carbono AISI 1020 em ?cido. Os resultados obtidos nos diferentes ensaios utilizados (Perda de Massa, Polariza??o Potenciodin?mica e Espectroscopia de Imped?ncia Eletroqu?mica) mostraram que estas t?cnicas s?o complementares quanto a avalia??o da inibi??o da corros?o. A melhor efici?ncia anticorrosiva foi observada para as tiossemicarbazonas cloro e hidroxi-substitu?das e, para suas formula??es com o extrato da T. triangulare obtendo-se 88% e 87% de efici?ncia por espectroscopia de imped?ncia eletroqu?mica, respectivamente.