The hormonal control of tomato (Solanum lycopersicum) fruit development have been extensively studied, mainly during ripening. Notwithstanding, considerable gaps still exist in our understanding of the function and spatial-temporal distribution of hormones during fruit development. Here, we performed histochemical analysis of tomato cv. Micro-Tom transgenic lines harboring the gene reporter GUS fused to five different promoter responsive to the hormones, auxin, cytokinins (CKs), gibberellins (GAs), abscisic acid (ABA) and ethylene, in order to redefine their spatial-temporal distribution during tomato fruit development, from early pre-anthesis stages to red ripe (RR) stage. CKs levels were high during pre-anthesis, initially in placental tissues and subsequently in ovule, indicating a major function of this hormone during pre-fertilized ovary growth. At early post-fertilization stages, CKs contents were high in seeds, and afterward in the outer and inner epidermical and subepidermical layer of pericarp. High auxin content was observed, during all pre-anthesis and fruit development stages, in pedicel, suggesting a basipetal transport to the mother plant. Ethylene contents increased during pre-anthesis ovary growth. Interestingly, ethylene contents did not decrease, immediately, post-fertilization. The content of GAs and ABA was low at pre-anthesis and early post-fertilization stages, specific in placental tissues and pericarp. Conversely, these hormones accumulated mainly during cell expansion phase of fruit growth. Pollen grains that reached the stigma, post anther dehiscence, showed high content of auxin and ABA. In addition, we reported an antagonism between ethylene and GAs contents during tomato fruit development, where the level of ethylene started to decrease during the cell expansion phase of the fruit growth, moment when the level of GAs started to increase in placental tissues and pericarp. / O controle hormonal do desenvolvimento do fruto do tomateiro (Solanum lycopersicum cv. Micro-Tom) já foi extensamente estudado, principalmente no amadurecimento. No entanto, ainda existem consideráveis lacunas em nosso conhecimento da função e distribuição espaço-temporal dos hormônios durante o desenvolvimento do fruto. Foram realizados ensaios histoquímicos com cinco linhas transgênicas de tomate cv. Micro-Tom que carregavam o gene repórter GUS fusionado a cinco diferentes promotores responsivos aos hormônios, auxina, citocinina (CKs), giberelina (GAs), ácido abscísico (ABA) e etileno, com o fim de redefinir a distribuição espaço-temporal deles ao longo do desenvolvimento do fruto, desde estágios iniciais pre-anteses até o estágio red ripe (RR). Os níveis de CKs foram altos na fase pre-anteses, inicialmente na placenta e posteriormente nos óvulos, indicando um papel importante deste hormônio no crescimento do ovário, pre- fertilização. Nos estágios inicias, post-fertilização, o conteúdo de CKs foi alto nas sementes e depois nas camadas epidérmicas e subepidérmicas internas e externas do pericarpo. Alto conteúdo de auxina foi observado, durante todos o desenvolvimento do fruto, no pedicelo, sugerindo o transporte basípeto de auxina para a planta mãe. Os níveis de etileno aumentaram durante o crescimento do ovário antes da anteses. Interessantemente, o nível de etileno não diminuiu imediatamente post-fertilização. Os conteúdos de GA e ABA foram baixos prévios a anteses e nos estágios inicias pre-fertilização, especificamente na placenta e pericarpo. Inversamente, o conteúdo desses hormônios aumentou na fase de expansão celular do crescimento do fruto. Os grãos de pólen que chegaram ao stigma, post deiscência das anteras, apresentaram altos níveis de ABA e auxina. Além disso, reportamos um antagonismo entre conteúdo de etileno e giberelina durante o desenvolvimento do fruto, onde o nível de etileno começou a decrescer durante a fase de expansão celular do crescimento do fruto, momento em que o nível de giberelina começou a aumentar na placenta e pericarpo.

Orientador: Renato de Mello Prado / Coorientador: Gilmara Pereira da Silva / Banca: Joaquim José Frazão / Banca: Claudenir Facincani Franco / Resumo: O mineral silício (Si) é considerado um elemento essencial para o ser humano, tendo diversas funções, especialmente a para formação óssea. O tomate é amplamente consumido no mundo, mas apresenta baixo teor de Si, não atendendo a exigência do ser humano. A pulverização foliar de Si em plantas tomate pode promover a biofortificação associada à melhora na qualidade pós-colheita, dependendo da fonte e da concentração do elemento na calda. Neste estudo, objetivou-se obter tomates biofortificados via pulverização foliar com Si, em diferentes fontes e concentrações, e avaliar sua qualidade tecnológica. O experimento foi conduzido em casa de vegetação, em sistema de cultivo hidropônico, em vasos (8 dm3) preenchidos com areia, contendo uma planta por vaso. Os tratamentos consistiram da combinação de quatro fontes de Si (silicato alcalino estabilizado; nanossílica; ácido silícico estabilizado e silicato de potássio) e quatro concentrações de Si (0,0; 0,2; 0,4 e 0,6 g L-1), dispostos em blocos casualizados, com cinco repetições. Realizaram-se cinco pulverizações com Si nas plantas de tomate cultivar Micro Tom, iniciando-se no florescimento, uma vez por semana. A pulverização foliar de Si durante a fase reprodutiva das plantas de tomate foi eficiente para biofortificar o fruto e incrementar o teor de ácido ascórbico, a acidez titulável e a firmeza do fruto, destacando-se a fonte nanossílica e ácido silícico na concentração próxima de 0,4 g L-1. / Abstract: The mineral silicon (Si) is considered an essential element for humans, having several functions, especially for bone formation. Tomato is a fruit widely consumed in the world but the low Si content does not meet the standard requirements for human beings. To this end, foliar spraying of tomato plants with Si may promote biofortification associated with improved post-harvest quality, depending on the source and concentration of Si used in the spraying mixture. This study aimed at producing tomatoes biofortified with Si at varying concentrations from different sources via foliar spraying, and evaluating their technological quality as well. The experiment consisted of pots (8 dm3) filled with sand containing one Micro-Tom cultivar tomato plant per pot in a greenhouse, in a hydroponic culture system. The treatments consisted of a combination of four Si sources (stabilized alkali metal silicate, nano silica, stabilized silicic acid, and potassium silicate) and four Si concentrations (0.0; 0.2; 0.4; and 0.6 g L-1), arranged as a randomized block design, with five replications. Five spraying mixtures containing Si were applied to the tomato plants once a week as the flowering stage started. Foliar spraying of Si during the reproductive phase of tomato plants effectively biofortified the fruit, increasing the ascorbic acid content, titratable acidity and fruit firmness, highlighting as particularly effective the nano silica and silicic acid sources at the approximate concentration o... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Vanildo Luiz Del Bianchi / Banca: Gisele Ferreira Bueno / Banca: Gleyce Teixeira Correia / Banca: Márcia Cristina Bisinoti / Banca: Crispin Humberto Garcia Cruz / Resumo: A produção da farinha de mandioca gera manipueira, efluente rico em matéria orgânica, que causa sérios problemas ambientais quando descartada de forma inadequada. Para contribuir com a reversão dessa realidade, desenvolveu-se esta pesquisa com o objetivo de tratar a manipueira em sistemas integrados RAHLF concomitante à produção de tomates com fertirrigação subsuperficial. Os Sistemas de Tratamento Anaeróbio Horizontal de Fertirrigação Subsuperficial (TAHFS) foram implantados em floreiras, que possuíam uma área em seu leito, onde atuou o Reator Anaeróbio Horizontal de Leito Fixo, com pedra brita, manipueira e bactérias anaeróbias sobrepostas. Os TAHFS foram alimentados em fluxo hidráulico contínuo, diariamente, com três diferentes concentrações de entrada da manipueira, 5.000, 10.000 e 15.000 mg.L-1 e três Tempos de Detenção Hidráulica (TDH), 3,5; 7 e 10,5 dias. Desenvolveu-se atividades de caracterização do efluente, monitoramento e desempenho dos sistemas, semanalmente, durante 60 dias através de análises semanais de temperatura, pH, condutividade elétrica, ácidos voláteis, alcalinidade a bicarbonato, alcalinidade total, turbidez, sólidos sedimentáveis, sólidos totais, sólidos voláteis, sólidos fixos, DQO e cianeto. Realizou-se também análises físico-química do solo para determinar influência da fertirrigação no mesmo. O efluente tratado em todos os TAHFS apresentou, no geral, redução de mais de 90% de DQO. O TAHFS C15.000/TDH10,5 destacou-se dentre os demais por ter... / Abstract: The production of cassava flour generates manipueira, an effluent rich in organic matter, which causes serious environmental problems when improperly discarded. In order to contribute to the reversal of this reality, this manipueira treatment research developed through integrated horizontal anaerobic system fixed bed (HAFB) and sub-surface fertigation, concomitant to the production of tomatoes. The Treatment Systems Anaerobic Horizontal Fertigation Subsurface (TAHFS) were implanted in flowerpots, which had an area in his bed, where he Reactor Horizontal Anaerobic Fixed Bed with crushed stone, Manipueira - with variable organic load - and bacteria anaerobic overlapping. The TAHFS were fed in continuous hydraulic flow daily with three different concentrations input of cassava, 5,000; 10,000 and 15,000 mg L-1 and three hydraulic retention times (HRT), 3.5; 7 and 10.5 days. Effluent characterization, monitoring and performance systems activities were carried, weekly for 60 days through temperature analysis, pH, electrical conductivity, volatile acids, bicarbonate alkalinity, total alkalinity, turbidity, settleable solids, total solids, volatile solids, fixed solids, COD and cyanide. It was also made up soil physical-chemical analysis to determine the influence of fertigation on it. The treated effluent in all TAHFS presented overall reduction of more than 90% of COD. The TAHFS C15.000/TDH10,5 stood out among the other for introducing high COD removal values, turbidity, total solids, total fixed solids, total volatile solids and settleable solids. The systems showed stable behavior in relation to AV/AT, suggesting withstand higher volumetric organic loads. TAHFS provided increased P and Mg contents in addition to the maintenance of organic matter and soil pH. TAHFS has been shown to be a viable alternative for anaerobic treatment of manipueira with tomato production / Doutor

Um dos maiores desafios encarados pelo produtor rural, e em especial o de hortaliças, é a comercialização de seus produtos. Percebe-se ser necessário esquematizar formas de se obter o melhor controle da qualidade dos produtos, mitigar as perdas de pós-colheita, agregar valor ao produto e distribuir melhor o lucro pela cadeia produtiva, assegurando a sustentabilidade da mesma. Surgem, então, as questões de quais são as transações e modelos de gestão existentes nos canais de distribuição de produtores de hortícolas. Qual modelo de gestão seria o mais adequado para os membros da cadeia? Na tentativa de contribuir com a solução deste problema, o presente estudo tem o objetivo de caracterizar as transações e modelos de gestão existentes entre produtores de hortícolas, intermediários e varejistas, e propor um novo modelo de gestão. Utilizaram-se entrevistas em profundidade para caracterização da cadeia de hortaliças e o estudo de caso único integrado de produtores de hortaliças, em especial o tomate, intermediários e varejistas na região metropolitana de Goiânia, Goiás. A análise dos dados foi por meio da triangulação do referencial teórico com os modelos de canais de distribuição de produtos perecíveis e com a descrição do caso. Os resultados do estudo indicaram que existem modelos de canais de distribuição eficientes, para a cadeia de produtos perecíveis na literatura; que os modelos caracterizados, na região de Goiânia, são passíveis de melhorias para atender as mudanças nos padrões de consumo e regulação dos canais de distribuição; existe, pois congruência e sinergias entre a teoria e modelos de canais de distribuição de produtores de hortícolas; e que esses permitem a elaboração de modelos organizacionais mais adequados, entre produtores de hortaliças, intermediários e varejistas. Com a proposição desse modelo, espera-se contribuir com uma estrutura organizacional que auxilie nas atividades de planejamento e gestão dos canais de distribuição de produtores de hortícolas, por gestores e especialistas, com transparência, sinergismo e satisfação de todos envolvido nos elos da cultura de tomate / One of the biggest challenges faced by the rural producer, and in particular one of the vegetables, is the commercialization of its products. It is necessary to outline ways to obtain better control of product quality, mitigate postharvest losses, add value to the product and better distribute the profit through the production chain, ensuring the sustainability of the same. The question then arises of which transactions and management models exist in the distribution channels of vegetable producers and which management model would be the most appropriate for the members of the chain? To contribute to the solution of this problem, the present study has the objective of characterizing the transactions and management models existing among horticultural producers, intermediaries, and retailers and propose a new management model. We used in-depth interviews to characterize the vegetable chain and the single integrated case study of vegetable producers, especially tomato, intermediaries and retailers in the metropolitan region of Goiânia, Goiás. Data analysis was done through triangulation of the theoretical reference with the models of channels of distribution of perishable products and with the description of the case. The results of the study indicated that there are models of efficient distribution channels for the chain of perishable products in the literature; that the models characterized in the region of Goiânia can be improved to meet the changes in consumption patterns and regulation of the distribution channels; that there are congruence and synergies between the theory and models of distribution channels of horticultural; and that these allow the elaboration of more appropriate organizational models among vegetable producers, intermediaries, and retailers. With the proposal of this model, it is hoped to contribute with an organizational structure that will assist in the planning and management of the vegetable distribution channels by managers and specialists, with transparency, synergism, and satisfaction of all involved in the production chain of tomato culture

Realizaram-se dois experimentos, em condições de campo, com os objetivos de (a) determinar o efeito de sistemas de condução de plantas e de tutoramento sobre a produção e seus componentes em híbridos de tomate de mesa de hábito de crescimento indeterminado dos segmentos Salada Longa Vida (SLV) e Santa Cruz (SC) (Experimento 1), e (b) avaliar o efeito do espaçamento entre plantas no sistema de condução com uma única haste tutorada com fitilho sobre a produção e seus componentes para híbridos do segmento SLV (Experimento 2). No experimento 1 adotou-se o delineamento em blocos ao acaso com os tratamentos em esquema fatorial 5 x 2, e quatro repetições, sendo avaliados três híbridos SLV e dois SC em dois sistemas de condução de plantas. No experimento 2, o delineamento utilizado também foi em blocos ao acaso, com os tratamentos em esquema fatorial 2 x 4, e quatro repetições, avaliando-se dois híbridos SLV. Os experimentos foram conduzidos em Itatiba, SP, de julho de 2007 a janeiro de 2008, e de janeiro a julho de 2009. Foram consideradas todas as plantas de cada parcela e avaliaram-se o número total frutos (NTF), a produção total por parcela (PTP), a massa de frutos descartados (MFD), o número de frutos comerciais (NFC), a produção comercial (PCO), a produção por planta (PPP), a massa média dos frutos (MMF), a massa de frutos comercializáveis nas classes AAA, AA e A, para ambos os grupos varietais, bem com o número de frutos com rachaduras radiais (RAD), com rachaduras concêntricas (CON), com lóculo aberto (LAB), manchados (MAN), ocos (OCO) e deformados (DEF). O sistema de condução de plantas com duas hastes tutoradas com bambu proporcionou incremento de NTF, NFC e PPP, para ambos os segmentos em comparação à condução de uma única planta por cova com uma haste tutorada com fitilho. O sistema de condução com bambu, para ambos os segmentos, proporcionou menor MMF e a massa de frutos das classes AAA e A também foi menor em relação ao sistema com fitilho. O híbrido Forty mostrou menor MFD devido ao menor MAN no sistema de condução com bambu. Não houve diferença entre os dois sistemas de condução para PTP, PCO, LAB e a massa de frutos da classe AA, para os dois segmentos de mercado. No experimento 2, não houve diferença entre os híbridos estudados nas diferentes densidades de plantio para produção e para a maioria de seus componentes, exceto para PPP, onde Forty superou Valenty, e para MFD, em que Valenty superou Forty devido a maior freqüência de LAB. O menor espaçamento entre plantas proporcionou maior NTF, PTP, NFC, PCO e massa de frutos das classes AA e A para ambos os híbridos, bem como menor MFD, PPP, MMF, massa de frutos da classe AAA e número de frutos com RAD e MAN para ambos os híbridos. O maior espaçamento entre plantas contribuiu para menor ocorrência de frutos com LAB para ambos os híbridos. / Two experiments were conducted under field conditions with the objectives of (a) determining the effect of training and staking systems of plants on yield potential and yield components of fresh market tomato hybrids of indeterminate growth habit of varietal segments Salad Extended Shelf Life (SLV) and Santa Cruz (SC) (Experiment 1), and (b) evaluating the effect of spacing between plants in the single-stem training system with polypropylene wire on yield and yield components for hybrids of segment SLV (Experiment 2). In experiment 1 it was adopted the randomized block design with the treatments in a 5 x 2 factorial scheme, and four replications, being evaluated three SLV hybrids and two SC hybrids in two systems of plant training. In experiment 2, the experimental design used was also randomized blocks with the treatments in a 2 x 4 factorial scheme, and four replications, being evaluated two SLV hybrids. The experiments were conducted in Itatiba, SP, from July 2007 to January 2008, and from January to July 2009. All plants of each plot were considered and the total number of fruits (NTF), the total production per plot (PTP), the mass of discarded fruits (MFD), the number of commercial fruits (NFC), the commercial production (PCO), the production per plant (PPP), the average mass of fruits (MMF) and the marketable fruit mass of classes AAA, AA and A, for both segments were evaluated, as well as the number of fruits with radial cracking (RAD), concentric cracking (CON), open locules with exposed seed (LAB), blotchy appearance (MAN), puffiness (OCO), and deformed (DEF). It was found that, the training system with one plant per hole, conducted with two stems staked with bamboo, provided increment of NTF, NFC and PPP, for both segments in comparison to the system of a single plant per hole with one stem trained with a propylene wire. The staking system with bamboo, for both segments, provided a smaller MMF and the mass of fruits of classes AAA and A was also lower in relation to the system with a propylene wire. The hybrid Forty showed lower MFD due to lower MAN in the staking system with bamboo. It was not found any difference between the two handling systems for PTP, PCO, LAB and for the mass of the fruits of class AA, for the two market segments. In experiment 2, there was no difference between the hybrids studied in different planting densities for production and for the majority of its components, except for PPP, in which Forty was shown to be superior than Valenty, and for MFD, in which Valenty exceeded Forty due to the greater frequency of LAB. The smaller spacing between plants provided larger NTF, PTP, NFC, PCO, and a mass of the fruits of classes AA and A for both hybrids, as well as a smaller MFD, PPP, MMF, a mass of fruits class AAA, and also a lower number of fruits with RAD and MAN for both hybrids. It was also found that, for both hybrids, under wider spacing between plants the occurrence of fruits with LAB significantly decreased.

Sementes de tomate do híbrido Gladiador foram expostas a radiações gama do Co-60 nas doses 0; 2,5; 5; 7,5; 10; 12,5; 15 e 20 Gy. Foram analisados vários parâmetros como germinação, altura da plântula até o cotilédone, altura total da plântula, peso fresco e seco da plântula, altura da planta, diâmetro do caule da planta, peso fresco e seco e área da 5º folha, número de frutos verdes com diâmetro maior que 3 cm, número de frutos esverdeados, de vez e maduros, número total de frutos, Brix e pH dos frutos, peso médio dos frutos e produção total de frutos. Diferentes efeitos estimulantes foram observados nos diversos estádios de desenvolvimento das plantas. O maior estímulo, para produção ocorreu para a dose de 10 Gy. As maiores alturas médias da plântula e da planta ocorreram para a dose de 7,5 Gy. O maior número de frutos verdes com 3 cm de diâmetro ocorreu para o tratamento de 12,5 e 15 Gy. A irradiação também estimulou a produção de maior número total de frutos, em todas as doses aplicadas, com vantagem para a dose de 10 Gy que produziu 88% mais frutos que a testemunha e também uma produção em peso 86% maior. O pH dos frutos acidificou significativamente a partir da dose de 12,5 Gy. Houve aumento na produção em todos os tratamentos em relação à testemunha sendo que o maior estímulo para produção ocorreu para as doses de 10, 12,5 e 15 Gy. O uso de baixas doses de radiação gama do Co- 60 aplicado no tratamento pré-semeadura, nas sementes, mostrou-se eficiente em estimular o desenvolvimento das plantas e aumentar a produção do tomate. / Tomato seeds of the Gladiador hybrid were exposed to gamma radiation of Co-60 with the following doses: 0; 2,5; 5; 7,5; 10; 12,5; 15 e 20 Gy. Analysis were performed on germination, seedlings height to cotyledon, seedling total height, seedling fresh and dry weight, plant height, stalk diameter at the root beginning, fresh and dry weight of the 5th leaf, number of green fruits with diameter higher than 3 cm, number of green, half ripen and ripen fruits, total number of fruits, Brix and pH of fruits, average fruit weight and fruit total production. A variety of stimulation effects were observed on the different plant developing stages. The greatest stimulus for production was observed in the 10 Gy dose. The highest seedling average height and plant average height were observed for the 7,5 Gy dose. The biggest number of green fruits with diameter higher than 3 cm occurred for the 12,5 and 15 Gy treatments. Irradiation also stimulated a higher total number of fruits in all doses, having advantage the 10 Gy dose which produced 88% more fruits than control as well as 86% more weight production. The fruits pH acidified significantly in a dose of 12,5 Gy and higher. Production increased in all treatments comparing to control and the highest stimulus for production observed was for the 10, 12,5 and 15 Gy. The use of low gamma radiation doses of Co-60 applied as pre-sowing treatment in the seeds, efficiently stimulated the development of plants and the tomato production.

Fitoplasmas, procariotos sem parede celular e habitantes de floema, têm causado danos consideráveis em diversas culturas comercialmente importantes. A associação desses fitopatógenos com várias doenças que ocorrem em espécies hortícolas têm sido comumente registradas tanto no território brasileiro como em outras regiões do mundo. Em áreas de plantio comercial, na região de Piracicaba-SP e Bragança Paulista-SP, plantas de tomate e berinjela apresentando porte reduzido, clorose foliar acentuada, produção exagerada de pequenos ramos, desenvolvimento anormal do cálice, encurtamento de entre-nós, redução no tamanho de folhas, flores e frutos, que podem ser traduzidos em sintomas de enfezamento, foram observadas evidenciando infecção por fitoplasma. Através da técnica de duplo PCR utilizando os oligonucleotídeos universais R16 mF1/mR2 e R16 F2n/R2, fragmentos de DNA de 1,2 Kb foram amplificados de amostras sintomáticas, demonstrando a presença de fitoplasma nos tecidos das plantas. Nenhum fragmento foi detectado em plantas sadias. O exame de tecidos do floema de plantas sintomáticas, submetidos ao microscópio eletrônico de transmissão, revelou a presença de corpúsculos pleomórficos no interior dos vasos, corroborando com os resultados da detecção através de PCR. O uso de oligonucleotídeos específicos para identificação demonstrou a ocorrência de fitoplasmas afiliados ao grupo 16SrIII, tanto em tomate quanto em berinjela. Análises de RFLP, usando as enzimas de restrição AluI, MseI, HpaII, KpnI, RsaI, HhaI e MboI, confirmaram a ocorrência de fitoplasmas do referido grupo em ambas as espécies vegetais. Para confirmar os resultados de RFLP, os fragmentos de DNA de 1,2 Kb dos fitoplasmas presentes em tomate e berinjela, amplificados com o par de iniciadores R16 F2n/R2, foram clonados em Escherichia coli para a determinação de suas seqüências de nucleotídeos. Os fragmentos clonados sequenciados foram comparados, por homologia de nucleotídeos, entre si e com isolados cujas seqüências já haviam sido depositadas no "GenBank". O resultado do sequenciamento revelou heterogeneidade das seqüências do gene 16S rDNA ocorrendo em alguns isolados, demonstrando e confirmando a variabilidade genética de organismos do grupo 16SrIII presentes no Brasil. / Phytoplasmas are cell wall-less prokaryotes and phloem- inhabitants. They caused considerable damages in some commercially important crops in the Brazilian territory and others regions of the world. It has been observed in the region of Piracicaba and Bragança Paulista, São Paulo State, commercial fields of eggplant and tomate showing reduced size, extensive chlorosis, proliferation of axillary buds, abnormal development of calyx, internode shortening and small leaves, flowers and fruits. These symptoms can be translated by stunting, making clear the phytoplasma infection. Presence of phytophasm was confirmed by nested PCR assay with the universal primer R16 F2N/R2 where DNA fragments of 1.2 kb were amplified from symptomatic samples. No fragments was observed in healthy plants. Analysis of symptomatic plant’s phloem tissue when submitted to electron microscope of transmission, disclosed the presence of pleomorphic bodies inside the tissues, corroborating with the results of detection by PCR assay. The use of specific primers for groups demonstrated the phytoplasmas occurrence associated to the 16SrIII group, in both tomato and eggplant. RFLP analyses using AluI, MseI, HpaII, KpnI, RsaI, HhaI and MboI restriction enzymes confirmed the occurrence of phytoplasmas on 16SrIII group in both plant species with typical stunting symptoms. The products of 1.2 kb of tomato and eggplant isolates amplified with the pair of primers R16 F2n/R2, were cloned in Escherichia coli to determine nucleotides sequence and to confirm the RFLP results. The nucleotide sequences were compared by homology and with isolates whose sequence have been already deposited in the "GenBank". The results revealed 16S rRNA sequence heterogeneity occurring in some isolates showing the genetic variability of group 16SrIII phytoplasma in Brazil.

O fungo fitopatogênico hemibiotrófico Moniliophthora perniciosa, causador da doença Vassoura-de-Bruxa no cacaueiro (Theobroma cacao), é um dos maiores responsáveis pela contribuição do declínio da produção brasileira de cacau e constitui um problema fitopatológico em todas as regiões cacauicultoras. O gênero Solanum, do qual faz parte o tomate, berinjela, batata entre outros, é bem conhecido na literatura por conterem compostos que exibem atividade biológica tais como antifúngica, antiviral, moluscida, anticancerígena entre outras. O presente trabalho explorou o potencial de extrato bruto de folhas de Solanum lycopersicum como agente inibidor no controle de crescimento e desenvolvimento de três biotipos de M. perniciosa (cacau, solanácea e liana). Através de ensaios biológicos e métodos cromatográficos foi identificado o metabólito secundário -tomatina como responsável pela atividade antifúngica. Este glicoalcalóide, que apresentou potente atividade antifúngica em ensaios in vitro, foi utilizado como agente de controle no desenvolvimento do fungo e manifestação dos sintomas em plantas in vivo, onde foi verificado uma redução significativa no número de plantas com sintomas. / The hemibiotrophic phytopathogenic fungi Moniliophthora perniciosa, agent of witches broom disease of cocoa (Theobroma cacao) is one of the major responsible for the Brazilian cocoa production decay and it is a phytopathological problem in every cocoa yield area. Solanum genera, from each belongs tomatoes, eggplants, potatoes, among others, is well known as producer of biological activity such as antifungal, antiviral, anti mollus, anticancer, etc. This study explored the potential of crude extract leaves from Solanum lycopersicum as an inhibitor agent for the control of growing and development of three M. perniciosa biotypes. By the use of biological assays and chromatography, -tomatine, a secondary metabolite was identified as responsible for antifungal activity. This glycoalcaloid presented great antifungal activity on in vitro assays and it was used on the control and development of witches broom symptoms in vivo, where a significant reduction of symptomatic plants could be observed.

Leaves are responsible for the majority of the fixed carbon in most plant species. Along leaf development, the photosynthetic capacity increases until the organ reaches maturity. Consequently, at the onset of senescence the leaves have the highest photosynthetic activity, then, as the chloroplasts are dismantled and the photosynthetic machinery is degraded, leaves gradually lose the rate of carbon assimilation. Although the capacity to fix carbon declines as senescence progresses, nutrient remobilization from macromolecule degradation nourishes the developing sink organs. In this regard, delaying leaf senescence stands out as a promising strategy to increase plant yield as extends the window of time with maximum carbon fixation rate. Another approach that is receiving much attention is the manipulation of chlorophyll degradation once it potentially regulates photosynthetic capacity and affects the nutritional quality of harvestable organs. As chlorophyll is degraded, the released phytol is recycled and can be either stored (i.e. as fatty acid phytyl esters), used for chlorophyll synthesis or be incorporated in tocopherol biosynthesis. Tocopherols have high nutraceutical value due to their antioxidant properties. However, the majority of the studies regarding senescence and chlorophyll degradation were carried out in the model plant Arabidopsis thaliana or grasses, creating a knowledge gap about these processes in fleshy fruit-bearing plants of human diet interest. In this regard, the tomato, Solanum lycopersicum, is an excellent model not only for the genetic and genomic resources, but also for its agronomic and nutritional importance. Thus, this project aims to extend what is known about the effects of chlorophyll degradation and senescence manipulation over the metabolism and yield of tomato plants, as well as fruit nutritional quality. In order to evaluate the consequences of alteration in chlorophyll degradation, first the enzymes chlorophyllase and pheophytinase, both capable of dephytylating the chlorophyll molecule, were identified and characterised. An extensive phylogenetic, evolutive and transcriptional analysis allowed the identification of two groups of chlorophyllases, one putatively involved in the response to different stimuli, while the other may act in chlorophyll homeostasis. As for pheophytinase, only one group was identified, being related to physiologically programmed processes that trigger chlorophyll degradation (i.e. leaf senescence and fruit ripening). Given this scenario, pheophytinase was chosen to be constitutively knocked-down in order to evaluate the effects over the metabolism of leaves and fruits. As consequence of this manipulation, transgenic plants were impaired in the leaf senescence-associated chlorophyll breakdown, but, although with an initial delay, fruit ripening-associated degreening was not compromised. Several photosynthetic and biochemical parameters were signs of photoinhibition, possibly due to a deficiency in chlorophyll recycling in leaves. This led to an increase in sugar exportation towards fruits, ultimately increasing soluble sugar content of ripe fruits. However, as a consequence, carotenoid levels were reduced, what, at least partially, it was compensated by an increase in tocopherol content. The results indicated that pheophytinase plays a role beyond senescence-associated chlorophyll degradation and its manipulation led to the development of fruit with increased soluble sugars and tocopherols at the cost of lowering carotenoid levels. Thus, these evidences support the manipulation of chlorophyll breakdown as a strategy for improvement of fleshy fruit plants. In order to address the effects of senescence over yield and fruit quality, the transcription factor ORESARA1, which has been widely characterised in A. thaliana and is considered a key regulator of senescence initiation, was targeted. After a comprehensive phylogenetic analysis and the characterization of the regulatory mechanisms, one putative ortholog was selected to be silenced. As consequence of this manipulation, leaves displayed increased chlorophyll content. Moreover, as senescence was delayed, the extent of photosynthetic activity of the leaves was also expanded. As the number of fruits was increased in the knockdown lines, this reflected in an increment in the harvest index. Ripe fruits accumulated more soluble sugars and tocopherols. Collectively, the results support the manipulation of leaf senescence as a strategy for tomato yield improvement. Altogether, data obtained enhance the knowledge about the impacts of chlorophyll degradation and leaf senescence over the metabolism of fleshy-fruit plants, providing strategies to increase yield and nutritional quality of fruits / As folhas, para a maioria das espécies vegetais, são o principal órgão responsável pela fixação de carbono. Durante o desenvolvimento foliar, o potencial fotossintético aumenta até a folha atingir a sua maturidade. Consequentemente, no momento que o programa de senescência se inicia, a folha apresenta a maior taxa de fotossíntese, a qual passa então a declinar conforme o cloroplasto se desorganiza e a maquinaria fotossintética é degradada. Apesar da redução na fixação de carbono, o catabolismo de macromoléculas possibilita a remobilização de nutrientes para os órgãos dreno em desenvolvimento. Neste contexto, atrasar a senescência destaca-se como uma promissora estratégia para aumento da produtividade, uma vez que estende o período de máxima fixação de carbono das folhas. Outra estratégia que tem recebido atenção por, potencialmente, regular a capacidade fotossintética e afetar a qualidade nutricional dos órgãos coletáveis é a manipulação da degradação da clorofila. Durante o catabolismo deste pigmento, o fitol liberado é reciclado podendo ser armazenado (i.e. na forma de ésteres de fitil com ácidos graxos), ser utilizado na síntese de novas moléculas de clorofila ou ser incorporado na rota biossintética de tocoferóis. Estes últimos compostos, por seu potencial antioxidante, possuem alto valor nutracêutico. No entanto, a maior parte dos estudos sobre senescência e degradação de clorofila foi realizada na planta modelo Arabidopsis thaliana ou em gramíneas, tornando escassas as informações relativas a plantas com frutos carnosos de interesse para a dieta humana. Nesse âmbito, o tomateiro, Solanum lycopersicum, é um excelente modelo de estudo não apenas pela disponibilidade de recursos genético e genômicos, mas também pela importância agronômica e nutricional desta espécie. Assim, este trabalho pretende expandir o conhecimento acerca dos efeitos da manipulação da degradação de clorofila e da senescência sobre o metabolismo e produtividade do tomateiro, bem como sobre a qualidade nutricional dos frutos. De modo a se avaliar as consequências de alterações na degradação de clorofila, iniciou-se por identificar e caracterizar em tomateiro as enzimas clorofilase e feofitinase, as quais catalisam a defitilação da molécula de clorofila. Uma vasta análise filogenética, evolutiva e transcricional permitiu a identificação de dois grupos de clorofilases, um dos quais estaria envolvido na plasticidade de respostas a estímulos e o outro na homeostase dos níveis de clorofila. Já para feofitinase, somente um grupo foi identificado, o qual está relacionado a processos fisiologicamente programados que levam à degradação de clorofila (i.e. senescência foliar e amadurecimento de frutos). Dado o panorama obtido, a feofitinase foi escolhida para ser constitutivamente silenciada de modo a se avaliar as consequências para o metabolismo de folhas e frutos. Como consequência do silenciamento, as linhagens transgênicas mostraram-se incapazes de degradar clorofila durante a senescência, mas, embora com um atraso nas etapas iniciais, a degradação ao longo do amadurecimento de frutos não foi comprometida. Diversos parâmetros fotossintéticos e bioquímicos foram indicativos de fotoinibição, possivelmente em virtude de uma deficiência na reciclagem da clorofila em folhas. Isto acarretou em um aumento na exportação de açúcares para frutos, incrementando a concentração de açúcares solúveis nos frutos maduros, que, em contrapartida, resultou na queda nos teores de carotenoides. A queda nestes compostos antioxidantes foi, ao menos parcialmente, compensada por um aumento nos níveis de tocoferóis. Os resultados indicaram que a feofitinase possui um papel além da degradação de clorofila associada à senescência, e que sua manipulação leva ao desenvolvimento de frutos com maior teor de açúcares solúveis e de tocoferóis ao custo da redução no de carotenoides. Desta forma, estas evidências suportam a manipulação da clorofila como estratégia para o melhoramento de frutos carnosos. Para investigar o efeito da senescência sobre a produtividade e qualidade de frutos foi escolhido o fator de transcrição ORESARA1, o qual está amplamente caracterizado em A. thaliana e é considerado um regulador chave no desencadeamento deste processo. A partir de uma extensa análise filogenética e da caracterização de sua regulação, um putativo ortólogo foi selecionado como alvo para silenciamento. Como consequência desta manipulação, folhas apresentaram os níveis de clorofila incrementados. Além disto, taxas fotossintéticas maiores que as do genótipo controle foram mantidas por maior tempo indicando que a iniciação da senescência foi retardada. Assim, estas plantas produziram um maior número de frutos, consequentemente, aumentando o índice de colheita dessas linhagens. Os frutos maduros apresentaram maiores teores de açúcares solúveis e de tocoferóis. Os resultados demostraram que o retardo do início da senescência é uma estratégia efetiva para aumento da produtividade de tomateiro. Coletivamente, os resultados obtidos aprofundam o conhecimento acerta dos impactos da degradação de clorofila e senescência sobre o metabolismo de plantas com frutos carnoso, além de prover estratégias para se incrementar a produtividade e a qualidade nutricional de frutos

O desenvolvimento da agricultura, a modernização dos meios da produção agrícola, buscando atender um mercado exigente em produtos de alta qualidade tem aumentado grandemente os cultivos conduzidos em condições de estufa. Tais culturas, demandam o uso de pesticidas para controle de problemas fitossanitários, cujos resíduos, principalmente em hortaliças e frutas, são motivo de preocupação com a saúde de consumidores e de operários que necessitam trabalhar nessas instalações. Os objetivos deste estudo foram determinar resíduos dos inseticidas acefato, de seu metabólito metamidofós e do fungicida clorotalonil em um sistema de cultura de tomate de estufa, em comparação com cultura de campo, de modo a abranger: estudo do metabolismo de acefato a metamidofós; alteração da contaminação dos resíduos de acefato, metamidofós e de clorotalonil em alguns compartimentos do sistema protegido (fruto, folha e solo); e comparação entre os níveis residuais encontrados nos frutos de cultura de estufa com os limites máximos de resíduos (LMRs) e os intervalos de segurança estabelecidos pela legislação brasileira. Foram conduzidos um experimento de estufa (Piracicaba-SP) e outro de campo (Pereiras-SP), no período de maio-agosto/2002 (outono-inverno), em tudo, muito semelhantes um ao outro. Os tratamentos aplicados foram: a: testemunha; b: uma aplicação de 100 g de Orthene 750 BR (75 g i.a. acefato) + 400 mL de Dacostar 500 (200 g i.a. clorotalonil).100 L -1 de água; c: uma aplicação com o dobro das dosagens dos pesticidas do tratamento b; d: quatro aplicações na dosagem do tratamento b. As amostras foram tomadas nos dias -1, zero, 1, 3, 7, 14 e 21 dias após a última ou única aplicação. O método analítico constou da extração dos resíduos com acetato de etila, limpeza dos extratos por técnica de cromatografia de permeação em gel (GPC), com eluição procedida com uma mistura acetato de etila/ciclohexano. A determinação quantitativa foi feita por técnica de cromatografia em fase gasosa, usando-se detector fotométrico de chama (PFPD) para os resíduos de acefato e de metamidofós e detector de captura de elétrons (µ-ECD, Ni 63 ) para os de clorotalonil. Os limites de quantificação do método (LOQs) para os três pesticidas, em fruto e solo foi de 0,05 mg.kg -1 (ppm); em folhas foi de 0,5 mg.kg -1 (ppm). Foram realizadas 1.512 análises dos três analitos, sendo 252 amostras de cada um dos experimentos. Os resultados indicaram que os resíduos de acefato, metamidofós e de clorotalonil, nos frutos de estufa e de campo, sempre estiveram abaixo dos respectivos LMRs em todo o período de colheita das amostras, inclusive no intervalo de segurança. Mostraram também, que o metabolismo de acefato a metamidofós foi muito baixo nos frutos, particularmente importante nas folhas, mas não bem caracterizado no solo. Ainda, foi observado que os resíduos de acefato e de clorotalonil foram invariavelmente maiores na estufa do que no campo, especialmente em folhas e no solo, sendo, também, estáveis e persistentes, em geral até a amostragem de 7 dias. Particularmente os resíduos de clorotalonil foram os mais persistentes, sendo encontrados nas amostras de 28 dias em níveis significantes, especialmente no solo. / The development of agriculture, the modernization of means of agricultural production, the attempt to supply a demanding market for high quality produce has largely increased the crops carried out in greenhouse environment. Such crops demand the use of pesticides for the control the pest problems, which residues, mainly in fruit and vegetables, are reasons for worries about the health of consumers and workers that need to work in these installations. The objective of this study was to determine residues of the insecticide acephate, of its metabolite methamidophos and the fungicide chlorotalonil in a system of greenhouse tomato crop, in comparison to field crop, as to embrace: study of the metabolism of acephate to methamidophos; alteration of the contamination of residues of acephate, methamidophos and chlorotalonil in some compartments of the protected system (fruit, leaf and soil); and comparison between the residual levels found in the fruit of greenhouse crop with the maximum residue levels (MRL’s) and the safety intervals stablished by the Brazilian legislation. It was carried out a greenhouse experiment (Piracicaba-SP) and another in field conditions (Pereiras-SP), in the period of May-August/2002 (Autumn-Winter), on a whole very similar to each other. The treatments applied were: a: check; b: an application of 100 g of Orthene 750 BR (75 g a.i. acephate) + 400 mL of Dacostar 500 (200 g a.i. chlorotalonil).100 L -1 of water; c: an application with the double dosage of the pesticides applied as treatment b; d: four applications with the dosage of the pesticides applied as treatment b. The samples were taken on the days -1, zero, 1, 3, 7, 14, 21 days after the last or only application. The analytical method included the residue extraction with ethyl acetate, clean-up of the extracts by gel permeation chromatography technique (GPC), with elution proceeded with a mixture of ethyl acetate/cyclohexane. The quantitative determination was done by gas chromatography technique, using flame photometric detector (PFPD) for the residues of acephate and of methamidophos, and electron capture detector (m-ECD, Ni 63 ) for the chlorotalonil. The limits of quantitation (LOQ’s) for the three pesticides, in fruit and soil was 0.05 mg.kg -1 (ppm); and in leaves 0.5 mg.kg -1 (ppm). There were performed 1512 analyses of the three analytis, being 252 samples from each one of the experiments. The results indicated that the residues of acephate, methamidophos and chlorotalonil, in greenhouse and field fruits, have always been below of their respective MRL's in the whole sample collecting period, including the safety intervals. It has shown as well, that the metabolism of acephate to metamidophos was much below in fruit, specially important in leaves, but not well characterized in the soil. It was still observed that the residues of acephate and chlorotalonil were invariable bigger in the greenhouse than in the field, specially in leaves as well as in soil, being also stable and persistent, in general, specially up to 7 day samples. Particularly, the residues of chlorotalonil were the most persistent, being found in the samples of 28 days in significant levels, specially in the soil.