Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental. / Made available in DSpace on 2012-10-21T02:02:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2013-07-16T19:26:04Z : No. of bitstreams: 1 199860.pdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Testes de toxicidade com organismos aquáticos constituem uma ferramenta efetiva para avaliação, predição ou detecção dos efeitos dos poluentes sobre os organismos vivos. Reatores UASB (reator anaeróbio de fluxo ascendente) têm sido utilizados para tratamento de efluentes e de lixiviados provenientes de outros sistemas de tratamento. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência de um reator experimental do tipo UASB no tratamento de lixiviado, por meio de testes de toxicidade aguda com Daphnia magna. Foram realizadas 16 coletas de efluente ao longo de 6 meses, antes e após o tratamento no reator. Para um melhor entendimento dos possíveis compostos que estão causando a toxicidade do meio foi utilizado o procedimento de Avaliação para Identificação da Toxicidade (AIT). O acompanhamento da toxicidade dos efluentes antes e após o tratamento no reator UASB permitiu detectar alterações provenientes da própria operação do sistema de tratamento. Os resultados indicam que o tratamento de efluentes neste tipo de reator pode reduzir a toxicidade das amostras em até 80%. Contudo, os baixos valores de CE50 encontrados nos testes demonstram a presença de alta toxicidade para todas as amostras. A fase I do AIT demonstrou que os grupos de contaminantes suspeitos são iguais para o afluente e para o efluente, sendo que os prováveis causadores da toxicidade sejam os compostos orgânicos apolares, metais catiônicos e principalmente os sólidos totais dissolvidos. Esforços devem ser direcionados para aumentar a eficiência deste reator, melhorando ainda mais a qualidade dos efluentes tratados neste sistema.

Orientadora : Profª. Drª. Josiane de Fátima Gaspari Dias / Coorientadora : Profª. Drª. Marilis Dallarmi Miguel / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 05/08/2016 / Inclui referências : f. 86-97 / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo: A espécie Ocotea nutans (Nees) Mez, pertencente à família Lauraceae, é encontrada no Paraná sendo endêmica da Floresta Ombrófila Mista. A ausência de trabalhos sobre essa espécie motivou o desenvolvimento desse estudo, que teve por objetivos investigar a composição química desta espécie vegetal verificando suas propriedades biológicas e analisar suas características morfológicas. A caracterização morfológica foi realizada de acordo com metodologia padrão de microscopia ótica e eletrônica. Ocotea nutans apresentou folhas lanceoladas e base cuneada em pecíolo. A lâmina foliar apresenta cutícula lisa em ambas as superfícies, estômato paracítico e mesofilo dorsiventral. Não foi observada a presença de tricomas em Ocotea nutans, característica diferente ao proposto para Lauraceae. Ao realizar a técnica de microscopia foi observada a presença de diversas células secretoras, o que motivou a busca de óleo essencial nesta espécie e sua identificação. Após a identificação do óleo por CG/EM foram encontrados como compostos majoritários o biciclogermacreno e o Dgermacreno, terpenos de mesma origem metabólica. Além do óleo essencial foram utilizados folhas e o caule da espécie para preparo do extrato bruto. Após a obtenção do extrato bruto, este foi fracionado com solventes de polaridade crescente para obter as frações hexano, clorofórmio, acetato de etila e residual. Os extratos e frações obtidos foram submetidos ao ensaio sistemático fitoquímico por CCD elencando os possíveis metabólitos que possam estar presentes na espécie. Os extratos brutos, frações e o óleo essencial foram avaliados em testes de triagem toxicológica in vitro e ao ensaio da atividade antimicrobiana pelo método CIM. Após avaliação dos resultados apresentados nos testes escolhidos foi observado que a espécie Ocotea nutans possui um potencial tóxico. Merecem destaque os extratos brutos, as frações hexano e o óleo essencial por apresentarem potencial tóxico e perspectivas para o uso em outras atividades biológicas. Palavras-chave: Lauraceae. Ocotea. Morfologia vegetal. Óleo essencial. Toxicidade / Abstract: The Ocotea nutans (Nees) Mez, belonging to the Lauraceae family, is found in Paraná being endemic to the Araucaria Forest. The absence of studies on this species motivated the development of this study, in which we aimed to investigate the chemical composition of this plant species checking their biological properties and analyze their morphological characteristics. Morphological characterization was performed according to standard methodology for light and electron microscopy. Ocotea nutans presented lanceolate leaves and cuneate base into the petiole. The blade features smooth cuticle on both surfaces, paracitic stomata and dorsiventral mesophyll. It wasn't observed the presence of trichomes in Ocotea nutans, different characteristic to the proposed Lauraceae. When performing microscopy technique it was observed the presence of several secretory cells, which led to essential oil search in this species and its identification. After identifying the oil by GC/MS were found to majoritarian compounds bicyclogermacrene and D-germacrene, terpenes of same metabolic origin. Addition to the essential oil, leaves and dry stems were used for the preparation of the crude extract. After obtaining the crude extract, this was fractionated by solvents with increasing polarity to obtain fractions hexane, chloroform, ethyl acetate and residual. The extracts obtained fractions were subjected to phytochemical systematic assay CCD listing the possible metabolites which may be present in the species. And the crude extracts, fractions, and the essential oil were evaluated for toxicological screening tests in vitro and testing the antimicrobial activity by the method MIC. After evaluation of the results presented in the chosen testing it was observed that Ocotea nutans species has toxic potential. Worth mentioning the crude extracts, the hexane fractions and essential oil for presenting toxicological potential and prospects for use in other biological activities. Keywords: Lauraceae. Ocotea. Plant morphology. Essential oil. Toxicity

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-30Bitstream added on 2015-04-09T12:47:36Z : No. of bitstreams: 1 000817489.pdf: 1268930 bytes, checksum: 26ee30b87bdf495b35fd877730980728 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O uso de sedimentos formulados em laboratório vem sendo largamente adotado e recomendado por organizações de proteção ambiental e outras entidades internacionais de importância, como U.S.EPA, OECD e ASTM, devido, principalmente, à sua fácil reprodutibilidade por diferentes laboratórios e por ser livre de organismos e contaminantes indesejados no estudo. Visando a representatividade de ambientes lóticos tropicais, este estudo propôs analisar diferentes formulações de sedimento para a aplicação em estudo toxicológico de interferentes endócrinos (IE), sendo eles o 17β-estradiol (E2) e 17α-etinilestradiol (EE2). Foram avaliados os parâmetros oxigênio dissolvido, dureza e pH de 5 formulações de sedimento durante um período de 15 dias e a adaptação da espécie bentônica Hyalella azteca com relação aos parâmetros sobrevivência, crescimento e reprodução. A toxicidade do E2 e EE2, ambos à concentração de 30 ng/L, foi verificada sobre o organismo nectônico Ceriodaphnia dubia, exposto por 8 dias em solução extraída da formulação de sedimento que continha menor quantidade de matéria orgânica, contaminada em laboratório. Os parâmetros avaliados foram sobrevivência e reprodução, sendo utilizados os métodos estatísticos de Kruskal- Wallis, teste t e teste t por bioequivalência. O comportamento químico dos compostos foi analisado quanto ao tempo de degradação em ambiente com sedimento formulado (após 2, 24 e 48 horas de contato) e à capacidade de retenção ao sedimento após 2 horas de contato através de quantificação por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (GC-MS). Os resultados mostraram que os sedimentos formulados contendo menores proporções de matéria orgânica (1 e 3% em massa) tiveram melhor estabilização em relação ao pH e também boa aceitação pela espécie H. azteca. Porém, o ambiente composto pelo mesmo sedimento não foi ideal para testes com C. dubia ... / The use of laboratory-formulated sediments have been widely adopted, and recommended by environmental protection organizations and other international agencies as USEPA, OECD, and ASTM, mainly for easy reproducibility by different laboratories, and for being free of unwanted contaminants and indigenous organisms. Aiming at the representation of tropical lotic environments, different sediment formulations were analyzed for use in toxicology studies of endocrine disruptors (EI), namely 17β-estradiol (E2) and 17α-ethinyl estradiol (EE2). Five different formulations were evaluated regarding dissolved oxygen, water hardness and pH over a period of 15 days, and on the adaptation of the benthic species Hyalella azteca regarding survival, growth, and reproduction parameters. The toxicity of E2 and EE2, both at the concentration of 30 ng/L, was observed in the nektonic organism Ceriodaphnia dubia, exposed to a solution extracted from spiked formulated sediment containing a minor amount of organic matter in a 8-days test. Survivability and reproduction parameters were evaluated using Kruskal-Wallis, t-test and bioequivalence t-test statistical methods. Chemical behavior of the compounds was analyzed regarding environmental degradation time in formulated sediment (after 2, 24, and 48 hours of contact), and sediment retention capacity after 2 hours of contact by quantification by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Results showed that the formulated sediments which contained smaller fractions of organic matter (1% and 3% dry weight) had better stabilization in relation to pH, and good acceptance by the species H. azteca. However, the formulated sediment environment was not ideal for C. dubia, which was therefore replaced by filtered interstitial water for E2 and EE2 tests. There was a statistically significant reduction in the number of newborns when exposed to control sediment and contaminants (Kruskal-Wallis, t-test, and bioequivalence ...

Cádmio (Cd²+) é um metal pesado tóxico para os sistemas biológicos e que pode competir com íons essenciais como Zn²+, Ca²+ e Mg²+ por seus respectivos sistemas de transporte. Em S. cerevisiae, íons Cd²+ podem ser conjugados com GSH formando complexos Cd.[GS]2 - os quais são internalizados no vacúolo pelo transporatador Ycf1p. Neste trabalho, foi feita uma análise comparativa da atuação de Ycf1p na desintoxicação de Cd²+ durante o metabolismo fermentativo e respiratório de S. cerevisiae. Adicionalmente, foi realizada uma investigação sobre a contribuição de transportadores de cálcio (Ca²+) para a tolerância ao Cd²+. Os resultados mostram que, durante o metabolismo respiratório, o mutante ycf1Δ é mais tolerante à Cd²+ e aos oxidantes t-BOOH e H2O2 do que a linhagem selvagem. Esta tolerância possivelmente está relacionada com o maior conteúdo de GSH presente nas células ycf1Δ. Na linhagem selvagem BY4741, a atividade do promotor YCF1 sofre uma queda gradual durante a transição do metabolismo fermentativo para o respiratório e a sua indução em resposta à Cd²+ depende da disponibilidade de GSH. Estes dados indicam que a atividade de Ycf1p pode, direta ou indiretamente, influenciar a homeostase de GSH e que as células de S. cerevisiae devem possuir mecanismos independentes de Ycf1p para conter a toxicidade do Cd²+ em situações nas quais a disponibilidade de GSH esteja comprometida. Neste contexto, os resultados do trabalho mostram também que as ATPases de Ca²+ Pmr1p e Pmc1p podem contribuir para a tolerância ao Cd²+. Na linhagem selvagem BY4741 o tratamento com Cd²+ promove aumento da expressão de PMC1 e este aumento é ainda maior nos mutantes ycf1Δ. O gene PMR1 só é induzido por Cd²+ na ausência do gene YCF1 funcional. Entretanto, no mutante pmr1Δ a expressão basal de YCF1 e PMC1 é maior do que na linhagem selvagem (70% e 200%, respectivamente). Adicionalmente, a ausência de Pmr1p funcional está associada a um acúmulo crescente, tempo dependente, de Cd²+ intracelular. Por outro lado, a linhagem selvagem BY4741 alterna fases de captação e exportação do metal. Os resultados apontam para Pmr1p e Pmc1p como proteínas auxiliares na desintoxicação de Cd²+ em S. cerevisiae, as quais possivelmente são ativadas em situações onde a formação e posterior importação de complexos Cd-[GS]2 por Ycf1p não é adequada ao metabolismo celular. / Cadmium (Cd²+) is a heavy metal highly toxic to biological systems, which can compete with essential ions like Zn²+, Ca²+ e Mg²+ for their respective transport systems. In the yeast S. cerevisiae, Cd²+ can be conjugated with GSH generating complexes of Cd - [GS]2 which, in turn, are removed from the cytosol to the vacuole by specific transmembrane proteins such as the glutathione-conjungated transporter Ycf1p. In this work the role of Ycf1p in Cd²+ detoxification during respiratory metabolism of S. cerevisiae was investigated. In addition, the contribution of Ca²+ transporters for Cd²+ detoxification was analized. The results showed that in respiratory condition the mutant ycf1Δ is more tolerant to Cd²+ and to the oxidants t-BOOH and H2O2 than the wild-type strain. This tolerance is probably related to the high content of GSH present in the ycf1Δ mutant. Expression of the YCF1 promoter in the wild type strain is naturally downregulated after the transition from fermentative to respiratory metabolism (diauxic shift), and its induction in response to Cd²+ is dependent on GSH availability. These data indicate that Ycf1p activity can, in some way, influence GSH intracellular homeostasis. Therefore, yeast cells may have an Ycf1p-independent mechanism to cope with Cd²+ toxicity when GSH availability is compromised. Accordingly, the results of this work point also to the contribution of the Ca²+-ATPases Pmc1p and Pmr1p to Cd²+ detoxification. In the BY4741 wild-type strain, Cd²+ treatment triggers an increase in PMC1 expression, and this increase is even greater in the ycf1Δ mutant strain. The PMR1 gene is induced by Cd²+ only in the absence of the functional YCF1 gene. However, the basal expression of YCF1 and PMC1 is higher in the pmr1Δ mutant than in wild-type cells (70% and 200%, respectively). In addition, the absence of the functional Pmr1p is associated with a crescent, timedependent, Cd²+ uptake by the cells. Unlikely, alternating phases of uptake and export of metal are observed in BY4741 wild-type cells. The results indicate that Pmr1p and Pmc1p can act as accessory proteins for Cd²+ detoxification, which possibly are activated when the formation and subsequent import of Cd-[GS]2 by Ycf1p is not adequate to cellular metabolism.

A fenilcetonuúia (PKU) é uma doença genética de caráter autossômico recessivo causada pela deficiência severa da enzima fenilalanina hidroxilase (PAH), que converte fenilalanina (Phe) em tirosina. O bloqueio desta reação resulta no acúmulo de fenilalanina e de seus metabolitos no plasma e tecidos (1 a 3 mM) e está relacionado com o retardo mental e convulsões apresentados pelos pacientes. A PKU é uma das mais frequentes e estudadas aminoacidopatias, porém a neurofisiopatologia da doença ainda é pouco conhecida. Estudos recentes tanto em pacientes quanto em animais mostraram que o estresse oxidativo pode estar envolvido na fisiopatologia da PKU devido ao acúmulo de metabólitos tóxicos, à excessiva produção de radicais livres e à influência de uma dieta restrita, que é o tratamento indicado para os pacientes fenilcetonúricos mas pode levar à carência de antioxidantes. O ácido lipóico (AL) é considerado um antioxidante ideal, pois interage com outros antioxidantes, induz expressão gênica e reage com espécies reativas específicas. Além disso, o AL pode ser adquirido na própria dieta e passa facilmente a barreira hematoencefálica, e por isso este composto vem sendo estudado no tratamento e prevenção de estresse oxidativo em diversas doenças neurodegenerativas. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar os efeitos do AL sobre a toxicidade da Phe em parâmetros de estresse oxidativo como atividade das enzimas catalase (CAT); superóxido dismutase (SOD); glutationa peroxidase (GSH-Px) e glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH), conteúdo de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS), de tióis totais e de carbonilas formadas. Além disso, avaliar o potencial antioxidante total (TRAP) e a reatividade antioxidante total (TAR), a concentração de glutationa reduzida (GSH), o conteúdo de 2'7'diclorofluoresceína formado (DCF) e a capacidade de eliminar radicais hidroxilas em cérebro de ratos jovens. Para isso foram realizados experimentos com pré-tratamento do AL in vitro e in vivo em um modelo de experimental de PKU. Foi observado que o prétratamento proposto é eficaz para previnir lipoperoxidação, diminuir as defesas antioxidantes enzimáticas e não-enzimáticas, diminuir o coteúdo total de GSH e, ainda, previnir o aumento de radicais gerados pelo acúmulo de Phe no tecido. Mais experimentos precisam ser realizados, porém se os resultados deste trabalho forem observados em pacientes é possível que uma dieta suplementada com AL possa contribuir para o tratamento da PKU. / Phenylketonuria (PKU) is a genetic disease caused by autosomal recessive severe deficiency of phenylalanine hydroxylase (PAH), which converts phenylalanine (Phe) to tyrosine. The blocking of this reaction results in accumulation of phenylalanine and its metabolites in plasma and tissues (1 to 3 mM) and is linked to mental retardation and seizures in affected patients. PKU is one of the most frequent and studied inherited disorder, but the neuropathophysiology of the disease is still poorly known. Recent studies both in patients and in animals have shown that oxidative stress may be involved in the pathophysiology of PKU because of the accumulation of toxic metabolites, the overproduction of free radicals and the influence of a restricted diet, which is indicated for the treatment patients with PKU but may produce antioxidant deficiencies. Lipoic acid (LA) is considered an ideal antioxidant because it interacts with other antioxidants, induces gene expression and reacts with specific reactive species. Moreover, AL can be acquired in the diet and easily cross the blood brain barrier, and so this compound has been studied in the treatment and prevention of oxidative stress in several neurodegenerative diseases. The purpose of this study was to evaluate the effects of LA against the toxicity of Phe on oxidative stress parameters such as the activity of catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px) and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH), and the content of thiobarbituric acid reactive substances (TBA-RS), total thiol and carbonyl formed. Furthermore, to evaluate the total antioxidant potential (TRAP) and total antioxidant reactivity (TAR), the concentration of reduced glutathione (GSH), the content of 2'7'diclorofluorescein formed (DCF) and the ability to eliminate hydroxyl radical. So, experiments were performed with pre-treatment of AL in vitro and in vivo in brain of young rats subjected to a chemically-induced PKU. It was observed that the proposed pre-treatment is effective to prevent the increase of lipoperoxidation, the reduction of enzymatic and non-enzymatic antioxidant defenses (especially GSH), and also to prevent the increase of radicals generated by the accumulation of Phe in the tissue. More experiments need to be made, but if the results observed in this work were also seen in patients it is possible that a diet supplemented with AL may contribute to the current dietary treatment of PKU.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2016. / Submitted by Larissa Nogueira Bello (larissabello@bce.unb.br) on 2016-06-27T13:39:47Z No. of bitstreams: 1 2016_FredericoHillesheimHorst.pdf: 2915734 bytes, checksum: 8743a756aa551871c3f303311b25c566 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2016-06-28T13:56:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_FredericoHillesheimHorst.pdf: 2915734 bytes, checksum: 8743a756aa551871c3f303311b25c566 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-28T13:56:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_FredericoHillesheimHorst.pdf: 2915734 bytes, checksum: 8743a756aa551871c3f303311b25c566 (MD5) / O melanoma é um tipo de câncer de pele que tem origem nos melanócitos. Apesar de somente 0,96% dos novos casos de câncer no Brasil para 2016 serem de melanoma, ele é extremamente agressivo, sendo que possui alto potencial metastático o que leva muitos pacientes aóbito. Uma forma de evitar essa alta mortalidade é a realização de um diagnóstico precoce. Estudos propõem a utilização de substâncias ou partículas fluorescentes para identificar focos de câncer, e entre essas partículas carbon dotstem apresentado um grande potencial de marcação de células cancerosas por apresentarem fluorescência. Tendo em vista essa propriedade de carbon dots, este estudo teve o objetivo de realizar a caracterização fotofísicaeavaliar a toxicidade in vitroe in vivode carbondotsrecobertos com boronato (C-DotB) em camundongos com ou sem melanoma. C-DotB apresentaram absorbância na faixa do ultravioleta (abaixo de 400 nm) e quando excitadas a 360 nm apresentaram pico de emissão em 460 nm. Os testes de toxicidade in vitroforam realizados com as linhagens celulares NIH/3T3 (fibroblasto murino) e B16F10 (melanoma murino). Somente a exposição a 0,1 mg/mL de C-DotB ocasionou morte celular significativa de 60 e 70% de fibroblastos e melanoma, respectivamente. Nos experimentos in vivoforam utilizados 66 camundongos C57BL/6. Nas avaliações do peso corporal, da ração consumida e da ingestão de água por animais sem tumor e com a aplicação de C-DotB não mostraram diferenças significativas quando comparados com animais que não receberam o nanomaterial, em um períodode 30 dias. Os exames hematológicosrealizados após 2 e 30 dias da aplicação de C-DotB, mostraram que C-DotB causouum leve aumento na quantidade de células do sistema imunedos animais que receberam C-DotB na concentração de 0,31 mg/mL e que foram monitorados por 30 dias. Os exames bioquímicos mostraram que só ocorreu aumento significativona fosfatase alcalina dos animais que receberam C-DotB na concentração de 0,16 mg/mL e monitorados por 30 dias, o qual pode estar relacionado com algum problema ósseo. As imagens obtidas das lâminas coradas com hematoxilina e eosina mostraram modificações em alguns órgãos, principalmente no pulmão onde é possível ver focos de fibrose e alvéolos coalescidos. No fígado foram encontrados focos de necrose e de inflamação. A única alteração encontrada no baço foi hiperplasia da polpa branca. Tanto no cérebro quanto nos rins não foram encontradas anormalidades. Nos tumores foi possível observado necrose e focos inflamatórios. Para observara deposição de C-DotB nos tecidos analisados, as lâminas histológicas foram analisadas em microscopia de fluorescência. Contudo, não foi possível observar nenhuma fluorescência de C-DotB, provavelmente por não ter mais partícula no animal no momento da coleta do órgão (2 e 30 dias). Com base nesses dados, C-DotB pode ser utilizado na biomedicina por ser biocompatível, possuir baixa toxicidade e ser eliminado rapidamente pelo organismo. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Melanoma it is a skin cancer, which has its origins in melanocytes. Even though melanoma represents only 0.96% of new cancer cases for 2016 in Brazil, it is extremely aggressive, and because it has a high metastatic potential, it leads many patients to death. One way to avoid this high mortality is achieving an early diagnosis. Studies suggests use substances or fluorescent particles to identify cancer foci. Within these particles, carbon dots has shown a great potential for targeting cancer cells because of its fluorescence. Owing to this propriety of carbon dots, this study has the purpose to perform photophysical characterization, evaluates in vitrotoxicity and biodistribution of carbon dotscovered with boronate (C-DotB) in mices with or without melanoma. C-DotB has absorbance at ultraviolet range (above 400 nm) and emission at 460 nm when excited at 360 nm. In vitro toxicity assays were done with cell lines NIH/3T3 (murine fibroblast) and B16F10 (murine melanoma). Only exposure of 0.1 mg/mL of C-DotB resulted in significant cell death of 40 and 30% of fibroblast and melanoma. For in vivoexperiments, it was used 66 female mice C57BL/6. Body weight, food and water intake evaluations by tumor free mice and that has been applied C-DotB, did not shown significant differences with mice that did not received nanomaterial by a period of 30 days. Hematologic exams shown that C-DotB induce a slight increase in white blood cellsfor animals that received C-DotB (0.31 mg/mL) and monitored for 30 days. Biochemistry assays shown slight increaseonly in alkaline phosphatase of animals that received C-DotB (0.16 mg/mL) and monitored for 30 days, which can be correlated with bone disturbance. Images obtained from histological slices stained by hematoxylin and eosin shown alterations in some organs, mainly in lungs where it is possibly to see fibrosis focus and coalesced alveoli. Inflammatory and necrosis foci could be found at liver. The only alteration found in spleen was whit pulp hyperplasia. There were no abnormalitiesin both brain and kidney. Necrosis and inflammatory focus where found at tumors slices. To confirm C-DotB deposition at the analyzed tissues, histological slices were analyzed by fluorescence microscopy. However, it was not possibly to observe C-DotB fluorescence, probably because there were no more particles in the animals at the time of organ collected (2 and 30 days). Based on this data, C-DotB can be used in biomedicine to be biocompatible, have low toxicity and be cleared rapidly by the body.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-08-07Bitstream added on 2014-06-13T20:10:16Z : No. of bitstreams: 1 souza_tf_me_rcla.pdf: 1237007 bytes, checksum: fe5f2ff0023b2ceaaa9190729308c607 (MD5) / Muitos inseticidas atuam inibindo a ação de neurotransmissores específicos, causando a super atividade dos neurônios, como por exemplo, aqueles ligados ao aprendizado e a memória e, como conseqüência, podem alterar estruturas cerebrais. Atualmente, o inseticida fipronil é muito utilizado como defensivo agrícola, principalmente em culturas como cana-de-açúcar, soja e citrus, sendo que sua pulverização, que visa o controle de insetos-praga, vem causando sérios danos aos insetos não-alvo, como os polinizadores. Embora alguns estudos tenham sido realizados para os efeitos das doses subletais de inseticidas em abelhas A. mellifera, não existe nenhum trabalho documentado sobre esses efeitos para as abelhas africanizadas, híbrido predominante no país. Assim, esse projeto teve como objetivo estabelecer as doses subletais para o inseticida fipronil, administrado oralmente e por contato; os efeitos no comportamento de forrageamento das abelhas; e as possíveis alterações na morfologia do cérebro das abelhas (A. mellifera). Para isso, previamente foi calculado a DL50 oral e por contato, para que posteriormente estabelecesse os valores das doses subletais. Para as abelhas tratadas foram avaliados teste da atividade locomotora durante o forrageamento e de sensibilidade ao alimento, através da metodologia de Resposta e Extensão da Probóscide (REP), que é uma reprodução no que ocorre na interação abelha-planta. Por fim, foram realizados cortes histológicos no cérebro das abelhas tratadas a fim de detectar as possíveis alterações morfológicas destas estruturas e utilizar a técnica de imunohistoquímica para marcar e mapear as regiões cerebrais de atuação do inseticida. Os resultados mostraram-se promissores para as avaliações sobre o efeito de baixas doses do inseticida fipronil para as abelhas africanizadas, embora mais estudos deverão ser realizados e os testes melhores adaptados. / Many pesticides act as an inhibitor of the action of specific neurotransmissors, causing a super activity of neurons, for example, those linked with learning and memory and, as consequence, they can alter cerebral structures. Nowadays, the pesticide fipronil is largely used as an agricultural defense, manly in sugar cane, soy and citrus cultures. Its use that targets the control of plague insects has been causing serious effects on other insects, such as pollinators. Although some studies have been done on the effects of sublethal doses of pesticides on bees Apis mellifera, there are no documented work on those effects on Africanized bees, a hybrid very abundant in this country. Therefore, this project has the objective of establishing the sublethal doses of the pesticide fipronil, administrated orally and by contact; the effects of the foraging behavior of work bees; possible alterations on the brain morphology of Africanized bees (A. mellifera). For that, the oral and by contact DL50 were calculated previously, so that the values of sublethal doses could be established later. For bees treated with sublethal doses of fipronil, tests of dislocation activity during foraging and sensitivity to food were evaluated through the PER methodology, which is a reproduction of what happens in the interaction bee/plant. At last, histological cuts were made in the brains of treated bees to detect possible morphological alterations on these structures and to use the imunehistochemistry technique to mark and map the cerebral regions affected by the pesticide. The results showed themselves very promising for the evaluations of small doses of fipronil pesticide on Africanized bees, although further studies should be made and tests more adapted.

Orientadora: Profª. Drª. Sila Mary Rodrigues Ferreira / Coorientadora: Profª. Drª. Mônica de Caldas Rosa dos Anjos / Dissertação (mestrado)- Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Segurança Alimentar e Nutricional. Defesa: Curitiba, 26/07/2013 / Inclui referências : f. 38-47;68-70;87-89 / Resumo: O fruto Jaracatiá spinosa é utilizados em algumas comunidades, principalmente na alimentação escolar. Ensaios prévios indicaram toxicidade positiva nos testes in vitro para hemólise em sangue de carneiro e Artemia salina, com extrato alcoólico e polpa de jaracatiá. Assim, ensaios in vivo tornam-se relevantes para comprovação da segurança ao consumo. A presente investigação foi realizada para avaliar a segurança dos extratos bruto de frutos de Jaracatiá spinosa in natura (EJIN) e em calda (EJC). Seguindo o protocolo da Organisation of Economic Cooperation and Development (OECD), foram conduzidos experimentos agudo (2000 e 5000 mg/kg) e subcrônico (1250, 2500 e 5000 mg/kg/dia e 5000 mg/kg/dia em grupo satélite) de 28 dias, em camundongos Swiss de machos (n=30) e fêmeas (n= 25). Os animais foram avaliados em parâmetros comportamentais, fisiológicos, ganho/perda de peso, parâmetros bioquímicos e hematológicos. E, após eutanásia, foi realizada a análise macroscópica e histológica dos órgãos, estômago, intestino, fígado, rins, baço e pulmão, e comparados os resultados com grupo controle. Em ensaio agudo obteve-se como resultado dose letal (DL50) de extrato de jaracatiá spinosa em camundongos Swiss superior a 5000 mg/ kg, sugerindo baixa toxicidade oral do fruto. Em ensaio subcrônico foram observados efeitos dose-resposta no aumento do número de bolos fecais, piloereção, aumento no peso relativo do estômago e elevação da contagem do número de plaquetas em ambos os gêneros, dentre outros. Alterações bioquímicas e histológicas também foram observadas, principalmente em estômago, fígado e baço, inclusive em grupo satélite. Modificações que em conjunto com demais achados representam alterações relevantes em animais que consumiram tanto o extrato do fruto in natura quanto em calda. Palavras-chave: Jaracatiá spinosa, toxicológicos, agudo, subcrônico. / Abstract: Considering the use of Jaracatiá fruit by some communities, especially in school meals, and positive toxicity in the in vitro tests for hemolysis on sheep blood and brine shrimp lethality bioassay using alcoholic extract and Jaracatiá pulp. In vitro essays become relevant to prove the safety for consumption. This research was conducted to evaluate the safety of gross extract of Jaracatiá spinosa fruit in natura (EJIN) and syrup fruit (EJS). Following the protocol of the Organization of Economy Cooperation and Development (OECD) were conducted acute experiments (2000 and 5000mg/kg) and subchronic (1250, 2500 and 5000 mg/kg/day to 5000 mg/kg/day satellite group) 28 days in Swiss mice. The animals were evaluated in behavioral and physiological parameters, as the consumption of food and water, weight gain/loss, biochemical and hematological parameters. After the euthanasia, were held macroscopic and histological analysis of organs, stomach, intestine, liver, kidney, spleen and lung, and compared with the control group. In the acute test it was achieved as a result lethal dose (LD50) of Jaractiá Spinosa extract in Swiss mice is higher than 5000 mg/kg, suggesting low oral toxicity of the fruit. In subchronic toxicity test were noticed dose - response effect of increasing the number of fecal boli, piloerection, increase in the relative weight of the stomach and increase the number of platelets count in both gender, among others. Biochemical and histological changes were also observed, especially in the stomach, liver and spleen, including satellite group. Changes that concurrently with other findings represent relevant changes in animals that consumed EJIN and EJC. Keywords: Jaracatiá spinosa, toxicology, acute, subchronic.

Orientador: Maria Teresa Barros Schutz Co-orientadora: Dirnei Seli F.Baroni / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular / Resumo: Ratos das gerações P, F1, F2, foram contaminados com uma solução do herbicida Tordon 0,1% na água de beber. O processo de contaminação pelo Tordon foi efetuado sobre os filhotes, através de suas mães, durante o período de gestação e amamentação. Nas três gerações foram quantificados: a proporção sexual em cada ninhada, número de dias para o nascimento dos filhotes, número de filhotes que morriam após o nascimento em cada ninhada e em cada grupo experimental. Na geração F1 foram quantificados o reflexo de endireitamento, o tempo de abertura palpebral, e o peso corporal, bem como, foram feitos testes comportamentais (movimentação espontânea, teste do "Rota-Rod", teste do "Open-Field", teste do "Plus-Maze" e esquiva ativa). Após todos estes processos, foi feito um estudo histológico a nível de sistema nervoso central e de testículos. Nossos resultados mostraram que a proporção sexual entre os filhotes de mães contaminadas (1 macho : 1 fêmea) é diferente (p<0,05) da proporção observada entre os filhotes do grupo controle (6 machos : 5 fêmeas). As fêmeas contaminadas demoraram mais (p<0,05) para dar cria que as fêmeas do grupo controle. Os animais contaminados nasceram com uma tendência de peso corporal menor, que se manteve até, aproximadamente, os 49 dias de idade. Aos 53 dias de idade o peso corporal destes animais tornou-se maior que os dos controles, permanecendo assim até a idade adulta. O reflexo de endireitamento levou mais tempo para ser adquirido no grupo Tordon, enquanto que o tempo de abertura palpebral é igual nos dois grupos. Nos testes comportamentais, verificamos que a movimentação espontânea aos 40 e aos 90 dias de idade é maior no grupo Tordon, sendo que no grupo controle há um decréscimo e no grupo Tordon um aumento da movimentação espontânea dos 40 para os 90 dias de idade. Por outro lado, no teste do "Rota-Rod" não se observou diferença entre os grupos experimentais. No teste do "Open-Field" os animais contaminados ambularam menos, tiveram um tempo de "freezing" maior, um número de "rearing-up" menor e um tempo de "grooming" maior. Em relação aos parâmetros de defecação e micção, não foram observadas diferenças. No teste de "Plus-Maze", os parâmetros %TA e T/NEA foram maiores no grupo Tordon. No teste de esquiva ativa os animais Tordon mostraram tendência a um desempenho maior. Apesar de todos estes resultados, o material histológico corado com H.E e/ou impregnado por prata não apresentou nenhuma alteração morfológica, quer seja a nível de S.N.C. ou a nível de testículos. Assim, devido a todas as alterações comportamentais observadas, podemos inferir que o herbicida Tordon contamina os filhotes através da barreira placentária, hemato-encefáfica e mesmo através do leite na amamentação. Podendo, com isto, causar alterações funcionais irreversíveis no S.N.C. Alterações estas que foram observadas na idade adulta do animal, quando foram feitos os testes comportamentais e não havia contato com o herbicida há, pelo menos, 40 dias. / Abstract: Three generation of rats P, F1, F2 was contaminated with "Tordon" 0,1% solution in water drink. The offspring Tordon contamination was done via their mothers during pregnancy and lactation. At the three generation was quantified the sexual ratio in each progeny; number of days for bird offspring and number of dead offspring in each experimental group. The F1 was used for quantified the time to respond stand upright reflex; eyelid opening time; body weight and behavioral tests (spontaneous movement, "Rota-Rod" time, "Open-Field" test, "Plus-Maze" test and active avoidance) and histological studies of C.N.S and testicles. Our experimental results demonstrated a sexual ratio 1 male : 1 female at the contaminated animal (TA) and 6 males : 5 females in control group (CA); contaminated females had longer gestational period than the control females; the (TA) were born with non significant lower body weight in comparison the (CA). However from 53 days old their average body weight become higher than the mean of non contaminated group; the contaminated rats were able to responsed to the stand upright reflex later than (CA) in spite of eyelid opening time being the same for both groups. At behavioral tests we have found that : Tordon group spontaneous movement rate was higher than the (CA) at 40 and 90 days old with a increasing rate in (TA) and decreasing rate in (CA) between first and second measurement. The results from "Rota-Rod test" were similar to both groups. Contaminated animals at the Open-Fields test, ambulated less, had a higher time of freezing, lower number of rearing-up and a higher time of grooming. Number of boluses and miction equal to control group. Plus-Maze test showed higher TA% and T/NEA for (TA), while active-avoidance test demonstrated a tendency of worse of performance for (TA). In spite of morphological alteration of C.N.S. and testicles were not observed at histological examinations, the behavioral changes found led us to condud that probably Tordon herbicide was able to cross the placentary and hemato-encephalic barrier and were present at the milk, causing irreversible functional alterations at C.N.S. that stayed until adult age when the behavior test occurred.

Made available in DSpace on 2015-09-05T02:05:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000474609-Texto+Completo-0.pdf: 859580 bytes, checksum: cb3a065e3f91d18ed57ee2c9c80a2a6f (MD5) Previous issue date: 2015 / A systematic review was performed on the cytotoxic and genotoxic effects of silver solder alloys in orthodontics. The search was conducted through medical databases, PubMed, EMBASE, Web of Science and Cochrane Library. The search of gray literature included the annals of the meetings of the Brazilian Society for Dental Research (SBPqO) and of the American Association of Orthodontists (AAO). The articles found were submitted to selection criteria and eligibility by two independent blind researchers. Afterwards, a manual search was conducted on articles’s references and study data were extracted by standardized forms. Sixty-four out of 76 articles were excluded because they did not reach the eligibility criteria. The remaining 12 articles and 3 other raised from manual search were included in this study. Two articles found on gray literature were repeated, though excluded. The level of agreement between researchers was adequate in the selection criteria (kappa = 0. 916) and very precise for the eligibility (kappa = 1). As a conclusion of the systematic review, the silver solder alloy may cause cytotoxic, mutagenic and genotoxic effects when applied on orthodontic treatment. / Foi realizada uma revisão sistemática dos efeitos citotóxicos e genotóxicos das ligas de solda de prata em Ortodontia. Para tanto, foi efetuada uma busca sistemática nas bases de dados PubMed, EMBASE, Web of Science e Biblioteca Cochrane. Foi pesquisado na literatura cinza os anais da Sociedade Brasileira de Pesquisa Odontológica (SBPqO) e os encontros anuais da American Association of Orthodontists (AAO). Os artigos encontrados foram submetidos a um critério de seleção e elegibilidade por dois pesquisadores de maneira cega e independente. Após a seleção dos estudos, uma busca manual foi realizada nas referências destes e foram extraídos os dados dos estudos através de fichas padronizadas. Foram encontrados no total 76 artigos. Destes, 64 foram excluídos, pois não preencheram os critérios de elegibilidade. Os 12 estudos remanescentes foram selecionados para o presente trabalho. Além disso, outros três artigos foram incluídos através da busca manual. Dois artigos encontrados na literatura cinza foram excluídos, pois eram repetidos. O nível de concordância entre os pesquisadores na seleção dos estudos foi considerado adequado (kappa=0,916) e para a elegibilidade dos estudos foi muito preciso (kappa=1). Após avaliação dos dados extraídos concluiu-se que ligas de solda de prata podem provocar efeitos citotóxicos, genotóxicos e mutagênicos.