Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-10-31Bitstream added on 2014-06-13T20:40:50Z : No. of bitstreams: 1 ouchi_ry_dr_sjrp.pdf: 1860080 bytes, checksum: 6ea294f1febce43f75eaaecd7bef2497 (MD5) / A cada ano, milhares de novos compostos químicos entram no mercado, e um volume enorme de resíduos é gerado pela atividade humana, existindo uma grande preocupação com relação aos seus efeitos a curto e longo prazo sobre a saúde e o ambiente. Um grande número dessas substâncias químicas é potencialmente perigoso e pode acarretar efeitos biológicos deletérios, sendo que mudanças a nível molecular são usualmente as primeiras respostas detectáveis da perturbação ambiental. Para avaliar os efeitos em sistemas biológicos, são utilizados bioindicadores, organismos sensíveis a agentes tóxicos. O presente trabalho teve por objetivo analisar os efeitos do Brometo de Etídio (BE), substância potencialmente mutagênica, na mosca da fruta (Drosophila melanogaster), realizando-se sempre comparações com o controle positivo, etilmetanosulfonato (EMS). Escolhemos o brometo de etídio por se tratar de uma substância usada frequentemente em métodos de biologia molecular, sendo tida como mutagênica, apesar de não constar como carcinogênico nas listagens da Agência Internacional para Pesquisa de Câncer (IARC). A pesquisa foi feita ao longo de 25 gerações, e em seis gerações (1ª, 5ª, 10ª, 15ª, 20ª, 25ª gerações) foram analisados: (1) os efeitos sobre padrões morfológicos, (2) a produtividade diária ao longo de 15 dias. Além disso, foram analisadas também: (3) alterações bioquímicas em enzimas do sistema oxidativo, acarretadas pela exposição a diferentes concentrações de brometo de etídio e EMS, (4) alterações gênicas: em nível de transposição do elemento transponível Bari-1 e na expressão dos genes que codificam as proteínas catalase, hsp 70 (heat shock protein), superóxido dismutase... / Each year thousands of new chemicals enter the market, and an enormous volume of waste is generated by human activity. Accordingly, there is a great concern regarding their short and long term health and environmental effects. A large number of these chemicals is potentially dangerous and can cause harmful biological effects, and changes at the molecular level are usually the first detectable responses of environmental disturbance. To evaluate the effects on biological systems, are used bioindicators, organisms sensitive to toxic agents. This study aimed to analyze the effects of Ethidium Bromide (EB), a potentially mutagenic substance, in the fruit fly (Drosophila melanogaster), comparing with a positive control, ethylmethanesulfonate (EMS). We chose ethidium bromide because it is a chemical frequently used in molecular biology techniques, and considered as a mutagenic although it is not included in the lists of the International Agency for Research on Cancer (IARC). The survey was conducted over 25 generations, and in six generations (1st, 5th, 10th, 15th, 20th, 25th generations) were analyzed: (1) the effects on morphological patterns, (2) the daily productivity over 15 days. In addition, we also analyzed: (3) biochemical changes in enzymes of the oxidative system brought about by exposure to different concentrations of ethidium bromide and EMS, (4) genetic alterations: level of transposition of the transposable element Bari-1 and expression genes that encode proteins catalase, hsp 70 (heat shock protein), superoxide dismutase 1 and esterase-6 and (5) longevity. Concerning daily productivity, five replicates were done, involving negative and positive controls (not exposed to any mutagen and with EMS, respectively), and three groups exposed to 1, 5 and 30 µM of EB. The results show that there were... (Complete abstract click electronic access below)

Doutoramento em Ciências Farmacêuticas / PhD in Pharmaceutical Sciences

Doutoramento em Toxicologia / PhD Degree - Toxicology

Doutoramento em Toxicologia / PhD Degree - Toxicology

Doutoramento / PhD Degree / The immune evasion mechanisms of pathogenic trypanosomatids involve a multitude of phenomena such as the polyclonal activation of lymphocytes, cytokine modulation and the enhanced detoxification of oxygen reactive species. A trypanothione-cascade seems to be involved in the detoxification process. We have recently described and characterized a tryparedoxin (LiTXN1) involved in the Leishmania infantum cytoplasmatic hydroperoxide metabolism. LiTXN1 is a secreted protein upregulated in the infectious form of the parasite, suggesting that it can play an important role during infection. In the present study, we investigated whether the recombinant LiTXN1 (rLiTXN1) would affect T and B cell functions in a murine model. We observed a significant increase of CD69 surface marker on the B-cell population in total spleen and on isolated B-cells from BALB/c mice after in vitro rLiTXN1 stimulus. Activated Bcells underwent further proliferation, as measured by an increased [3H]-thymidine incorporation. Cytokine quantification showed a dose-dependent upregulation of IL-10 secretion. B-cells were identified as a source. Furthermore, intraperitoneal injection of rLiTXN1 into BALB/c mice triggered the production of elevated levels of rLiTXN1 specific antibodies, predominantly of the IgM, IgG1 and IgG3 isotypes, with a minimum reactivity against other heterologous antigens. Taken together, our data suggest that rLiTXN1 could participate in the immunopathological processes by targeting the B-cells effector functions with subsequent IL-10 secretion and specific antibodies production.

Doutoramento em Toxicologia / PhD Degree - Toxicology

Orientador: Kunie Iabuki Rabello Coelho / Resumo: A matriz extracelular hepática (MEC) é atualmente alvo de diversos estudos em modelos de intoxicação experimental e lesões hepáticas crônicas, devido ao seu papel relevante nesses processos. Na espécie bovina, não existem estudos sobre os componentes da MEC hepática normal e nas lesões crônicas os enfoques têm sido os hepatócitos, com apresentações descritivas das alterações da matriz. Por esse motivo propusemos um modelo iniciando com estudo de fígados normais (controle) obtidos dos animais antes do início da intoxicaçãp experimental por Senecio brasiliensis. Esta planta contém alcalóides pirrolizidínicos (APs), que são substâncias causadoras de lesão hepática crônica progressiva. Este trabalho tem como principais objetivos fazer uma avaliação semi-quantitativa e quantitativa de componentes da MEC de fígado normal e de suas alterações durante a progressão da lesão hepática por intoxicação crônica por APs na espécie bovina. Foram usados 5 animais, intoxicados com folhas dessecadas de S. brasiliensis na dose de 0,38g/kg de peso corporal diariamente durante 24 dias. O experimento teve duração de 60 dias e foi dividido em 5 momentos (M1= controle; M2=15 dias; M3= 30 dias; M4=45 dias e M5=60 dias), nos quais os animais foram submetidos a biópsias hepáticas e colheita de sangue para exames bioquímicos. As biópsias hepáticas foram processadas para MO, Imuno-histoquímica e MET. Como foram observados sinais clínicos digestivos no início da 3a semana suspendeu-se a administração da planta aos 24 dias. Mesmo assim as lesões foram progressivas, com morte de um animal aos 45 dias. A partir de M2 havia alterações degenerativas, necrose, apoptose e megalocitose de hepatócitos associadas à fibrose portal, centrolobular e pericelular. Foi feita morfometria por análise de imagem para colágeno total com... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Extracellular matrix (ECM) has been studied on chronic hepatic lesions of experimental intoxication models due to its relevant role in this pathologic process. Nevertheless there are no specific studies on ECM in normal or chronically damaged bovine liver. Hepatocellular damage has been more important center of attention in chronic bovine liver damage and ECM has been simply described. Because of this fact we decided to present a bovine model starting with detailed study of normal (control) liver biopsy taken from animals before experimental intoxication by Senecio brasiliensis. This plant contains pyrrolizidine alkaloids (PA) that causes acute or chronic progressive liver damage. The main objetive of this project is to do quantitative and / or semi-quantitative measurement of specific components of normal liver ECM and its change during progressive liver damage when bovines are submitted to chronic PA intoxication. Five animals received 0,38g of dry leaf of S. brasiliensis per Kg of body weight orally per day during 24 days. All but one animal were evaluated up to 60 th day. Liver biopsy and blood samples were collected on 5 moments (M1= controle; M = 15th day; M3 = 30th day; M4=45th day and M5=60th day). Biopsy samples were processed for light microscopy, immuno-histochemistry and transmission electron microscopy (TEM) at the begining of the 3rd week some clinical signs indicated digestive complications and we stoped giving toxic plant on 24th day of experiment. Liver lesions were progressive even after that day and one animal died on 45th day. From M2 on ligth microscopy showed hepatocellular degenerative changes, necrosis, apoptosis and megalocitosis plus portal, centrilobular and pericellular fibrosis. Morphometric study by analysis of image for total collagen was done using Picrossirius staining and for elastic fiber system was done using... (Complete abstract, click electronic address below) / Doutor

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciencias Agrarias. Inclui apendice / Made available in DSpace on 2012-10-16T04:38:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-08T17:24:19Z : No. of bitstreams: 1 86997.pdf: 1940019 bytes, checksum: d0d074c66e95477ef01bfb8d9a8507e1 (MD5) / Um levantamento sobre a incidência de portadores de Salmonella spp. em 4 cozinhas hospitalares e 4 institucionais no município de Florianópolis-SC, revelou a presença de 6% de indivíduos portadores, para um universo de 100 amostras de fezes analisadas. Dentre os indivíduos pesquisados, 70% deles trabalhavam em cozinhas há 5 anos ou mais e foram os responsáveis por 100% dos casos positivos. Os sorotipos encontrados foram "S. derby", "S typhimurium", "S. agona" e "S. heidelberg". Dos 6 casos encontrados, 5 (83%) foram provenientes de cozinhas hospitalares; sendo que 4 portadores pertenciam a mesma cozinha. Através do perfil de resistência à antibióticos, realizado frente a 6 cepas isoladas, 4 delas foram resistentes a ampicilina, sulfazotrim, netilmicina, carbenicilina e gentamicina; 3 amostras foram resistentes ainda à tobramicina e cefalotina e uma mostrou resistência também à cefoxitina. Comprovou-se estatisticamente, que as condições de higiene apresentadas pelas cozinhas demonstraram correlação direta com o estado de portador.

Nos últimos 50 anos houve uma redução significativa na fertilidade de animais selvagens. Estudos revelam que as alterações morfológicas e fisiológicas sobre os órgãos reprodutivos de animais e também de seres humanos podem ser conseqüência da exposição a contaminantes ambientais. Vários pesticidas presentes no ambiente têm sido apontados como substâncias capazes de afetar o sistema endócrino, incluindo efeitos sobre a reprodução (COLBORN et al., 1993). Inúmeros fatores contribuem para que o Brasil seja um dos maiores consumidores de pesticidas do mundo. E, neste país, os herbicidas são os pesticidas líderes em vendas. O Roundup® é o herbicida mais utilizado, sendo comercializado em preparação contendo 36% de glifosato e 18% de polioxietilenamida (POEA) (ANVISA, 2002a e 2002b). Estudos de toxicidade reprodutiva realizados com o glifosato técnico referem a possibilidade de efeito sobre o sistema reprodutivo (WHO, 1994). Entretanto a literatura carece de estudos sobre os efeitos do POEA e dos produtos comerciais que o contém associado ao glifosato (DALLEGRAVE, 2002). Sendo assim, o presente trabalho objetivou verificar a influência do herbicida glifosato-Roundup® sobre a fertilidade e o desenvolvimento de ratos Wistar e a possibilidade deste desregular o sistema endócrino. Foram avaliados os efeitos do herbicida glifosato Roundup (lote BS 1096/98) sobre a reprodução de ratos Wistar, incluindo os efeitos teratogênicos (segmento II), sobre fertilidade e performance reprodutiva de machos e fêmeas (segmento I) e sobre animais expostos pré e perinatalmente (segmento III). As concentrações desejadas foram elaboradas mediante adição de água destilada. As progenitoras do ensaio de teratogenicidade foram tratadas, por via oral, com 500, 750 ou 1000mg/kg de glifosato (Roundup) ou água destilada (10ml/kg), do 6° ao 15° dia de gestação. Os animais da geração paterna (segmento I) foram tratados diariamente, por via oral, com 50, 150 ou 450mg/kg de glifosato (Roundup) ou água destilada (10ml/kg). Os machos foram tratados por 70 dias no pré-acasalamento e por 15 dias consecutivos na fase de acasalamento. As fêmeas foram tratadas por 15 dias no pré-acasalamento, de 1 a 15 dias na fase de acasalamento, por 21 a 23 dias durante a gestação, e aquelas que foram deixadas parir, por mais 21 dias referente ao período de lactação. A segunda geração (segmento III) foi exposta apenas durante a gestação e a lactação (fêmeas do segmento I). Os resultados do ensaio de teratogênese mostraram sinais de toxicidade materna com 50% de letalidade para as fêmeas tratadas com 1000mg/kg e sinais de retardo de desenvolvimento do esqueleto dos fetos. Os machos da geração paterna mostraram sinais de toxicidade sistêmica, com aumento na massa relativa de fígado e rins, acompanhado de alterações histopatológicas, e de toxicidade reprodutiva, caracterizada por alterações histopatológicas nos testículos, redução na concentração de espermatozóides, na produção diária de espermatozóides, na concentração de testosterona e aumento no percentual de espermatozóides anormais. As fêmeas da geração paterna não apresentaram sinais de toxicidade sistêmica e/ou reprodutiva nas variáveis avaliadas. Os machos expostos durante as fases pré e perinatal manifestaram sinais de toxicidade reprodutiva, caracterizados por alterações histopatológicas nos testículos, como degeneração das espermátides em ambas as fases, aumento no percentual de espermatozóides anormais na puberdade e redução na concentração de espermatozóides na fase adulta. As fêmeas expostas durante as fases pré e perinatal não apresentaram sinais de toxicidade sistêmica e/ou reprodutiva nas variáveis avaliadas, como também a prole das mesmas não manifestou alterações de desenvolvimento ponderal ou geral. Este estudo revelou que o herbicida glifosato-Roundup provocou um retardo no desenvolvimento esquelético dos fetos expostos durante a fase de organogênese. Afetou ainda o sistema reprodutivo masculino de indivíduos tratados na fase adulta e expostos durante as fases pré e perinatal, interferindo nas variáveis de fertilidade masculina em puberdade e fase adulta. Também houve sinais de toxicidade sistêmica nas fêmeas do ensaio de teratogênese (segmento II) e nos machos do ensaio de fertilidade e performance reprodutiva (segmento I), em doses muito inferiores aquelas referidas na literatura (WHO, 1994) para o glifosato grau técnico. Conclui-se que o glifosato-Roundup manifestou maior grau de toxicidade sistêmica, reprodutiva masculina e de desenvolvimento esquelético fetal, do que o referido na literatura para o glifosato grau técnico. E, frente à toxicidade reprodutiva masculina evidenciada neste estudo, pode-se sugerir que o glifosato- Roundup® manifestou efeitos de modulação endócrina e conseqüentemente, potencial desregulador endócrino.

O presente estudo avaliou a segurança de um fitoterápico, constituído de extrato fluído de Gossypium herbaceum (algodoeiro) (Tintura de Algodoeiro Cangeri®), através de estudos de toxicidade subcrônica, tendo como base a resolução Nº 90, de 16 de março de 2004 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). O objetivo era verificar se o presente fitoterápico causava toxicidade sistêmica de doses repetidas em ratos Wistar. Para o teste de toxicidades repetidas constituiu-se quatro grupos de ratos Wistar, cada um composto por 10 machos e dez fêmeas, tratados por via oral (gavagem) com 0,4ml.kg-1, 2ml.kg-1e 4ml.kg-1, respectivamente a dose terapêutica indicada pelo fabricante para seres humanos adultos, 5 vezes e 10 vezes a dose terapêutica, além de um grupo controle, que recebeu o veículo do fitoterápico. Os resultados revelaram que os animais tratados com a dose terapêutica não mostraram alterações sistêmicas que indique toxicidade. As alterações observadas nas variáveis de ganho de massa corporal, dados hematológicos e de bioquímica sangüínea nos grupos tratados com as doses 5 e 10 vezes a dose terapêutica revelaram a ocorrência de toxicidade sistêmica, agravada com a elevação da mesma. / The phytoterapic constituted by Gossypium herbaceaum (cotton plant) (Tintura de Algodoeiro Cangeri®) was investigated from the potential of toxicological effects when orally administered to male and female Wistar rats for 30 days. The studies were based in the resolution n. 90, March 16th, 2004 from National Agency of Sanitary Vigilance (ANVISA). The aim of the study was watch if daily doses of the fitoterapic would became in to systemic toxicity. Four experimental groups were formed (10 animals/sex/dose) receiving daily doses of 0.4ml, 2ml and 4ml.kg-1 respectively the therapeutic dose recommended by the producer for adult humans, 5 times and 10 times the therapeutic dose, besides a control group treated with the phytotherapic vehicle. The results revealed the absence of systemic toxicity with the therapeutic dose. The alterations observed in the weight gain, hematological values and biochemical blood analyses in the doses equivalent to 5 and 10 times the therapeutic doses revealed systemic toxicity, in a dose related manner.