Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2003. / Härtill 4 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Uppsala : Univ., 2003. / Härtill 5 uppsatser.

Thesis (Ph.D. in Immunology) -- University of Colorado, 2005. / Typescript. Includes bibliographical references (leaves 133-151). Free to UCDHSC affiliates. Online version available via ProQuest Digital Dissertations;

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-07-21Bitstream added on 2014-06-13T20:44:59Z : No. of bitstreams: 1 bonfante_s_dr_araca.pdf: 1718096 bytes, checksum: f842700dfddf9a4f0edab9314172252a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo do presente estudo foi avaliar histológica e histometricamente o padrão de cicatrização de defeitos de deiscência periodontal tratados com enxerto de tecido conjuntivo subepitelial (ETC) ou matriz dérmica acelular (MDA), cada qual comparado ao tratamento com Retalho posicionado Coronal (RPC). Foram utilizados 10 cães, divididos em dois grupo de 5. Defeitos de deiscência óssea (6x8 mm) foram criados nos caninos superiores e os grupos divididos seguindo um modelo de boca dividida de acordo com o tratamento. Em um grupo de 5 cães foi realizado o tratamento com ETC e no lado contralateral RPC e o outro grupo de 5 cães foi tratado com MDA e RPC no lado contralateral. Após 3 meses pós-operatórios os animais foram submetidos à eutanásia e os blocos processados para análise histológica e histométrica. Os parâmetros histométricos avaliados incluíram extensão de tecido epitelial (TE), nova inserção (NITC) e aposição de tecido conjuntivo (ATC), novo cemento (NC) e novo osso (NO). Os dados histométricos transformados em porcentagem, foram estatisticamente analisados pelo teste ANOVA, seguido pelo teste de Tukey... / The aim of the present study was to evaluate histologically and histometrically the healing pattern of periodontal dehiscence defects treated with Subepithelial Connective Tissue Graft (CTG) or Acellular Dermal Matrix (ADM), when compared to the Coronally Positioned Flap (CPF). Dehiscence bone defects (6x8mm) were created bilaterally in the maxillary canine area of dogs (n=10, divided in 2 groups). By means of a split mouth test design, a group of 5 dogs was randomly allocated to receive subepithelial connective tissue graft (CTG) in one of the sides and a coronally positioned flap (CPF) in the opposing side. The remaining 5 dogs had acellular dermal matrix graft (ADM) as a treatment in either one of the sides and CPF on the other side. Three months after surgery, dogs were euthanized and blocks of interest were processed. The histometric parameters for the latter included lenght of epithelial tissue (ET), new attachment (NACT) and connective tissue aposition (CTA), new cementum (NC), and new bone (NB). Histometric data were converted to percentage and statistically analyzed by ANOVA followed by Tukey test at a p<0.05. No significant difference was detected in the following parameters for both groups: ET yielding... (Complete abstract click electronic access below)

Considerando as diferentes aplicações clínicas dos enxertos ósseos nas reconstruções alveolares e a dificuldade de se obter ganhos ósseos em altura, o presente estudo avaliou do ponto de vista histológico a integração do enxerto autógeno (AU), do aloenxerto ósseo liofilizado desmineralizado (ALD), do aloenxerto ósseo congelado mineralizado (ACM) e do coágulo sanguíneo (CO) em um modelo de regeneração óssea vertical. Foram utilizados nove coelhos, sendo um animal doador primário de enxertos ósseos e oito animais submetidos a um modelo de regeneração óssea guiada (ROG), onde 32 cilindros de titânio foram fixados na calota craniana e preenchidos aleatoriamente com AU, ALD, ACM e CO. Após 13 semanas, os animais sofreram eutanásia e o conteúdo dos cilindros submetido à avaliação histológica e histomorfometrica para quantificar a área total de tecido neoformado (AT), o osso neoformado (ON) e o remanescente do material enxertado (MR). Os dados foram submetidos aos testes t-Student e Mann-Whitney com nível de significância de 5%. Os resultados mostraram que em relação à AT os valores médios foram significantes para ACM e ALD e seguiram a seguinte relação: ACM = ALD > AU > CO. Para a variável neoformação óssea as intervenções ALD e ACM mostraram maior quantidade de tecido ósseo formado do que as que empregaram osso autógeno ou coágulo. Já em relação à MR, a média da variável obedeceu à relação: ACM > ALD = AU = CO (valores-p < 5%). Todas as intervenções apresentaram médias mais significativas de crescimento tecidual nas regiões mais próximas ao leito receptor. Foi possível concluir que os aloenxertos podem ser considerados soluções adequadas para o crescimento ósseo vertical. / Regarding different clinical applications for bone grafts in alveolar reconstructions and difficulties on achieving vertical osseous increase the present study performed a comparative histological evaluation of demineralized freeze-dried bone allograft (DFDBA), of fresh frozen bone allograft (FFBA), autogenous graft (AU) and blood clot (CO) on vertical guided bone regeneration (GBR) in rabbit calvarium. Nine rabbits were used, with one as the primary bone graft donor and eight that were subjected to a model of GBR, whereby 32 titanium cylinders were fixed to the calvaria and randomly filled with DFDBA, FFBA, AU, or CO. The animals were sacrificed 13 weeks later, and the content of the cylinders was subjected to hitomorphological and histomorphometric analysis to quantify the total area of neoformed tissue (AT), the new bone tissue (NB) and residual graft particles (RG). The results showed that mean values for AT were significant to DFDBA and FFBA and followed the relation DFDBA = FFBA > AU > CO. Considering new bone formation DFDBA and FFBA showed better results than the AU and CO. The amount of residual bone particles was larger in the DFDBA and followed the relation FFBA > DFDBA = AU = CO (pvalues < 5%). All interventions showed greater new tissue formation nearby the receptor site. It was possible to conclude that allografts DFDBA and FFBA can be considered good strategies for new bone formation in vertical increasing bone.

Orientador: Carmino Antonio de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-14T17:03:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Boer_CamilaCominato_M.pdf: 2207695 bytes, checksum: 7b3343dfad702a44b23f1b6171662f86 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Pacientes submetidos ao transplante de células precursoras hematopoéticas (TCPH) apresentam queixas freqüentes de alterações ou perda do paladar e redução do fluxo salivar. O objetivo do estudo foi avaliar a percepção do paladar e sua associação com as condições orais de 61 pacientes adultos, submetidos ao TCPH na Unidade de TMO/Unicamp. Os pacientes foram divididos em três grupos, considerando o tempo pós-TCPH. Grupo I- n= 20) composto por pacientes com até 150 dias pós-TCPH, Grupo II-(n=20), entre 150 e 1094 dias, e Grupo III-(n= 21), acima de 1094 dias. No exame clínico oral foram coletados dados de saúde oral, Índices de CPOD (dentes cariados perdidos e obturados), IG (Índice Gengival) e IP (Índice de Placa), pelo ambulatório de Odontologia. A avaliação subjetiva de paladar foi realizada por meio de questionário, enquanto que a avaliação objetiva utilizou 5 ml de soluções líquidas de NaCl, sacarose, ácido cítrico, cafeína, em três diferentes concentrações cada. O estudo da saliva foi feito por avaliação clinica e pela coleta da saliva não estimulada. Os dados foram submetidos à análise estatística descritiva e testes paramétricos e não paramétricos. Dos 61 pacientes avaliados, 31 apresentaram DECHc (Doença do enxerto contra o hospedeiro) sendo que a DECHc oral ocorreu principalmente nos grupos II/III. A mediana do CPOD foi de 22±7,94 enquanto que o do IP e do IG foi de 1,0±0,63 e 0,75±0,50, respectivamente. 43/61 (89,58%) pacientes faziam uso de drogas relacionadas às alterações de paladar, em maior número para o grupo I. A avaliação subjetiva do paladar mostrou que 15 (24,6%) pacientes estavam com paladar mais sensível, e 22 (36,1%), menos sensível após o TCPH. Essas alterações de sensibilidade do paladar estavam associadas à presença de náusea (p= 0,03), alteração de olfato (p= 0,05), sensação de gosto anormal na boca (p= 0,03) e ao uso de medicações (p= 0,03). A avaliação objetiva do paladar mostrou que não houve diferença entre os grupos para a percepção dos sabores amargo e azedo. Os 3 grupos tiveram dificuldade para a discriminação do sabor da concentração fraca de cafeína e grupo I apresentou melhor percepção da intensidade fraca e forte da sacarose (p= 0,04 e p= 0,05). Para a concentração forte da sacarose e média da NaCl, os grupos II e III tiveram melhor percepção destas soluções (p= 0,08). Na avaliação salivar 42 (68,9%) pacientes apresentaram aderência da espátula de madeira à mucosa jugal, 35 (57,4%) ausência de lago salivar sublingual, 26 (42,6%) espessamento salivar e 26 (42,6%) ausência de secreção salivar à estimulação manual dos ductos das parótidas. Estas condições foram correlacionadas com a presença de DECHc oral e xerostomia (p=0,02). O fluxo salivar estava diminuído em 10 (16,4%) pacientes (0.01-1.35- SD 0.296), e hiposalivação foi mais intensa nos grupos II/III (p=0,007). Os resultados indicaram que as alterações de paladar foram observadas somente para os sabores: doce e salgado, nos pacientes com até 3 anos após TCPH. Não foi encontrado correlação dessas alterações com a condição da saúde oral, DECHc oral, hiposalivação. Portanto, as alterações de paladar podem ser consideradas como uma resposta individual do paciente ao TCPH. Palavras chaves: transplante alogênico, percepção do paladar, saliva. forte da sacarose e média da NaCl, os grupos II e III tiveram melhor percepção destas soluções (p= 0,08). Na avaliação salivar 42 (68,9%) pacientes apresentaram aderência da espátula de madeira à mucosa jugal, 35 (57,4%) ausência de lago salivar sublingual, 26 (42,6%) espessamento salivar e 26 (42,6%) ausência de secreção salivar à estimulação manual dos ductos das parótidas. Estas condições foram correlacionadas com a presença de DECHc oral e xerostomia (p=0,02). O fluxo salivar estava diminuído em 10 (16,4%) pacientes (0.01-1.35- SD 0.296), e hiposalivação foi mais intensa nos grupos II/III (p=0,007). Os resultados indicaram que as alterações de paladar foram observadas somente para os sabores: doce e salgado, nos pacientes com até 3 anos após TCPH. Não foi encontrado correlação dessas alterações com a condição da saúde oral, DECHc oral, hiposalivação. Portanto, as alterações de paladar podem ser consideradas como uma resposta individual do paciente ao TCPH. / Abstract: Patients submitted to allogeneic Hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) complain of loss or a change in taste perception and dry mouth. The aim of this study was to evaluate taste perception and salivary flow rate in three different groups of adults patients submitted to HSCT at the BMT Unit/UNICAMP. Patients were classified in three groups considering post-transplant timing. Group I (n= 20), up to 150 days after HSCT, Group II (n= 20), between 151-1094 days, and Group III (n= 21), above 1094 days. Taste acuity was measured with a questionnaire, and also by the taste thresholds for the four basic tastes using 5ml of 4 solutions, in 3 concentrations NaCl, sucrose, citric acid, caffeine. Hyposalivation was clinically evaluated by visual parameters, and, unstimulated saliva was collected. Statistical analysis was performed using parametric and non-parametric tests. From those 61 evaluated patients, 31 presented cGVHD (Graft Versus Host Disease) and oral cGVHD was more presented in Groups II/III. Oral health Results showed a median value of DMFT index was 22±7.94 and the median value of IP and IG indexes were respectively, 1.0±0.63 e 0.75±0.50. From the 61 patients 43 (89.58%), were regularly taking prescribed medications with a recognized influence on taste perception, especially those from grupo I. At the survey, 15 (24.6%) reported a subjective increase of taste perception, whereas 22 patients (36.1%), described a decrease in taste perception after HSCT. Those taste sensitivity's alterations were correlated to the presence of nausea (p= 0.03), changes in olfaction (p= 0.05), abnormal taste in oral cavity (p= 0.03) and to the use of drugs (p= 0.03). Results of taste thresholds showed that the sour and bitter perception was not different between the 3 groups. For the sweet solution, the high and low concentrations were a challenging to be determined for those patients. Perception for a medium concentration of salty solutions was better perceived by groups II and III (p= 0.08). None patients were sensitive for the low concentration of bitter solution (p=0.05), in any period of study. Salivary clinical evaluation showed that, 42 (68.9%) patients presented adherence of a wood spatula to the buccal mucosa, 35 (57.4%) absence of the sublingual lake, 26 (42.6%) mucous saliva and 26 (42.6%) lack of salivation on palpation of the Parotid's ducts. Those conditions were correlated to oral cGVHD and to the patients complain of xerostomia (p= 0.02). The saliva flow rate was diminished in 10/61 patients in all periods (1.36 (0.01-1.35- SD 0.296) and hyposalivation was more intense in the Groups II/III (p= 0.007). The results indicate that, taste alterations were only observed for the sweet and salty tastes even in patients up to 3 years post-HSCT. These results may indicate that taste alterations post-HSCT are not correlated to oral health, cGVHD and to hyposalivation but may be considered as an individual response of the HSCT. / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

O tratamento das lesões condrais e osteocondrais do joelho em pacientes jovens ainda permanece um desafio para os médicos ortopedistas. As técnicas de reparo destas lesões atualmente disponíveis no Brasil, como desbridamento, microfraturas e transplante osteocondral autólogo são insuficientes nos tratamentos das lesões condrais e osteocondrais maiores do que 4 cm2. O transplante osteocondral homólogo a fresco (TOF) na articulação do joelho vem sendo usado em outros países com excelentes resultados. Até o presente momento não existem relatos da utilização desta técnica no Brasil, fato que dificulta o tratamento de pacientes jovens ativos que necessitam de reparo biológico. Foram incluídos neste estudo oito pacientes de 15 a 45 anos portadores de lesões osteocondrais maiores que 4 cm2. Os enxertos a fresco foram obtidos de doadores de órgãos, sendo a articulação do joelho captada sem violação da cápsula articular e transportada ao Banco de Tecidos para processamento. O pareamento doador e receptor foi realizado conforme o tamanho, a localização e a prioridade em lista de espera de acordo com os tecidos captados, sendo os mesmos armazenados no meio de preservação Ham F-12 - GIBCO com glutamax (Invitrogen, Life Technologies, Estados Unidos) e com antibióticos. O procedimento cirúrgico foi realizado pelas técnicas de cilindro osteocondral e de superfície, sendo fixados quando necessário. Os pacientes foram avaliados através dos questionários de IKDC objetivo, IKDC subjetivo, KOOS e índice de Merle D\'Aubigne e Postel modificado. Foram realizados oito TOFs de março a outubro de 2012. A média de idade dos pacientes transplantados foi de 30,1 anos (17- 44 anos) e a média da área transplantada foi de 10,6 cm2 (4,6 - 22,4 cm2). O intervalo médio em dias entre captação e transplante foi de 15,3 (14 - 16 dias) e o número médio de cirurgias prévias ao TOF foi de 2 cirurgias (0-4 cirurgias). A pontuação na escala de IKDC objetiva no pré-operatório foi B em 12%, C em 25% e D em 63% dos pacientes; e 12% A e 88% B aos 18 meses de pós-operatório. A média da pontuação da escala IKDC subjetiva pré-operatória foi de 31,99 ± 13,4 e de 81,84 ± 9,25 em 18 meses de pós-operatório, e da escala KOOS pré-operatória foi de 46,8 ± 20,9 e de 89,58 ± 7,06 em 18 meses de pós-operatório, com melhora significativa ao longo do tempo (p < 0,01) pela análise da variância. A média da pontuação pelo índice de Merle D\'Aubigne e Postel modificado foi de 8,75 ± 2,25 no pré-operatório e de 16,75 ± 2,19 em 18 meses de pós-operatório. O resultado do teste de Friedman para amostras não-paramétricas demonstrou melhora significativa ao longo do tempo (p < 0,01). A padronização da captação, processamento e transplante de enxertos osteocondrais a fresco na articulação do joelho depende de um banco de tecidos altamente especializado e leva a excelentes resultados no tratamento de lesões osteocondrais grandes, sendo atualmente uma boa alternativa de tratamento biológico para pacientes jovens no Brasil / Treatment of chondral and osteochondral lesions of the knee in young patients is still a challenge for Orthopedic Surgeons. The techniques available nowadays in Brazil, as debridement, microfracture and autologous osteochondral transplantation are insufficient for the treatment of chondral and osteochondral lesions larger than 4 cm2. Fresh osteochondral allografts on the knee joint have been used in other countries with great success. Until the present days there are no reports of the utilization of this technique in Brazil, a fact that creates boundaries for the treatment of young active patients that need cartilage repair treatment. Eight patients with age ranging from 15 to 45 years old and osteochondral lesions larger than 4 cm2 were included in this study. Fresh grafts were obtained from organ donors and the knee joint was harvest without violation of synovium capsule and then was transported to the tissue bank for processing. Donor and receptor tissue matching occurred according to size, localization and priority on waiting list and tissue was preserved in Ham F-12 - GIBCO media with glutamax (Invitrogen, Life Technologies, United States) and antibiotics. Surgical procedure was achieved with osteochondral plugs or shell techniques, with additional fixation when needed. Patients were evaluated with IKDC objective, IKDC subjective, KOOS and modified Merle D\'Aubigne-Postel outcome scores. Eight fresh osteochondral allografts were performed from march to october, 2012. The average age was 30.1 years old (17-44) and mean graft surface area was 10.6 cm2 (4.6 - 22.4 cm2). Average time from harvest to transplantation was 15.3 days (14-16 days) and mean number of previous surgical procedures was 2 (0 - 4 procedures). Pre-operative objective IKDC score was B in 12%, C in 25% and D in 63% and was A in 12% and B in 88% in 18 months follow-up. Pre-operative IKDC subjective and KOOS score were 31.99 ± 13.4 and 46.8 ± 20.9; and in 18 months follow-up were 81.84 ± 9.25 and 89.58 ± 7.06, respectively, with a significant increase along time on variance analysis (p < 0.01). Pre-operative mean modified Merle D\'Aubigne-Postel scores were 8.75 ± 2.25 and 16.75 ± 2.19 in 18 months follow-up. Non-parametric Friedman test analysis showed a significant progression in follow-up (p < 0.01). Standards of procurement, processing and utilization of fresh osteochondral allografts in the knee joint relay on a high specialized tissue bank and promote excellent results on the treatment of large osteochondral lesions, being a good alternative of a biologic repair for young patients in Brazil

Os substitutos valvares possuem grande importância pela freqüência da sua utilização e porque de seu bom desempenho depende o sucesso do procedimento cirúrgico realizado. Vários substitutos valvares têm sido empregados, todos com complicações inerentes ao material utilizado, como trombose, calcificação, degeneração, dificuldade de esterilização, custo, complexidade de produção, etc. Buscando disponibilizar homoenxertos preservados de maneira mais simples e econômica, avaliamos uma nova forma de preservação utilizando o polietileno-glicol, método L-Hydro. Este método consiste na extração controlada de substâncias antigênicas e de incorporação de um agente antinflamatório e anti-trombótico. Em dez carneiros jovens substituímos o Tronco Pulmonar, em sete por homoenxertos pulmonares tratados pelo processo L-Hydro e em três por homoenxertos pulmonares a fresco, implantados ortotopicamente e seguidos por 320 dias. Os carneiros foram avaliados por exames laboratoriais e ecocardiográficos. Ao cabo dos 320 dias foram sacrificados, quando se procedeu à avaliação hemodinâmica, radiológica, macroscópica e por microscopia óptica e eletrônica, de varredura e transmissão. Os resultados foram analisados pelo teste t de Student de amostras independentes para os dados contínuos, pela análise de variância para as medidas repetidas e pelo teste exato de Fischer para os dados categóricos. Na evolução clínica e nos exames laboratoriais não conseguimos estabelecer diferenças significativas entre os dois grupos. O ecocardiograma revelou diferença quanto ao gradiente médio pulmonar, significativa aos 10 meses de seguimento, maior no grupo controle do que no grupo L-Hydro. A avaliação radiológica e macroscópica não estabeleceu diferenças. Na avaliação microscópica, óptica e eletrônica, células de revestimento e intersticiais foram encontradas nos dois grupos igualmente. O porcentual de revestimento celular calculado nos dois grupos foi semelhante. Nódulos de celularidade foram observados somente no grupo de homoenxertos a fresco. Em conclusão, estes dados indicam que os dois grupos apresentaram desempenho clínico e hemodinâmico semelhante. Ao ecocardiograma o grupo L-Hydro apresentou melhor desempenho; apresentou também evidências histológicas de repopulação celular intersticial e endotelial. Na análise macro e microscópica, óptica e eletrônica, o grupo L-Hydro apresentou macroscopia, estrutura histológica e ultraestrutural semelhante ao homoenxerto afresco, à exceção de nódulos de maior celularidade intersticial, presentes apenas no homoenxerto a fresco / Valve substitutes are highly important in account of their frequent use and since the success of a surgical procedure depends on their good performance. A variety of valve substitutes have been used, all presenting complications pertaining to their materials, such as thrombosis, calcification, degeneration, sterilization difficulties, cost, production complexity, etc. In an effort to make available homografts preserved in a simpler and less costly way, we evaluated a new preservation form using polyethyleneglycol, the LHydro method. This method consists in the controlled extraction of antigenic substances and the incorporation of an anti-inflammatory and anti-thrombotic agent. We substituted the pulmonary trunk in ten ovines, seven received LHydro treated pulmonary homografts and three received pulmonary homografts fresco, orthotopically implanted and followed-up for 320 days. Ovines where evaluated by means of laboratory tests and echocardiographic exams. At the end of the 320 days, they were euthanized, and hemodynamic, radiology, macroscopic, optic and electronic microscopic, scanning and transmission evaluations were performed. Results were analyzed by Student t test of independent samples for continuous data, by variance analysis of repeated measures, and by Fischer exact test for categorical data. We couldnt establish relevant differences in clinical evolution and laboratory tests between both groups. Echocardiogram revealed a difference in the pulmonary medium gradient, which was significant at the 10 months followup, higher in the control group than in the L-Hydro group. Radiologic and macroscopic evaluations didnt established differences. In the optic and electronic microscopic evaluation, liner and interstitial cells were equally found in both groups. The cell liner percent calculated in both groups was similar. Cellularity nodules were observed only in the homograft fresco group. In conclusion, these data indicate that both groups presented similar clinical and hemodynamic performances. The L-Hydro groups echocardiogram presented a better performance. It also presented histological evidences of interstitial and endothelial cell repopulation. In the macro and optic and electronic microscopic analysis, group L-Hydro presented macroscopy, histological structure and ultra-structural similar to the homograft fresco group, with the exception of nodules with higher interstitial cellularity, present only in the homograft fresco group.

Orientadores: Afonso Celso Vigorito, Maria Elvira Pizzigatti Corrêa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-27T23:05:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Boer_CamilaCominato_D.pdf: 4791570 bytes, checksum: ef421fd26cc41a5841f0e57323bce220 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Recentemente, a quantificação do fluxo salivar e dos componentes bioquímicos da saliva, foram considerados possíveis biomarcadores para a patogênese da doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (DECHc) oral em pacientes submetidos ao Transplante de Células Tronco Hematopoiéticas (TCTH). O objetivo deste estudo foi avaliar prospectivamente a composição inorgânica salivar em diferentes períodos do transplante alogênico e no diagnóstico da DECHc e correlacioná-los com as manifestações clínicas orais. A saliva não estimulada foi coletada para determinação de fluxo salivar e das concentrações de cálcio (Ca), fosfato (Pi), cloro (Cl), magnésio (Mg), potássio (K) e sódio (Na), utilizando reações colorimétricas e absorção atómica. Os Índices de saúde bucal, mucosite e DECHc orais foram avaliados por exame clínico odontológico. A hiposalivação foi avaliada por parâmetros visuais e os pacientes responderam a um questionário sobre xerostomia, dor oral e sensibilidade. Foram incluídos no estudo, consecutivamente, 55 pacientes submetidos ao primeiro TCTH alogênico. Destes 55 pacientes, 49 (89%) foram reavaliados entre os dias D+ 8 e D+10 e 6 (11%) pacientes foram a óbito antes desse período. Após a avaliação entre os dias D+ 8 e 10, 2/ 49 (4%) pacientes recaíram, 13/49 (27%) foram a óbito 34/49 (69%) pacientes permaneceram vivos até o final deste estudo. Dos 34 pacientes 28 (82%) foram avaliados entre os dias D+ 80 e D+ 100, sem o diagnóstico de DECHc, e 12/ 34 (35%) pacientes avaliados no momento do diagnóstico da DECHc, com mediana de dias do diagnóstico de 110 (68-412). A avaliação da saúde bucal entre os dias 8 e 10 apresentou mediana do índice gengival (IG) maior quando comparada com os dados do pré-TCTH (p=0,03). Os índices Dentes Cariados, Perdidos e Obturados (CPOD), Índice de Placa (IP) e o (IG) não apresentaram qualquer alterações nos períodos do estudo. De 49 pacientes, 32 (65%) apresentaram mucosite grau 2 a 4 e a frequência foi maior ao condicionamento de altas doses (p=0,03) e nos pacientes mais jovens (p=0,02). Entre os dias 8 e 10 a queixa de dor oral foi maior nos pacientes mais jovens e no condicionamento de altas doses, (p=0,03) e (p=0,02), respectivamente. O fluxo salivar foi significativamente maior entre os dias 8 e 10 (p=0,05) em comparação ao pré-TCTH. O Pi diminuiu entre os dias 8 e 10 dias (p=0,007) e as concentrações de Na e Cl aumentaram entre os dias 8 e 10 (p=0,001 para ambos). O fluxo salivar no mesmo período demonstrou correlação negativa com a concentração de Pi (p=0,02) e positiva com as concentrações de Na e Cl, (p=0.003) e (p=0.001), respectivamente. Pacientes submetidos ao condicionamento de altas doses apresentarem menores concentrações de Pi (p=0,05). Entre os dias 80 e 100, a xerostomia foi mais frequente nos pacientes submetidos ao condicionamento com altas doses, comparada com de baixa dose (p=0,05). O fluxo salivar foi significativamente menor entre os dias 80-100 (p=0,02) em comparação com o pré-TCTH e as concentrações de Na, Cl e K aumentaram entre 80-100 dias (p=0,03), (0,02) e (p=0,003), respectivamente. O fluxo salivar no mesmo período demonstrou correlação negativa com as concentrações de Na e Cl, (p=0.01) e (p=0.013), respectivamente. Pacientes submetidos ao condicionamento de altas doses apresentaram menor concentração de Na (p=0.05), enquanto que os pacientes que receberam condicionamento de baixas doses apresentaram maiores concentrações de Na e Pi (p=0.05),( p=0,04), respectivamente. No momento do diagnostico da DECHc, o fluxo salivar não mostrou diferença estatística significativa entre os períodos do estudo. Foi observada um tendência de maior concentração de Na no diagnóstico da DECHc (p=0,06) e diminuição significativa da concentração de Pi (p=0.004) em comparação com o pré-TCTH. As concentrações de cálcio e magnésio não apresentaram qualquer alteração durante o mesmo período avaliado. O presente estudo mostrou alterações nos componentes salivares inorgânicos em períodos pós-TCTH, principalmente durante a inflamação da cavidade oral, como mucosite e DECHc. Nós podemos especular que o sódio, cloreto, fosfato e, na saliva, pode ser utilizado como um biomarcador potencial de atividade inflamatória oral em estudos posteriores / Abstract: Recent studies have considered the qualitative and quantitative assessment of salivary flow, as well the biochemical components of saliva, as possible biomarkers that might contribute to the pathogenesis of chronic Graft-Versus-host-Disease (cGHVD) in HSCT patients. The aim of this study was to evaluate the inorganic salivary status at different periods of allogeneic HSCT and cGVHD onset, prospectively. Patients were evaluated in pre-HSCT, between the days 8 and 10, 80 and 100 days without cGVHD, and at the onset of oral cGVHD. Oral health indexes, mucositis, and oral cGVHD were prospectively evaluated by oral clinical examination. Hyosalivation was clinically evaluated by visual parameters, and patients answered a questionnaire concerning xerostomia, oral pain and sensitivity. Unstimulated saliva was collected to determine the salivary flow rate and the concentrations of Calcium (Ca), Phosphate (Pi), Chloride (Cl), Magnesium (Mg), Potassium (K), and Sodium (Na) using colorimetric reactions and atomic absorption. Fifty-five consecutive patients undergoing first allogeneic HSCT were included in this study. Forty-nine out of 55 (89%) patients were evaluated between the days 8 and 10, and 6 (11%) had died before the evaluation. After the evaluation between 8 and 10 days, 2 out of 49 (4%) patients relapsed, 13 out of 49 (27%) patients died and thirty-four out of 49 (69%) patients remained alive until the end of the study. Twenty-eight out of 34 (82%) patients were evaluated between days 80 and 100 without cGVHD, and twelve out of 34 (35%) were evaluated at oral cGVHD onset, at a median time of 110 days (68-412). Oral health evaluation between the days 8 and 10 showed a higher median of Gingival Index (GI) compared with baseline data (p=0.03), and the Decayed, Missing and Filled Teeth Index (DMFT) and Plaque Index (PI) presented no statistical difference. Thirty-two out of 49 (65%) patients developed grade 2-4 oral mucositis associated with a high dose conditioning regimen (p=0.03) and younger patients (p=0.02). Between the days 8 and 10 younger patients and those who received high dose conditioning had more oral pain (p=0.03) and (p=0.02), respectively. The salivary flow rate was significant higher compared with the baseline between days 8 and 10 (p=0.05), Pi concentration was decreased, (p=0.007) and Na and Cl were increased (p=0.001), (p=0.001), respectively. The analysis of the salivary flow rate during the same period showed a negative correlation with Pi concentration (p=0.02) and a positive correlation with Na and Cl concentration, (p=0.003) and (p=0.001), respectively. Patients who received a high dose conditioning regimen presented a lower Pi concentration (p=0.05), and regardless of the conditioning regimen, no other biochemical component showed statistical difference. Xerostomia was more frequent between the days 80 and 100 in high dose, compared with reduced dose conditioning (p=0.05). The salivary flow rate was decreased between days 80 and 100 (p=0.02) and Na, Cl and K concentration was increased, (p=0.03), (p=0.02) and (p=0.003), respectively. The analysis of the salivary flow rate during the same period showed a negative correlation with Na and Cl, (p=0.01) and (p=0.013), respectively. Patients who received high dose conditioning regimen presented a lower Na concentration (p=0.05), whereas those who underwent a reduced dose conditioning regimen presented higher Na and Pi concentrations (p=0.05),( p=0,04), respectively. No other statistical difference was detected in the other biochemical components regardless of the conditioning regimen. At cGVHD onset, the salivary flow rate showed no statistical difference compared with the other periods. A trend was observed in the higher Na concentration compared with the baseline (p=0.06) and Pi concentration presented a significant decrease (p=0.004). Ca and Mg concentrations showed no changes during all evaluation periods. The present study showed changes in inorganic salivary components in post-HSCT periods, mainly during oral cavity inflammation, such as mucositis and cGVHD. We speculate that Na, Cl, and Pi in saliva could be used as a potential biomarker for oral inflammatory activity in further studies / Doutorado / Clinica Medica / Doutora em Clínica Médica

A two-element protocol consisting of one donor-specific transfusion (DST) plus a brief course of anti-CD154 mAb greatly prolongs the survival of murine islet, skin, and cardiac allografts. To study the mechanisms involved in the induction of allograft survival, we determined the fate of tracer populations of alloreactive T cell receptor (TcR) transgenic CD8+ T cells circulating in a normal microenvironment. In the first portion of this thesis, we observed that DST plus anti-CD154 mAb prolonged allograft survival and deleted alloreactive TcR transgenic CD8+ T cells. Neither component alone did so. Skin allograft survival was also prolonged in normal recipients treated with anti-CD154 mAb plus a depleting anti-CD8 mAb and in C57BL/6-CD8 knockout mice treated with anti-CD154 mAb monotherapy. We conclude that, in the presence of anti-CD154 mAb, DST leads to an allotolerant state in part by deleting alloreactive CD8+ T cells. Consistent with this conclusion, blockade of CTLA4 and B7-l/2 by CTLA4-Ig, which is known to abrogate the effects of DST and anti-CD154 mAb, prevented the deletion of alloreactive TcR transgenic CD8+ T cells. Also in support of our hypothesis, depletion of CD4+ T cells, which is known to abrogate the effects of DST and anti-CD154 mAb, prevented the deletion of alloreactive TcR transgenic CD8+ T cells. We continued by examining the effects of IFN-γ, IL-10 and IL-4. None of these cytokines had any significant effect on the deletion of alloreactive TcR transgenic CD8+ T cells induced by co-stimulation blockade. The last part of this thesis studied the behavior of alloreactive TcR transgenic CD8+ T cells during the maintenance phase of allograft survival induced by our two-element protocol. Using a hematopoietic TcR transgenic chimera system, our results demonstrated that levels of alloreactive CD8+ T cells remained low throughout the maintenance phase. These results document for the first time that peripheral deletion of alloantigen-specific CD8+ T cells is an important mechanism through which allograft survival can be prolonged by co-stimulatory blockade. We propose a unifying mechanism to explain allograft prolongation by DST and blockade by co-stimulation blockade.