Orientador: Mirela Tinucci Costa / Banca: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Marcos Rogério André / Banca: Noeme Sousa Rocha / Banca: Felipe Augusto Ruiz Sueiro / Resumo: O tumor venéreo transmissível canino (CTVT) é um câncer transmissível que propaga-se, naturalmente, entre os cães pela transferência alogênica de células tumorais, principalmente, durante o coito. Trata-se da mais antiga linhagem tumoral conhecida na natureza e uma de suas características marcantes é a habilidade de se desenvolver e se evadir da rejeição imunológica, como enxerto alogênico, apesar da estrita e contínua vigilância do sistema imunológico. Há a hipótese de que as células do CTVT não expressam MHC-II, como um mecanismo de escape à detecção imune, e que a positividade detectada em muitas amostras tumorais possa ser atribuída à infiltração de células do hospedeiro no sítio do tumor. Objetivou-se avaliar a expressão gênica e proteica e a caracterização genotípica do loco DLADQA-1 (MHC-II) em tumores venéreos transmissíveis de ocorrência espontânea em cães. Adicionalmente, detectar a interação entre anticorpos séricos e antígenos tumorais específicos do CTVT. Para tanto, foram incluídos neste estudo 20 cães provenientes de São José do Rio Preto, São Paulo, Brasil, com CTVT de ocorrência natural. As amostras tumorais foram coletadas antes do tratamento quimioterápico (M1) e três semanas após o início da quimioterapia (M2). A análise de expressão gênica foi realizada pelo método de qPCR e de expressão proteica de CD3, CD79, MAC387, Ki67 e MHC-II, pelo método de imuno-histoquímica. Foi realizado sequenciamento por capilaridade para caracterização genotípica e estudo dos antígenos tumorais pela técnica de Western Blotting. Amostras de CTVT e de seus hospedeiros provenientes de outros países foram empregados para estudos comparativos. Foi observada diferença significativa de células imunomarcadas para MHC-II e CD3 entre M1 e M2 detectando-se maior expressão em M2. Não houve expressão gênica de DLADQA-1 em nenhuma amostra de CTVT em M1 e M2. O elevado grau de... / Abstract: The canine transmissible venereal tumor (CTVT) is a transmissible cancer that is spread between dogs by the allogeneic transfer of living cancer cells during coitus. It is the oldest cancer lineage known in nature and one of the most remarkable features of CTVT is its ability to develop and evade the immune rejection, as an allogeneic graft, despite the strict and continuous surveillance of the immune system. It has been hypothesized that CTVT cells do not express MHC-II as an escape mechanism to immune detection, and MHC-II positivity detected in tumor samples can be attributed to infiltrating host cell at the tumor site. The aims of this study were: evaluate gene and protein expression and genotypic characterization of DLADQA-1 locus (MHC-II) in spontaneous transmissible venereal tumours in dogs. Additionally, to detect the interaction between serum antibodies and specific tumor antigens of CTVT. For this, 20 dogs from São José do Rio Preto, São Paulo, Brazil with naturally occurring CTVT were included and samples were collected before chemotherapy (M1) and three weeks after starting chemotherapy (M2). The gene expression analysis was performed by qPCR method and protein expression of CD3, CD79, MAC387, Ki67 and MHC-II by immunohistochemistry method. Sequencing was performed by capillary method and the study of tumor antigens by the Western Blotting technique. CTVT samples and their hosts from other countries have been used for comparative studies. Significant differences were observed in MHC-II and CD3 immunostained cells between M1 and M2 with higher expression in M2. There was no gene expression of DLADQA-1 in any sample of CTVT in M1 and M2. The genotypic similarity between tumor samples, which differ from their respective hosts, is consistent with a clonal origin of this tumour. There was no significant difference between the genotypes of hosts and control dogs. The detection of two protein bands in different CTVT from Brazil ... / Doutor

Resumo: O tumor venéreo transmissível (TVT) é a segunda neoplasia de maior prevalência nos cães atendidos no Hospital Veterinário de Botucatu. Na associação entre o comportamento biológico do tumor e a clínica desses animais, há fortes diferenças em relação às apresentadas na literatura especializada no assunto. O TVT desperta, no meio científico, o interesse pela sua origem, modo de transmissão e questionável regressão espontânea, fato atribuído ao comportamento versátil desse tumor, diferindo dos mecanismos de outras neoplasias. Investigações têm sugerido fenômenos semelhantes aos que ocorrem nos tumores de outras espécies, inclusive no homem. A quimioterapia para o TVT é a mais indicada. Porém, traz efeitos colaterais extremamente tóxicos às células desses animais. Pesquisadores relatam a propriedade antitumoral in vitro da própolis sobre o grau de agressividade do TVT. Para tal, foram utilizadas células neoplásicas de 77 animais, sem distinção por raça, sexo e idade. Os animais foram provenientes do Hospital Veterinário da FMVZ - UNESP, Campus de Botucatu. As neoplasias foram divididas em três Grupos: TVT linfocitóide; TVT plasmocitóide e TVT misto. Nestas neoplasias, o índice de proliferação celular foi verificado pelo AgNOR e CEC, para auxiliar a averiguar o grau de agressividade do tumor. No final do estudo, foi possível observar que a própolis apresenta atividade antitumoral tempo-dose dependente sobre as células de TVT, incluindo nas do grupo plasmocitóide (considerada a de maior agressividade), onde, após 48 horas e na concentração de 100 æg, a atividade antitumoral é efetiva. Concluímos também que os marcadores de proliferação (AgNOR e CEC) mostram-se eficientes para monitorar a evolução do TVT e que, a avaliação clínica, morfológica e o estudo in vitro auxiliam no diagnóstico, na conduta terapêutica e na monitoração do TVT. / Abstract: The transmissible venereal tumor is the second most common neoplasia among the dogs attended in the Veterinary Hospital of Botucatu. When neoplastic biological behavior and clinical findings are associated, intense differences were presented with the literature. In the scientific environment, interest in the origin of this tumor, the means of transmissible and questionable spontaneous regression, since this tumour has a versatile behavior, differs from that in other neoplasias. Studies have been done that show similar phenomena occurring in human neoplasias. Chemotherapy is advised for transmissible venereal tumor, but it has extreme toxicity for other cells. Investigators have related the antitumoral properties of propolis; so, this study aimed to verify the supposed antitumoral effect on the transmissible venereal canine tumor, in order to minimize the toxicity caused by chemotherapy. Seventy-seven animals from Veterinary Hospital of Botucatu, were used. Based on the cellular morphology stained with Giemsa, new nomenclature was created and the animals were divided into three groups: "lymphocyte-like" transmissible venereal tumor, "plasmocyte-like" transmissible venereal tumor and "mixed" transmissible venereal tumor. Proliferation markers (AgNOR and CEC) were used to verify whether there were malignancies, in different morphological groups and in the sensitivity to propolis, were studied in vitro. In this study, we saw that propolis showed activity on transmissible venereal tumor. After 48 hours and with 100 æg of propolis, the antitumoral activity was effective, including the "plasmocyte-like" transmissible venereal tumor, that showed cytotoxic effect only with the greatest dose and the longest time. / Orientador: Noeme Sousa Rocha / Coorientador: José Maurício Sforcin / Mestre

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Coorientador: Gyl Eanes Barros Silva / Coorientador: Mirela Tinucci Costa / Banca: Priscylla Tatiana Chalfun Guimarães Okamoto / Banca: Andrigo Barboza de Nardi / Banca: Geórgia Modé Magalhães / Banca: Sabryna Gouveia Calazans / Resumo: O presente estudo buscou avaliar as alterações glomerulares e tubulares associadas com o carcinoma mamário em cadelas. Para tanto foram utilizadas 11 fêmeas caninas como controle e 32 com diagnóstico de carcinoma mamário, atendidas pelo Serviço de Oncologia e Obstetrícia do Hospital Veterinário "Governador Laudo Natel" da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - UNESP, câmpus de Jaboticabal, SP. O protocolo experimental incluiu a obtenção de histórico clínico e exames inerentes ao hemograma, bioquímica sérica, excreção fracionada de sódio, eletroforese de proteínas séricas e urinárias e pressão arterial sistêmica em conjunto da avaliação do tecido renal obtido por tru-cut logo após a realização da ováriohisterectomia (OH), os quais foram avaliados por microscopia de luz, imunofluorescência e microscopia eletrônica de transmissão. Vale ainda ressaltar que exames sorológicos, PCR e testes hormonais foram utilizados para exclusão/inclusão de animais nos seus respectivos grupos. O grupo carcinoma apresentou maior concentração de globulinas, haptoglobina e transferrina séricas, indicando provável estímulo e produção de substâncias provenientes do carcinoma mamário. A proteinúria associada a maior frequência no aparecimento de proteínas urinárias de baixo, médio e alto pesos moleculares e sua relação com as alterações da microscopia de luz evidência que existem tanto alterações glomerulares quanto tubulares. Ademais a associação desses achados ao depósito de diferentes classes de imunoglobulinas e complemento C3 (C3) na imunofluorescência renal, e a presença de depósitos eletrodensos subendoteliais no glomérulo confirmam a existência de importantes alterações renais relacionados ao carcinoma mamário em cadelas / Abstract: The present study evaluated the glomerular and tubular alterations associated with mammary carcinoma in bitches. Eleven animals was used for control and 32 bitches with diagnosis of mammary carcinoma was assisted by Oncology and Obstetrics Service of the Veterinary Teaching Hospital "Governador Laudo Natel" of Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - UNESP, câmpus de Jaboticabal. The experimental protocol included obtaining clinical history and examination inherent to the blood count, serum biochemistry, urinary fractional excretion of sodium, electrophoresis of serum and urinary protein and blood pressure in combination with the evaluation of renal tissue obtained by tru-cut after the achievement of ovariohysterectomy (OH), which were evaluated by light, immunofluorescence and transmission electron microscopy (TEM). Serological tests, PCR and hormonal tests were used for animal's exclusion or inclusion in their respective groups. Carcinoma group had higher concentration of globulins, haptoglobin and serum transferrin, indicating probable stimulation and production of substances from mammary carcinoma. Proteinuria associated with higher frequency of low, medium and high molecular weights of urinary proteins and their relationship with glomerular and tubular alterations evidenced by light microscopy and the association of these findings to the deposit of different classes of immunoglobulins and complement C3 (C3) in renal immunofluorescence, and the presence of subendothelial electron-deposits in the glomerulus might support the hypothesis of existence of renal alterations associated with mammary carcinoma / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T18:59:53Z : No. of bitstreams: 1 silva_sb_me_botfmvz.pdf: 1275136 bytes, checksum: c4961a43687de964361a407adaa3c185 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / O tumor venéreo transmissível (TVT) é a segunda neoplasia de maior prevalência nos cães atendidos no Hospital Veterinário de Botucatu. Na associação entre o comportamento biológico do tumor e a clínica desses animais, há fortes diferenças em relação às apresentadas na literatura especializada no assunto. O TVT desperta, no meio científico, o interesse pela sua origem, modo de transmissão e questionável regressão espontânea, fato atribuído ao comportamento versátil desse tumor, diferindo dos mecanismos de outras neoplasias. Investigações têm sugerido fenômenos semelhantes aos que ocorrem nos tumores de outras espécies, inclusive no homem. A quimioterapia para o TVT é a mais indicada. Porém, traz efeitos colaterais extremamente tóxicos às células desses animais. Pesquisadores relatam a propriedade antitumoral in vitro da própolis sobre o grau de agressividade do TVT. Para tal, foram utilizadas células neoplásicas de 77 animais, sem distinção por raça, sexo e idade. Os animais foram provenientes do Hospital Veterinário da FMVZ - UNESP, Campus de Botucatu. As neoplasias foram divididas em três Grupos: TVT linfocitóide; TVT plasmocitóide e TVT misto. Nestas neoplasias, o índice de proliferação celular foi verificado pelo AgNOR e CEC, para auxiliar a averiguar o grau de agressividade do tumor. No final do estudo, foi possível observar que a própolis apresenta atividade antitumoral tempo-dose dependente sobre as células de TVT, incluindo nas do grupo plasmocitóide (considerada a de maior agressividade), onde, após 48 horas e na concentração de 100 æg, a atividade antitumoral é efetiva. Concluímos também que os marcadores de proliferação (AgNOR e CEC) mostram-se eficientes para monitorar a evolução do TVT e que, a avaliação clínica, morfológica e o estudo in vitro auxiliam no diagnóstico, na conduta terapêutica e na monitoração do TVT. / The transmissible venereal tumor is the second most common neoplasia among the dogs attended in the Veterinary Hospital of Botucatu. When neoplastic biological behavior and clinical findings are associated, intense differences were presented with the literature. In the scientific environment, interest in the origin of this tumor, the means of transmissible and questionable spontaneous regression, since this tumour has a versatile behavior, differs from that in other neoplasias. Studies have been done that show similar phenomena occurring in human neoplasias. Chemotherapy is advised for transmissible venereal tumor, but it has extreme toxicity for other cells. Investigators have related the antitumoral properties of propolis; so, this study aimed to verify the supposed antitumoral effect on the transmissible venereal canine tumor, in order to minimize the toxicity caused by chemotherapy. Seventy-seven animals from Veterinary Hospital of Botucatu, were used. Based on the cellular morphology stained with Giemsa, new nomenclature was created and the animals were divided into three groups: lymphocyte-like transmissible venereal tumor, plasmocyte-like transmissible venereal tumor and mixed transmissible venereal tumor. Proliferation markers (AgNOR and CEC) were used to verify whether there were malignancies, in different morphological groups and in the sensitivity to propolis, were studied in vitro. In this study, we saw that propolis showed activity on transmissible venereal tumor. After 48 hours and with 100 æg of propolis, the antitumoral activity was effective, including the plasmocyte-like transmissible venereal tumor, that showed cytotoxic effect only with the greatest dose and the longest time.

Orientador: Luiz Carlos Vulcano / Coorientador: Marco Antonio Rodrigues Fernandes / Banca: Alexandre Lima de Andrade / Banca: Sheila Canevese Rahal / Resumo: No Brasil, o uso da radioterapia na medicina veterinária ainda é incipiente, com apenas estudos em nível de pesquisa científica e poucos grupos de especialistas dedicados a esse tipo de trabalho. Centros de radioterapia veterinária já existem em outros países como Estados Unidos, França, Canadá, Inglaterra, e até mesmo na Argentina. Os resultados apresentados nestas clínicas são bastante incentivadores e promissores. Muitos dos estudos desenvolvidos na radioterapia veterinária são derivados e facilitadores da implementação na medicina humana. A Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ) da UNESP de Botucatu foi contemplada com um novo equipamento do tipo acelerador linear, o qual será instalado no setor de radiologia veterinária. Este trabalho apresenta os protocolos clínicos específicos para a radioterapia veterinária usados em alguns dos centros atualmente em funcionamento. Foram desenvolvidos acessórios para imobilização de pequenos animais, visando o posicionamento durante o planejamento tomográfico e a reprodutibilidade dos procedimentos de radioterapia. Para a produção foi utilizado acrílico liso, madeira do tipo Medium Density Fiberboard (MDF), silicone de condensação (Speedex putty) e um catalizador universal (Speedex). Os acessórios produzidos foram a rampa de MDF, as cunhas de posicionamento e o suporte para o molde dentário, os quais, após testados em um animal durante a simulação, demostrou ser eficaz na utilização em pequenos animais e nos procedimentos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Radiation therapy is a medical modality that uses sources of ionizing radiation for the treatment of diseases, and is already a medical procedure well established in human medicine, however, in Brazil, the use of this technique in veterinary medicine is still in its incipient, with only studies in scientific research level and few groups of specialists dedicated to this type of work. Veterinary radiotherapy centers already exist in other countries like USA, France, Canada, England, and even in Argentina. The results presented in these clinics are very incentive and promising. Many of the studies developed in veterinary radiation and enhancers are derived implementation in human medicine. The Scholl of Veterinary Medicine and Animal Science (FMVZ) of UNESP in Botucatu is funding a new linear accelerator will be installed in the veterinary radiology sector. However, it is necessary to establish specific clinical protocols, in addition to produce a routine guide procedures and techniques that are appropriate to the reality of the veterinary clinic. The success of radiation therapy depends on several factors, among which, the daily reliability of the planned treatment field, which requires immobilization of the target volume irradiation. In this respect, due to the peculiarities of handling routine veterinary patients, most procedures should be monitored anesthesia of the animal. To minimize this fact, methods and immobilization accessories were developed in this work for the application in different types of animals undergoing radiotherapy. / Mestre

Orientador: Andrigo Barboza De Nardi / Coorientador: Mirela Tinucci Costa / Coorientador: Reneé Laufer Amorim / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Banca: Daniel Guimarães Gerardi / Resumo: A via PI3K/AKT/mTOR está relacionada com a proliferação, síntese proteica, sobrevivência e motilidade das células. Mutações nesta via tem sido associadas com o processo carcinogênico de diferentes tipos tumorais. Atualmente, inibidores específicos de proteínas como a PI3K, AKT, mTOR, vem sendo testados com o intuito de otimizar a terapia antitumoral em seres humanos e animais. Além de potenciais alvos terapêuticos, o aumento da expressão de algumas destas proteínas tem sido associado a tumores de pior prognóstico em seres humanos. Em cães, o mastocitoma (MCT) é um tumor cutâneo extremamente comum, de comportamento bastante variável e etiologia ainda não esclarecida. Diante disso, o objetivo deste estudo, foi avaliar a imunomarcação dos componentes proteicos da via PI3K/AKT/mTOR, por meio da técnica de imuno-histoquímica e em um segundo momento, associar esses resultados com os parâmetros clínicos dos pacientes, com as características morfológicas e biológicas dos tumores e com o tempo de sobrevida dos pacientes, visando determinar possíveis marcadores prognósticos para esta neoplasia. Para tal 46 MCTs caninos foram utilizados. Todos os tumores apresentaram positividade na avaliação imuno-histoquímica para as proteínas analisadas. As proteínas p-AKT Thr 308 e p-S6K1 apresentaram forte intensidade de imunomarcação, quando comparadas a parâmetros associados a piores prognósticos. Esses resultados indicam que a forte intensidade de imunomarcação de p- AKT Thr 308 e p-S6K1 está relacionada a um pior prognóstico para os cães acometidos pelo MCT cutâneo / Abstract: The PI3K/AKT/mTOR pathway is related to proliferation, protein synthesis, cell motility and survival. Mutations in this pathway have been associated with the carcinogenic process in diferent tumor types. Currently, specific inhibitors of some proteins such as PI3K, AKT, mTOR, are being tested in order to optimize antitumor therapy in humans and animals. Apart from potential therapeutic targets, increased in immunostaining of some of these proteins have been associated with poorer prognostic in humans tumors. In dogs, mast cell tumor (MCT) is an extremely common skin tumor, which presents a highly variable behavior and unclear etiology. Therefore, the aim of this study was to evaluate the immunostaining of the protein components of PI3K/AKT/mTOR pathway, through the technique of immunohistochemistry, and in a second stage, correlate this results with clinical parameters of patients, with morphological and biological tumor characteristics and the survival time of patients to determine possible prognostic markers for this disease. For this, 46 canine MCTs were used. All tumors were positive in immunohistochemical analysis for the proteins analyzed. Proteins p-AKT Thr 308 and p-S6K1 showed increases in the intensity of immunostaining compared to parameters associated with worse prognosis. These results suggest that the increase in the intensity of immunostaining of p-AKT Thr 308 and p-S6K1 are related to a worse prognosis for dogs affected by cutaneous MCT / Mestre

Orientador: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Banca: Claudia Momo / Banca: Karen Regina Lemos / Banca: Gisele Fabrino Machado / Banca: Marcos Rogério André / Resumo: A inflamação é um componente crítico para a progressão de tumores e sua malignidade está correlacionada com a resposta inflamatória induzida por citocinas e leucócitos infiltrados no sítio tumoral. O presente estudo teve por objetivo caracterizar, por imuno-histoquímica, o infiltrado inflamatório e citocinas pró e anti-inflamatórias nos carcinomas mamários caninos e determinar a identidade molecular dos tumores em luminal A ou B, C-erbb-2 ou basal. Para isso fez-se a imunodetecção de macrófagos, linfócitos (CD4, CD8, Treg), citocinas (MIF, IL-10, IL-4 e TGF-β e IFN-ɣ), além de C-erbb-2, receptor de estrógeno e receptor de progesterona e avaliou-se as médias das imunomarcações por meio do Teste T e análise de variância nos tecidos mamários com ou sem carcinomas. Houve diferença estatística (p<0,0001) entre o grupo controle e o grupo de animais com carcinoma mamário simples em todos os parâmetros avaliados, apresentando aumento nas médias de animais acometidos por neoplasias. Quando ocorreu a divisão por tipo histológico, todos os anticorpos apresentaram diferença com o grupo controle (p<0,0001). Os carcinomas mamários simples (tubulares e papilares) apresentaram aumento na contagem de macrófagos, linfócitos T, linfócitos T auxiliares, T regulatórios, assim como, aumento na imunomarcação das citocinas MIF, IL-10, IL-4 e TGF-β em comparação ao grupo controle. Os carcinomas mamários sólidos tiveram menor detecção de macrófagos e das subpopulações de linfócitos T, bem como de IFN-ɣ, IL-4 e TGF-β, possivelmente por um menor estímulo do sistema imune como mecanismo de evasão. Os macrófagos e linfócitos T CD4, bem como a citocina IL-10 foram predominantes no padrão tubular. Os carcinomas mamários caninos apresentam um perfil celular e de citocinas com ação pró-tumor, favorecendo seu crescimento e metástase. Na identificação molecular os tumores basais apresentaram menor... / Abstract: Inflammation is a critical component of tumor progression and its malignancy is correlated with the inflammatory response induced by cytokines and infiltrating leukocytes in the tumor site. This study aimed to characterize, by immunohistochemistry, the inflammatory infiltrate and pro- and anti-inflammatory cytokines in canine mammary carcinomas and determine the molecular identity of tumors in luminal A or B, C-erbB-2 or basal. For this, we made immunodetection of macrophages, lymphocytes (CD4, CD8, Treg), cytokines (MIF, IL-10, IL-4 and TGF-β and IFN-ɣ), further on c-erbB-2, estrogen receptor and progesterone receptor and evaluated the average of immunostainings through the T test and analysis of variance in the breast tissue with or without carcinomas. There was statistical difference (p <0.0001) between the control group and the group of animals with simple breast carcinoma in all parameters, an increase in average animal affected by cancer. When the split occurred by histological type, all antibodies showed differences with the control group (p <0.0001). Simple breast carcinoma (papillary and tubular) showed increased macrophage counts, T lymphocytes, T helper lymphocytes, regulatory T as well as increase in the immunostaining of the cytokines MIF, IL-10, IL-4 and TGF-β compared to control group. The solid breast carcinomas have had a decreased of macrophages and subsets of T lymphocytes and IFN-ɣ, IL-4 and TGF-β, possibly for less stimulation of the immune system as evasion mechanism. The macrophages and T CD4 + lymphocytes and IL-10 cytokine were prevalent in the tubular pattern. The canine mammary carcinomas have a cell profile and cytokines with pro-tumor action, favoring their growth and ... / Doutor

Orientador: Renée Laufer Amorim / Coorientador: Mirela Tinucci Costa / Banca: Geovanni Dantas Cassali / Banca: Renata Afonso Sobral / Resumo: O tumor de mama é o principal tumor que acomete as cadelas e seu comportamento biológico se assemelha com o que ocorre nas mulheres; com isso as cadelas podem ser um excelente modelo comparativo para o estudo do processo carcinogênico desta neoplasia. A metástase é uma consequência comum e a principal causa de mortalidade por esta doença. A identificação de marcadores tumorais pode ser uma ferramenta útil para a determinação do prognóstico pelo câncer de mama. Assim, os objetivos deste estudo foram avaliar a expressão gênica e proteica do ATM, p53 e VEGF na glândula mamária de cadelas e tentar correlacioná-las com a evolução tumoral e possível envolvimento metastático. Com isso foram utilizadas 53 amostras de glândula mamária de cadelas divididas em quatro grupos: G1= mamas normais, G2 = lesões mamárias benignas, G3 = carcinomas mamários não metastáticos e G4 = carcinomas mamários metastáticos. A análise de expressão gênica foi realizada pelo método de RT-qPCR e de expressão proteica pelo método de imuno-histoquímica. Baixa regulação de transcritos do ATM foi observada entre as neoplasias e as mamas normais, além da diminuição de níveis proteicos, sendo esta diminuição maior no grupo 4 quando comparado com o grupo 1. Os transcritos de TP53 e VEGF não apresentaram diferença estatística entre os grupos analisados. Entretanto, verificou-se diminuição proteica da p53 e aumento da proteína VEGF nos carcinomas mamários metastáticos em comparação com a mama normal. As expressões gênica e proteica do ATM apresentaram comportamento semelhante ao observado em mulheres, assim, o processo de desenvolvimento de metástase do carcinoma mamário pode ser semelhante em ambas as espécies. O aumento da expressão proteica do VEGF e a diminuição do ATM estavam principalmente relacionados com... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Canine mammary tumor is the major tumor that affects bitches and their biological behavior is similar to what occurs in women, so bitches can be an excellent comparative model for the study of the carcinogenic process in this type of neoplasm. Metastasis is a common consequence and the major cause of death by the tumor. Identification of tumor markers can be a useful tool for determining the prognosis of mammary gland cancer. So, the objectives of this study were to evaluate ATM, p53, and VEGF gene and protein expression in canine mammary tissues and try to correlate them with tumor development and metastatic involvement potential. Therefore 53 bitches mammary gland tissue samples were used divided in four groups: G1 = normal mammary glands, G2: benign mammary lesions, G3 = non-metastatic mammary gland carcinomas and G4 = metastatic mammary gland carcinomas. Gene expression analysis was performed by RT-qPCR and protein expression by immunohistochemistry. Down-regulation of ATM transcripts was observed between tumor tissue and normal mammary gland and protein levels were also reduced, it was mainly observed in group 4 when compared to group 1. TP53 and VEGF markers did not show statistical difference in gene expression among the groups. However, it was observed lower level of p53 protein in malignant tumors and higher level of VEGF protein in tumor tissues. ATM showed similar behavior when compared to women, so tumorigenesis process of breast cancer may be similar in both species. The increase in VEGF protein expression and ATM decrease were mainly related in poor prognosis tumors... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Mirela Tinucci-Costa / Coorientador: Erika Maria Terra / Banca: Felipe Augusto Ruiz Sueiro / Banca: Letícia Abrahão Anai / Resumo: Tumores mamários são altamente prevalentes em cadelas e apresentam comportamento biológico semelhante ao das mulheres, fazendo da cadela um modelo para o estudo comparativo. Em mulheres, a utilização dos marcadores sorológicos está bem consolidada, sendo um método útil para o acompanhamento da paciente desde o diagnóstico. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o comportamento do antígeno carcionoembrionário (CEA) e da Alfafetoproteína (AFP) em cadelas com carcinomas mamários metastáticos e não metastáticos, para futuramente utilizá-los no monitoramento e prognóstico das pacientes. Para tanto, foram utilizados soros de 35 cadelas, separados em três grupos; G1 (n=10): grupo controle (cadelas livres de neoplasias); G2 (n=20): cadelas com carcinoma de mama sem metástase em linfonodo e G3 (n=5): cadelas com carcinoma de mama com metástase em linfonodo. O CEA e a AFP foram dosados por ELISA e os resultados foram avaliados pelo teste de Tukey com nível de significância de 5%, quanto à presença de cada marcador no soro da paciente, sua relação com o comportamento biológico da neoplasia e as alterações clínico-patológicas encontradas. Os resultados mostraram que os valores de CEA (p<0,0001) e AFP (p=0,0004) foram significantemente maiores nas cadelas com carcinoma de mama, em comparação as saudáveis. Além disso, os valores de CEA estavam significantemente aumentados nas cadelas com metástase (p<0,0001) e naquelas com tumores maiores do que 3 cm de diâmetro (p=0.0091). Houve aumen... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Mammary tumors are highly prevalent in bitches and present biological behavior for women, making the bitch a model for the comparative study. In women, the use of serological markers for prognostic determination is well established, being a useful method for monitoring patients since his diagnosis. Thus, the objective of this study was to evaluate the behavior of carcinogenic antigen (CEA) and alpha-fetoprotein (AFP) in bitches with mammary tumors, with the aim of using those as diagnostic and prognostic markers in these animals. For that, sera from 35 bitches were used and separated into three groups; G1 (n = 10) control group; G2 (n = 15) animals with mammary carcinomas with no lymph node metastasis and G3 (n = 5) animals with mammary carcinomas with lymph node metastasis. Markers were measured by ELISA method. Results regarding the presence of markers in sera of each patient, its relation with tumor behavior and clinical-pathological variables were analyzed with Tukey test with a significance level of 5%. Results showed that values of CEA (p <0.0001) and AFP (p = 0.0004) were significantly higher in bitches with mammary tumors. In addition, CEA values significantly increases in bitches with metastasis (p <0.0001) and larger than 3.0 cm tumors (p = 0.0091). There was a significant increase in AFP in intact bitches (p = 0.0307). There was no significance among histological grade, necrosis, ulceration and inflammation for both markers. CEA was efficient in detecting the presence of mammary carcinomas and may be a promising marker for the follow-up of female dogs with mammary tumors. Future studies, including follow-up of patients with serial measures should be performed to include these markers in the clinical routine of veterinary oncology. / Mestre

Resumo:As neoplasias testiculares caninas são achados ocasionais. São descritas como benignas, mas podem metastatizar ou mostrar características de malignidade com o avanço da idade do animal, o que torna necessário o melhor entendimento do comportamento destas neoplasias no cão. O objetivo deste estudo foi caracterizar a expressão imuno-histoquímica de Ki-67, COX-2, MMP-9 e p53 em neoplasias testiculares de 50 cães, verificar a relação entre o padrão histológico e raça, idade e posicionamento testicular e verificar a expressão imuno-histoquímica dos anticorpos avaliados nos diferentes tipos de neoplasia. A avaliação imuno-histoquímica das proteínas Ki-67, MMP-9 e p53 foi mais intensa nos seminomas, enquanto que os leydigocitomas exibiram maior marcação para COX-2. A avaliação histológica e imuno-histoquímica dos subtipos de seminomas em cães, particularmente o seminoma difuso, podem resultar em diferença significativa que permita a utilização destas proteínas como marcadores de prognóstico. As características histopatológicas em associação ao histórico dos animais e à expressão das proteínas estudadas podem contribuir para a caracterização do comportamento biológico nas neoplasias testiculares caninas / Abstract:testicular neoplasms are sporadic findings. They are described as benign, but they can metastasize or express malignant features with the animal ageing, which makes necessary the better understanding of theses neoplasms behavior in dogs. The aim of this study was to characterize the immunoexpression of Ki-67, COX-2, MMP-9 and p53 in testicular neoplasms of fifty dogs, to verify the relation among histological pattern of the neoplasms and breed, age and testicular localization; and also to verify the immunoexpression of these markers in different types of testicular tumours. Ki-67, MMP-9 and p53 immunostaining were more intense in seminomas, whereas COX-2 presented a more intense staining in Leydig cell tumors. The histological and immunohistochemical analyses of the subtypes of canine seminomas, especially the diffuse seminoma, may result in significant differences which would allow the use of these markers as prognostic factors. The histopathological features associated with the day-history of the animals and with these markers may contribute to the characterization of the biological behavior of canine testicular neoplasms / Orientador:Gisele Fabrino Machado / Banca:Felipe Augusto Ruiz Sueiro / Banca:Rosemary de Oliveira Vasconcelos / Mestre