Made available in DSpace on 2018-08-01T23:27:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_9415_Dissertação Augusto - Versão final.pdf: 2549815 bytes, checksum: 02f0b18f7f93dc516bd1fd0b019e7388 (MD5) Previous issue date: 2017-02-02 / Helicobacter pylori é uma bactéria Gram-negativa capaz de sobreviver ao ambiente gástrico e possui forte influência sobre o desenvolvimento de doenças estomacais como gastrite, úlceras pépticas e até mesmo câncer gástrico. Plectranthus barbatus (Falso-boldo) e Vernonia condensata (Boldobaiano), são espécies de plantas medicinais amplamente utilizadas na medicina tradicional brasileira para distúrbios gástricos, no entanto, não há relatos científicos da atividade dessas espécies vegetais frente H. pylori. Assim, este estudo objetivou avaliar as atividades anti-H. pylori, gastroprotetora, imunomoduladora e antioxidante de extratos e frações destas espécies, assim como avaliar o perfil fitoquímico das espécies. O perfil fitoquímico foi avaliado através de ensaio fitoquímico preliminar, doseamento de fenóis totais e flavonoides e espectrometria de massas. A atividade gastroprotetora foi avaliada in vivo frente a modelo agudo de úlcera induzido por etanol. A atividade anti-H. pylori foi realizada através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM), bactericida mínima (CBM), análise morfológica por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e inibição da urease. Avaliou-se também a atividade imunomoduladora das amostras através da detecção de óxido nítrico e citocinas (TNF-α, IL-1β, e IL-6) liberadas por macrófagos. Por fim, a ação antioxidante foi verificada frente a radicais artificiais (DPPH e ABTS+) e espécies reativas de oxigênio e nitrogênio (O2-, HOCl, H2O2 e NO). O tratamento oral com os extratos de ambas as espécies vegetais indicam gastroproteção variando de 58 a 78%. Os resultados para atividade anti-H. pylori foram promissores apenas para a espécie P. barbatus apresentando CIM de 512 µg/mL para extrato aquoso e 256 µg/mL para fração acetato de etila (AcOEt) e ainda CBM para fração AcOEt na concentração de 1024 µg/mL. A análise por MEV da fração AcOEt demonstrou influência sobre a parede celular de H. pylori. Os resultados da atividade antioxidante foram considerados significativos para ambas as espécies, frente aos radicais artificiais e também para as espécies reativas O2- (CE50: 32 72 µg/mL) e HOCl (CE50: 53 85 µg/mL). Nos resultados de atividade imunomoduladora, houve inibição da produção de citocinas para ambas as espécies em estudo, porém a espécie V. condensata demonstrou ter o maior potencial anti-inflamatório por inibir o NO e as citocinas testadas de forma dose-dependente, em macrófagos estimulados por LPS (28 -88% de inibição). Ambas espécies apresentaram quantidade significativa das classes químicas flavonoides e fenóis totais. Além disto P. barbatus apresentou diferentes diterpenos como o plectrin, abietano hidrolisado, barbatusina, 3β-hidroxi-3deoixibarbatusina e ciclobutatosina e também os polifenois coleosídeo B e ácido rosmarinico. De modo geral, a espécie P. barbatus, em especial sua fração AcOEt demonstrou ser promissora para emprego futuro na prevenção e tratamento da infecção por H. pylori.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-11-06T14:42:48Z No. of bitstreams: 1 juceliabarbosadasilva.pdf: 5387573 bytes, checksum: d7ba864889d911413adaa37b47b0dba9 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-11-09T14:20:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 juceliabarbosadasilva.pdf: 5387573 bytes, checksum: d7ba864889d911413adaa37b47b0dba9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-09T14:20:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 juceliabarbosadasilva.pdf: 5387573 bytes, checksum: d7ba864889d911413adaa37b47b0dba9 (MD5) Previous issue date: 2017-08-01 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A espécie vegetal Vernonia Condensata Baker (Asteraceae), tradicionalmente empregada para o alívio de diversas doenças, tais como distúrbios gástricos e hepáticos, e, ainda, em processos inflamatórios, foi foco deste estudo que buscou aprofundar os conhecimentos sobre o potencial biológico desta espécie. As folhas da mesma foram submetidas à extração a frio com etanol. O extrato (EE) assim obtido foi seco e ressuspendido, passando por um processo de partição líquidolíquido com solventes em ordem crescente de polaridade, originando as partições: hexânica (PH), diclorometânica (PD) e em acetato de etila (PA). A atividade hepatoprotetora foi avaliada in vivo. Para tal foram aplicados três modelos de indução de lesão hepática: paracetamol dose aguda, paracetamol doses repetidas e etanol dose aguda. Para o primeiro modelo foram testados o extrato etanólico e suas partições, observou-se inibição do dano hepático para os animais tratados com PA nas concentrações 50, 100 e 200 mg / kg, com a diminuição dos níveis das transaminases hepáticas, dos parâmetros lipídicos e ação antioxidante observada pelos ensaios de peroxidação lipídica e atividade das enzimas catalase e glutationa reduzida realizados no tecido hepático. Para o modelo de paracetamol em doses repetidas os animais foram tratados com PA nas concentrações 100 e 200 mg / kg, dado o perfil do tratamento não foram observadas diferenças significativas entre os parâmetros bioquímicos dos diferentes grupos, porém foi possível verificar a atividade antioxidante da partição para este modelo. Para indução de lesão hepática aguda por etanol, observaram-se diferenças significativas para os níveis de transaminases hepáticas para os grupos tratados simultaneamente e após a indução com PA na concentração de 200 mg / kg. A atividade anti-inflamatória in vitro também foi testada frente a células RAW (macrófagos) para PA e os níveis de NO, IL- 6 e TNF- α foram dosados e observou-se redução significativa destes mediadores pró-inflamatórios. A atividade antibacteriana das amostras foi verificada pelos testes de concentração inibitória mínima (CIM), concentração bactericida mínima (CBM), checkerboard, análise da curva de crescimento, viabilidade celular e inibição da adesão do biofilme. Os resultados da CIM para PA indicaram moderada atividade antibacteriana para as cepas de S. aureus com resultados iguais ou inferiores a 625 µg / mL, apresentando, então, atividade bacteriostática. PA levou a diminuição da velocidade de crescimento das cepas de S. aureus bem como inibiu a adesão do biofilme. Em PA, que se mostrou mais promissora pelos ensaios realizados, foram identificados e quantificados por meio de cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a arranjo de diodo com padrões externos os flavonoides luteolina, apigenina e o composto fenólico ácido clorogênico. PA foi ainda fracionado e de uma das frações obtidas foi isolado, identificado e quantificado o ácido 1,5 – o- dicafeoilquínico. A presença destes pode justificar, em parte, as atividades observadas neste estudo. / Vernonia Condensata Baker (Asteraceae), traditionally used for the relief of several diseases, such as gastric and hepatic disorders, and also in inflammatory processes, was the focus of this study, which sought to deepen the knowledge about the biological potential of this species. The leaves were subjected to cold extraction with ethanol. The extract (EE) thus obtained was dried and resuspended, passing through a liquid-liquid partitioning process with solvents in increasing order of polarity, giving the partitions: hexane (PH), dichloromethane (PD) and ethyl acetate (PA). Hepatoprotective activity was evaluated in vivo. Three models of hepatic injury induction were applied: acetaminophen, acetaminophen, acetaminophen, acetaminophen and acetaminophen. For the first model the ethanolic extract and its partitions were tested, inhibition of hepatic damage was observed for the animals treated with PA at the concentrations 50, 100 and 200 mg / kg, with the reduction of hepatic transaminases levels, lipid parameters and antioxidant action observed by the lipid peroxidation assays and the activity of catalase and reduced glutathione enzymes performed in hepatic tissue. For the paracetamol model in repeated doses the animals were treated with PA at concentrations 100 and 200 mg / kg, given the treatment profile no significant differences were observed between the biochemical parameters of the different groups, however it was possible to verify the antioxidant activity of the partition for this model. For induction of acute hepatic injury by ethanol, significant differences were observed for hepatic transaminase levels for the groups treated simultaneously and after induction with BP at the concentration of 200 mg / kg. In vitro anti-inflammatory activity was also tested against RAW (macrophages) PA cells and levels of NO, IL-6 and TNF-α were measured and a significant reduction of these pro-inflammatory mediators was observed. The antibacterial activity of the samples was verified by tests of minimum inhibitory concentration (MIC), minimum bactericidal concentration (MBC), checkerboard, growth curve analysis, cell viability and inhibition of biofilm adhesion. The results of CIM for PA indicated moderate antibacterial activity for S. aureus strains with results equal to or less than 625 μg / mL, presenting bacteriostatic activity. PA led to a decrease in the growth rate of S. aureus strains as well as to inhibit biofilm adhesion. In PA, which was more promising for the tests performed, the flavonoids luteolin, apigenin and the chlorogenic acid phenolic compound were identified and quantified by means of high performance liquid chromatography coupled to diode array with external standards. PA was further fractionated and one of the fractions obtained was isolated, identified and quantified 1,5 - o - dicyclohexylic acid. The presence of these may justify, in part, the activities observed in this study.

Submitted by MARCOS LEANDRO TEIXEIRA DE OLIVEIRA (marcosteixeira@ufv.br) on 2018-08-13T13:28:57Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3973916 bytes, checksum: ec0ab2d11f3f4115ebc3866618e3b737 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-13T13:28:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3973916 bytes, checksum: ec0ab2d11f3f4115ebc3866618e3b737 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de MInas Gerais / Vernonia condensata Baker é uma planta tradicionalmente utilizada pela medicina popular brasileira. Suas propriedades medicinais se devem aos metabólitos produzidos pela espécie, tais como flavonoides, alcaloides, cumarinas e esteroides. Devido ao seu potencial farmacológico, a espécie foi incluída em uma lista de plantas da flora brasileira que necessitam de mais estudos para gerar produtos ao sistema único de saúde. A cultura de tecidos é uma ferramenta viável para a produção de plantas com maior biomassa e teor de compostos bioativos de interesse, pois permite a manipulação das condições de cultivo. Entretanto, existem poucos trabalhos abordando o cultivo de V. condensata. Assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a influência de diferentes condições de meio e ambientes no cultivo in vitro de V. condensata. Para isso, foram conduzidos quatro experimentos: I) Avaliação do potencial fotoautotrófico, através do cultivo em diferentes concentrações de sacarose (0; 7,5; 15 e 30 g L - 1) e com o uso de tampas com membranas porosas de 0,45 m; II) Análise do desenvolvimento, fotossíntese e anatomia de V. condensata cultivados in vitro sob diferentes qualidades de luz: Branco; Vermelho/Azul; Vermelho/Branco/Azul; Vermelho/Branco/Vermelho distante/Azul; III) Avaliação do desenvolvimento e fotossíntese de plantas de V. condensata aclimatizadas em casa-de- vegetação, cultivadas inicialmente in vitro sob os diferentes espectros luminosos descritos no experimento II; IV) Avaliação das respostas de V. condensata à exposição à radiação UV-B. Nossos resultados demonstraram que V. condensata apresenta potencial para propagação fotoautotrófica, e plantas com maior crescimento e acúmulo de biomassa foram encontrados nas condições de cultivo com maiores trocas gasosas. A qualidade da luz afetou o desenvolvimento de V. condensata in vitro, e essa influência foi mantida após a aclimatização. O desenvolvimento de V. condensata também foi influenciado pela radiação UV-B, que induziu respostas antioxidantes enzimáticas e não-enzimáticas. Os resultados obtidos nesse trabalho contribuem para um melhor entendimento do desenvolvimento in vitro de V. condensata, e podem colaborar para futuros trabalhos futuros que explorem a biossíntese de compostos bioativos presentes em V. condensata, que são de grande interesse econômico e industrial. / Vernonia condensata is a species widely used by folk medicine. Its medicinal properties are due with the metabolites produced by the species, such as flavonoids, alkaloids, coumarins and steroids. Due to its pharmacological potential, the species was included in a list of plants of the Brazilian flora that need more studies to generate products to the single health system. Tissue culture is a viable tool for the production of plants with higher biomass and content of bioactive compounds of interest, because it allows the manipulation of the culture conditions. However, there are few studies addressing the cultivation of V. condensata. Thus, the objective of this work was to evaluate the influence of different environment conditions on the in vitro culture of V. condensata. For this, four experiments were carried out: I) Evaluation of the photoautotrophic potential, through the cultivation in different concentrations of sucrose (0; 7.5; 15 and 30 g L -1 ) and with the use of lids with porous membranes of 0.45 μm; II) Analysis of the development, photosynthesis and anatomy of V. condensata grown in vitro under different light spectral (White; White/Medium blue; Dark red/White/Medium blue; Dark red/White/Far red/Medium blue); III) Evaluation of the development and photosynthesis of plants of V. condensata acclimatized under greenhouse conditions, cultivated initially in vitro under the different light spectral described in experiment II; IV) Evaluation of the responses of V. condensata to the exposure to UV-B radiation. Our results demonstrate that V. condensata presents potential for photoautotrophic propagation, and the plants with the highest growth and accumulation of biomass were found in the culture conditions with the highest gas exchange. Light quality affected the development of V. condensata in vitro, and this influence was maintained after acclimatization. The development of V. condensata was also influenced by UV-B radiation, which induced enzymatic and non- enzymatic antioxidant responses. The results obtained in this work contribute to a better understanding of the in vitro development of V. condensata, and may contribute to future works that explore the biosynthesis of bioactive compounds present in V. condensata, which are of great economic and industrial interest.