Made available in DSpace on 2014-07-28T18:09:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 103.pdf: 652449 bytes, checksum: ea164ab2e7463c3fab8f472fadef32d6 (MD5) Previous issue date: 2008 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 103.pdf: 652449 bytes, checksum: ea164ab2e7463c3fab8f472fadef32d6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Staphylococus aureus e Staphylococcus Coagulase negative(CNS) são reconhecidos como causadores de infecções hospitalares e comunitárias em todas as regiões do mundo. Nós estudamos a produção de biofilme em 43 cepas de Staphylococus aureus meticilina resistente (MRSA) e em 21 isolados de Staphylococus epidermidis meticilina resistente (MRSE) e a susceptibilidade a antibióticos destas cepas que foram obtidas de pacientes infectados do Hospital Universitário Antônio Pedro (HUAP), localizado na cidade de Niterói no estado do Rio de Janeiro. Foi realizado também a Eletroforese em campo pulsado (PFGE) de fragmentos de macrorestrição de SmaI do DNA genômico, bem como a tipificação do cassete cromossômico estafilocócico mec (SCCmec).Os isolados que carreaiam mecA foram usados para estudar a distribuição do tipo clonal entre 43 cepas de MRSA colhidas no HUAP de 2003 a 2006. Nossos resultados demonstraram que a maioria das cepas de MRSA (83.7 por cento) e MRSE (52,4 por cento) produziram biofilme,e altas taxas de resistência de MRSA e MRSE à eritromicina, à clindamicina e ao ciprofloxacino foram observadas. Dois tipos clonais predominantes (A e B) foram identificados por PFGE, tendo ambos compreendendo a maioria das cepas (32,6 por cento cada um). De acordo com a tipificação de SCCmec, o SCCmec tipo IV foi o que prevaleceu (51,2 por cento). Porém, o mais interessante em nosso estudo foi a mudança observada no background genético dos MRSA isolados do HUAP, pois o Clone Epidêmico Brasileiro(CEB) que era o clone predominante neste hospital, está sendo substituído pelo USA-400, um clone que a princípio foi denominado de clone comunitário Staphylococcus aureus meticilina resistente (CA-MRSA). / Staphylococus aureus and coagulase-negative staphylococci (CNS) are recognized as causing nosocomial and community-acquired infection in every region of the world. We study biofilm production in 43 isolates of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and 21 isolates methicillin-resistant Staphylococcus epidermidis (MRSE) and the antibiotics susceptibilities of these strains that were obtained from infected patients at Antônio Pedro University Hospital (HUAP) located in Niterói city, Rio de Janeiro. In addition, Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) of SmaI macrorestriction fragments of genomic DNA as well as staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) typing for mecA-carrying isolates were used to study the distribution of clonal types among 43 MRSA recovered in HUAP between 2003 and 2006. Our results demonstrated that the majority strains of MRSA (83.7%) and MRSE (52,4%) produced biofilm and high resistance of MRSA and MRSE to erytromicin, clindamicin and ciprofloxacin were observed. The two major clones types (A and B) were identified by PFGE, with both them comprising the majority of strains (32,6% each). According to SCCmec typing, SCCmec type IV were the most prevalent type, showing 51,2% . But the most interesting in our study is a changed observed in the genetic background of MRSA isolates from HUAP, because of Brazilian clone, which was the major clone in this hospital, was replaced by the USA-400, one type of community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus (CA-MRSA).

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:10:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 98.pdf: 3463846 bytes, checksum: 8603b620b9560561e10f307f624ab539 (MD5) Previous issue date: 2008 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 98.pdf: 3463846 bytes, checksum: 8603b620b9560561e10f307f624ab539 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Dentre os efeitos induzidos pela toxina pertussis (TP) em mamíferos, ocupa um lugar de destaque o fenômeno conhecido por sensibilização aos efeitos biológicos e letais da histamina, cuja intensidade e constância proporcionaram o estabelecimento de um ensaio in vivo de controle de qualidade para avaliação da segurança de vacinas contra a pertussis (coqueluche) e tríplice bacteriana contra a difteria, tétano e coqueluche (DTP). O ensaio de sensibilização à histamina (ESH) em camundongos NIH fêmeas mostrou-se altamente sensível à toxina pertussis de referência NIBSC 90/518 (TPR) detectando níveis tão baixos quanto 20 ng de TP/dose. Todas as 5 vacinas DTP de um produtor nacional noESH apresentaram níveis de TP ativa que variaram entre 84 a 147 ng/mL, valores inferiores ao valor limite de 1789 ng/mL obtido para a vacina pertussis de referência NIBSC 66/303 (VPR), logo, todas as vacinas foram aprovadas para uso humano. Embora o ESH tenha sido conclusivo quanto à alta especificidade à TP, o elevado número de animais, no mínimo, 40 por ensaio, acarretando alto custo e o sofrimento dos animais são fatores limitantes que dificultam o uso rotineiro como ensaio de controle de qualidade da vacina DTP. O objetivo do nosso estudo foi desenvolver uma metodologia in vitro em preparações de íleo isolado de cobaias Short Hair fêmeas (250 a 300 g) fornecidas pelo CECAL/FIOCRUZ /Rio de Janeiro para avaliação do fenômeno de sensibilização à histamina pela TPR. Todos os experimentos foram aprovados de acordo com as diretrizes estabelecidas pela CEUA/FIOCRUZ. Curvas concentração-efeito à histamina em íleos isolados de cobaias foram analisadas e os parâmetros de concentração efetiva média(CE50), concentração efetiva máxima (CEmax) e de constante de dissociação no equilíbrio do complexo droga-receptor (Kd) para histamina foram determinados [...]. / Among the effects induced by pertussis toxin (PT) in mammalian species, a prominence place is occupied by the phenomenon known as sensitization to the biological and lethal effects of the histamine, whose intensity and constancy promoted the establishment of an in vivo quality control assay to evaluate the safety of the pertussis vaccine (PV) against whooping cough and the triple bacterial vaccine, (DPT) against diphtheria, whooping cough and tetanus. The histamine sensitization assay (HSA) performed with NIH female mice was highly sensitive to reference pertussis toxin NIBSC 90/518 (RPT), detecting levels as low as 20 ng of administered RPT/dose, which caused 50% lethality. All five samples of DPT vaccines from one Brazilian producer presented active PT levels in the range of 84 and 147 ng/ml by the HSA, inferior to the limit value of 1789 ng/mL obtained for reference pertussis vaccine NIBSC 66/303 (RPV), thus all the vaccines were approved for use. Although the HSA has been conclusive in relation to its high specificity for RPT, the large number of mice used (at least 40 per assay) results in high costs and the suffering of the mice are limiting factors that make its routine use as a DPT vaccine quality control assay difficult. The aim of our study was to develop an in vitro methodology in ileum segments from female Short Hair guinea pigs (250-300 g) maintained in the animal facilities of the Oswaldo Cruz Foundation in Rio de Janeiro (FIOCRUZ), Brazil, to evaluate the histamine sensitization phenomenon by RPT. All experiments were approved in accordance with the guidelines of the Committee for Ethics in Animal Use of the FIOCRUZ. Concentration effects curves for histamine in guinea pig ileum were studied and the parameters of mean effective concentration (EC50), maximum effective concentration (ECmax) and dissociation constant of drug-receptor complex (Kd) were determined. No increase in ileum contractile response to histamine was detected in relation to control PBS 4 days after intraperitoneal treatment of guinea pigs with doses and dilutions corresponding to mean histamine sensitization dose (HSD50) obtained in NIH female mice of RPT (40 ng), RPV and of 5 DPT vaccines (0.26 IU). In all the ten assays performed on the experimental group, the data followed normal distribution, the variances were homogeneous and no significant differences occurred between assays. With doses 10 times higher than the HSD50 of RPT (400 ng) and of RPV (2.6 IU), analysis of the data showed the same behavior above. Contrary to the anticipated results, histamine EC50 and Kd values in ileum of guinea pigs treated in vivo with RPT were significantly higher than the control and RPV (p< 0.05) with no alteration in ECmax (p= 0.3672). In vitro 15 min treatment of guinea pig ileum with 30 ng/ml of RPT reduced the ECmax to about half in relation to control (p= 0.0028), with no significant reduction in the mean values of histamine EC50 and Kd (p= 0.09). In contrast, in vitro 15 min treatment of ileum with 40 ng/ml of RPT significantly reduced histamine ECmax (p< 0.0069), EC50 (p= 0.0261) and Kd (p= 0.0479) in relation to control ileum. In vitro 15 min treatment with PBS (390 and 520 µL in 13 mL of Tyrode) did not significantly alter the mean values of histamine EC50 (p=0.4043 and p= 0.1035), ECmax (p= 0.2366 and p= 0.2708) or KD (p= 0.4564 and p= 0.1158) in relation to control without treatment, demonstrating no effect of the control solvent (PBS) on ileum contractile response by histamine. In conclusion, increased histamine sensitization in female guinea pig ileum after in vitro treatment of 30 and 40 ng/ml of RPT was demonstrated.

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:10:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 95.pdf: 1907649 bytes, checksum: 0e755db75ec5e523bade6b690b137698 (MD5) Previous issue date: 2008 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 95.pdf: 1907649 bytes, checksum: 0e755db75ec5e523bade6b690b137698 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Os problemas associados à indústria têxtil provêm especialmente da utilização de corantes, visto que a maioria é recalcitrante e alguns apresentam caráter mutagênico e carcinogênico. Agências reguladoras relacionadas à saúde pública, incluindo a Vigilância Sanitária, devem atuar conjuntamente com outros segmentos voltados à saúde ambiental no intuito de reduzir ou eliminar os riscos provenientes deste setor. Deste modo vem sendo investigada à capacidade de fungos de descolorir e detoxificar diferentes tipos de corantes têxteis. Amostras de sedimentos de cinco igarapés na região de Manaus (AM) foram coletados com intuito de isolar fungos com capacidade de descolorir eficientemente os corantes Vermelho Reativo 198 (V198) e Azul Reativo 21 (A21). Os fungos isolados foram testados juntamente com fungos da Coleção de Microrganismos de Referência do INCQS, àqueles eficientes na descoloração foram avaliados na presença de outro corante, Azul Reativo 214 (A214) e da mistura dos 3 corantes (MXC). Os tratamentos foram avaliados toxicologicamente utilizando os ensaios ecotoxicológico com o microcrustáceo Daphnia pulex, de genotoxicidade com células sanguíneas (Ensaio Cometa) e de mutagenicidade com a bactéria Salmonella typhimurium(Teste de Ames). Os isolados de Manaus não foram considerados eficientes na descoloração, pois adsorveram o corante, ao contrário dos fungos da Coleção do INCQS, Penicillium simplicissimum INCQS 40211, e do fungo de referência Lentinula edodes INCQS 40220 [...] / The problems associated with the textile industry are especially due to the use of dyes, since the majority is recalcitrant and some of them might be mutagenic and carcinogenic. Regulatory agencies related to public health, including the Health Surveillance, must act jointly with other segments regarding environmental health in order to reduce or eliminate the risks from this sector. Thus the ability of fungi to decolorize and reduce the toxicity of different types of textile dyes have been investigated. Sediment samples of five igarapés of Manaus region – (AM) were collected in order to isolate fungi able to efficiently decolorize Reactive Red 198 (V198) and Reactive Blue 21 (A21). The fungal isolates were tested simultaneously with fungi from the Reference Collection of Microorganisms of INCQS. The fungi that efficiently decolorized the dyes were evaluated in the presence of another dye, Reactive Blue 214 (A214), and a mixture of the 3 dyes (MXC). The treatments were toxicologically evaluated using ecotoxicological test with the microcrustacean Daphnia pulex, genotoxicity test with blood cells (SGE – Assay Comet) and mutagenicity test with the bacteria Salmonella typhimurium (Ames Test). None of the fungi isolated from Manaus was efficient on decolorization without adsorbing the dye, differently of the fungi from the Culture Collection, Penicillium simplicissimum (INCQS 40211) and Lentinula edodes (INCQS 40220). Both showed complete decolorization of V198, A21, A214 and MXC. L. edodes reduced 93% of the toxicity of V198 and 95% of A21 with daphnia test and 60% of the genotoxicity the mixture MXC, however in other experiments evaluated by tests with daphniaand bacteria (Ames Test) the toxicity increased. P. simplicissimum reduced 87% of the toxicity of V198 and 94% of A21, but increased the toxicity of A214 and MXC with the daphnias. Genotoxicity was not detected in the treatments by this fungus, however with the bacteria all the treatments were cytotoxic and some of them also were mutagenic. Therefore, the fungi selected were efficient on dye decolorization, nevertheless the toxicological results demonstrated the great importance and need of decolorization studies to be associated withtoxicological tests to ensure risks reduced risks to the environment and the population health.

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:09:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 105.pdf: 763272 bytes, checksum: 5b08e5b3e276180cfde228711ff06a51 (MD5) Previous issue date: 2008 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 105.pdf: 763272 bytes, checksum: 5b08e5b3e276180cfde228711ff06a51 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / A sociedade científica mundial vem sofrendo pressão para que seja efetuada a substituição de ensaios in vivo por ensaios in vitro, sendo o teste de irritação ocular de Draize um dos testes in vivo mais fortemente combatidos pelos setores ativistas que lutam pela promoção e preservação do bem estar animal. Como a substituição do teste de Draize por metodologia alternativa se mostrou tarefa mais difícil do que se imaginava inicialmente, sobretudo devido ao grande número de desfechos que esta metodologia quantifica, as agências internacionais de validação de metodologia alternativas adotaram como conduta a busca por uma bateria de ensaios in vitro que possam servir de triagem para avaliação do potencial irritante ocular de produtos e ingredientes. Neste caso, o uso de animais só é recomendado, quando os resultados obtidos in vitro sugerem um baixo potencial irritante. Neste contexto, o presente estudo objetivou avaliar o grau de preditibilidade do método de Quantificação de Proteínas Totais (QPT) na avaliação do potencial citotóxico de tensoativos (N=6) e produtos cosméticos acabados (xampus e condicionadores, N=19). Todos os produtos avaliados no presente estudo foram previamente analisados quanto ao seu potencial irritante pela metodologia in vivo. O teste in vitro foi realizado utilizando linhagem celular proveniente de fibroblasto de embrião de camundongo (3T3) e o corante Azul Brilhante de Coomassie R-250. A avaliação do coeficiente de variação do teste de QPT em células 3T3 mostrou um valor de CV por cento global de 30,00 por cento. Para a comparação entre os resultados in vivo (MEM) e in vitro (IC50) utilizamos o coeficiente de correlação de Pearson. / The world scientific community is under pressure to find effective ways to substitute in vivo by in vitro tests. The Draize Eye Test is one of the most disapproved in vivo tests by the animal welfare activists. Since the substitution of the Draize Eye Test by an alternative method turned out to be a more difficult issue than it was first thought, mainly due to the great number of endpoints that this assay is able to quantify, the international validation agencies for alternative methods adopted, as a conduct, the search for a set of in vitro assays, which might work as a screening for the evaluation of the ocular irritant potential of products and ingredients. The use of animals would only be recommended if the results obtained with the in vitro screening tests indicate a low irritant potential for a determined substance. In this context, the main goal of the present study was to evaluate the degree of predictability of the Total Protein Quantification Methodology (QPT) in the evaluation of the citotoxic potential of surfactants (n=6) as well as in cosmetics (shampoos and hair conditioners, n=19). All the evaluated products in this study were previously analyzed in vivo, regarding their irritant potential. The in vitro test was performed using a cellular lineage derived from embryo mouse fibroblast (3T3) and the dye Blue Brilhant of Coomassie – R 250. The evaluation of the test variation coefficient (CV%) in 3T3 cells demonstrated a global CV% of 30%. In order to compare the in vivo (MMS) results with the ones obtained in vitro (IC50), we applied the Pearson´s coefficient of correlation. The value obtained for the correlation between the two methods was –0.420 (p=0.022). The analysis of the IC50 and MMS values of the different ocular structures showed a better correlation of the in vitro method with the injuries on the conjunctive, than with the damage found on the iris or cornea in vivo. Furthermore, an enhanced correlation of the in vitro versus in vivo method was observed for surfactants, when compared to whole products. In order to evaluate the predictability of the in vitro test in regard to the in vivo method a cut-off point was established, where substances with values of IC50<1 mg/ml were determined as irritant and substances with levels of IC50 higher then 1mg/ml were considered as non-irritant. Hence, under the experimental conditions of the present study, the assay accuracy was of 80%, the sensibility was 94% and the specificity was of 43%. Based on the results obtained we conclude that the QPT method, using Dye Blue Brilliant of Comassie R-250 and the cellular lineage 3T3, shows a better ability to predict the irritant potential of isolated products (surfactants) than of entire products. Even though the global CV% value found with our in vitro method, according to WHO, is considered suitable for assays performed with cell lines, the comparison of our results with the published data shows that the SIRC cell line is more interesting once considering inter-assay accuracy. We also conclude that the proposed assay has a better capacity to predict the irritant effect on the conjunctive than on the other ocular structures. At last, it is worth pointing out that this method shows a high sensibility degree and moderate level of specificity, and the application of the QPT assay may be useful to add the screening set assays for the evaluation of toxicity induced by products under the scope of Sanitary Surveillance.

Made available in DSpace on 2015-02-20T12:56:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 90.pdf: 3851149 bytes, checksum: e4dbb69d527e33af273cdc8bef40b262 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / O ambiente tem sido fortemente impactado por uma diversidade de poluentes, principalmente, devido ao crescimento populacional e ao aumento da atividade industrial. Neste contexto, a contaminação de corpos d água por efluentes de indústrias têxteis tem tido destaque, pois os efluentes produzidos por este setor são constituídos por uma complexa mistura de poluentes. Os corantes mais extensivamente usados, os do tipo azo, quando lançados no meio aquático sofrem degradação podendo gerar aminas aromáticas e benzidinas, potentes agentes carcinogênicos e mutagênicos que além de afetar o ambiente podem causar danos à saúde humana. A persistência de resíduos perigosos no ambiente é um problema público que leva à necessidade da atuação de segmentos relacionados à Saúde Pública, inclusive a Vigilância Sanitária, na eliminação ou mitigação das conseqüências adversas decorrentes deste processo. A seleção de fungos capazes de descolorir e detoxificar esses corantes é uma alternativa promissora para substituir ou complementar os tratamentos convencionais. Sedimentos de vinte reservatórios de água do Parque Nacional da Serra da Capivara, área de preservação ambiental encravado na caatinga no Estado do Piauí, com clima semi-árido, foram avaliados com o objetivo de selecionar consórcios de fungos com capacidade de descolorir e detoxificar três azo corantes (Vermelho Reativo 198, Azul Reativo 214 e Vermelho Reativo 141), e destas amostras de sedimento selecionar fungos que apresentem esta mesma capacidade isoladamente. / O ambiente tem sido fortemente impactado por uma diversidade de poluentes, principalmente, devido ao crescimento populacional e ao aumento da atividade industrial. Neste contexto, a contaminação de corpos d’água por efluentes de indústrias têxteis tem tido destaque, pois os efluentes produzidos por este setor são constituídos por uma complexa mistura de poluentes. Os corantes mais extensivamente usados, os do tipo azo, quando lançados no meio aquático sofrem degradação podendo gerar aminas aromáticas e benzidinas, potentes agentes carcinogênicos e mutagênicos que além de afetar o ambiente podem causar danos à saúde humana. A persistência de resíduos perigosos no ambiente é um problema público que leva à necessidade da atuação de segmentos relacionados à Saúde Pública, inclusive a Vigilância Sanitária, na eliminação ou mitigação das conseqüências adversas decorrentes deste processo. A seleção de fungos capazes de descolorir e detoxificar esses corantes é uma alternativa promissora para substituir ou complementar os tratamentos convencionais. Sedimentos de vinte reservatórios de água do Parque Nacional da Serra da Capivara, área de preservação ambiental encravado na caatinga no Estado do Piauí, com clima semi-árido, foram avaliados com o objetivo de selecionar consórcios de fungos com capacidade de descolorir e detoxificar três azo corantes (Vermelho Reativo 198, Azul Reativo 214 e Vermelho Reativo 141), e destas amostras de sedimento selecionar fungos que apresentem esta mesma capacidade isoladamente. As culturas de fungos em consórcio oriundas do Caldeirão Escuridão foram as mais eficientes na descoloração e detoxificação dos três corantes. A partir deste consórcio foi possível isolar três fungos identificados como Candida rugosa, Trichosporon ovoides e Mucor sp. Destes isolados a levedura C. rugosa apresentou importantes resultados de descoloração e detoxificação quando comparada à cepa de referência Lentinula edodes. C. rugosa foi mais eficiente na descoloração de dois dos corantes testados e obteve melhor desempenho na detoxificação dos três corantes frente a L. edodes. Este é o primeiro trabalho descrevendo a capacidade de C. rugosa tanto na degradação quanto na detoxificação de corantes têxteis. Assim, este fungo se apresenta como um potencial agente na biorremediação de efluentes têxteis.

Made available in DSpace on 2015-02-27T17:39:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 68.pdf: 635196 bytes, checksum: 89e720cf3ca5902e34caf1c29437eafd (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / As estatinas são substâncias capazes de reduzir os níveis plasmáticos de colesterol sangüíneo, o qual é considerado um dos principais fatores de risco para o desenvolvimento da arteriosclerose e das doenças coronarianas. Atualmente, representam a maior causa de óbitos no mundo ocidental e o tratamento de escolha para reduzir as taxas de colesterol consiste no emprego de estatinas, por serem estas mais seguras e eficazes, especialmente a atorvastatina. Diminuir os riscos associados à utilização de medicamentos é uma das atribuições da Vigilância Sanitária e pode ser realizada por meio do monitoramento do controle de qualidade dos produtos comercializados. Os Laboratórios Centrais (LACENS) são responsáveis por esta ação e, através do emprego de metodologias capazes de gerar resultados confiáveis, são capazes de fornecer o suporte adequado às decisões da Vigilância Sanitária. A validação, por sua vez, torna evidente a capacidade de uma metodologia fornecer resultados seguros e confiáveis. A maioria das técnicas descritas na literatura para o doseamento da atorvastatina não são adequadas à rotina dos laboratórios de controle de qualidade. Até o momento, não estão disponíveis em compêndios oficiais metodologias analíticas para o monitoramento da qualidade da atorvastatina, seja como insumo farmacêutico ativo ou comprimidos. O objetivo deste estudo foi desenvolver e validar uma técnica analítica para o doseamento de atorvastatina, enquanto insumo farmacêutico ativo e comprimidos de 40 mg. O método proposto empregou coluna cromatográfica Novapak® C18 (150 x 3,9 mm; 4μm) e fase móvel constituída de uma mistura de tampão acetato de amônio 0,02 M (ajustado a pH 3,0) e acetonitrila (60:40 %v/v). O fluxo empregado foi de 1,3 mL.min-1 e detecção UV/VIS a 248 nm. A metodologia apresentou especificidade, linearidade na faixa de 50-150 µg.mL-1 (R≈ 0,999), precisão e exatidão satisfatórios. / As estatinas são substâncias capazes de reduzir os níveis plasmáticos de colesterol sangüíneo, o qual é considerado um dos principais fatores de risco para o desenvolvimento da arteriosclerose e das doenças coronarianas. Atualmente, representam a maior causa de óbitos no mundo ocidental e o tratamento de escolha para reduzir as taxas de colesterol consiste no emprego de estatinas, por serem estas mais seguras e eficazes, especialmente a atorvastatina. Diminuir os riscos associados à utilização de medicamentos é uma das atribuições da Vigilância Sanitária e pode ser realizada por meio do monitoramento do controle de qualidade dos produtos comercializados. Os Laboratórios Centrais (LACENS) são responsáveis por esta ação e, através do emprego de metodologias capazes de gerar resultados confiáveis, são capazes de fornecer o suporte adequado às decisões da Vigilância Sanitária. A validação, por sua vez, torna evidente a capacidade de uma metodologia fornecer resultados seguros e confiáveis. A maioria das técnicas descritas na literatura para o doseamento da atorvastatina não são adequadas à rotina dos laboratórios de controle de qualidade. Até o momento, não estão disponíveis em compêndios oficiais metodologias analíticas para o monitoramento da qualidade da atorvastatina, seja como insumo farmacêutico ativo ou comprimidos. O objetivo deste estudo foi desenvolver e validar uma técnica analítica para o doseamento de atorvastatina, enquanto insumo farmacêutico ativo e comprimidos de 40 mg. O método proposto empregou coluna cromatográfica Novapak® C18 (150 x 3,9 mm; 4µm) e fase móvel constituída de uma mistura de tampão acetato de amônio 0,02 M (ajustado a pH 3,0) e acetonitrila (60:40 %v/v). O fluxo empregado foi de 1,3 mL.min-1 e detecção UV/VIS a 248 nm. A metodologia apresentou especificidade, linearidade na faixa de 50-150 µg.mL-1 (R≈ 0,999), precisão e exatidão satisfatórios.

Made available in DSpace on 2015-02-27T17:39:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 47.pdf: 882272 bytes, checksum: 401f86c677016c9683a9566630f091be (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Produtos biológicos, tais como soros hiperimunes e vacinas, podem ser definidos como produtos derivados ou produzidos a partir de organismos vivos. Isso implica que suas características podem variar de um lote para outro. Conseqüentemente, um minucioso controle da qualidade na liberação de lotes é requerido para garantir que esses produtos sejam seguros e eficazes. O ensaio de potência com animais é um dos ensaios preconizados para garantir a qualidade das vacinas e soros hiperimunes. Somente para realização do ensaio de potência para o produto final de vacinas e soros antidiftéricos (SAD) e antitetânicos (SAT), são utilizados no INCQS cerca de 5.000 animais por ano, desses aproximadamente 4.500 animais são utilizados na etapa de soroneutralização e o restante na etapa de imunização. Neste contexto, e baseado nos princípios dos 3Rs, o objetivo deste trabalho foi padronizar e validar o método imunoenzimático de inibição da ligação da toxina (ToBI) capaz de avaliar a potência de SAD, SAT e de vacinas bacterianas combinadas: tétano-difteria uso adulto (dT) e uso infantil (DT) e tétano-difteria-pertussis (DTP), como alternativa da etapa de soroneutralização do ensaio de controle de potência. Os resultados encontrados indicam que o método proposto apresenta linearidade, especificidade e precisão (intra e inter-ensaio) satisfatórias e que é um ensaio confiável, rápido e conveniente para avaliar a potência de componentes diftérico e tetânico presentes em vacinas e soros hiperimunes. Além disso, reduz drasticamente o número de animais usados, o tempo na liberação de laudos e os custos associados ao controle da qualidade destes produtos. O método ToBI apresenta potencial para a substituição do ensaio em animais na determinação de potência de vacinas e soros antidiftéricos e antitetânicos... / Produtos biológicos, tais como soros hiperimunes e vacinas, podem ser definidos como produtos derivados ou produzidos a partir de organismos vivos. Isso implica que suas características podem variar de um lote para outro. Conseqüentemente, um minucioso controle da qualidade na liberação de lotes é requerido para garantir que esses produtos sejam seguros e eficazes. O ensaio de potência com animais é um dos ensaios preconizados para garantir a qualidade das vacinas e soros hiperimunes. Somente para realização do ensaio de potência para o produto final de vacinas e soros antidiftéricos (SAD) e antitetânicos (SAT), são utilizados no INCQS cerca de 5.000 animais por ano, desses aproximadamente 4.500 animais são utilizados na etapa de soroneutralização e o restante na etapa de imunização. Neste contexto, e baseado nos princípios dos 3Rs, o objetivo deste trabalho foi padronizar e validar o método imunoenzimático de inibição da ligação da toxina (ToBI) capaz de avaliar a potência de SAD, SAT e de vacinas bacterianas combinadas: tétano-difteria uso adulto (dT) e uso infantil (DT) e tétano-difteria-pertussis (DTP), como alternativa da etapa de soroneutralização do ensaio de controle de potência. Os resultados encontrados indicam que o método proposto apresenta linearidade, especificidade e precisão (intra e inter-ensaio) satisfatórias e que é um ensaio confiável, rápido e conveniente para avaliar a potência de componentes diftérico e tetânico presentes em vacinas e soros hiperimunes. Além disso, reduz drasticamente o número de animais usados, o tempo na liberação de laudos e os custos associados ao controle da qualidade destes produtos. O método ToBI apresenta potencial para a substituição do ensaio em animais na determinação de potência de vacinas e soros antidiftéricos e antitetânicos. Entretanto, para efeitos regulatórios, se faz necessária a realização de um estudo colaborativo, envolvendo laboratórios de diversos segmentos, para conclusão da validação da metodologia considerando os parâmetros já avaliados nessa etapa.

Made available in DSpace on 2015-02-27T17:39:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 70.pdf: 4487406 bytes, checksum: 233bd27015d9696418f0f45da4432774 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / O objetivo deste trabalho foi desenvolver um programa (software) para controlar o estoque de Materiais de Referência de Agrotóxicos (e outros itens de interesse), utilizados na determinação de resíduos de agrotóxicos em alimentos no Laboratório de Resíduos de Agrotóxicos do Departamento de Química do Instituto Nacional de Controle da Qualidade em Saúde INCQS da Fundação Oswaldo Cruz. Foi desenvolvido utilizando técnicas e ferramentas de Engenharia de Sistemas e o programa Epi Info para Windows 3.5.1, sendo denominado como Sistema de Controle de Estoque de Materiais de Referência de Agrotóxicos ou simplesmente ConPad. O programa ConPad, entre outras características, permite de uma forma amigável, realizar o registro de materiais de referência de agrotóxicos quando adquiridos, indicando quais daqueles materiais e quanto de cada composto está disponível no laboratório, bem como o gasto e a obsolescência dos mesmos, isto é quando novas aquisições deverão ser feitas. O programa ConPad poderá ser aperfeiçoado no futuro para registrar e informar sobre as soluções mãe de materiais de referência disponíveis no laboratório. / O objetivo deste trabalho foi desenvolver um programa (software) para controlar o estoque de Materiais de Referência de Agrotóxicos (e outros itens de interesse), utilizados na determinação de resíduos de agrotóxicos em alimentos no Laboratório de Resíduos de Agrotóxicos do Departamento de Química do Instituto Nacional de Controle da Qualidade em Saúde – INCQS da Fundação Oswaldo Cruz.Foi desenvolvido utilizando técnicas e ferramentas de Engenharia de Sistemas e o programa Epi Info para Windows 3.5.1, sendo denominado como Sistema de Controle de Estoque de Materiais de Referência de Agrotóxicos ou simplesmente ConPad. O programa ConPad, entre outras características, permite de uma forma amigável, realizar o registro de materiais de referência de agrotóxicos quando adquiridos, indicando quais daqueles materiais e quanto de cada composto está disponível no laboratório, bem como o gasto e a obsolescência dos mesmos, isto é quando novas aquisições deverão ser feitas. O programa ConPad poderá ser aperfeiçoado no futuro para registrar e informar sobre as soluções mãe de materiais de referência disponíveis no laboratório.

Made available in DSpace on 2015-03-16T14:27:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 53.pdf: 1219606 bytes, checksum: 3b9a9cb9b8d3126b41a7fc7d493c2c69 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / As bolsas de coleta utilizadas para preservação do sangue humano variam de acordo com a solução anticoagulante e/ou preservadora utilizada, sendo estas, no Brasil, regulamentadas pela Portaria nº 950, de 26 de novembro de 1998. A adenina é um dos componentes desta solução, sendo adicionada para a biosíntese do ATP nas hemácias para diminuir a hemólise durante a estocagem do sangue. O objetivo deste estudo foi desenvolver e validar um método alternativo aos oficiais - da Portaria nº 950 e da Farmacopéia Americana - para determinação quantitativa por cromatografia líquida de alta eficiência de fase reversa com pareamento iônico da adenina, utilizando reagentes menos agressivos para aumentar o tempo de vida útil da coluna cromatográfica. O método proposto empregou coluna cromatográfica de fase reversa Symmetry® C8 (250 x 4,6 mm; 5,0µm) e fase móvel constituída de uma mistura de 2,5% (v/v) de ácido acético + 0,02% (p/v) acetato de amônio + 0,005 %(p/v) heptano sulfonato de sódio + 5%(v/v) de acetonitrila. O fluxo empregado foi de 0,6 mL/min e detecção UV a 262 nm. Este estudo demonstra que o método desenvolvido apresentou especificidade, linearidade na faixa de 0,0264 a 0,0480 mg/mL. A estatística t de Levene não foi significativa (p > 0,05), a independência dos resíduos da regressão foi evidenciada pelo teste de Durbin-Watson e a significância da regressão foi alta (p < 0,001)... / As bolsas de coleta utilizadas para preservação do sangue humano variam de acordo com a solução anticoagulante e/ou preservadora utilizada, sendo estas, no Brasil, regulamentadas pela Portaria nº 950, de 26 de novembro de 1998. A adenina é um dos componentes desta solução, sendo adicionada para a biosíntese do ATP nas hemácias para diminuir a hemólise durante a estocagem do sangue. O objetivo deste estudo foi desenvolver e validar um método alternativo aos oficiais - da Portaria nº 950 e da Farmacopéia Americana - para determinação quantitativa por cromatografia líquida de alta eficiência de fase reversa com pareamento iônico da adenina, utilizando reagentes menos agressivos para aumentar o tempo de vida útil da coluna cromatográfica. O método proposto empregou coluna cromatográfica de fase reversa Symmetry® C8 (250 x 4,6 mm; 5,0µm) e fase móvel constituída de uma mistura de 2,5% (v/v) de ácido acético + 0,02% (p/v) acetato de amônio + 0,005 %(p/v) heptano sulfonato de sódio + 5%(v/v) de acetonitrila. O fluxo empregado foi de 0,6 mL/min e detecção UV a 262 nm. Este estudo demonstra que o método desenvolvido apresentou especificidade, linearidade na faixa de 0,0264 a 0,0480 mg/mL. A estatística t de Levene não foi significativa (p > 0,05), a independência dos resíduos da regressão foi evidenciada pelo teste de Durbin-Watson e a significância da regressão foi alta (p < 0,001). O método está livre de tendência (valor p da interseção > 0,05), (r ≈ 0,999) e mostrou-se satisfatório na avaliação dos parâmetros de precisão, exatidão, efeito matriz, estabilidade e robustez. A importância da validação deste método alternativo, que atende aos critérios tanto da Anvisa quanto do Inmetro, é a diminuição do custo das análises e a possível alteração da legislação vigente no que concerne à normatização de bolsas de sangue utilizadas no Brasil. De acordo com os resultados de validação obtidos através dos testes estatísticos a metodologia proposta pode ser empregada em laboratórios para o controle de qualidade.

Made available in DSpace on 2015-03-16T14:27:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 37.pdf: 1620315 bytes, checksum: 706860285680f5ed734db1b6b53778bd (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / A solução injetável de cloridrato de bupivacaína tem na sua potência e no tempo de duração de sua ação, os grandes diferenciais clínicos que a tornam uma das soluções anestésicas mais utilizadas. Esse fármaco possui em sua estrutura um carbono assimétrico, apresentando assim, dois isômeros, a levobupivacaína e a dextrobupivacaína, com comportamentos farmacológicos independentes em decorrência da estereosseletividade. Até o momento, os métodos analíticos presentes nos compêndios oficiais avaliam o somatório dos isômeros na solução injetável de cloridrato de bupivacaína, não havendo separação e quantificação das proporções de cada um desses isômeros. O desenvolvimento de métodos analíticos adequados para determinar precisamente as concentrações dos isômeros de um fármaco em preparações farmacêuticas é um pré-requisito essencial para controlar a qualidade. O objetivo deste estudo foi desenvolver e validar um método analítico para determinar as proporções dos isômeros presentes na solução injetável de cloridrato de bupivacaína por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). O método desenvolvido utilizou coluna cromatográfica com fase estacionária quiral chirobiotic V Vancomycin (250 x 4,6) mm, 5,0µm e fase móvel constituída de uma mistura de água: meOH: TEA (60: 40: 0,2) pH= 5,0 ajustado com ácido acético. O fluxo empregado foi de 0,8 mL/min e detecção no ultravioleta a 230 nm. Este estudo demonstrou que o método desenvolvido apresentou linearidade no intervalo de concentração de 0,20 a 1,40 mg/mL e mostrou-se satisfatório na avaliação dos parâmetros de seletividade, precisão, exatidão, efeito matriz e robustez. Esse método poderá ser empregado no laboratório de controle de qualidade do INCQS a fim de elucidar possível fonte de agravo à saúde, relacionada as diferentes proporções dos isômeros presentes na solução injetável de cloridrato de bupivacaína, gerando resultados capazes de auxiliar na atuação de vigilância sanitária.