Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química. / Made available in DSpace on 2012-10-24T09:33:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 265552.pdf: 4089605 bytes, checksum: b62e984b87a5730d8ab9d8787fafbc0c (MD5) / Este trabalho propõe estratégias para caracterizar alterações causadas por melatonina e vincristina na dinâmica e topologia de modelos de membranas contendo fosfatidilcolina. A influência de melatonina em lipossomas foi caracterizada por ressonância magnética nuclear (RMN), espectroscopia de fluorescência e calorimetria de varredura diferencial (DSC). As medidas demonstraram que a melatonina induziu a um aumento da fluidez da membrana, e indicaram a localização da molécula na interface da mesma. O efeito de melatonina em filmes de Langmuir foi observado através de medidas em cuba de Langmuir e microscopia no ângulo de Brewster (BAM). Tal análise indicou um aumento na área, bem como uma redução na espessura da membrana, sugerindo um aumento de fluidez. A microscopia de força atômica (AFM) foi usada para caracterizar o efeito de melatonina em membranas suportadas em mica. Neste modelo, a melatonina reduziu a fluidez dos lipídios, o que pode ter sido influenciado por forças de interação mica-membrana. Os efeitos de vincristina foram estudados em lipossomas. Medidas de RMN, fluorescência e DSC indicaram que a vincristina induziu a desordem nas membranas, e que se localiza na região apolar dos lipídios. Este trabalho pode contribuir para maior compreensão dos mecanismos de ação dos fármacos e para o desenvolvimento de formas farmacêuticas mais eficientes no tratamento de doenças.

A aneuploidia é uma característica dos tumores sólidos. Ela pode ser resultado de diferentes erros durante a mitose, como a amplificação centrossômica, mitoses multipolares, e anormalidades durante a citocinese. Hoje se sabe que a aneuploidia pode estar relacionada à supressão ou progressão tumoral dependendo do grau da aneuploidia e do contexto genético das células, e assim esforços vem sendo feitos a fim de elucidar quais erros durante a mitose estão relacionados à formação de células aneuploides viáveis e inviáveis. Estudos prévios do nosso grupo mostraram que tratamentos de células em cultura com fibras de crisotila e com vincristina levam a formação de células aneuploides. Agora direcionados nossos esforços para elucidar os mecanismos envolvidos na formação dessas células, investigando alterações nos centrossomos, número de cromossomos, e origens e destinos de mitoses multipolares após o tratamento com crisotila e com vincristina. As fibras de crisotila, em linhagens de células tumorais e normais, levaram a padrões de localização alterados de proteínas relacionadas à abscisão durante a citocinese, e ocorreu a regressão deste processo e consequente formação de apenas uma célula-filha com o dobro do conteúdo de cromossomos e de centrossomos. Nas duas linhagens estudadas essas células tetraploides progrediram no ciclo celular, gerando mitoses multipolares e consequente formação de células aneuploides. O tratamento com vincristina levou a respostas similares e também distintas em células normais e tumorais. Durante a retenção em metáfase ocorreu a fragmentação da matriz pericentriolar, e as células foram encaminhadas à morte celular ou à saída da mitose sem a ocorrência de divisão celular. Entretanto, células de origem normal tetraploides não progrediram no ciclo celular e não formaram mitoses multipolares, enquanto na linhagem tumoral as células apresentaram aumento da expressão de Aurora A e células com conteúdo cromossômico aumentado e aneuploide em mitoses multipolares. As mitoses multipolares formaram uma, duas ou três células e apresentaram diversas anormalidades no processo de divisão. As alterações observadas no número e composição dos centrossomos após o tratamento com as duas linhagens indicaram que processos de amplificação centrossômica ocorreram após o tratamento. Os dados foram compatíveis com a reduplicação dos centrossomos e com a formação de centríolos a partir do aumento da matriz pericentriolar. Os dados reunidos mostram que apenas células tumorais foram capazes de proliferar mesmo após diferentes erros mitóticos, enquanto células normais puderam apenas superar os erros ocasionados pelas fibras de crisotila / Aneuploidy is a feature of solid tumors. Aneuploid cells result from errors during mitosis, such as centrosome amplification, multipolar mitosis and cytokinesis abnormalities. The capability of aneuploidy to promote and to suppress tumorigenesis has driven the efforts to characterize mitotic errors that form viable and not viable aneuploid cells. We have previously shown that chrysotile, an asbestos fiber, and vincristine, a chemotherapeutic agent, are able to induce aneuploidy. Now we directed our focus to discover possible mechanisms involved in aneuploid cell formation. Herein we evaluated centrosome morphology, chromosome number, and origins and fates of multipolar mitosis after chrysotile and vincristine treatment. Chrysotile fibers, in normal and cancer cells, led to mislocalization of proteins involved in abscission, which resulted in cytokinesis regression and tetraploid cells. These cells were able to enter cell cycle, giving rise to multipolar mitosis and aneuploid cells. Vincristine treatment led to specific and common responses in normal and cancer cells. During metaphase arrest, pericentrosomal matrix was fragmented, and the cells could be conducted to mitotic slippage in both lineages. However, normal tetraploid cells could not progress through cell cycle and neither to form multipolar mitosis, while cancer tetraploid cells showed Aurora A overexpression, structural and numerical centrosome abnormalities, multipolar mitosis and high levels of aneuploidy. The results showed that cancer cells could proliferate even after several mitotic errors, while normal cells could only overcome errors induced by chrysotile treatment

PEIXOTO JÚNIOR, Arnaldo Aires. Um novo modelo de disautonomia induzida pelo tratamento crônico com vincristina em ratos acordados. 2008. 139 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-06T16:54:56Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_aapjúnior.pdf: 5366559 bytes, checksum: 4bb7b2362cc0b68d676ab5ceaa7e2f1c (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-07T11:35:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_aapjúnior.pdf: 5366559 bytes, checksum: 4bb7b2362cc0b68d676ab5ceaa7e2f1c (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-07T11:35:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_aapjúnior.pdf: 5366559 bytes, checksum: 4bb7b2362cc0b68d676ab5ceaa7e2f1c (MD5) Previous issue date: 2008 / Vincristine is a chemotherapy drug and its use is limited by peripheral neuropathy with autonomic, sensory and motor involvement. Vincristine sulphate or saline was injected into the tail vein at doses of 50 µg/Kg (5 doses), 100 µg/Kg (2-5 doses) or 150 µg/Kg (1, 2 or 5 doses) QOD in 144 male Wistar rats (200-250g). Next day, they were gavage-fed with a test meal and sacrificed 10 minutes later. Gastric and intestinal dye recovery was determined by spectrophotometry. Basal mean arterial pressure (MAP) and heart rate (HR) and peak values of MAP and HR after i.v. phenylephrine 5 µg/Kg and atropine 0.5 mg/Kg were used to evaluate the baroreflex responses. Differences were evaluated by One-Way ANOVA with P<0.05. Chronic treatment with 5 doses of 50 µg/Kg; 3, 4 and 5 doses of 100 µg/Kg; 2 and 5 doses of 150 µg/Kg delayed gastric emptying (GE) (P<0.05). Two and 5 doses of 150 µg/Kg induced constipation and reduction in withdrawal latencies occurred after 1 dose of 50 µg/Kg, 100 µg/Kg and 150 µg/Kg (P<0.05). Vincristine (150 µg/Kg) immediately decreased fecal output (P<0.05). The effect of vincristine on the GE was not present in rats treated with 5 doses of vincristine 150 µg/kg one week and two weeks after the last dose (P>0.05). The withdrawal latency decrease lasted for at least 2 weeks after 5 doses of 150 µg/Kg (P<0.05). Vincristine enhanced the HR reduction induced by phenylephrine and enhanced cardiac response to atropine (P<0.05). Vincristine-induced autonomic neuropathy courses with delayed GE, altered baroreflex responses and increased colonic weight. Sensory neuropathy preceded and outlasted these autonomic changes. / A vincristina é um quimioterápico e seu uso é limitado devido a neuropatia periférica, com acometimento autonômico, sensitivo e motor. Sulfato de vincristina ou salina foram injetados na veia da cauda, nas doses de 50 µg/Kg (5 doses), 100 µg/Kg (2-5 doses) ou 150 µg/Kg (1, 2 ou 5 doses) a cada dois dias em 144 ratos Wistar machos (200-250 g). No dia seguinte, os animais receberam a refeição-teste por gavagem e foram sacrificados 10 minutos após. A recuperação gástrica e intestinal de corante foi determinada por espectrofotometria. Constipação foi avaliada pelo peso colônico e neuropatia sensitiva pela latência térmica (51±0,5ºC). Pressão arterial média (PAM) e freqüência cardíaca (FC) basais e valores da PAM e FC após a administração de fenilefrina 5 µg/Kg e atropina 0,5 mg/Kg foram usados para estudo dos baroreflexos. Diferenças foram avaliadas por One-Way ANOVA com P<0,05. Tratamentos crônicos com 5 doses de 50 µg/Kg; 3, 4 e 5 doses de 100 µg/Kg; 2 e 5 doses de 150 µg/Kg causaram retardo do esvaziamento gástrico (EG) (P<0,05). Duas e 5 doses de 150 µg/kg induziram constipação e houve redução da latência térmica após 1 dose de 50 µg/Kg, 100 µg/Kg e 150 µg/kg (P<0,05). O efeito da vincristina sobre o EG não foi evidenciado uma e duas semanas após o tratamento com 5 doses de 150 µg/Kg (P>0,05). Houve redução do tempo de latência ao calor por até duas semanas após 5 doses de 150 µg/Kg (P<0,05). Vincristina potencializou a redução da FC induzida pela fenilefrina e aumentou a resposta cardíaca à atropina (P<0,05). A neuropatia autonômica induzida pela vincristina cursa com retardo do EG, alterações na resposta baroreflexa e aumento do peso colônico. A neuropatia sensitiva precede o surgimento das alterações autonômicas e persiste após a reversão destas.

A aneuploidia é uma característica dos tumores sólidos. Ela pode ser resultado de diferentes erros durante a mitose, como a amplificação centrossômica, mitoses multipolares, e anormalidades durante a citocinese. Hoje se sabe que a aneuploidia pode estar relacionada à supressão ou progressão tumoral dependendo do grau da aneuploidia e do contexto genético das células, e assim esforços vem sendo feitos a fim de elucidar quais erros durante a mitose estão relacionados à formação de células aneuploides viáveis e inviáveis. Estudos prévios do nosso grupo mostraram que tratamentos de células em cultura com fibras de crisotila e com vincristina levam a formação de células aneuploides. Agora direcionados nossos esforços para elucidar os mecanismos envolvidos na formação dessas células, investigando alterações nos centrossomos, número de cromossomos, e origens e destinos de mitoses multipolares após o tratamento com crisotila e com vincristina. As fibras de crisotila, em linhagens de células tumorais e normais, levaram a padrões de localização alterados de proteínas relacionadas à abscisão durante a citocinese, e ocorreu a regressão deste processo e consequente formação de apenas uma célula-filha com o dobro do conteúdo de cromossomos e de centrossomos. Nas duas linhagens estudadas essas células tetraploides progrediram no ciclo celular, gerando mitoses multipolares e consequente formação de células aneuploides. O tratamento com vincristina levou a respostas similares e também distintas em células normais e tumorais. Durante a retenção em metáfase ocorreu a fragmentação da matriz pericentriolar, e as células foram encaminhadas à morte celular ou à saída da mitose sem a ocorrência de divisão celular. Entretanto, células de origem normal tetraploides não progrediram no ciclo celular e não formaram mitoses multipolares, enquanto na linhagem tumoral as células apresentaram aumento da expressão de Aurora A e células com conteúdo cromossômico aumentado e aneuploide em mitoses multipolares. As mitoses multipolares formaram uma, duas ou três células e apresentaram diversas anormalidades no processo de divisão. As alterações observadas no número e composição dos centrossomos após o tratamento com as duas linhagens indicaram que processos de amplificação centrossômica ocorreram após o tratamento. Os dados foram compatíveis com a reduplicação dos centrossomos e com a formação de centríolos a partir do aumento da matriz pericentriolar. Os dados reunidos mostram que apenas células tumorais foram capazes de proliferar mesmo após diferentes erros mitóticos, enquanto células normais puderam apenas superar os erros ocasionados pelas fibras de crisotila / Aneuploidy is a feature of solid tumors. Aneuploid cells result from errors during mitosis, such as centrosome amplification, multipolar mitosis and cytokinesis abnormalities. The capability of aneuploidy to promote and to suppress tumorigenesis has driven the efforts to characterize mitotic errors that form viable and not viable aneuploid cells. We have previously shown that chrysotile, an asbestos fiber, and vincristine, a chemotherapeutic agent, are able to induce aneuploidy. Now we directed our focus to discover possible mechanisms involved in aneuploid cell formation. Herein we evaluated centrosome morphology, chromosome number, and origins and fates of multipolar mitosis after chrysotile and vincristine treatment. Chrysotile fibers, in normal and cancer cells, led to mislocalization of proteins involved in abscission, which resulted in cytokinesis regression and tetraploid cells. These cells were able to enter cell cycle, giving rise to multipolar mitosis and aneuploid cells. Vincristine treatment led to specific and common responses in normal and cancer cells. During metaphase arrest, pericentrosomal matrix was fragmented, and the cells could be conducted to mitotic slippage in both lineages. However, normal tetraploid cells could not progress through cell cycle and neither to form multipolar mitosis, while cancer tetraploid cells showed Aurora A overexpression, structural and numerical centrosome abnormalities, multipolar mitosis and high levels of aneuploidy. The results showed that cancer cells could proliferate even after several mitotic errors, while normal cells could only overcome errors induced by chrysotile treatment

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El tratamiento del Tumor Venéreo Transmisible canino es una práctica que se realiza hace décadas con gran efectividad. Si bien se han probado diferentes drogas, el sulfato de vincristina es el medicamento de elección para lograr la remisión de la neoplasia. Sin embargo, los mecanismos por los que esto se logra, parecen ser más complejos que la acción citotóxica sobre las células neoplásicas y pudiesen tener relación con la angiogénesis del tumor. Así, en este estudio se analizó el efecto de la vincristina sobre el lecho vascular del Tumor Venéreo Transmisible de presentación natural. Para esto, se utilizaron biopsias de tumores de ocho perros obtenidas antes y después del tratamiento con sulfato de vincristina. Luego, con las muestras tumorales se procedió a cuantificar el área del lecho vascular marcada con anticuerpo anti-factor de vonWillebrand y a describir los cambios morfológicos observados en los cortes con tinciones de Hematoxilina-Eosina y Van Gieson. Una vez realizado el análisis estadístico, se observó una disminución significativa (p≤0,05) del área del lecho vascular de las muestras tumorales con tratamiento al compararlas con las muestras no tratadas. En conclusión, el sulfato de vincristina es capaz de disminuir el área del lecho vascular de manera significativa, sugiriendo así tener un efecto antiangiogénico sobre el Tumor Venéreo Transmisible del canino. / Proyecto FONDECYT nº 1020980

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Actualmente, dentro de las opciones terapéuticas antineoplásicas más investigadas, se destaca la terapia anti-angiogénica, aparentemente sin efectos colaterales importantes para el paciente. Esta terapia se dirige hacia los factores implicados en el progreso de la cascada angiogénica, para impedir el soporte sanguíneo del tejido tumoral, aumentando la apoptosis de las células neoplásicas. En este estudio se estudiaron los cambios del lecho vascular del TVT, tanto en su fase de crecimiento progresivo como durante la regresión inducida por el tratamiento con sulfato de vincristina (VCR), droga antineoplásica que, adicionalmente a su efecto citostático sobre la masa tumoral, ha demostrado presentar características antivasculares directas. Se utilizaron biopsias de tumores de TVT de ubicación genital de 10 caninos adultos de entre 1 a 10 años de edad, sin distinción de sexo ni raza. Los pacientes fueron sometidos a quimioterapia, utilizando VCR, en dosis única de 0,03 mg/kg, vía endovenosa, para inducir regresión tumoral. Histopatológicamente a través de la tinción Papanicolau, se observó que luego del tratamiento, el número de vasos sanguíneos y eritrocitos presentes en el lecho vascular disminuían notoriamente. Por otra parte se determinó, mediante el estudio morfométrico de los cortes de TVT, que el área ocupada por los eritrocitos era significativamente mayor (p<0.05) en los casos de TVT progresivo versus los de fase regresiva. Además, se comprobó que el área total y el área promedio ocupada por vasos sanguíneos intratumorales en fase progresiva, son significativamente mayores (p<0.05) a las obtenida para la fase regresiva inducida con VCR. / The inhibition of the angiogenesis process is currently one of the most investigated antineoplastic therapies, with no important side effects for the patient. This therapy is directed against the factors implied in the progress of the angiogenic cascade, to impede a vascular supply to the tumoral mass, increasing apoptosis in neoplastic cells. In this study changes of the vascular bed of canine TVT were studied after regression induced by treatment with vincristine sulfate (VCR). This antineoplastic drugs has shown both a cytostatic effect on tumor cells and an antivascular action. Histopatologically through computerized assisted morphometry and Papanicolau stain, was observed that after the treatment with VCR, the number of blood vessels and area occupied by erythrocytes diminished significantly (p <0.05). Also, the total area and the average area occupied by intratumoral blood vessels was significantly lower (p <0.05) for the regressive phase of canine TVT growth induced with VCR.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-graduação em Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2012-10-22T06:58:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A leucemia linfoblástica aguda (LLA) é uma desordem maligna resultante da proliferação clonal de células progenitoras linfóides de linhagem T ou B. Conforme os protocolos de tratamento multicentro Berlin-Frankfurt-Münster (BFM), em torno de 80% das crianças diagnosticadas com LLA entram em remissão completa. No entanto, o tratamento de pacientes adultos com LLA, tem demonstrado modestas melhorias nas últimas duas décadas, devido à resistência apresentada pelos linfoblastos leucêmicos à quimioterapia, o que resulta na persistência à doença ou em recaída e, finalmente, causa a morte do paciente. Apenas 40% de pacientes adultos com leucemia linfoblástica aguda (LLA) entram em remissão completa com a terapia de indução hiper-CVAD (hiperciclofosfamida, vincristina, adriamicina, dexametasona). Vários estudos demonstraram que drogas antimicrotúbulos, que afetam a polimerização e despolimerização da tubulina, têm atividade citotóxica na LLA. Em trabalhos anteriores demonstramos que o taxol é citotóxico para células de linhagem linfoblástica leucêmica de origem humana (CEM) e murina (L-1210). Sendo assim, o objetivo do presente estudo foi investigar o envolvimento da atividade do NF-kB e dos níveis de glutationa na resistência à apoptose induzida por compostos antimicrotúbulos, taxol e vincristina, e comparar a depleção dos níveis de GSH com a atividade da bomba de efluxo MRP, em células de linhagem de leucemia linfoblástica aguda humana. Os resultados demonstraram que tanto o taxol como a vincristina induziram a apoptose de maneira concentração-dependente em células CEM, porém, o taxol foi mais citotóxico do que a vincristina. Além disso, apenas o taxol depletou os níveis de GSH de maneira significante e inibiu a atividade do NF-kB, mesmo quando em associação com a ciclofosfamida. Esses resultados sugerem que o efeito citotóxico do taxol nas células CEM é mais eficaz do que o da vincristina pois, além de ter diminuído os níveis de glutationa intracelular, inibiu a atividade da MRP e impediu o restabelecimento dos níveis normais de GSH, através da inibição da atividade do NF-kB.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-07T12:19:25Z No. of bitstreams: 1 MIrian Aparecida de Queiroz Barbosa Ferreira.pdf: 1537380 bytes, checksum: 4f7250c772918ad4309b7bc67392342d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-07T12:19:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MIrian Aparecida de Queiroz Barbosa Ferreira.pdf: 1537380 bytes, checksum: 4f7250c772918ad4309b7bc67392342d (MD5) Previous issue date: 2016-02-25 / The transmissible venereal tumor is one of the most frequent cancers in clinical medicine of small animals and exhibits excellent responsiveness to chemotherapy. Against the importance of this disease, the objective was evaluate the clinical, haematological, biochemical and cytopathology dogs with transmissible venereal tumor treated with vincristine sulfate. We selected 10 dogs without distinction of sex, race or age suspected of transmissible venereal tumor, who had their diagnosis confirmed by cytological examination of which were collected blood samples for achievement hemogramy and biochemical levels. The animals were treated with vincristine sulfate at a dose of 0.75 mg / m2 intravenous administration every seven days for six consecutive weeks. The patients received medical discharge after the complete regression of tumor and the absence of neoplastic cells in cytological evaluation. Of affected animals evaluated by TVT, 70% were female and 30% male with a mean age of 4.8 ± 1.3 years, all mixed breed. The main clinical complaints of animals examined was bloody discharge, nasal and / or genital. After chemotherapy, only the vulvar bleeding statistically significant differences (p <0.05) from twenty-one days, and 100% of the animals showed no further bleeding. As for the cytological classification it was observed that 50% of the plasma cell type was 30% and 20% mixed lymphocyte. The hematological abnormalities observed was in relation to the counting rods (p = 0.042) at the beginning and after seven days and phosphorus serum nadosagem (p = 0.024) with statistically significant results (p <0.05). Its conclude that cytological aspiration fine needle is an effective, simple and safe for the diagnosis and classification of transmissible and independent venereal tumor type deTVT was satisfactory response method to chemotherapy treatment Vincristinae Sulfate base a protocol from six applications of chemotherapy, seven days betweenoperations applications intervals was effective for treatment. / O tumor venéreo transmissível é uma das neoplasias mais frequentes na clínica médica de pequenos animais e apresenta excelente responsividade à quimioterapia. Diante da relevância dessa afecção, objetivou-se avaliar os aspectos clínicos, hematológicos, bioquímicos e citopatológicos de cães com o tumor venéreo transmissível tratados com o sulfato de vincristina. Selecionou-se 10 cães sem distinção de sexo, raça ou idade com suspeita do tumor venéreo transmissível, que tiveram seu diagnóstico confirmado pelo exame citopatológico, dos quais foram coletados amostras de sangue para realização de hemograma e dosagens bioquímicas. Os animais foram tratados com o sulfato de vincristina na dose de 0,75mg/m2 com administração intravenosa a cada sete dias, por seis semanas consecutivas. Os pacientes receberam alta médica após a regressão completa do tumor e pela ausência de células neoplásicas na avaliação citopatológica. Dos animais avaliados acometidos pelo TVT, 70% eram fêmeas e 30% machos com média de idade de 4,8±1,3 anos, todos sem raça definida. A principal queixa clínica dos animais examinados foi de secreção sanguinolenta, nasal e/ou genital. Após a quimioterapia, apenas o sangramento vulvar apresentou diferenças estatisticamente significativas (p<0,05) a partir de vinte e um dias, 100% dos animais não apresentaram mais sangramentos. Quanto à classificação citopatológica observou-se que 50% foi do tipo plasmocitário, 30% misto e 20% linfocitário. A alteração hematológica observada foi em relação à contagem dos bastonetes (p=0,042) no inicio e após sete dias e na dosagem sérica de fósforo (p=0,024) com resultados estatisticamente significativos (p<0,05). Conclui-se que a citologia aspirativa por agulha fina foi um método eficaz, simples e seguro para o diagnóstico e classificação do tumor venéreo transmissível e independente do tipo de TVT houve resposta satisfatória ao tratamento quimioterápico a base de Sulfato de Vincristina e um protocolo a partir de seis aplicações do quimioterápico, com intervalos de sete dias entre as aplicações mostrou-se eficiente para o tratamento.

Orientador: Konradin Metze / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T22:07:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Scarpelli_KarimeCury_M.pdf: 4019689 bytes, checksum: 327500d1e9eaf9d7ba789fda03cc4064 (MD5) Previous issue date: 2008 / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

O estudo de agentes que interferem no funcionamento das proteínas relacionadas com o ciclo celular é importante para a compreensão dos processos de transformação e de morte celular. Alterações de ploidia, embora presentes na maioria dos tumores humanos, não têm ainda seu papel conhecido no processo de oncogênese. A alteração do número cromossômico é conseqüência primária de erros que envolvem o fuso mitótico e o cinetócoro. Dessa maneira, drogas que agem sobre os microtúbulos são consideradas aneugênicas potenciais. O presente trabalho enfocou o estudo do mecanismo pelo qual drogas que atuam sobre microtúbulos levam ao aparecimento de células multinucleadas e o significado biológico destas. Os resultados mostraram que a vincristina induziu bloqueio em mitose das células BBnt e MDCK, com conseqüente entrada em interfase no estado multinucleado. As células multinucleadas não apresentaram sinais de morte celular por apoptose, entretanto, quando em prófase apresentaram vários centrossomos, que poderiam originar divisões celulares com fusos multipolares. Estes resultados indicam que essas linhagens celulares possuem pontos de checagem mitótico funcionais e células multinucleadas são viáveis e capazes de prosseguir no ciclo celular. A presença de mitoses com fusos multipolares é indício de que as células multinucleadas passam por divisões anormais, que progrediriam para apoptose resultando na eliminação desta população. / The study of agents that interfere in the functionality of proteins related to cell cycle is important for the understanding of the transformation and cell death processes. Although ploidy alterations are presented in the majority of human tumors, their role in oncogenic process is not understood yet. The alteration on chromosomal number is the primary consequence of errors involving the mitotic spindle and kinetocore. Thus, drugs acting on the microtubules are considered as potentially aneugenic agents. The present work aimed to study the mechanism of multinucleated cells induction by action of antimicrotubule drug and biological meaning of these cells. The results showed that vincristine induced mitotic arrest of both BBnt and MDCK cells, with consequent entrance into interphasic-multinucleated status. Multinucleated cells did not present features of cell death by apoptosis; they were still viable and able to go further in cell-cycle progression. The presence of many structures suggested microtubule enucleation, centrosomes-like were detected on treated cells and could be responsible for the multi-spindle assembling that leads the multinucleated cells to abnormal divisions. Later on, when the multinucleated cells accumulated more abnormalities they were eliminated from the cell population by apoptosis.