SÁ NETO, Walter Cavalcante. Avaliação da força de adesão de três cimentos endodônticos pelo método do push-out. 2012. 44 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-02-15T16:10:54Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_wcsáneto.pdf: 11529722 bytes, checksum: 9a8b57977fb5b5fef7cbe4c5f74f6bc1 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-02-18T15:46:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_wcsáneto.pdf: 11529722 bytes, checksum: 9a8b57977fb5b5fef7cbe4c5f74f6bc1 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-02-18T15:46:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_wcsáneto.pdf: 11529722 bytes, checksum: 9a8b57977fb5b5fef7cbe4c5f74f6bc1 (MD5) Previous issue date: 2012 / The main aim of endodontic therapy is the cleaning and shaping of the root canal and the complete filling of the entire root canal system. Adhesion is defined as the atomic or molecular attraction between two surfaces that touch, caused by the interfacial force of attraction between the molecules or atoms of both materials. The adhesion can be chemical, mechanical or a combination of both. The perfect adhesion of the filling to the canal walls is a constant search through the improvement and introduction of new materials used in this phase of treatment, with emphasis on the sealer that promotes the union of the solid part of the filling, gutta-percha, to the walls of the root canal. This study aimed to evaluate the bond strength of three root canal sealers by the push-out test, that is quite reliable in view of the accuracy and reproducibility of results. Thirty human upper canines teeth were selected and sectioned at the cementoenamel junction to remove the crown and 2 mm from the apex. All canals were enlarged with Gates-Glidden drills #1-5 and finished the preparation with Peeso drill #6. Between every drill exchange, 1 ml of 2.5% sodium hypochlorite was used as irrigating solution. The roots were sectioned in 1 mm slices and filled according to the root canal sealer, subdividing each group according to the root third (n=25). They were then filled with the sealer as follow: Group 1, AH Plus, Group 2, MTA Fillapex and Group 3 Pulp Canal Sealer. The results showed statistically significant superiority of the AH Plus compared to the other two sealers and Pulp Canal Sealer in relation to the MTA Fillapex. Regarding the root thirds, only the Pulp Canal Sealer´s group showed statistically significant differences, with superiority of the apical third compared to cervical and middle thirds. It is concluded that AH Plus showed the best values of bond strength, regardless of the root third. / Os principais objetivos do tratamento endodôntico são a limpeza, a modelagem do canal radicular e a completa obturação de todo o sistema de canais radiculares. Uma das propriedades exigidas do material obturador é a adesão, que é definida como a atração molecular ou atômica entre duas superfícies que se tocam, causada pela força de atração interfacial existente entre as moléculas ou átomos de dois materiais. A adesão pode ser química, mecânica ou a combinação de ambas. A perfeita adesão da obturação às paredes do canal é uma busca constante através do aprimoramento e lançamento de novos materiais utilizados nessa fase do tratamento, com ênfase no cimento endodôntico, responsável pela união da parte sólida da obturação, a guta percha, às paredes do canal radicular. Este estudo teve como objetivo avaliar a força de adesão de três cimentos endodônticos através do teste de push-out, que é um teste bastante confiável, tendo em vista a precisão dos resultados e sua reprodutibilidade. Trinta caninos superiores humanos extraídos foram selecionados e seccionados na junção cemento-esmalte, descartando-se a coroa e removendo-se 2mm do ápice radicular. Em seguida, os canais radiculares foram preparados com brocas de Gates-Glidden #1 a 5 e finalizados com a broca de Peeso #6, gerando um preparo do canal radicular de forma cilíndrica e com 1,5 mm de diâmetro. Logo após, as raízes foram seccionadas transversalmente em fatias de 1mm de altura, sendo logo após divididas em 3 grupos de acordo com o cimento utilizado e 3 sub grupos, de acordo com o terço radicular (n=25). Os espécimes foram então preenchidos com o cimento da seguinte forma: Grupo 1, cimento AH Plus, Grupo 2, cimento MTA Fillapex e Grupo 3, cimento Pulp Canal Sealer. Os resultados mostraram superioridade com diferença estatisticamente significante do cimento AH Plus em relação aos outros dois cimentos e do Pulp Canal Sealer em relação ao MTA Fillapex. Em relação aos terços radiculares, somente no grupo do Pulp Canal Sealer foram encontradas diferenças estatisticamente significantes, com superioridade do terço apical em relação aos terços cervical e médio. Conclui-se que o cimento AH Plus apresentou os melhores valores de força de adesão, independente do terço radicular.

CARVALHO, Adriana Andrade. Estudo da atividade antimetastática da biflorina, uma o-naftoquinona isolada das raízes da Capraria biflora. 2009. 106 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) -Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-01T16:30:22Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_aacarvalho.pdf: 10168239 bytes, checksum: c82f2913718a7edb557546fc613fab6c (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-05T12:58:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_aacarvalho.pdf: 10168239 bytes, checksum: c82f2913718a7edb557546fc613fab6c (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-05T12:58:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_aacarvalho.pdf: 10168239 bytes, checksum: c82f2913718a7edb557546fc613fab6c (MD5) Previous issue date: 2009 / The main cause of mortality in cancer patients is related to the incidence of secondary tumors in the body. Owning up to the deficiency of therapeutic schemes direct to the treatment of metastasis, many efforts are being launched to develop drugs with anti-metastatic potential. In previous studies performed in our laboratory, biflorin, an o-naphthoquinone isolated from the roots of Capraria biflora, was found to increase the survival rates of B16-bearing mice without significant toxicity. In spite of these findings we decided to evaluate the anti-metastatic activity of biflorin using B16-F10 (murine melanoma) and MDAMB-435 (human melanoma) cells line. The experimental metastasis model was achieved by injecting B16-F10 cells in the tail vein of C57BL/6 mice. In this assay, biflorin (25 and 50 mg/kg/day) inhibited the formation of metastatic nodules in 57 and 71 %, respectively. Nevertheless, histopathological analyses of biflorin-treated lungs showed the presence of erythrocytes and hemosiderin, indicating the occurrence of recent and late hemorrhage. In order to evaluate how biflorin inhibits metastasis, we carried out in vitro tests using two cell lines of metastatic melanoma, B16-F10 and MDAMB-435. In the cell adhesion assay, biflorin inhibited adhesion of both cells lines on type I collagen, a substrate of the extracellular matrix. Moreover, biflorin was able to inhibit cell motility in the wound healing assay. The concentrations used in these assays did not show any cytotoxicity after 24 h of incubation, excluding a false-positive. Even so, in the zymogram assay we observed that biflorin did not alter the release of metallopeptidases -2 and -9 into growth medium, thus excluding this as the means by which biflorin exerts the anti-metastatic effect. These data suggest that biflorin has a promising anti-metastatic potential, as shown by its anti-adhesion and anti-migration properties on metastatic melanoma cell lines, however further studies are indispensable to elucidate its action mechanism. / A principal causa de mortalidade em pacientes com câncer está relacionada com a presença de tumores secundários pelo organismo. Devido a falta de tratamento das metástases, muitos esforços estão sendo lançados para o desenvolvimento de novas drogas com potencial antimetastático. Em estudos realizados em nosso laboratório observamos que a biflorina, uma o-naftoquinona isolada das raízes da Capraria biflora, aumentava a sobrevida dos animais transplantados com o melanoma B16 sem expressiva toxicidade. Diante desse dado resolvemos avaliar a atividade antimetastática desta naftoquinona, em modelos experimentais in vivo e in vitro, utilizando as linhagens celulares B16-F10 (melanoma murino) e MDAMB-435 (melanoma humano). A indução da metástase experimental foi realizada pela inoculação da linhagem celular B16-F10 via veia caudal de animais C57BL/6. Neste ensaio, a biflorina (25 e 50 mg/kg/dia) inibiu a formação dos nódulos metastático em 57 e 71 %, respectivamente. Entretanto, em análise histopatológica dos pulmões dos animais tratados, foi observada a presença de hemácias e hemossiderina, o que indica a presença de hemorragia recente e tardia. Com objetivo de avaliar como a biflorina tem seu efeito sobre a metástase, foram realizados alguns ensaios in vitro utilizando duas linhagens de melanoma metastático: B16-F10 e MDAMB-435. Em ensaio de adesão celular, a biflorina foi capaz de inibir a adesão de ambas as células sobre o colágeno tipo I, um dos constituintes da matriz extracelular. Além disso, em ensaio de migração celular, utilizando o método Wound healing (cicatrização), a biflorina também foi capaz de inibir a motilidade destas células. Vale ressaltar que nesses ensaios foram utilizadas concentrações não-citotóxicas, o que exclue um efeito falso positivo. Por fim, em ensaio de zimograma com gelatina, foi observado que a biflorina não alterava a liberação das metaloproteinases -2 e -9 para o meio de crescimento, excluindo esse mecanismo de ação. Esses resultados sugerem que a biflorina apresenta um potencial antimetastático bastante promissor através da sua ação sobre a adesão e migração celular, eventos cruciais para que ocorra a formação de metástase. Entretanto, futuros estudos são necessários para elucidar seu mecanismo de ação.

SOUZA, Iêda Pereira. Alterações hematológicas e funcionais causadas por venenos de subespécies brasileiras de Crotalus durissus e suas frações isoladas. 2006. 157 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2006. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-06-11T14:03:15Z No. of bitstreams: 1 2006_tese_ipsouza.pdf: 3598629 bytes, checksum: d2c825e9725328ccc51084a6e4a36355 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-06-11T15:30:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_tese_ipsouza.pdf: 3598629 bytes, checksum: d2c825e9725328ccc51084a6e4a36355 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-11T15:30:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_tese_ipsouza.pdf: 3598629 bytes, checksum: d2c825e9725328ccc51084a6e4a36355 (MD5) Previous issue date: 2006 / Venomous snake accidents represent a serious public health problem in tropical countries, as much as for their frequency of occurrence and/or morbidity and mortality that they caused. In Brazil, the genus Crotalus comprise only one species, termed Crotalus durissus, which is divided into six subspecies. The aim of our study was to evaluate the effects promoted by venoms of Crotalus durissus cascavella, originated from the States of Ceará (Cdcc) and Maranhão (Cdcm); C. durissus collilineatus (Cdcol); C. durissus ruruima (Cdru) and its isolated components, such as crotoxin (CTXru) and phospholipase A2 (PLA2ru), in the biological processes of cellular spreading, phagocytosis, hematological alterations and antifungal activity. Male Swiss mice were inoculated intraperitoneally with the venom doses of 120, 50, 27, 20, 10 and 10 µg/Kg, respectively to the snakes described above. After two hours of inoculation blood samples and exudate were collected from orbital plex and peritoneum, respectively. Statistical evaluation was performed using Student-T test with significance level set at 95%. We compared the treated animals with a control group, where animals were inoculated with saline 0.9%. Cdcm and CTXru caused the most severe alterations in the erythrogram. We noticed that 37.5% of the erythrocytes showed macrocytic and microcytic morphology; 25.5% were hipocromic; 25% showed anisocytosis and the presence of polycromasia. We also found Howell Jolly bodies in 16.8% of the examined erythocytes. The total counting of leukocytes was reduced statistically after administration of Cdcc (82.9%), Cdcm (70.1%) and Cdru (83.8%). Cellularity was altered after the inoculation of Cdcc, Cdru and CTXru for all evaluated cells. We noticed a statistic increase of peritoneum total cells caused by Cdcc, Cdcol, Cdru and CTXru. In addition, macrophage was the most predominant cell after peritoneum differential cell counting. However, only Cdcol showed a statistic increase of macrophages (62.3%). We found significant reduction of cellular spreading after administration of all venoms ranging from 52.7 to 65.7%. Phagocytosis was statistically reduced by Cdcc in the periods of 30, 60, 90 and 120 minutes. However, Cdru reduced phagocytosis only at 30, 60 and 90 minutes, Cdcm decreased phagocytosis at 30 and 90 minutes and CTXru in the periods of 60 and 120 minutes. Cdcol and CTXru showed significant fungicide activity against C. albicans in the periods of 30, 60, 90 and 120 minutes, but Cdcc showed similar results at 60, 90 and 120 minutes. We conclude that distinct venoms interfered differently in the intensity of each functional and hematological response. In addition, we postulate that macrophages maybe partially responsible for these alterations. Further studies should be evaluated for the use of venoms as fungicides. / Os acidentes ofídicos de serpentes representam um sério problema de Saúde Pública nos países tropicais, tanto pela freqüência com que ocorrem e/ou pela morbi-mortalidade que ocasionam. As serpentes do gênero Crotalus estão representadas no Brasil pela espécie Crotalus durissus, a qual se divide em seis subespécies. Nosso trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos dos venenos das serpentes Crotalus durissus cascavella originadas do estado do Ceará (Cdcc) e Maranhão (Cdcm); Crotalus durissus collilineatus (Cdcol); Crotalus durissus ruruima (Cdru) e suas frações, Crotoxina (CTXru) e Fosfolipase A2 (PLA2ru), nos processos biológicos de espraiamento celular, fagocitose, atividade fungicida e alterações hematológicas. Camundongos Swiss, machos, foram inoculados por via intraperitonial com os venenos descritos acima, nas doses de 120, 50, 27, 20 (venenos) e 10µg/Kg (frações), respectivamente. Duas horas após inoculação foram coletadas amostras de sangue do plexo orbital e o exsudato peritonial. A análise estatística utilizada foi o teste t de Student com significância de 95%. Os animais tratados foram comparados com o grupo controle (inoculados com salina 0,9%). Cdcm e a CTXru causaram as maiores alterações no eritrograma. 37,5% dos eritrócitos apresentaram morfologia macrocítica e microcítica; 25,5% hipocrômia; 25% com anisocitose e presença de policromasia. Foram observados 16,8% de corpúsculos de Howell Jolly. A contagem global de leucócitos foi reduzida significantemente após administração do Cdcc (82,9%), Cdcm (70,1%) e Cdru (83,8%). A celularidade foi alterada depois da inoculação de Cdcc, Cdru e CTXru, em todos os tipos de células. A contagem global de células do peritônio aumentou após inoculação de Cdcc, Cdcol, Cdru e a CTXru. Em adição, o macrófago foi à célula predominante na contagem diferencial de células peritoniais, contudo, somente a Cdcol apresentou significância estatística para macrófago (62,3%). Foi encontrada redução significativa do espraiamento celular depois da administração de todos os venenos variando de 52,7 a 65,7%. A fagocitose foi estatisticamente reduzida pela Cdcc nos períodos de 30, 60, 90 e 120 minutos. Cdru reduziu a fagocitose apenas em 30, 60 e 120 minutos, Cdcm em 30 e 90 minutos e CTXru nos tempos de 60 e 120 minutos. A Cdcol, e a CTXru mostraram significância na atividade fungicida contra C. albicans nos períodos de 30, 60, 90 e 120 minutos, mas a Cdcc mostrou resultado similar em 60, 90 e 120 minutos. Conclui-se que o veneno interfere diferentemente na resposta hematológica e funcional. Em adição pode-se postular que os macrófagos foram responsáveis por estas alterações. Estudos futuros deverão ser realizados na perspectiva da identificação de provável ação fungicida de venenos ofídicos e suas frações.

Orientador: Fernando Ferreira Costa, Nicola Conran Zorzetto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T23:23:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Canalli_AndreiaAverci_M.pdf: 2541856 bytes, checksum: 4a5f854727702c9e74f05f113fe6ac82 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A hemoglobina S (HbS) é decorrente de uma mutação de ponto que ocasiona a troca do ácido glutâmico pela valina na cadeia polipeptídica da globina beta. Em homozigose, esta alteração genética acarreta a anemia falciforme, que se caracteriza por anemia hemolítica não imune e fenômenos vaso-oclusivos, seguidos de lesões a órgãos alvos, responsáveis pela morbi-mortalidade associada a esta doença. O fenômeno vasooclusivo é associado ao processo inflamatório desencadeado pela polimerização da HbS desoxigenada, favorecendo a impactação das hemácias na microcirculação e subsequente obstrução da luz do endotélio. As integrinas, complexos glicoprotéicos localizadas nas superncies dos leucócitos e células endoteliais, modulam, em parte, as interações moleculares e intercelulares desencadeadas pela reação inflamatória, e são responsáveis pela adesão dos elementos figurados do sangue ao endotélio. Neste estudo nós investigamos o papel dos eosinófilos na anemia falciforme. Análises de amostras de sangue periférico de pacientes com anemia falciforme (AF) demonstraram que o valor absoluto do número de eosinófilos estava três vezes maior no sangue periférico destes pacientes comparados aos indivíduos normais. Adicionalmente, eosinófilos isolados do sangue periférico de pacientes com AF demonstrou significativamentemaior adesão (aproximadamente 70%) para fibronectina (FN) que os eosinófilos de indivíduos normais em ensaios "in vitro" de adesão estática. Co-incubacão de eosinófilos com anticorpos monoclonais específicos para bloqueio da adesão mostrou que as integrinas VLA-4, LFA-I e Mac-l estão envolvidas na adesão de eosinófilos normais e de pacientes falciformes pela fibronectina . A expressão destas integrinas, foi inalterada na supercífie dos eosinófilos dos pacientes falciformes, sugerindo que o aumento da adesão nos pacientes com AF é preferencialmente consequência de aumento da afinidade ou avidez das integrinas do que da expressão. A adesão pela fibronectina nos eosinófilos de pacientes com AF foi aumentada pela citocina GM-CSF, indicando que alguma alteração nos níveis de GM-CSF durante o processo de inflamação pode preferivelmente estimular a adesão dos eosinófilos nestes pacientes. Em contraste, o GMCSF não alterou a adesão dos eosinófilos normais à fibronectina. Em conclusão, nós apresentamos a primeira evidência experimental para demonstrar que os eosinófilos podem participar no processo de vaso-oclusão de pacientes com anemia falciforme. Estudos adicionais poderão ser necessários para determinar a extensa contribuição destas células neste fenômeno / Abstract: A role for leukocytes in vasoocclusion is becoming increasingly recognized. Here we investigate a possible role for the eosinophil in sicklecell anemia (SCA). Analysis of whole blood samples of 59 steady-state SCA patients demonstrated that absolute eosinophil numbers were significantly elevated in these individuaIs. Furthermore, eosinophils isolated from a random selection of these SCA patients demonstrated a significantlygreater adhesion (~70 % increased) to fibronectin (FN) than normal eosinophils in static adhesion assays. Co-incubation of eosinophils with integrin-blocking monoclonal antibodies in adhesion assays showed that an association of the VLA-4, LFA-I and Mac-I integrins mediate the adhesion of SCA eosinophils to FN. Flow cytometry demonstrated that the expression of these integrins, however, was unaltered on the surface of SCA eosinophils, suggesting that the increased SCA eosinophil adhesion is a consequence of increased integrin affinity or avidity. SCA eosinophil adhesion to FN was further increased by the cytokine, GM-CSF, indicating that inflammation processes may further stimulate eosinophil adhesion in these patients. In conc1usion,we report that eosinophil numbers may be significantly increased in SCA individuaIs and that these cells appear to exist in an activated state. Such alterations may indicate a role for the eosinophil in the vasooclusive process / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

O câncer de mama é a neoplasia mais comum entre as mulheres. Existem diversos fatores que estão associados ao desenvolvimento desta neoplasia, que tem etiologia multifatorial e pode se originar de uma combinação de fatores genéticos, hormonais e ambientais. Este estudo teve como objetivo investigar a relação entre níveis séricos de adipocinas e moléculas de adesão com fatores antropométricos e bioquímicos em mulheres com e sem câncer de mama. Participaram do estudo 47 mulheres com câncer de mama e 145 sem a neoplasia. As mulheres com câncer de mama tiveram menos filhos e amamentaram por menos tempo. Encontrou-se correlação inversa para índice de massa corporal (IMC) e circunferência da cintura (CC) com HDL-colesterol em todas as participantes. Adiponectina correlacionou-se inversamente com todas as medidas antropométricas apenas nas mulheres com câncer de mama. PAI-1 correlacionouse diretamente com CC e relação cintura-quadril nas mulheres com a neoplasia. VCAM-1 apresentou correlação inversa com IMC e CC nas mulheres sem câncer de mama, enquanto que a glicemia de jejum teve correlação direta com estas medidas. Para cada aumento de 1ng/ml de adiponectina, PAI-1 e ICAM-1 ocorre, respectivamente, aumento de 0,8%, 5,2% e 4,3% no risco de desenvolver câncer de mama. Assim, mulheres com câncer de mama apresentam níveis séricos elevados de adiponectina, PAI-1, VCAM-1 e ICAM-1, apesar de terem médias de IMC menores. / Breast cancer is the most common neoplasia among women. There are several factors that are associated with the development of this neoplasia, which has a multifactoral etiology and can arise from a combination of genetic, hormonal and environmental factors. This study aimed to investigate the relationship between serum levels of adipokines and adhesion molecules with anthropometric and biochemical factors in women with and without breast cancer. 47 women with breast cancer and 145 without neoplasia participated in the study. Women with breast cancer had fewer children and breastfed for less time. We found an inverse correlation for body mass index (BMI) and waist circumference (WC) with HDL cholesterol in all participants. Adiponectin was inversely correlated with all anthropometric measures only in women with breast cancer. PAI-1 was directly correlated with WC and WHR in women with neoplasia. VCAM-1 was inversely correlated with BMI and WC in women without breast cancer, while fasting glycemia had a direct correlation with these measures. For every 1ng/ml increase of adiponectin, PAI-1 and ICAM-1 there is, respectively, an increase of 0.8%, 5.2% and 4.3% in risk of developing breast cancer. Therefore, women with breast cancer have high serum levels of adiponectin, PAI-1, VCAM-1 and ICAM-1, despite having lower BMI mean.

CARVALHO, Adriana Andrade. Estudo do potencial antimetastático da biflorina. 2011. 120 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-17T16:41:14Z No. of bitstreams: 1 2011_tese_aacarvalho.pdf: 3712281 bytes, checksum: 36af52d1a88594761d0fb719bb12a56a (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-05-18T13:03:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_tese_aacarvalho.pdf: 3712281 bytes, checksum: 36af52d1a88594761d0fb719bb12a56a (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-18T13:03:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_tese_aacarvalho.pdf: 3712281 bytes, checksum: 36af52d1a88594761d0fb719bb12a56a (MD5) Previous issue date: 2011 / Metastasis remains the leading cause of death from cancer. Due to the absence of pharmacological therapy for the treatment of secondary tumors, the search for new drugs with antimetastatic potential is important to the development of new anticancer drugs. In this context we decided to evaluate the antimetastatic potential of biflorin, an o-naphthoquinone isolated from roots of Capraria biflora. In cell proliferation assay using Alamar blue, we found that this quinone has cytotoxic activity against human melanoma cells line (MDAMB-435) at 5 µM concentration during 24 hours of exposure. However, with this same dose, there was no cytotoxic effect within 12 hours of exposure. Trypan blue and crystal violet assay showed that biflorina has no cytotoxic effect at 1.0, 2.5 and 5.0 µM during 12 hours of exposure. Migration assay and cell invasion assay were performed using concentrations of 1.0, 2.5 and 5.0 µM (12h exposure). In these trials we found that biflorin decreases cell motility and invasiveness. In morphological analysis of cells stained using May-Grunwald-Giemsa and actin stain by phalloidin, we observed that biflorin alters the organization of the actin cytoskeleton, with the presence of smaller, retracted and larger cells. In Western blot assay we observed a decrease in the expression of the adhesion molecule N-cadherin and inhibition of PI3K/AKT signaling pathway. These results give biflorin as an agent with promising antimetastatic potential. / A presença de metástase permanece como a principal causa de morte pelo câncer. Diante da ausência de terapia farmacológica para o tratamento de tumores secundários, a pesquisa de novas drogas com potencial antimetastático é de suma importância para o desenvolvimento de novos fármacos anticâncer. Neste quadro, decidimos avaliar o potencial antimetastático da biflorina, uma o-naftoquinona isolada das raízes da Capraria biflora. Em ensaio de proliferação celular por Alamar blue, observamos que esta quinona possui atividade citotóxica contra melanoma humano (MDAMB-435) a partir da concentração 5 µM em 24h de exposição. Porém, nessa mesma dose, não houve efeito citotóxico em 12h de exposição. Ensaios de azul de tripan e cristal violeta mostraram que nas concentrações de 1,0; 2,5 e 5,0 µM durante 12h de exposição a biflorina não possui efeito citotóxico. Utilizando as concentrações de 1,0; 2,5 e 5,0 µM (12h exposição) foram realizados ensaio de migração e invasão celular. Nestes ensaios observamos que a biflorina diminui a motilidade e a invasividade da célula MDAMB-435. Em análise morfológica das células, utilizando coloração de May-Grunwald-Giemsa e coloração de actina por faloidina, observamos que a biflorina altera a organização do citoesqueleto de actina, com a presença de células menores, retraídas e células maiores com expansões filamentosas semelhantes à filopódios. Em ensaio de Western blot observou-se a diminuição na expressão da molécula de adesão N-caderina e inibição da via de sinalização PI3K/Akt. Estes resultados conferem à biflorina um potencial antimetastático bastante promissor.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2011. / Submitted by Juliane Alves (juliane_570@hotmail.com) on 2012-04-05T18:58:22Z No. of bitstreams: 1 2011_VitórioCamposdaSilva.pdf: 3279628 bytes, checksum: 49f1f7cd5a12944901cf37c8f07ae3a6 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2012-04-10T18:43:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_VitórioCamposdaSilva.pdf: 3279628 bytes, checksum: 49f1f7cd5a12944901cf37c8f07ae3a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-04-10T18:43:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_VitórioCamposdaSilva.pdf: 3279628 bytes, checksum: 49f1f7cd5a12944901cf37c8f07ae3a6 (MD5) / A estabilidade do titânio (Ti) e sua alta resistência à corrosão, fizeram do mesmo o elemento de escolha na implantodontia e estão relacionadas, dentre outros fatores, com a camada natural de óxido na sua superfície. Vários tratamentos tem sido utilizados para modificar sua topografia e energia de superfície, no intuito de promover melhor adesão, migração e proliferação celular, diminuindo o tempo necessário para a osteointegração. Diferentes superfícies provavelmente influenciam de maneira distinta a resposta inflamatória e eventos celulares como ativação de leucócitos, cicatrização e osteogênese. A adesão de plaquetas e geração de fibrina, bem como a ativação do sistema complemento, resultam na ativação e recrutamento de neutrófilos. Durante a colocação de um implante, a adsorção de pequenos íons e proteínas plasmáticas ocorre na superfície, sendo responsável por subseqüentes respostas celulares. Portanto, a compreensão do papel dos neutrófilos humanos nas interações que ocorrem nas superfícies implantares, e a influencia da composição elementar bem como, dos diversos tratamentos aplicados a essas superfícies é de grande importância. A otimização para uso clínico dos materiais utilizados na confecção de implantes requer modificações controladas de suas superfícies. No presente, as relações entre tais superfícies e sua reatividade com os tecidos, bem como sua integridade a longo prazo, são pouco conhecidos. O objetivo do presente estudo foi comparar a resposta de neutrófilos interagindo diretamente com duas distintas superfícies de Ti em diferentes tempos de incubação. Neutrófilos humanos foram separados e colocados em contato com discos de Ti, lisos e rugosos. Para a análise da adesão celular foram utilizadas a microscopia eletrônica de varredura (MEV) e a citometria de fluxo (Facs). A morfologia e o resultado do uso de marcadores de adesão revelaram sinais de ativação dos neutrófilos por ambas as superfícies. As características morfológicas nas duas superfícies mostraram progressivas alterações durante os primeiros 120 minutos da interação. Utilizou-se também a microscopia de fluorescência e marcadores como o Dapi, Faloidina e anti CD-62L para caracterizar, respectivamente, o núcleo celular, o citoesqueleto actínico e receptores de membrana. Não houve correlação entre a força de adesão, alterações morfológicas, complexidade do citoesqueleto e expressão dos marcadores CD-62L e CD-11b, considerados, após os tempos de interação das células com as superfícies. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The stability and high corrosion-resistance of the titanium (Ti) makes it, the element of choice in implantology and its related, among other factors, with the natural oxide layer that covers the Ti surface. Many treatments have been used to modify its topography and surface energy in order to promote better cell adhesion, migration and proliferation shortening the time necessary to the osseointegration. Different surfaces probably influence distinctly the inflammatory responses and cellular events as leukocyte activation, healing and osteogenesis. The platelet adhesion and fibrin generation as well as the complement activation results in the neutrophil recruitment and activation. At the time of an implant placement plasma proteins and ions adsorb to the surface and are responsible for subsequent cellular responses. So the comprehension of the human neutrophils role on the interactions network that occurs on the implant surfaces and the influence of the elemental composition as well as different surface treatments applied are of great importance. The optimization for clinical use of the materials used to construct implants need controlled modifications on its surfaces. At the present the relationship between these surfaces and its reactivity with tissues for a long period of time are little known. The aim of the present study was to compare the response of neutrophils interacting with two different Ti surfaces and different time contact. Isolated human neutrophils were placed into contact with Ti discs, which had been rendered as “smooth” or “rough” following different surface treatments. Scanning electron microscopy and flow cytometry were used to analize the cell adhesion to the surfaces and the exposure of membrane proteins such as CD-62L and CD-11b. Topographic roughness was demonstrated as higher for the SLA treated surfaces, measured by atomic force microscopy and elemental analysis was performed by energy dispersive X-ray, showing a similar composition for both surfaces. The cell morphology and adhesion marker results revealed signs of neutrophil activation by either surface, with different neutrophil morphological characteristics being observed between the 2 surface types and progressive morphologic changes during the first 120 min of interaction. Topoghrafic analyses were also performed by the use of atomic force microscopy. Fluorescence microscopy (AFM) and markers as Dapi, Faloidin and CD 62L were also utilized in order to characterize the cellular nucleous, actin cytoskeleton and membrane receptors. There is no correlation between adhesive forces, morphologycal changes, citoskeletal complexity and marker expression as anti CD-62L or CD-11b on the evaluated interaction time of the cells with the surfaces.

O câncer de mama é a neoplasia mais comum entre as mulheres. Existem diversos fatores que estão associados ao desenvolvimento desta neoplasia, que tem etiologia multifatorial e pode se originar de uma combinação de fatores genéticos, hormonais e ambientais. Este estudo teve como objetivo investigar a relação entre níveis séricos de adipocinas e moléculas de adesão com fatores antropométricos e bioquímicos em mulheres com e sem câncer de mama. Participaram do estudo 47 mulheres com câncer de mama e 145 sem a neoplasia. As mulheres com câncer de mama tiveram menos filhos e amamentaram por menos tempo. Encontrou-se correlação inversa para índice de massa corporal (IMC) e circunferência da cintura (CC) com HDL-colesterol em todas as participantes. Adiponectina correlacionou-se inversamente com todas as medidas antropométricas apenas nas mulheres com câncer de mama. PAI-1 correlacionouse diretamente com CC e relação cintura-quadril nas mulheres com a neoplasia. VCAM-1 apresentou correlação inversa com IMC e CC nas mulheres sem câncer de mama, enquanto que a glicemia de jejum teve correlação direta com estas medidas. Para cada aumento de 1ng/ml de adiponectina, PAI-1 e ICAM-1 ocorre, respectivamente, aumento de 0,8%, 5,2% e 4,3% no risco de desenvolver câncer de mama. Assim, mulheres com câncer de mama apresentam níveis séricos elevados de adiponectina, PAI-1, VCAM-1 e ICAM-1, apesar de terem médias de IMC menores. / Breast cancer is the most common neoplasia among women. There are several factors that are associated with the development of this neoplasia, which has a multifactoral etiology and can arise from a combination of genetic, hormonal and environmental factors. This study aimed to investigate the relationship between serum levels of adipokines and adhesion molecules with anthropometric and biochemical factors in women with and without breast cancer. 47 women with breast cancer and 145 without neoplasia participated in the study. Women with breast cancer had fewer children and breastfed for less time. We found an inverse correlation for body mass index (BMI) and waist circumference (WC) with HDL cholesterol in all participants. Adiponectin was inversely correlated with all anthropometric measures only in women with breast cancer. PAI-1 was directly correlated with WC and WHR in women with neoplasia. VCAM-1 was inversely correlated with BMI and WC in women without breast cancer, while fasting glycemia had a direct correlation with these measures. For every 1ng/ml increase of adiponectin, PAI-1 and ICAM-1 there is, respectively, an increase of 0.8%, 5.2% and 4.3% in risk of developing breast cancer. Therefore, women with breast cancer have high serum levels of adiponectin, PAI-1, VCAM-1 and ICAM-1, despite having lower BMI mean.

O câncer de mama é a neoplasia mais comum entre as mulheres. Existem diversos fatores que estão associados ao desenvolvimento desta neoplasia, que tem etiologia multifatorial e pode se originar de uma combinação de fatores genéticos, hormonais e ambientais. Este estudo teve como objetivo investigar a relação entre níveis séricos de adipocinas e moléculas de adesão com fatores antropométricos e bioquímicos em mulheres com e sem câncer de mama. Participaram do estudo 47 mulheres com câncer de mama e 145 sem a neoplasia. As mulheres com câncer de mama tiveram menos filhos e amamentaram por menos tempo. Encontrou-se correlação inversa para índice de massa corporal (IMC) e circunferência da cintura (CC) com HDL-colesterol em todas as participantes. Adiponectina correlacionou-se inversamente com todas as medidas antropométricas apenas nas mulheres com câncer de mama. PAI-1 correlacionouse diretamente com CC e relação cintura-quadril nas mulheres com a neoplasia. VCAM-1 apresentou correlação inversa com IMC e CC nas mulheres sem câncer de mama, enquanto que a glicemia de jejum teve correlação direta com estas medidas. Para cada aumento de 1ng/ml de adiponectina, PAI-1 e ICAM-1 ocorre, respectivamente, aumento de 0,8%, 5,2% e 4,3% no risco de desenvolver câncer de mama. Assim, mulheres com câncer de mama apresentam níveis séricos elevados de adiponectina, PAI-1, VCAM-1 e ICAM-1, apesar de terem médias de IMC menores. / Breast cancer is the most common neoplasia among women. There are several factors that are associated with the development of this neoplasia, which has a multifactoral etiology and can arise from a combination of genetic, hormonal and environmental factors. This study aimed to investigate the relationship between serum levels of adipokines and adhesion molecules with anthropometric and biochemical factors in women with and without breast cancer. 47 women with breast cancer and 145 without neoplasia participated in the study. Women with breast cancer had fewer children and breastfed for less time. We found an inverse correlation for body mass index (BMI) and waist circumference (WC) with HDL cholesterol in all participants. Adiponectin was inversely correlated with all anthropometric measures only in women with breast cancer. PAI-1 was directly correlated with WC and WHR in women with neoplasia. VCAM-1 was inversely correlated with BMI and WC in women without breast cancer, while fasting glycemia had a direct correlation with these measures. For every 1ng/ml increase of adiponectin, PAI-1 and ICAM-1 there is, respectively, an increase of 0.8%, 5.2% and 4.3% in risk of developing breast cancer. Therefore, women with breast cancer have high serum levels of adiponectin, PAI-1, VCAM-1 and ICAM-1, despite having lower BMI mean.

Orientadores: Fatima Aparecida Bottcher Luiz, Liliana Aparecida Lucci De Angelo Andrade / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:09:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marques_FrancesRoveri_M.pdf: 1209081 bytes, checksum: 21eb4d322e727b922989a2628412e24d (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Mudanças no padrão de expressão das moléculas de adesão são observadas no desenvolvimento tumoral em diferentes tipos de câncer, estando relacionadas com invasão e metástase. O objetivo deste estudo foi analisar e comparar os padrões de expressão de a- e b-cateninas, E- e N-caderinas em tumores malignos e benignos do epitélio ovariano de superfície, visando estabelecer possíveis correlações entre a expressão destas moléculas, o estádio tumoral e a manifestação de metástases, nas neoplasias malignas. Preparações de imunoistoquímica foram obtidas a partir de 88 biópsias (39 benignas e 49 malignas) incluídas em parafina, procedentes de mulheres submetidas à cirurgia para retirada dos ovários no período de 1993 a 2001, no hospital da Universidade Estadual de Campinas. Estas foram avaliadas segundo o número de células positivas, as estruturas celulares e a intensidade da reação para cada uma das moléculas analisadas. Os resultados mostraram que a maioria dos tumores malignos apresentou reações imunoistoquímicas de maior intensidade (p=0,01) para b-catenina, além de maior número de células positivas para a-catenina (p=0,04). Os carcinomas endometrióides apresentaram expressão aumentada de b-catenina, tanto em número de células positivas (p=0,04) como também na intensidade das reações (p=0,01). Os tumores malignos onde a marcação para E-caderina manteve-se preservada na membrana corresponderam aos casos que não evoluíram para metástases, enquanto os tumores malignos que apresentaram expressão nula ou restrita ao citoplasma, para esta proteína, evoluíram como recidivas da doença (p=0.04). Considerando estes dados, a E-caderina pode ser um bom marcador de prognóstico para câncer de ovário. Paralelamente, a expressão de b- e a-cateninas aparece estatisticamente aumentada nos tumores malignos, sugerindo a possível utilização destes como marcadores discriminantes de malignidade. Quanto à N-caderina, os dados mostraram que a expressão desta está relacionada mais precisamente ao tipo histológico dos tumores, do que com o estádio tumoral ou evolução dos casos / Abstract: Changes in the expression pattern of the adhesion molecules are observed in the malignant development of different types of cancer, being related with tumor cell invasion and metastasis. The aim of this study was to analyze and compare the expression patterns of a- and b-catenins, E- and N-cadherins in benign and malignant tumors of the ovarian surface epithelium, trying to establish possible correlations between the expression of these molecules, the tumor staging and the manifestation of metastasis in the malignant neoplasias. Immunohistochemical preparations, obtained from 88 paraffin-embedded biopsies (39 benign and 49 malignant) taken from women who underwent surgery for the resection of the ovaries from 1993 to 2001, in the hospital of the State University of Campinas. These samples were evaluated accordingly to the number of positive cells, stained cellular structures and reaction intensity for each one of the analyzed molecules. The results showed that most of the malignant tumors presented more intense b-catenin immunoreactions (p=0,01) and also a bigger number of a-catenin positive cells (p=0,04). Endometrioid carcinomas presented increased expression of b-catenin, in number of positive cells (p=0,04) and in the intensity of the immunoreactions (p=0,01). Malignant tumors where the E-cadherin staining was preserved in the membrane showed no metastasis, whereas E-cadherin negative cases or cases which presented E-cadherin expression just in the cytoplasm had metastasis in their evolution (p= 0,04). Considering these results, E-cadherin might be a marker of prognosis value in ovarian cancer. In addition, the increased expression of b- and a-catenin in malignant ovarian tumors suggests the use of these molecules as markers of malignancy. This data also showed that the N-cadherin expression was correlated with different histologic ovarian tumor types, but not with tumor staging or case evolution / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas