No abstract available. / Dissertation (MSc)--University of Pretoria, 2011. / Microbiology and Plant Pathology / unrestricted

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-23Bitstream added on 2014-06-13T19:03:41Z : No. of bitstreams: 1 carneiro_aaj_dr_rcla_parcial.pdf: 344876 bytes, checksum: f4257e3a50f28d8e5fbbfc16ac265fb6 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-04T11:39:25Z: carneiro_aaj_dr_rcla_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-02-04T11:40:11Z : No. of bitstreams: 1 000687526.pdf: 2190725 bytes, checksum: 76a291fbe3368473b4a2340b9a8996c5 (MD5) / As glucanas fúngicas têm sido muito estudadas por apresentarem respostas biológicas benéficas à saúde. O Agaricus blazei, conhecido popularmente como cogumelo do sol, é um basidiomiceto que apresenta propriedades funcionais devido às β-glucanas. Os fungos Trichoderma harzinaum e Trichoderma reesei foram capazes de se desenvolverem em Agaricus blazei em pó como única fonte de carbono produzindo β-1,3-glucanases, analisadas por superfície de resposta. As enzimas hidrolisaram β-glucanas de A. blazei e produziu glucose e diferentes glucooligossacarídeos. As enzimas brutas do T. harzianum e T. reesei hidrolisaram menos de 15 % de glucana e em torno de 40 % de laminarina (β-1,3 glucana comercial), após 60 minutos, respectivamente. Utilizando a β-1,3-glucanase bruta de T. harzianum foram detectados gentiobiose e laminaritriose nos hidrolisados enzimáticos de β- glucana e laminarina, enquanto a laminaritetraose, celotetraose e celotriose foram identifificados e quantificados apenas nos hidrolisados de β-glucana de A. blazei. A ação da β- 1,3-glucanase bruta de T. reesei sobre a laminarina e glucana de A. blazei resultou em glicose e gentiobiose. O que sugere uma possível diferença na ação catalítica das duas enzimas. As enzimas parcialmente purificadas do T. harzianum e T. reesei hidrolisaram 47 e 85 % de laminarina, respectivamente. A β-1,3-glucanase purificada de T. harzianum não degradou a glucana de A. blazei, e a enzima purificada de T. reesei degradou 2,6 % de glucana, após 60 minutos, no entanto, gentiobiose e laminaritriose foram detectados no hidrolisado de laminarina. Utilizando a enzima parcialmente purificada de T. reesei gentiobiose foi detectado no hidrolisado de glucana e de laminarina, e celotriose e laminaritriose foram detectados apenas no hidrolisado de laminarina. A fim de conhecer melhor... / Fungal glucans have been studied extensively because of their biological responses, which have been shown to possess health benefits. Agaricus blazei, commonly known as mushroom of the sun, is a basidiomycete that has functional properties because of its β-glucans. The fungi Trichoderma harzinaum and Trichoderma reesei were able to develop in a powdered form of A. blazei, which served as the only carbon source. The result was the production of β- 1,3-glucanases, which were analyzed using response surface methodology. The enzymes hydrolyzed the β-glucans of A. blazei, and produced glucose and different glucooligosaccharides. The crude enzymes of T. harzianum and T. reesei hydrolyzed less than 15% of glucan and approximately 40% of laminarin after 60 minutes, respectively. Using crude β-1,3-glucanase from T. harzianum, gentiobiose and laminaritriose were detected in enzymatic hydrolysates of β-glucan and laminarin, while laminaritetraose, cellotriose and celotetraose were identified and quantified only in the hydrolysates of the β-glucan of A. blazei. The action of the crude β-1,3-glucanase of T. reesei on the laminarin and glucan of A. blazei resulted in glucose and gentiobiose. These results suggest a possible difference in the catalytic action of the two enzymes. The partially purified enzymes of T. harzianum and T. reesei hydrolyzed 47% and 85% of laminarin, respectively. The purified β-1,3-glucanase from T. harzianum did not degrade the glucan of A. blazei, and the purified enzyme from T. reesei degraded 2.6% of the glucan after 60 minutes; however, gentiobiose and laminaritriose were detected in the hydrolyzates of laminarin. Using partially purified enzymes from T. reesei, gentiobiose was detected in the hydrolyzates of both glucan and laminarin, and laminaritriose and cellotriose and were detected... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-05-18Bitstream added on 2014-06-13T21:02:47Z : No. of bitstreams: 1 zied_dc_dr_botfca.pdf: 557370 bytes, checksum: 69bf54c16ee07efb02b42fdaa6383349 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O cogumelo Agaricus subrufescens [A. blazei (Murrill) ss. Heinemann] vem sendo muito estudado em várias partes do mundo devido às suas propriedades medicinais e farmacológicas. Como substância de interesse, na parede celular do fungo, tem-se a presença de polissacarídeos chamados β-glucanas, os quais possuem função estrutural. Poucos estudos são encontrados na literatura sobre quais fatores influenciam a concentração de β – glucana nos basidiomas; para isso foram realizados 3 experimentos a fim de se entender melhor o processo. O primeiro experimento teve como objetivo avaliar a influência do processo de compostagem “Indoor” no comportamento agronômico do A. subrufescens e nas características químicas dos basidiomas, sendo analisados os cogumelos “in natura”, desidratados e liofilizados. Para isso, o experimento constou de um fatorial simples com 3 compostos (provindos de diferentes centrais de compostagem “Indoor”, os quais foram produzidos através de distintos métodos), com 5 repetições cada tratamento. O fator composto afetou a produtividade e o número de basidiomas, porém não afetou a massa de basidiomas, a precocidade e o tempo para o primeiro fluxo. O processo de compostagem para o cultivo de A. subrufescens não está totalmente conhecido, sendo necessárias maiores pesquisas com enfoque de manejo, métodos e formulações a serem utilizadas para a produção de composto. O método de desidratação de basidiomas para sua conservação se mostrou eficiente (pouca mudança nas características químicas dos cogumelos foram observadas) e não possui um custo elevado de processamento quando comparado com o método de liofilização... / The mushroom Agaricus subrefescens Peck [A. blazei (Murrill) ss. Heinemann] has been widely studied in various parts of the world, because their medical and pharmacological properties. As substances of interest, on the cell wall of fungi, there is the presence of polysaccharides called β-glucans, which have structural function. Few results are found in the literature about which factors influence the concentration of β - glucan in the mushrooms. For these, 3 experiments were carried out in order to better understand this particular case. The first experiment aimed to evaluate the influence of the Indoor composting process in the agronomic performance (yield, number and weight of basidiocarps, precociousness and earliness) of A. subrufescens and their chemical characteristics of basidiocaps, had been analyzed the mushrooms in natura, dehydrated and freeze-dried. The experiment followed a simple factorial with 3 composts (coming from different composting Indoor installations, which were produced through varied methods) with five replicates per treatment. The compost factor affected the yield and the number of basidiocarps, but not affected the weight of the basidiocarps, the precociousness and the earliness. The compost process for the cultivation of A. subrufescens is still unknown, requiring further research with management approaches, methods and formulations to be used for the production of the compost. The method of dehydration of the basidiocarps for its conservation is efficient (little change in the chemical characteristics of the mushrooms was observed) and does not have a high cost of production when compared to the freeze-dried. The second experiment aimed to analyze the agronomic performance (yield, number and weight of basidiocarps, precociousness and earliness) and the medicinal potential (β-glucan) of A. subrufecens, according to the different strains... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1999-04-20Bitstream added on 2014-06-13T19:01:57Z : No. of bitstreams: 1 braga_gc_dr_botfca.pdf: 432107 bytes, checksum: 7b22fe235f002c836b40e7a4ee958ec6 (MD5) / Dado à escassez de informações ou relatos técnico-científicos sobre o cultivo protegido de Agaricus blazei Murril, este trabalho teve como objetivos, avaliar os efeitos do ambiente de cultivo, da massa do substrato, da espessura da camada de cobertura e de choques térmicos no substrato de cultivo, na frutificação e produtividade de cogumelos A. blazei. Foram realizados dois experimentos. O primeiro constou da avaliação de três espessuras da camada de cobertura (3, 5 e 8 cm), duas massas de substrato (5 e 10kg) e dois ambientes de cultivo protegido (ambiente coberto com bambu e estufa coberta com lona plástica). O substrato de cultivo foi acondicionado em caixas plásticas, representando as parcelas experimentais. Cada tratamento foi constituído por 5 parcelas experimentais. O segundo experimento foi constituído por 5 tratamentos, sendo 3 com choques térmicos de 15oC e 2 controles (15oC e 25oC). Os choques térmicos foram aplicados no substrato de cultivo variando o número de choques e a duração de cada um, sendo tratamento 1: três choques térmicos com duração de 24 horas cada e em intervalos de 21 dias; tratamento 2: três choques térmicos com duração de 72 horas cada e em intervalos de 21 dias e tratamento 3: um choque térmico com duração de 72 horas. Nesse experimento, o cultivo foi realizado em uma sala escura sob condições controladas de temperatura (25oC) e umidade relativa do ar (80%). Os resultados foram obtidos a partir de 4 períodos de 21 dias de mensurações, que constituíam os intervalos entre os choques. Em função desses dois experimentos, foi realizada uma terceira avaliação onde se determinou a produtividade máxima, a taxa máxima de produtividade e o tempo de início de produção, em função dos três ambientes de cultivo referidos nesses dois experimentos. A partir dos resultados, concluiu-se que: no inverno, o ambiente coberto com plástico... / Given the shortage of information and technical scientific reports on the protected cultivation of A. blazei, the objectives of this work were to evaluate the effects of cultivation environment, mass of the substrate, thickness of the casing layer, and thermal shocks in the cultivation substrate, on the growth and productivity of the mushroom A. blazei Murril. To obtain the results, two experiments were performed. The first consisted of evaluating three thicknesses of casing layer (3, 5 and 8 cm), two substrates of different masses (5 and 10kg) and two types of protected cultivation (covered with bamboo and in a greenhouse covered with blue plastic canvas). in plastic boxes. Each different treatment was performed on 5 units (plastic boxes) of cultivation substrate. The second experiment consisted of five units, three with thermal shocks and one a control. The thermal shocks were applied to the cultivation substrate in varying number and duration, treatment 1 being: three thermal shocks of 24 hours duration; treatment 2: three thermal shocks of 72 hours duration, and treatment 3: one thermal shock of 72 hours duration. In this experiment, cultivation was carried out under controlled conditions in a room at temperature (25oC) and relative humidity (80%). The measurements were taken and shocks applied at four 21 day intervals. After these two experiments, a third evaluation was accomplished determining the maximum productivity, the maximum rate of production and the beginning time of production, in relation to the three cultivation environments used in the two experiments. From these results, it was concluded that: in the winter, the greenhouse covered with plastic, promoted more favourable environmental conditions for the production of A. blazei, than the structure covered with bamboo; in the greenhouse, casing layers of 5 and 8 cm thickness were more productive than the 3 cm layer... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Roberto da Silva / Banca: Adalberto Pessoa Junior / Banca: Inês Conceição Roberto / Banca: Eleonora Cano Carmona / Banca: Eleni Gomes / Resumo: As glucanas fúngicas têm sido muito estudadas por apresentarem respostas biológicas benéficas à saúde. O Agaricus blazei, conhecido popularmente como cogumelo do sol, é um basidiomiceto que apresenta propriedades funcionais devido às β-glucanas. Os fungos Trichoderma harzinaum e Trichoderma reesei foram capazes de se desenvolverem em Agaricus blazei em pó como única fonte de carbono produzindo β-1,3-glucanases, analisadas por superfície de resposta. As enzimas hidrolisaram β-glucanas de A. blazei e produziu glucose e diferentes glucooligossacarídeos. As enzimas brutas do T. harzianum e T. reesei hidrolisaram menos de 15 % de glucana e em torno de 40 % de laminarina (β-1,3 glucana comercial), após 60 minutos, respectivamente. Utilizando a β-1,3-glucanase bruta de T. harzianum foram detectados gentiobiose e laminaritriose nos hidrolisados enzimáticos de β- glucana e laminarina, enquanto a laminaritetraose, celotetraose e celotriose foram identifificados e quantificados apenas nos hidrolisados de β-glucana de A. blazei. A ação da β- 1,3-glucanase bruta de T. reesei sobre a laminarina e glucana de A. blazei resultou em glicose e gentiobiose. O que sugere uma possível diferença na ação catalítica das duas enzimas. As enzimas parcialmente purificadas do T. harzianum e T. reesei hidrolisaram 47 e 85 % de laminarina, respectivamente. A β-1,3-glucanase purificada de T. harzianum não degradou a glucana de A. blazei, e a enzima purificada de T. reesei degradou 2,6 % de glucana, após 60 minutos, no entanto, gentiobiose e laminaritriose foram detectados no hidrolisado de laminarina. Utilizando a enzima parcialmente purificada de T. reesei gentiobiose foi detectado no hidrolisado de glucana e de laminarina, e celotriose e laminaritriose foram detectados apenas no hidrolisado de laminarina. A fim de conhecer melhor... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fungal glucans have been studied extensively because of their biological responses, which have been shown to possess health benefits. Agaricus blazei, commonly known as "mushroom of the sun," is a basidiomycete that has functional properties because of its β-glucans. The fungi Trichoderma harzinaum and Trichoderma reesei were able to develop in a powdered form of A. blazei, which served as the only carbon source. The result was the production of β- 1,3-glucanases, which were analyzed using response surface methodology. The enzymes hydrolyzed the β-glucans of A. blazei, and produced glucose and different glucooligosaccharides. The crude enzymes of T. harzianum and T. reesei hydrolyzed less than 15% of glucan and approximately 40% of laminarin after 60 minutes, respectively. Using crude β-1,3-glucanase from T. harzianum, gentiobiose and laminaritriose were detected in enzymatic hydrolysates of β-glucan and laminarin, while laminaritetraose, cellotriose and celotetraose were identified and quantified only in the hydrolysates of the β-glucan of A. blazei. The action of the crude β-1,3-glucanase of T. reesei on the laminarin and glucan of A. blazei resulted in glucose and gentiobiose. These results suggest a possible difference in the catalytic action of the two enzymes. The partially purified enzymes of T. harzianum and T. reesei hydrolyzed 47% and 85% of laminarin, respectively. The purified β-1,3-glucanase from T. harzianum did not degrade the glucan of A. blazei, and the purified enzyme from T. reesei degraded 2.6% of the glucan after 60 minutes; however, gentiobiose and laminaritriose were detected in the hydrolyzates of laminarin. Using partially purified enzymes from T. reesei, gentiobiose was detected in the hydrolyzates of both glucan and laminarin, and laminaritriose and cellotriose and were detected... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

No direct stimulation of human peripheral blood mononuclear cells proliferation could be detected with incubation of various AB extracts including JAB80E70 in vitro. However, ex vivo assay performed using BALB/c mice orally fed with either water (control) or JAB80E70 for 28 days indicated for the first time that extract-treated groups significantly lowered the ex vivo mitogen-stimulated lymphocyte proliferation. / Our study started with the preparations of different AB extracts using various solvent systems with or without heating. Among all AB extracts tested, the extract JAB80E70 (extracted with 70% v/v ethanol at 80°C) showed the strongest selective suppression on the growth of human leukemia NB-4 and K-562 cells. The anti-leukemia effect of JAB80E70 was also confirmed in vivo using xenografted NB-4 bearing athymic nude mice model. / Phytochemical studies suggested that the selective anti-leukemia activity of JAB80E70-W-B-1 was retained in a relatively polar sub-fraction. One compound was isolated and identified as adenosine from JAB80E70-W-B-1. To the best of our knowledge, this is the first report of the presence of adenosine in AB, even though it exhibited no anti-leukemia activity in vitro. / The mushroom Agaricus blazei (AB) is traditionally used as a remedy against various cancers, infections and immune-related diseases. In the present study, the underlying mechanisms of the anti-tumor and immunomodulatory effects of AB extracts on human leukemia cells were systematically investigated. / With bioassay-guided fractionation, a sub-fraction (JAB80E70-W-B-1) with almost 5-fold improved selective cytotoxicity towards NB-4 cells was obtained. Both JAB80E70 and JAB80E70-W-B-1 could induce apoptosis characteristic DNA fragmentation and nucleosomes enrichment in NB-4 cells. An increase in the pro-apoptotic and a decrease in the anti-apoptotic Bcl-2 family proteins expression were observed in NB-4 cells treated with JAB80E70-W-B-1. JAB80E70-W-B-1 was also found to enhance activities of caspases 3, 8 and 9 in NB-4 cells. However, the activation of caspases 3 and 9 was not affected by the inhibition of caspase 8. Furthermore, JAB80E70-W-B-1 induced apoptosis in NB-4 cells was accompanied by a significant reduction in mitochondria membrane potential and telomerase activity. These results demonstrated that JAB80E70-W-B-1 induced apoptosis in NB-4 cells was dependent on caspase activity, and involved multiple molecular pathways. / Jiang, Jingjing. / Adviser: Lau Bik San Clara. / Source: Dissertation Abstracts International, Volume: 70-06, Section: B, page: 3454. / Thesis (Ph.D.)--Chinese University of Hong Kong, 2008. / Includes bibliographical references (leaves 224-250). / Electronic reproduction. Hong Kong : Chinese University of Hong Kong, [2012] System requirements: Adobe Acrobat Reader. Available via World Wide Web. / Electronic reproduction. [Ann Arbor, MI] : ProQuest Information and Learning, [200-] System requirements: Adobe Acrobat Reader. Available via World Wide Web. / Abstracts in English and Chinese. / School code: 1307.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T08:42:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 286377.pdf: 3812439 bytes, checksum: 6fcfa72b2a13e20109075fe00c344e6a (MD5) / Agaricus subrufescens (=A. brasiliensis) é um fungo comestível amplamente comercializado no Brasil e em outros países, devido as suas propriedades nutricionais e medicinais relacionadas principalmente aos polissacarídeos presentes em sua parede celular, tais como glucanas e glucomananas. Certos processos biotecnológicos têm sido utilizados para aumentar a escala produtiva do micélio e, consequentemente, aumentar a obtenção dos polissacarídeos. Previamente ao desenvolvimento desses processos de produção é importante estabelecer métodos de preservação do fungo in vitro e a recuperação do micélio após estocagem. Para a produção de biomassa foi utilizada a fermentação no estado sólido (FES) em grãos de trigo pré-tratados e a fermentação submersa (FSm) em hidrolisados de resíduos agroindustriais, como farelo de trigo (FT) e resíduo de cervejaria (RC). Polissacarídeos extraídos da frutificação (controle), do micélio em FES e do micélio isolado da FSm foram separados de acordo com suas massas molares por meio de diferentes membranas. Essas frações de polissacarídeos foram testadas na ativação de macrófagos in vitro. Entre os métodos de preservação, melhores resultados foram obtidos quando o meio de cultura foi suplementado com carvão ativo, tanto para a preservação quanto para a recuperação de A. subrufescens, sem alterações significativas na morfologia e genética do fungo durante um período de até 12 meses de estocagem. Para a FES, 21 min de cozimento dos grãos de trigo seguido de 24 min de molho após o cozimento demonstrou ser mais adequado para a produção de polissacarídeos (glucomananas) pelo fungo, inclusive quando o substrato não foi suplementado com cálcio, ou com adição máxima de 0,25 % CaCO3 (pH 6,6). A quantidade inicial de inoculante para a melhor produção de glucomananas (6,89 mg.mL-1) foi aproximadamente 10,3 %, numa temperatura ótima de incubação de 27,2 °C. As maiores biomassas de A. subrufescens para a FSm em hidrolisados de RC e FT foram obtidas na concentração de HCl 0,45 % e 20 min de hidrólise, apresentando 9,65 g.L-1 e 22,1 g.L-1, respectivamente. Porém, melhores resultados de bioconversão foram obtidos em hidrolisados utilizando até 0,3 % de HCl e 30 min de hidrólise, com adição de 2 g.L-1 de carvão ativo durante a hidrólise. Também foram obtidas altas taxas de biomassa de A. subrufescens no cultivo em hidrolisado com pH 5,3 e temperatura de incubação de 30,2 ºC. Na separação com membranas houve aumento da retenção dos polissacarídeos de todos os extratos à medida que o tamanho dos poros da membrana diminuiu. Os polissacarídeos separados pelas membranas de microfiltração (MF) e ultrafiltração (UF1) favoreceram a retenção de polissacarídeos de maior massa molar da frutificação (627 g.mol-1) e do micélio (310 g.mol-1), obtido tanto em FES quanto em FSm. Todos os polissacarídeos extraídos e retentados pelas membranas ativaram macrófagos através da expressão do Fator de Necrose Tumoral-a (TNF-a). Porém, somente os extratos brutos da frutificação e do micélio isolado da FSm, e seus polissacarídeos de maior massa molar retidos pela membrana MF ativaram macrófagos através da expressão de Óxido Nítrico Sintase Induzível (iNOS). Resultados importantes também foram obtidos para os polissacarídeos das frutificações de A. subrufescens, apresentando efeito antigenotóxico e atividade antiherpética quando esses foram sulfatados. Baseado nesses resultados, pesquisas complementares estão sendo desenvolvidas para a obtenção de produtos biotecnológicos com finalidade nutricêutica e/ou farmacêutica. / Agaricus subrufescens (=A. brasiliensis) is an edible fungus widely commercialized in Brazil and other countries, mainly due to its nutritional and medicinal properties related principally to the polysaccharides present in the fungus cell wall, such as glucans and glucomannans. Biotechnological processes may in turn be used to scale up the production of mycelium and consequently the polysaccharides. Previous to the development of the production process it is important to establish techniques for the in vitro preservation and recovery of the mycelium after storage. Solid state fermentation (SSF) on pre-treated wheat grains and submerse fermentation (SmF) on hydrolyzed residues from the agro industries, such as wheat bran (FT) and brewery residues (RC) were used for biomass production. Polysaccharides extracted from fruiting bodies (control), mycelium on SSF and isolated mycelium from SmF were separated by molecular weight through different membranes. These polysaccharide fractions were tested on macrophage activity in vitro. Among the preservation techniques, better results were obtained when the media was supplemented with activated charcoal both for preservation and further recovery of A. subrufescens, without significant morphological and genetic changes within the 12 month storage period. For SSF, 21 min of wheat grain cooking followed by a 24 min resting time has shown to be the optimal condition for the production of polysaccharides (glucomannans) by the fungus, either with no supplement added, or when up to 0.25 % CaCO3 (pH 6.6) has been added to the substrate. The initial inoculum amount for the best polysaccharide production levels (6.89 %) was around 10.3 % with an optimal temperature of 27.2 °C. The highest biomass of A. subrufescens for the SmF in hydrolyzed RC and FT using HCL 0.45% and 20 min hydrolysis was 9.65 g.L-1 and 22.1 g.L-1, respectively. On the other hand, better results of bioconversion were obtained in hydrolyzed residues using up to 0.30 % HCl and 30 min hydrolysis, with the addition of 2 g.L-1 of activated charcoal throughout the process. High biomass levels were also obtained when the cultivation was carried out at a pH of 5.3 and with incubation temperature of 30.2 ºC. The results showed an increase in retention of all polysaccharide extracts as the membro ane porosity decreased. Microfiltration (MF) and ultrafiltration (UF1) membranes retained the highest polysaccharides from fruiting body (627 g.mol-1) and mycelium (310 g.mol-1) obtained on both SSF and SFm. All polysaccharide extracts and fractions separated by the membranes showed biological activity for TNF-a cytokines. On the other hand, only extracts obtained from fruiting bodies and isolated mycelium of FSm, and its high molecular weight polysaccharides retained by the MF membrane activated the iNOS. Important results were also obtained for the polysaccharides extracted from the fruiting bodies, showing antigenotoxic and antiherpetic activities after sulphatation. Based on these findings, additional research is currently in progress to purpose biotechnological products that can be used in both the nutraceutical and/or pharmaceutical areas.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2008 / Made available in DSpace on 2012-10-24T04:14:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Agaricus blazei, conhecido popularmente no Brasil como cogumelo-do-sol e himematsutake no Japão, é um cogumelo nativo no sudeste brasileiro e amplamente consumido devido às suas propriedades nutricionais e medicinais. Neste estudo, foi avaliada a citotoxicidade, a genotoxicidade e a atividade anti-herpética das suas frações de beta-glucanas (E-SI, E-SII e E-SIII) e do seu extrato polissacarídico (ERP). A citotoxicidade e a genotoxicidade foram avaliadas através dos ensaios do MTT e do cometa, respectivamente. A ação antiviral in vitro frente ao Herpes Simplex Vírus tipo 1 (HSV-1, cepa KOS) e Herpes Simplex Vírus tipo 2 (HSV-2, cepa 333) foi testada pelo ensaio de redução de placas de lise. Nenhuma amostra apresentou genotoxicidade, nas condições experimentais testadas, e os valores de CC50 foram maiores do que 320 µg/ml para as frações de beta-glucanas e maior do que 2.370 µg/ml para o extrato ERP. Somente o ERP mostrou atividade antiviral entre as amostras testadas, para ambos os vírus. Os valores de CI50 foram de 6,74 µg/ml para o HSV-1 e 4,62 µg/ml para o HSV-2, com índices de seletividade de 393 e 545, respectivamente. A fim de determinar o possível mecanismo da ação anti-herpética detectada para o ERP, outras análises foram realizadas: ação virucida, influência na adsorção e penetração dos vírus nas células, e na propagação intercelular viral. O ERP não teve efeito direto na inativação dos vírions, mas inibiu significativamente a adsorção, a penetração do vírus nas células hospedeiras e a difusão intercelular viral. Estes resultados sugerem que o mecanismo de ação do ERP é particularmente interessante e difere daquele do aciclovir, que é o fármaco de escolha para o tratamento de infecções herpéticas.

Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2014-12-09T18:40:53Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_EstudoPotencialHipocolesterolêmico.pdf: 1372205 bytes, checksum: 32a4c68b8fe38fc00390f64c0e7a8a83 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-12-09T20:10:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_EstudoPotencialHipocolesterolêmico.pdf: 1372205 bytes, checksum: 32a4c68b8fe38fc00390f64c0e7a8a83 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-09T20:10:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_EstudoPotencialHipocolesterolêmico.pdf: 1372205 bytes, checksum: 32a4c68b8fe38fc00390f64c0e7a8a83 (MD5) Previous issue date: 2011 / Diversas espécies de cogumelos têm sido relacionadas ao controle da hiperlipidemia. Os cogumelos comestíveis são considerados ainda um alimento ideal para a prevenção da aterosclerose, na medida em que possuem um alto conteúdo em fibras aliado ao seu baixo teor em lipídios. Contudo, os efeitos medicinais destes cogumelos são, muitas vezes, promovidos sem evidências científicas, baseados apenas na crença popular. Nesta perspectiva e mediante o grande interesse que vem despertando não somente à comunidade científica, mas também à população como um todo, o presente estudo refere-se ao Agaricus blazei, popularmente conhecido como Cogumelo do Sol. O Agaricus blazei, nativo do Brasil, tem gerado inúmeras dúvidas que vão desde a classificação taxonômica até o tipo de comercialização e utilização pela população. Desta forma, o objetivo desse trabalho foi avaliar algumas propriedades funcionais do A. blazei especialmente com relação aos efeitos hipocolesterolemiante e antioxidante. Foram utilizados 32 ratos Fischer (fêmeas), distribuídos em quatro grupos (8 animais/grupo): grupo C recebeu dieta padrão AIN-93M (4% óleo de soja); grupo H recebeu dieta hipercolesterolemiante (25% de óleo de soja e 1% de colesterol); grupo CAb recebeu dieta padrão suplementada com 1% de Agaricus blazei e grupo HAb recebeu dieta hipercolesterolemiante suplementada com 1% de Agaricus blazei. Dieta e água foram oferecidas ad libitum aos animais durante todo período experimental. Ao final desse período (8 semanas) amostras de sangue e do tecido hepático foram coletadas para as análises bioquímicas. Os dados foram avaliados através da análise de variância bivariada (Two-way ANOVA). As diferenças foram consideradas significativas quando o valor de p foi menor do que 0,05. A análise da composição centesimal mostrou que esse cogumelo constitui uma importante fonte de nutrientes, sendo considerado fonte de fibras e com alto teor em proteínas. Como esperado, a dieta hipercolesterolemiante promoveu um aumento nos níveis séricos do colesterol total e da fração não-HDL, concomitante a uma diminuição do colesterol HDL. A adição do Agaricus blazei a 1% na dieta hipercolesterolemiante promoveu um significativo efeito hipolipidêmico, reduzindo substancialmente os níveis séricos do colesterol total, colesterol não HDL e triacilgliceróis. O mesmo também mostrou-se efetivo em reduzir o peso da gordura abdominal a valores próximos à normalidade. Ao mesmo tempo, uma redução foi observada quando esse cogumelo foi adicionado à dieta controle, reduzindo significativamente os níveis de triacilgliceróis, indicando que, aliado a uma dieta saudável, o Agaricus blazei pode ser benéfico à saúde. Ao contrário do encontrado na literatura, o Agaricus blazei, na concentração e na forma de administração utilizadas, não exerceu efeito antioxidante. Nossos resultados sugerem que o Agaricus blazei, adicionado à dieta, possa atuar como um importante agente hipolipidêmico, fornecendo benefícios à saúde, principalmente, nas condições impostas pela hipercolesterolemia. ______________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: Several species of mushrooms have been related to the control of hyperlipidemia. Edible mushrooms are considered an ideal food for the prevention of atherosclerosis, as they have a high content of fiber, together with its low fat content. However, the effects of these medicinal mushrooms are often promoted without scientific evidence, based only in popular belief. In this perspective and due to the great interest that it is attracting not only within the scientific community, but also in the population as a whole, this study refers to Agaricus blazei, popularly known as of the Sun Mushroom. Agaricus blazei, native of Brazil, has raised numerous questions ranging from the taxonomic classification to the type of marketing and use by the population. Thus, the aim of this study was to evaluate some functional properties of this mushroom especially regarding hypocholesterolemic and antioxidant effects. Thirty two female Fischer rats were used which were divided into four groups (8 animals / group): group C received the standard AIN-93M diet (4% soybean oil), group H received a hypercholesterolemic diet (25% soybean oil and 1 % cholesterol); group CAb was given the standard diet supplemented with 1% of Agaricus blazei and group HAb which received the hypercholesterolemic diet supplemented with 1% of Agaricus blazei. Diet and water were offered ad libitum to animals throughout the experimental period. At the end of this period (8 weeks) blood samples and liver tissue were collected for biochemical analysis. Data were analysed by two-way ANOVA. Differences were considered significant when the p value was less than 0.05. Analysis of the chemical composition showed that the mushroom is an important source of nutrients and is considered a source of fiber besides having a high protein content. As expected, the hypercholesterolemic diet promoted an increase in serum total cholesterol and non-HDL fraction, concurrent with a decrease in HDL cholesterol. The addition of 1% Agaricus blazei in the hypercholesterolemic diet promoted a significant hypolipidemic effect, substantially reducing the serum levels of total cholesterol, triglycerides and non-HDL cholesterol fractions. It also proved to be effective in reducing abdominal fat weight to values close to the normal. At the same time, a decrease was observed when the fungus was added to the control diet, significantly reducing the levels of triacylglycerols, indicating that a healthy diet combined with Agaricus blazei may be beneficial to health. Unlike other studies, Agaricus blazei, in the concentration used and in the form administration did not exert an antioxidant effect. Our results suggest that Agaricus blazei, added to the diet may act as an important hypolipidemic agent, providing health benefits, especially under the conditions imposed by hypercholesterolemia.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Alimentos. / Made available in DSpace on 2013-03-04T19:06:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 305250.pdf: 1279611 bytes, checksum: 85fa4d588f03cf34811d1f02b10b6bf1 (MD5) / O Agaricus brasiliensis, conhecido popularmente no Brasil como cogumelo do sol, é amplamente utilizado nos países orientais como um cogumelo comestível. Além disso, o cogumelo do sol tem sido extensivamente estudado devido a suas propriedades medicinais, havendo uma abundante literatura sobre o tema. O presente trabalho avaliou a composição química e atividade antioxidante e antimicrobiana dos extratos de A. brasiliensis obtidos por extração supercrítica (ESC) com CO2 puro e com a adição de etanol como cossolvente. Para avaliar o método a alta pressão quanto a rendimento, composição e atividade antioxidante e antimicrobiana dos extratos, métodos a baixa pressão, como hidrodestilação, maceração etanólica e soxhlet com diferentes solventes foram aplicados. As condições testadas na ESC foram: 40 oC, 50 oC e 60 oC e pressões entre 10 MPa e 30 MPa. A cinética de extração e o emprego de cossolvente no processo de extração supercrítica também foram avaliados. Os extratos obtidos por soxhlet utilizando água (56,8 %) e etanol (36,7 %) como solventes apresentaram os maiores rendimentos, enquanto que o menor rendimento foi observado na hidrodestilação (0 %). A extração supercrítica de cogumelo do sol apresentou rendimentos inferiores àqueles alcançados nas extrações à baixa pressão, em soxhlet e maceração. O melhor rendimento no processo de extração supercrítica utilizando CO2 puro foi na condição de 50 oC e 30 MPa (1,2 %). O emprego de 10 % de etanol como cossolvente no processo de extração supercrítica aumentou 3,8 vezes o rendimento de extração. O teor de compostos fenólicos totais foi avaliado pelo método de Folin-Ciocalteau e a atividade antioxidante pelo método DPPH, sendo verificado que os melhores resultados foram obtidos no extrato proveniente da maceração etanólica. A adição de cossolvente ao processo de extração supercrítica promoveu um incremento do teor de compostos fenólicos totais e atividade antioxidante dos extratos de cogumelo do sol. A atividade antimicrobiana foi avaliada pela concentração mínima inibitória e pelo método de difusão em gel. Os extratos de cogumelos do sol obtidos por técnicas a baixa pressão como por extração supercrítica apresentaram atividade antibacteriana, sendo maior para bactérias Gram-positivas. Apenas os extratos de cogumelos do sol obtidos por ESC (20 MPa/50 °C e 20 MPa/60 °C) apresentaram uma fraca atividade antifúngica frente a espécie Candida albicans. A quantificação e a identificação da composição dos extratos foram realizadas por cromatografia. Os principais compostos identificados nos extratos foram o ácido linoléico e ácido palmítico. Apesar dos baixos rendimentos observados na ESC, esta técnica torna-se bem interessante na obtenção de compostos de alto valor agregado, devido à seletividade do processo. A busca por condições operacionais que favoreçam positivamente o rendimento das extrações é uma alternativa a esta situação. / Agaricus brasiliensis, popularly known in Brazil as Sun mushroom, is widely used in oriental countries as an edible mushroom. Furthermore, Sun mushroom is a mushroom extensively studied for its medicinal properties for several years and literature abounds on the topic. The objective of this study was to obtain extracts from the mushroom A.brasiliensis using supercritical fluid extraction (SFE) with pure CO2 and with CO2 and co-solvent. In order to evaluate the high pressure method in terms of process yield, extract composition and biological activity, low pressure methods were also applied to obtain extracts, such as maceration with ethanol (Mac), Soxhlet (Sox) with different organic solvents, and hydrodistillation (HD). The SFE conditions were temperatures of 40 oC, 50 oC and 60 oC and pressures from 10 to 30 MPa. The SFE kinetic the overall extraction curve (OEC) was investigated. Soxhlet presented the highest yields when using water (56.8 %) and ethanol (36.7 %) as solvent. Hydrodistillation technique showed the lowest extraction yields (0 %). Supercritical extraction of Sun mushroom showed lower yields than the low pressure extraction in Soxhlet and maceration. The best conditions in the studied range to obtain high yields resulted to be 30.0 MPa and 50 oC (1.2 %). When 10 % of ethanol was added as co-solvent, the yield of extraction increased 3.8 times. Total phenol content was evaluated by the Folin-Ciocalteu and antioxidant activity by DPPH method, being verified the best results for the maceration extract. The use of ethanol as a co-solvent in the SFE improves antioxidant activity by DPPH assays and the total phenolic content. Antimicrobial activity was evaluated by minimum inhibitory concentration and gel diffusion assay. The antimicrobial activity presented by SFE and low pressure methods indicated great potential of the extracts as inhibitors of the microorganism growth, especially for Gran-positive bacteria. Only extracts of sun mushroom obtained by SFE (20 MPa/50 °C and 20 MPa/60 °C) showed a weak antifungal activity against Candida albicans. The identification and quantification of the composition of the extracts was performed by chromatography. The major compounds identified in extracts were linoleic acid and palmitic acid. Despite the low yields observed in the SFE, this technique is very interesting in obtaining the compounds of high aggregated value due to the selectivity of the process. The optimization of operating conditions that favor a positive yield of extraction is an alternative to this situation.