Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A doença de Chagas é endêmica na América Latina sendo considerada uma doença negligenciada com grande impacto socioeconômico. A infecção é causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi que é transmitido pela forma vetorial, entre outros mecanismos. O tratamento consiste basicamente no uso de dois fármacos, o benznidazol e o Nifurtimox que apresentam uma série de efeitos colaterais e atuam muito pouco nas formas amastigotas intracelulares o que faz com que o tratamento atual seja restrito e insatisfatório.Várias atividades farmacológicas foram atribuídas ao lapachol e a pterocarpanos, tais como atividade antitumoral e antiparasitária. Devido a esse potencial foi sintetizado uma molécula híbrida, a pterocarpanoquinona LQB-118, e algumas moléculas derivadas. A LQB-118 mostrou anteriormente atividade antitumoral e anti-Leishmania. O objetivo do presente trabalho foi investigar a atividade in vitro da LQB-118 e suas moléculas derivadas sobre o Trypanosoma cruzi clone Dm28c. Para avaliação inicial do efeito anti-parasitário das moléculas, amastigotas intracelulares, tripomastigotas metacíclicos e epimastigotas foram incubados com 20 M das LQBs 118, 168, 187, 182 e 236. A LQB-118 demonstrou atividade antiparasitária nas três formas evolutivas (90% na forma amastigota, 44% na forma tripomastigota e 70% na forma epimastigota) do parasito, enquanto as moléculas derivadas não mostraram atividade significativa. Sendo assim os estudos foram continuados com a molécula LQB-118. A ação da LQB-118 sobre as amastigotas intracelulares foi dose dependente, com redução do índice de infecção em 81% e 88% nas concentrações de 20 e 30 M respectivamente. Já sobre tripomastigotas, a LQB-118 foi menos ativa reduzindo a mobilidade dessas formas em até 45% a 30 M. Sobre a forma epimastigota a ação foi dose-dependente chegando a inibir 96% o crescimento dos parasitos a 20 M, com alterações da morfologia tais como arrendondamento do corpo celular e perda do flagelo. A dose capaz de inibir 50% foi de 4,2 M para amastigota intracelular e 38,1 M para tripomastigotas. Para macrófagos, a LC50 ficou em 40 M, uma concentração quase dez vezes maior que a IC50 para amastigotas. A capacidade das formas amastigotas intracelulares se diferenciarem em tripomatigotas e lisar os macrófagos foi avaliada após o tratamento com a LQB-118 por 72h. Observou-se um atraso do ciclo intracelular do parasito de modo dose-dependente, onde na concentração de 30 M o surgimento de tripomastigota foi no 9 dia enquanto nos controles foi no 5 dia de cultura. Para delinear o mecanismo de ação, foi avaliado o efeito direto sobre o parasito como a indução da fragmentação de DNA. A análise de indução da fragmentação do DNA feita pela marcação pelo TUNEL mostrou que o tratamento com a LQB-118 induziu seletivamente a fragmentação do núcleo das amastigotas enquanto o núcleo dos macrófagos se mantiveram íntegros. Macrófagos peritoneais pré-tratados com LQB-118 por 24 horas foram capazes de reduzir o número de amastigotas após 72h de cultivo na ausência da molécula, mas sem alteração na produção de óxido nítrico. Esses resultados mostram que a LQB-118 é ativa contra o T. cruzi, principalmente sobre a forma amastigota intracelular, que é a forma presente na fase crônica da infecção. O mecanismo de ação sugere que a LQB-118 é capaz de ser seletivamente tóxica para o parasito e também ativar os mecanismos microbicidas dos macrófagos de modo independente da produção de óxido nítrico. / Chagas disease is endemic in Latin America being considered a neglected disease with high socioeconomic impact. The infection is caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, which is transmitted by the vector form, among other mechanisms. The treatment basically consists of using two drugs, benznidazole and nifurtimox which presenting several side effects and acts very little on intracellular amastigotes what makes the current treatment is restricted and unsatisfactory. Several pharmacological activities have been attributed to lapachol and pterocarpans, such as antitumor and antiparasitic activity. Because of this therapeutic potential an hybrid molecule was synthesized, a pterocarpanquinone LQB-118, and some derived molecules. The LQB-118 previously showed antitumor and anti-Leishmania activity. The objective of this study was to investigate the in vitro activity of LQB-118 and its derived molecules on Trypanosoma cruzi Dm28c clone. For initial evaluation of the antiparasitic effect of the molecules, intracellular amastigotes, epimastigotes and metacyclic trypomastigotes were incubated with 20 M of LQBs 118, 168, 187, 182 and 236. The LQB-118 showed antiparasitic activity on the three evolutionary forms (90% on amastigote form, 44% on trypomastigote form and 70% on epimastigote form) of the parasite, while derived molecules showed no significant activity. Thus, studies were continued with the molecule LQB-118. The action of LQB-118 on intracellular amastigotes was dose dependent, with reduction of infection index into 81 and 88% at concentrations of 20 and 30 M respectively. In trypomastigotes, LQB-118 was less active reducing the mobility of these forms up to 45% at 30 M. In epimastigote form, the action was dose dependent reaching 96% to inhibit the growth of parasites at 20 M, with morphological changes such as rounding of the cell body and loss of the flagellum. The dose able to inhibit 50% was 4,2 M to intracellular amastigote and 38,1 M to trypomastigote. To macrophages, LC50 was 40 M, a concentration about ten times higher than the IC50 to amastigotes.The ability of intracellular amastigotes differentiate on trypomastigotes and break macrophages was evaluated after the treatment with LQB-118 for 72 hours. There was a delay on intracellular cycle of the parasite in a dose dependent way, where in the concentration of 30 M the trypomastigote emergence was on the 9th day while in controls was on the 5th day of culture. To delineate the mechanism of action, it was evaluated the direct effect on the parasite such as the induction of DNA fragmentation. Analysis of the induction of DNA fragmentation by TUNEL labeling showed that the treatment with LQB-118 induced selectively fragmentation of amastigotess nuclei while macrophagess nuclei remained without fragmentation. Peritoneal macrophages pretreated with LQB-118 for 24 hours were able to reduce the number of amastigotes after 72 hours of culture in absence of the molecule, but without alteration in nitric oxide production. These results show that LQB-118 is active against T. cruzi, mainly on intracellular amastigote form, which is present in the chronic phase of infection. The mechanism of action suggests that LQB-118 can be selectively toxic to parasite and also activate the microbicidal mechanisms of macrophages independently of nitric oxide production.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-08-18Bitstream added on 2014-06-13T20:53:02Z : No. of bitstreams: 1 isabel_tf_me_arafcf.pdf: 1862116 bytes, checksum: d792133dba66b88c4e71af8a6e774544 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A toxoplasmose na maioria dos casos é assintomática, porém pode causar seqüelas graves no feto, quando transmitida durante a fase aguda da infecção pela gestante. Diante disso, é de fundamental importância o acompanhamento sorológico de gestantes, a fim de definir o momento em que houve a aquisição da infecção por T. gondii, possibilitando assim, o tratamento precoce e diminuindo, portanto, o risco de transmissão congênita. No período de Janeiro a Novembro de 2005, avaliou-se a metodologia sorológica do teste de avidez de IgG anti-Toxoplasma gondii na rotina laboratorial entre as gestantes com teste sorológico negativo para anticorpos IgM anti-Toxoplasma (n = 200) e gestantes com teste sorológico positivo (n = 33) durante o pré-natal, em Araraquara-SP, no Laboratório de Imunologia Clínica e Biologia Molecular NAC-FCF/UNESP. Os resultados foram avaliados, segundo o perfil sorológico das gestantes participantes da pesquisa e a variação do índice de avidez de IgG entre as soropositivas para IgM e sua relação com o tratamento antiparasitário. Baseando-se nos resultados ressaltou-se a importância da adoção de medidas profiláticas para a redução da transmissão congênita. Todos os resultados para anticorpos IgG e IgM devem ser notificados na ficha da paciente, outros testes complementares devem ser realizados e a interpretação utilizada para o teste de avidez de IgG, precisa ser padronizada. Concluiu-se que alguns profissionais de saúde realizaram desnecessariamente o tratamento antiparasitário nas gestantes. Embora as gestantes realizem em sua maioria, o pré-natal no primeiro trimestre de gestação, a prevalência para toxoplasmose entre as gestantes de Araraquara-SP foi elevada, necessitando, portanto, de melhor acompanhamento da gestante e do recém-nascido e conscientização da importância da assistência à saúde pelos serviços de saúde. / Toxoplasmosis usually is asymptomatic but can cause serious sequels in the fetus, when transmitted during the acute stage by the pregnant woman. Therefore, the serological screening of pregnant women has fundamental importance, in order to define the moment of contamination by T. gondii, and thus facilitating the precocious treatment and decreasing the risk of congenital transmission. During the period of January to November of 2005, we evaluated the serological methodology of IgG avidity test for toxoplasmosis in the routine laboratory, among pregnant women, with negative serological test for anti-Toxoplasma IgM antibodies (n = 200) and pregnant with serological test positive (n = 33), during the prenatal, in Araraquara-SP, in Immunology Clinic's Laboratory and Molecular Biology NAC-FCF/UNESP. The results in this study were evaluated, according to the serological profile of the pregnant women and the variation of anti-Toxoplasma IgG avidity index among the pregnant women with positive IgM antibodies and its relationship with the antiparasitic treatment. According to our results, we reinforce the importance of use prophylactics measures to reduce congenital transmission. All results for IgG and IgM antibodies must be notified, other complementary tests should be accomplished and the interpretation used for the IgG avidity test should be standardized. We concluded that some professionals realized unnecessary antiparasitic treatment. Although most of pregnant women at Araraquara-SP accomplish the prenatal in the first trimester of gestation, the prevalence for toxoplasmosis are elevated, needing therefore, a better accompaniment of the pregnant women and of the newly born and conscientiousness about the importance of health assistance during pregnancy by health services.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A doença de Chagas é endêmica na América Latina sendo considerada uma doença negligenciada com grande impacto socioeconômico. A infecção é causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi que é transmitido pela forma vetorial, entre outros mecanismos. O tratamento consiste basicamente no uso de dois fármacos, o benznidazol e o Nifurtimox que apresentam uma série de efeitos colaterais e atuam muito pouco nas formas amastigotas intracelulares o que faz com que o tratamento atual seja restrito e insatisfatório.Várias atividades farmacológicas foram atribuídas ao lapachol e a pterocarpanos, tais como atividade antitumoral e antiparasitária. Devido a esse potencial foi sintetizado uma molécula híbrida, a pterocarpanoquinona LQB-118, e algumas moléculas derivadas. A LQB-118 mostrou anteriormente atividade antitumoral e anti-Leishmania. O objetivo do presente trabalho foi investigar a atividade in vitro da LQB-118 e suas moléculas derivadas sobre o Trypanosoma cruzi clone Dm28c. Para avaliação inicial do efeito anti-parasitário das moléculas, amastigotas intracelulares, tripomastigotas metacíclicos e epimastigotas foram incubados com 20 M das LQBs 118, 168, 187, 182 e 236. A LQB-118 demonstrou atividade antiparasitária nas três formas evolutivas (90% na forma amastigota, 44% na forma tripomastigota e 70% na forma epimastigota) do parasito, enquanto as moléculas derivadas não mostraram atividade significativa. Sendo assim os estudos foram continuados com a molécula LQB-118. A ação da LQB-118 sobre as amastigotas intracelulares foi dose dependente, com redução do índice de infecção em 81% e 88% nas concentrações de 20 e 30 M respectivamente. Já sobre tripomastigotas, a LQB-118 foi menos ativa reduzindo a mobilidade dessas formas em até 45% a 30 M. Sobre a forma epimastigota a ação foi dose-dependente chegando a inibir 96% o crescimento dos parasitos a 20 M, com alterações da morfologia tais como arrendondamento do corpo celular e perda do flagelo. A dose capaz de inibir 50% foi de 4,2 M para amastigota intracelular e 38,1 M para tripomastigotas. Para macrófagos, a LC50 ficou em 40 M, uma concentração quase dez vezes maior que a IC50 para amastigotas. A capacidade das formas amastigotas intracelulares se diferenciarem em tripomatigotas e lisar os macrófagos foi avaliada após o tratamento com a LQB-118 por 72h. Observou-se um atraso do ciclo intracelular do parasito de modo dose-dependente, onde na concentração de 30 M o surgimento de tripomastigota foi no 9 dia enquanto nos controles foi no 5 dia de cultura. Para delinear o mecanismo de ação, foi avaliado o efeito direto sobre o parasito como a indução da fragmentação de DNA. A análise de indução da fragmentação do DNA feita pela marcação pelo TUNEL mostrou que o tratamento com a LQB-118 induziu seletivamente a fragmentação do núcleo das amastigotas enquanto o núcleo dos macrófagos se mantiveram íntegros. Macrófagos peritoneais pré-tratados com LQB-118 por 24 horas foram capazes de reduzir o número de amastigotas após 72h de cultivo na ausência da molécula, mas sem alteração na produção de óxido nítrico. Esses resultados mostram que a LQB-118 é ativa contra o T. cruzi, principalmente sobre a forma amastigota intracelular, que é a forma presente na fase crônica da infecção. O mecanismo de ação sugere que a LQB-118 é capaz de ser seletivamente tóxica para o parasito e também ativar os mecanismos microbicidas dos macrófagos de modo independente da produção de óxido nítrico. / Chagas disease is endemic in Latin America being considered a neglected disease with high socioeconomic impact. The infection is caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, which is transmitted by the vector form, among other mechanisms. The treatment basically consists of using two drugs, benznidazole and nifurtimox which presenting several side effects and acts very little on intracellular amastigotes what makes the current treatment is restricted and unsatisfactory. Several pharmacological activities have been attributed to lapachol and pterocarpans, such as antitumor and antiparasitic activity. Because of this therapeutic potential an hybrid molecule was synthesized, a pterocarpanquinone LQB-118, and some derived molecules. The LQB-118 previously showed antitumor and anti-Leishmania activity. The objective of this study was to investigate the in vitro activity of LQB-118 and its derived molecules on Trypanosoma cruzi Dm28c clone. For initial evaluation of the antiparasitic effect of the molecules, intracellular amastigotes, epimastigotes and metacyclic trypomastigotes were incubated with 20 M of LQBs 118, 168, 187, 182 and 236. The LQB-118 showed antiparasitic activity on the three evolutionary forms (90% on amastigote form, 44% on trypomastigote form and 70% on epimastigote form) of the parasite, while derived molecules showed no significant activity. Thus, studies were continued with the molecule LQB-118. The action of LQB-118 on intracellular amastigotes was dose dependent, with reduction of infection index into 81 and 88% at concentrations of 20 and 30 M respectively. In trypomastigotes, LQB-118 was less active reducing the mobility of these forms up to 45% at 30 M. In epimastigote form, the action was dose dependent reaching 96% to inhibit the growth of parasites at 20 M, with morphological changes such as rounding of the cell body and loss of the flagellum. The dose able to inhibit 50% was 4,2 M to intracellular amastigote and 38,1 M to trypomastigote. To macrophages, LC50 was 40 M, a concentration about ten times higher than the IC50 to amastigotes.The ability of intracellular amastigotes differentiate on trypomastigotes and break macrophages was evaluated after the treatment with LQB-118 for 72 hours. There was a delay on intracellular cycle of the parasite in a dose dependent way, where in the concentration of 30 M the trypomastigote emergence was on the 9th day while in controls was on the 5th day of culture. To delineate the mechanism of action, it was evaluated the direct effect on the parasite such as the induction of DNA fragmentation. Analysis of the induction of DNA fragmentation by TUNEL labeling showed that the treatment with LQB-118 induced selectively fragmentation of amastigotess nuclei while macrophagess nuclei remained without fragmentation. Peritoneal macrophages pretreated with LQB-118 for 24 hours were able to reduce the number of amastigotes after 72 hours of culture in absence of the molecule, but without alteration in nitric oxide production. These results show that LQB-118 is active against T. cruzi, mainly on intracellular amastigote form, which is present in the chronic phase of infection. The mechanism of action suggests that LQB-118 can be selectively toxic to parasite and also activate the microbicidal mechanisms of macrophages independently of nitric oxide production.

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LIVIA MAGOSSO RAMIRES.pdf: 444845 bytes, checksum: cec97741510efe0b6f3650e654cc5843 (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / The geohelminthoses are important diseases that infect human beings. These diseases are caused by parasites that harbor the man as definitive host. In addition, dogs and cat may be responsible by environmental contamination by agents with zoonotic potential, particularly Toxocara spp. and Ancylostoma spp. These parasites may cause the visceral/ocular and cutaneous larva migrans syndromes, respectively. The drastic increase of people who raise dogs and cats with no parasitic control and the free access of these animals to sidewalks/recreative public areas are important factors for soil contamination by larva migrans agents. The aim of the study was to evaluate the impact of deworming in dogs on the environmental contamination of sidewalks/streets and public parks caused by larva migrans (LM) agents (Toxocara spp. and/or Ancylostoma spp.). The study was carried out in a disadvantaged social area of Presidente Prudente, São Paulo, Brazil. A survey was applied to 138 dog owners, who received a plastic bag (Cata-Caca MSD) to collect a stool sample of their animals (n=200). Further, stool samples of dogs observed in sidewalks/streets (440) and two parks (n=63) were also collected. The samples were analyzed by the Gordon and Whitlock technique, to evaluate the egg count of LM agents. The positive dogs (at least one egg per gram (epg)= 100) were submitted to an anthelminthic treatment (Fembendazole, Panacur® 10%). The egg count was verified in 32.5% (65/200) of the dogs, in 45.25% (62/137) of the stool samples found on the sidewalks/streets and in 3.7% (14/37) of the samples collected in the parks. Following 30 days after deworming, the effectiveness of treatment for Ancylostoma spp. and for Toxocara spp. was 95.8% and 96.6%, respectively. In addition, it was observed a highly significantly reduction in the contamination of environment by LM agents (sidewalks/streets and parks) after treatment of the dogs (p<0.0001). This findings were also observed in the sidewalks/streets, in which there was a significant reduction (p<0.0128) in the count mean of Ancylostoma spp. epg. However, the same phenomenon was not observed taking into account the contamination of the parks. The high infection of dogs with Ancylostoma spp. and/or Toxocara spp. observed in this study indicates that LM agents represent a risk for both the health of dogs and their owners. The deworming of domiciliated dogs should be considered an important and significant impact for the reduction of environmental contamination of public places by LM agents. / As geohelmintoses são importantes doenças que acometem seres humanos. Além de serem ocasionadas por parasitos que têm o homem como hospedeiro definitivo, cães e gatos podem ser responsáveis pela contaminação ambiental por agentes com potencial zoonótico. Entres esses agentes, destacam-se Toxocara spp. e Ancylostoma spp., que podem ocasionar as síndromes de Larva migrans visceral/ocular e cutânea, respectivamente. O número crescente de pessoas que criam cães e gatos sem controle parasitário e o acesso desses animais às vias e áreas de lazer públicas representam um importante fator para a contaminação de solos por agentes de Larva migrans. O objetivo do estudo foi avaliar o impacto da desverminação de cães sobre a contaminação de vias e parques públicos ocasionada por agentes de larva migrans (LM), Toxocara spp. e/ou Ancylostoma spp. O estudo foi realizado em uma área de baixa renda de Presidente Prudente, São Paulo, com entrevista de 138 moradores, que receberam um coletor de fezes (Cata-caca MSD) para armazenamento das amostras de fezes de seus cães (n=200). Além disso, foram coletadas fezes de cães depositadas em vias públicas (n=440) e em dois parques (n=63). As amostras foram analisadas pelo método de Gordon e Whitlock, modificado, para avaliação a contagem de ovos (opg) dos agentes de LM. Os cães cujas amostras foram positivas (pelo menos um ovo por grama (opg)= 100) foram submetidos ao tratamento antihelmíntico (Fembendazole, Panacur® 10%). A presença de ovos nas fezes (opg&#8805;100) foi verificada em 32,5% (65/200) das amostras dos cães domiciliados, em 45,25% (62/137) das vias públicas e em 3,7% (14/37) das praças. Após 30 dias do tratamento, a média de eficácia do produto para Ancylostoma spp. e para Toxocara spp. foi de 95,8% e 96,6%, respectivamente. Houve uma redução significativa da contaminação das fezes presentes no meio ambiente (Vias e Praças) após o tratamento (p<0,0001). Esse achado foi observado em vias públicas, onde houve também uma redução significativa (p<0,0128) na média de opg de Ancylostoma spp. Contudo, esse fenômeno não se repetiu nas praças. A alta infecção dos cães por Ancylostoma spp. e /ou Toxocara spp. indica que agentes de LM são um risco para a saúde dos cães, dos seus proprietários e da contaminação ambiental. A desverminação de cães domiciliados mostrou um impacto significativo na contaminação ambiental por agentes de LM em locais públicos.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LIVIA MAGOSSO RAMIRES.pdf: 444845 bytes, checksum: cec97741510efe0b6f3650e654cc5843 (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / The geohelminthoses are important diseases that infect human beings. These diseases are caused by parasites that harbor the man as definitive host. In addition, dogs and cat may be responsible by environmental contamination by agents with zoonotic potential, particularly Toxocara spp. and Ancylostoma spp. These parasites may cause the visceral/ocular and cutaneous larva migrans syndromes, respectively. The drastic increase of people who raise dogs and cats with no parasitic control and the free access of these animals to sidewalks/recreative public areas are important factors for soil contamination by larva migrans agents. The aim of the study was to evaluate the impact of deworming in dogs on the environmental contamination of sidewalks/streets and public parks caused by larva migrans (LM) agents (Toxocara spp. and/or Ancylostoma spp.). The study was carried out in a disadvantaged social area of Presidente Prudente, São Paulo, Brazil. A survey was applied to 138 dog owners, who received a plastic bag (Cata-Caca MSD) to collect a stool sample of their animals (n=200). Further, stool samples of dogs observed in sidewalks/streets (440) and two parks (n=63) were also collected. The samples were analyzed by the Gordon and Whitlock technique, to evaluate the egg count of LM agents. The positive dogs (at least one egg per gram (epg)= 100) were submitted to an anthelminthic treatment (Fembendazole, Panacur® 10%). The egg count was verified in 32.5% (65/200) of the dogs, in 45.25% (62/137) of the stool samples found on the sidewalks/streets and in 3.7% (14/37) of the samples collected in the parks. Following 30 days after deworming, the effectiveness of treatment for Ancylostoma spp. and for Toxocara spp. was 95.8% and 96.6%, respectively. In addition, it was observed a highly significantly reduction in the contamination of environment by LM agents (sidewalks/streets and parks) after treatment of the dogs (p<0.0001). This findings were also observed in the sidewalks/streets, in which there was a significant reduction (p<0.0128) in the count mean of Ancylostoma spp. epg. However, the same phenomenon was not observed taking into account the contamination of the parks. The high infection of dogs with Ancylostoma spp. and/or Toxocara spp. observed in this study indicates that LM agents represent a risk for both the health of dogs and their owners. The deworming of domiciliated dogs should be considered an important and significant impact for the reduction of environmental contamination of public places by LM agents. / As geohelmintoses são importantes doenças que acometem seres humanos. Além de serem ocasionadas por parasitos que têm o homem como hospedeiro definitivo, cães e gatos podem ser responsáveis pela contaminação ambiental por agentes com potencial zoonótico. Entres esses agentes, destacam-se Toxocara spp. e Ancylostoma spp., que podem ocasionar as síndromes de Larva migrans visceral/ocular e cutânea, respectivamente. O número crescente de pessoas que criam cães e gatos sem controle parasitário e o acesso desses animais às vias e áreas de lazer públicas representam um importante fator para a contaminação de solos por agentes de Larva migrans. O objetivo do estudo foi avaliar o impacto da desverminação de cães sobre a contaminação de vias e parques públicos ocasionada por agentes de larva migrans (LM), Toxocara spp. e/ou Ancylostoma spp. O estudo foi realizado em uma área de baixa renda de Presidente Prudente, São Paulo, com entrevista de 138 moradores, que receberam um coletor de fezes (Cata-caca MSD) para armazenamento das amostras de fezes de seus cães (n=200). Além disso, foram coletadas fezes de cães depositadas em vias públicas (n=440) e em dois parques (n=63). As amostras foram analisadas pelo método de Gordon e Whitlock, modificado, para avaliação a contagem de ovos (opg) dos agentes de LM. Os cães cujas amostras foram positivas (pelo menos um ovo por grama (opg)= 100) foram submetidos ao tratamento antihelmíntico (Fembendazole, Panacur® 10%). A presença de ovos nas fezes (opg&#8805;100) foi verificada em 32,5% (65/200) das amostras dos cães domiciliados, em 45,25% (62/137) das vias públicas e em 3,7% (14/37) das praças. Após 30 dias do tratamento, a média de eficácia do produto para Ancylostoma spp. e para Toxocara spp. foi de 95,8% e 96,6%, respectivamente. Houve uma redução significativa da contaminação das fezes presentes no meio ambiente (Vias e Praças) após o tratamento (p<0,0001). Esse achado foi observado em vias públicas, onde houve também uma redução significativa (p<0,0128) na média de opg de Ancylostoma spp. Contudo, esse fenômeno não se repetiu nas praças. A alta infecção dos cães por Ancylostoma spp. e /ou Toxocara spp. indica que agentes de LM são um risco para a saúde dos cães, dos seus proprietários e da contaminação ambiental. A desverminação de cães domiciliados mostrou um impacto significativo na contaminação ambiental por agentes de LM em locais públicos.

O benzoato de emamectina, um antiparasitário da classe das avermectinas, é amplamente utilizado em diversos países para o tratamento de infecções causadas por helmintos intestinais e ectoparasitas, os quais estão relacionados a grandes prejuízos na produção aquícola. Apesar de sua eficácia ser conhecida na aquicultura, seu uso não está regulamentado no Brasil. Diante da demanda nacional por uma maior variedade de medicamentos veterinários regulamentados para uso em espécies aquícolas, o presente projeto visou estimar um período de carência para o antiparasitário benzoato de emamectina, a partir de um estudo experimental de depleção residual desse fármaco em tilápia (filé com pele em proporção natural), a espécie de maior importância comercial para a produção aquícola no Brasil. Para tanto, fez-se necessárias as seguintes etapas: (i) incorporar o benzoato de emamectina na ração através da técnica de revestimento polimérico em equipamento de leito fluidizado; (ii) desenvolver e validar métodos analíticos para a determinação do benzoato de emamectina na ração e em filé de tilápia empregando cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas (LC- MS/MS); e (iii) realizar um ensaio com tilápias para avaliar a depleção residual de emamectina B1a no filé. O revestimento da ração com 1,5% de etilcelulose permitiu incorporar o benzoato de emaectina na ração sem alterar a estrutura física da mesma, o que torna o processo vantajoso, visto que a ração mantém suas características nutricionais e de flutuabilidade. Além disso, o processo foi homogêneo (CV de 2,1%) e não apresentou taxa de lixiviação quantificável do fármaco para a água, contribuindo para uma maior segurança em relação à dose de tratamento a ser administrada e em relação ao risco potencial ao meio ambiente. A emamectina B1a foi extraída da ração por processo sólido-líquido e do filé de tilápia pelo método QuEChERS modificado. Os métodos foram avaliados mediante os seguintes parâmetros: seletividade, curva analítica, linearidade, precisão, exatidão, limite de detecção (LD) e de quantificação (LQ). Todos os parâmetros avaliados se encontraram conformes às recomendações dos guias de validação tomados como referências, qualificando os métodos como adequados para os objetivos propostos no presente trabalho. Para avaliar a depleção de emamectina B1a no filé de tilápia, os peixes receberam o fármaco via ração em dose de 50 ?g/kgPV/dia durante sete dias consecutivos. As curvas de depleção residual de emamectina B1a se ajustaram ao modelo exponencial de primeira ordem. Tomando como referência o limite máximo de resíduo de 100 ?g/kg recomendado pelo Codex Alimentarius, não houve a necessidade de se propor um período de carência mínimo para o abate dos peixes, considerando as condições experimentais empregadas. / Emamectin benzoate, an antiparasitic of the class of avermectins, it is widely used in several countries for the treatment of infections caused by intestinal helminths and ectoparasites, which are related to great losses in aquaculture production. Although its known effectiveness for aquaculture, its use is not regulated in Brazil. The national demand for a greater variety of regulated veterinary drugs for use in aquaculture species,the current project that aimed to evaluate a withdrawal period for the antiparasitic emamectin benzoate, based on an experimental study of residual depletion of this drug in tilapia ( fillet with skin in natural proportion) the species of major commercial importance for aquaculture production in Brazil. To do so, it was necessary to: (i) incorporate emamectin benzoate into the feed through the polymer coating technique in fluidized bed equipment; (ii) to develop and validate the analytical methods for the determination of emamectin benzoate in the feed and in tilapia fillet using high-performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry (LC-MS / MS) and (iii) perform a tilapia test to evaluate the depletion of emamectin B1a in fillet. The feed coating with 1.5% ethylcellulose allowed to incorporate the emaectin benzoate into the feed without altering the physical structure, which makes the process advantageous, since the feed retains its nutritional and buoyancy characteristics. In addition, the process was homogeneous (CV 2,1%) and did not present quantifiable leaching rate of the drug into the water, contributing to a greater safety in relation to the dose of treatment to be administered and in relation to potential risk to the environment. Emamectin B1a was extracted from the feed by solid-liquid process and from tilapia fillet by the modified QuEChERS method. The methods were evaluated using the following parameters: selectivity, analytical curve, linearity, precision, accuracy, limit of detection (LD) and quantification (LQ). All the evaluated parameters were in accordance with the recommendations of the validation guides taken as references, qualifying the methods as adequate for the objectives proposed in the present work. To evaluate the depletion of emamectin B1a tilapia fillet, the fish received the drug via feed at a dose of 50 ?g / kgPV / day for seven consecutive days. The residual depletion curves of emamectin B1a were fitted to the first order exponential model. Taking into account the maximum residue limit of 100 ?g / kg recommended by the Codex Alimentarius, there was no need to propose a minimum withdrawal period for the slaughtering of fish, considering the experimental conditions used.