As doenças neurodegenerativas tais como as doenças de Alzheimer, Parkinson e desordens cerebrovasculares constituem-se em uma das principais causas de morbidade e de mortalidade na vida adulta. Além disso, o desequilíbrio entre os sistemas de geração e de proteção antioxidante celulares, chamado de estresse oxidativo, desempenha um papel importante nos danos neuronais causados pelos processos isquêmicos, provocando alterações funcionais em macromoléculas e promovendo a lipoperoxidação de membranas. Substâncias com dupla atividade anticolinesterásica e antioxidante vêm sendo consideradas como uma nova abordagem terapêutica para o tratamento farmacológico da doença de Alzheimer, incentivando a investigação e o estudo de produtos naturais para o desenvolvimento de fármacos novos e eficientes. Nesse estudo empregamos um modelo in vitro de fatias hipocampais de ratos, submetidas à privação de oxigênio e glicose (POG) e os métodos de avaliação da toxicidade dos alcalóides empregados foram a liberação da enzima lactato desidrogenase (LDH) citosólica e redução do MTT (viabilidade mitocondrial). Os alcalóides boldina e vincamina promoveram um aumento de 40 % na liberação de LDH nas fatias que sofreram POG na concentração de 100 μM, além de aumentos significativos na liberação desta enzima também nas fatias controles. Psicolatina e reserpina também tiveram efeitos neurotóxicos. Foi verificado que a POG em fatias hipocampais promove uma diminuição nas medidas do potencial antioxidante total (TRAP) e reatividade antioxidante total (TAR), de 63 % e 16,5 %, respectivamente, além de causar um aumento nos níveis de malonodialdeído liberado pelas fatias, detectado pelo ensaio de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS). Entretanto, este efeito foi revertido pela presença de boldina nas concentrações de 10 μM e de 50 μM. Este mesmo alcalóide, com reconhecida atividade antioxidante, também demonstrou ser um seqüestrador de radicais peroxila mais potente que o padrão Trolox. Além disso, os alcalóides indólicos monoterpênicos coronaridina, venalstonina, andrangina, vincadiformina e voacristina, além da boldina, exibiram potentes atividades antioxidante e anticolinesterásica em ensaios autobiográficos in vitro. / Neurodegenerative disorders, such as Alzheimer, Parkinson and cerebrovascular diseases are one of the major causes of morbidity and mortality in the middle aged and the elderly. Also, the imbalance between the activity of free radicals generation and scavenging systems, called oxidative stress, plays a important role in the neuronal damages caused by ischemia, leading to functional alterations in macromolecules and promoting lipoperoxidation in membranes. Acetylcholinesterase inhibitors and antioxidant compounds have been extensively investigated as new pharmacological strategies for the symptomatic treatment of Alzheimer disease. In this way, natural products are potentially important in an attempt to develope newer and safer drugs. In the present study, we selected the in vitro model of oxygen and glucose deprivation (OGD) in hippocampal slices and the methods used to assess the neurotoxicity of the alkaloids were cellular lactate dehydrogenase (LDH) release and reduction of MTT salt (mitochondrial activity). Both alkaloids boldine and vincamine 100 μM promoted a 40 % increase in LDH release in POG slices, as well as significant increases in the activity of this enzyme in control slices. Psychollatine and reserpine had also neurotoxic effects. It was also verified that OGD decreased the measurements of total antioxidant potential (TRAP) in 63 % and the total antioxidant reactivity (TAR) levels in 16.5 %, as well as an increase in the malondialdehyde levels by slices, which was detected by thiobarbituric acid-reactive substances (TBA-RS). However, this effect was prevented by the presence of boldine 10 μM and 50 μM. This alkaloid is a known antioxidant and it displayed a potent scavenger activity for peroxyl radicals, when compared with Trolox. Another finding is that the monoterpene indole alkaloids coronaridine, venalstonine, andrangine, vincadifformine, voacristine and also boldine exhibited both potent antioxidant and acetylcholinesterase inhibitor activities in in vitro autobiographic assays.

Resumo: Helicobacter pylori é, atualmente, reconhecido como o principal fator de risco para desenvolvimento da gastrite crônica e úlcera péptica. A resposta inflamatória decorrente da infecção por essa bactéria induz alterações patológicas no microambiente gástrico, com a liberação de citocinas e de grande quantidade de espécies reativas de oxigênio (EROs) por células inflamatórias, especialmente neutrófilos, que contribuem para a injúria da mucosa e desenvolvimento de câncer gástrico. Neste trabalho, a citotoxicidade basal, atividade anti-H. pylori e antioxidante de extratos (apolares e polares), frações, mistura de triterpenos (- amirina e -amirina) e compostos fenólicos (amentoflavona, (+)-catequina, galato de metila, quercetina-3-O--L-arabinopiranosídeo e quercetina-3-O--D-galactopiranosídeo) obtidos de plantas do Cerrado brasileiro, empregadas popularmente no tratamento de distúrbios gastrintestinais, foram determinadas pela técnica do vermelho neutro, microdiluição em caldo, redução do radical 1,1-difenil-2-picril-hidrazila (DPPH) e quimiluminescência dependente de luminol, respectivamente. As preparações vegetais (extratos, frações e mistura de triterpenos) apresentaram baixo potencial citotóxico para a linhagem celular empregada (McCoy). Dentre os compostos fenólicos, quercetina (padrão comercial) e (+)-catequina apresentaram maior citotoxicidade quando comparadas aos extratos, frações e mistura de triterpenos. As espécies Byrsonima crassa (Malpighiaceae) e Davilla elliptica (Dilleniaceae) demonstraram maior potencial para o tratamento de doenças induzidas pelo H. pylori por proporcionarem maior atividade antibacteriana (concentração mínima inibitória = 1024 g/mL), entretanto frações enriquecidas e substâncias isoladas não foram conclusivas para o reconhecimento de grupos ou compostos que pudessem inferir a mesma capacidade... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Helicobacter pylori is a bacterium recognized as the major cause of chronic gastritis and peptic ulcer. The H. pylori infection induces an inflammatory response and pathological changes in the gastric microenvironment. The host immune cells (especially neutrophils) release inflammatory mediators and large amounts of reactive oxygen species (ROS), which are related to an increased risk of developing gastric cancer. In this study, we evaluated the basal cytotoxicity, anti-H. pylori and antioxidant activities of extracts (apolar and polar), fractions, mixture of triterpenes (-amirin and -amirin) and phenolic compounds (amentoflavone, (+)-catechin, methyl gallate, quercetin 3-O--L-arabinopyranoside and quercetin-3-O--D-galactopyranoside) obtained from Brazilian Cerrado plants used to treat gastrointestinal disorders, by neutral red uptake assay, broth microdilution method, 1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical and luminol-dependent chemiluminescence assays, respectively. A low basal cytotoxicity was showed by the vegetal preparations (extracts, fractions and mixture of triterpenes). Among the phenolic compounds tested, quercetin (commercial standard) and (+)-catechin demonstrated higher cytotoxicity as compared to extracts, fractions and mixture of triterpenes. The Byrsonima crassa (Malpighiaceae) and Davilla elliptica (Dilleniaceae) specie presented greater potential for the treatment of H. pylori-induced gastric pathologies, since they have better antibacterial activity (minimum inhibitory concentration = 1024 g/mL). However, fractions and isolated compounds were not conclusive to identify substances that could be accountable for the antimicrobial activity of the extracts. The antioxidant activity in vitro (DPPH assay) was not necessarily the same as those observed in the ex vivo assay (luminol-dependent chemiluminescence). Although the poor anti-H. pylori activity... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Maria Stella Gonçalves Raddi / Coorientador: Luiz Marcos da Fonseca / Banca: Luiz Marcos da Fonseca / Banca: Celso Vataru Nakamura / Banca: Clélia Akiko Hiruma Lima / Banca: Wagner Vilegas / Banca: Iracilda Zeppone Carlos / Doutor

Submitted by JULIA DIETSCHE MONFARDINI null (juliadm@iq.unesp.br) on 2016-04-01T16:52:10Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Julia Dietsche Monfardini.pdf: 10246419 bytes, checksum: dff6716d7f1e0f36c408ba7afeff1e25 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-04-05T18:12:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 monfardini_jd_me_araiq_par.pdf: 807325 bytes, checksum: 9a9635608b6709f23a60f0fd6f5e676e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-05T18:12:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 monfardini_jd_me_araiq_par.pdf: 807325 bytes, checksum: 9a9635608b6709f23a60f0fd6f5e676e (MD5) Previous issue date: 2016-03-10 / Os micro-organismos têm demonstrado serem valiosas fontes de princípios ativos de uso clínico, no qual a penicilina é o exemplo mais conhecido de metabólito secundário, de importância medicinal, produzido por fungos. A espécie vegetal Eugenia jambolana Lam., popularmente conhecida como Jambolão, é utilizada na medicina popular brasileira, principalmente no tratamento de diabetes. O fungo Botryosphaeria parva, isolado das folhas da E. jambolana (L.) e codificado como Ej_F01, foi cultivado em escala ampliada em três meios de cultivo: Czapek®, PDB e Milho. Após o período de fermentação do endófito no meio de milho, foi feita uma extração direta com MeOH, seguida de filtração e evaporação do solvente. O extrato obtido foi solubilizado em AcOEt e fez-se três partições líquido-líquido com H2O, após a evaporação do solvente orgânico, o extrato foi dissolvido em CH3CN e foi feita uma nova partição líquido-líquido com Hexano, após a evaporação da CH3CN, foi obtido o extrato de interesse. Após o período de fermentação do endófito nos meios líquidos (PDB e Czapek®), a suspensão micelar foi filtrada a pressão reduzida, separando os micélios dos meios fermentados. Em seguida, os filtrados aquosos foram submetidos a três partições líquido-líquido com AcOEt, e após a evaporação do solvente orgânico, foram obtidos os extratos brutos de interesse. Todos os extratos foram fracionados utilizando técnicas cromatográficas, como Cromatografia em Coluna e/ou Cromatografia Líquida de Alta Eficiência preparativa. Após o fracionamento dos extratos brutos, foi possível obter sete substâncias oriundas do extrato do milho, seis substâncias do extrato do Czapek®, e uma do extrato de PDB, que foram submetidas a análises espectrométricas (EM, RMN de 1H, 13C, 1D e 2D) para a determinação/identificação estrutural. As substâncias 05, 08, 09 e 11 foram identificadas como 5-hidroximeleina, rel. (3S, 4S)-4-hidroximeleina, meleina e rel. (3S, 4R)-4-hidroximeleina, respectivamente, pertencentes à classe das isocumarinas; as substâncias 01, 03, 06 e 07 foram identificadas como botryosphaerin A, 13,14,15,16-tetranorlabd-7-eno-19,6β:12,17-diolídeo, CJ-14445 e oidiolactona E, respectivamente, pertencentes à classe dos diterpenos tetranorlabdanos; a substância 12 foi identificada como botryosphaerona D, pertencente à classe das naftalenonas. A substância 02, inédita, foi nomeada como rel. (4S, 5R, 6R, 10S)-18-hidroxi-13,14,15,16-tetranorlabd-7,9-dieno-19,6β:12,17-diolídeo, codificada como botryosphaerin I. Os estudos relacionados ao B. parva têm como finalidade verificar sua produção metabólica em diferentes meios de cultivo, bem como a avaliação do potencial biológico dos extratos brutos, frente aos ensaios antioxidante, antifúngico e anticolinesterásico. / Microorganisms have proven to be valuable sources of active principles for clinical use, wherein the penicillin is the best known example of a secondary metabolite of medicinal importance, produced by fungi. The plant species Eugenia jambolana Lam., commonly called Black Plum, is used in traditional Brazilian medicine, especially in the treatment of diabetes. The Botryosphaeria parva fungus, isolated from leaves of E. jambolana (L.) encoded as Ej_F01, was grown on an enlarged scale in three different culture media: Czapek®, PDB and corn. After the fermentation period in the corn media, a direct extraction was done with MeOH followed by filtration and evaporation of the solvent. The extract was disolved in AcOEt and made three liquid-liquid partition with H2O, after evaporation of the organic solvent, the extract was dissolved in CH3CN and was made a new liquid-liquid partition with Hexane, after evaporation of the CH3CN, it was obtained extract of interest. After the fermentation period in liquid media (PDB and Czapek®), the micellar suspension was filtered under reduced pressure, separating the mycelium from the fermented broth. Then, the aqueous filtrates were subjected to three liquid-liquid partition with AcOEt, and after evaporation of the organic solvent, there were obtained the crude extracts of interest. All extracts were fractionated using chromatographic techniques such as column chromatography and/or preparative High Performance Liquid Chromatography efficiency. After the fractioning of crude extracts, it was possible to obtain seven substances derived from corn extract, six substances obtained from Czapek extract, and a substance obtained from the PDB extract, which were submitted to spectrometric analysis (MS-ESI, NMR 1H, 13C, 1D and 2D) for determining and structural identification. The substances 05, 08, 09 and 11 were identified as 5-hydroxymelein, rel. (3S, 4S)-4-hydroxymelein, Melein and rel. (3S, 4R)-4-hydroxymelein, respectively, belonging to the class of isocoumarins; the substances 01, 03, 06 and 07 were identified as botryosphaerin A, 13,14,15,16-tetranorlabd-7-ene-19,6β:12,17-diolide, CJ-14445 and oidiolactone E, respectively, belonging to the class of tetranorlabdanes diterpenoids, and substance 12 was identified as botryosphaerone D, belonging to the class of naftalenones. A new tetranorlabdane diterpenoid was obtained, substance 02, named rel. (4S, 5R, 6R,10S)-18-hydroxy-13,14,15,16-tetranorlabd-7,9-dien-19,6β:12,17-diolide and encoded botryosphaerin I. These studies related to the B. parva are intended to verify your metabolic production in different culture media as well as the evaluation of the biological potential of extracts compared to antioxidant, antifungal and anticholinesterase trials.

Objetivo. Diversos produtos de origem vegetal vêm sendo estudados por serem fontes de antioxidantes, podendo ser uma alternativa aos antioxidantes sintéticos. Este trabalho avaliou a atividade antioxidante in vitro de extratos de erva-mate (Ilex paraguariensis) verde e tostada e de chá verde (Camellia sinensis). Métodos. Extratos aquosos, etanólicos e etéreos foram analisados quanto ao teor de sólidos solúveis, fenólicos totais e atividade antioxidante por dois métodos: captação do radical livre DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazil) e inibição da oxidação sistema ?-caroteno/ácido-linoléico. A análise estatística foi efetuada pela estimativa do erro-padrão dos intervalos de confiança das diferenças das médias. Resultados. Extratos aquosos e etanólicos apresentaram os maiores teores de sólidos solúveis. Em relação aos fenólicos totais, o extrato etanólico de chá verde apresentou o maior teor (13,0mg/mL/EAC), enquanto o extrato etanólico de erva-mate tostada apresentou o menor (3,4mg/mL/EAC). Em relação à porcentagem de captação do DPPH, todos os resultados obtidos foram similares ou superiores aqueles encontrados para o BHT. No teste de inibição da oxidação, o extrato aquoso de erva-mate tostada (1,0mg/mL) apresentou resultado médio 10,1% maior do que o extrato aquoso de erva-mate verde e o extrato etanólico da erva-mate tostada (1,0mg/mL) resultado médio 11,7% maior do que o extrato de erva-mate verde. Apenas os extratos aquoso e etéreo de chá verde apresentaram resultados inferiores ao BHT. Conclusão. Evidenciou-se a elevada atividade antioxidante de diferentes extratos de erva-mate (verde e tostada) e de chá verde, indicando o potencial uso dessas ervas como antioxidantes alimentícios. / Objective. Different products from vegetal origin have been studied due to the fact that they are known as sources of antioxidants, which could be an alternative to the synthetic antioxidants. This research investigated in vitro antioxidant activity of extracts of green and roasted mate (Ilex paraguariensis) and green tea (Camellia sinensis). Methodology. Soluble solid, total phenolics and antioxidant activity were analyzed in aqueous, ethanolic and etheric extracts. Two methods were used: free radical DPPH. (1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl) quenching assay and ?-carotene/linoleic-acid oxidation model system. Data were analysed by the standard error estimative of the confidence intervals from average differences. Results. Aqueous and ethanolic extracts presented the highest content of soluble solids. Ethanolic extracts of green tea had the highest phenolic content (13,0mg/mL/EAC), while ethanolic extracts of roasted mate presented the lowest (3,4mg/mL/EAC). All results from DPPH. quenching assay were similar or superior to those found for BHT (synthetic antioxidant). The ?-carotene/linoleic acid oxidation model system showed that the aqueous extract of roasted mate (1,0mg/mL) had an average value 10.1% higher than aqueous extract of green mate, and the roasted mate ethanolic extract (1,0mg/mL) showed higher values (11.7%) than green mate ethanolic extract. Only aqueous and etheric green tea extracts presented lower values when compared to the BHT. Conclusion. It was evident the high antioxidant activity of different extracts from mate (green and roasted) and green tea, indicating the potential use of these herbs as natural antioxidants in food systems.

The essential oils of six species of plants wild in south Brazil, were investigated as for its chemical composition, antibacterial activity and antioxidant potential. The selected species for this study were Calea clematidea (Asteraceae), Acanthospermum australe (Asteraceae), Tagetes minuta (Asteraceae), Julocroton humilis (Euphorbiaceae), Nectandra megapotamica (Lauraceae) e Nectandra lanceolata (Lauraceae). In this work, the essential oil of each specie was submitted to chromatographic procedures to isolate its constituents in pure form. The structural determination of isolated components were realized through chromatographic technics, obtainment of Kovats indices, GC-MS and RMN of 1H and 13C uni- and bi dimensional. So that, were possible to identify two inedited sesquiterpenes of essential oil from Nectandra megapotamica denominated in this work as PF1 and PF2. From essential oil of Acanthospermum australe were isolated its principal constituent, the mix of Carvacrol isobutirate and Timol isobutirate. In conclusion, the essential oil obtained as well as, the isolated components through chromatographic methods were submitted to antibacterial and antifungical tests, using the microdiluition methods, through which is possible to observe that the essential oils were active against a greater number of microorganisms. The results, between 6,5 a 100 μg/ mL, showed that the PF1 and PF2 have a excellent antimicrobial activity against the tested microorganisms. Furthermore, the antioxidant activity was accessed by the reducing power assay, the scavenging effect on DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) radicals model system. In a general way, the essential oils from Acanthospermum australe presented moderate antioxidant activity. / Os óleos essenciais de seis espécies de plantas nativas do sul do Brasil foram obtidos através de hidrodestilações e analisados quanto suas composições químicas, atividades antimicrobianas e potencial antioxidante. As espécies selecionadas para este estudo foram: Calea clematidea (Asteraceae), Acanthospermum australe (Asteraceae), Tagetes minuta (Asteraceae), Julocroton humilis (Euphorbiaceae), Nectandra megapotamica (Lauraceae) e Nectandra lanceolata (Lauraceae). Neste trabalho, os óleos voláteis de cada espécie foram submetidos a procedimentos cromatográficos visando o isolamento de seus constituintes em suas formas puras. As análises estruturais dos componentes isolados puros foram realizadas através de técnicas cromatográficas, obtenção dos respectivos índices de retenção de Kovats, cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas e ressonância magnética nuclear de 1H e 13C utilizando-se de técnicas uni- e bidimensionais. Desta forma, identificaram-se dois componentes sesquiterpênicos inéditos como componentes do óleo essencial de Nectandra megapotamica, denominado neste trabalho de PF1 e PF2. Do óleo essencial de Acanthospermum australe foi isolado o seu principal constituinte, uma mistura de Carvacrol isobutirato e Timol isobutirato. Finalmente, os óleos essenciais obtidos, assim como os componentes isolados através de métodos cromatográficos, foram testados quanto as suas possíveis atividades antimicrobianas. Para isso foi utilizado o método de Microdiluição em caldo (CIM), através do qual se observou que os óleos analisados foram ativos contra a maioria dos microorganismos utilizados. Os resultados, entre 6,5 a 100 μg /mL), mostraram que a PF1 e PF2 têm uma excelente atividade antimicrobiana contra os microrganismos testados. Além disso, a atividade antioxidante foi realizada pelo método DPPH, que é baseado na captura do radical DPPH (2,2-difenil-1-picril-hidrazil) por antioxidantes. De uma maneira geral, os óleos essenciais de Acanthospermum australe apresentaram atividade antioxidante moderada.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The present study aims to evaluate the functional compounds dietary fibre and fractions, antioxidants, minerals, and antioxidant activity of barley cultivars, and a concentrated extract made from whole grains of barley through methodologies in vitro and to investigate the influence of the growing region and climatic factors on the content of functional compounds of cultivars. The work is divided into three chapters dealing respectively with: Literature review on barley (Hordeum vulgare L.) addressing the anatomical characteristics of barley grain, functional components of barley grain (dietary fibre, β-glucans, minerals, flavonoids), identification and functions of the phenolic compounds (rutin, caffeic acid, ferulic acid, myricetin, gallic acid, catechin, tannic acid, p-coumaric acid), analytical methods for detection and quantitation of phenolic compounds (High-liquid chromatography (HPLC), Mass spectrometry electrospray ionization (ESI-MS/MS), Folin- Ciocalteau s method, antioxidant activity in vitro (determination of antioxidant capacity by capturing the free radical DPPH, determination of reactive oxygen species (ANCOMROS), and superoxide anion radical); Development (subdivided in the form of thematic chapters, according to the standards published by the National Institute of Industrial Property (INPI) and scientific journals in the area) and the final considerations from the author about their her findings. / O presente trabalho tem por objetivo avaliar os compostos funcionais fibra alimentar e frações, antioxidantes, minerais, bem como a atividade antioxidante de cultivares de cevada, e de um extrato concentrado obtido a partir de grãos integrais de cevada por meio de metodologias in vitro e investigar a influência da região de cultivo e dos fatores climáticos no conteúdo dos compostos funcionais das cultivares. O trabalho está dividido em três capítulos tratando respectivamente de: Revisão de literatura sobre cevada (Hordeum vulgare L.) abordando as características anatômicas do grão de cevada, componentes funcionais do grão de cevada (fibra alimentar, β-glicanas, minerais, flavonóides), identificação e funções dos compostos fenólicos (rutina, ácido caféico, ácido ferúlico, miricetina, ácido gálico, catequina, ácido tânico, ácido p-cumárico), metodologias analíticas para detecção e quantificação de compostos fenólicos (Cromatografia a líquido de alta eficiência (CLAE), Espectrometria de massas com ionização electrospray (ESI-MS/MS), método de Folin-Ciocalteau, atividade antioxidante in vitro (determinação da capacidade antioxidante pela captura do radical livre DPPH, determinação de espécies reativas de oxigênio (ANCOMROS) e radical ânion superóxido); Desenvolvimento (subdividido na forma de capítulos temáticos, conforme as normas de publicação do Instituto Nacional da Propriedade Industrial (INPI) e revistas científicas da área) e das considerações finais da autora sobre os seus achados.

Submitted by Vasti Diniz (vastijpa@hotmail.com) on 2017-09-04T13:20:40Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1164967 bytes, checksum: 332512ca6a2aeedf157cf9480454d7f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-04T13:20:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1164967 bytes, checksum: 332512ca6a2aeedf157cf9480454d7f8 (MD5) Previous issue date: 2017-06-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Colostrum from the first secretions of the mammary glands is considered an essential food for the development of newborns due to its high content of proteins, antimicrobial peptides, macro and micronutrients. The serum is considered na important coproduct for the dairy industry, configuring about 85-90% of the total milk volume, its proteins are recognized by their biological properties, since they have an excellent composition and bioavailability of essential amino acids. The present study had as objective to characterize the serum protein profile of goat colostrum produced by goats Created in Paraíba and to evaluate possible biological activities. The serum (SR) was obtained by acid precipitation in pH 4.1 and fractionated by ammonium sulfate precipitation to obtain the fractions 0-30% (SF1), 30- 60% (SF2) and 60-90% (SF3). The analysis of the protein profile was verified by SDS-PAGE and total amino acids. The biological properties of the samples were verified with the analysis of antioxidant, DNA protection and antibacterial activities. It was verified that colostrum serum presents proteins with molecular masses between 12-160kDa and an excellent profile of amino acids. From the obtained results it is possible to affirm that all the fractions were able to sequester the radicals ABTS and DPPH. For the DNA protection test, the concentracion of 10μg of SF3 conferred a greater integrity to the molecule. The samples presented inhibitory activity for both gram-negative and gram-positive bacteria. Colostrum serum proteins have biological properties with potential biotechnological application and pharmaceutical interest / O colostro oriundo das primeiras secreções das glândulas mamárias é considerado um alimento essencial para o desenvolvimento dos recém-nascidos, devido seu elevado teor de proteínas, peptídeos antimicrobianos, macro e micronutrientes. O soro é considerado um coproduto importante para a indústria leiteira, configurando cerca de 85–90% do volume total do leite. Suas proteínas são reconhecidas pelas propriedades biológicas, uma vez que possuem uma excelente composição e biodisponibilidade de aminoácidos essenciais. O presente estudo teve como objetivo caracterizar o perfil proteico do soro de colostro caprino produzido por cabras criadas na Paraíba e avaliar possíveis atividades biológicas. O soro (SR) foi obtido por precipitação ácida em pH 4,1 e fracionado por precipitação com sulfato de amônio para obtenção das frações 0-30% (SF1), 30-60% (SF2) e 60-90% (SF3). A análise do perfil proteico foi verificado por SDS-PAGE e aminoácidos totais. As propriedades biológicas das amostras foram verificadas com as análises das atividades antioxidante, proteção ao DNA e antibacteriana. Verificou-se que o soro do colostro apresenta proteínas com massas moleculares entre 12-160kDa e um excelente perfil de aminoácidos. A partir dos resultados obtidos é possível afirmar que todas as frações foram capazes de sequestrar os radicais ABTS e DPPH. Para o teste de proteção ao DNA, a concentração de 10μg de SF3 conferiu uma maior integridade à molécula. As amostras apresentaram atividade inibitória tanto para as bactérias gramnegativas quanto para gram-positivas. As proteínas do soro do colostro apresentam propriedades biológicas com potencial aplicação biotecnológica e de interesse farmacêutico.

Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2017-09-11T13:37:48Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4539317 bytes, checksum: 8b0c70f7cf6924075fe039736b510527 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-11T13:37:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4539317 bytes, checksum: 8b0c70f7cf6924075fe039736b510527 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Dalbergia ecastophyllum (L.) Taub., popularly known as “rabo-de-bugio” or “marmelo-do-mangue”, is a species of the Fabaceae family, with expressive commercial value, since propolis comes from resinous exudates present in the stem of this species. This study aimed to contribute the phytochemistry study of Dalbergia (Fabaceae) genus through the phytochemical study of D. ecastophyllum species. The plant material (leaves and roots) was collected in Rio Tinto - Paraiba and deposited in the Herbarium of the Department of Systematics and Ecology – UFPB with the 45738 code (JPB). For phytochemical study, the plant material after drying and pulverization, was subjected to extraction processes, partition and chromatography to isolate the chemical constituents. The chemical structures thereof were determined by spectroscopic methods and comparisons with literature data. The fractions of the leaves allowed isolation of 13²-17³-hydroxy-ethoxypheophorbide A, pheophytin A, phytol and isoquercitrin substances. Since fractions of the roots were isolated the cedrol, acetate morolic acid, daidzein, formononetin, β-sitosterol and stigmasterol; and 4-geranyl-3,5-dihydroxy-4'-methoxy-trans-stilbene. The latter substance was isolated for the first time in the literature. The ethyl acetate fraction of the leaves has excellent antioxidant activity against DPPH (IC50 = 0.85 ± 0.236 g/ml). / Dalbergia ecastophyllum (L.) Taub., popularmente conhecida como rabo-de-bugio ou marmelo-do-mangue, é uma espécie da família Fabaceae, de significativa importância comercial, visto que a própolis vermelha tem origem do exsudato resinoso presente no caule desta espécie. Este trabalho objetivou contribuir o estudo fitoquímico do gênero Dalbergia (Fabaceae) através do estudo fitoquímico da espécie D. ecastophyllum. Para tanto, o material vegetal (partes aéreas e raízes) foi coletado em Rio Tinto – Paraíba e depositado no Herbário do Departamento de Sistemática e Ecologia – UFPB com o código 45738 (JPB). Para o estudo fitoquímico, o material vegetal, após secagem e pulverização, foi submetido a processos de extração, partição e cromatografia para isolamento dos constituintes químicos. As estruturas químicas dos mesmos foram determinadas por métodos espectroscópicos e comparações com modelos da literatura. Das frações das partes aéreas foram isoladas as substâncias 13²-hidroxi-17³-etoxifeoforbídeo A, feoftina A, fitol e isoquercitrina. Já das frações das raízes foram isolados o cedrol, acetato de ácido morolique, daidzeina, formononetina, β-sitosterol e estigmasterol; e 4-geranil-3,5-dihidroxi-4’-metoxi-trans-stilbeno. Sendo este último isolado pela primeira vez na literatura. A fração acetato de etila das partes aéreas apresentam uma excelente atividade antioxidante frente ao DPPH (CE50 = 0,85 ± 0,236 μg/ml).

Submitted by GABRIELA BRASIL ROMÃO null (gabibromao@yahoo.com.br) on 2016-08-02T16:22:32Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Versão Final (GABRIELA BRASIL ROMAO).pdf: 4722088 bytes, checksum: 45c94484a90edf6dfe782f335f396a2e (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-08-02T17:18:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 romao_gb_me_arafcf.pdf: 4722088 bytes, checksum: 45c94484a90edf6dfe782f335f396a2e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T17:18:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 romao_gb_me_arafcf.pdf: 4722088 bytes, checksum: 45c94484a90edf6dfe782f335f396a2e (MD5) Previous issue date: 2016-07-04 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A erva-baleeira, Cordia verbenacea DC., é uma espécie de planta originária do Brasil, encontrada principalmente na Floresta Tropical Atlântica. É largamente utilizada na medicina tradicional por apresentar, principalmente, ação anti-inflamatória. Dados recentes da literatura mostraram que esta ação está relacionada à presença de compostos fenólicos, flavonoides e sesquiterpenos, além de ser constatada a atividade antioxidante em diferentes extratos de C. verbenacea. Epécies reativas de oxigênio e nitrogênio são produzidas constantemente no organismo, podendo causar danos ou benefícios aos sistemas biológicos. Estão altamente relacionadas com o processo de envelhecimento do organismo, e, consequentemente, do envelhecimento cutâneo. A busca e pesquisa de cosméticos com ativos naturais com propriedades antioxidantes tem aumentado significativamente. Este estudo teve como objetivo avaliar a ação do extrato hidroetanólico 70 % de folhas de C. verbenacea (EtOH 70 %) em diferentes espécies reativas de oxigênio de importância biológica, para uma possível aplicação na prevenção do envelhecimento cutâneo. Inicialmente, foram comparados os extratos etanólico, hidroetanólico 70 % e aquoso de folhas de C. verbenacea a fim de selecionar o extrato com maior teor de compostos fenólicos totais e flavonoides totais, além de maior atividade antioxidante. O extrato EtOH 70 % foi selecionado para avaliação da atividade antioxidante in vitro frente a diferentes espécies reativas (radicais modelo ou sistemas biológicos modelo envolvendo estas espécies) como também avaliar a citotoxicidade, os perfis cromatográficos em CCD e CLAE-DAD e desenvolver uma formulação fitocosmética contendo o extrato para avaliar o fator de proteção solar (FPS). O extrato EtOH 70 % apresentou resultados promissores em relação à atividade antioxidante comparado aos resultados dos padrões utilizados e aos dados da literatura disponíveis para extratos vegetais similares. Com relação ao FPS, este não apresentou valor considerável. Na linhagem celular HepG2 o extrato EtOH 70 % não apresentou citotoxicidade nas concentrações testadas, porém, na linhagem HaCat, apresentou baixa citotoxicidade. O extrato EtOH 70 % apresentou teor de compostos fenólicos totais e flavonoides totais de 14,0 e 4,0 % (m/m), respectivamente; os valores de CE50 obtidos para os ensaios de análise antioxidante pelo DPPH•, ABTS+•, O2―•, descoramento da crocina (ROO•), HOCl e H2O2 foram de 13,44, 7,02, 196,61, 10,93, 3,49 e 302,17 μg/mL, respectivamente; os perfis cromatográficos mostraram-se complexos contendo substâncias de média e alta polaridade, sugerindo a presença de flavonoides e triterpenos pelos espectros no UV e sendo confirmada pela quantificação das substâncias 4',5-diidroxi-2',3,5',6,7-pentametoxiflavona, cordialina A e outro triterpeno análogo à cordialina A com teores de 0,66, 0,67 e 0,12 % (m/m), respectivamente. Com os resultados obtidos foi possível comprovar a eficácia do extrato EtOH 70 % quanto à sua pronunciada atividade antioxidante frente a diferentes espécies reativas, possivelmente, devido às substâncias fenólicas e flavonoides, o que pode ter também relação com a sua atividade anti-inflamatória. / Erva-baleeira, Cordia verbenacea DC., is a native Brazilian plant species, mainly found at the Atlantic Forest. It is widely used in traditional medicine mostly for its anti-inflammatory properties. Literature data shows that this activity is related to the presence of phenolic compounds, flavonoids and sesquiterpenes, it was also verified the antioxidant activity for different extracts of C. verbenacea. Reactive oxygen and nitrogen species are constantly produced in the organism and might cause damage or benefits on biological systems. They are highly related to the ageing process of the body and, consequently, to skin ageing. The research for natural cosmetics drugs with antioxidant properties has had a significant increase and, therefore, the aim of this study was to evaluate the antioxidant activity of an hydroethanolic extract of C. verbenacea leaves (EtOH 70 %) on different reactive oxygen species of biological importance. Initially, the ethanolic, hydroethanolic (70 %) and aqueous extracts of C. verbenacea leaves were compared to select the extract with a higher total phenolic content and total flavonoid content, as well as higher antioxidant activity. The EtOH 70 % extract was selected for in vitro evaluation of its antioxidant activity against different reactive species (radicals model or bioprocess model involving these species), but also to evaluate its cytotoxicity, the chromatographic profiles in TLC and HPLC and to develop a phytocosmetic contaning the extract, to evaluate its sun protection factor (SPF). The EtOH 70 % extract showed promising results concerning the antioxidant activity compared to the standard substances used and to the available literature data for similar plant extracts. Regarding to the SPF, the extract did not present a considerable value. In HepG2 cell line, the extract did not show cytotoxicity on the tested concentrations, but, in HaCat cell line, it showed low cytotoxicity. The EtOH 70 % extract exhibited total phenolic content and total flavonoid content of 14.0 and 4.0 % (w/w), respectively; the EC50 values obtained from the antioxidant activity tests by DPPH• , ABTS+• , O2 ―• , crocin bleaching (ROO• ), HOCl and H2O2 assays were 13.44, 7.02, 196.61, 10.93, 3.49 and 302.17 μg/mL, respectively; the chromatographic profiles demonstrated to be complex containg substances of medium and high polarity, suggesting the presence of flavonoids and triterpenes by UV spectra, which were confirmed by the quantification of 4',5-dihydroxy-2',3,5',6,7-pentamethoxiflavone, cordialin A and another triterpene similar to cordialin A with the content of 0,66, 0,67 e 0,12 % (w/w), respectively. From the obtained results, it was possible to prove the effectiveness of EtOH 70 % extract regarding its pronounced antioxidant activity against different reactive species, possibly, due to the phenolics and flavonoids and, also, the relation with its anti-inflammatory activity.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AnaKLN_DISSERT.pdf: 1765239 bytes, checksum: 7e63eba3061cff582da8c8d2fd3d9659 (MD5) Previous issue date: 2013-03-18 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Plukenetia volubilis conhecida popularmente como sacha incha ou amendoa lopo, ? uma planta oleaginosa e trepadeira, pertecente a fam?lia Euphorbiaceae. Suas sementes apresentam alto valor nutritivo e suas folhas s?o utilizadas pela popula??o amaz?nica para tratar doen?as de pele, contudo essa a??o n?o ? comprovada cientificamente. Dentro deste contexto, o presente trabalho prev? uma prospec??o qu?mica e biol?gica de diferentes extratos obtidos das folhas de P. volubilis. : extrato aquoso (EA), metan?lito (EM), etan?lico (EE), clorof?rmico (EC) e hex?nico (EH). A triagem fitoqu?mica foi realizada por meio de rea??es qu?micas de identifica??o e an?lise por cromatografia em camada delgada (CCD), utilizando diferentes eluentes e reveladores. Como parte das an?lises de constitui??o qu?mica dos extratos, foram realizadas dosagens de compostos fen?licos, a??cares totais e prote?nas. Em rela??o ?s atividades biol?gicas, foi avaliada a capacidade antioxidante dos extratos e seus efeitos sob c?lulas tumorais e normais. Com os resultados obtidos foi poss?vel detectar por meio das reacoes a presen?a de compostos fen?licos, flavonoides, saponinas e alcaloides. Por meio da an?lise por CCD foi poss?vel verificar a presen?a de compostos com estruturas de terpenos, polifen?is e flavon?ides. O extrato metan?lico (EM) apresentou uma banda de colora??o verde e Rf 0,65 similar ao padr?o de flavon?ide canferol. Com as metodologias de dosagem qu?mica foi observado uma elevada quantidade de a??cares totais nos extratos de P. volubilis. Os testes para avalia??o da atividade antioxidante revelaram que todos os extratos apresentam capacidade antioxidante. No teste de capacidade antioxidante total (expresso como equivalente em ?cido asc?rbico, EEA/g), os extratos apresentaram valores que variaram entre 59,31 a 97,76 EAA/g. Para o teste de DPPH os valores de sequestro variaram de 88,3% a 62,8%. O teste de viabilidade celular, verificado por meio da redu??o do composto MTT possibilitou observar que os extratos foram capazes de diminuir a viabilidade das c?lulas cancer?genas HeLa e A549, sendo mais eficazes para linhagem HeLa. Os extratos EM e EH (250 ?g/mL) apresentaram redu??o da prolifera??o de HeLa para 54,3 e 48,5%, respectivamente. Enquanto que os extratos EH e EA induziram de forma significativa a prolifera??o de fibroblastos normais 3T3, cerca de 70% a mais que o controle. Resultado semelhante foi observado em macr?fagos Raw, onde foi verificado que a prolifera??o dessas c?lulas tratadas com os extratos EM, EC e EA foi a duas vezes mais que o controle. Nenhum efeito foi observado nas c?lulas CHO quando tratadas com os extratos. Outra abordagem utilizada foi a de citometria de fluxo de modo a avaliar marcadores de morte celular em c?lulas HeLa quando expostas aos extratos de P. volubilis. Os resultados destes ensaio mostraram que os extratos induziram a morte celular via apoptose. Portanto, esses resultados sugerem que os extratos das folhas de P. volubilis s?o potenciais alvos para serem utilizados futuramente no desenvolvimento de f?rmacos com a??o antioxidante, proliferativa e antitumoral