DORNELAS, Conceição Aparecida. Efeitos da própolis verde na carcinogênese e angiogênese de tumores de bexiga induzidos pelo bbn em ratas wistar. 2009. 333 f. Tese (Doutorado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-17T11:45:41Z No. of bitstreams: 1 2009_tese_cadornelas.pdf: 7855534 bytes, checksum: 9a68b2eca1e4255673da8570ab0f60d9 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-03-17T11:46:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_tese_cadornelas.pdf: 7855534 bytes, checksum: 9a68b2eca1e4255673da8570ab0f60d9 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-17T11:46:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_tese_cadornelas.pdf: 7855534 bytes, checksum: 9a68b2eca1e4255673da8570ab0f60d9 (MD5) Previous issue date: 2009 / The present study evaluated the effects of prolonged, daily intragastric (ig) or subcutaneous (sc) administration of water-soluble derivative of green propolis extracted in L-lysine and of ig administration of L-lysine upon Wistar rat bladder carcinomas angiogenesis and bladder carcinogenesis induced with BBN (N-butyl-N-[4-hydroxybutyl] nitrosamine). At baseline 125 rats were distributed in 14 groups (I, IIA, IIB, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII and XIII). Groups I through X received BBN in drinking water for 14 weeks. Group I was treated with propolis ig (150 mg/kg body weight) during 44 weeks beginning 30 days before challenge with BBN. Groups IIA, III and VIII were treated for 40 weeks with propolis (150 mg/kg) sc and ig initiated concurrently with BBN. By the 32nd week, the animals in Groups IV, V, VI, VII and IX were ultrasound-scanned, stratified and reallocated into 4 groups (K, L, M and N) so that the groups contained the same number of animals with small, medium and large tumors or without lesions. Groups L, M and N were treated with L-lysine ig (300mg/kg), celecoxib (30 mg/kg) and propolis (300 mg/kg), respectively, from the 32nd to the 40th week. Groups IIB and K (positive control groups receiving BBN only) were treated with water sc and orally, respectively, during 40 weeks. Groups XI, XII and XIII (negative control groups) received propolis (150mg/kg), L-lysine (150 mg/kg) and water ig, respectively, for 40 weeks. Groups III and VIII were merged into a single group (Group III). The animals were euthanized after 40 weeks. Carcinogenesis was studied in all groups. Angiogenesis was evaluated for Groups K, L, M, N, III and X using quantifying microvascular density of hot spots in histological sections stained with the marker CD-31 and analyzed with specific software. The carcinogenesis index (21.00) and the carcinoma incidence (20%) in Group I (treated with propolis 30 days prior to challenge with BBN) were smaller (p<0.05) than for Group K (control; 39.67 and 66.67%, respectively). The microvascular density of bladder carcinoma hot spots was smaller (p<0.05) for rats treated with propolis for 40 weeks (Group III) and rats treated with propolis from the 32nd to the 40th week (Group N) than for rats receiving BBN only (Group K). Carcinoma multiplicity (p=0.00267), carcinogenesis index (p<0.05) and microvascular density (p<0.05) were greater for Group X (treated with L-lysine) than for group K. In addition, the carcinoma incidence in Group X was 100%, and tumors were more invasive (p=0.0039) than in Group K. The group receiving only L-lysine presented no vesical lesions, indicating that L-lysine in itself does not generate carcinomas. Our review of the literature identified no reports of L-lysine acting as a promoter of bladder carcinogenesis. However, the 100% carcinoma incidence observed in the group treated with L-lysine suggests the amino acid may serve as a model for the study of carcinogenesis. In conclusion, daily ig administration of water-soluble derivative of green propolis at 150 mg/kg body weight reduced the incidence of carcinoma when initiated 30 days prior to challenge with BBN, and inhibited angiogenesis in bladder carcinoma at 150 mg/kg when initiated concurrently with BBN or when administered at 300 mg/kg after 31a week of the initiate BBN. / Avaliação dos efeitos da administração diária, intragástrica (ig) e subcutânea (sc) prolongada do produto hidrossolúvel da própolis verde, extraída em L-lisina e do aminoácido L-lisina ig sobre a angiogênese de carcinomas de bexiga e a carcinogênese de bexiga induzida pelo BBN (N-butil-N{4-hidroxibutil}nitrosamina) em ratas Wistar. O total de 125 ratas foi distribuído inicialmente em 14 grupos: I, IIA, IIB, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII e XIII. Os grupos de I a X receberam BBN por 14 semanas em água de beber. O grupo I foi tratado com própolis ig 150 mg/kg/peso, por 44 s, iniciado 30 dias antes do início do BBN. Os grupos IIA, III e VIII foram tratados com própolis (150 mg/kg/peso), por 40s, vias sc e ig iniciada simultaneamente com o BBN. Na 32ªs, os animais dos grupos IV, V, VI, VII e IX, após ultrassonografia, foram estratificados e realocados em 4 grupos K, L, M e N, de forma que cada grupo recebesse o mesmo número de animais sem lesão vesical ou com imagem tumoral pequena, média e grande. As ratas dos grupos L, M e N, foram tratadas ig com: L-lisina (300mg/kg/peso), celecoxibe (30 mg/kg/peso) e própolis (300 mg/kg/peso) respectivamente, da 32ª a 40ªs. Os grupos controles positivos (que receberam apenas BBN) IIB e K foram tratados com água, via sc e oral, respectivamente, por 40 s. Os grupos controles negativos XI, XII e XIII receberam nesta sequência, própolis (150mg/kg/peso), L-lisina (150 mg/kg/peso) e água ig por 40 semanas (s). Os grupos III e VIII foram reunidos em um único grupo, o grupo III. Os animais foram sacrificados ao final da 40ªs. A carcinogênese foi estudada em todos os grupos. A angiogênese foi avaliada nos grupos K, L, M, N III e X, pela quantificação da densidade microvascular em hot spots, através de imunomarcação (CD-31), utilizando-se um programa de computador. O índice de carcinogênese (21,00) e a incidência de carcinomas (20%) no grupo I, tratado com própolis 30 dias antes do início do BBN, foram menores (P<005) que os do grupo controle K (39,67% e 66,67%, respectivamente). A densidade microvascular de hot spot em carcinomas de bexigas foi menor (P<0,05) tanto em ratos tratados com própolis por 40 semanas (grupo III), quanto em tratados com própolis da 32ª a 40ªs (grupo N), quando comparada com a densidade dos carcinomas de animais que receberam apenas carcinógeno (grupo K). A multiplicidade de carcinomas (P= 0, 00267), o índice de carcinogênese (P<0,05) a densidade microvascular (P<0,05) no grupo X (tratado com L-lisina) foram maiores que os do grupo controle K. Somando-se a isso, a incidência de carcinomas no grupo X foi de 100% e apresentando tumores mais invasivos (p= 0, 0039) que os verificados no grupo K. O grupo que recebeu apenas L-lisina não apresentou lesões vesicais. Isso significa que a L-lisina por si só não gera carcinomas. Não há descrição de efeito promotor da L - lisina na carcinogênese de bexiga na literatura pesquisada. A incidência de 100% de carcinomas no grupo tratado com L- lisina pode fazer desta modelo para estudo da carcinogênese de bexiga. Conclui-se que o produto de própolis verde administrado diariamente na dose de 150 mg/kg/peso ig, diminui a incidência de carcinomas quando iniciada 30 dias antes do BBN e inibe a angiogênese de carcinomas de bexiga na dose de 150 mg/kg/peso quando iniciada simultaneamente ou na dose de 300 mg/kg/peso após a 31ª semana do início de BBN.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pos-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T06:25:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 289480.pdf: 1840258 bytes, checksum: 1a58fd49245ad6bea3a26426f0d7f25a (MD5) / O envolvimento dos receptores B1 e B2 para as cininas em processos fisiopatológicos da bexiga urinária tem sido demonstrado em diversos estudos. No entanto, a implicação destes receptores na hiperatividade da bexiga urinária após lesão medular permanece inexplorada até o momento. Desse modo, este estudo investigou o envolvimento dos receptores B1 e B2 na hiperatividade da bexiga urinária induzida por lesão da medula espinhal por compressão ao nível torácico T9-T10. A lesão medular induziu uma resposta inflamatória pronunciada e diversas mudanças funcionais na contratilidade e nos parâmetros urodinâmicos da bexiga urinária. A lesão medular resultou, ainda, em um aumento nos níveis de RNAm para os receptores B1 na bexiga urinária, nos gânglios da raiz dorsal (L6-S1) e nos segmentos correspondentes da medula espinhal. Houve também, em um aumento na expressão dos receptores B1 e B2 na bexiga urinária. Ensaios in vitro com preparações da bexiga urinária obtidas 2, 7, 14 e 28 dias após a lesão medular reveleram aumento significativo da resposta contrátil a agonistas seletivos dos receptores B1 (des-Arg9-BK) ou B2 (bradicinina) quando comparadas às respostas obtidas de grupos controle ou falso-operado. As respostas aos agonistas B1 ou B2 foram reduzidas pelos seus respectivos antagonistas seletivos, des-Arg9-[Leu8]-BK ou Hoe 140. De maneira interessante, estudos cistométricos em animais com lesão medular demonstraram que o tratamento sistêmico com Hoe 140 reduziu significativamente a amplitude e o número das contrações não-associadas a micção (CNMs) na bexiga urinária. Tratamento sistêmico com o antagonista do receptor B1, des-Arg9-[Leu8]-BK, apenas reduziu significativamente o número das CNMs na bexiga urinária dos animais lesionados. O presente estudo demonstra o importante envolvimento dos receptores B1 e B2 para as cininas na hiperatividade da bexiga urinária induzida por lesão medular em ratos e apontam novos alvos terapêuticos para o tratamento da hiperatividade da bexiga urinária decorrente de lesão medular traumática. / The B1 (B1R) and B2 (B2R) kinin receptors has been implicated in physiological and pathological conditions of the bladder, but its role in overactive bladder (OB) following spinal cord injury (SCI) remains elusive. Here we assessed by means of functional and molecular approaches the relevance of these receptors in OB caused by SCI in rats. SCI resulted in an inflammatory process, changes in bladder contractility and in urodynamic parameters. Moreover, SCI caused a marked up-regulation of B1 mRNA levels in bladder, spinal cord and dorsal root ganglion (L6-S1). SCI also caused an up-regulation of B1 and B2 protein levels in bladder. The exposure of B1 agonist, des-Arg9-BK, and B2 agonist, bradykinin (BK), to bladder strips induced a contractile response significantly enhanced following SCI. Pre-incubation of the bladder preparations with des-Arg-Leu8-BK (B1 antagonist) or Hoe 140 (B2 antagonist), significantly reduced bladder contraction. In addition, cystometric studies on SCI animals revealed that systemic Hoe 140 treatment significantly reduced the amplitude and the number of non-voiding contractions (NVCs) while systemic treatment with DALBK only reduced the number of NVCs. There were no significant changes in basal pressure, threshold pressure, maximum voiding pressure, voided volume and voiding efficiency before administration of vehicle, HOE 140 or DALBK. Taken together, these results suggest that up-regulation of BK receptors are involved in the mechanism inducing OB following SCI in rats.

CARVALHO, Marcos Fiuza de. Análise do efeito de inibidores de fosfodiesterase do tipo 5 e agonistas beta adrenergicos em parametros urodinamicos de camundongos utilizando modelo experimental de hiperatividade detrusora. 2015. 51 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T15:41:19Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_mfcarvalho.pdf: 1241642 bytes, checksum: 64103057c08598098ba4fe542a194bf8 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T16:09:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_mfcarvalho.pdf: 1241642 bytes, checksum: 64103057c08598098ba4fe542a194bf8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-07T16:09:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_mfcarvalho.pdf: 1241642 bytes, checksum: 64103057c08598098ba4fe542a194bf8 (MD5) Previous issue date: 2015 / Pharmacological treatment of detrusor overactivity (DO) has been classically done with antimuscarinics. Recently new pharmacological agents or association of drugs have been used to treat DO. One of them are the beta3 agonists. Beta 3 agonists increase intracellular cyclic adenosine monophosphate (cAMP) through adenylyl cyclase pathway. cAMP induces detrusor smooth muscle (DSM) relaxation. Phosphodiesterase type 5 inhibitors (PDE-5i) like tadalafil also cause DSM relaxation through nitric oxide/cyclic guanosine monophosphate (NO/cGMP) pathway. Besides the above mechanisms it has been hypothetized that association of beta 3 agonists with PDEi may cause more pronounced DSM relaxation. As a consequence, the principal aim of this in vivo experimental study was to evaluate the impact of association of PDE-5i (tadalafil) and beta3 agonist (BRL 37344) on DO. Thirty mice were randomized into five groups: Control (n=6); L-Ng-Nitroarginine methyl ester hydrochloride (L-NAME) (n=6); L-NAME /tadalafil (n=6); L-NAME / BRL 37344 (n=6); L-NAME/ tadalafil / BRL 37344 (n=6). L-NAME was used to experimentally cause DO on mice by NO deprivation. All animals were submitted to urodynamic studies and the following parameters were evaluated: non-voiding contractions (NVC); frequency of micturition cycles (FM). It was considered as detrusor overactivity the increase in the number of NVC and FM. Comparisons between five groups of treatment were made by analysis of variance (ANOVA) associated with Tukey test. L-NAME Group (4.33 ±2.58) increased the number of NVC compared to Control Group (1,50±0,55). L-NAME/Tadalafil (2.00±1.10), L-NAME/BRL 37344 (1,50±1,52) and L-NAME/Tadalafil/BRL37344 (2,00±1,26 ) Groups decreased number of NVC compared to L-NAME Group (p<0.05). However, co-administration of Tadalafil/BRL 37344 was not more effective than administration of Tadalafil or BRL 37344 alone (Figure 1). L-NAME Group (2,18±0,68) increased the number of FM compared to Control Group (0,69±0,56). L-NAME/Tadalafil (0,97±0,71), L-NAME/BRL 37344 (0,92±0,38) and L-NAME/Tadalafil/BRL 37344 (1,05±0,44) Groups decreased number of FM compared to L-NAME Group (p<0,05). However, co-administration of Tadalafil/BRL 37344 was not more effective than administration of Tadalafil or BRL 37344 alone. Both Tadalafil and BRL 37344 improved DO. Nonetheless, association of tadalafil and BRL 37344 has not an additive effect on DO. / Tratamento farmacológico da hiperatividade detrusora (HD) tem sido classicamente feito com antimuscarínicos. Recentemente novos agentes farmacológicos ou associação de drogas tem sido usados para tratar HD. Um deles são os beta3 agonistas. Beta3 agonistas aumentam a adenosina monofosfato cíclica intracelular (AMPc) através da via da adenilato ciclase. AMPc induz o relaxamento do músculo liso detrusor (MLD). Inibidores da fosfodiesterase tipo 5 (iPDE-5) como a tadalafila também causam relaxamento do MLD através da via do óxido nítrico/guanosina monofosfato cíclico (NO/GMPc). Além dos mecanismos acima tem-se feito a hipótese que a associação dos beta 3 agonistas com iPDE pode causar relaxamento pronunciado do MLD. Como consequência, o principal objetivo deste estudo experimental in vivo foi avaliar o impacto da associação dos iPDE (tadalafila) e beta 3 agonista (BRL 37344) na HD. Trinta camundongos foram randomizados em cinco grupos: Controle (n=6); L-Ng-Nitroarginine methyl ester hidroclorido (L-NAME) (n=6); L-NAME/Tadalafila (n=6); L-NAME/BRL 37344 (n=6); L-NAME/Tadalafila/BRL 37344 (n=6). L-NAME foi usado para causar experimentalmente HD nos camundongos pela depleção de NO. Todos animais foram submetidos a estudos urodinâmicos e os seguintes parâmetros foram avaliados: non-voiding contractions (NVC); frequência de micção (FM). Foi considerada como hiperatividade detrusora o aumento no número de NVC e FM. Comparações entre os cinco grupos de tratamento foram feitos pela análise de variância (ANOVA) associados com o teste de Tukey. O Grupo L-NAME (4,33 ±2,58) aumentou o número de NVC comparado ao Grupo Controle (1,50 ±0,55). Os Grupos L-NAME/Tadalafila (2.00±1.10), L-NAME/BRL 37344 (1,50±1,52) e L-NAME/Tadalafila/BRL37344 (2,00±1,26 ) diminuiram o número de NVC comparado com o Grupo L-NAME (p<0,05). Porém a co-administração de Tadalafila/BRL 37344 não foi mais efetiva que a administração de Tadalafila ou BRL 37344 sozinhos. O Grupo L-NAME (2,80 ± 0,68) aumentou o número de FM comparada ao Grupo Controle (0,69 ±0,56). Os Grupos L-NAME/Tadalafila(0,97±0,71), L-NAME/BRL 37344(0,92 ±0,38) e L-NAME/Tadalafila/BRL 37344 (1,05 ±0,44) diminuiram o número de FM comparado com o Grupo L-NAME (p<0,05). Porém a co-administração da Tadalafila/ BRL 37344 não foi mais efetiva que a administração de Tadalafila e BRL 37344 sozinhos. Ambos Tadalafila e BRL 37344 melhoraram a HD. Porém, a associação de Tadalafila e BRL 37344 não teve efeito aditivo na hiperatividade detrusora.

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-05T17:08:13Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertaçao Leslie Araujo.pdf: 2142115 bytes, checksum: 7236db401aab88bc9de98a2de67c457b (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T17:08:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertaçao Leslie Araujo.pdf: 2142115 bytes, checksum: 7236db401aab88bc9de98a2de67c457b (MD5) Previous issue date: 2013-11 / O tabagismo é um importante fator de risco para diversas patologias, afetando o sistema arterial, pele e sistema urogenital onde inclui a estenose do colo vesical, seu efeito no colo vesical ainda não foi descrito. Avaliar possíveis alterações morfológicas ocasionadas pela nicotina no colo vesical. Foram avaliados estereologicamente fragmentos do colo vesical de 16 paciente divididos em dois grupos, um tabagista e um não tabagista com respectivamente, 7 e 9 pacientes, após 90 dias da cirurgia foram submetidos a urofluxometria livre e tendo dados analisados por teste T não pareado, obtendo significância estatística com p<0,05. Foram observados aumento de 63,26% na quantidade de fibras do sistema elástico no grupo tabagista e diminuição da espessura das artérias em 35,96%, bem como aumento do IPSS e queda do fluxo máximo à urofluxometria todos com significância estatística. As alterações laboratoriais são semelhantes às encontradas em outros trabalhos em diferentes tipos de tecidos, tais como a pele, onde estes achados estão relacionados ao envelhecimento precoce. Os resultados clínicos, embora estatisticamente significativos, não possuem consistência clínica devido ao desenho do estudo ter sido para análise morfológica. O tabagismo aumenta a quantidade de fibras do sistema elástico e diminui a espessura das artérias do colo vesical.

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-07-18T18:47:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação - VERSÃO DEFINITIVA.pdf: 1089828 bytes, checksum: 4544a130daaff959ea08e49caa0831c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-18T18:47:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação - VERSÃO DEFINITIVA.pdf: 1089828 bytes, checksum: 4544a130daaff959ea08e49caa0831c4 (MD5) Previous issue date: 2016-01-22 / Objetivos: O declínio da função vesical com a idade pode levar a comprometimento da qualidade de vida além de sérios problemas de saúde aos idosos. Assim, avaliaremos as alterações da função vesical com o envelhecimento em mulheres através do estudo urodinâmico e tentaremos desenvolver fórmulas que possam estimar os valores esperados dos parâmetros urodinâmicos avaliados de acordo com a idade. Materiais e métodos: Foi realizada uma análise retrospectiva dos estudos urodinâmicos realizados no Serviço de Urologia do Departamento de Cirurgia do Hospital das Clínicas da UFPE, cadastrados no prontuário eletrônico www.infomed.net.br entre maio de 2011 e novembro de 2015, a fim de obter e calcular os parâmetros necessários para avaliar a função vesical em diferentes faixas etárias (18-30, 31-40, 41-50, 51-60, 61-70, 71-80 e maior que 80 anos). Além disso, excluímos pacientes com qualquer fator conhecido que tenha o potencial de afetar a função vesical que não a idade. Resultados: De um total de 3103 exames analisados, foram selecionadas 719 pacientes do sexo feminino para serem incluídas no estudo. A média de idade das pacientes foi de 49,3 anos e em todos os parâmetros avaliados (fluxo máximo, volume urinado, complacência vesical, capacidade cistométrica máxima, pressão detrusora no fluxo máximo, resíduo pós-miccional, índice de contratilidade vesical e índice de eficiência vesical) obtivemos correlação estatisticamente significante entre o declínio da função vesical e a idade. Ainda, conseguimos expressar por equações matemáticas a relação de causa-efeito por regressão linear. Conclusão: O presente estudo observou que há uma diminuição da função vesical tanto de armazenamento (diminuição da capacidade cistométrica máxima e complacência vesical) quanto de esvaziamento (diminuição do fluxo máximo, da pressão detrusora no fluxo máximo, do volume urinado, do índice de contratilidade vesical e do índice de eficiência vesical, assim como o aumento do resíduo pós-miccional) com o envelhecimento. Paralelamente, estamos propondo fórmulas que podem estimar os valores esperados dos parâmetros urodinâmicos avaliados de acordo com a idade, na população estudada. / Purposes: The bladder function declines with age and can lead to impaired quality of life and serious health problems in the elderly. The aim of the study is to evaluate changes in bladder function with aging in women by urodynamic study and try to develop equations that can estimate the expected values of the urodynamic parameters evaluated according to the age. Methods: A retrospective analysis of urodynamic studies in the Urology Service of the Department of Surgery - Hospital das Clínicas, Federal University of Pernambuco, recorded in the electronic medical database www.infomed.net.br among May 2011 and November 2015 was performed in order to obtain and calculate the parameters necessary to evaluate bladder function in different age groups (18-30, 31-40, 41-50, 51-60, 61-70, 71-80 and above 80 years). Patients with any factor that had the potential to affect bladder function were excluded. Results: 3103 urodynamics studies were analyzed and 719 female patients were selected. The average age of patients was 49.3 years and in all evaluated parameters (maximum flow, volume of urination, bladder compliance, maximum cystometric capacity, detrusor pressure at maximum flow, post-void residual urine volume, bladder contractility index and bladder voiding efficiency) statistically significant correlation between the decline of bladder function and age were obtained. Also we presented mathematical equations with cause-effect relationship by linear regression. Conclusion: The present study showed that there is a decrease in the bladder storage function (reduction in maximum cystometric capacity and bladder compliance) and in the bladder emptying function (reduction of the maximum flow, detrusor pressure at maximum flow, volume of the urination, contractility index urinary bladder and bladder voiding efficiency , as well increased post-void residual urine volume) with aging. Analyzing data let us to propose equations that can estimate the expected values of the urodynamic parameters evaluated according to the age in the studied population.

Introdução: Apesar de recentes inovações e aprimoramentos no tratamento do Câncer de Bexiga (CaB) não músculo invasivo, o índice de progressão e recorrência continuam altos possivelmente devido a tumores residuais ou não evidenciados na ressecção transuretral de bexiga (RTU), o que profundamente afeta o prognóstico desta doença e evidencia a importância da qualidade desse procedimento padrão não só para o diagnóstico, mas também para o estadiamento e tratamento do tumor de bexiga. A presença de muscular própria no espécime é essencial para conduzir o tratamento, embora esta esteja presente apenas em cerca de 36-51% dos casos. Na sua ausência muitas vezes torna-se necessário um novo procedimento, vindo com isso a morbidade e os gastos de uma nova cirurgia. Dessa forma várias técnicas têm sido propostas com o intuito de melhorar a acurácia da RTUb, o que pode reduzir as ressecções incompletas e o subestadiamento. Objetivo: Avaliar a importância da biópsia de congelação do leito da lesão ressecada no que diz respeito ao estadiamento inicial e controle local da doença. Materiais e Métodos: Estudo prospectivo e randomizado dos pacientes com tumor de bexiga sem tratamento prévio que foram submetidos à RTUb no período de 09/2011 a 08/2013 em uma única instituição (Instituto do Câncer do Estado de São Paulo - ICESP). Esses pacientes foram submetidos à RTUb convencional, conforme o Guideline Europeu (EAU, 2011). No grupo 1, foi realizada biópsia de congelação do leito da lesão após a RTU, onde o cirurgião julgou esta ser possivelmente invasiva, aguardando análise do patologista quanto a presença de muscular própria, se caso esta não estivesse representada, era feita nova biópsia até sua representatividade. O grupo 2 são os controles não sendo submetidos à biópsia de congelação. Foram incluídos apenas os pacientes que tiveram critério e foram submetidos à re-RTUb. Um total de 150 pacientes foram randomizados, tornando-se elegíveis 131, sendo 64 no grupo 1 e 67 no grupo 2. Resultados: Comparando-se os grupos, não houve diferença em relação ao sexo, idade, quantidade e tamanho do tumor. No estudo anatomo-patológico da RTUb houve representatividade muscular em 100% x 58,5%, entre os grupos 1 e 2, respectivamente, com p < 0,001. Na Re-RTUb o índice de tumor residual foi 10,4% x 35,2%, entre os grupos 1 e 2, respectivamente, com p = 0,005. No grupo 1, 15 pacientes foram diagnosticados como pT2 com 100% do diagnóstico na primeira RTUb; no grupo 2, 6 pacientes tiveram diagnóstico de pT2 com apenas 33,3% na primeira RTUb, p=0,003. O tempo cirúrgico médio foi de 50 min no grupo 1 e 42min no grupo 2 (p= 0,037). Não houve diferença em relação à complicações (transfusão e perfuração vesical). Conclusão: A biópsia de congelação melhorou o correto estadiamento e controle local do câncer de bexiga, além de aumentar a acurácia do diagnóstico de doença pT2, podendo permitir o planejamento precoce do tratamento definitivo sem aumentar as complicações / Background and Purpose: Despite recent improvements of bladder cancer treatment, recurrence and progression rates are still high, possibly related to residual or overlooked tumors at the first transurethral resection (TUR), which strongly emphasizes the importance of the quality of this method. In order to improve the effectiveness of the procedure, we sought to evaluate the impact of frozen section during TUR, aiming on increasing muscular layer sample in the specimen, which may minimize incomplete resections and understaging. Patients and Methods: We prospectively included 150 consecutive patients assigned to TUR which were randomized to undergo either frozen section biopsy of the tumor bed during the TUR procedure until muscle was obtained or standard resection procedure (no frozen section). Nineteen patients were excluded after randomization, leaving 131 for analysis. All patients underwent a second TUR performed 4-6 weeks later. Frozen sections and final pathology reports were centralized and all performed by pathologists, the doubtful cases were reviewed by one uropathologist. Exclusion criteria: incomplete resection at first TUR, no criteria for second TUR according to EUA Guideline Update 2011 and previous bladder cancer treatment. (Group w/ biopsy, n = 64; Group control, n=67). Results: Both groups were comparable regarding age, gender, size and number of lesions. The majority of patients had high grade tumor in both groups. In the group where frozen section was obtained, muscle-invasive disease was higher (23% x 3%, p < 0,001). All patients in this group had muscle layer represented in the final pathology at the first TUR, while only 60% of patients in the control group (p < 0.001), including 40,5% of patients with pTa, 81,5% with pT1 e 100% with pT2 and Cis. Ninety percent of patients in the biopsy group had no residual tumor compared to 65% of the control group at second TUR (p=0,002). While all 15 patients in the frozen section group with T2 disease were diagnosed at first TUR, only 2 of 6 patients (33%) in the control group were diagnosed initially. The surgery duration was longer in the study group with mean of 50 min x 42 min (p=0,037) and there were no significant differences regarding complications (perforation and transfusion rates). Conclusion: Our results support the prove of principal that standard TUR with frozen section biopsy of bladder tumor bed increase the disease control and improve the diagnosis of T2 tumors, which may lead to reduced the number of patients in need a second TUR and avoid pT2 disease diagnosis delay, with no more complications

Introdução: Apesar de recentes inovações e aprimoramentos no tratamento do Câncer de Bexiga (CaB) não músculo invasivo, o índice de progressão e recorrência continuam altos possivelmente devido a tumores residuais ou não evidenciados na ressecção transuretral de bexiga (RTU), o que profundamente afeta o prognóstico desta doença e evidencia a importância da qualidade desse procedimento padrão não só para o diagnóstico, mas também para o estadiamento e tratamento do tumor de bexiga. A presença de muscular própria no espécime é essencial para conduzir o tratamento, embora esta esteja presente apenas em cerca de 36-51% dos casos. Na sua ausência muitas vezes torna-se necessário um novo procedimento, vindo com isso a morbidade e os gastos de uma nova cirurgia. Dessa forma várias técnicas têm sido propostas com o intuito de melhorar a acurácia da RTUb, o que pode reduzir as ressecções incompletas e o subestadiamento. Objetivo: Avaliar a importância da biópsia de congelação do leito da lesão ressecada no que diz respeito ao estadiamento inicial e controle local da doença. Materiais e Métodos: Estudo prospectivo e randomizado dos pacientes com tumor de bexiga sem tratamento prévio que foram submetidos à RTUb no período de 09/2011 a 08/2013 em uma única instituição (Instituto do Câncer do Estado de São Paulo - ICESP). Esses pacientes foram submetidos à RTUb convencional, conforme o Guideline Europeu (EAU, 2011). No grupo 1, foi realizada biópsia de congelação do leito da lesão após a RTU, onde o cirurgião julgou esta ser possivelmente invasiva, aguardando análise do patologista quanto a presença de muscular própria, se caso esta não estivesse representada, era feita nova biópsia até sua representatividade. O grupo 2 são os controles não sendo submetidos à biópsia de congelação. Foram incluídos apenas os pacientes que tiveram critério e foram submetidos à re-RTUb. Um total de 150 pacientes foram randomizados, tornando-se elegíveis 131, sendo 64 no grupo 1 e 67 no grupo 2. Resultados: Comparando-se os grupos, não houve diferença em relação ao sexo, idade, quantidade e tamanho do tumor. No estudo anatomo-patológico da RTUb houve representatividade muscular em 100% x 58,5%, entre os grupos 1 e 2, respectivamente, com p < 0,001. Na Re-RTUb o índice de tumor residual foi 10,4% x 35,2%, entre os grupos 1 e 2, respectivamente, com p = 0,005. No grupo 1, 15 pacientes foram diagnosticados como pT2 com 100% do diagnóstico na primeira RTUb; no grupo 2, 6 pacientes tiveram diagnóstico de pT2 com apenas 33,3% na primeira RTUb, p=0,003. O tempo cirúrgico médio foi de 50 min no grupo 1 e 42min no grupo 2 (p= 0,037). Não houve diferença em relação à complicações (transfusão e perfuração vesical). Conclusão: A biópsia de congelação melhorou o correto estadiamento e controle local do câncer de bexiga, além de aumentar a acurácia do diagnóstico de doença pT2, podendo permitir o planejamento precoce do tratamento definitivo sem aumentar as complicações / Background and Purpose: Despite recent improvements of bladder cancer treatment, recurrence and progression rates are still high, possibly related to residual or overlooked tumors at the first transurethral resection (TUR), which strongly emphasizes the importance of the quality of this method. In order to improve the effectiveness of the procedure, we sought to evaluate the impact of frozen section during TUR, aiming on increasing muscular layer sample in the specimen, which may minimize incomplete resections and understaging. Patients and Methods: We prospectively included 150 consecutive patients assigned to TUR which were randomized to undergo either frozen section biopsy of the tumor bed during the TUR procedure until muscle was obtained or standard resection procedure (no frozen section). Nineteen patients were excluded after randomization, leaving 131 for analysis. All patients underwent a second TUR performed 4-6 weeks later. Frozen sections and final pathology reports were centralized and all performed by pathologists, the doubtful cases were reviewed by one uropathologist. Exclusion criteria: incomplete resection at first TUR, no criteria for second TUR according to EUA Guideline Update 2011 and previous bladder cancer treatment. (Group w/ biopsy, n = 64; Group control, n=67). Results: Both groups were comparable regarding age, gender, size and number of lesions. The majority of patients had high grade tumor in both groups. In the group where frozen section was obtained, muscle-invasive disease was higher (23% x 3%, p < 0,001). All patients in this group had muscle layer represented in the final pathology at the first TUR, while only 60% of patients in the control group (p < 0.001), including 40,5% of patients with pTa, 81,5% with pT1 e 100% with pT2 and Cis. Ninety percent of patients in the biopsy group had no residual tumor compared to 65% of the control group at second TUR (p=0,002). While all 15 patients in the frozen section group with T2 disease were diagnosed at first TUR, only 2 of 6 patients (33%) in the control group were diagnosed initially. The surgery duration was longer in the study group with mean of 50 min x 42 min (p=0,037) and there were no significant differences regarding complications (perforation and transfusion rates). Conclusion: Our results support the prove of principal that standard TUR with frozen section biopsy of bladder tumor bed increase the disease control and improve the diagnosis of T2 tumors, which may lead to reduced the number of patients in need a second TUR and avoid pT2 disease diagnosis delay, with no more complications

O câncer de bexiga é a segunda neoplasia urogenital mais comum, atinge mais os homens e está relacionado principalmente com o fumo. Os tratamentos atualmente utilizados não são suficientemente efetivos, permitindo os diversos casos de recorrência, progressão do tumor e/ou morte do paciente. Assim, as pesquisas realizadas continuam buscando tratamentos mais efetivos. Diversos estudos revelam o envolvimento do sistema purinérgico na tumorigênese da bexiga, no âmbito das ectonucleotidases, há evidências de alterações em duas delas na progressão do câncer de bexiga: a NTPDase3 e a ecto-5’-NT/CD73. O urotélio normal dos camundongos expressa a NTPDase3 que é expressa em linhagem de câncer de bexiga de grau 1 (RT4), mas não em linhagem de grau 3 (T24). Já a ecto-5’-NT/CD73, não é expressa no urotélio normal de camundongos e tem baixa atividade em linhagem de câncer de bexiga de grau 1 (RT4) em comparação a linhagem de grau 3 (T24), evidenciando a possível participação destas proteínas na progressão do câncer de bexiga. Dessa forma, o objetivo desta tese foi investigar o envolvimento da NTPDase3 e da ecto-5'-NT/CD73 na progressão e malignidade do câncer de bexiga. A fim de caracterizar a expressão dessas enzimas durante a progressão do estabelecimento do câncer de bexiga, camundongos Balb-c receberam N-butil-N-(hidroxibutil)-nitrosamina (BBN) 0,05% em sua água de beber por 4, 8, 12, 18 e 24 semanas. Nas primeiras 8 semanas as bexigas dos animais apresentaram características de inflamação, em 12 semanas iniciaram as transformações neoplásicas que em 24 semanas caracterizaram câncer. NTPDase3 teve sua expressão diminuída nesse processo, enquanto a ecto-5’-NT/CD73 passou a ser expressa e sua expressão foi significativamente maior no utrotélio cancerígeno. A fim de verificar se a atividade das enzimas acompanhava as alterações de expressão, o câncer de bexiga foi induzido pela BBN em ratos Wistar por 24 semanas. As hidrólises de ATP e ADP são maiores nas bexigas dos animais controle do que no urotélio tumoral dos animais concordando com a expressão da NTPDase3. Por fim, no intuito de verificar o envolvimento dessas duas enzimas na malignidade do câncer de bexiga, a NTPDase3 foi superexpressa na linhagem T24, por transfecção com pcDNA3, e a ecto-5’-NT/CD73 foi silenciada utilizando o sistema CRISPR/Cas. Os clones de cada tranfecção foram caracterizados mostrando o sucesso de ambas transformações genéticas. As transfecções não alteraram significativamente as respostas purinérgicas testadas e os experimentos de implante tumoral in vivo mostram que a ecto-5’-NT/CD73 está provavelmente envolvida na malignidade dessa neoplasia. / The bladder cancer is the second most prevalent tumor of genitourinary tract. It is more common among men and it is mainly associated with smoking. The current treatments are not efficient enough to avoid the cases of tumor recurrence, progression and pacient death. So, the researches follow the pursuit of more effective treatments. Many studies have shown the involvement of purinergic system in the bladder tumorigenesis, in relation to the ectonucleotidases, there is evidence of the engagement of two of them, the NTPDase3 and the ecto05’-Nucleotidase/CD73. The health urothelium expresses NTPDase3, which is also expressed in a bladder cancer cell line of grade 1 (RT4) but it is not expressed in bladder cancer cell line of grade 3 (T24). While ecto-5’-NT/CD73 does not is expressed in the health urothelium of mice and presents a low activity in a bladder cancer cell line of grade 1 front of a high activity in a bladder cancer cell line of grade 3, highlighting the possible role of these proteins in the bladder cancer progression. In this way, the aim of this thesis was to investigate the involvement of NTPDase3 and ecto-5'-NT/CD73 in bladder cancer progression and malignancy. To investigate the enzymes expression during the progress of bladder cancer establishment, Balb-c mice received 0,05% of N-butyl-N-(hydroxybutyl)-nitrosamine (BBN) in its drinking water during 4, 8, 12, 18 and 24 weeks. Until the first 8 weeks just inflammation was observed in mice bladder, at 12 week beginning the neoplastic alterations that culminated in cancer after 24 weeks of induction. The NTPDase3 expression was decreased in this process while ecto-5’-NT/CD73 showed up and was significantly enhanced in cancerous urothelium. To verify if the enzyme activities were in agreement with their expression changes, bladder cancer was induced in Wistar rats with BBN for 24 weeks. The ATP and ADP hydrolysis was higher in the urothelium of control animals than in the cancerous urothelium, in accordance with NTPDase3 expression. Finally, in order to verify the involvement of these two enzymes in bladder cancer malignancy, NTPDase3 was overexpressed in T24 bladder cancer cell line, through transfection with pcDNA3, and ecto-5’-NT/CD73 was silenced with CRISPR/Cas system. The clones of each transfection were featured showing the success of both cell genetic transformations. The transfections did not significantly change the tested purinergic answers and the experiments of in vivo tumor implant shows that ecto-5’-NT/CD73 is probably involved in bladder cancer malignancy.

Resumo não disponível.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:04:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000437983-Texto+Completo-0.pdf: 3242745 bytes, checksum: 9b67fa711fdfe3bdd518bb49b3f07fc0 (MD5) Previous issue date: 2012 / This study was designed to characterize, by means of functional and molecular approaches, the relevance of kinin B1 and B2 receptors in bladder cancer. Our data clearly shows that both B1 des-Arg9-BK and B2 BK receptor agonists were able to stimulate the proliferation of the grade 3-derived bladder cancer T24 cells. Furthermore, the incubation of B1 and B2 receptor antagonists, SSR240612 and HOE140, respectively, markedly inhibited the proliferation rate of T24 cells. In contrast, only higher concentrations of BK elicited the proliferation of the grade 1 bladder cancer cell line RT4, while des-Arg9-BK incubation completely failed to induce its proliferation. Interestingly, real time PCR experiments revealed that mRNA expression of B2, and mainly B1 receptors was found superior in T24 cells, in comparison to the low malignity grade RT4 cells. Furthermore, data obtained using bladder cancer human biopsies revealed that B1 receptor expression was visibly increased in all tumoral samples or under chronic inflammation of bladder. Concerning the signaling pathways related to the mitogenic effects of kinins, we bring novel evidence showing that pharmacological inhibition of PI3Kg with AS252424 concentration-dependently reduced T24 cell proliferation induced by BK or des-Arg9-BK. Finally, the incubation of T24 cells with kinin agonists led to a marked activation of PI3K/AKT and ERK 1/2 signaling pathways, whereas p38 MAP kinase remained unaffected. Our results indicate that kinin B2, and especially B1 receptors appear to be implicated in bladder cancer progression. It is tempting to suggest that selective kinin antagonists might represent potential therapeutic alternatives for bladder cancer control. / O presente estudo teve por objetivo caracterizar, através de abordagens funcionais e moleculares, a relevância dos receptores B1 e B2 para as cininas no câncer de bexiga. Os dados obtidos mostraram que tanto o agonista dos receptores B1, des- Arg9-BK, quanto do receptor B2, BK, foram capazes de estimular a proliferação das células de câncer de bexiga grau 3, denominadas T24. Além disso, a incubação dos antagonistas dos receptores B1 e B2, SSR240612 e HOE140, respectivamente, inibiram acentuadamente a proliferação das células T24. Por outro lado, apenas maiores concentrações de BK levaram à proliferação das células de câncer de bexiga grau 1 RT4; enquanto a incubação com des-Arg9-BK não induziu sua proliferação. De maneira similar, os resultados revelaram que a expressão de mRNA dos receptores B2 e, principalmente, dos receptores B1 foi superior em células T24, em comparação com as células RT4, que apresentam baixo grau de malignidade. Além disso, os dados obtidos com biópsias de câncer de bexiga humano revelaram que a expressão do receptor B1 foi claramente maior em todas as amostras tumorais ou, em uma biópsia obtida de um quadro de inflamação crônica de bexiga. Em relação às vias de sinalização relacionadas com os efeitos mitogênicos das cininas, os dados obtidos mostram que a inibição farmacológica da PI3Kg com AS252424 reduziu de maneira concentração-dependente a proliferação das células T24, quando está foi induzida por BK ou des-Arg9-BK. Finalmente, a incubação das células T24 com agonistas dos receptores de cininas produziu uma acentuada ativação das vias de sinalização PI3K/AKT e ERK 1/2, enquanto a via p38 MAP quinase permaneceu inalterada. Nossos resultados indicam que os receptores de cininas B2 e, especialmente, os receptores B1 parecem estar associados com a progressão do câncer de bexiga. Dessa forma, é possível sugerir que antagonistas seletivos de receptores de cininas poderiam representar alternativas terapêuticas interessantes para o controle do câncer de bexiga.