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Análise biomolecular de comunidades microbianas subgengivais associadas às periodontites crônica e agressiva generalizadas / Biomolecular analyses of subgingival microbial communities from generalized chronic and agressive periodontitis

Cruz, Sergio Eduardo Braga da 06 July 2010 (has links)
Orientadores: Reginaldo Bruno Gonçalves, Daniel Saito / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-16T03:29:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cruz_SergioEduardoBragada_D.pdf: 4484196 bytes, checksum: 41cbfe2b81d194ae03d4070bbe8108b8 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Há um consenso que outros micro-organismos além de Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Tannerella forsythia (Tf) e Treponema denticola (Td) estariam correlacionados às periodontites, inclusive algumas espécies ainda não identificadas. Nosso objetivo foi estudar as microbiotas subgengivais de indivíduos com periodontite crônica generalizada (PCG) e periodontite agressiva generalizada (PAG) para avaliar diferenças entre suas microbiotas. MATERIAL E MÉTODOS-Foram selecionados 15 indivíduos com PCG e 14 com PAG. Coletou-se amostra do biofilme subgengival de uma bolsa periodontal profunda (BP-PS ? 7mm) e uma moderada (BM - PS entre 5 e 6 mm) de cada indivíduo. Foi preparado e analisado, por meio de DGGE, o perfil bacteriano entre os grupos. A similaridade e a análise de cluster do padrão de UTO's foram verificadas utilizando-se coeficiente de Jaccard e a construção do dendrograma realizada por UPGMA. Realizou-se também análise clonal direta de 10 amostras de BP de cada grupo e as sequências foram agrupadas em táxons com similaridade >97%. RESULTADOS-DGGE - No perfil de DGGE foi observada uma tendência para a formação de grupos em BP, mas não em BM, com a presença de dois grupos maiores e distintos de oito indivíduos tanto para PCG como PAG, com variação de similaridade intra-grupo entre 53,6-68,4% e 50,2-64,7%, respectivamente. Análise clonal - Foram identificados 109 táxons conhecidos a partir de 987 clones. Ao todo 44 gêneros bacterianos, 28 gêneros comuns aos dois grupos, nove que se apresentaram apenas para PCG e sete para PAG. Entre os dois grupos foram observados 34 táxons comuns, sendo 42 específicos para PAG e 37 para PCG. A espécie Tf foi detectada em 90% dos indivíduos com PCG e 80% com PAG, Pg foi detectada em 70% com PCG e 50% com PAG e Td foi detectada em 40% com PCG e 30% PAG. A espécie Aa foi encontrada em somente 20% de PCG e 30% de PAG. A espécie Filifactor alocis foi observada em altas taxas e prevalência em PCG (58 clones, 90%) e PAG (91 clones, 90%). As espécies encontradas exclusivamente por grupo com prevalência acima de dois pacientes foram: PCG: Treponema lecithinolyticum, Selenomonas dianae, Prevotella pleuritidis, Dialister pneumosintes; e para PAG: Fusobacterium nucleatum ss vincentii, Veillonella parvula, Peptococcus sp. Cepa GEA8, Streptococcus gordonii, Lautropia mirabilis, Gemella sanguinis, Afipia broomeae. Para os filotipos, PCG: Peptostreptococcaceae sp. Clone-MCE10_174, Fusobacterium sp. C-I035, Veillonellaceae sp. C-JS031; PAG: Peptostreptococcaceae sp. C-PUS9170, Treponema sp. CG093. Apesar de não haver exclusividade entre grupos, é de nota os filotipos Synergistes sp. clone W028 (80% e 60%) e o clone D084 (70% e 10%) em PCG e PAG, respectivamente. O filotipo Bacteroidetes sp. AU126 foi encontrado tanto em PCG (60%) como PAG (30%). CONCLUSÃO - O presente trabalho demonstrou por meio de DGGE uma tendência a um perfil microbiano comum entre a maioria das amostras estudadas, entretanto, sem seu completo delineamento como dois grupos distintos microbiologicamente. A análise clonal, apesar de algumas espécies específicas entre grupos, demonstrou pequenas diferenças, sem, entretanto, delinear grupos microbiologicamente específicos. / Abstract: There is an agreement that not only the already known periodontopathogens, Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Tannerella forsythia (Tf) and Treponema denticola (Td) would be involved in periodontitis, but also some others micro-organisms not-yet-identified. The scope of this study is to compare the subgingival microbiota in generalized chronic periodontitis (GCP) or generalized aggressive periodontitis (GAP) subjects. MATERIAL AND METHODS - 15 subjects with GCP and 14 with GAP were enrolled. One subgingival biofilm sample from a periodontal deep pocket (DP) with PD ? 7mm and one from a moderate pocket (MP) with PD from 5 to 6 mm were harvested from each subject. The microbial profiles (OTU's) were compared between groups by DGGE and the similarity OTU profile was analyzed by Jaccard coefficient and the dendrogram and cluster analyses were made by UPGMA. The direct clonal analysis of the 16SrDNA from 10 samples of each group from DP was made. The sequences were grouped in clusters of taxa with > 97% similarity. RESULTS - DGGE - It was observed in the profile a tendency for eight subjects from each group to assemble as clusters in the DP, but not for the MP samples, with similarities between 53.6-68.4% (GCP) and 50.2-64.7% (GAP). Clonal analyses - One-hundred-and-nine already recognized taxa were obtained from 987 clones. From a total of 44 bacterial genera, 28 were common for both groups; nine were exclusive to PCG and seven to PAG subjects. It was found 34 common taxa between GCP and GAP, 37 were specific for GCP and 42 for GAP. The Tf species was found in 90% from GCP subjects and 80% from GAP subjects, Pg was found in 70% from GCP and in 50% from GAP and Td was detected in 40% from GCP and 30% from GAP. The Aa species were found in only 20% GCP subjects and in 30% from GAP. Filifactor alocis species were detected in high prevalence in both GCP (58 clones, 90%) and PAG (91 clones, 90%). The species which were detected exclusively in each group, with 20% prevalence or more were, for GCP: Treponema lecithinolyticum, Selenomonas dianae, Prevotella pleuritidis, Dialister pneumosintes; and GAP: Fusobacterium nucleatum ss vincentii, Veillonella parvula, Peptococcus sp. Cepa GEA8, Streptococcus gordonii, Lautropia mirabilis, Gemella sanguinis, Afipia broomeae. In relation to phylotypes, PCG: Peptostreptococcaceae sp. Clone-MCE10_174, Fusobacterium sp. C-I035, Veillonellaceae sp. C-JS031; PAG: Peptostreptococcaceae sp. C-PUS9170, Treponema sp. C-G093. Despite not been found exclusively for neither GCP nor GAP, the phylotypes Synergistes sp. clone W028 (80% e 60%) and clone D084 (70% e 10%) had a notable presence in GCP and GAP, respectively. The phylotype Bacteroidetes sp. AU126 was found in GCP (60%) and GAP (30%) groups. CONCLUSION - The present study demonstrated by DGGE a slight tendency to the clustering of the microbial profile of some GCP and GAP subjects, although these were not well delineated. The clonal analyses showed some differences, but also could not show GCP and GAP as microbiologic distinct profiles. / Doutorado / Microbiologia e Imunologia / Doutor em Biologia Buco-Dental
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Desenvolvimento e caracterização de filmes ativos de alginato de sodio reticulados com benzoato de calcio / Development and characterization of sodium alginate active films using calcium benzoate as cross-linking agent

Turbiani, Franciele Rezende Barbosa 26 February 2007 (has links)
Orientador: Theo Guenter Kieckbusch / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-11T12:31:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Turbiani_FrancieleRezendeBarbosa_M.pdf: 2355251 bytes, checksum: 54057feae41bd47bee56d5615dbbfd3d (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Filmes biodegradáveis são produzidos a partir de polímeros naturais, principalmente polissacarídeos e proteínas, e tem potencial aplicação na área médica, farmacêutica e alimentícia. A incorporação de agentes ativos pode ampliar suas funções como embalagens antimicrobianas, por exemplo. Filmes foram confeccionados à base de alginato de sódio usando cloreto de cálcio como agente reticulante e glicerol como plastificante. O uso de benzoato de cálcio foi investigado como agente ativo (íons benzoato) e como auxiliar na reticulação (íons cálcio). Devido ao alto poder gelificante do Ca++, confeccionou-se, inicialmente, um filme de baixa reticulação a partir de soluções filmogênicas contendo até 0,54% de Ca++ (1º estágio). Esse filme sofreu uma reticulação complementar com excesso de Ca++ (2º estágio). Dentre os vários procedimentos avaliados (contato do filme com tecido e/ou esponja umidecidas, pincel ou rolo de pintura e imersão do filme em solução reticuladora), a simples imersão em solução contendo de 3 a 7% de CaCl2 no 2º estágio produziu filmes com alto grau de reticulação. O aumento da concentração de glicerol nessa solução melhora a manuseabilidade e plasticidade dos filmes, porém aumenta a solubilidade em água e o conteúdo de umidade dos mesmos e um adequado compromisso foi obtido usando 5% desse plastificante. Ensaios nos quais o CaCl2 foi substituído, total ou parcialmente, por benzoato de cálcio indicou que o mesmo não pode ser usado na solução do 2º estágio por favorecer a precipitação de cristais sobre o filme. Filmes ativos de 0,06 mm de espessura, pré-reticulados apenas com benzoato de cálcio e 0,7% de glicerol na solução do 1º estágio e imersos por 30 minutos em banho contendo 3% de CaCl2 e 5% de glicerol no 2º estágio, apresentaram baixa solubilidade em água (até 20% da matéria seca). Estes filmes têm baixo grau de intumescimento (< 50% da massa inicial), boa resistência mecânica à tração, mas baixa elasticidade. A permeabilidade ao vapor de água é moderada e os valores encontrados são típicos de biofilmes hidrofílicos. Ensaios de liberação de benzoato utilizando água como sorvedouro, apresentaram bom ajuste as soluções da 2ª Lei de Fick, com valores de difusividade efetiva do benzoato variando de 3 a 5.10-7 cm2/s. Os valores de difusividade diminuiram com o aumento da reticulação e aumentaram com o aumento da concentração de benzoato no filme / Abstract: Biodegradable films are produced from natural polymers, structurized mainly by polysaccharides or proteins, and have potential applications in the medical, pharmaceutical or food area. The incorporation of active agents can extend their application as antimicotic packaging, for instance. Films were manufactured with sodium alginate, using calcium chloride as cross-linking agent and glycerol as plasticizer. The use of calcium benzoate as active agent (benzoate ions) and as crosslinking agent (calcium ions) was investigated. Due to the strong gelling power of Ca++ ions, impeding smooth casting procedures, films with low reticulation are initially manufactured, using less than 0.54% Ca++ in the filmogenic solutions (1st stage). These films are further crosslinked with an excess of Ca++ by immersion in a solution of 3% to 7% of CaCl2 (2nd stage). Increasing the glycerol concentration in this solution improves the handling and plasticity of the films but increase water solubility and moisture content and an adequate compromise was obtained using 5% plasticizer. Tests conducted with partial or total substitution of CaCl2 by calcium benzoate indicated that the later could not be used in the 2nd stage solution since it promoted crystals precipitation on film surface. Active films, 0.06mm thick, pre-reticulated with calcium benzoate only and with 0.7% glycerol in the solution of the 1st stage, immersed for 30 minutes in a 3% CaCl2 and 5% glycerol solution (2nd stage) had around 17% moisture content and low water solubility (up to 20% of total dry mass). These films show low swelling degree (<50% of initial mass), good tension strength but low elongation ability. The water vapor permeability is moderate, typical of highly hydrophilic films. Benzoate liberation tests, using pure water as sink, presented good fit to solutions of Fick¿s 2nd law and effective diffusivities found varied from 4.2 to 6.3 × 10-7 cm2/s. The diffusivity values decreased with the degree of reticulation and increase with benzoate concentration in the film / Mestrado / Engenharia de Processos / Mestre em Engenharia Química
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Efeito do metabÃlito bioativo e de lectinas vegetais sobre o crescimento de micro-organismos patogÃnicos / Effect of bioactive metabolites and plant lectins on the growth of pathogenic micro-organisms

Victor Alves Carneiro 10 January 2011 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Biofilmes sÃo comunidades de cÃlulas microbianas incluÃdas em uma matriz de material polimÃrico constituÃdo principalmente por polissacarÃdeos que se formam sobre uma superfÃcie biÃtica ou abiÃtica. A busca de agentes fitoquÃmicos com potencial anti-biofilme tornou-se uma Ãrea ativa na pesquisa cientifica. Lectinas sÃo proteÃnas que se ligam a carboidratos de forma especÃfica e reversÃvel, sendo capazes de aglutinar cÃlulas e/ou precipitar glicoconjugados. Devido à sua capacidade de ligar e reconhecer carboidratos especÃficos, as lectinas podem ser uma potente ferramenta para estudos de biofilmes. Estas proteÃnas podem se ligar Ãs bactÃrias ou impedir a interaÃÃo com a superfÃcie e, conseqÃentemente, diminuir a formaÃÃo de biofilme. Outras classes de biomolÃculas com grande aplicabilidade nesse tipo de comunidades bacterianas sÃo os metabÃlitos secundÃrios isolados de tecidos vegetais. A classe dos diterpenos, substancias bastante comuns em plantas, corresponde a uma classe de molÃculas naturais com propriedades antimicrobianas bem estabelecidas. Com isso, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antibacteriana âin vitroâ de lectinas vegetais e do diterpeno casbano (DC), um metabÃlito secundÃrio isolado de Croton nepetaefolius, uma planta nativa do Nordeste brasileiro, contra diferentes microrganismos patogÃnicos. A concentraÃÃo mÃnima inibitÃria do crescimento planctÃnico foi realizado pela tÃcnica padrÃo de microdiluiÃÃo determinada atravÃs da densidade Ãptica a 640nm. Os ensaios de adesÃo inicial e formaÃÃo de biofilme foram realizados utilizando placas de microtitulaÃÃo de poliestireno com quantificaÃÃo da biomassa pelo mÃtodo de coloraÃÃo com cristal de violeta. Os ensaios foram realizados com diferentes concentraÃÃes dos produtos testados. Os resultados demonstraram que a lectina de Canavalia ensiformis apresentou um efeito antibacteriano, inibindo o crescimento planctÃnico de bactÃrias Gram- positivas. Outras lectinas apresentaram uma inibiÃÃo da adesÃo inicial, assim como na inibiÃÃo da formaÃÃo do biofilme de alguns microrganismos. O DC teve uma atividade biocida e bioestÃtica para a maioria das espÃcies testadas, sendo capaz de prejudicar tambÃm a formaÃÃo do biofilme. Em conclusÃo, estes resultados mostraram que as lectinas e diterpeno casbano, importantes classes de produtos naturais, podem desempenhar atividade antibacteriana promissora, sugerindo um possÃvel potencial terapÃutico para o tratamento farmacolÃgico de infecÃÃes associadas a diferentes agentes infecciosos. / Biofilms are communities of microbial cells embedded in a matrix of polymeric material consists mainly of polysaccharides that form on biotic or abiotic surface. The search for phytochemicals agents with potential anti-biofilm became an active area in scientific research. Lectins are proteins that bind carbohydrates of form specifically and reversibly, being able to agglutinate and precipitate cells and/or glycoconjugates. Due to their capacity to bind and recognize specific carbohydrates, lectins can be a potent toolin biofilm studies. These proteins can bind to the bacteria or prevent the interaction with the surface and consequently decrease biofilm formation. Other classes of biomolecules with applicability in this type of bacterial communities are the secondary metabolites isolated from plant tissues. The class of diterpenes, substances very common in plants, corresponds to a class of natural molecules with antimicrobial properties well established. T hus, the present study was to evaluate the antibacterial activity "in vitro" of plant lectins and diterpene casbano(CD), a secondary metabolite isolated from Croton nepetaefolius, aplant native to northeastern Brazil, against different pathogens microorganisms. The minimum inhibitory concentration, MIC, of planktonic growth was made by the standard techinique of microdilution determined by optical density at 640nm. Analisys of initial adhesion and biofilm formation were performed using polystyrene microtiter plates with quantification of biomass by the method of staining with crystal violet. The tests were performed with different concentrations of the products tested. The results showed that the lectin from Canavalia ensiformis had an antibacterial effect, inhibiting the planktonic growth of gram-positive bacteria. Other lectins showed an inhibition of initial adhesion and an inhibition of biofilm formation of some microorganisms. The CD had a biocidal activity and biostatic for most species tested, being able to affect also the formation of biofilm. In conclusion, these results showed that the lectins and casbane diterpene have a promising antibacterial activity, suggesting a possible application therapeutic for pharmacological treatment of infections associated with different infectious agents.
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Effects of statins in the bacterial viability and on biofilm of Staphylococcus aureus / Efeitos das estatinas sobre a viabilidade bacteriana e sobre o biofilme de Staphylococcus aureus

Graziano, Talita Signoreti, 1988- 25 August 2018 (has links)
Orientadores: Karina Cogo Müller, Francisco Carlos Groppo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-25T11:18:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Graziano_TalitaSignoreti_M.pdf: 1603562 bytes, checksum: 9522f75e1f8c1147c84c0fde100549ed (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: As estatinas são um grupo de fármacos que atuam como inibidores competitivos da enzima 3-Hidroxi-3-MetilGlutaril Coenzima-A Redutase (HMG-CoA redutase). Além de atuarem como importantes agentes hipolipemiantes, também apresentam outros efeitos, chamados de pleiotrópicos. Diversos estudos têm explorado um possível efeito protetor das estatinas atuando na redução na morbidade e mortalidade de várias doenças infecciosas. A atividade antimicrobiana das estatinas tem sido reportada por estudos in vivo e in vitro. O objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos das estatinas sobre o crescimento e viabilidade de bactérias aeróbias patogênicas, e o efeito da sinvastatina sobre o biofilme de Staphylococcus aureus. Culturas das espécies de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli e Enterococcus faecalis foram avaliadas na forma planctônica quanto à sensibilidade à atorvastatina, pravastatina e sinvastatina, através do teste de Concentração Inibitória Mínima (CIM). Além disso, diante da atividade apresentada pela sinvastatina contra S. aureus, foi determinada a ação dessa droga sobre a viabilidade celular através dos testes de Time-kill e Efeito pós-antibiótico (EPA). Também foi verificado um possível efeito sinérgico entre a sinvastatina e vancomicina. Por fim, a ação da sinvastatina foi avaliada contra biofilmes de S. aureus. Os valores de CIM da sinvastatina para o microrganismo S. aureus foram: 15,65 µg/ml (ATCC 29213) e 31,25 µg/ml (ATCC 33591, 43300, 14458 e 6538). A sinvastatina apresentou um perfil bacteriostático, e na concentração de 4xCIM seu EPA foi similar ao da vancomicina. Não foi encontrado nenhum tipo de interação entre a associação de sinvastatina e vancomicina. Entretanto, a sinvastatina foi capaz de reduzir a formação do biofilme nas concentrações entre 1/8CIM à 4xCIM. Além disso, na concentração 4xMIC foi capaz de diminuir a viabilidade, biomassa e a produção de polissacarídeos extracelulares e aumentar a produção de polissacarídeos intracelulares de biofilmes maduros de S. aureus. A produção de proteínas pelo biofilme não foi alterada. Em conclusão, os resultados encontrados mostram que a sinvastatina possui um grande potencial a ser explorado, principalmente em relação ao descobrimento de novos antimicrobianos / Abstract: Statins are drugs that competitively inhibit the enzyme 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase (HMG-CoA). Besides their important lipid-lowering action, they also are pleiotropic agents. Several studies have explored a possible protective effect of statins to reduce the morbidity and mortality of various infectious diseases. The antimicrobial activity of statins has been reported by in vivo and in vitro studies. The aim of this study was to evaluate the effects of statins on the growth, viability and biofilm formation of pathogenic aerobic bacteria. The Minimum Inhibitory Concentrations (MIC) of atorvastatin, pravastatin and simvastatin against planktonic cells of Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli and Enterococcus faecalis strains were obtained. Since simvastatin showed activity against S. aureus, its effects on cell viability were evaluated in a time-kill and post-antibiotic effect (PAE) assays. A possible synergistic effect between simvastatin and vancomycin was also assessed. In addition, the effect of simvastatin against biofilms of S. aureus was tested. The MIC values of simvastatin for S. aureus were: 15.65 µg/ml (ATCC 29213) and 31.25 µg/ml (ATCC 33591, 43300, 14458 and 6538). Simvastatin showed a bacteriostatic profile, and in a 4x>MIC concentration the PAE was similar to vancomycin. No synergistic effect was found between simvastatin and vancomycin. Simvastatin was able to reduce the formation of biofilms in concentrations ranging from 1/8MIC to 4xMIC. In addition, the 4xMIC was able to decrease the viability, biomass and production of extracellular polysaccharides and increase the production of intracellular polysaccharides on mature biofilm of S. aureus. The protein production on biofilm was not altered in the presence of simvastatin . In conclusion, our results showed that simvastatin has a great potential to be explored, especially in relation to the development new antimicrobial agents / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestra em Odontologia
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Avaliação da atividade antimicrobiana de óleos essenciais contra microrganismos do grupo mutans e determinação da atividade antiproliferativa / Antimicrobial activity of essential oils on mutans Streptococci and determination of their antiproliferative effect

Galvão, Lívia Câmara de Carvalho, 1985- 20 August 2018 (has links)
Orientadores: Pedro Luiz Rosalen, Marta Cristina Teixeira Duarte / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-20T05:30:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Galvao_LiviaCamaradeCarvalho_M.pdf: 2503098 bytes, checksum: 760c43af0e7b213e1e3e3c97f4e922d7 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana, in vitro, de óleos essenciais e frações dos óleos de melhor atividade, contra microrganismos do grupo mutans em estado planctônico. Além disso, os biofilmes de Streptococcus mutans foram submetidos às frações ativas e os óleos de melhor atividade e frações ativas foram avaliados quanto à sua citotoxicidade e caracterizados quimicamente. Para isso, vinte óleos essenciais (OE) foram obtidos por hidrodestilação a partir de plantas pertencentes ao banco de germoplasmas da Coleção de Plantas Medicinais e Aromáticas (CPMA/CPQBA/UNICAMP). Estes OE foram avaliados quanto à sua atividade antimicrobiana por meio dos ensaios: concentrações inibitória (CIM) e bactericida mínima (CBM) contra Streptococcus mutans UA159. Controles positivo (clorexidina 0,12 %) e negativo (propilenoglicol 6,12 % e 25 %) também foram testados...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The aim of this study was to evaluate the in vitro antimicrobial activity of essential oils (EO) and fractions from highest activity EO against planktonic cells of mutans streptococci. Besides, the biofilms formed by this microorganism were submitted to active fractions and the higher activity EO and active fractions were evaluated regarding their citotoxicity and chemically characterized. For this, twenty essentinal oils were obtained from plants of the "Collectio of Medicinal and Aromatic Plants" (CPMA, CPQBA/UNICAMP), germplasm bank by hydrodistillation. These EO were evaluated by antimicrobial assays: minimum inhibitory (MIC) and bactericidal (MBC) concentrations against Streptococcus mutans UA159. Positive (chlorhexidine 0.12%) and negative (propylene glycol 6.12 % and 25%) controls were also tested...Note: The complete abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia
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Elaboração e caracterização de filmes a base de gelatina modificada enzimatica e quimicamente

Carvalho, Rosemary Aparecida de 12 February 2002 (has links)
Orientador: Carlos R. F. Grosso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-02T19:14:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_RosemaryAparecidade_D.pdf: 41380646 bytes, checksum: 1d1fef154ed79d80e341e037f3dbe962 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo:Inúmeras são as aplicações da gelatina em produtos alimentícios em virtude de suas propriedades funcionais (agente geleificante, espessante, estabilizante, protetor coloidal, emulsificante, agente espumante, clarificante de bebidas e outras), e dentre as mais recentes tem se destacado a formação de filmes comestíveis elou biodegradáveis, visando a proteção de alimentos. Estudos envolvendo filmes comestíveis elou biodegradáveis surgiram da necessidade de alternativas para as embalagens sintéticas, pois embora estas apresentem excelentes propriedades mecânicas e de barreira, na sua grande maioria não apresentam caráter biodegradável e em virtude do grande volume e diversidade apresentam dificuldades de reciclagem. A grande maioria dos estudos relacionados a filmes comestíveis elou biodegradáveis desenvolvidos atualmente visam a produção e caracterização dos mesmos, devido a grande susceptibilidade das propriedades (mecânicas e de barreira) dos mesmos às condições ambientais, sendo que a propriedade de barreira ao vapor de água é o fator limitante na sua utilização / Abstract: There are numerous applications for gelatin in food products due to its functional properties (as gelling, thickening, stabilizing and foaming agents, colloid protector, emulsifier, beverage clarifier and others), and of the more recent applications, the formation of edible and/or biodegradable films has shown considerable promise, aiming at protecting the food. Studies involving edible and/or biodegradable films arose from the need for altematives to synthetic packaging, which, although presenting excellent mechanical and barrier properties, were almost ali non-biodegradable, and, due to the tremendous volume and variety, were presenting great difficulties with respect to recycling. The vast majority of the studies related to edible and/or biodegradable films currently under development, aim at their production and development, due to the great susceptibility of their properties (mechanical and barrier) under environmental conditions, the property of water vapor barrier being the limiting factor to their use / Doutorado / Doutor em Alimentos e Nutrição
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Estudo in vitro da atividade antimicrobiana do hipoclorito de sodio e da clorexidina usados como substancias quimicas auxiliares frente a biofilmes de especie unica

Sena, Neylla Teixeira 17 December 2004 (has links)
Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-04T08:34:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sena_NeyllaTeixeira_M.pdf: 2765120 bytes, checksum: 8a7f044f8c8b34593e4ca88e997a79d7 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O objetivo deste estudo foi investigar a atividade antimicrobiana do hipoclorito de sódio (NaOCl) 2,5% e 5,25% e da clorexidina (CLX) 2.0% tanto na forma gel como líquida utilizados como substância química auxiliar durante o preparo químico-mecânico frente a biofilmes de espécies única. Biofilmes simples dos microrganismos Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis, Porphyromonas endodontalis, Fusobacterium nucleatum e Candida albicans foram formados em filtros de membrana de nitrato de celulose sobre placas de agar sangue. Os biofilmes foram imersos nas substâncias químicas por 30s, 5, 10, 15, 30 e 60 min com ou sem agitação mecânica e em seguida transferidos para meios de cultura contendo neutralizadores das substâncias químicas. A seguir, foram realizadas diluições em série, alíquotas foram inoculadas em placas de agar sangue, incubadas e após crescimento, as unidades formadoras de colônias foram quantificadas através de suas diluições. O hipoclorito de sódio (NaOCl) 5,25% eliminou todos microrganismos testados em 30 segundos de contato. Frente aos microrganismos anaeróbios estritos, todas as substâncias químicas obtiveram o mesmo desempenho, sendo efetivas em 30 segundos. A solução salina permitiu o crescimento microbiano de todas as cepas. Concluiu-se que NaOCl a 5,25% foi a substância química testada mais efetiva, seguido pela CLX líquida 2%. Os resultados demonstraram que a efetividade do agente antimicrobiano depende dos microrganismos que constituem o biofilme, do tempo de contato destes com o a substância química, da ação ou não da agitação mecânica e forma de apresentação da substância / Abstract: The aim of this study was to investigate the antimicrobial activity of 2.5% and 5.25% sodium hypoclorite and 2.0% chlorhexidine gel and liquid as auxiliary chemical substances against selected single-species biofilms. Enterococcus faecalis, Staphylococus aureus, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis, Porphyromonas endodontalis, Fusobacterium nucleatum and Candida albicans were grown on cellulose nitrate membrane placed on agar medium, generating single biofilms, which were immersed in the endodontic auxiliary chemical substance for 30 second and 5, 10, 15, 30, and 60 minutes with mechanical agitation or not. Sterile saline was used as a control group. After each time tested, the antimicrobial activity was neutralized. The microorganisms were suspended using a vortex, which was tem-fold serially diluted. Aliquots of the dilutions were plated on 5% sheep blood agar media, and incubated. Colony-forming units were then calculated. NaOCl 5.25% was observed to eliminate all strains in 30 seconds. However, other irrigating solutions showed effective antimicrobial activity against the anaerobic microorganisms in 30 seconds. Sterile saline showed microbial growth in all tested times. NaOCl 5.25% followed by 2% liquid chlorhexidine, was the most effective agents tested. These results indicate that the effectiveness of an antimicrobial agent is closely related to the organization of microorganisms in the biofilm as well as to the contact time between microorganisms and substances, presence or lack of the mechanical agitation, and presentation form of the substances / Mestrado / Endodontia / Mestre em Clínica Odontológica
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Formação de biofilmes microbianos em membranas poliméricas de poliamida e polietersulfona e seu controle por agentes sanitizantes. / Microbial biofilms formation in polymeric membranes of polyamide and polyethersulfone and its control by sanitizers agents

Camargo, Liliane Rodrigues, 1981- 19 August 2018 (has links)
Orientadores: Arnaldo Yosteruy Kuaye, Luiz Antonio Viotto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-19T05:42:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Camargo_LilianeRodrigues_M.pdf: 1091941 bytes, checksum: 60be1838dcd0800329468f3b7825e521 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O grande consumo de águas minerais tem alavancado muitos estudos de relação caracterização microbiológica, nas mais diversas regiões brasileiras. Trabalhos revelam que a grande maioria das águas brasileiras envasadas e águas de poços artesianos possuem contaminação microbiana, causando grande preocupação com relação à qualidade da água a ser consumida. Dentre os processos para tratamento da água mineral, a fim de atender as exigências comerciais e de legislações, está a microfiltração. O processo consiste da utilização de filtros de membranas poliméricas, nos quais os microrganismos ficam retidos (barreira mecânica). De acordo com a Resolução RDC nº 275/2005 Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), os microrganismos Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, estão inseridos, juntamente com outras bactérias, como Enterococos, Clostridium perfringens e coliformes totais no quadro de controle microbiano de águas minerais. Devido à utilização dos filtros de membrana para controle destes microrganismos, há a necessidade da realização da sanitização desses filtros para evitar proliferação de microrganismos na superfície; prevenindo o entupimento dos poros da membrana e contaminação do processo. O sanitizante a base de ácido peracético e água quente são os principais agentes sanitizantes utilizados na indústria de água mineral para sanitização de equipamentos. Assim este trabalho objetivou avaliar a formação de biofilme microbiano de Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa em membranas poliméricas de poliamida e polietersulfona e a eficiência da sanitização das membranas por solução de ácido peracético a 0,1%, 0,2% e água quente a 85 ºC em dois diferentes tempos de contato, 10 minutos e 20 minutos. O teste foi realizado através do contato de cupons de 1 cm2 das membranas com o inóculo na concentração de 104 UFC/ mL, em temperaturas de 5, 25 e 35ºC e a análise dos cupons após 24h, 48h e 72h de contato. A quantidade de células aderidas de Escherichia coli para ambas as membranas foi de 4 log UFC/ cm2 para as primeiras 24h de contato, chegando até 6 log UFC/cm2 após 72h de contato para a temperatura de 35ºC. Para Pseudomonas aeruginosa, o comportamento de adesão foi similar, onde a maior quantidade chegou à 6,25 log UFC/cm2 após 72h de contato para a temperatura de 25ºC. Para avaliar a eficiência dos agentes sanitizantes, os cupons foram submetidos ao processo de adesão dos microrganismos e após 24 horas de contato na temperatura de 35ºC foram colocados em contato com a solução sanitizante à base de ácido peracético 0,1%, 0,2% e água quente à 85ºC durante 10 e 20 minutos. Os sanitizantes utilizados ofereceram grande eficiência na redução das bactérias aderidas nas membranas. A concentração do sanitizante químico mais efetivo foi 0,2% para 10 e 20 minutos de contato, onde cerca de 80% dos cupons tiveram redução de > 4 Log UFC/cm2. A água na temperatura de 85ºC em ambos os tempos de contato (10 minutos e 20 minutos) também ofereceu grande eficiência na redução logarítmica dos microrganismos, onde 100% dos cupons apresentaram redução > 4 Log UFC/cm2 / Abstract: The high consumption of mineral water has leveraged many studies regarding microbiological, in several brazilian regions. Papers reveal that the vast majority of brazilian bottled waters and water from artesian wells have microbiological contamination, causing great concern about the quality of water being consumed. Among the processes for treatment of mineral water in order to meet business requirements and laws is microfiltration. The process consist in the use of polymer membrane filters, the where the microorganisms are withheld (mechanical barrier). According to Resolution RDC 275/2005 of National Agency for Sanitary Vigilance (ANVISA) microorganisms Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa, are inserted, along with other bacteria such as Enterococcus, Clostridium perfringens and total coliforms under control of microbiological characteristics of mineral waters. Due to the use of membrane filters to control these microorganisms, there is the need to perform sanitization filters to prevent the proliferation of microorganisms on the surface, preventing the clogging of the pores of the membrane and process contamination. The sanitizing the basis of peracetic acid and hot water are the main agents sanitizers available in the industry of mineral water to equipments sanitize. This study aimed to evaluate the microbial biofilm formation of Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa in polymeric membranes of polyamide and polyethersulfone membranes and the sanitizing ef ficiencyprocess with of peracetic acid 0.1%, 0.2% and hot water at 85 °C in two different contact times, 10 minutes and 20 minutes. The test was conducted through the contact of coupons with 1 cm2 of the membranes in the inoculum with concentration of 104 CFU /mL, at temperatures of 5, 25 and 35 °C and an alysis of the coupons after 24h, 48h and 72h of contact. The amount of Escherichia coli cells attached to both membranes was 4 log CFU /cm2 for the first 24 hours of contact, reaching 6 log CFU /cm2 after 72 hours of contact to a temperature of 35 °C. For Pseudomonas aeruginosa, the adherence behavior was similar, where the largest amount reached 6.25 log CFU /cm2 after contact for 72 hours at 25 º C. To evaluate the effectiveness of sanitizing agents, the coupons were subjected to the adhesion of microorganisms and after 24 hours of contact at 35 ºC were placed in contact with the sanitizing solution based on peracetic acid 0.1%, 0.2% and hot water at 85 °C for 10 to 20 minutes. The sanitizers used offered high efficiency in reducing bacteria attached on the membranes. The concentration of chemical sanitizer most effective was 0.2% for 10 and 20 minutes of contact, where about 80% of the coupons was reduced by > 4 Log CFU/cm2. The water temperature at 85 °C in both contact times (10 and 20 minutes) also offered greater efficiency in logarithmic reduction of microorganisms, where 100% of the coupons showed a reduction > 4 Log UFC/cm2 / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos
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Análise periodontal em pacientes submetidos à tratamento ortodôntico corretivo: avaliação clínica, microbiológica e imunológica / Periodontal analysis in patients submitted to orthodontic treatment: clinical, microbiological and immunological evaluation

Shirozaki, Mariana Umekita 29 August 2018 (has links)
O biofilme é um dos fatores primários para o desenvolvimento da gengivite, periodontite e outras alterações na saúde gengival do paciente. O tratamento ortodôntico é um fator predisponente para adesão de microrganismos deixando o paciente susceptível ao maior acúmulo de biofilme e, consequentemente, às doenças periodontais. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar as alterações clínicas, microbiológicas e imunológicas no paciente em tratamento ortodôntico corretivo e testar as hipóteses nulas: 1 - não há diferença nos parâmetros clínicos, microbiológicos e imunológicos antes e durante o tratamento ortodôntico, 2 não há correlação entre os índices clínicos e imunológicos. Em 28 pacientes com necessidade de tratamento ortodôntico corretivo foram avaliados parâmetros clínicos como índice de Placa (IP), índice de Sangramento (IS), largura de gengiva queratinizada (LGQ); parâmetros microbiológicos por meio da contagem de 40 espécies subgengivais em amostras de biofilme (Checkerboard DNA-DNA Hybridization) e avaliação imunológica por meio da expressão dos níveis de Interleucina-1 &beta; (IL-1&beta; ), metaloproteínase da matriz-8 (MMP-8) e Fator de Necrose Tumoral (TNF-&alpha;) no Fluído Crevicular Gengival (FCG) (Luminex). Foram realizadas coletas em 3 momentos: T0 = antes da colocação do aparelho; T1 = 6 meses após e T2= 12 meses após o início do tratamento. Para as análises clínicas e microbiológicas foram aplicados teste de Friedman e Wilcoxon com correção de Bonferroni e para a análise imunológica, Análise de variância para medidas repetidas. Não foi observada diferença estatisticamente significante para a LGQ. IP apresentou aumento, sendo estatisticamente significante em T1 (70,58±28,56) e T2 (83,23±12,30) quando comparados ao T0 (24,44±11,56). O IS apresentou aumento estatisticamente significante em T1 (7,97±5,04) e diminuição em T2 (6,20±4,09), demonstrando valores sem diferença estatisticamente significante a T0 (4,54±4,98). Na análise microbiológica, dentre os seis complexos analisados, apenas o complexo vermelho apresentou frequência significativamente maior (p=0,001) em T2. Não houve diferença estatisticamente significante nos valores dos níveis das citocinas avaliadas, entre todos os tempos (p>0,05), porém em T2 houve correlação positiva moderada entre IS e IL-1&beta; (r=0,49 p=0,01) e TNF-&alpha; (r=0,39 e p=0,05). As hipóteses nulas foram rejeitadas. O tratamento ortodôntico corretivo causou alterações periodontais clínicas com relação ao acúmulo de biofilme e sangramento gengival, alterações de bactérias periodontopatogênicas, além de gengivite após 6 meses de tratamento / The biofilm is one of the primary factors for the gingivitis and periodontitis development and changes in periodontal health. Orthodontic treatment is a predisposing factor for microorganisms adhesion leaving the patient susceptible to greater biofilm accumulation and, consequently, to periodontal diseases. Therefore, the study aimed to analyze clinical, microbiological and immunological parameters in patients in orthodontic treatment. The null hypothesis tested were: 1 - there is no difference in clinical, microbiologica and immunological parameters before and during orthodontic treatment; 2 there is no correlation between clinical and immunological parameters. In twenty-eight patients with corrective orthodontic treatment were evaluated clinical parameters, such as Plaque index (PI), Bleeding on Probing (BOP) and width of keratinized gingiva; microbiological parameters with counting of 40 subgingival species with Checkerboard DNA-DNA hybridization and immunological evaluation of cytokines levels IL-1&beta; , MMP-8 and Tumor Necrosis Factor (TNF-&alpha;) in Gingival Crevicular Fluid (GCF). Samples were collected in three times: T0 = before orthodontic treatment; T1 = 6 months after and T2 = 12 months after starting orthodontic treatment. Data from clinical and microbiological evaluation were statistically analyzed with Friedman and Wilcoxon tests with Bonferroni correction and for the immunological analysis, Analysis of variance for repeated measures were applied. No significant difference was found for the width of keratinized gingiva. PI presented an increase, being statistically significant at T1 (70.58±28.56) and T2 (83.23±12.30) when compared with T0 (24.44±11.56). The BOP showed a statistically significant increase at T1 (7.97±5.04), however, at T2 (6.20±4.09) the values decrease with no statistically significant difference with T0 (4.54±4.98). In the microbiological analysis, the red complex showed significantly greater frequency (p=0.01) at T2. There was no statistically significant difference in the cytokine levels between the times, but there was a positive moderate correlation between BOP and IL-1&beta; (r=0.49 p=0.01) and TNF-&alpha; (r=0.39 e p=0.05). The null hypothesis were rejected. Corrective orthodontic treatment caused clinical periodontal changes regarding biofilm accumulation and gingival bleeding, alterations of periodontopathogens, besides gingivitis after 6 months of treatment
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Efeito dos desafios erosivo e abrasivo sobre a camada de glaze aplicada em materiais cerâmicos para CAD/CAM / Effect of erosive and abrasive challenges on the glaze layer applied in ceramic materials for CAD/CAM

Willers, Amanda Endres 25 February 2019 (has links)
O objetivo deste trabalho é estudar o impacto dos processos erosivo, abrasivo e erosivo/abrasivo sobre a camada de glaze aplicada em materiais restauradores indiretos produzidos com tecnologia CAD/CAM quanto à rugosidade superficial (Ra), à perda de superfície (PS), à topografia superficial (T) e à deposição de biofilme (DB). Este estudo teve como fatores de variação: material restaurador [LuxaCam Zircon HT - Plus (LC) e IPS e.max CAD (IPS)] e tratamento de superfície [Sinterização (S), Glaze (G), Erosão (E), Abrasão (A), Erosão/Abrasão (EA)]. Foram produzidos espécimes de 6mm x 7 mm x 1,3mm, divididos em 10 grupos para cada resposta. Para as respostas Ra e PS (n=10) foi utilizada perfilometria óptica, já para a resposta T foi utilizado MEV e para DB, ensaio microbiológico (n=3 e n=5, respectivamente). O protocolo de erosão consistiu na imersão de espécimes em 5ml de HCl 0,06M, pH 1,2, por 30 horas a 37ºC. O protocolo abrasivo foi realizado com máquina de escovação, escovas de cerdas macias e slurry pasta dentifrícia/água destilada 1:2. Foram realizados 400.000 ciclos com carga de 200 gramas. O protocolo erosivo/abrasivo consistiu na combinação dos dois protocolos anteriores. Para DB foi acrescentada a variável tempo de leitura (5 e 24 horas). Para este ensaio foi utilizada a cepa de Streptococcus mutans UA159, cultivada em TSB suplementado com 1,7% de sacarose, usando o método indireto de coloração por safranina e leitura de absorbância. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e teste de Tukey (p<0,05). Quanto ao Ra, LC apresentou maior Ra do que IPS (p<0,05) para todos os grupos testados. O desafio E diminuiu o Ra do glaze (p<0,05), enquanto A e EA o aumentaram (p<0,05). Quanto à PS, LC apresentou PS maior que IPS (P=0,03). Os desafios A e EA geraram maior PS do que E (p=0,00). Para DB, não houve diferença para nenhum fator após 5 horas (p>0,05). Para 24 horas, LC apresentou maior DB que IPS (P=0,00) e os desafios A e EA geraram maior DB (p=0,01) que E. A DB após 5 horas foi maior do que após 24 horas (p=0,02). Todas as propriedades da camada de glaze testadas foram alteradas pelos desafios de superfície, porém a camada de glaze aplicada sobre zircônia foi mais suscetível a estas. A maior rugosidade da camada de glaze levou à maior deposição de biofilme. / The aim of this study is to evaluate the impact of erosive, abrasive and erosive / abrasive challenges on the glaze layer applied on indirect restorative materials produced with CAD/CAM technology for surface roughness (Ra), surface loss (SL), surface topography (ST) and biofilm deposition (BD). This study had as factors of variation: restoration material [LuxaCam Zircon HT - Plus (LC) and IPS e.max CAD (IPS)] and surface treatment [Sintering (S), Glaze (G), Erosion (E), Abrasion (A), Erosion / Abrasion (EA)]. Specimens of 6mm x 7mm x 1.3mm were produced and divided into 10 groups for each response. For Ra and SL responses (n = 10) was used optical profilometry, for ST was used SEM (n=3) and for BD was used microbiological assay (n = 5). The erosion protocol consisted of immersing specimens in 5ml of 0.06M HCl, pH 1.2, for 30 hours at 37ºC. The abrasive protocol was performed with brushing machine, soft bristle brushes and slurry toothpaste /distilled water 1: 2. 400.000 cycles were performed with a load of 200 grams. The erosive / abrasive protocol consisted of a combination of the two previous protocols. For BD the variable reading time was added (after 5 and 24 hours). Strains of Streptococcus mutans UA159, cultivated in TSB supplemented with 1.7% of sucrose, were used by the indirect method of staining with safranin and reading of absorbance. Data were submitted to analysis of variance (ANOVA) and Tukey test (p <0.05). Regarding Ra, LC presented higher Ra than IPS (p <0.05) for all groups tested. E decreased glaze Ra (p <0.05), while A and AE increased it (p <0.05). Regarding SL, LC presented SL higher than IPS (P = 0.03). A and EA challenges generated higher SL than E (p = 0.00). For BD, there was no difference for any factor after 5 hours (p> 0.05). For 24 hours, LC presented higher BD than IPS (P = 0.00) and A and EA challenges generated higher BD (p = 0.01) than E. BD after 5 hours was higher than after 24 hours (p = 0.02). All the glaze layer properties tested were altered by the surface challenges, however the glaze layer applied on zirconia was more susceptible to these. Greater roughness of the glaze layer led to greater biofilm deposition.

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