Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-08T11:46:19Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 811660 bytes, checksum: 22a429ae96272122735337467c7e7599 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-08T11:46:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 811660 bytes, checksum: 22a429ae96272122735337467c7e7599 (MD5) Previous issue date: 2000-09-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente trabalho tem por objetivo verificar, nos parâmetros morfológicos e biológicos, após a exposição das larvas de Culex. quinquefasciatus à concentração de 1,5 ppb de ivermectina, o comportamento e a sobrevivência de C. quinquefasciatus, as possíveis alterações morfológicas no corpo gorduroso das larvas, as possíveis alterações no número de ínstares, número médio de ovos por postura da fêmea, duração do período larval e a assimetria flutuante nos adultos. Na sua execução foram utilizadas 601 larvas de 3o e 4o ínstar do mosquito como material biológico, que foram obtidas de criação semi natural. As larvas foram colocadas em recipientes plásticos num período de 30 minutos de exposição à droga. Após a exposição à solução do fármaco, foram lavadas em água desclorada e colocadas em gaiolas teladas para acompanhamento do desenvolvimento. Após a postura, os ovos foram separados e as larvas eclodidas, contadas. Algumas larvas submetidas a 1,5 ppb de ivermectina, foram utilizadas para o preparo de amostras para estudos em histologia. Para a análise de assimetria flutuante, 40 machos e 43 fêmeas adultas do grupo controle e 39 machos e 40 fêmeas adultas, sobreviventes das larvas expostas à concentração de 1,5 ppb de ivermectina, foram selecionados e destes, retiradas suas asas para posterior observação através do microscópio estereoscópico com câmera de vídeo acoplada. Foram realizadas medidas de comprimento das nervuras R3, R4+5, M1, M2, M3+4 e do perímetro das nervuras M1 e M2. Os resultados obtidos neste trabalho mostraram que a ivermectina na concentração de 1,5 ppb causou paralisia nas larvas com 73,38% de mortalidade, aumento das gotículas de lipídios no corpo gorduroso larval e uma diminuição do número de posturas. Foi verificado também, alteração na assimetria flutuante (AF), sendo maior no grupo controle e nas fêmeas. / The present work aims to investigate the behavior and the survival rate of Culex. quinquefasciatus, and to determine the lethal effect of ivermectin based on morphologic and biologic parameters of a 1.5 ppb concentration of C. quinquefasciatus larvae, and possible alterations of their fat body. Larvae of mosquito were obtained from semi-natural breeding as biologic material. Changes in the number of instars, average number of eggs per laying, length of the larval stage and fluctuating asymmetry (FA) were studied in adults. For this experiment, 601 larvae of 3rd and 4th instars of the mosquito were obtained and placed in plastic containers and exposed for 30 minutes. The laid eggs were separated and the hatched larvae were counted. Some larvae submitted to 1.5 ppb of ivermectin were used to prepare samples for histologic study. For asymmetry analyses, 40 floating males and 43 adult females of the control group which survived exposure to 1.5 ppb of ivermectin were selected and from them, the posterior observation through stereoscopic microscope with video camera mounting. R3, R4+5, M1, M2, M3+4 nervures and the perimeter of M1 and M2 nervures were measured. The results obtained show that ivermectin in a concentration of 1.5 ppb caused paralysis to the larvae with a mortality rate of 73.38%, an increase in the number of lipid droplets in the fat body and an reduction of the number of egg layings in the adult. It was also observed that the FA is larger in females than in males and also larger in the treated group than in the control one.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-08T16:43:05Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 564049 bytes, checksum: 4e2aaffba113a5a7cfe889fd50aa6203 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-08T16:43:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 564049 bytes, checksum: 4e2aaffba113a5a7cfe889fd50aa6203 (MD5) Previous issue date: 1999-08-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo deste trabalho foi analisar os constituintes químicos do pólen de Stryphnodendron polyphyllum (barbatimão), causador da doença cria-ensacada brasileira (CEB) em Apis mellifera. Para isso, coletaram-se pólen e inflorescência de barbatimão para serem submetidos a extrações sucessivas com hexano e, posteriormente, com etanol. Com os extratos hexânico e etanólico do pólen e da inflorescência obtidos, foram realizados ensaios biológicos, nos quais se verificaram pré-pupas com sintomas da doença nos tratamentos em que as larvas eram alimentadas com dieta de operária mais extrato etanólico. Observou-se a presença de taninos nos extratos etanólicos, tendo sido determinado nestes 7,91 e 21,43% de taninos no pólen e na inflorescência, respectivamente. Com o fracionamento do extrato etanólico do pólen, isolaram-se ainda ácidos graxos e frutose, que foram submetidos a ensaios biológicos. Essas frações não determinaram o aparecimento de sintoma da CEB nas abelhas tratadas. Como várias espécies de barbatimão são conhecidas por possuírem altas concentrações de tanino, realizaram-se ensaios biológicos com concentrações diferentes de ácido tânico para verificar o seu efeito no desenvolvimento das crias de abelhas. Observou-se a presença de sintomas da doença e de alta mortalidade das crias tratadas a partir da terceira alimentação com dieta contendo diferentes concentrações de ácido tânico, tendo sido estimada uma CL50 de 0,012% no referido composto. Diante desses resultados, concluiu-se que o constituinte químico responsável pelos sintomas da cria-ensacada brasileira está presente na fração etanólica do pólen, podendo pertencer ao grupo dos taninos. Os resultados dos ensaios biológicos obtidos com a inflorescência foram semelhantes àqueles conseguidos com o pólen. / The objective of this study was to analyze quimical components of Stryphnnodendron polyphyllum pollen, which cause the Brazilian encapsulated- larvae disease (CEB) in Apis mellifera. Pollen and inflorescence of Stryphnnodendron polyphyllum were collected and gone through successive extraction with hexane and later with ethanol. Biological assays were carried out with the hexane and ethanol extracts obtained from pollen and inflorescence. In those assays it was verified the presence of pre-pupae showing the symptoms of the disease in the treatments where the larvae were fed with the working bees diet supplemented with ethanol extract. It was detected the presence of tannins in ethanol extracts, which was found to be 7,91 and 21,43% of tannins for pollen and inflorescence, respectively. Fructose and fatty acids were isolated from pollen ethanol extract fractionation and were gone through biological assays; in these fractions no symptom of CEB was detected in the treated bees. Since several Stryphnnodendron species are known as containing high tannin concentrations, biological assays using different concentrations of tannic acid were carried out to verify its effect on bee young development. It was observed the presence of CEB symptoms and a high mortality of the young which were treated, from the third feed onwards, with diet containing different concentrations of tannic acid, whose CL50 was estimated at 0,012%. Based on these results, it was concluded that the chemical component which is responsible for the CEB symptoms is present in the ethanol fraction of pollen and it may belong to the tannin group. The results obtained from the inflorescence biological assays were similar to those from pollen.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-20T13:29:02Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 138918 bytes, checksum: 657a2facbaa19eccaaf07357a0fe5d5a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-20T13:29:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 138918 bytes, checksum: 657a2facbaa19eccaaf07357a0fe5d5a (MD5) Previous issue date: 2002-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Esta tese teve por objetivo testar a importância de fatores locais para a riqueza e estrutura da comunidade de formigas em ambiente de serapilheira. No primeiro capítulo a hipótese de que a disponibilidade e heterogeneidade local de recursos determinam a riqueza local de espécies de formigas foi testada, utilizando o peso da serapilheira como medida indireta de disponibilidade de recursos. Foi encontrada uma relação positiva estatisticamente significativa entre o peso seco da serapilheira e a riqueza local de espécies de formigas. A s análises não mostraram maior importância de nenhuma das frações da serapilheira (folhas, frutos, ramos, detritos), também não foram encontrados efeitos da heterogeneidade da serapilheira sobre a riqueza local de espécies de formigas. A ausência do efeito da heterogeneidade é uma evidência de que a escala utilizada nesta tese é apropriada para o estudo de processos locais. No segundo capítulo a hipótese de que a dinâmica local de imigração e extinção determina a riqueza local de espécies de formigas em serapilheira foi testada experimentalmente. A hipótese complementar de que a disponibilidade e heterogeneidade local de recursos afetam a dinâmica local desta comunidade também foi testada. O estudo da dinâmica da comunidade não mostrou um efeito significativo das extinções locais sobre a riqueza local pelo período de dois meses. Os resultados evidenciaram que a dinâmica das espécies de serapilheira parece ser mais afetada pelos movimentos das espécies do que pela extinção local. O experimento com recolonização mostrou que há migração para áreas onde há remoção de espécies, entretanto dois meses (duração do experimento) não foi um período de tempo suficiente para recuperar a riqueza local encontrada antes do distúrbio. A recolonização foi independente da abundância, composição e heterogeneidade da serapilheira, reforçando os resultados do primeiro capítulo. A composição da comunidade após a migração também foi alterada, ou seja, as espécies que recolonizaram uma área não foram as mesmas que habitavam aquele local antes do distúrbio. Este fato mostrou que perturbações em pequena escala podem ser um fator importante para a estrutura desta comunidade. É provável que após um distúrbio a comunidade mude ao longo do tempo, desta forma é possível que a comunidade de serapilheira seja formada por um mosaico de manchas em diferentes estágios de sucessão. / Determinant factors of local richness and composition in litter ant communities. A dviser: José Henrique Schoereder. Committee Members: Carlos Frankl Sperber e Og Francisco Fonseca de Souza. The aim of this thesis was to test the importance of local factors to ant species richness determination in litter communities. In the first chapter the hypothesis of local availability and heterogeneity of resources to determine local species richness was tested, using litter weight as an indirect of resource availability. A significant positive relationship between litter dry weight and local species richness was found. The analyses did not evidence the effect of any of the litter fractions, nor of litter heterogeneity on local ant species richness. The absence of litter heterogeneity effect is evidence that the spatial scale used in this work is appropriate to the study of local processes. The hypothesis that local dynamics of immigration and extinction determine the local litter ant species richness was experimentally tested in the second chapter. The complementary hypothesis that local resource availability and heterogeneity affect local dynamics of this community was also tested. The study of community dynamics did not show a significant effect of extinction on local species richness in a two months period. The results evidenced that litter species dynamics seems to be more affected by species movements than by local extinction. The re-colonization experiment showed that migration occurred to areas where the ants were removed, although two months was not time enough to recover the species richness found before the disturbance. Re- colonization is independent of litter abundance, composition and heterogeneity, stressing the results from the first chapter. The community composition after migration was also altered, this means that species re-colonizing a given area are not the same than those living in the same area before disturbance. This shows that small-scale disturbances may be an important factor to community structuring. It is probable that after disturbance community changes along time. In that case litter ant communities would be formed by a mosaic of patches in different successional stages. Studies on species composition that re-colonize an area after a disturbance may show the successional pattern and give important information on the mechanisms by which dynamics of such communities determine local species richness.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-21T17:13:02Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 501683 bytes, checksum: 927975262b78b9e277bbfec0dfb54d77 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-21T17:13:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 501683 bytes, checksum: 927975262b78b9e277bbfec0dfb54d77 (MD5) Previous issue date: 2003-07-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A poliginia dentro de uma colônia de inseto social pode ser primária ou secundária. A poliginia primária ocorre quando várias rainhas se juntam para iniciar uma nova colônia. Também, colônias monogínicas podem aceitar novas rainhas fecundadas, tornando-se assim poligínicas secundariamente. A poliginia diminui o grau de parentesco entre as operárias companheiras de ninho e, com isso, os benefícios de se ajudar indivíduos mais próximos geneticamente também se reduzem. Estudos acerca do reconhecimento entre companheiras de ninho e da adoção de rainhas são imprescindíveis para esclarecer como o número de rainhas é regulado, bem como as causas da variação nesse número. Neste trabalho, escolheu-se como objeto de estudo Acromyrmex subterraneus molestans Santschi, 1925, uma subespécie de formiga cortadeira bastante comum na região de Viçosa, MG. Numa mesma região são encontradas colônias monogínicas e poligínicas dessa subespécie, o que a torna ideal em estudos dos processos que regulam o número de rainhas em colônias de Formicidae. Estudos conduzidos em laboratório mostraram que colônias monogínicas de Ac. subterraneus molestans podem se tornar poligínicas pelo mecanismo de adoção de rainhas de outras colônias. Operárias da maioria das colônias estudadas não foram capazes de discriminar entre rainhas de outras colônias da sua própria. A ausência de comportamento discriminatório também foi verificada quando se realizaram encontros de operárias de diferentes colônias. Análises químicas mostraram que não existem diferenças qualitativas no perfil químico cuticular das colônias, quer sejam elas monogínicas ou poligínicas. Finalmente, avaliou-se a possibilidade de haver sobrevivência diferencial entre operárias de colônias poligínicas e monogínicas, quando essas eram mantidas em contato com o lixo da própria colônia. Os testes de sobrevivência mostraram que operárias dos dois tipos de colônia morriam a taxas estatisticamente iguais. Vantagens da poliginia e da ausência de comportamento discriminatório são discutidas nesta dissertação. / Polygyny within a colony of social insects can be primary or secondary. Primary polygyny may occur when several queens jointly initiate a new colony. Monogynous colonies can also accept newly mated queens and become secondarily polygynous. Polygyny reduces kinship among nestmate workers and, consequently, reduces the benefits of helping genetically close individuals. Studies on nestmate recognition and on queen adoption are essential to elucidate how the number of queens is regulated, as well as the causes of the variation in this number. In this research, Acromyrmex subterraneus molestans Santschi, 1925 was chosen because it is a very common leaf-cutting ant in the region of Viçosa, Minas Gerais State where the Federal University of Viçosa is located. Additionally in this region monogynous and polygynous colonies of this subspecies occur naturally, which makes them ideal for studying regulation in queen number in Formicidae. Laboratory studies demonstrated that monogynous colonies of Ac. subterraneus molestans may become polygynous by the mechanism of queen adoption from other colonies. Workers of most of the studied colonies were not able to discriminate among queens from other colonies and their own. The lack of discriminatory behavior was also observed when encounters from different colonies were induced. Chemical analyzes showed no qualitative differences in the cuticular chemical profile of either polygynous or monogynous colonies. Finally, the possibility of differential survival among workers from these colonies when maintained in contact with colony refuse was evaluated. Survival tests revealed that workers from either monogynous or polygynous colonies died at equal rates in contact with refuse. Advantages of polygynous and of the lack of discriminatory behavior among workers are discussed in this thesis.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-28T18:19:29Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3332652 bytes, checksum: 04ec070117dac8440805ce5de641c800 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-28T18:19:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3332652 bytes, checksum: 04ec070117dac8440805ce5de641c800 (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A papel da sacarose em CG foi investigado através da caracterização de plantas de Tabaco transgênicas superexpressando a isoforma 3 do gene sacarose sintase (NtSuSy3) sob controle do promotor KST1 bem como por experimentos de análise de fluxo metabólico utilizando fragmentos epidérmicos enriquecidos com CG (EF) durante abertura estomática induzida pela luz. As plantas NtSuSy3 mostraram aumentos na condutância estomática, fotossíntese e nas taxas de transpiração a nível foliar e de planta inteira. As alterações observadas no metabolismo de CG das plantas transgênicas são discutidas no texto. Observou-se uma redução nos níveis de sacarose em diferentes experimentos de abertura estomática induzida pela luz, enquanto que os níveis de sacarose no meio não foram alterados, sugerindo que a sacarose foi degradada no simplasto de CG. A análise via LC-qTOF-MS de experimentos com EF submetidos a NaH13C03 durante abertura estomática induzida pela luz mostraram um enriquecimento de 13 C em sacarose, malato, fumarate e glutamins. As possíveis funções exercidas por esses metabólitos são discutidas no texto. Em conjunto, os dados desse trabalho sugerem que a degradação da sacarose no simplasto de CG pode ser um mecanismo importante para a abertura estomática de Tabaco induzida pela luz. / A characterization of transgenic tobacco plants overexpressing potato sucrose synthase 3 gene (NtSuSy3) under control of KST1 promoter was performed in order to analyze the role of sucrose metabolism on GC osmoregulation. Also, we performed a metabolic flux analysis in guard cell enriched epidermal fragment (EF) of Nicotiana tabacum in order to investigate changes in GC metabolism during stomatal aperture light-induced. NtSuSy3 plants showed higher stomatal conductance, transpiration rate, whole plant transpiration, and net photosynthetic rate than wild type (WT). Several changes in GC metabolism were observed in transgenic plants are discussed in the text. In different stomatal aperture light-induced experiments, it was observed a decrease in sucrose content, while no changes were detected in the sugar content in the medium; suggesting that the sugars decreased observed is due to breakdown and not efflux of GC. Using a feeding strategy in EF submitted to NaH13C03 followed by LC-qTOF-MS analysis, a 13 C-enrichment in sucrose, malate, fumarate and glutamine were observed. The possible function of these metabolites for GC osmoregulation are discussed in the text. Taken together, the data showed here provide evidence for another role of sucrose for GC osmoregulation. Our data suggest that sucrose breakdown, not just sucrose accumulation, can be performed to induce stomatal opening in tobacco. / O autor não aprersentou título em portuguẽs. A data de aprovação foi aleatória devido não constar na tese. Tese enviada pela secretaria do curso por e-mail, em 28-03-17.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-29T11:03:04Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3774617 bytes, checksum: 197f3ca5359c93c3476e850581110d85 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-29T11:03:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3774617 bytes, checksum: 197f3ca5359c93c3476e850581110d85 (MD5) Previous issue date: 2013-04-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O arsênio (As) é um elemento não só tóxico, mas também altamente genotóxico aos seres vivos. Muitas lacunas precisam ser preenchidas com relação aos processos causadores de toxidade do As em plantas, bem como os mecanismos de tolerância e sensibilidade a este metalóide. Para isso, plantas de Arabidopsis thaliana (WT, mutantes msh2 e transgênicas repórteres em mutações) e Allium cepa foram expostas a 0, 2, 8 e 16 mg As L -1, durante cinco dias, em sistema hidropônico ou em meio de cultura. As plantas acumularam grandes teores de As nas raízes e apresentaram elevado fator de translocação para a parte aérea, e também alterações no acúmulo de nutrientes. Os sintomas visuais se intensificaram com o aumento da concentração de As na solução nutritiva. As raízes adquiriram coloração escura e aspecto gelatinoso, danificado e aumento no comprimento e densidade dos pêlos; a parte aérea apresentou aumento dos teores de antocianinas e sinais de senescência precoce, bem como alterações na espessura de tecidos. O estresse oxidativo e a redução dos teores de fósforo foram apontados como os principais efeitos do As capazes de causar toxidez, evidenciando os danos indiretos deste elemento no organismo. Foram verificadas importantes alterações fotossintéticas, bem como indícios de danos ao processo de respiração celular devido o aumento da expressão de genes codificantes de oxidases alternativas. Também foram observadas alterações nos teores de açúcares em folhas jovens, maduras e raízes. O As promoveu fragmentação do DNA nos ápices radiculares de A. cepa e aumento das taxas de mutação pontual e de recombinação-não homóloga em A. thaliana. O significativo aumento da expressão dos genes msh2 e msh7, codificadores de enzimas-chave do processo mismatch repair, que realiza o reparo de bases danificadas ou erroneamente inseridas no DNA, sugeriu a importância deste mecanismo no combate à genotoxidade do As em A. thaliana. Isso foi confirmado pela maior sensibilidade observada nas plantas mutantes msh2 ao As, detectada visualmente via aumento da peroxidação de lipídios. Observou-se inibição da atividade da protease caspase-3, associada ao processo de morte celular programada, reforçando a capacidade de inibição da atividade enzimática pelo As. / Arsenic (As) is not only a toxic element, but also highly genotoxic to living organisms. Several gaps in our understanding of As toxicity in plants need to be filled, including the mechanisms that result in tolerance and sensitivity to this metalloid. For this reason Arabidopsis thaliana plants (WT, msh2 mutants and transgenic reporters in mutation process) and Allium cepa were exposed to 0, 2, 8 e 16 mg As L -1, for five days, in a hydroponic system or in culture medium. The plants accumulated large amounts of As in roots and presented a high translocation factor to the shoot, and also showed changes in nutrient accumulation. The visual symptoms have intensified with the increasing of As concentration in the nutritive solution. Roots showed dark coloration and a damaged and gelatinous aspect, with increased roots hair length and density. The shoots showed accumulation of anthocyanins and signs of early senescence, as well as changes in tissue thickness. Oxidative stress and reduction of phosphorus concentration in tissues have been implicated as the main cause of toxicity, evidencing the indirect damage from this element in the organism. Important changes in photosynthesis were observed, as signs of damage to respiration, due to increased expression of alternative oxidase genes. Thus, changes in the levels of synthesis and utilization of sugars by plants were observed. As promoted DNA fragmentation in A. cepa and increased rates of point mutation and nonhomologous recombination. The significant increase in the expression pattern of the msh2 and msh7 genes, which encode key enzymes in DNA repair process, suggests the importance of this mechanism in defense against As genotoxicity in A. thaliana. This was confirmed by the greater sensitivity observed in msh2 mutants to As as indicated by visual symptoms and by an increase in lipid peroxidation. Inhibition of the activity of the caspase-3 protease was also observed, evidencing the As capacity of enzyme activity inhibition. / Tese enviada pela secretaria do curso por e-mail, em 28-03-17.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-29T11:17:16Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 905568 bytes, checksum: 94c53779a921ceebf36267e09ef933a1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-29T11:17:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 905568 bytes, checksum: 94c53779a921ceebf36267e09ef933a1 (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Ao contrário de outros transportadores de ADP/ATP, ADNT1 é o único que medeia um antiporte um de ATP preferencialmente por AMP, e, em menor grau, por ADP. Um trabalho prévio sugere que a expressão ADNT1 é maior em pontas de raízes e em tecidos senescentes. Considerando a elevada expressão de ADNT1 em tecidos senescentes, nos propusemos a investigar o papel do ADNT1 durante o processo de senescência induzida pelo escuro. Sob estas condições, plantas mutantes de Arabidopsis thaliana deficientes na expressão do transportador ADNT1 exibiram uma senescência antecipada em relação ao tipo selvagem, como evidenciado tanto pelo fenótipo visual das plantas após o crescimento em longos períodos de escuridão, como pela perda de clorofilas e da capacidade fotossintética. O tratamento prolongado de escuro levou, em geral, a um declínio mais rápido nos mutantes do que nos do tipo selvagem nos teores de clorofila e nos níveis de sacarose e de proteínas. Por outro lado, os níveis de aminoácidos totais e de alguns intermediários do ciclo TCA, como malato, fumarato e isocitrato geralmente aumentaram significativamente nos mutantes no final do tratamento de escuro. As razões NADH/NAD + e NADPH/NADP+ também se apresentaram maiores nos mutantes em comparação com o tipo selvagem, com a progressão da escuridão. Além disso, as plantas mutantes apresentaram sintomas de senescência precoce em comparação ao tipo selvagem, mesmo sob condições tidas como não estressantes. Estes dados demonstram, assim, que ADNT1 não é funcionalmente redundante aos previamente caracterizados transportadores de ADP/ATP, especialmente durante a falta de carbono, e reforçam a função potencial de ADNT1 no fornecimento da energia necessária para suportar o crescimento de tecidos vegetais heterotróficos. / Unlike other ADP/ATP carriers, ADNT1 is the only one that mediates an antiport of ATP, AMP, and, to a lesser extent, ADP and the corresponding deoxyadenine nucleotides. Previous work observed that ADNT1 expression is much stronger in root tips and senescing tissues. Considering the high expression of ADNT1 in senescing tissues, we have investigated the role of ADNT1 during the process of dark-induced senescence. Under these conditions, Arabidopsis thaliana mutants deficient in the expression of ADNT1 transporter displayed a similar, yet milder, early onset of senescence as evidenced both by the visual phenotype of plants following growth in extended periods of darkness and the loss of chlorophyll and photosynthetic competence. The extended dark treatment led in general to a more rapidly decline in the mutants than in the wild type in the levels of sucrose and protein. By contrast, the levels of total amino acids and TCA cycle intermediates malate, fumarate and isocitrate generally increased significantly in the mutants at the end of dark treatment. The NADH/NAD + and NADPH/NADP+ ratios also increased in mutants in comparison to the wild type with progression of the darkness. Additionally, the mutant plants exhibited symptoms of early senescence in comparison to the wild type even under optimal conditions. Altogether the data obtained demonstrate that ADNT1 is not functionally redundant to the previously characterized ADP/ATP carriers, especially during carbon starvation and reinforce the potential function for ADNT1 in the provision of energy which is required to support growth in heterotrophic plant tissues. / Não foi localizado o cpf do autor. Tese enviada pela secretaria do curso por e-mail, em 28-03-17.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-29T11:36:45Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1817587 bytes, checksum: 926162ce1f44cc0b545b80273c21b20b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-29T11:36:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1817587 bytes, checksum: 926162ce1f44cc0b545b80273c21b20b (MD5) Previous issue date: 2013-03-13 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O objetivo geral do trabalho foi determinar um protocolo de embriogênese somática e de calogênese em raízes de Passiflora morifolia Masters, e realizar análises fitoquímicas em calos e em diferentes órgãos da espécie. Explantes radiculares foram incubados em meio Murashige & Skoog (MS) suplementado com diferentes concentrações de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D). Avaliaram-se o número de explantes com formação de zonas embriogênicas e de calos, aspectos anatômicos, estruturais e moleculares, assim como, a caracterização fitoquímica de calos, de diferentes órgãos de vitroplantas e de plantas cultivadas em casa de vegetação. O primeiro capítulo teve como objetivos estabelecer um protocolo de indução da embriogênese somática em raízes de P. morifolia, e realizar a caracterização morfoanatômica do processo e de expressão do gene SERK por hibridização in situ. As concentrações de 2,4-D iguais ou superiores a 6,78 μM induziram embriogênese somática. O teste de dupla coloração com carmin acético e azul de Evans confirmou a natureza embriogênica do material. O contínuo desenvolvimento de zonas de proliferação formadas a partir do periciclo e de tecidos vasculares associados promoveu o rompimento do córtex e da epiderme da raiz, culminando na diferenciação de embriões somáticos. Adicionalmente, a hibridização in situ com sonda heteróloga de PcSERK (Passiflora cincinnata SERK), confirmou a embriogênese somática. O segundo capítulo teve como objetivos estabelecer um protocolo de calogênese em explantes radiculares de P. morifolia, e realizar análises fitoquímicas em calos submetidos a tratamentos com luz UV-B, e em diferentes órgãos da espécie cultivada em casa de vegetação e in vitro sob iluminação fornecida por lâmpadas de LED. Por cromatografia em camada delgada foram observadas diferenças fitoquímicas entre plantas e vitroplantas. Flavonoides foram facilmente observados em folhas de plantas em ambas as condições de cultivo, exceto em calos. Por cromatografia líquida de alta eficiência foi identificado isovitexina como o flavonoide presente em maior concentração nas folhas e caules de plantas cultivadas em casa de vegetação. Outros flavonoides foram identificados nos demais órgãos em ambas as condições de cultivo, com exceção dos calos. Diferenças entre a atividade antioxidante de plantas e vitroplantas foram verificadas, ao contrário do observado para os calos submetidos ao tratamento com UV-B, quando comparados com o tratamento controle. O presente estudo demonstrou a versatilidade de raízes de P. morifolia para a calogênese e embriogênese, e a possibilidade de produção de metabólitos secundários em vitroplantas cultivadas sob iluminação de lâmpadas de LED. / The general objective of the study was to establish a protocol for somatic embryogenesis and callogenesis in roots of Passiflora morifolia Masters and carry out phytochemical analysis in root-derived calluses and in different plant organs. Root explants were plated on Murashige and Skoog (MS) supplemented with different concentrations of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). It was evaluated the number of explants forming embryogenic areas and calluses, anatomical, molecular and structural aspects, as well as the phytochemical characterization of calluses from different organs of in vitro plants and plants grown in the greenhouse. Chapter 1 aimed to establish a protocol for induction of somatic embryogenesis in roots of P. morifolia and its morphoanatomical characterization as well as of the SERKgene expression through in situ hybridization. Concentrations of 2,4-D greater than or equal to 6.78 μM induced somatic embryogenesis. The double staining test with carmine acid and Evans blue confirmed the embryogenic nature of the material. The continuous development of proliferation zones from the pericycle and associated vascular tissue caused the epidermis and cortex of the root to break, leading to the differentiation of somatic embryos. Additionally, the in situ hybridization with the heterologous probe PcSERK (Passiflora cincinnata SERK) confirmed the occurrence of somatic embryogenesis. Chapter 2 aimed to establish a protocol for callus formation in root explants of P. morifolia, perform phytochemical analysis in callus undergoing treatment with UV-B light and perform phytochemical analysis in different organs of greenhouse-grown and in vitro-grown plants under LED illumination. Phytochemical differences between greenhouse plants and in vitro plants were detected by thin layer chromatography. Flavonoids were easily observed in leaves of plants in both culture conditions, except calluses. High performance liquid chromatography identified isovitexin as the flavonoid present with greater intensity in leaves and stems of greenhouse-grown plants. Other flavonoids were identified in other organs of plants under both culture conditions, with the exception of calluses. Differences in the antioxidant activity between greenhouse plants and in vitro plants were detected, contrary to that found for calluses treated with UV-B when compared with the control. The present study showed the versatility of P. morifolia roots for callus formation and embryogenesis and the possibility of secondary metabolite production in in vitro plants grown under LED illumination. / Tese enviada pela secretaria do curso por e-mail, em 28-03-17.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-03-29T12:19:51Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 873335 bytes, checksum: 4598fa3fe932f9c2ddc440fd2517c66b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-29T12:19:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 873335 bytes, checksum: 4598fa3fe932f9c2ddc440fd2517c66b (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A diversidade de acessos dentro de uma mesma espécie tem sido relatada como uma forma alternativa de procurar respostas fisiológicas e metabólicas que podem ter grandes efeitos na regulação do crescimento e produção de biomassa. Este trabalho teve como objetivo investigar características fisiológicas e metabólicas assim como suas interações com o crescimento e a produção de frutos em 49 acessos brasileiros de pimenta (Capsicum chinense) geneticamente diversos. Estes diferentes acessos foram cultivados simultaneamente e, assim, grande variação genética foi observado para muitas características. Embora a análise de cada variável individualmente permitiu a formação de até sete grupos distintos através do teste Scott-Knott modificado, como observado para altura de planta, usando o conjunto de dados através de análises multivariadas foi possível separar os 49 acessos em apenas três clusters. Interessantemente os grupos formados por estas análises não seguiram a distribuição geográfica de origem dos genótipos. O primeiro cluster contém dois acessos com os menores valores para altura de planta e taxa de crescimento relativo (TCR). Por outro lado, os mesmos acessos tiveram a maior área foliar específica (AFE), altas taxas de fotossíntese e os maiores conteúdos de nitrato (NO 3 ). Os genótipos do segundo cluster demonstraram comportamento oposto para os parâmetros de crescimento e NO 3 , porém apresentaram padrão indefinido para os parâmetros de trocas gasosas e eficiência do uso da água (EUA), apesar de apresentarem baixos valores de AFE. O terceiro cluster compreende os demais acessos com os mais diversos resultados para as características aqui investigadas. Tomados em conjunto, estes resultados reforçam a idéia de que, embora os acessos pertençam a mesma espécie, eles apresentam mecanismos de adaptação diversos sendo, portanto, uma fonte muito interessante de informações para melhoramento de plantas. Além disso, demonstrou-se que o estabelecimento dos frutos está positivamente correlacionado com fotossíntese. No entanto, a fotossíntese por si só não explica as diferenças em relação ao abortamento de frutos. Análises metabólicas revelaram que malato e fumarato apresentam respostas diferentes em Capsicum. Embora fumarato não tenha contribuido individualmente para a separação de grupos, um grande número de correlações significativas foram observadas. Em suma, dados aqui apresentados sugerem fumarato como um importante metabólito possivelmente envolvido na regulação do crescimento e desenvolvimento da parte aérea e dos frutos em C. chinense. Além de estender nossos conhecimentos sobre mecanismos e vias biológicas no gênero Capsicum o trabalho aqui apresentado destaca a importância de se estudar a variação genética como um meio para entender como a espécie se adapta a diferentes ambientes. / Diversity of accessions within the same specie has been reported as an alternative way to search for physiological and metabolic traits that may have large effects on both growth regulation and biomass production. This work aimed to investigate physiological and metabolic traits as well as its interactions with plant growth and fruit production using 49 genetically diverse brazilian pepper accessions of Capsicum chinense. These different accessions were grown together and genetic variation was observed for many traits. Although the analysis of each variable individually allowed the formation of up to seven distinct groups, as observed for plant height, working with the whole data set by multivariate analyzes allowed the separation of the 49 accessions in only three clusters. Interestingly, the groups formed by this analysis did not follow the geographical origin of the genotypes. The first cluster contains two accessions with lower plant height and relative growth rate (RGR). On the other hand, the same accessions had the highest specific leaf area (SLA), high photosynthesis rates and have the highest nitrate (NO 3 ) content. Genotypes in the second cluster demonstrate opposite behavior for growth parameters and NO 3, however they had an undefined pattern for gas exchange parameters and water use efficiency (WUE), despite having low values of SLA. The third cluster comprised the other accessions with the most diverse results for the investigated characteristics. Altogether, these results reinforce the idea that, although the accessions belong to the same species, they have diverse adaptation mechanisms being a highly interesting source of information for plant breeders. In addition, it was demonstrated that fruit set is positively correlated with photosynthesis. However, photosynthesis does not explain alone the differences in accession susceptibility to fruit abortion. Metabolite analysis revealed that malate and fumarate had different responses in Capsicum. Although fumarate did not individually contribute to the accession group separation, a large number of significant correlations was observed. In summary the results obtained suggest fumarate as an important metabolite that might be involved in the regulation of both shoot and fruit growth and development of C. chinense. Apart from extending our knowledge of biological mechanism and pathways within the Capsicum genus the work presented here highlights the importance of studying genetic variation as a mean to understand how a specie adapts to different local environments. / Dissertação enviada pela secretaria do curso por e-mail, em 28-03-17

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-29T13:15:32Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1146273 bytes, checksum: 4c59d7889b107c9a870070465d40075b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-29T13:15:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1146273 bytes, checksum: 4c59d7889b107c9a870070465d40075b (MD5) Previous issue date: 2013-01-30 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Pfaffia glomerata (Amaranthaceae), conhecida como ginseng brasileiro, é uma importante espécie medicinal nativa do Brasil. O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência da ploidia das plantas e das condições de cultivo in vitro e ex vitro no crescimento e produção de metabólitos secundários em P. glomerata. Nesse trabalho foram utilizados explantes diploides e tetraploides induzidos artificialmente por uso de colchicina. Nas condições in vitro foram avaliados os efeitos da poliploidização, da adição de sacarose ao meio de cultura e da concentração atmosférica de CO2 nos parâmetros de crescimento e acúmulo de 20E em P. glomerata. Enquanto nas condições ex vitro analisou- se o crescimento, acúmulo de pigmentos, densidade estomática, teores de 20E e saponinas triterpênicas em função da ploidia da planta, volume de vaso e tratamento com paclobutrazol (PBZ). Todos os parâmetros de crescimento avaliados e o acúmulo de metabólitos secundários foram reprimidos em plantas tetraploides comparadas às diploides em condições de cultivo in vitro e ex vitro. Foram observadas nos indivíduos tetraploides características específicas de poliploidia, como redução da densidade estomática e aumento da relação largura/comprimento foliar. Em condições in vitro, a presença de sacarose no meio de cultura promoveu melhor crescimento, porém inibiu o acúmulo de 20E. Assim, a fotoautotrofia mostra-se mais favorável por apresentar potencial na produção comercial massal de mudas dessa espécie com altos teores de 20E. O enriquecimento de CO2 (1.000 μmol/mol de CO2) também induziu a produção de plantas com maiores biomassa e acúmulo de 20E, favoráveis ao interesse comercial. Após aclimatização, plantas de P. glomerata apresentaram forte indução nos parâmetros de crescimento quando crescidas em vasos de maior volume, enquanto a aplicação de PBZ não interferiu na produção de biomassa e metabólitos secundários. Dessa forma, a utilização de vasos de maior volume é um importante fator na produção em escala comercial de ginseng brasileiro. / Pfaffia glomerata (Amaranthaceae), known as Brazilian ginseng, is an important medicinal species native to Brazil. The objective of this study was to evaluate the influence of the ploidy level and in vitro and ex vitro culture conditions on the growth and secondary metabolite production in P. glomerata. Explants of diploids and tetraploids artificially induced by colchicine explants were used. Under in vitro conditions, we evaluated the effects of polyploidization, supplementation of sucrose to the culture medium and atmospheric CO 2 concentration on growth parameters and 20-hydroxyecdysone (20E) accumulation of P. glomerata nodal explants. Following transfer to ex vitro conditions, growth, pigment content, stomatal density, levels of 20E and saponins were analyzed according to the plant ploidy, vessel volume and treatment with paclobutrazol (PBZ). All growth characteristics and accumulation of secondary metabolites were inhibited in tetraploid background compared with diploids, both under in vitro and ex vitro conditions. Specific characteristics of polyploidy, such as reduced stomatal density and increased width/length ratio of leaves were found in tetraploid individuals. Under in vitro conditions, the presence of sucrose in the culture medium promoted better growth, but inhibited 20E accumulation. Thus, the photoautotrophy seems to be more favorable because shows potencial commercial mass production of seedlings of this species with high levels of 20E. CO2 enrichment also induced plant production with higher biomass and 20E accumulation, favorable for commercial purposes. After acclimatization, P. glomerata showed significant increase in growth parameters when it was grown in higher-volume pots, while the PBZ application did not affect the biomass and secondary metabolite production. Thereby, the use of larger pots is an important factor in commercial-scale production of Brazilian ginseng. / Não foi localizado o cpf do autor. Tese enviada pela secretaria do curso por e-mail, em 28-03-17.