Durante o processo de refino do petróleo é gerado um resíduo denominado de borra oleosa que compreende cerca de 0,34% do volume total processado. Entre os tratamentos possíveis para a borra oleosa estão métodos físicos, químicos e biológicos. O landfarming é uma técnica em que o resíduo oleoso é incorporado ao solo, sob condições controladas, para promover a degradação e imobilização dos contaminantes perigosos presentes pela microbiota do solo. O objetivo geral deste trabalho foi avaliar estratégias de biorremediação como a bioaumentação e bioestimulação em solo de landfarming contaminado com borra oleosa durante 35 dias, em frascos respirométricos no Laboratório de Biorremediação do Departamento de Solos. Foram coletadas amostras de solo de célula de landfarming e de borra oleosa no SICECORS do Pólo Petroquímico de Triunfo. Quatro espécies de bactérias (Stenotrophomonas acidaminiphila, Bacillus megaterium, Bacillus cibi e Bacillus cereus) previamente isoladas por Cerqueira (2011) do solo de landfarming e da borra oleosa foram usadas para formação de um consórcio microbiano na estratégia de bioaumentação e três relações C:N:P (dose 1: 100:0,5:0,125; dose 2: 100:6:1,5 e dose 3: 100:12:3) foram selecionadas para os tratamentos de bioestimulação. Foram usados (NH4)2SO4 como fonte de nitrogênio e KH2PO4 como fonte de fósforo na preparação da solução aquosa de fertilizantes. Os tratamentos de bioaumentação e de bioestimulação (denominados respectivamente de AD1, AD2, AD3, ED1, ED2 e ED3 ) foram usados isoladamente e também em conjunto (denominados AED1, AED2 e AED3 ). Os indicadores avaliados foram: produção de C-CO2, P mineral, N mineral, hidrólise de diacetato de fluoresceína (FDA) e hidrocarbonetos totais do petróleo (HTP). A maior liberação de C-CO2 ocorreu nos tratamentos contendo a dose 2 de fertilizantes, e maior ainda quando o consórcio foi adicionado. As formas nitrogenadas inorgânicas e o fósforo variaram entre os tratamentos, sendo observado os maiores valores nas maiores doses de fertilizantes adicionados. Observou-se que a maior atividade hidrolítica do FDA ocorreu no tratamento AED1. Quando a dose de fertilizante foi aumentada na bioaumentação, a atividade hidrolítica diminuiu. Em relação aos valores de HTP, o tratamento AED1apresentou o maior valor. Nos tratamentos AED1, AED2 e AED3 os valores de HTP foram inversamente proporcional as doses aplicadas, e para os tratamentos ED1, ED2 e ED3, os valores de HTP não foram alterados pelo aumento das doses. Os resultados permitem concluir que a fertilização associada a microrganismos competentes pode ser uma boa estratégia de degradação da borra oleosa. / During the process of petroleum refining an oily sludge residue is generated comprising about 0,34% of the total volume processed. Among the possible treatments for oily sludge are physical, chemical and biological. The landfarming is a technique in which the oily residue is incorporated into the soil under controlled conditions to promote degradation and immobilization of hazardous contaminants present by soil microorganisms. The aim of this study was to evaluate bioremediation strategies such as bioaugmentation and biostimulation in landfarming soil contaminated with oily sludge. We collected soil samples from cell landfarming and oily sludge from Sicecors in the Triunfo Petrochemical Plant Complex. Four bacteria previously isolated by Cerqueira (2011) from landfarming soil and oily sludge were used to form a microbial consortium for the bioaugmentation strategy and three C: N: P ratios (dose 1: 100:0,5:0,125; dose 2: 100:6:1,5 and dose 3: 100:12:3) were selected for biostimulation treatments. The bioaugmentation treatment and biostimulation (named respectively as AD1, AD2, AD3, ED1, ED2 and ED3) were used alone and also in combined (named as AED1, AED2 and AED3). The indicators were: production of CO2-C, P mineral, N mineral, hydrolysis of fluorescein diacetate (FDA), pH and total petroleum hydrocarbons (TPH). The greater release of CO2-C occurred in treatments containing dose 2 of fertilizer, and greater still when the consortium was added. Inorganic forms of nitrogen and phosphorus varied between treatments, the highest values being observed at higher doses of fertilizer added. It was observed that the greater hydrolytic activity over FDA was observed in treatment AED1. When the dose of fertilizer was increased in bioaugmentation, the hydrolytic activity decreased. Regarding the values of TPH, treatment AED1 showed the highest value. In the treatments AED1, AED2 and AED3 TPH values were inversely proportional to the doses applied, and for the treatments ED1, ED2 and ED3 TPH values were not affected by increasing doses. The results allow us to conclude that fertilization associated with microorganisms can be a good strategy for degradation of oily sludge in soil.

O petróleo é um composto orgânico formado basicamente por uma mistura de hidrocarbonetos sendo considerado uma das maiores fontes de energia da atualidade. A crescente demanda por derivados de petróleo tem aumentado a sua exploração. Como consequência, o número de acidentes envolvendo derramamentos de petróleo e seus derivados na natureza tem se elevado, ocasionando sérios problemas ambientais. Desta forma, uma alternativa de mitigar os impactos ambientais resultantes dos vazamentos é por técnicas de biorremediação. Estas técnicas se baseiam na utilização de micro-organismos com potencial de biodegradar compostos, sendo práticas ambientalmente corretas e sustentáveis. Portanto, o objetivo deste trabalho foi selecionar micro-organismos capazes de se desenvolverem em ambientes aquáticos contendo petróleo, bem como caracterizar seu potencial de degradação deste contaminante. Para isso, 19 micro-organismos foram isolados a partir de solo previamente contaminado com petróleo bruto. Para avaliar a capacidade de biodegradação de petróleo ocasionada por cada isolado, estes foram submetidos a um teste prévio com indicador redox TTC, e três bactérias (BPH 1.4, BPH 1.5 e BPH 1.14) e três leveduras (BPH 2.1, BPH 2.2 e BPH 2.3) foram selecionadas para testes futuros. Também foi realizada uma avaliação visual da solubilização dos hidrocarbonetos pelos micro-organismos selecionados em meios com tratamentos de bioaumentação e bioaumentação simultânea a bioestimulação. Visto que os seis micro-organismos se mostraram potenciais degradadores nestas primeiras etapas, os mesmos foram avaliados quanto a produção de biossurfactantes e foi determinada IE24h%>38 e IE24h%>39, na presença e ausência de células microbianas, respectivamente. Os isolados também foram capazes de reduzir a tensão superficial nos meios utilizados. BPH 1.4, BPH 1.5 e BPH 2.2 também produziram biossurfactantes do tipo ramnolipídeos. Adicionalmente, a detecção de metabólitos provenientes da degradação foi mensurada pela determinação do pH dos meios, na qual, principalmente os isolados leveduriformes mostraram capacidade de acidificar os meios. A identificação molecular foi realizada por sequenciamento das regiões conservadas 16S e 26S do rDNA. Por fim, um consórcio microbiano foi selecionado e adicionado em água marinha contendo 2% de petróleo (m/v). Este sistema foi mantido por 40 dias e a biodegradação dos hidrocarbonetos foi quantificada por GC-FID. Os resultados da bioaumentação demonstraram uma redução de 25% nos TPHs após o fim do tratamento. / Oil is an organic compound consisting essentially of a mixture of hydrocarbons and it is considered one of the greatest sources of energy nowadays. The rising demand for petroleum derivative has increased its exploration. Consequently, the number of accidents involving oil spills and oil products has risen in nature, causing serious environmental problems. Thus, an alternative to mitigate the environmental impacts of oil spills is through bioremediation techniques. The bioremediation techniques are based on the use of microorganisms with potential for biodegrade compounds, being environmentally friendly and sustainable techniques. Therefore, the aim of this work was to select microorganisms able of grow in aquatic environments containing oil, as well as characterize potential degradation of these contaminants. For this, 19 microorganisms were isolated from previously contaminated soil with crude oil. In order to evaluate the ability of biodegradation of oil caused by each isolate, they were submitted to a pretest with TTC redox indicator, and three bacteria (BPH 1.4, BPH 1.5 and BPH 1.14) and three yeasts (BPH 2.1, BPH 2.2 and BPH 2.3) were selected for further subsequent tests. Was also performed a visual assessment of the solubilization of hydrocarbons by selected microorganisms in media containing bioaugmentation treatment and biostimulation and bioaugmentation treatments together. Since the six microorganisms showed potential degraders in these early stages, they were evaluated for the production of biosurfactants and was determined IE24h%>38% and IE24h%>39% in the presence and absence of microbial cells, respectively. The isolates were also capable of reducing the surface tension in the media used. BPH 1.4, BPH 1.5 and BPH 2.2 microorganisms were also able to produce biosurfactants of ramnolipids type. Additionally, metabolites detection from possible degradation was assessed by measuring the pH of the medias in which yeast isolates showed mainly acidify the medias. The molecular identification was performed by sequencing of the 16S and 26S conserved regions of ribosomal DNA. Finally, a microbial consortium was selected and added to the seawater containing 2% of oil (m/v). This system was maintained for 40 days and the degradation of the hydrocarbons was measured by GC-FID. The bioaugmentation results demonstrated a reduction of 25% of the TPHs after the end of treatment.

O petróleo é um composto orgânico formado basicamente por uma mistura de hidrocarbonetos sendo considerado uma das maiores fontes de energia da atualidade. A crescente demanda por derivados de petróleo tem aumentado a sua exploração. Como consequência, o número de acidentes envolvendo derramamentos de petróleo e seus derivados na natureza tem se elevado, ocasionando sérios problemas ambientais. Desta forma, uma alternativa de mitigar os impactos ambientais resultantes dos vazamentos é por técnicas de biorremediação. Estas técnicas se baseiam na utilização de micro-organismos com potencial de biodegradar compostos, sendo práticas ambientalmente corretas e sustentáveis. Portanto, o objetivo deste trabalho foi selecionar micro-organismos capazes de se desenvolverem em ambientes aquáticos contendo petróleo, bem como caracterizar seu potencial de degradação deste contaminante. Para isso, 19 micro-organismos foram isolados a partir de solo previamente contaminado com petróleo bruto. Para avaliar a capacidade de biodegradação de petróleo ocasionada por cada isolado, estes foram submetidos a um teste prévio com indicador redox TTC, e três bactérias (BPH 1.4, BPH 1.5 e BPH 1.14) e três leveduras (BPH 2.1, BPH 2.2 e BPH 2.3) foram selecionadas para testes futuros. Também foi realizada uma avaliação visual da solubilização dos hidrocarbonetos pelos micro-organismos selecionados em meios com tratamentos de bioaumentação e bioaumentação simultânea a bioestimulação. Visto que os seis micro-organismos se mostraram potenciais degradadores nestas primeiras etapas, os mesmos foram avaliados quanto a produção de biossurfactantes e foi determinada IE24h%>38 e IE24h%>39, na presença e ausência de células microbianas, respectivamente. Os isolados também foram capazes de reduzir a tensão superficial nos meios utilizados. BPH 1.4, BPH 1.5 e BPH 2.2 também produziram biossurfactantes do tipo ramnolipídeos. Adicionalmente, a detecção de metabólitos provenientes da degradação foi mensurada pela determinação do pH dos meios, na qual, principalmente os isolados leveduriformes mostraram capacidade de acidificar os meios. A identificação molecular foi realizada por sequenciamento das regiões conservadas 16S e 26S do rDNA. Por fim, um consórcio microbiano foi selecionado e adicionado em água marinha contendo 2% de petróleo (m/v). Este sistema foi mantido por 40 dias e a biodegradação dos hidrocarbonetos foi quantificada por GC-FID. Os resultados da bioaumentação demonstraram uma redução de 25% nos TPHs após o fim do tratamento. / Oil is an organic compound consisting essentially of a mixture of hydrocarbons and it is considered one of the greatest sources of energy nowadays. The rising demand for petroleum derivative has increased its exploration. Consequently, the number of accidents involving oil spills and oil products has risen in nature, causing serious environmental problems. Thus, an alternative to mitigate the environmental impacts of oil spills is through bioremediation techniques. The bioremediation techniques are based on the use of microorganisms with potential for biodegrade compounds, being environmentally friendly and sustainable techniques. Therefore, the aim of this work was to select microorganisms able of grow in aquatic environments containing oil, as well as characterize potential degradation of these contaminants. For this, 19 microorganisms were isolated from previously contaminated soil with crude oil. In order to evaluate the ability of biodegradation of oil caused by each isolate, they were submitted to a pretest with TTC redox indicator, and three bacteria (BPH 1.4, BPH 1.5 and BPH 1.14) and three yeasts (BPH 2.1, BPH 2.2 and BPH 2.3) were selected for further subsequent tests. Was also performed a visual assessment of the solubilization of hydrocarbons by selected microorganisms in media containing bioaugmentation treatment and biostimulation and bioaugmentation treatments together. Since the six microorganisms showed potential degraders in these early stages, they were evaluated for the production of biosurfactants and was determined IE24h%>38% and IE24h%>39% in the presence and absence of microbial cells, respectively. The isolates were also capable of reducing the surface tension in the media used. BPH 1.4, BPH 1.5 and BPH 2.2 microorganisms were also able to produce biosurfactants of ramnolipids type. Additionally, metabolites detection from possible degradation was assessed by measuring the pH of the medias in which yeast isolates showed mainly acidify the medias. The molecular identification was performed by sequencing of the 16S and 26S conserved regions of ribosomal DNA. Finally, a microbial consortium was selected and added to the seawater containing 2% of oil (m/v). This system was maintained for 40 days and the degradation of the hydrocarbons was measured by GC-FID. The bioaugmentation results demonstrated a reduction of 25% of the TPHs after the end of treatment.

Durante o processo de refino do petróleo é gerado um resíduo denominado de borra oleosa que compreende cerca de 0,34% do volume total processado. Entre os tratamentos possíveis para a borra oleosa estão métodos físicos, químicos e biológicos. O landfarming é uma técnica em que o resíduo oleoso é incorporado ao solo, sob condições controladas, para promover a degradação e imobilização dos contaminantes perigosos presentes pela microbiota do solo. O objetivo geral deste trabalho foi avaliar estratégias de biorremediação como a bioaumentação e bioestimulação em solo de landfarming contaminado com borra oleosa durante 35 dias, em frascos respirométricos no Laboratório de Biorremediação do Departamento de Solos. Foram coletadas amostras de solo de célula de landfarming e de borra oleosa no SICECORS do Pólo Petroquímico de Triunfo. Quatro espécies de bactérias (Stenotrophomonas acidaminiphila, Bacillus megaterium, Bacillus cibi e Bacillus cereus) previamente isoladas por Cerqueira (2011) do solo de landfarming e da borra oleosa foram usadas para formação de um consórcio microbiano na estratégia de bioaumentação e três relações C:N:P (dose 1: 100:0,5:0,125; dose 2: 100:6:1,5 e dose 3: 100:12:3) foram selecionadas para os tratamentos de bioestimulação. Foram usados (NH4)2SO4 como fonte de nitrogênio e KH2PO4 como fonte de fósforo na preparação da solução aquosa de fertilizantes. Os tratamentos de bioaumentação e de bioestimulação (denominados respectivamente de AD1, AD2, AD3, ED1, ED2 e ED3 ) foram usados isoladamente e também em conjunto (denominados AED1, AED2 e AED3 ). Os indicadores avaliados foram: produção de C-CO2, P mineral, N mineral, hidrólise de diacetato de fluoresceína (FDA) e hidrocarbonetos totais do petróleo (HTP). A maior liberação de C-CO2 ocorreu nos tratamentos contendo a dose 2 de fertilizantes, e maior ainda quando o consórcio foi adicionado. As formas nitrogenadas inorgânicas e o fósforo variaram entre os tratamentos, sendo observado os maiores valores nas maiores doses de fertilizantes adicionados. Observou-se que a maior atividade hidrolítica do FDA ocorreu no tratamento AED1. Quando a dose de fertilizante foi aumentada na bioaumentação, a atividade hidrolítica diminuiu. Em relação aos valores de HTP, o tratamento AED1apresentou o maior valor. Nos tratamentos AED1, AED2 e AED3 os valores de HTP foram inversamente proporcional as doses aplicadas, e para os tratamentos ED1, ED2 e ED3, os valores de HTP não foram alterados pelo aumento das doses. Os resultados permitem concluir que a fertilização associada a microrganismos competentes pode ser uma boa estratégia de degradação da borra oleosa. / During the process of petroleum refining an oily sludge residue is generated comprising about 0,34% of the total volume processed. Among the possible treatments for oily sludge are physical, chemical and biological. The landfarming is a technique in which the oily residue is incorporated into the soil under controlled conditions to promote degradation and immobilization of hazardous contaminants present by soil microorganisms. The aim of this study was to evaluate bioremediation strategies such as bioaugmentation and biostimulation in landfarming soil contaminated with oily sludge. We collected soil samples from cell landfarming and oily sludge from Sicecors in the Triunfo Petrochemical Plant Complex. Four bacteria previously isolated by Cerqueira (2011) from landfarming soil and oily sludge were used to form a microbial consortium for the bioaugmentation strategy and three C: N: P ratios (dose 1: 100:0,5:0,125; dose 2: 100:6:1,5 and dose 3: 100:12:3) were selected for biostimulation treatments. The bioaugmentation treatment and biostimulation (named respectively as AD1, AD2, AD3, ED1, ED2 and ED3) were used alone and also in combined (named as AED1, AED2 and AED3). The indicators were: production of CO2-C, P mineral, N mineral, hydrolysis of fluorescein diacetate (FDA), pH and total petroleum hydrocarbons (TPH). The greater release of CO2-C occurred in treatments containing dose 2 of fertilizer, and greater still when the consortium was added. Inorganic forms of nitrogen and phosphorus varied between treatments, the highest values being observed at higher doses of fertilizer added. It was observed that the greater hydrolytic activity over FDA was observed in treatment AED1. When the dose of fertilizer was increased in bioaugmentation, the hydrolytic activity decreased. Regarding the values of TPH, treatment AED1 showed the highest value. In the treatments AED1, AED2 and AED3 TPH values were inversely proportional to the doses applied, and for the treatments ED1, ED2 and ED3 TPH values were not affected by increasing doses. The results allow us to conclude that fertilization associated with microorganisms can be a good strategy for degradation of oily sludge in soil.

Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-04-10T14:29:26Z No. of bitstreams: 2 TESE Danilo Mamede da Silva Santos.pdf: 1499667 bytes, checksum: b2dfd4e39962c1d31e016167242057dc (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-10T14:29:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Danilo Mamede da Silva Santos.pdf: 1499667 bytes, checksum: b2dfd4e39962c1d31e016167242057dc (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-08-09 / FACEPE; CAPES; CNPq / Acidentes causados por petróleo e derivados representam um problema devido a sua persistência e difícil assimilação no meio ambiente. Para que ocorra a biodegradação do produto oleoso, é necessário que haja a interação das gotas de óleo com os microrganismos, podendo ser mediada por biossurfactantes. Os biossurfactantes do tipo ramnolipídeo são constituídos por uma ou duas moléculas de raminose ligada a uma ou duas moléculas de -hidrozidecanóico sendo produzidos principalmente por Pseudomonas aeruginosa. Assim, o objetivo deste trabalho foi analisar o potencial de biodegradação do naftaleno e do catecol, por bactérias isoladas da areia da praia de Suape, e avaliar a produção simultânea do biossurfactante ramnolipídeo e o polímero polihidroxialcanoato, utilizando estirpes de Pseudomonas aeruginosa, isoladas de poços de petróleo do Canto do Amaro-RN. Foram realizados o isolamento, seleção e identificação de microrganismos endógenos da areia da praia de Suape; posteriormente foram realizadosensaios de produção e identificação do biossurfactante ramnolipídeo com substrato hidrofílico (glicerol); e ensaios de microscopia eletrônica de varredura transmissão para detecção de polihidroxialcanoatos (PHA) e ensaios de ecotoxicidade. Durante todos os ensaios foram realizadas medições de: pH, crescimento microbiano, produção de ramnolipídeo através da determinação da concentração de raminose e análise cromatográfica por LCMS-IT-TOF. A análise dos resultados evidencia que a produção do biossurfactante ramnolipídico, para as linhagens bacterianas estudadas, nem sempre está associada ao crescimento celular. O glicerol proveniente da refinaria do biodiesel se mostrou promissor para a produção de metabólitos tensoativos como os ramnolipídeos, sendo a linhagem DAUFPE-563 a que melhor que produziu, 3,27 g/L de raminose com 120 horas de fermentação. As bactérias isoladas da praia de Suape não apresentam potencial genético para a degradação de hidrocarbonetos poliaromáticos. Este trabalho permitiu fortalecer os conhecimentos em relação à petroderivados, quanto aos principais constituintes que conferem toxicidade e persistência no ambiente, e destacar os biossurfactantes produzidos através de um resíduo, como um recurso para minimizar danos ao meio ambiente.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:07:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo918_1.pdf: 580682 bytes, checksum: b12f10fa83b5ebe63b7d20c267f8d8cd (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / O querosene é um produto derivado da destilação do petróleo, formado por uma mistura de hidrocarbonetos parafínicos e naftênicos. O presente trabalho objetivou avaliar o potencial de Aspergillus tamarii (UFPEDA 870), Curvularia lunata (UFPEDA 885), Penicillium aurantiogriseum (UFPEDA 884), P. corilophylum (UFPEDA 886)e P. griseofulvum (UFPEDA 880), isolados de uma lagoa poluída na região portuária de Suape, Pernambuco, em degradar o querosene. Inicialmente foi feito um ensaio primário de degradação utilizando o indicador redox 2,6 diclorofenol indofenol. Em seguida os fungos foram adaptados em concentrações crescentes de querosene (1% a 30%) e os produtos da degradação foram analisados por fitotoxicidade. Os fungos que se destacaram foram submetidos ao ensaio de bioestímulo, onde foram empregados três meios de cultura: Bushnell-Haas: tradicional (BH1) e modificados com relações carbono:nitrogênio de 50:1 (BH2) e de 100:1 (BH3). Nos ensaios preliminares A. tamarii e P.griseofulvum apresentaram menor tempo de mudança do indicador, com 14 horas de contato e ainda promoveram um efeito sinérgico para com as demais linhagens, quando em consórcio. Nos ensaios de adaptação, os mesmos cresceram em até 30% de querosene, enquanto que as demais linhagens não sobreviveram a concentrações superiores a 5% (C. lunata) ou produziram baixos teores de biomassa (P. aurantiogriseum e P. corilophyllum), a partir de 15%. Nos ensaios de fitotoxicidade, os resíduos da biodegradação por A. tamarii e por P. griseofulvum, causaram menor impacto às sementes de Brassica oleracea var. capitata (repolho roxo) até a concentração de 12%, obtendo-se 62,6% e 83,6% para o índice de germinação, respectivamente, embora todas as sementes tenham germinado. Para os resíduos degradados por C. lunata, P. aurantiogriseum e P. corilophyllum, as sementes não cresceram apenas germinaram, indicando toxicidade dos produtos da degradação. Os experimentos de bioestímulo realizados com A. tamarii e P. griseofulvum, mostraram maior degradação dos hidrocarbonetos alifáticos do querosene no meio de BH 1 para A. tamarii, enquanto que para P. griseofulvum a melhor composição de meio foi em BH 3. Os resultados obtidos destacam A. tamarii (UFPEDA 870) e P.griseofulvum (UFPEDA 880) como microrganismos promissores na biorremediação de ambientes impactados por querosene

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:55:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo70_1.pdf: 2336211 bytes, checksum: 04e8d18d2125932575f4bfe785ae964c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os surfactantes ou tensoativos são moléculas anfifílicas que possuem ação superficial devido à presença de grupos hidrofílicos e hidrofóbicos numa mesma molécula apresentando a capacidade de atuar na interface de compostos de diferentes naturezas. O interesse em surfactantes de origem microbiana tem aumentado consideravelmente nos últimos anos, especialmente devido ao seu potencial de aplicação industriais e ambientais. Neste trabalho, foi investigado o potencial de cinco linhagens de Chromobacterium violaceum (UCP 1467, UCP 1489, UCP 1552, ATCC 12472 e UCP 1463), isolados de solo e água, na produção de biossurfactantes em meio de produção constituído por resíduos industriais como substratos alternativos de baixo custo. Os efeitos das concentrações dos componentes do meio de produção foram investigados através do planejamento fatorial completo com todas as linhagens de C. violaceum. A linhagem de C. violaceum UCP (1463) demonstrou melhores resultados referente à máxima produção do biossurfactante, evidenciada pelo alcance da redução da tensão superficial da água de 72 mN/m para 26,7 mN/m, em meio formulado com milhocina (0,3%) e glicerina (0,782%), através de um planejamento experimental do tipo Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) após 72 horas de cultivo. O biossurfactante bruto, obtido pelo método de isolamento através da precipitação com sulfato de amônio, com posterior diálise da amostra, mostrouse mais eficiente devido à reduzida quantidade de impurezas no biopolímero, constatadas pela coloração esbranquiçada do biossurfactante. Este biopolímero extracelular, produzido por esta mesma linhagem, foi caracterizado como aniônico, apresentando um valor da concentração micelar crítica (CMC) de 1,5% e capacidade de emulsificação (E24) de 100% utilizando óleo queimado de motor com atividade emulsificante de 6 U.A.E. Verificou-se a presença dos grupamentos éster e ácido carboxílico no biossurfactante selecionado de C. violaceum UCP (1463), sendo caracterizado como polimérico devido a alta composição em carboidratos, lipídeos e proteínas, além de apresentar efetiva estabilidade em todas as faixas de pHs, estabilidade térmica em todas as temperaturas testadas como também, estabilidade nas concentrações de 8 e 10% de NaCl. O potencial do biossurfactante produzido pela linhagem de C. violaceum UCP (1463), em meio constituído por resíduos industriais, foi comprovado pela eficiência deste biopolímero na remoção de óleo queimado de motor adsorvido em solo arenoso, removendo 86% deste óleo adsorvido, indicando desta forma, seu potencial em aplicações biotecnológicas

Dissertação(mestrado) - Universidade Federal do Rio Grande, Programa de Pós-Graduação em Oceanografia Física, Química e Geológica, Instituto de Oceanografia, 2007. / Submitted by Cristiane Silva (cristiane_gomides@hotmail.com) on 2013-02-18T17:58:25Z No. of bitstreams: 1 2007_maicon_silva.pdf: 2073944 bytes, checksum: af385f9e57b56b200b854bc3856fc5a5 (MD5) / Approved for entry into archive by Bruna Vieira(bruninha_vieira@ibest.com.br) on 2013-07-15T17:13:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_maicon_silva.pdf: 2073944 bytes, checksum: af385f9e57b56b200b854bc3856fc5a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-15T17:13:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_maicon_silva.pdf: 2073944 bytes, checksum: af385f9e57b56b200b854bc3856fc5a5 (MD5) Previous issue date: 2007 / Áreas contaminadas com hidrocarbonetos tem sido um problema cada vez mais constante, uma vez que existe um grande crescimento na produção, distribuição e consumo de petróleo, principalmente nos últimos anos. Desta forma, é cada vez mais importante o conhecimento de técnicas que sejam eficientes na limpeza destas áreas. Com isso, o presente trabalho através da técnica de biorremediação buscou estabelecer qual o melhor tratamento para a remoção de contaminantes de um petróleo leve em solo arenoso. Para tanto, foram realizados dois experimentos (I e II), em que no primeiro se estudou a eficiência de remoção dos contaminantes pela utilização de três tratamentos distintos de bioestimulação (adição de nutrientes (C), adição de biossurfactante (D), adição de nutriente mais biossurfactante (E)), os quais foram comparados a dois controles, um de solo (A) e outro de atenuação natural de petróleo (B). O outro experimento serviu para verificar a eficiência da esterilização no biossurfactante utilizado, sendo utilizados um controle de solo (F), um controle de atenuação natural de petróleo (G), um tratamento com biossurfactante/nutrientes (H) e outro com biossurfactante estéril/nutrientes (I). Ao final de seis meses de estudo verificou-se que os tratamentos C e E apresentaram as melhores taxas de remoção de óleos e graxas (OG), respectivamente, 90,4 e 78%, e os melhores índices de remoção de hidrocarbonetos alifáticos: 96,82 e 98,35% e de HPAs: 83,58 e 72,3% respectivamente. Já em relação ao experimento II, concluiu-se que não houve diferenças quanto ao uso do biossurfactante estéril ou não estéril, recomendando-se no entanto, a utilização do biossurfactante estéril uma vez que desta forma não há a introdução de microorganismos estranhos ao ambiente. / Sites contaminated with hydrocarbons have been a problem more and more constant, a time that exist a great growth in the production, distribution and consumption of oil, mainly in the last years. Of this way the knowledge of techniques efficient in the cleanness of these sites is more and more important. With this, the present work through the bioremediation technique searched to establish which the best treatment for the removal of contaminantes of light oil in sandy ground. For in such a way, two experiments had been carried through (I and II), where in the first one if it studied the efficiency of removal of the contaminantes for the use of three distinct treatments of biostimulation (addition of nutrients (C), biosurfactant addition (D), addition of biosurfactant and nutrient (E)), which the two controls had been compared, one of soil (a) and another one of natural attenuation of oil (B). The other experiment served to verify the efficiency of the used biosurfactant, being used a control of soil (F), a control of natural attenuation of oil (G), a treatment with biosurfactant/nutrients (H) and another with biosurfactant sterile/nutrients (I). To the end of six months of study it can be verified that treatments C and E had presented the best ones resulted for OG, with rates of removal of 90,4 and 78% respectively. How much the Aliphatics and HPAs these had also been the best treatments with rates of removal of 96,82 and 98,35% for aliphatics and 83,58 and 72.3% for HPAs respectively. Already in relation to experiment II, it can be concluded that it doesn’t have differences how much to the use of the sterile or not sterile biosurfactant, however sends regards use to it of the biosurfactant sterile a time that of this form doesn’t have the introduction of strange microorganisms to the environment.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:03:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1727_1.pdf: 824913 bytes, checksum: 00efe919e16ab6f02b4d4b518d72475b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Os manguezais são considerados como um dos ambientes mais susceptíveis a acidentes envolvendo derramamento de petróleo, o que constitui a principal e mais danosa causa de contaminação dos solos e águas, demandando o desenvolvimento de tecnologias que visam solucionar os problemas causados por esse impacto ambiental. Dentre as novas tecnologias, a biorremediação tem surgido como a mais atrativa e menos agressiva ao ambiente, pois utiliza o próprio metabolismo dos microrganismos para eliminar ou reduzir os poluentes presentes na área contaminada. Neste trabalho objetivou-se isolar fungos filamentosos de sedimentos de mangue impactado e selecionar os mais promissores quanto à capacidade de degradação do petróleo. O isolamento foi realizado pela técnica de diluições seriadas utilizando os meios de cultura Ágar Sabouraud e Ágar Martin. As espécies obtidas no isolamento foram submetidas a um teste qualitativo de degradação do petróleo utilizando o indicador redox 2,6- diclorofenol-indofenol (DCPIP). A partir do teste qualitativo foram selecionados 5 isolados: Aspergillus niger, A. terreus, A. oryzae, Penicillium waksmanii e Tallaromyces flavus, para serem submetidos à aclimatação em concentrações crescentes de petróleo (2 a 12%), e em seguida foi realizado um planejamento fatorial para conhecer a influência da agitação, pH, concentração celular e concentração da fonte de nitrogênio (NH4NO3), tendo como variável resposta a biodegradação do petróleo. Foram identificadas 14 espécies pertencentes aos gêneros Aspergillus, Cunninghamella, Curvularia, Penicillium, Tallaromyces e Trichoderma. Todas as espécies testadas promoveram a descoloração do indicador em tempos variados, destacando-se A. oryzae e A. terreus, que apresentaram menor tempo de descoloração, 10 e 15h, respectivamente. De uma maneira geral, observou-se aumento da biomassa e o pH se manteve próximo a neutralidade. Com relação à fitotoxicidade, os produtos metabólicos e o material residual presente no meio com A. oryzae e A. terreus demonstraram os maiores índices de germinação para as sementes de pepino com 65,12% e 55,45%, respectivamente. Com relação aos parâmetros avaliados, apenas a agitação apresentou significância estatística. Os resultados obtidos sugerem A. oryzae como espécie promissora para biorremediação de ambientes impactados por petróleo

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-21T14:52:05Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Diogo P. Castro.pdf: 4963073 bytes, checksum: 8291097db7a4b61e3f71e40b4279c977 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-21T14:52:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Diogo P. Castro.pdf: 4963073 bytes, checksum: 8291097db7a4b61e3f71e40b4279c977 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-21T14:52:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Diogo P. Castro.pdf: 4963073 bytes, checksum: 8291097db7a4b61e3f71e40b4279c977 (MD5) Previous issue date: 2015-11-30 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Bioremediation is the use of microorganisms capable of metabolizing contaminants and converts them into less toxic products. In previous studies, we performed bacteria isolation from contaminated area for oil waste in Amazon. Despite its oil degradation potential, the application of bacteria in contaminated sites may interfere with their ecological balance. This study aimed to promote studies of gene characterization and hydrocarbon degradation potential with a selected bacterial strain and identify and define the proteins involved in degradation process. To achieve this objectives degraded substances have been identified by gas chromatography and proteins involved by proteomics; Genome analysis allowed characterization of genes related to xenobiotics degradation. The strain was identified as Pseudomonas putida S16. 51 substances were detected by gas chromatography, of these, 23 were completely degraded, including PAH containing naphthalene (100%), anthracene (11.49%) and phenanthrene (7.41%). We identified 89 genes related to xenobiotic degradation in P. putida S16 AM genome, genes capable of degrading naphthalene, anthracene and phenanthrene (nah, phn, fdx, catA), cytochrome production and chemotaxis. In proteome analysis, proteins were expressed oxidation-reduction, metabolic processes, polyamines, aldehyde dehydrogenase, carbon storage, chemotaxis and amino acid synthesis. 355 proteins were identified with redundancy expressed during 7h contact to P. putida S16 AM (I4) with petroleum, and 268 during 75h contact; For glycerol, 467 were identified in 7h interaction, and 228 in 75h contact. The presence of proteins related to metabolism and oxidationreduction when the strain under study was in contact to the petroleum suggest the use of this as a carbon source for bacterial metabolism. These studies are important because of identification of genes and proteins with potential to become practical application of biotechnology products. / A biorremediação é a utilização de microrganismos capazes de metabolizar contaminantes e transforma-los em produtos menos tóxicos. Em estudos anteriores, foi realizado o isolamento de bactérias provenientes de área contaminada por resíduos de petróleo na Amazônia. Apesar de possuírem o potencial de degradação de petróleo, a aplicação de bactérias em ambientes contaminados pode interferir em seu equilíbrio ecológico. Este estudo propôs-se a seleção de uma linhagem bacteriana para promover estudos de caracterização gênica, identificação do potencial de degradação de hidrocarbonetos e definição das proteínas envolvidas no processo de degradação. Para alcançar os objetivos, foram identificadas substâncias degradadas por cromatografia gasosa e proteínas envolvidas por proteômica; A análise do genoma permitiu a caracterização dos genes relacionados a degradação de compostos xenobióticos através da revisão da literatura. A cepa foi identificada como Pseudomonas putida S16. Foram detectadas 51 substâncias por cromatografia gasosa, destas, 23 foram completamente degradadas, incluindo HPAs contendo naftaleno (100%), antraceno (11,49%) e fenantreno (7,41%). Foram identificados 89 genes relacionados a degradação de xenobíoticos no genoma da P. putida S16 AM, genes capazes de degradar naftaleno, antraceno e fenantreno (nah, phn, fdx, catA), produção de citocromo e quimiotaxia. Na análise proteômica, foram expressas proteínas de óxido-redução, processos metabólicos, poliaminas, aldeído desidrogenase, armazenamento de carbono, quimiotaxia e síntese de aminoácidos. Foram identificadas 355 proteínas com redundância expressas durante o contato de 7h da P. putida S16 AM (I4) com o petróleo, e 268 no contato de 75h; Para o glicerol, foram identificadas 467 na interação de 7h, e 228 no contato de 75h. A presença de proteínas relacionadas ao metabolismo e óxidoredução quando a cepa em estudo esteve em contato com o petróleo evidenciam a utilização deste como fonte de carbono para o metabolismo bacteriano. Estes estudos são importantes devido à identificação de genes e proteínas que possuem o potencial de se tornarem produtos biotecnológicos de aplicação prática.