Submitted by CAMILA RIBEIRO FERLIN null (camilarferlin@gmail.com) on 2016-07-28T00:21:05Z No. of bitstreams: 1 Mestrado em Ortodontia-Camila Ribeiro Ferlin.pdf: 1881838 bytes, checksum: 8874aacd95ef8cd8c122f5acebf6e247 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-07-28T14:44:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ferlin_cr_me_araca.pdf: 1881838 bytes, checksum: 8874aacd95ef8cd8c122f5acebf6e247 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-28T14:44:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ferlin_cr_me_araca.pdf: 1881838 bytes, checksum: 8874aacd95ef8cd8c122f5acebf6e247 (MD5) Previous issue date: 2016-06-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivo: Avaliar a quantidade de deslocamento dentário e realizar as análises histomorfométricas da remodelação óssea (RO) e reabsorção radicular (RR), após a aplicação de forças contínuas sobre molares de ratos. Materiais e métodos: 70 ratos Wistar machos, divididos em 7 grupos: grupo controle (GC), grupo movimentação 1, 3, 5, 7, 14 e 21 dias (GM1, GM3, GM5, GM7, GM14, GM21) submetidos à movimentação dentária induzida (MDI) por meio de uma mola de níquel-titânio de secção fechada, 50 cN de magnitude, instalada no primeiro molar superior direito e incisivos superiores. As lâminas foram coradas pelo método de Hematoxilina e Eosina, seguido das análises histomorfométricas da movimentação dentária, da RO e da RR. As médias da análise de movimentação dentária foram comparadas por meio do teste Anova – Holm-Sidak com nível de significância de p = 0,05, para a RO, foi realizado o teste Anova, pós-teste Tukey, com nível de significância de p < 0,05 e para RR, optou-se pelo teste não paramétrico de Kruskal-Wallis, com nível de significância de 1%. Resultados: Verificou-se a ocorrência de diferenças estatisticamente significantes em todos os grupos movimentados em relação ao GC. A quantidade de movimentação dentária observada no GM1 foi menor do que nos grupos GM7, GM14 e GM21. No GM3 e no GM5 a movimentação foi menor que no GM14 e GM21. Em relação à RO, o quadrante 3 (área médio-cervical de tensão de compressão), apresentou diferença estatística significante nos grupos GM3 e GM5 em relação ao GC, com maior possibilidade de reabsorção óssea. Em relação às RR, foram detectadas diferenças significantes no terço cervical, do GM21 para os grupos GC e GM1, e no terço médio, dos grupos GM14 e GM21 em relação aos grupos GC, GM1 e GM3. Conclusão: A quantidade de movimentação dentária está relacionada com o tempo de atuação da força, a RO ocorreu com maior possibilidade de reabsorção óssea nos grupos GM3 e GM5 na área de tensão de compressão no terço cervical e as RR estiveram presentes com predomínio nos tempos tardios. / Objective: To evaluate the amount of dental displacement and histomorphometric analysis of bone remodeling (BR) and root resorption (RR), after an application of continuous forces on rat molars. Materials and Methods: 70 male Wistar rats were divided into 7 groups: control group (CG), movement group 1, 3, 5, 7, 14 and 21 days (MG1, MG3, MG5, MG7, MG14, MG21) submitted the induced tooth movement (ITM) by means of a nickel-titanium spring section closed, 50 cN of magnitude, was installed in the upper right first molar and upper incisors. The blades were stained by hematoxylin and eosin method, followed by the histomorphometric analysis of tooth movement, of BR and of RR. The averages of tooth movement analysis were compared by means of test ANOVA - Holm-Sidak with significance level of p = 0.05, for the BR, was performed the test ANOVA, Tukey post-test, with significance level of p <0.05 and RR, opted for the non-parametric test Kruskal-Wallis, with a significance level of 1%. Results: It was found the occurrence of statistically significant differences in all groups moved than the CG. The amount of tooth movement observed in MG1 was lower than those observed in groups MG7, MG14 and MG21. In MG3 and MG5 the tooth movement was less than in MG14 and MG21. About BR, the quadrant 3 (middle-cervical area compressive stress), it showed a statistically significant difference in MG3 and MG5 groups compared to the CG, with a greater chance of bone resorption. About RR, significant differences were detected in the cervical third, the MG21 for the CG and MG1, and the middle third, the groups MG14 and MG21 for groups CG, MG1 and MG3. Conclusion: The amount of tooth movement is related to the time of actuation force; the BR occurred with a greater chance of bone resorption in MG3 and MG5 groups in the compressive stress area in the cervical third and the RR were present with predominance in later times.

Orientador: Rosemary Adriana Chiérici Marcantonio / Resumo: Este estudo avaliou a influência da utilização do extrato de óleo insaponificável de abacate e soja (ASU) na osseointegração de implantes em animais saudáveis e com artrite. Foram utilizados implantes de titânio com 4 mm de comprimento x 2.2 mm de diâmetro, instalados nas tíbias dos ratos. No estudo 1, trinta ratos foram divididos aleatoriamente em três grupos: ASU1: administração de ASU a partir de 7 dias antes da colocação do implante; ASU2: administração de ASU começando no dia da colocação do implante, e CTL: administração de solução salina. Em todos os animais, um implante de titânio foi colocado em cada uma das tíbias. Todos os animais receberam ASU ou solução salina por sonda gástrica diariamente durante 60 dias até o sacrifício. Osseointegração foi avaliada por análise de densidade óssea radiográfica; biomecânica; histologia descritiva; imuno-histoquímica para BMP­2, TGF­β1, e osteocalcina; e avaliação histomorfométrica de contato osso­implante (BIC) e fração de área mineralizada do osso dentro das roscas do implante (BAFO). ASU1 e ASU2 apresentaram maior expressão de BMP­2 e TGF­β1 em comparação com CTL (P<0,05). Na análise histomorfométrica, os grupos ASU1 e ASU2 apresentaram valores significativamente mais elevados BIC somente na região de osso cortical, quando comparado com o CTL (P <0,05). No estudo 2, 120 animais foram divididos randomicamente em quatro grupos: CTR- Animais saudáveis que ingeriram soro; ASU- Animais saudáveis que ingeriram ASU; ART- Animais com ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated the influence of the administration of avocado/soybean unsaponifiables (ASU) on implant osseointegration in healthy and arthritis animals. Titanium implants were used with 4 mm length x 2.2 mm diameter, installed in the tibiae of rats. In study 1, thirty rats were randomly divided into three groups: ASU1: ASU administration from 7 days prior to implant placement; ASU2: ASU administration beginning on the day of implant placement, and CTL: saline solution administration. In all animals a titanium implant was placed in each of the tibia. All animals received ASU or saline by gavage every day for 60 days until the sacrifice. Osseointegration was evaluated by analysis of radiographic and biomechanical bone density; descriptive histology, immunohistochemistry for BMP2, TGFβ1, and osteocalcin, and histomorphometric evaluation ossoimplante contact (BIC) and mineralized area fraction of the bone into the threads of the implant (BBT). ASU1 ASU2 and showed increased expression of TGF-β1 and BMP-2 compared to CTL (P <0.05). The histomorphometric analysis, ASU1 and ASU2 groups showed significantly higher values BIC only in the cortical bone region, as compared to the CTL (P <0.05). In study 2, 120 animals were randomly divided into four groups: CTR- Healthy animals who consumed saline solution; ASU- Healthy animals that consumed ASU; ART- Animals with arthritis who consumed saline solution; ART/ASU- Animals with arthritis who consumed ASU. The solutions were administ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Circadian rhythm of parathyroid hormone (PTH) is well documented, but its physiological role is not fully understood. In healthy individuals, biochemical markers of bone remodeling follow a similar circadian rhythm to PTH with a nocturnal rise in bone resorption and formation. The loss of PTH diurnal variation was observed not only in primary hyperparathyroidism, but also in patients with postmenopausal osteoporosis. Continuously elevated concentrations of PTH lead to excessive stimulation of bone resorption, whereas intermittent PTH administration has a strong osteoanabolic effect in patients with osteoporosis. It has not been examined whether the skeletal sensitivity to PTH action depends also on the time of its application. The aim of our study was to verify the hypothesis that the application of teriparatide (TPTD, recombinant human PTH [1-34]) at different times of the day in the context of its diurnal variability affects the physiological circadian rhythm of bone remodeling and also the bone mineral density (BMD) after the long-term TPTD treatment. Fourteen women with postmenopausal osteoporosis treated with 20 micrograms of TPTD daily, applied subcutaneously either in the morning or evening, were included in the first study. The concentration of serum C-terminal telopeptide of type I collagen...

Os efeitos da terapia laser de baixa intensidade no controle da dor e na velocidade da movimentaÃÃo ortodÃntica, bem como na regeneraÃÃo Ãssea apÃs disjunÃÃo da maxila, à foco de estudos recentes. Os resultados mostram-se satisfatÃrios e indicam um futuro promissor para esse recurso terapÃutico na Ortodontia, porÃm na literatura sÃo encontradas divergÃncias quanto Ãs dosimetrias, o que torna difÃcil estabelecer um protocolo clÃnico e uma prescriÃÃo ideal para cada caso. Considerando a importÃncia desse tema e a necessidade do conhecimento cientÃfico atual sobre os protocolos estudados e testados na literatura, este trabalho foi dividido em dois capÃtulos: O primeiro à uma revisÃo de literatura, que tem como objetivo analisar os efeitos da terapia laser de baixa intensidade no controle da dor e na movimentaÃÃo ortodÃntica, o outro à um estudo clÃnico dos efeitos da terapia laser de baixa intensidade na regeneraÃÃo Ãssea da sutura palatina mediana apÃs disjunÃÃo rÃpida da maxila. Para a revisÃo de literatura, foi realizada uma pesquisa na base de dados MEDLINE (1975 â 2014) com os descritores terapia laser de baixa intensidade, dor, movimentaÃÃo e ortodontia. Foram identificados 65 artigos, dos quais foram selecionados dez, segundo os critÃrios de inclusÃo: artigos de estudos clÃnicos em humanos, que usaram para a terapia laser GaAlAs, e que apresentavam metodologia claramente descrita. Para o estudo clÃnico, foram selecionados 14 pacientes com idade entre oito e quatorze anos com deficiÃncia transversa da maxila. Os pacientes foram submetidos à disjunÃÃo rÃpida da maxila com aparelho disjuntor de Hyrax, que foi ativado com o seguinte protocolo: uma volta completa apÃs instalaÃÃo, seguida de duas ativaÃÃes diÃrias atà ser obtida a sobrecorreÃÃo. Posteriormente, por meio de sorteio, os pacientes foram divididos em dois grupos - experimental (n=10) e controle (n=4). O grupo experimental foi submetido a 12 sessÃes de laser de baixa intensidade do tipo GaAlAs, com potÃncia de 70mW e comprimento de onda na faixa do infravermelho (780 nm). As sessÃes foram realizadas duas vezes por semana no primeiro mÃs e uma vez por semana no segundo mÃs. A dose foi aplicada por dez segundos em quatro pontos equidistantes ao longo da sutura palatina mediana. Duas imagens tomogrÃficas foram realizadas, em ambos os grupos, sendo a primeira (T0) logo apÃs a disjunÃÃo e a segunda (T1) apÃs quatro meses de controle. A regeneraÃÃo Ãssea da sutura palatina mediana foi avaliada por meio da mediÃÃo da densidade Ãptica das imagens tomogrÃficas, usando o programa InVivo Dental 5.0, comparando T0 e T1 intragrupo, assim como comparando o grupo-controle com o experimental, com base no teste T de Student (&#945;=0,05%). Foi observada diferenÃa estatisticamente significante entre as densidades Ãpticas das tomografias T0 e T1 no grupo experimental (P=0,00), enquanto no grupo-controle essa diferenÃa nÃo foi significante (P=0,20). Quando os grupos foram comparados, maior densidade Ãptica foi observada no grupo experimental (p=0,05). Os resultados deste trabalho demonstraram que a irradiaÃÃo laser de baixa intensidade (GaAlAs) pode ser usada como coadjuvante no tratamento ortodÃntico, diminuindo a dor apÃs a instalaÃÃo de artifÃcios ortodÃnticos, acelerando a movimentaÃÃo dentÃria e a regeneraÃÃo Ãssea da sutura palatina mediana, apÃs disjunÃÃo maxilar. Mais estudos, porÃm, sÃo necessÃrios para aprimorar os parÃmetros de tratamento.

A diabetes mellitus (DM) é um grupo de doenças metabólicas caracterizadas por hiperglicemia resultante do déficit na secreção e/ou ações de insulina. Dentre as muitas complicações da diabetes incluem a osteopenia diabética, que causa osteoporose e aumento do risco de fraturas ósseas. A patofisiologia da baixa resistência óssea associada a DM é considerada multifatorial, podendo ser decorrente da deficiência de insulina, resistência à insulina, insuficiência de osteoblastos, deficiência de vitamina D, formação e acúmulo dos produtos finais da glicação avançada e complicações microvasculares. Por isso, existe um interesse crescente no estudo da diabetes associada a outras alterações metabólicas e o efeito das drogas antidiabéticas, de forma a reverter os efeitos maléficos. O objetivo desse estudo foi avaliar a influência das drogas antidiabéticas na movimentação dentária ortodôntica e na densidade/microarquitetura óssea alveolar em ratos diabéticos. Assim, ratos Normoglicêmicos (NG,n=20) e Diabéticos induzidos pela estreptozotocina (DM1,n=60) foram divididos em: TinDM1(n=20) tratados com Insulina, TinmetDM1(n=20) tratados com Insulina+Metformina, e os STDM1(n=20) e STNG(n=20) que não receberam tratamento. Após 14 dias da indução, o 1o molar superior direito recebeu força ortodôntica (50g) em sentido mesial. Nos periodos experimentais de 0, 3, 7 e 14 dias, as maxilas foram coletadas e submetidas às análises microtomográficas para quantificar a movimentação dentária e a densidade óssea e histológica, para avaliar as alterações periodontais ocorridas durante a movimentação. Os dados microtomográficos foram submetidos à ANOVA a dois critérios e teste de Tukey (p<0,05). A indução com estreptozotocina induziu ao quadro de diabetes grave (glicemia de jejum de 325mg/dL) os quais foram acentuados com o tempo no grupo STDM1 (404mg/dL). A utilização de insulina e da associação insulina e metformina reduziram consideravelmente os níveis glicêmicos (127mg/dL). A força de 50g aplicadas no 1o molar promoveu movimentação dentária linear, sendo menor no grupo STNG (116&#x3BC;m) e maior nos diabéticos (173&#x3BC;m). Durante a movimentação a densidade óssea no grupo STNG foi mantida (BV/TV=83%), enquanto nos TinDM1 e TinmetDM1 ocorreu pequena redução (BV/TV=76%). Já nos STDM1 a força produziu grande perda óssea (BV/TV=62%). No grupo STDM1 O quadro histopatológico confirma os efeitos deletérios nas estruturas dentarias e periodontais durante a movimentação dentária, com acentuada perda óssea e processo inflamatório. A redução dos índices glicêmicos com utilização das drogas hipoglicemiantes nos grupos TinDM1 e TinmetDM1 equilibrou o processo de formação e reabsorção óssea no STNG, após os 3 dias da movimentação. Concluímos que, a utilização contínua de insulina ou insulina e metformina nos animais diabéticos diminuem significativamente o quadro de perda óssea alveolar decorrente das forças ortodônticas no estado diabético. / Diabetes mellitus (DM) is a group of metabolic diseases characterized by hyperglycemia resulting in deficits in the secretion and/or insulin action. Among the many complications of diabetes, it includes diabetic osteopenia that causes osteoporosis and increased risk of bone fractures. The pathophysiology associated with low bone strength in DM is considered multifactorial and may be due to insulin deficiency, insulin resistance, osteoblast deficiency, vitamin D deficiency, formation and accumulation of advanced glycation end products and microvascular complications. Therefore, there is a growing interest in the study of diabetes associated with other metabolic abnormalities and the effect of antidiabetic drugs, in order to reverse the deleterious effects. The objective of this study was to evaluate the influence of antidiabetic drugs in orthodontic tooth movement and alveolar bone density/microarchitecture in diabetic rats. Thus, normoglycemic rats (NG, n=20) and streptozotocin-induced diabetic (DM1, n=60) were divided into TinDM1 (n=20) treated by insulin, TinmetDM1 (n=20) treated by Insulin + Metformin and STDM1 (n = 20) and STNG (n = 20) that received no treatment. After 14 days of induction, the M1 received orthodontic force (50g) to move mesially. After 0, 3, 7 and 14 days jaws were collected and subjected to microtomographic images analysis to quantify, tooth movement and bone density and histological analysis to evaluate periodontal changes occurred during the movement. Microtomographic data were submitted to two-way ANOVA and Tukey test (p <0.05). The induction with streptozotocin induced severe diabetes frame (fasting blood glucose 325 mg/dL) which accentuated over the time of the disease in STDM1 group (404mg/dL). The use of insulin and insulin and metformin reduced blood glucose levels to satisfactory values (127mg/dL). The strength of 50g applied on M1 promoted linear tooth movement, being lower in STNG group (116&#x3BC;m) and higher in diabetics (173&#x3BC;m). When handling bone density was maintained at STNG group (BV/TV = 83%), in TinDM1 and TinmetDM1 small reduction occurred (BV/TV = 76%). Already in STDM1 the force produced large bone loss (BV/TV = 62%). Histopathological analysis confirmed the deleterious effects on periodontal and dental structures during tooth movement in STDM1 group, with marked bone loss and inflammatory process. Reducing the glycemic index by using insulin in TinDM1 group and insulin + metformin in TinmetDM1 balanced process of bone formation and resorption after 3 days of mechanical loading. We conclude that the continuous use of insulin or insulin and metformin in diabetic animals diminishesalveolar bone loss resulting from orthodontic forces in the diabetic condition.

Orientador: Pedro Duarte Novaes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T09:21:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Neves_JulianadosSantos_M.pdf: 17773747 bytes, checksum: 861f7b8b208320f769d2c3c3c20302c5 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Nos incisivos de ratos a face do alvéolo relacionada ao esmalte é continuamente reabsorvida do lado interno e neoformada no lado externo. Estudo realizado em nosso laboratório mostrou que em incisivos de ratos contidos por um período de 18 dias, há uma substituição de reabsorção óssea na face do alvéolo relacionada ao esmalte por neoformação óssea, onde osteoclastos foram substituídos por osteoblastos. CSF-1 e RANKL estimulam a proliferação e diferenciação de osteoclastos enquanto a OPG possui potente atividade inibitória da osteoclastogênese. O objetivo deste estudo foi analisar a distribuição e a intensidade do CSF-1, RANKL e OPG nos tecidos periodontais relacionados ao esmalte (PRE), de incisivos inferiores de ratos em erupção normal e após período de 18 dias de contenção, utilizando método imunohistoquímico e associando a análise quantitativa de osteoclastos. Quinze ratos Wistar machos tiveram seu incisivo inferior esquerdo imobilizado por meio de um fio de aço preso ao 1° molar inferior esquerdo por 18 dias. Quinze ratos com o incisivo esquerdo em erupção normal foram utilizados como controle. A taxa de erupção foi medida por meio de uma marca feita na face labial da coroa. No 18º dia de experimento os animais foram sacrificados e a região da crista alveolar do incisivo foi separada. Os incisivos de 12 ratos (6 controles e 6 contidos) foram fixadas e processadas para inclusão em Paraplast e reação imunohistoquímica foi realizada utilizando anticorpos primários anti-CSF-1, OPG e RANKL. A intensidade de marcação do folículo dentário foi quantificada através de medida da densidade óptica, utilizando o ¿software¿ de análise de imagens Leica QWin (Leica imaging systems, Cambridge, UK ) e ambos os grupos foram comparados pelo test t não-pareado. Para verificar a atividade osteoclástica, os incisivos de 18 ratos (9 controles e 9 contidos) foram fixadas e processadas para inclusão em Historesina e foram realizadas a evidenciação da fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP) e a contagem de osteoclastos TRAP positivos presentes em toda a extensão do osso alveolar que circunda o esmalte. A contenção com fio de aço mostrou-se eficiente em imobilizar o incisivo. A diferença na quantidade de osteoclastos entre os grupos foi significante (p<0.001), sendo que no incisivo normofuncional a quantidade destes foi aproximadamente três vezes maior que no contido. Para o CSF-1 e OPG não houve, no folículo dentário, diferença estatisticamente significante na intensidade de marcação entre os grupos (p>0.05). Para RANKL o grupo contido apresentou-se com intensidade de marcação menor do que o normofuncional (p<0.01). As moléculas estudadas estavam presentes no PRE, da região da crista de incisivos inferiores de ratos, em erupção normal e contida, sendo que na condição contida houve uma diminuição na intensidade de RANKL e da quantidade de osteoclastos. Diante desta observação, podemos concluir que alterações nos tecidos que compõem o PRE no incisivo contido, modificam o balanço na relação RANKL/OPG alterando o metabolismo das células que participam da remodelação óssea / Abstract: In the rat incisors the face of the socket related to the enamel is resorpted continually on the inner side and formed on the outer side. A study accomplished at our laboratory showed that in rat incisors immobilized by a period of 18 days, there is a replacement of bone resorption in the face of the socket related to the enamel by bone formation, where osteoclasts were substituted by osteoblasts. CSF-1 and RANKL stimulate the proliferation and osteoclast differentiation while OPG has a potent osteoclastogenesis inhibitory activity. The aim of this study was to analyze the distribution and intensity of CSF-1, RANKL and OPG in periodontal tissues related to the enamel (PRE) of rat lower incisors, in normal eruption and after the period of 18 days of containment, using immunohistochemical technique and associating the quantitative analysis of osteoclasts. Fifteen male Wistar rats had their left lower incisor immobilized by means of a steel wire attached to the first left lower molar for 18 days. Fifteen rats with the left lower incisor in normal eruption were used as control. The eruption rate was measured using landmarks in the labial face of the crown. The animals were killed on day 18th and the region of the alveolar crest of the incisor was split. The incisors of 12 rats (6 control and 6 immobilized) were fixed and processed for embedding in Paraplast and immunohistochemical assay was accomplished using primary antibodies anti-CSF-1, OPG and RANKL. The immunostaining of the dental follicle was quantified by measure of the optical density, using the image analysis software Leica QWin (Leica imaging systems, Cambridge, UK) and both groups were compared by test t. To verify osteoclast activity, the incisors of 18 rats (9 control and 9 immobilized) were fixed and processed for embedding in Historesin and to make the tartrate resistant acid phosphatase (TRAP) evident. Osteoclasts TRAP positive in the whole length of the alveolar bone surrounding the enamel were counted. The incisor immobilization with steel wire was efficient. The difference in the number of osteoclasts between both rat groups was significant (p<0.001). In the normal incisor, the number of osteoclasts was threefold greater than in the immobilized tooth. In the dental follicle, there wasn't significant difference in the immunostaining intensity for CSF-1 and OPG between the groups (p>0.05). The immobilized incisor group showed immunostained intensity smaller than the normal incisor group (p <0.01). The studied molecules were present in PRE, in the region of the alveolar crest of rat lower incisor, in normal and immobilized eruption. There was a decrease in the intensity of RANKL immunostaining and in the number of osteoclasts in the immobilized condition. Hence, we concluded that changes in tissues of PRE, in the immobilized incisor, modify the RANKL/OPG ratio altering the metabolism of cells that participate in the bone remodeling / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental

A movimentação dentária ortodôntica ocorre através de dois processos, nos quais o osso alveolar é reabsorvido nas áreas de pressão, enquanto que novo osso é formado na área de tração. O processo de reabsorção óssea ocorre pela ação de células multinucleadas, os osteoclastos. Os bisfosfonatos constituem um grupo de fármacos com propriedade de inibir a reabsorção óssea, foi utilizado no presente estudo com a finalidade de interferir na remodelação óssea induzida ortodonticamente. Para isso, força contínua de 15 cN foi aplicada aos primeiros molares superiores de ratos machos Wistar de 2 1/2 meses, utilizando uma biomecânica com fios superelásticos. Os animais foram divididos aleatoriamente em 4 grupos: 1) O grupo controle constituído por dezoito ratos, os quais foram injetados solução salina por 7 dias antes da instalação da biomecânica passiva, que permaneceu por 3, 10 e 18 dias; 2) Dezoito animais foram tratados com ALN (dose 2,5 mg/Kg) por 7 dias antes da instalação da biomecânica passiva que permaneceu por 3, 10 e 18 dias; 3) Dezoito animais foram tratados com alendronato com a mesma dose citada acima por 7 dias antes da instalação da biomecânica ativa que permaneceu por 3, 10 e 18 dias; 4) Dezoito animais foram injetados com solução salina 7 dias antes da instalação da biomecânica ativa que permaneceu por 3, 10 e 18 dias. As maxilas foram fixadas com 4% de formaldeído + 0,1% de glutaraldeído, descalcificadas em EDTA a 4,13% e incluídas em parafina ou resina Spurr. Os cortes foram corados com HE para análise morfológica. Alguns cortes foram submetidos à imuno-histoquímica para detecção de RANKL e OPG. Foi utilizado o método TRAP, marcador de osteoclastos e microscopia eletrônica de transmissão para análise ultraestrutural. Alguns espécimes tiveram a cortical óssea vestibular do primeiro molar superior congelada em nitrogênio líquido para análise da expressão de RANKL por Western Blotting. O ALN inibiu a reabsorção óssea e radicular de todos os grupos tratados. As células clásticas apresentaram-se em estado latente. No grupo da movimentação ortodôntica o osso alveolar foi remodelado e com 18 dias a superfície radicular apresentou-se reabsorvida e o TRAP revelou clastos ativos, achados confirmados pela microscopia eletrônica de transmissão. A expressão de RANKL, molécula ativadora de células clásticas, nao foi inibida pela droga. A expressão de OPG foi aumentada nos animais tratados. Os resultados demonstram que o uso de alendronato sódico na movimentação ortodôntica não interfere no recrutamento dos osteoclasto, ele aparentemente inibe sua ativação, o que pode interferir no processo de remodelação óssea e talvez diminua a quantidade de movimentação dentária. / Orthodontic tooth movement occurs through two processes in which the alveolar bone is resorbed in the pressure areas, whereas new bone is formed in the tension area. The bone resorption occurs by multinucleated cell, the osteoclasts. The bisphosphonates are drugs with capability to inhibit clastic activity were used in the present study in order to interfere with the bone remodeling induced orthodontic. For this continuous force of 15 cN was applied to the first molars of Wistar male rats of 2 1/2 months, using a biomechanical with superelastic wire. The animals were randomly divided into 4 groups: 1) The control group consisted of eighteen mice, which received sterile saline solution saline for 7 days prior to installation of passive biomechanics, which remained for 3, 10 and 18 days; 2) Eighteen animals were treated with ALN (dose 2.5 mg / kg) for 7 days prior to installation of the passive biomechanical to remain for 3, 10 and 18 days; 3) Eighteen animals were treated with alendronate with the same dose quoted above for 7 days prior to the biomechanical installation that remains active for 3, 10 and 18 days; 4) Eighteen animals were injected with sterile saline solution 7 days prior to the biomechanical installation that remains active for 3, 10 and 18 days. The maxillae were fixed with 4% formaldehyde + 0.1% glutaraldehyde, decalcified in EDTA 4.13% and embedded in paraffin or Spurr resin. The specimens were morphologically analyzed in HE stained sections. Some stained sections were used for immunolabeling for RANKL and OPG. The osteoclasts were marked by tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) histochemistry. The ultrathin sections were examined in a trasnmission electron micrsocpe. Some specimens were frozen in liquid nitrogen for protein extraction and Western Blotting protein expression analyzes. The ALN inhibited bone resorption and root of all the treated groups. The clastic cells present in a latent state. In the orthodontic movement group alveolar bone was remodeled with 18 days to root surface presented itself reabsorbed and the TRAP revealed clasts assets, findings confirmed by transmission electron microscopy. Expression of RANKL activating molecule clastic cells was not inhibited by the drug. The OPG expression was increased in treated animals. The results demonstrate that the use of alendronate in the orthodontic movement does not interfere with osteoclast recruitment, it apparently inhibits their activation, which can interfere in the bone remodeling process and may reduce the amount of tooth movement.

A osteonecrose dos maxilares associada ao uso dos Bisfosfonatos é uma exposição óssea que persiste por mais de 8 semanas na cavidade oral em pacientes sob tratamento com bisfosfonatos e que não foram submetidos a radioterapia de cabeça e pescoço. Explicar o motivo do desenvolvimento destas lesões ósseas principalmente nos maxilares e desvendar a sua patofisiologia ainda é necessário. Por isso, o reparo ósseo em um modelo animal de osteonecrose dos maxilares associada ao uso de bisfosfonatos em ratos Wistar (Rattus norvegicus, albinus) foi avaliado através de análise microscópica e molecular. A amostra foi composta por 48 ratos machos, com 12 semanas de vida e peso aproximado de 300 gramas, que foram submetidos a administração de Ácido Zoledrônico, 0,6 mg/kg a cada 28 dias com um total de 5 doses. Os animais foram dividos em quatro grupos, cada um composto por 12 animais; 2 grupos de tratamento AZ e AZ-experimental (AZ-exp) e 2 grupos controles CO e CO-experimental (CO-exp) com administração de cloreto de sódio 0,9% no mesmo volume e frequencia do Ácido Zoledrônico. As soluções foram administradas por via intraperitoneal. O grupo AZ-exp e o CO-exp foram submetidos a exodontias dos molares superiores direitos e a realização de defeito ósseo no fêmur esquerdo 45 dias após a primeira aplicação das soluções. A eutanásia dos animais ocorreu após 150 dias do início do experimento. A avaliação histológica foi realizada através de análises qualitativa e quantitativa, verificou a presença de sequestros ósseos, áreas de osteonecrose e áreas de osso total por meio de estudos de microscopia óptica pela coloração Hematoxilina e Eosina. Análise quantitativa da expressão do RNAm de proteínas envolvidas no processo de reparo ósseo pelo método de reação em cadeia da polimerase em tempo real (RealTimePCR) também foi realizada para avaliação dos osteoclastos (RANK, RANKL e OPG), osteoblastos (ALPL e OCN) osteócitos (DMP-1 e PHEX) e vascularização (VEGF). Apenas o grupo com administração de AZ e realização de exodontias apresentou sequestros ósseos e áreas significativamente maiores de osteonecrose em comparação aos animais com exodontia e sem a administração de AZ. Não foram encontradas áreas de osteonecrose na análise do fêmur. A avaliação do osso total apresentou maior quantidade de osso nos animais submetidos a procedimentos cirúrgicos e administração de AZ, porém não houve significância estatística. Na análise molecular, a administração de AZ e a realização das exodontias e do defeito ósseo, provocou alteração na expressão de marcadores para osteoclastos. A administração do AZ associada à realização dos procedimentos cirúrgicos aumentou a expressão de marcadores iniciais da osteoblastogênese e diminuiu a expressão tardia dos osteoblastos. A expressão de marcadores de osteócitos foi menor após a administração de AZ e exodontias na maxila, no entanto, no fêmur, houve aumento na expressão destes marcadores. A realização das exodontias e de defeitos ósseos no fêmur aumentou a expressão de VEGF nos grupos com e sem administração de AZ. Estes resultados evidenciam a interferência do Ácido Zoledrônico no reparo ósseo dos alvéolos e dos defeitos ósseos nos fêmures, causando incidência de osteonecrose na maxila, atraso na remodelação óssea, e ausência de lesões de osteonecrose no fêmur. A presença de lesões de osteonecrose na maxila pode ser consequência do atraso na remodelação óssea, evidenciado pela alteração na expressão de marcadores para osteclastos e osteoblastos, e as mesmas ocasionam a diminuição da expressão de proteínas pelos osteócitos. / Bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaws is a bone exposure persisting for more than 8 weeks in the oral cavity in patients receiving bisphosphonates and who did not undergo radiation therapy for head and neck. Explain the reason for these development bone lesions mainly in the jaws and unveil its pathophysiology is still needed. Therefore, the bone repair in an animal model of Bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaws in Wistar rats (Rattus norvegicus, Albinus) was evaluated by microscopic and molecular analysis. The sample was composed of 48 male rats, with 12 weeks old and weighing approximately of 300 grams, who underwent the administration of zoledronic acid, 0.6 mg / kg every 28 days with a total of 5 doses. The animals were divided into four groups, each consisting of 12 animals; 2 treatment groups AZ and AZ-experimental (AZ-exp) and 2 control groups CO and CO-experimental (CO-exp) with sodium chloride administration 0.9% in the same volume and frequency of zoledronic acid. All solutions were administered intraperitoneally. The AZ-exp group and the CO-exp group underwent extractions rights upper molars and the bone defect was performed in the left femur 45 days after the first application of the solutions. Euthanasia of animals occurred after 150 days from the beginning of the experiment. Histological evaluation was performed through quantitative and qualitative analysis checked the presence of bone sequestration, osteonecrosis area and whole bone areas by means of optical microscopy by hematoxylin-eosin staining. Quantitative analysis of mRNA expression of proteins involved in bone repair by polymerase chain reaction method in real time (RealTimePCR) was also performed: osteoclasts (RANK, RANKL and OPG), osteoblasts (ALPL and OCN) osteocytes (PMD-1 and PHEX) and vascularization (VEGF). Only the group with administration of AZ and performing tooth extractions presented bone sequestration and significantly larger areas of osteonecrosis when compared to animals with extraction and without AZ administration. There were no areas of osteonecrosis of the femoral analysis. The evaluation of the whole bone showed more bone in animals undergoing surgeries and AZ administration but there was no statistical significance. Molecular analysis, AZ administration and the performance of tooth extractions and bone defect changed the expression of markers for osteoclasts. The AZ administration associated with surgical procedures increased the expression of early markers of osteoblastogenesis and decreased the late expression of osteoblasts. The expression of osteocytes markers was lower after AZ administration and maxillary tooth extractions; however, there was an increase in the expression of these markers in the femur. The performance of tooth extractions and bone defects in the femur increased VEGF expression in animals with and without administration of AZ. These results show the interference of zoledronic acid on bone repair of the sockets and bone defects in the femurs, causing incidence of osteonecrosis of the upper jaw, delayed bone remodeling, and no femoral osteonecrosis injuries. The presence of osteonecrosis injuries in the upper jaw can be the consequence of the delay on bone remodeling, evidenced by the change in the markers expression for osteoclasts and osteoblasts, and they cause the decreased in protein expression by osteocytes.

L’action du système nerveux périphérique sympathique sur le métabolisme osseux, via la sécrétion de neurotransmetteurs, comme le VIP, est clairement établie. Réciproquement, les cellules osseuses expriment des molécules possédant des propriétés chémo-attractives (NGF) ou répulsives (Sémaphorine 3a) suggérant que l’os est capable de contrôler sa propre innervation. Afin de mieux comprendre les relations entre système nerveux et cellules osseuses, notre travail s’est déroulé en deux étapes.Dans un premier temps, nous avons montré que la sympathectomie chimique à la guanéthidine monosulfatée, au niveau du périoste mandibulaire, modulait le ratio OPG/RANKL par l’intermédiaire de la voie cholinergique du système nerveux sympathique. Le traitement par du VIP des rats sympathectomisés a permis de rétablir le potentiel résorbant du système sympathique et ainsi confirmé le rôle prépondérant du VIP dans la modulation du métabolisme osseux au niveau du périoste mandibulaire. Dans un deuxième temps, nous avons évalué les variations d’expression du NGF et de la Séma3a, en fonction de la disponibilité locale en VIP. La sympathectomie, dans le compartiment ostéogène du périoste mandibulaire, a épuisé les réserves en proNGF et en Sema 3a et provoqué une migration de fibres sensorielles immunoréactives au CGRP où physiologiquement elles sont absentes. Dans compartiment non-ostéogène, la sympathectomie a induit une dégranulation des mastocytes et la libération de βNGF (forme mature) et le développement de fibres CGRP-IR.. Le traitement par le VIP10-28, un antagoniste des récepteurs du VIP, a provoqué des effets similaires à la sympathectomie. In vitro, le VIP n’a pas modifié l’expression relative des ARNm codant pour le NGF et la Séma 3a, augmenté celle de RANKL et diminué celle d’OPG. Le VIP10-28 a permis d’augmenter l’expression d’OPG, et de diminuer celle de Séma3a et de CGRP. L’ensemble de ce travail a permis de montrer que le système sympathique cholinergique, via le VIP, module à la fois le rapport OPG/RANKL et l’expression de NGF et de Sema3a au niveau des ostéoblastes et du périoste mandibulaire et renforce l’hypothèse d’une communication bidirectionnelle entre les cellules nerveuses et osseuses. / The action of the sympathetic nervous system on bone metabolism, via the secretion of neurotransmitters such as VIP, is clearly established. Conversely, bone cells express molecules with chemo-attractive properties (NGF) or -repulsive (Semaphorin3a), suggesting that bone can control its own innervation. To better understand the relationship between the nervous system and the bone cells, our work takes place in two stages. As a first step, we have shown that chemical monosulfate guanethidine sympathectomy, modulates in the mandible periosteum the OPG/RANKL ratio through the cholinergic nervous system. VIP treatment of sympathectomized rats restored to controls the resorption potential of the sympathetic system and thus confirmed the leading role of VIP in the modulation of bone metabolism in this bone envelope. In a second step, we evaluated, the variations in NGF and Sema3a expressions, according to the local availability in VIP. Sympathectomy, exhausted proNGF and Sema 3a stores in the osteogenic compartment of the periosteum and caused its invasion by CGRP immunoreactive sensory fibers, where they are physiologically absent. In the non-osteogenic compartment, sympathectomy induced mast cell degranulation and release of βNGF (the mature form) and sprouting of CGRP-IR fibers Treatment with VIP10-28, a VIP receptors antagonist, had effects similar to sympathectomy. In vitro, VIP did not alter the relative expression of mRNA encoding NGF and Sema 3a, increased RANKL and decreased OPG mRNAs. VIP10-28 increased OPG mRNA expression and decreased that of Sema3a and CGRP.In conclusion, this work showed that the cholinergic sympathetic system, via VIP, modulates the OPG/RANKL ratio and NGF and Sema3a expression in periosteal osteoblasts and strengthens the hypothesis of a bi-directional communication between nerve and bone cells.

Circadian rhythm of parathyroid hormone (PTH) is well documented, but its physiological role is not fully understood. In healthy individuals, biochemical markers of bone remodeling follow a similar circadian rhythm to PTH with a nocturnal rise in bone resorption and formation. The loss of PTH diurnal variation was observed not only in primary hyperparathyroidism, but also in patients with postmenopausal osteoporosis. Continuously elevated concentrations of PTH lead to excessive stimulation of bone resorption, whereas intermittent PTH administration has a strong osteoanabolic effect in patients with osteoporosis. It has not been examined whether the skeletal sensitivity to PTH action depends also on the time of its application. The aim of our study was to verify the hypothesis that the application of teriparatide (TPTD, recombinant human PTH [1-34]) at different times of the day in the context of its diurnal variability affects the physiological circadian rhythm of bone remodeling and also the bone mineral density (BMD) after the long-term TPTD treatment. Fourteen women with postmenopausal osteoporosis treated with 20 micrograms of TPTD daily, applied subcutaneously either in the morning or evening, were included in the first study. The concentration of serum C-terminal telopeptide of type I collagen...