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Nutrição pós-eclosão de frangos de corte / Post-hatch nutrition of broiler chickens

Gomes, Gilson Alexandre 15 March 2007 (has links)
Realizaram-se dois experimentos com o objetivo de avaliar os efeitos da nutrição pós-eclosão em frangos de corte. No primeiro experimento avaliaram-se o efeito do tempo de fornecimento da dieta pré-inicial (DPI) nas características histomorfométricas do duodeno (CHD), em parâmetros de desempenho (PDES), de rendimento de carcaça (RC) até os 49 dias de idade. Foram utilizadas 960 aves distribuídas em delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x4 (2 pesos de pintainhos - até 42 gramas e acima de 45 gramas; 4 tempos de fornecimento da DPI - 0, 1 a 7 dias, 1 a 10 dias e 1 a 14 dias), totalizando 8 tratamentos com 5 repetições de 30 aves cada. No segundo experimento avaliaram-se o tempo para alojamento e o fornecimento de suplementos pós-eclosão (SPO) para pintainhos com diferentes pesos à eclosão, na atividade mitótica de células satélites da musculatura peitoral, na alometria dos órgãos do trato gastrintestinal (TGI), em CHD, em PDES, e RC até os 42 dias de idade. Foram utilizadas 1.280 aves distribuídas em delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x2x2 (2 pesos dos pintainhos à eclosão: até 44g e acima de 48g; 2 SPO: 1 suplemento com 8% PB e 16% carboidratos - SPO 8/16 - e 1 suplemento com 10% PB e 20% de carboidratos - SPO 10/20 - ; 2 períodos de fornecimento dos SPO: 24 e 48h), totalizando 8 tratamentos com 4 repetições de 40 aves cada. Adicionalmente, foram alojadas 160 aves da mesma linhagem, que apresentavam peso médio de 49g à eclosão, e foram submetidas a um período de jejum de 24h, sendo que as mesmas provinham do mesmo lote de matrizes das aves submetidas aos tratamentos supracitados. Os animais de ambos os experimentos foram submetidas a programas alimentares que compreenderam três ou quatro fases (préinicial e/ou inicial; engorda; final), sendo as dietas formuladas a base de milho e farelo de soja. Os dados obtidos foram analisados com auxílio do procedimento GLM do software estatístico SAS, e as médias comparadas pelo teste de Tukey ao nível de 5% de probabilidade. Para o presente estudo, o peso dos pintainhos ao alojamento/eclosão causou efeito significativo no desempenho dos animais, sendo que animais mais pesados apresentaram peso vivo superior, apesar de terem apresentado menores alturas de vilosidade. Observou-se que o fornecimento da DPI por um período de 7 dias, causou efeito benéfico no desempenho dos animais, acarretando, entretanto, numa diminuição no RC das aves. Pintainhos mantidos em jejum por um período de 24h demonstraram um melhor desenvolvimento do TGI no período pós-eclosão, permitindo que estas aves apresentassem crescimento compensatório. O fornecimento de SPO demonstrou ser eficaz em reduzir a perda de peso dos animais no período pré-alojamento, sendo que o oferecimento do SPO 10/20 mostrou ser mais vantajoso, devido ao fato do mesmo ter causado efeitos benéficos nas CHD, e também um aumento no rendimento de filé de peito. Entretanto, deve-se priorizar o fornecimento dos SPO pelo menor período possível, já que os mesmos não são capazes de suprir de maneira adequada às exigências nutricionais das aves recém-eclodidas. / It were performed two experiments with the aim of evaluate the effects of posthatch nutrition of broiler chickens. In the first trial were evaluated the effects of feeding a pre-starter diet (PSD) on duodenal morphology (DM), live performance (LP), and carcass yield (CY). Nine hundred and sixty day-old male Cobb-500 broiler, with two different weights at housing (until 42 g and more than 45 g) were placed in 32 floor pens, and then submitted to four different periods of feeding a PSD (0, 1 to 7 days, 1 to 10 days and 1 to 14 days), totalizing 8 treatments with 4 replications of 30 birds each. In the second trial were evaluated the effects of feeding different hatchling supplements (HS) for different periods on breast muscle satellite cell mitotic activity (SCMA), alometric growth of digestive organs, DM, LP, and CY of broiler chickens up to 42 days. One thousand and two hundred and eighty day-old male Cobb-500 broiler were used on a 2x2x2 factorial study (two different weights at hatch :until 44 g and more than 49 g; two HS: 8% of crude protein and 16% of carbohydrates - HS 8/16 - or 10% of crude protein and 20% of carbohydrates - HS 10/20; two feeding periods of HS: 24 or 48h), totalizing 8 treatments with 4 replications of 40 birds each. Additionally, it were housed 160 male chicks from the same broiler breeder flock, of 49g of mean weight at hatch, which were submitted to 24h fasting prior to placement. The animals of both experiments were fed with basal corn-soy pre-starter/starter/grower/finisher diets. All data were analyzed using SAS\'s GLM procedures, and significance were measured at p<0,05 using Tukey\'s multiple range test to determine differences between treatments means. Overall, heavier birds at hatch/housing caused significative effect on LP, presenting decreased villus height, and an increased body weight. The birds that were fed with the PSD up to 7 days presented an increased LP, and a smaller CY. Chicks which were fasted for 24h presented a better development of DM on the post-hatch period, showing a compensatory growth. Both HS were efficient on minimize the chick\'s weight loss prior to placement, however birds that were fed with 10/20 HS showed satisfactory effects not only on DM but also an increased breast meat yield. However, the period of feeding of HS should be as small as possible, because this supplement is not capable to supply efficiently the nutritional requirements of newly hatched chicks.
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Análise da expressão de metaloproteinases da matriz em células satélites gliais do gânglio trigeminal de ratos portadores de inflamação da articulação temporomandibular persistente submetidos a laserterapia de baixa intensidade / Analysis of matrix metalloproteinase expression in glial cells satellites of the trigeminal ganglia of rats with persistent inflammation of the temporomandibular joint subjected to low intensity laser therapy

Amanda de Carvalho Desiderá 14 April 2016 (has links)
A dor é uma das principais sintomatologias capazes de levar indivíduos a buscar tratamento médico-odontológico. Na odontologia estima-se que cerca de 40 a 75% da população seja portadora de dor de origem orofacial e tenha pelo menos um sinal ou sintoma de disfunção temporomandibular (DTM). A DTM corresponde a um quadro patológico de caráter multifatorial que acomete a articulação temporomandibular (ATM) e os músculos mastigatórios, ocasionando dores na região orofacial bom como alterações na realização de movimentos bucais. O principal sinal desta enfermidade é a inflamação articular, a qual gera dor nas estruturas relacionadas. A inflamação, por sua vez, leva a liberação de mediadores tais como, substância P, peptídeo relacionada ao gene da calcitonina (CGRP), além de fator de necrose tumoral a (TNF-&alpha;) e interleucina 1&beta; (IL-1&beta;). Estes mediadores sensibilizam as terminações nervosas livres e a informação nociceptiva caminha para a primeira estação sináptica, o gânglio trigeminal. A inflamação quando persistente promove a expressão de metaloproteinases da matriz (MMP), cuja ação modifica a matriz extracelular podendo, então, modular vias neuronais de percepção. Células satélites gliais (CSGs) são células envolvidas no suporte microambiente neuronal e, possivelmente, células que atuariam na modulação de vias de percepção nociceptiva. Conhecendo mais profundamente os mecanismos de modulação da dor, são buscadas terapêuticas não invasivas eficientes para atenuar a sintomatologia dolorosa advinda da DTM. A laserterapia de baixa intensidade (LLLT) mostra-se como um tratamento eficiente, porém seu efeito dose-dependente gera resultados ambíguos. Nesse contexto o presente trabalho teve como objetivos verificar os biomarcadores inflamatórios presentes no fluído sinovial em ratos portadores de inflamação persistente da ATM, tratados ou não com LLLT. Foram utilizados ratos Wistar (200-240g, n=440 - CEUA 2013.1.1111.58.7), os quais receberam administração de CFA (Adjuvante Completo de Freund) ou salina 0,9% (SAL) intraarticular e que foram submetidos (LLLT) ou não a aplicação de laser na região temporomandibular no primeiro dia, 1 hora após a indução da inflamação,, e nos dias 3, 5, 7 e 10 após indução da inflamação. Resultados obtidos neste trabalho mostram que a LLLT reduz as células polimorfonucleares presentes na cápsula articular das ATM, e, também, de espécies reativas de oxigênio (redução da atividade de mieloperoxidase - MPO). Ainda, verificou-se a redução da expressão de MMP-2 e MMP-9 no líquido sinovial de ratos com inflamação persistente induzida pela administração de CFA intraarticular. Citocinas pró-inflamatórias (por exemplo: IL-1&alpha;, IL-1&beta;, IL-6, IL-12p70, IFN-&upsih;, GM-CSF e TNF-&alpha;.) analisadas do líquido sinovial mostraram aumento significativo em sua expressão quando da presença de inflamação, a LLLT reduziu a expressão de dessas citocinas. No entanto, a fotoestimulação em alguns momentos na ausência de inflamação estimulou a expressão das citocinas IL-2, IL-5, IL-12p70, GM-CSF. Além disso, a terapia fotodinâmica aumentou expressão das citocinas anti-inflamatórias IL-4, IL-10 e IL-13 na presença de inflamação. A análise da imunofluorescência para marcação de MMP-2 e MMP-9 co-localizadas para células suporte mostrou que a expressão mais significativa ocorreu em neurônios, e resultados apontam que a LLLT na dose de 60J/cm&sup2; não reduziu a expressão dessas gelatinases no gânglio trigeminal. / Pain is one of the main symptomatology able to lead individuals to seek medical and dental treatment. In dentistry it is estimated that about 40-75% of the population is a carrier of orofacial pain source and has at least one sign or symptom of temporomandibular disorders (TMD). The TMD corresponds to a pathological condition of multifactorial affecting the temporomandibular joint (TMJ) and masticatory muscles, causing pain in the orofacial region well as changes in the performance of mouth movements. The main sign of this disease is joint inflammation, which generates pain related structures. The inflammation leads to release of mediators such as substance P, calcitonin-related peptide gene (CGRP), and tumor necrosis factor (TNF-&alpha;) and interleukin-1&beta; (IL-1&beta;). These mediators sensitize terminal fiber nerves and nociceptive information goes to the first synaptic station, the trigeminal ganglion. The persistent inflammation when promotes the expression of metalloproteinase (MMP), whose operation modifies the extracellular matrix may therefore modulate neuronal pathways perception. Satellite glial cells (CSGs) are involved in neuronal microenvironment support, and possibly cells that act in the modulation of nociceptive pathways perception. Knowing deeper into the mechanisms of pain modulation, are sought noninvasive therapeutic effective to alleviate the painful symptoms arising from the DTM. The low level laser therapy (LLLT) is shown as an effective treatment, but their dose-dependent effect produces ambiguous results. In this context, this study aimed to verify the inflammatory biomarkers present in the synovial fluid in rats with persistent inflammation of the ATM, or not treated with LLLT. Wistar rats (200-240g, n = 440 - CEUA 2013.1.1111.58.7), which received CFA administration (Complete Freund\'s Adjuvant) or 0.9% saline (SAL) intraarticular and underwent (LLLT) or not applying laser temporomandibular region on the first day, 1 hour after inflammation induction, and after days 3, 5, 7 and 10. Our results showed that LLLT reduces polymorphonuclear cells present in the joint capsule of the TMJ, and also of reactive oxygen species (reduction in myeloperoxidase activity - MPO). Still, there was a reduction in expression of MMP-2 and MMP-9 in the synovial fluid of rats with persistent inflammation induced by the intraarticular administration of CFA. Pro-inflammatory cytokines (IL-1&alpha;, IL-1&beta;, IL-6, IL-12p70, IFN-&upsih;, GM-CSF and TNF-&alpha;) analyzed synovial fluid showed a significant increase in its expression induced by TMJ 20 inflammation, and LLLT reduced expression of these cytokines. However, the photostimulation in the absence of inflammation stimulated the expression of cytokines IL-2, IL-5, IL-12p70, GM-CSF. Furthermore, photodynamic therapy increased expression of anti-inflammatory cytokines IL-4, IL-10 and IL-13 in rats with TMJ inflammation. Analysis of immunofluorescence for MMP-2 and MMP-9 co-located to support cells showed that the most significant expression was located in neurons, and results indicate that LLLT at a dose of 60 J/cm&sup2; did not reduce the expression of these gelatinases in the ganglion trigeminal.
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Influência do tempo de irradiação da terapia por ultrassom sobre o tecido conjuntivo no processo de reparação muscular de ratos / Irradiation time effect of ultrasonic therapy on connective tissue related to rat muscular repair process

Baldan, Cristiano Schiavinato 18 January 2013 (has links)
O objetivo deste estudo foi avaliar se a terapia por ultrassom influencia o processo de reparação em ratos submetidos à laceração muscular. A amostra foi composta por 61 ratos Wistar, aleatoriamente distribuídos em 9 grupos: controle, 4LMST (lesão muscular / eutanásia no 4º dia pós-operatório), 7LMST (lesão muscular / eutanásia no 7º dia pós-operatório), 4US2 (lesão muscular / 2 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 4º dia), 7US2 (lesão muscular / 2 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 7º dia), 4US4 (lesão muscular / 4 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 4º dia), 7US4 (lesão muscular / 4 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 7º dia), 4US6 (lesão muscular / 6 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 4º dia) e 7US6 (lesão muscular / 6 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 7º dia). Todos os animais dos grupos 4US2, 7US2, 4US4, 7US4, 4US6 e 7US6 foram irradiados com ultrassom terapêutico de frequência igual a 1 MHz, frequência de repetição de pulso de 100 Hz, pulsos com duração de 2 ms (ciclo de trabalho de 20%), irradiância de 0,5 W/cm2. A emissão das ondas ultrassonoras ocorreu de forma pulsada. A taxa de não uniformidade do feixe (BNR) foi menor que 6,0 e a área de radiação efetiva (ERA) foi de 0,5 cm2. A lesão foi realizada por procedimento operatório, de forma a gerar-se uma secção transversal de 1 cm de comprimento e 3 mm de profundidade no músculo gastrocnêmio dos ratos, a partir de 2,5 cm do osso calcâneo. Foram feitas análises de birrefringência e picrosirius. Os animais do grupo 4US4 apresentaram retardo óptico menor que os demais animais sacrificados no 4º dia pós-operatório. Os animais dos grupos 7US4 e 7US6 apresentaram percentual de colágeno total maior que os demais animais lesionados e tratados e o mesmo percentual do apresentado pelo grupo controle. Assim, concluiu-se que a terapia por ultrassom, com tempo de irradiação de 4 e 6 minutos por sessão, aumenta o percentual de colágeno total intramuscular, no local da lesão, quando mantida por, pelo menos 7 dias e diminui o retardo óptico do colágeno situado no local da lesão, no início do processo de reparação tecidual (até o 4º dia pós-operatório), se irradiado por 4 minutos por sessão / The aim of this study was to analyze the ultrasonic therapy effect on repair process in rats under muscular injury. The sample included 61 Wistar rats, randomly distributed in 9 groups: control, 4LMST (muscular injury / euthanasia in 4th postoperative day), 7LMST (muscular injury / euthanasia in 7th postoperative day), 4US2 (muscular injury / 2 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 4th day), 7US2 (muscular injury / 2 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 7th), 4US4 (muscular injury / 4 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 4th day), 7US4 (muscular injury / 4 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 7th day), 4US6 (muscular injury / 6 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 4th day), 7US6 (muscular injury / 6 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 7th day). All animals from the 4US2, 7US2, 4US4, 7US4, 4US6 and 7US6 groups were irradiated with the same 1 MHz ultrasonic therapeutic frequency, 100Hz pulse repetition frequency, 2 ms pulse duration, 0,5 W/cm2 intensity. The ultrasonic waves emission occurred as pulsed. The beam nonuniformity rate (NBR) was less than 6.0 and the effective radiation area (ERA) was 0,5 cm2. The injury was performed through an operative procedure in order to produce a transverse section of 1 cm length and 3 mm deep in rat gastrocnemius muscles, from 2.5 cm of the calcaneus bone. It was realized birefringence and picrosirius analysis. The animals from the group 4US4 showed an optical delay lower than the 4th postoperative euthanasia animals. The animals from the groups 7US4 and 7US6 showed a total collagen percentual higher than the other injured and treated animals and the same percentual of control animals. Therefore, we concluded the ultrasonic therapy, with irradiation times of 4 and 6 minutes per session, increases the total intramuscular collagen, lesion limited, since a 7-day ultrasonic therapy is followed, which is able to diminish collagen optical delay in the lesion, in early tissue repair process (until 4th postoperative day), if irradiated for 4 minutes per session
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Efeitos epigenéticos sobre a diferenciação in vitro de mioblastos e a expressão dos genes CAST e CAPN1 em bovinos

Oliveira, Alexandre de Lima 20 September 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T20:21:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6302.pdf: 1873865 bytes, checksum: 9751d8d17780f8f77d9e24a60cc67c6f (MD5) Previous issue date: 2013-09-20 / Financiadora de Estudos e Projetos / Epigenetics can be defined as the study of heritable changes in phenotype without the occurrence of changes in nucleotide sequence. Epigenetic modifications occur by the chemical changes in DNA and their associated proteins, such as DNA methylation and histone acetylation, respectively. Meat tenderness is a trait of great interest worldwide, resulting in the development of the beef livestock sector to produce meat of quality. It is worth to highlight the role of the calpain/calpastatin system on tenderness. Calpain encoded by the CAPN1 gene plays a role in proteolysis posmortem by cleaving proteins from muscle fiber. The calpastatin encoded by the CAST gene, on the other hand, acts controlling this cleavage by blocking the action of calpain. In addition, this system is also involved in myoblast differentiation into myotubes during embryogenesis. This system controls the proteolysis of proteins that constitute the cytoskeleton and the plasma membrane. To mimic the myotube formation during embryogenesis and to study the epigenetic control of CAPN1 and CAST gene expression, satellite cell cultures established from bovine muscle were kept undifferentiated (negative control) or were induced to differentiate by incubation with culture medium containing 2% fetal bovine serum in the absence (positive control) or after treatment with epigenetic modifiers like 5-Aza- 2'-deoxycytidine (Aza, DNA demethylating) for 48 h at 10 &#956;M, and Trichostatin A (TSA, histone acetylating) for 24 h at 50 nM. The results showed no differences (p>0.05) in myoblast rate fusion between Aza, TSA and positive control groups, but there were differences (p>0.05) when these groups were compared to the negative control, which showed lower fusion rates. There was no difference (p>0.05) in cell viability among the four groups, showing that Aza and TSA were not cytotoxic at the used concentrations. Concerning the gene expression, the gene CAST was more expressed (p<0,05) in the positive control group than the negative one; but no differences were seen in the expression (p>0,05) between positive control, 5-Aza-2 - deoxycytidine and Trichostatin A groups. For the CAPN1 gene, no difference was seen in the expression (p>0,05) between negative and positive control groups, but the CAPN1 gene was more expressed (p<0,05) in the 5-Aza-2 -deoxycytidine and Trichostatin A treatments relative to the positive control group. When the expression ratio of CAPN1/CAST were compared between treatments, was seen more expression (p<0,05) in the positive control group both comparing with negative control group and with 5-Aza-2 -deoxycytidine and Trichostatin A treatments. We may conclude that the treatments with the epigenetic modifier agents didn't affect both the bovine myoblast differentiation into myotubes and the CAST gene expression, but did in the CAPN1 gene expression and so did in the expression ratio of CAPN1/CAST. / Epigenetics can be defined as the study of heritable changes in phenotype without the occurrence of changes in nucleotide sequence. Epigenetic modifications occur by the chemical changes in DNA and their associated proteins, such as DNA methylation and histone acetylation, respectively. Meat tenderness is a trait of great interest worldwide, resulting in the development of the beef livestock sector to produce meat of quality. It is worth to highlight the role of the calpain/calpastatin system on tenderness. Calpain encoded by the CAPN1 gene plays a role in proteolysis posmortem by cleaving proteins from muscle fiber. The calpastatin encoded by the CAST gene, on the other hand, acts controlling this cleavage by blocking the action of calpain. In addition, this system is also involved in myoblast differentiation into myotubes during embryogenesis. This system controls the proteolysis of proteins that constitute the cytoskeleton and the plasma membrane. To mimic the myotube formation during embryogenesis and to study the epigenetic control of CAPN1 and CAST gene expression, satellite cell cultures established from bovine muscle were kept undifferentiated (negative control) or were induced to differentiate by incubation with culture medium containing 2% fetal bovine serum in the absence (positive control) or after treatment with epigenetic modifiers like 5-Aza- 2'-deoxycytidine (Aza, DNA demethylating) for 48 h at 10 &#956;M, and Trichostatin A (TSA, histone acetylating) for 24 h at 50 nM. The results showed no differences (p>0.05) in myoblast rate fusion between Aza, TSA and positive control groups, but there were differences (p>0.05) when these groups were compared to the negative control, which showed lower fusion rates. There was no difference (p>0.05) in cell viability among the four groups, showing that Aza and TSA were not cytotoxic at the used concentrations. Concerning the gene expression, the gene CAST was more expressed (p<0,05) in the positive control group than the negative one; but no differences were seen in the expression (p>0,05) between positive control, 5-Aza-2 - deoxycytidine and Trichostatin A groups. For the CAPN1 gene, no difference was seen in the expression (p>0,05) between negative and positive control groups, but the CAPN1 gene was more expressed (p<0,05) in the 5-Aza-2 -deoxycytidine and Trichostatin A treatments relative to the positive control group. When the expression ratio of CAPN1/CAST were compared between treatments, was seen more expression (p<0,05) in the positive control group both comparing with negative control group and with 5-Aza-2 -deoxycytidine and Trichostatin A treatments. We may conclude that the treatments with the epigenetic modifier agents didn't affect both the bovine myoblast differentiation into myotubes and the CAST gene expression, but did in the CAPN1 gene expression and so did in the expression ratio of CAPN1/CAST. / Epigenetics can be defined as the study of heritable changes in phenotype without the occurrence of changes in nucleotide sequence. Epigenetic modifications occur by the chemical changes in DNA and their associated proteins, such as DNA methylation and histone acetylation, respectively. Meat tenderness is a trait of great interest worldwide, resulting in the development of the beef livestock sector to produce meat of quality. It is worth to highlight the role of the calpain/calpastatin system on tenderness. Calpain encoded by the CAPN1 gene plays a role in proteolysis posmortem by cleaving proteins from muscle fiber. The calpastatin encoded by the CAST gene, on the other hand, acts controlling this cleavage by blocking the action of calpain. In addition, this system is also involved in myoblast differentiation into myotubes during embryogenesis. This system controls the proteolysis of proteins that constitute the cytoskeleton and the plasma membrane. To mimic the myotube formation during embryogenesis and to study the epigenetic control of CAPN1 and CAST gene expression, satellite cell cultures established from bovine muscle were kept undifferentiated (negative control) or were induced to differentiate by incubation with culture medium containing 2% fetal bovine serum in the absence (positive control) or after treatment with epigenetic modifiers like 5-Aza- 2'-deoxycytidine (Aza, DNA demethylating) for 48 h at 10 &#956;M, and Trichostatin A (TSA, histone acetylating) for 24 h at 50 nM. The results showed no differences (p>0.05) in myoblast rate fusion between Aza, TSA and positive control groups, but there were differences (p>0.05) when these groups were compared to the negative control, which showed lower fusion rates. There was no difference (p>0.05) in cell viability among the four groups, showing that Aza and TSA were not cytotoxic at the used concentrations. Concerning the gene expression, the gene CAST was more expressed (p<0,05) in the positive control group than the negative one; but no differences were seen in the expression (p>0,05) between positive control, 5-Aza-2 - deoxycytidine and Trichostatin A groups. For the CAPN1 gene, no difference was seen in the expression (p>0,05) between negative and positive control groups, but the CAPN1 gene was more expressed (p<0,05) in the 5-Aza-2 -deoxycytidine and Trichostatin A treatments relative to the positive control group. When the expression ratio of CAPN1/CAST were compared between treatments, was seen more expression (p<0,05) in the positive control group both comparing with negative control group and with 5-Aza-2 -deoxycytidine and Trichostatin A treatments. We may conclude that the treatments with the epigenetic modifier agents didn't affect both the bovine myoblast differentiation into myotubes and the CAST gene expression, but did in the CAPN1 gene expression and so did in the expression ratio of CAPN1/CAST. / A epigenética pode ser definida como o estudo de mudanças herdáveis no fenótipo sem a ocorrência de mudanças na sequência de nucleotídeos. As modificações epigenéticas caracterizam-se por alterações químicas no DNA e em suas proteínas associadas, como a metilação no DNA e a acetilação nas proteínas histonas, respectivamente. A maciez da carne bovina tem ganhado interesse por todo mundo, e o setor pecuário tem se desenvolvido para produzir carne de qualidade que satisfaça a essa demanda. Vale destacar os papéis do sistema calpaína/calpastatina. A calpaína, codificada pelo gene CAPN1, desempenha um papel fundamental na proteólise posmortem pela clivagem de proteínas que constituem a fibra muscular. A calpastatina, codificado pelo gene CAST, por outro lado, age controlando essa clivagem pelo bloqueio da ação da calpaína. Além disso, esse sistema também está envolvido na diferenciação dos mioblastos em miotubos na embriogênese. A ação desse sistema ocorre pela proteólise controlada de proteínas que constituem a membrana plasmática e o citoesqueleto. Para reproduzir a formação de miotubos durante a embriogênese e estudar o controle epigenético na expressão dos genes CAPN1 e CAST, foram estabelecidas culturas de células satélites de músculo bovino, que foram mantidas sem diferenciação (controle negativo) ou foram induzidas à diferenciação, por meio da incubação com meio de cultivo com 2% de soro fetal bovino, na ausência (controle positivo) e após o tratamento com os agentes modificadores epigenéticos como o 5-Aza-2 - desoxicitidina (Aza; desmetilante de DNA), por um período de 48 h á concentração de 10 &#956;M, e Tricostatina A (TSA; acetilante de histona), por um período de 24 h á concentração de 50 nM. Os resultados mostraram que não houve diferenças (p>0,05) no índice de fusão dos mioblastos entre os grupos Aza, TSA e controle positivo, mas que houve diferença (p<0,05) desses grupos em comparação ao controle negativo, que apresentou menor índice de fusão. Também não houve diferença (p>0,05) nas taxas de viabilidade das células entre os grupos, mostrando que o Aza e TSA não foram citotóxicos nas concentrações usadas Em relação à expressão gênica, o gene CAST foi mais expresso (p<0,05) no grupo controle positivo em comparação ao controle negativo; mas não foram observadas diferenças de expressão (p>0,05) entre os grupos controle positivo, 5-Aza-2 -desoxicitidina e Tricostatina A. Para o gene CAPN1, não foi observada diferença (p>0,05) de expressão entre os grupos controle negativo e positivo, mas o gene CAPN1 foi mais expresso (p<0,05) nos tratamentos 5-Aza-2 -desoxicitidina e Tricostatina A em comparação ao grupo controle positivo. Quando a razão de expressão CAST/CAPN1 foi comparada entre os tratamentos, foi observada maior expressão (p<0,05) no grupo controle positivo, tanto em comparação ao grupo controle negativo, quanto aos tratamentos 5-Aza-2 -desoxicitidina e Tricostatina A. Podemos concluir que os tratamentos com agentes modificadores epigenéticos não afetaram a diferenciação de mioblastos bovinos em miotubos e nem a expressão do gene CAST, mas afetaram a expressão do gene CAPN1 e a razão de expressão CAST/CAPN1. / A epigenética pode ser definida como o estudo de mudanças herdáveis no fenótipo sem a ocorrência de mudanças na sequência de nucleotídeos. As modificações epigenéticas caracterizam-se por alterações químicas no DNA e em suas proteínas associadas, como a metilação no DNA e a acetilação nas proteínas histonas, respectivamente. A maciez da carne bovina tem ganhado interesse por todo mundo, e o setor pecuário tem se desenvolvido para produzir carne de qualidade que satisfaça a essa demanda. Vale destacar os papéis do sistema calpaína/calpastatina. A calpaína, codificada pelo gene CAPN1, desempenha um papel fundamental na proteólise posmortem pela clivagem de proteínas que constituem a fibra muscular. A calpastatina, codificado pelo gene CAST, por outro lado, age controlando essa clivagem pelo bloqueio da ação da calpaína. Além disso, esse sistema também está envolvido na diferenciação dos mioblastos em miotubos na embriogênese. A ação desse sistema ocorre pela proteólise controlada de proteínas que constituem a membrana plasmática e o citoesqueleto. Para reproduzir a formação de miotubos durante a embriogênese e estudar o controle epigenético na expressão dos genes CAPN1 e CAST, foram estabelecidas culturas de células satélites de músculo bovino, que foram mantidas sem diferenciação (controle negativo) ou foram induzidas à diferenciação, por meio da incubação com meio de cultivo com 2% de soro fetal bovino, na ausência (controle positivo) e após o tratamento com os agentes modificadores epigenéticos como o 5-Aza-2 - desoxicitidina (Aza; desmetilante de DNA), por um período de 48 h á concentração de 10 &#956;M, e Tricostatina A (TSA; acetilante de histona), por um período de 24 h á concentração de 50 nM. Os resultados mostraram que não houve diferenças (p>0,05) no índice de fusão dos mioblastos entre os grupos Aza, TSA e controle positivo, mas que houve diferença (p<0,05) desses grupos em comparação ao controle negativo, que apresentou menor índice de fusão. Também não houve diferença (p>0,05) nas taxas de viabilidade das células entre os grupos, mostrando que o Aza e TSA não foram citotóxicos nas concentrações usadas Em relação à expressão gênica, o gene CAST foi mais expresso (p<0,05) no grupo controle positivo em comparação ao controle negativo; mas não foram observadas diferenças de expressão (p>0,05) entre os grupos controle positivo, 5-Aza-2 -desoxicitidina e Tricostatina A. Para o gene CAPN1, não foi observada diferença (p>0,05) de expressão entre os grupos controle negativo e positivo, mas o gene CAPN1 foi mais expresso (p<0,05) nos tratamentos 5-Aza-2 -desoxicitidina e Tricostatina A em comparação ao grupo controle positivo. Quando a razão de expressão CAST/CAPN1 foi comparada entre os tratamentos, foi observada maior expressão (p<0,05) no grupo controle positivo, tanto em comparação ao grupo controle negativo, quanto aos tratamentos 5-Aza-2 -desoxicitidina e Tricostatina A. Podemos concluir que os tratamentos com agentes modificadores epigenéticos não afetaram a diferenciação de mioblastos bovinos em miotubos e nem a expressão do gene CAST, mas afetaram a expressão do gene CAPN1 e a razão de expressão CAST/CAPN1. / A epigenética pode ser definida como o estudo de mudanças herdáveis no fenótipo sem a ocorrência de mudanças na sequência de nucleotídeos. As modificações epigenéticas caracterizam-se por alterações químicas no DNA e em suas proteínas associadas, como a metilação no DNA e a acetilação nas proteínas histonas, respectivamente. A maciez da carne bovina tem ganhado interesse por todo mundo, e o setor pecuário tem se desenvolvido para produzir carne de qualidade que satisfaça a essa demanda. Vale destacar os papéis do sistema calpaína/calpastatina. A calpaína, codificada pelo gene CAPN1, desempenha um papel fundamental na proteólise posmortem pela clivagem de proteínas que constituem a fibra muscular. A calpastatina, codificado pelo gene CAST, por outro lado, age controlando essa clivagem pelo bloqueio da ação da calpaína. Além disso, esse sistema também está envolvido na diferenciação dos mioblastos em miotubos na embriogênese. A ação desse sistema ocorre pela proteólise controlada de proteínas que constituem a membrana plasmática e o citoesqueleto. Para reproduzir a formação de miotubos durante a embriogênese e estudar o controle epigenético na expressão dos genes CAPN1 e CAST, foram estabelecidas culturas de células satélites de músculo bovino, que foram mantidas sem diferenciação (controle negativo) ou foram induzidas à diferenciação, por meio da incubação com meio de cultivo com 2% de soro fetal bovino, na ausência (controle positivo) e após o tratamento com os agentes modificadores epigenéticos como o 5-Aza-2 - desoxicitidina (Aza; desmetilante de DNA), por um período de 48 h á concentração de 10 &#956;M, e Tricostatina A (TSA; acetilante de histona), por um período de 24 h á concentração de 50 nM. Os resultados mostraram que não houve diferenças (p>0,05) no índice de fusão dos mioblastos entre os grupos Aza, TSA e controle positivo, mas que houve diferença (p<0,05) desses grupos em comparação ao controle negativo, que apresentou menor índice de fusão. Também não houve diferença (p>0,05) nas taxas de viabilidade das células entre os grupos, mostrando que o Aza e TSA não foram citotóxicos nas concentrações usadas Em relação à expressão gênica, o gene CAST foi mais expresso (p<0,05) no grupo controle positivo em comparação ao controle negativo; mas não foram observadas diferenças de expressão (p>0,05) entre os grupos controle positivo, 5-Aza-2 -desoxicitidina e Tricostatina A. Para o gene CAPN1, não foi observada diferença (p>0,05) de expressão entre os grupos controle negativo e positivo, mas o gene CAPN1 foi mais expresso (p<0,05) nos tratamentos 5-Aza-2 -desoxicitidina e Tricostatina A em comparação ao grupo controle positivo. Quando a razão de expressão CAST/CAPN1 foi comparada entre os tratamentos, foi observada maior expressão (p<0,05) no grupo controle positivo, tanto em comparação ao grupo controle negativo, quanto aos tratamentos 5-Aza-2 -desoxicitidina e Tricostatina A. Podemos concluir que os tratamentos com agentes modificadores epigenéticos não afetaram a diferenciação de mioblastos bovinos em miotubos e nem a expressão do gene CAST, mas afetaram a expressão do gene CAPN1 e a razão de expressão CAST/CAPN1.
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Participação dos receptores P2X7 presentes em células da glia do gânglio da raiz dorsal na nocicepção

Lemes, Júlia Borges Paes 13 February 2017 (has links)
CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Nos gânglios sensitivos, os corpos celulares dos neurônios encontram-se circundados por células gliais denominadas células satélites. Estudos recentes apontam para uma possível comunicação entre neurônios e células satélites através da liberação de ATP e ativação de receptores P2X7 presentes nas células gliais. Além disto, células satélites adjacentes podem estar conectadas através de junções comunicantes (“gap junctions”). Até o presente, a comunicação entre células satélites e neurônios tem sido implicada na cronificação da dor e em processos inflamatórios. Nesse estudo buscamos avaliar o papel da comunicação entre neurônios e células satélites através da ativação dos receptores P2X7 assim como das junções comunicantes em modelos de dor aguda. Em culturas primárias de gânglios da raiz dorsal, verificamos que a administração de capsaicina leva a um aumento de cálcio em neurônios e em seguida em células satélites sendo que a resposta das células satélites foi bloqueada por A740003, um antagonista seletivo para receptores P2X7, indicando que os nociceptores quando ativados liberam ATP que, por sua vez, ativa receptores P2X7 nas células gliais. Para avaliar o papel desta comunicação celular in vivo, o antagonista P2X7 ou o bloqueador de junções comunicantes, carbenoxolona, foram administrados por via intraganglionar (L5) e foram avaliados os efeitos das injeções intraplantares de capsaicina, mentol e formalina em ratos. Tanto o A740003 quanto a carbenoxolona reduziram a nocicepção induzida por capsaicina e mentol. No teste da formalina, ambas as substâncias afetaram apenas a segunda fase do teste, considerada a fase inflamatória. Capsaicina ativa seletivamente receptores TRPV1 e mentol ativa receptores TRPM8, e possivelmente receptores TRPA1, que são expressos majoritariamente em neurônios nociceptivos associados a fibras C. Além disto, estudos de outros autores indicam a primeira fase do teste da formalina envolve principalmente a ativação de fibras do tipo Aδ enquanto que a segunda fase envolve a ativação de fibras Aδ e C. Considerando estes dados juntamente como os presentes resultados, podemos sugerir que a comunicação entre células satélites e neurônios ocorre também na dor aguda, mas apenas quando esta depende da ativação de fibras C. Deste modo, a comunicação entre neurônios e células satélites, via liberação de ATP e ativação de receptores P2X7, assim como uma comunicação entre células satélites adjacentes através de junções comunicantes parecem estar envolvidos em um processamento rápido do sinal doloroso no gânglio da raiz dorsal. / In sensory ganglia, the cellular bodies of neurons are surrounded by glial cells called satellite cells. Recent studies point to a possible communication between neurons and satellite cells through the release of ATP and activation of P2X7 receptors present in glial cells. In addition, adjacent satellite cells may be connected through gap junctions. Still today, the communication between satellite cells and neurons has been implicated in chronic pain and in inflammatory processes. In this study we sought to evaluate the role of communication between neurons and satellite cells through the activation of the P2X7 receptors as well as of the communicating junctions in acute pain models. In primary cultures of dorsal root ganglia, we found that the administration of capsaicin leads to an increase of calcium in neurons and then in satellite cells. The response of satellite cells was blocked by A740003, a selective antagonist for P2X7 receptors, indicating that nociceptors when activated release ATP, which in turn activates P2X7 receptors in the glial cells. To assess the role of this in vivo cellular communication, the P2X7 antagonist or the gap junction blocker, carbenoxolone, were administered by intraganglionar injection (L5) and the effects of intraplantar injections of capsaicin, menthol or formalin in rats were evaluated. Both A740003 and carbenoxolone reduced nociception induced by capsaicin and menthol. In the formalin test, both substances affected only the second phase of the test, considered the inflammatory phase. Capsaicin selectively activates TRPV1 receptors while menthol activates TRPM8 receptors, and possibly TRPA1 receptors, which are expressed mainly in nociceptive neurons associated with C fibers. In addition, studies by other authors indicate that the first phase of the formalin test involves primarily the activation of Aδ fibers whereas the second phase involves the activation of Aδ and C fibers. Considering these data together with the present results, we can suggest that the communication between satellite cells and neurons also occurs in acute pain, but only, when it depends on the activation of C fibers. Thus, communication between neurons and satellite cells, via release of ATP and activation of P2X7 receptors, as well as communication between adjacent satellite cells through gap junctions seems to be involved in a rapid processing of the pain signal in the dorsal root ganglion. / Dissertação (Mestrado)
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Nutrição pós-eclosão de frangos de corte / Post-hatch nutrition of broiler chickens

Gilson Alexandre Gomes 15 March 2007 (has links)
Realizaram-se dois experimentos com o objetivo de avaliar os efeitos da nutrição pós-eclosão em frangos de corte. No primeiro experimento avaliaram-se o efeito do tempo de fornecimento da dieta pré-inicial (DPI) nas características histomorfométricas do duodeno (CHD), em parâmetros de desempenho (PDES), de rendimento de carcaça (RC) até os 49 dias de idade. Foram utilizadas 960 aves distribuídas em delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x4 (2 pesos de pintainhos - até 42 gramas e acima de 45 gramas; 4 tempos de fornecimento da DPI - 0, 1 a 7 dias, 1 a 10 dias e 1 a 14 dias), totalizando 8 tratamentos com 5 repetições de 30 aves cada. No segundo experimento avaliaram-se o tempo para alojamento e o fornecimento de suplementos pós-eclosão (SPO) para pintainhos com diferentes pesos à eclosão, na atividade mitótica de células satélites da musculatura peitoral, na alometria dos órgãos do trato gastrintestinal (TGI), em CHD, em PDES, e RC até os 42 dias de idade. Foram utilizadas 1.280 aves distribuídas em delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x2x2 (2 pesos dos pintainhos à eclosão: até 44g e acima de 48g; 2 SPO: 1 suplemento com 8% PB e 16% carboidratos - SPO 8/16 - e 1 suplemento com 10% PB e 20% de carboidratos - SPO 10/20 - ; 2 períodos de fornecimento dos SPO: 24 e 48h), totalizando 8 tratamentos com 4 repetições de 40 aves cada. Adicionalmente, foram alojadas 160 aves da mesma linhagem, que apresentavam peso médio de 49g à eclosão, e foram submetidas a um período de jejum de 24h, sendo que as mesmas provinham do mesmo lote de matrizes das aves submetidas aos tratamentos supracitados. Os animais de ambos os experimentos foram submetidas a programas alimentares que compreenderam três ou quatro fases (préinicial e/ou inicial; engorda; final), sendo as dietas formuladas a base de milho e farelo de soja. Os dados obtidos foram analisados com auxílio do procedimento GLM do software estatístico SAS, e as médias comparadas pelo teste de Tukey ao nível de 5% de probabilidade. Para o presente estudo, o peso dos pintainhos ao alojamento/eclosão causou efeito significativo no desempenho dos animais, sendo que animais mais pesados apresentaram peso vivo superior, apesar de terem apresentado menores alturas de vilosidade. Observou-se que o fornecimento da DPI por um período de 7 dias, causou efeito benéfico no desempenho dos animais, acarretando, entretanto, numa diminuição no RC das aves. Pintainhos mantidos em jejum por um período de 24h demonstraram um melhor desenvolvimento do TGI no período pós-eclosão, permitindo que estas aves apresentassem crescimento compensatório. O fornecimento de SPO demonstrou ser eficaz em reduzir a perda de peso dos animais no período pré-alojamento, sendo que o oferecimento do SPO 10/20 mostrou ser mais vantajoso, devido ao fato do mesmo ter causado efeitos benéficos nas CHD, e também um aumento no rendimento de filé de peito. Entretanto, deve-se priorizar o fornecimento dos SPO pelo menor período possível, já que os mesmos não são capazes de suprir de maneira adequada às exigências nutricionais das aves recém-eclodidas. / It were performed two experiments with the aim of evaluate the effects of posthatch nutrition of broiler chickens. In the first trial were evaluated the effects of feeding a pre-starter diet (PSD) on duodenal morphology (DM), live performance (LP), and carcass yield (CY). Nine hundred and sixty day-old male Cobb-500 broiler, with two different weights at housing (until 42 g and more than 45 g) were placed in 32 floor pens, and then submitted to four different periods of feeding a PSD (0, 1 to 7 days, 1 to 10 days and 1 to 14 days), totalizing 8 treatments with 4 replications of 30 birds each. In the second trial were evaluated the effects of feeding different hatchling supplements (HS) for different periods on breast muscle satellite cell mitotic activity (SCMA), alometric growth of digestive organs, DM, LP, and CY of broiler chickens up to 42 days. One thousand and two hundred and eighty day-old male Cobb-500 broiler were used on a 2x2x2 factorial study (two different weights at hatch :until 44 g and more than 49 g; two HS: 8% of crude protein and 16% of carbohydrates - HS 8/16 - or 10% of crude protein and 20% of carbohydrates - HS 10/20; two feeding periods of HS: 24 or 48h), totalizing 8 treatments with 4 replications of 40 birds each. Additionally, it were housed 160 male chicks from the same broiler breeder flock, of 49g of mean weight at hatch, which were submitted to 24h fasting prior to placement. The animals of both experiments were fed with basal corn-soy pre-starter/starter/grower/finisher diets. All data were analyzed using SAS\'s GLM procedures, and significance were measured at p<0,05 using Tukey\'s multiple range test to determine differences between treatments means. Overall, heavier birds at hatch/housing caused significative effect on LP, presenting decreased villus height, and an increased body weight. The birds that were fed with the PSD up to 7 days presented an increased LP, and a smaller CY. Chicks which were fasted for 24h presented a better development of DM on the post-hatch period, showing a compensatory growth. Both HS were efficient on minimize the chick\'s weight loss prior to placement, however birds that were fed with 10/20 HS showed satisfactory effects not only on DM but also an increased breast meat yield. However, the period of feeding of HS should be as small as possible, because this supplement is not capable to supply efficiently the nutritional requirements of newly hatched chicks.
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Influência do tempo de irradiação da terapia por ultrassom sobre o tecido conjuntivo no processo de reparação muscular de ratos / Irradiation time effect of ultrasonic therapy on connective tissue related to rat muscular repair process

Cristiano Schiavinato Baldan 18 January 2013 (has links)
O objetivo deste estudo foi avaliar se a terapia por ultrassom influencia o processo de reparação em ratos submetidos à laceração muscular. A amostra foi composta por 61 ratos Wistar, aleatoriamente distribuídos em 9 grupos: controle, 4LMST (lesão muscular / eutanásia no 4º dia pós-operatório), 7LMST (lesão muscular / eutanásia no 7º dia pós-operatório), 4US2 (lesão muscular / 2 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 4º dia), 7US2 (lesão muscular / 2 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 7º dia), 4US4 (lesão muscular / 4 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 4º dia), 7US4 (lesão muscular / 4 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 7º dia), 4US6 (lesão muscular / 6 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 4º dia) e 7US6 (lesão muscular / 6 minutos de irradiação ultrassonora por dia / eutanásia no 7º dia). Todos os animais dos grupos 4US2, 7US2, 4US4, 7US4, 4US6 e 7US6 foram irradiados com ultrassom terapêutico de frequência igual a 1 MHz, frequência de repetição de pulso de 100 Hz, pulsos com duração de 2 ms (ciclo de trabalho de 20%), irradiância de 0,5 W/cm2. A emissão das ondas ultrassonoras ocorreu de forma pulsada. A taxa de não uniformidade do feixe (BNR) foi menor que 6,0 e a área de radiação efetiva (ERA) foi de 0,5 cm2. A lesão foi realizada por procedimento operatório, de forma a gerar-se uma secção transversal de 1 cm de comprimento e 3 mm de profundidade no músculo gastrocnêmio dos ratos, a partir de 2,5 cm do osso calcâneo. Foram feitas análises de birrefringência e picrosirius. Os animais do grupo 4US4 apresentaram retardo óptico menor que os demais animais sacrificados no 4º dia pós-operatório. Os animais dos grupos 7US4 e 7US6 apresentaram percentual de colágeno total maior que os demais animais lesionados e tratados e o mesmo percentual do apresentado pelo grupo controle. Assim, concluiu-se que a terapia por ultrassom, com tempo de irradiação de 4 e 6 minutos por sessão, aumenta o percentual de colágeno total intramuscular, no local da lesão, quando mantida por, pelo menos 7 dias e diminui o retardo óptico do colágeno situado no local da lesão, no início do processo de reparação tecidual (até o 4º dia pós-operatório), se irradiado por 4 minutos por sessão / The aim of this study was to analyze the ultrasonic therapy effect on repair process in rats under muscular injury. The sample included 61 Wistar rats, randomly distributed in 9 groups: control, 4LMST (muscular injury / euthanasia in 4th postoperative day), 7LMST (muscular injury / euthanasia in 7th postoperative day), 4US2 (muscular injury / 2 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 4th day), 7US2 (muscular injury / 2 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 7th), 4US4 (muscular injury / 4 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 4th day), 7US4 (muscular injury / 4 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 7th day), 4US6 (muscular injury / 6 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 4th day), 7US6 (muscular injury / 6 minutes ultrasonic therapy per day / euthanasia in 7th day). All animals from the 4US2, 7US2, 4US4, 7US4, 4US6 and 7US6 groups were irradiated with the same 1 MHz ultrasonic therapeutic frequency, 100Hz pulse repetition frequency, 2 ms pulse duration, 0,5 W/cm2 intensity. The ultrasonic waves emission occurred as pulsed. The beam nonuniformity rate (NBR) was less than 6.0 and the effective radiation area (ERA) was 0,5 cm2. The injury was performed through an operative procedure in order to produce a transverse section of 1 cm length and 3 mm deep in rat gastrocnemius muscles, from 2.5 cm of the calcaneus bone. It was realized birefringence and picrosirius analysis. The animals from the group 4US4 showed an optical delay lower than the 4th postoperative euthanasia animals. The animals from the groups 7US4 and 7US6 showed a total collagen percentual higher than the other injured and treated animals and the same percentual of control animals. Therefore, we concluded the ultrasonic therapy, with irradiation times of 4 and 6 minutes per session, increases the total intramuscular collagen, lesion limited, since a 7-day ultrasonic therapy is followed, which is able to diminish collagen optical delay in the lesion, in early tissue repair process (until 4th postoperative day), if irradiated for 4 minutes per session
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O ultrassom pulsado de baixa intensidade na regeneração do músculo tibial anterior de rato: análise morfológica, organização e deposição de colágeno e expressão de fatores regulatórios miogênicos / Ultrasound pulsed low intensity in the regeneration of the previous tibial muscle of mouse: morphological analysis, organization and deposition of collagen and expression of regulatory myogenic factors

Ribeiro, Jacira Souza 10 December 2015 (has links)
Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-06-19T15:19:00Z No. of bitstreams: 1 Jacira Souza Ribeiro.pdf: 1136563 bytes, checksum: 6f35b1abf4cd3ca62f8560ee50069169 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-19T15:19:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jacira Souza Ribeiro.pdf: 1136563 bytes, checksum: 6f35b1abf4cd3ca62f8560ee50069169 (MD5) Previous issue date: 2015-12-10 / The low-intensity pulsed ultrasound (LIPUS) has been used to promote muscle repair with better quality and in shorter time, however, there is no standardization for the parameters used in clinical practice. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of USPBI on the repair of skeletal muscle of rats after cryoinjury. Male Wistar rats (n=45) were divided into 3 groups: control; only injury; Injured and treated with LIPUS. The LIPUS application was performed daily, using the stationary mode, pulse 1: 4, 1 MHz frequency, intensity 0.4 W / cm2 for 3 minutes. The injured groups were euthanized at 1, 2, 3 and 7 days following injury induction. The tibialis anterior muscle (TA) was removed for morphological analysis and collagen remodeling, and the muscle sections stained with H&E and Picrosirus Red, respectively. Then, the slides were photographed and quantified using the program "Image J". The analysis of MyoD and myogenin gene expression was performed using real time PCR. The results showed that the USPBI promoted modulation of inflammatory responses with a decrease of inflammatory infiltrates after 1, 2, 3 and 7 days, and reduction of myonecrosis after 7 days, followed by an increase in the number of immature fibers after 3 and 7 days, and increase of blood vessels on days 2, 3 and 7 days. Regarding the deposition of collagen, the results showed better organization of the fibers in all experimental periods, and increased deposition of collagen fibers in the injured group and treated after 2 and 3 days. In addition, treatment with LIPUS promoted increased gene expression of MyoD reduction after 3 days and after 7 days. Regarding myogenin expression, the treated group showed increased expression after 7 days. In conclusion, the LIPUS induced positive effects on muscle repair process leading to reduced inflammation and myonecrosis, increased in the immature fibers and mature blood vessels, as well as modulation of Myod and miogenin in different periods. / O ultrassom pulsado de baixa intensidade (USPBI) tem sido utilizado por promover um reparo muscular de melhor qualidade e menor duração, porém, não há padronização quanto aos parâmetros utilizados na prática clínica. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do USPBI sobre o reparo do músculo esquelético de rato após criolesão. Foram utilizados 45 ratos Wistar, machos, divididos em 3 grupos experimentais: controle; somente lesão; lesionado tratado com USPBI. A aplicação de USPBI foi realizada diariamente após indução da lesão, modo estacionário, pulsado 1:4, frequência 1 MHz, intensidade 0,4 W/cm2, durante 3 minutos. Os grupos lesionados foram eutanasiados após 1, 2, 3 e 7 dias da indução da lesão. O músculo tibial anterior (TA) foi removido para análise morfológica e de remodelamento do colágeno, sendo os cortes corados com H&E e Picrosirius Red, respectivamente. As lâminas foram fotografadas e quantificadas com auxílio do programa “Image J”. A expressão gênica de MyoD e miogenina foi obtida por PCR em tempo real. Os resultados evidenciaram que o USPBI promoveu modulação da resposta inflamatória, havendo redução do infiltrado inflamatório após 1, 2, 3 e 7 dias, e redução da mionecrose após 7 dias, seguido pelo aumento no número de fibras imaturas após 3 e 7 dias, e aumento dos vasos sanguíneos nos dias 2, 3 e 7 dias. Em relação à deposição de colágeno, os resultados evidenciaram melhor organização das fibras em todos os períodos experimentais, além de aumento da deposição de fibras colágenas no grupo lesionado e tratado após 2 e 3 dias. Além disso, o tratamento com USPBI promoveu aumento da expressão gênica de MyoD após 3 dias e redução após 7 dias. Em relação a expressão de miogenina, o grupo tratado demonstrou aumento da expressão após 7 dias. Em conclusão, o USPBI nos parâmetros utilizados induziu efeitos positivos ao processo de reparo muscular causando redução do processo inflamatório e mionecrose, aumento de fibras jovens vasos sanguíneos maduros, além de modulação de MyoD e miogenina nos diferentes períodos avaliados.

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