Introduction: Neuropathic pain is an important condition whose treatment includes gabapentin (GABAP). The mechanism of analgesic action of GABAP is not fully elucidated. Objective: The present study investigated the contribution of peripheral (plantar) and central (spinal) cannabinoid receptors on the effect of GABAP on the partial sciatic nerve injury (PSNI) model. Methods: Swiss male mice weighing 25-35 g were housed under controlled conditions with free access to food and water and acclimated to the laboratory before testing. PSNI was induced in the anesthetized mice, followed by incision of the right hind limb for nerve exposure, followed by its ligation (1 / 3-1 / 2 of the medial portion) with 8-0 silk thread. In the control group, the nerve was exposed and not connected. The contribution of CB1 and CB2 receptors on the effect of GABAP was evaluated on day 14th after PSNI. Mice received AM281 or AM630 by i.t. (2 μg / 5 μl) or i.pl. (10 g / 20 L) and 15 min after GABAP (30 mg / kg, oral), being evaluated 1 hour after in relation to mechanical hyperalgesia. Data were evaluated by 1 or 2-way ANOVA (Tukey or Bonferroni, respectively, p <0.05). Project approved by CEUA-UNISUL (16.027.5.01.IV). Results: The peripheral treatment with AM281 or AM630 partially reversed (AM281: 47.5  10.6% response; AM630: 40.0  5.3% response) the anti-hyperalgesic effect of GABAP (75.0  11.8% and 67.5  5.3% response, respectively) on the 14th day after the PSNI. With spinal treatment, only AM281 was able to promote this effect (GABAP: 47.5  10.6% and AM281: 82.5  5.9% response). Conclusion: CB1 receptors, at the spinal and peripheral level, as well as CB2 receptors in peripheral level contribute to the anti-hyperlagesic effect of GABAP in this model, and the (*endocanabinoid) EC system can be studied as a target for new treatments for neuropathic pain. / Submitted by Alexandre Carlos Buffon (alexandre.buffon@unisul.br) on 2018-04-09T20:39:28Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Final_Alexandre_Carlos_Buffon.pdf: 1937208 bytes, checksum: 6fe0a71013064e8bbfc64598bfcd57dc (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Correa da Cruz (caroline.cruz@unisul.br) on 2018-04-10T12:02:26Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Final_Alexandre_Carlos_Buffon.pdf: 1937208 bytes, checksum: 6fe0a71013064e8bbfc64598bfcd57dc (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-10T12:02:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Final_Alexandre_Carlos_Buffon.pdf: 1937208 bytes, checksum: 6fe0a71013064e8bbfc64598bfcd57dc (MD5) Previous issue date: 2017 / Introdução: A dor neuropática é uma condição importante, cujo tratamento inclui a gabapentina (GABAP). O mecanismo de ação analgésica da GABAP não está totalmente elucidado. Objetivo: O presente estudo investigou a contribuição de receptores canabinóides periféricos (plantar) e centrais (espinal), sobre o efeito da GABAP no modelo de lesão parcial no nervo isquiático (LPNI). Métodos: Utilizou-se camundongos Swiss, machos, com 25-35g, alojados em condições controlados, com livre acesso a comida e água e aclimatados ao laboratório antes dos testes. A LPNI foi induzida nos camundongos anestesiados, seguindo-se incisão do membro traseiro direito para exposição do nervo, seguida por sua ligadura (1/3-1/2 da porção medial) com fio de seda 8-0. No grupo controle, o nervo foi exposto e não ligado. A contribuição dos receptores CB1 e CB2 sobre o efeito da GABAP foi avaliada no dia 14o. após LPNI. Os camundongos receberam AM281 ou AM630 por via i.t. (2 g/5 L) ou i.pl. (10 g/20 L) e 15 min depois GABAP (30 mg/kg, oral), sendo avaliados 1 h após quanto à hiperalgesia mecânica. Dados avaliados por ANOVA de 1 ou 2 vias (Tukey ou Bonferroni, respectivamente, p< 0,05). Projeto aprovado pela CEUA-UNISUL (16.027.5.01.IV). Resultados: O tratamento periférico com AM281 ou AM630, reverteu parcialmente (AM281: 47,5  10,6% de resposta; AM630: 40,0  5,3% de resposta) o efeito anti-hiperlagésico da GABAP (75,0  11,8% e 67,5  5,3% de resposta, respectivamente) no 14o. dia após a LPNI. Com o tratamento espinal, apenas o AM281 foi capaz de promover este efeito (GABAP: 47,5  10,6% e AM281: 82,5  5,9% de resposta). Conclusão: Os receptores CB1, em nível espinal e periférico, bem como de receptores CB2 em nível periférico contribuem para o efeito anti-hiperálgico da GABAP neste modelo, podendo o sistema endocanabinóide (EC) ser estudado como alvo de novos tratamentos para a dor neuropática.

Memoria para optar el título de Bioquímico

Unidad de práctica para optar al título de Químico Farmacéutico / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / Marihuana es el nombre común para la planta Cannabis sativa L. [1]. Contiene sobre 421 compuestos químicos diferentes, incluyendo más de 60 cannabinoides [2]. El principal cannabinoide psicoactivo es el delta9- tetrahidrocannabinol (Δ9-THC). El metabolito más importante del Δ9-THC, 11-nordelta9- carboxi-tetrahidrocannabinol (THC-COOH) se excreta en la orina y se analiza comúnmente en especímenes biológicos para la detección del consumo de marihuana [3]. La Policía de Investigaciones de Chile (PDI), es una institución policial de carácter profesional, técnico y científico, integrante de las Fuerzas de Orden. Entre sus funciones está la de emplear la ciencia y la tecnología de vanguardia para el esclarecimiento de los delitos. Para esto recibe el apoyo del Laboratorio de Criminalística (LACRIM) y de los peritos que lo conforman [4]. En la actualidad, no es aceptable que un laboratorio utilice un método analítico que no haya sido objeto previamente de algún tipo de validación. La validación de un método analítico, es el establecimiento de la evidencia documental de que un procedimiento analítico conducirá, con un alto grado de seguridad, a la obtención de resultados precisos y exactos, dentro de las especificaciones y los atributos de calidad previamente establecidos [3]. Se planteó como objetivo de esta práctica, la validación de una metodología analítica, utilizada por la sección Química y Física perteneciente al LACRIM, para la cuantificación del metabolito 11-nor-delta9-carboxitetrahidrocannabinol (THC-COOH) mediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (CG-EM). Se utilizaron muestras de orina negativas, las cuales fueron suplementadas con 11-nor-delta9-carboxi-tetrahidrocannabinol y con 11-nor-delta9-carboxi-tetrahidrocannabinol-D3 como estándar interno. Para esto se efectuó un proceso de extracción en fase sólida (EFS) con posterior derivatización de la molécula, previo a la cuantificación. Se determinaron parámetros de calidad como: linealidad, selectividad, límite de cuantificación y de detección, precisión, exactitud, estabilidad y recuperación / Marijuana is the common name for the plant Cannabis sativa L. [1]. It contains over 421 different chemical compounds, including more the 60 cannabinoids [2]. The main psychoactive cannabinoid is delta9- tetrahydrocannabinol (Δ9-THC). The major metabolite of Δ9-THC, 11-nor-delta9- carboxy-tetrahydrocannabinol (THC-COOH) is excreted in the urine and is commonly analyzed in biological specimens for the detection of marijuana [3]. Investigations Police of Chile (PDI), is a professional police institution, technical and scientific, member of the Forces of Order. Among its functions is to employ science and cutting edge technology, to clarify crimes. For this is supported by the Laboratory of Criminology (LACRIM), and the experts that comprise [4]. Today, the idea that a laboratory can use an analytical method has not previously been covered by some type of validation is inconceivable. The validation of an analytical method is the establishment of documentary evidence that an analytical procedure lead, with a high degree of security, obtaining precise and accurate results within specifications and quality attributes previously established [3]. It is proposed as target practice, validation of an analytical methodology, used by the Chemistry and Physics section pertaining to LACRIM, for the quantification of metabolite 11-nor-delta9-carboxy-tetrahydrocannabinol (THCCOOH) by gas chromatography coupled mass spectrometry (GC-MS). Negative urine samples, which were supplemented with 11-nor-delta9-carboxytetrahydrocannabinol and 11-nor-delta9-carboxy-tetrahydrocannabinol-D3 as internal standard. For this is used in solid phase extraction process (SPE) with subsequent derivatization of the molecule, prior to quantification. Were determined quality parameters: linearity, selectivity, limit of quantification and detection, precision, accuracy, stability and recovery

Orientador: João Cesar Bedran de Castro / Coorientador: José Antunes Rodrigues / Banca: Roberta Okamoto / Banca: Keico Okino Nonaka / Resumo: O objetivo do presente estudo foi caracterizar o impacto da breve bloqueio dos receptores canabinóides CB1 ou CB2 durante o período neonatal sobre o crescimento somático e desenvolvimento esquelético durante a infância, puberdade e na idade adulta em ratos. Ratos Wistar recém-nascidos foram distribuídos aleatoriamente em seis grupos, três grupos do sexo masculino e três grupos femininos. Os grupos tratados receberam durante os primeiros sete dias de vida de uma dose subcutânea de antagonistas dos receptores CB1 (AM251) ou CB₂ (SR144528) (3 mg/kg dissolvidos em 50 uL de veículo composto em álcool absoluto e tampão fosfato salino - PBS). Os grupos controle receberam a solução veículo com mesmo volume e período. O peso corporal foi mensurado aos 20, 40, 120 dias de idade e os fêmures direitos foram coletados. O comprimento e a espessura dos fêmures foram medidos e a densidade mineral óssea areal (DMO areal) foi determinada por meio de um densitômetro de dupla emissão de raios-X (DEXA). O teste biomecânico de flexão da cabeça do fêmur foi utilizado para avaliar a força máxima, a energia para fratura, e rigidez extrínseca dos ossos. Ganho de massa corporal, DMO areal e propriedades biomecânicas do osso aumentaram rapidamente com a idade em todos os grupos. Entre animais veículo, os padrões de dimorfismo sexual esquelética foram evidentes após a puberdade. No entanto, o bloqueio neonatal dos receptores canabinóides CB1 e CB2 promoveu um efeito transitório e sexo-dependentes sobre a massa corporal e desenvolvimento ósseo ao longo da vida, e que a inibição neonatal desses receptores nos machos promoveu um efeito bifásico sobre a aquisição de DMO areal ao longo do desenvolvimento, e aumento da fragilidade óssea nos machos AM251 na idade adulta. Este estudo demonstrou que... / Abstract: The aim of the present study was to characterize the impact of brief blockade of cannabinoid CB1 or CB2 receptors during neonatal period on somatic growth and skeletal development during childhood, puberty, and adulthood in rats. Newborn Wistar rats were randomly divided into six groups, three male groups and three female groups. The treated groups received during the firsts seven days of life a subcutaneous dose of a CB1 (AM251) or CB₂ (SR144528) receptors antagonist (3 mg/kg dissolved in 50 μl of a vehicle consisting of absolute ethanol and phosphate buffered saline - PBS). Control groups received the vehicle solution in the same volume and period. Body weight was measured at 20, 40, 120 days of age and femurs were collected. The length and thickness of the femurs were measured and the areal bone mineral density (areal BMD) was determined by dual-energy X-ray absorptiometry (DEXA). Biomechanical femoral neck bending testing was used to evaluate bone breaking strength, energy to fracture, and extrinsic stiffness. Weight gain, areal BMD and bone biomechanical properties increased rapidly with respect to age in all groups. In vehicle animals, skeletal sexual dimorphism patterns were evident after puberty. However, neonatal blockade of cannabinoid CB1 and CB2 receptors promoted a transient and sex-dependent effect on the body weight and bone development throughout the life, and that neonatal inhibiting the CB1 and CB2 receptors in males promotes a biphasic effect on the acquisition of areal BMD throughout development, and increased bone fragility in males AM251 in adulthood. This study demonstrated that brief blockade of cannabinoid CB1 or CB2 receptors during neonatal period causes a long-lasting and sex-dependents modification in somatic growth and skeletal development in rats / Mestre

Made available in DSpace on 2016-02-05T18:30:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-31. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-05T18:34:19Z : No. of bitstreams: 1 000857839.pdf: 1265917 bytes, checksum: 668aecd70d30203ad662b956638e0da8 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo do presente estudo foi caracterizar o impacto da breve bloqueio dos receptores canabinóides CB1 ou CB2 durante o período neonatal sobre o crescimento somático e desenvolvimento esquelético durante a infância, puberdade e na idade adulta em ratos. Ratos Wistar recém-nascidos foram distribuídos aleatoriamente em seis grupos, três grupos do sexo masculino e três grupos femininos. Os grupos tratados receberam durante os primeiros sete dias de vida de uma dose subcutânea de antagonistas dos receptores CB1 (AM251) ou CB₂ (SR144528) (3 mg/kg dissolvidos em 50 uL de veículo composto em álcool absoluto e tampão fosfato salino - PBS). Os grupos controle receberam a solução veículo com mesmo volume e período. O peso corporal foi mensurado aos 20, 40, 120 dias de idade e os fêmures direitos foram coletados. O comprimento e a espessura dos fêmures foram medidos e a densidade mineral óssea areal (DMO areal) foi determinada por meio de um densitômetro de dupla emissão de raios-X (DEXA). O teste biomecânico de flexão da cabeça do fêmur foi utilizado para avaliar a força máxima, a energia para fratura, e rigidez extrínseca dos ossos. Ganho de massa corporal, DMO areal e propriedades biomecânicas do osso aumentaram rapidamente com a idade em todos os grupos. Entre animais veículo, os padrões de dimorfismo sexual esquelética foram evidentes após a puberdade. No entanto, o bloqueio neonatal dos receptores canabinóides CB1 e CB2 promoveu um efeito transitório e sexo-dependentes sobre a massa corporal e desenvolvimento ósseo ao longo da vida, e que a inibição neonatal desses receptores nos machos promoveu um efeito bifásico sobre a aquisição de DMO areal ao longo do desenvolvimento, e aumento da fragilidade óssea nos machos AM251 na idade adulta. Este estudo demonstrou que... / The aim of the present study was to characterize the impact of brief blockade of cannabinoid CB1 or CB2 receptors during neonatal period on somatic growth and skeletal development during childhood, puberty, and adulthood in rats. Newborn Wistar rats were randomly divided into six groups, three male groups and three female groups. The treated groups received during the firsts seven days of life a subcutaneous dose of a CB1 (AM251) or CB₂ (SR144528) receptors antagonist (3 mg/kg dissolved in 50 μl of a vehicle consisting of absolute ethanol and phosphate buffered saline - PBS). Control groups received the vehicle solution in the same volume and period. Body weight was measured at 20, 40, 120 days of age and femurs were collected. The length and thickness of the femurs were measured and the areal bone mineral density (areal BMD) was determined by dual-energy X-ray absorptiometry (DEXA). Biomechanical femoral neck bending testing was used to evaluate bone breaking strength, energy to fracture, and extrinsic stiffness. Weight gain, areal BMD and bone biomechanical properties increased rapidly with respect to age in all groups. In vehicle animals, skeletal sexual dimorphism patterns were evident after puberty. However, neonatal blockade of cannabinoid CB1 and CB2 receptors promoted a transient and sex-dependent effect on the body weight and bone development throughout the life, and that neonatal inhibiting the CB1 and CB2 receptors in males promotes a biphasic effect on the acquisition of areal BMD throughout development, and increased bone fragility in males AM251 in adulthood. This study demonstrated that brief blockade of cannabinoid CB1 or CB2 receptors during neonatal period causes a long-lasting and sex-dependents modification in somatic growth and skeletal development in rats

Submitted by PPG Odontologia (odontologia-pg@pucrs.br) on 2018-03-15T18:13:31Z No. of bitstreams: 1 MARIANA_KLEIN_DIS.pdf: 2818382 bytes, checksum: 8bd8dc12dea147fdea294b9c63661941 (MD5) / Approved for entry into archive by Tatiana Lopes (tatiana.lopes@pucrs.br) on 2018-03-28T11:55:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MARIANA_KLEIN_DIS.pdf: 2818382 bytes, checksum: 8bd8dc12dea147fdea294b9c63661941 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-28T11:59:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARIANA_KLEIN_DIS.pdf: 2818382 bytes, checksum: 8bd8dc12dea147fdea294b9c63661941 (MD5) Previous issue date: 2018-01-22 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Ulcerative lesions are some of the most common injuries of the oral mucosa. Damage to the epithelial barrier results in discomfort, which may interfere with oral hygiene, chewing, swallowing and speech. The management of these lesions basically aims to optimize and accelerate tissue repair, in addition to reducing its symptomatology. However, there is no option considered gold standard for the treatment of traumatic mouth ulcers. Cannabidiol (CBD) is the main non-psychomimetic component of Cannabis sativa. It exerts potent antiinflammatory, antioxidant and analgesic effects when tested in various pathological conditions. The present dissertation is structured in the form of 2 scientific papers. The first article consists of a literature review to evaluate the different mechanisms of action of CBD that may be involved in the repair of ulcerative lesions, suggesting that this drug is promising for the treatment of oral inflammatory disorders. The second article is a report of an experimental study conducted in an animal model, to assess the effect of 5 and 10 mg/kg CBD on the repair of an ulcerative lesion induced on the ventral tongue of 60 Wistar rats after 3 and 7 days. Treatment with CBD decreased inflammatory scores after 3 days (p < 0.05), but was unable to clinically influence the size of ulcerative lesions. Thus, it is concluded that CBD has an inflammation modulating effect and may represent a promising alternative in the management of oral wounds. / As les?es ulceradas correspondem ?s enfermidades mais frequentes da mucosa bucal. O dano ? barreira epitelial resulta em desconforto, podendo interferir na higiene oral, mastiga??o, degluti??o e fala. O manejo dessas les?es objetiva basicamente otimizar e acelerar o reparo tecidual, al?m de diminuir a sintomatologia dolorosa. No entanto, n?o est? dispon?vel atualmente uma alternativa considerada o padr?o-ouro para o tratamento das ?lceras traum?ticas bucais. O canabidiol (CBD) ? o principal componente n?o-psicomim?tico da Cannabis sativa e desempenha potentes efeitos anti-inflamat?rios, antioxidantes e analg?sicos em diversas condi??es patol?gicas. A presente disserta??o est? estruturada na forma de 2 artigos cient?ficos. O primeiro consiste em uma revis?o de literatura, cujo objetivo foi avaliar os diferentes mecanismos de a??o do CBD que possam estar envolvidos no reparo de les?es ulceradas traum?ticas, sugerindo o car?ter promissor desta droga na terapia de dist?rbios inflamat?rios orais. O segundo trata de um estudo experimental desenvolvido em modelo animal, com objetivo de avaliar cl?nica e histologicamente o efeito da administra??o intraperitoneal do CBD, nas doses de 5 e 10 mg/kg, por 3 e 7 dias, no reparo de les?o ulcerada induzida no ventre lingual de 60 ratos Wistar. O tratamento com CBD foi capaz de diminuir os escores inflamat?rios das les?es ap?s 3 dias (p < 0,05), contudo n?o foi suficiente para interferir no tempo de cicatriza??o das ?lceras. Dessa forma, concluiu-se que o CBD ? capaz de modular o processo inflamat?rio em les?es ulceradas orais, podendo representar uma alternativa promissora no manejo dessa condi??o.

Tricomas secretores são apêndices epidérmicos presentes nas maiorias das plantas desempenhando funções diversas, dentre elas a defesa contra herbivoria. Dentre as famílias que apresentam tricomas secretores destaca-se Cannabaceae, que é amplamente estudada por produzir compostos psicoativos e outros utilizados como aromatizantes de cerveja. Recentemente alguns gêneros pertencentes à Ulmaceae foram inseridos em Cannabaceae, como Celtis e Trema. Tais gêneros são os mais numerosos em espécies da família. Considerando que tricomas secretores são os principais sítios de produção de substâncias de interesse econômico, e que são amplamente utilizados como caráter de valor taxonômico, o presente trabalho comparou a distribuição e morfologia de tricomas secretores de duas espécies de Cannabaceae (Celtis pubescens e Trema micrantha) e três espécies afins de Ulmaceae (Ampelocera glabra, Phyllostylon rhamnoides e Ulmus parvifolia). Os dados foram comparados aos existentes na literatura e discutidos em um contexto sistemático. Os tricomas secretores de Trema micranta foram, ainda, analisados em detalhe quanto à ontogenia, análise química do exsudato (in situ e direto) e ultraestrutura. Para tal, amostras de folhas e flores (pistiladas e estaminadas) foram coletadas, fixadas e processadas para análise de microscopia de luz, eletrônica de varredura e de transmissão. Foram encontrados cinco morfotipos diferentes nas espécies estudadas. C. pubescens e T. micrantha apresentaram tricomas secretores capitados e filiformes, que diferiram quanto ao pedúnculo, unisseriado em C. pubescens e bisseriado em T. micrantha. As três espécies de Ulmaceae apresentaram um único morfotipo (capitado com pedúnculo unicelular). Os tricomas de T. micranta iniciam o desenvolvimento com uma divisão anticlinal, semelhante ao que ocorre em Cannabis sativa. Seus tricomas secretam terpenos, alcaloides e compostos fenólicos. Testes químicos comprovaram a presença de alcaloides e os indicadores de canabinoides sugerem que T. micrantha apresenta potencial para produção desses compostos. A morfologia dos tricomas encontrados nas espécies de Cannabaceae é diferente da observada nas espécies de Ulmaceae, o que apoia a atual circunscrição destas famílias. A diversidade morfológica e de termos utilizados torna difíceis a classificação e comparação entre os tipos de tricomas secretores, sendo necessários esforços no sentido de padronizar a caracterização destas estruturas secretoras, em especial nas famílias que compõem o clado urticoide. / Secretory trichomes are epidermal appendages that are present in most plants performing various functions, among them the defense against herbivory. Cannabaceae comprises plants covered with secretory trichomes, and is a well-known family for producing psychoactive compounds and others used as beer flavorings. Recently some genera belonging to Ulmaceae were inserted into Cannabaceae, such as Celtis and Trema, the species-richest genera of the family. As the secretory trichomes are the main plant source of economically important substances and are widely used as taxonomic markers, the present study compared the distribution and morphology of secretory trichomes of two species of Cannabaceae (Celtis pubescens and Trema micrantha) and three related species of Ulmaceae (Ampelocera glabra, Phyllostylon rhamnoides and Ulmus parvifolia). The data were compared to those in the literature and discussed in a systematic context. The secretory trichomes of Trema micranta were also analyzed in detail regarding ontogeny, histolocalization of substances and ultrastructure. For this, samples of leaf and flower (pistillate and staminate) were collected, fixed and processed for analyses of light microscopy, scanning electron microscopy and transmission electron microscopy. For T. micranta chemical tests in situ and direct were carried out; in addition, samples were prepared for ultrastructural study in transmission electron microscopy. Five different morphotypes of secretory trichomes were found in the species studied. C. pubescens and T. micrantha exhibited capitate and filiform secretory trichomes that differed in the stalk, uniseriate in C. pubescens and biseriate in T. micrantha. The three species of Ulmaceae had a single morphotype (capitate with a unicellular stalk). The trichomes of T. micranta originate of a first anticlinal cell division, similar to what occurs in Cannabis sativa. They secrete terpenes, alkaloids and phenolic compounds. Chemical tests have confirmed the presence of alkaloids and cannabinoid indicators suggest that T. micrantha is a putative species for the production of these compounds. The morphology of the trichomes found in the species of Cannabaceae is different from that observed in the species of Ulmaceae, which supports the current circumscription of these families. The diversity of morphology and terms employed makes it difficult to classify and compare the types of secretory trichomes. In this sense, efforts are needed to standardize the characterization of these secretory structures, especially in the families that comprise the urticalean rosids.

Tricomas secretores são apêndices epidérmicos presentes nas maiorias das plantas desempenhando funções diversas, dentre elas a defesa contra herbivoria. Dentre as famílias que apresentam tricomas secretores destaca-se Cannabaceae, que é amplamente estudada por produzir compostos psicoativos e outros utilizados como aromatizantes de cerveja. Recentemente alguns gêneros pertencentes à Ulmaceae foram inseridos em Cannabaceae, como Celtis e Trema. Tais gêneros são os mais numerosos em espécies da família. Considerando que tricomas secretores são os principais sítios de produção de substâncias de interesse econômico, e que são amplamente utilizados como caráter de valor taxonômico, o presente trabalho comparou a distribuição e morfologia de tricomas secretores de duas espécies de Cannabaceae (Celtis pubescens e Trema micrantha) e três espécies afins de Ulmaceae (Ampelocera glabra, Phyllostylon rhamnoides e Ulmus parvifolia). Os dados foram comparados aos existentes na literatura e discutidos em um contexto sistemático. Os tricomas secretores de Trema micranta foram, ainda, analisados em detalhe quanto à ontogenia, análise química do exsudato (in situ e direto) e ultraestrutura. Para tal, amostras de folhas e flores (pistiladas e estaminadas) foram coletadas, fixadas e processadas para análise de microscopia de luz, eletrônica de varredura e de transmissão. Foram encontrados cinco morfotipos diferentes nas espécies estudadas. C. pubescens e T. micrantha apresentaram tricomas secretores capitados e filiformes, que diferiram quanto ao pedúnculo, unisseriado em C. pubescens e bisseriado em T. micrantha. As três espécies de Ulmaceae apresentaram um único morfotipo (capitado com pedúnculo unicelular). Os tricomas de T. micranta iniciam o desenvolvimento com uma divisão anticlinal, semelhante ao que ocorre em Cannabis sativa. Seus tricomas secretam terpenos, alcaloides e compostos fenólicos. Testes químicos comprovaram a presença de alcaloides e os indicadores de canabinoides sugerem que T. micrantha apresenta potencial para produção desses compostos. A morfologia dos tricomas encontrados nas espécies de Cannabaceae é diferente da observada nas espécies de Ulmaceae, o que apoia a atual circunscrição destas famílias. A diversidade morfológica e de termos utilizados torna difíceis a classificação e comparação entre os tipos de tricomas secretores, sendo necessários esforços no sentido de padronizar a caracterização destas estruturas secretoras, em especial nas famílias que compõem o clado urticoide. / Secretory trichomes are epidermal appendages that are present in most plants performing various functions, among them the defense against herbivory. Cannabaceae comprises plants covered with secretory trichomes, and is a well-known family for producing psychoactive compounds and others used as beer flavorings. Recently some genera belonging to Ulmaceae were inserted into Cannabaceae, such as Celtis and Trema, the species-richest genera of the family. As the secretory trichomes are the main plant source of economically important substances and are widely used as taxonomic markers, the present study compared the distribution and morphology of secretory trichomes of two species of Cannabaceae (Celtis pubescens and Trema micrantha) and three related species of Ulmaceae (Ampelocera glabra, Phyllostylon rhamnoides and Ulmus parvifolia). The data were compared to those in the literature and discussed in a systematic context. The secretory trichomes of Trema micranta were also analyzed in detail regarding ontogeny, histolocalization of substances and ultrastructure. For this, samples of leaf and flower (pistillate and staminate) were collected, fixed and processed for analyses of light microscopy, scanning electron microscopy and transmission electron microscopy. For T. micranta chemical tests in situ and direct were carried out; in addition, samples were prepared for ultrastructural study in transmission electron microscopy. Five different morphotypes of secretory trichomes were found in the species studied. C. pubescens and T. micrantha exhibited capitate and filiform secretory trichomes that differed in the stalk, uniseriate in C. pubescens and biseriate in T. micrantha. The three species of Ulmaceae had a single morphotype (capitate with a unicellular stalk). The trichomes of T. micranta originate of a first anticlinal cell division, similar to what occurs in Cannabis sativa. They secrete terpenes, alkaloids and phenolic compounds. Chemical tests have confirmed the presence of alkaloids and cannabinoid indicators suggest that T. micrantha is a putative species for the production of these compounds. The morphology of the trichomes found in the species of Cannabaceae is different from that observed in the species of Ulmaceae, which supports the current circumscription of these families. The diversity of morphology and terms employed makes it difficult to classify and compare the types of secretory trichomes. In this sense, efforts are needed to standardize the characterization of these secretory structures, especially in the families that comprise the urticalean rosids.

Orientadora: Profa. Dra. Káthia Maria Honório / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Ciência & Tecnologia - Química, 2014. / Polimeros de impressao molecular (MIPs) sao materiais sinteticos que possuem sitios de reconhecimento molecular especificos para determinado analito de interesse (molecula molde), e tem sido empregados para a pre-concentracao e extracao em amostras complexas, considerando a maior seletividade em relacao aos sorventes convencionais empregados na extracao em fase solida. A escolha dos reagentes utilizados na sintese de um MIP deve ser criteriosa, a fim de que sejam criados sitios de ligacoes especificos. Metodos computacionais de Quimica Teorica podem ser empregados para racionalizar o planejamento de MIPs, por intermedio do estudo de parametros fisico-quimicos das moleculas envolvidas e as interacoes que ocorrem no sistema de pre-polimerizacao. Com a utilizacao de metodos de quimica quantica, foi objetivo desse trabalho o estudo previo das interacoes entre as moleculas moldes e os possiveis reagentes empregados na sintese de MIPs, como forma de predicao das melhores interacoes que promovam um MIP de desempenho ideal. O estudo teorico foi direcionado para a molecula de ¿¢9-tetrahidrocanabinol (¿¢9-THC), substancia presente na planta Cannabis sativa e que e a substancia ilicita mais produzida e consumida mundialmente, e seu principal metabolito de excrecao urinario, o 11-nor-9-carboxi-¿¢9-THC (THC-COOH). A simulacao computacional foi realizada utilizando a Teoria do Funcional da Densidade (DFT), e a metodologia envolveu a comparacao das energias de interacao (¿¢E) dos adutos de pre-polimerizacao entre a molecula molde e os reagentes de sintese. Com os resultados das simulacoes, verificou-se que as melhores interacoes ocorrem quando o monomero utilizado tem caracteristica acida, como o acido acrilico e o acido metacrilico; e que o solvente mais adequado para a sintese sao os que apresentam baixa constante dieletrica, como o cloroformio e o tolueno, por interferirem menos na formacao do complexo de interacao entre a molecula molde e o monomero na etapa de pre-polimerizacao. Detalhes das interacoes existentes entre as moleculas do meio reacional tambem foram analisadas e forneceram informacoes sobre a possivel competicao entre as moleculas no acesso aos sitios de interacao das moleculas moldes, informacao crucial para obtencao de MIPs seletivos e de grande afinidade a molecula molde desejada. A partir das predicoes do estudo computacional, os MIPs de THC-COOH foram sintetizados com os monomeros indicados, juntamente com o polimero nao impresso (NIP), em alguns dos solventes simulados (agua, acetonitrila, metanol e agua), para avaliacao da interferencia do solvente na eficiencia do MIP obtido. Foi realizada a analise dos MIPs por espectroscopia vibracional na regiao do infravermelho, e avaliada as bandas de absorcao nas regioes dos grupos C=O e O-H, para analise da formacao de interacoes por ligacao de hidrogenio. Concluiu-se, portanto, que sem substituir os ensaios experimentais, a abordagem computacional pode ser utilizada como uma ferramenta preliminar e complementar a selecao experimental. / Molecularly imprinted polymers (MIPs) are synthetic materials with specific sites of molecular recognition for a given analyte of interest (template molecule), and have been used for the extraction and pre-concentration in complex samples, considering the higher selectivity presented in relation to the sorbent employed in conventional solid phase extraction. The choice of the reagents used in the synthesis of a MIP must be chosen carefully, so that site-specific linkages are created. Computational methods in Theoretical Chemistry can be used to rationalize the planning of MIPs through the study of physico-chemical parameters of the molecules involved and the interactions that occur in the pre-polymerization system. Using quantum chemical methods, the aim of this study was a preliminary investigation of the interactions between the template molecules and the possible reagents used in the synthesis of MIPs, as a way to predict the best interactions that promote MIPs with optimal performance. The theoretical study was directed to the molecule of Ä9-tetrahydrocannabinol (Ä9-THC), present in the plant Cannabis sativa, and that is the illicit substance most widely produced and consumed globally, as well as its major metabolite urinary excretion, 11 -nor-9-carboxy-Ä9-THC (THC-COOH). The computational simulation was performed using the Density Functional Theory (DFT), and the methodology involved the comparison of the interaction energies (ÄE) of adducts in pre-polymerization between the template molecule and reagents for synthesis. From the results of the simulations, it was found that the best interactions occur when the monomer has acid characteristic, such as acrylic acid and methacrylic acid; and that the most suitable solvent for synthesis are those with low dielectric constant such as toluene and chloroform, by interfering less in the formation of complex interaction between the template molecule and monomer in the pre-polymerization step. Details of the existing interactions between the molecules of the reactional medium were analyzed and provided information about the possible competition between the molecules in the access to the interaction sites of the template molecules, which is a crucial information for obtaining selective MIPs and with high affinity to the template molecule desired. From the computational predictions obtainde in this study, the MIPs of THC-COOH was synthesized with the indicated monomers, and also a non-imprinted polymer (NIP), considering some of simulated solvents (water, acetonitrile, methanol and water) for evaluation of the interference of solvent in the efficiency of the MIP obtained. Analyses on the formed MIPs were performed by spectroscopy in the infrared region, and the absorption bands in the regions of the groups C=O and OH were evaluated with the aim of analysing the formation of hydrogen bond interactions. Therefore, it is possible to conclude that, without replacing the experimental trials, the computational approach can be used as a preliminary and complementary tool to experimental selection.

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