La flore buccale abrite plusieurs microorganismes qui vivent en équilibre homéostatique avec l'hôte. Cette flore n'est pas pathogène, mais elle peut le devenir en cas de rupture de cet équilibre, c'est le cas des candidoses buccales. Dans une telle situation, le recours aux médicaments devient nécessaire. Cependant, les drogues dirigées contre le pathogène peuvent avoir des effets secondaires très significatifs, en plus de la résistance que peuvent développer les microorganismes contre les agents antifongiques. Dans un tel contexte, le développement de nouvelles molécules pour contrôler l'invasion de Candida albicans (C. albicans) est nécessaire. Nous avons porté notre intérêt sur deux bactériocines utilisées dans l'industrie alimentaire pour leur pouvoir antibactérien : la nisine Z (lantibiotique) et la pédiocine PA-1 (non-lantibiotique) produites par des bactéries lactiques ou lacto-bactéries. L'objectif est d'étudier l'innocuité de ces deux bactériocines sur les cellules humaines et leur effet sur C. albicans. Pour ce faire, nous avons analysé les effets de ces deux bactériocines sur l'adhésion et la croissance des cellules épithéliales et des fibroblastes gingivaux. Puis nous avons analysé l'effet ±synergique¿ entre les bactériocines et les cellules humaines sur l'adhésion, la prolifération et la transformation de C. albicans. Nos travaux sur l'innocuité montrent que la nisine Z, à fortes concentrations, réduit l'adhésion et la prolifération des fibroblastes mais les cellules épithéliales semblent moins sensibles. En effet, le DL50 de la nisine sur les fibroblastes est d'environ 57 u.g/ml et de HOjug/ml pour les cellules épithéliales, après 72 heures. Contrairement à la nisine Z, nous avons observé pour les deux types cellulaires, une moins grande sensibilité à l'effet de la pédiocine PA-1, avec près de 80% de survie à 200 fig/ml. Pour ce qui est du potentiel antifongique, nos travaux suggèrent un effet ±synergique¿ ou plutôt additif entre les bactériocines et les cellules gingivales sur l'inhibition de l'adhésion de C. albicans et sur sa transformation, sans toutefois montrer un net effet fongicide.

Candida albicans est un champignon pouvant être pathogène pour l’humain. Il peut passer de la forme levure à la forme mycélienne selon son environnement. Cette capacité au dimorphisme a été démontrée chez l’animal comme étant un facteur de virulence important. En utilisant la technique du differential display, nous avons déterminé un certain nombre de gènes exprimés préférentiellement dans la forme mycélienne. Un de ceux-ci a été cloné et l’analyse de sa séquence a révélé une homologie de 70% avec le gène PHO89 de Saccharomyces cerevisiae, codant pour un transporteur de phosphate. Pour vérifier le fonctionnement de CaPHO89, le cadre de lecture ouvert a été cloné dans un vecteur d’expression de S. cerevisiae et transformé dans un mutant de S. cerevisiae délétant pour PHO89. La capacité de ce transformant à transporter le phosphate a été évaluée en utilisant du [32P]-orthophosphate. Les résultats obtenus ont montré que CaPHO89 peut rétablir le phénotype sauvage de S. cerevisiae, suggérant que CaPHO89 encode un transporteur de phosphate fonctionnel. / Candida albicans is a human fungal pathogen which can switch from yeast-like growth to filamentous growth depending upon its environment. The ability to grow in the filamentous form has been shown to be important for virulence in animal models. Using the differential display technique, we have identified a number of genes preferentially expressed in filamentous cells. One of them was cloned and sequence analysis revealed 70% homology with Pho89 from Saccharomyces cerevisiae, a gene encoding a phosphate transporter. To verify the function of CaPHO89, the open reading frame was cloned into an expression vector and transformed into a S. cerevisiae pho89 null mutant strain. Phosphate transport in the transformants was evaluated using [32P]-orthophosphate. The results obtained showed that CaPHO89 could restore the wild-type phenotype in S. cerevisiae, suggesting that CaPHO89 encodes a functional phosphate transporter.

La cavité buccale est la porte d'entrée de nombreux antigènes, mais elle est également le lieu d'établissement de niches microbiennes. C'est le cas de la levure dimorphique, Candida albicans, qui y réside de manière symbiotique et asymptomatique. Cependant, C. albicans est également l'agent étiologique des candidoses buccales, infections buccales communes qui se développent essentiellement chez les personnes jeunes, âgées ou immunosupprimées. Les candidoses muco-cutanées peuvent être traitées. Cependant, les antifongiques efficaces sont peu nombreux ; leur utilisation clinique est liée à des effets secondaires et à l'émergence de résistances. Ceci montre l'importance de développer de nouveaux composés antifongiques efficaces et sécuritaires. Une molécule senseur du quorum de C. albicans, le farnesol, a été découverte récemment. Cette molécule est sécrétée par C. albicans lui-même qui régule ainsi sa croissance et sa virulence. Le premier objectif de notre étude a été de montrer comment le farnesol agissait sur C. albicans et son dimorphisme (bourgeonnement), puis comment il pouvait moduler la virulence de C. albicans en agissant sur des proteinases aspartyles sécrétées (les SAPs). Nous avons montré que le farnesol contrôle la croissance de C. albicans en inhibant la formation de colonies par des modifications ultrastructurales. D'autre part, nous avons confirmé que le farnesol bloque le bourgeonnement. Enfin, nos résultats ont montré que le farnesol inhibe l'expression des SAPs, facteur de virulence de C. albicans. Par ailleurs, plusieurs études ont indiqué que l'épithélium de la muqueuse buccale, barrière anatomique importante contre les agents physiques, microbiens et chimiques, était impliqué dans le processus pro-inflammatoire via la production de cytokines. Ceci suggérerait que l'épithélium buccal joue un rôle actif dans le contrôle des infections buccales et le maintien de la relation symbiotique avec les agents microbiens, ce qui est le cas de Candida. Nous avons montré grâce à un modèle de muqueuse buccale que les cellules épithéliales buccales préviennent l'infection à C. albicans via les TLRs et que la présence de farnesol exogène favorise la défense des cellules épithéliales contre les infections à C. albicans. Ainsi, le farnesol pourrait être une nouvelle voie dans le traitement des candidoses buccales.

A estomatite por dentadura representa um processo inflamatório na mucosa oral em contato com a resina acrílica da prótese total ou parcial removível, sendo sua etiologia multifatorial, associada com fatores locais e sistêmicos, incluindo a presença de Candida albicans. O presente trabalho teve como objetivo a realização de uma análise demográfica, clínica e microscópica da candidose, associada ao uso da prótese total superior, nas formas atrófica, hiperplásica papilar e associada à hiperplasia fibrosa inflamatória. Para este fim, as amostras dos arquivos do laboratório de Anatomia Patológica do Departamento de Estomatologia - Área de Patologia - da Faculdade de Odontologia de Bauru, da Universidade de São Paulo, foram avaliadas microscopicamente, por meio das colorações de Hematoxilina e Eosina, Grocott de prata e Periodic Acid Schiffer (PAS), em comparação à mucosa normal de palato, oriunda de pacientes não usuários de prótese total ou removível superior. Foram resgatadas todas as informações contidas nas fichas clínicas correspondentes às amostras. As amostras de candidose bucal, independente do grupo, foram provenientes principalmente de indivíduos idosos, com médias variando de 51 a 60 anos, do gênero feminino e raça branca. Em alguns casos, o diagnóstico clínico da estomatite por dentadura atrófica pode ser difícil, necessitando de biópsia para confirmação. As lesões de hiperplasia papilar são removidas cirurgicamente com mais freqüência que aquelas de estomatite por dentadura atrófica, sendo geralmente reconhecidas pelo profissional clínico como hiperplasia fibrosa inflamatória. A candidose nas hiperplasias fibrosas inflamatórias não apresenta sinais clínicos exclusivos da sua presença; assim, torna-se improvável a suspeita clínica desta associação. De forma diferente da mucosa normal, microscopicamente, na maioria dos casos de candidose bucal, observaram-se revestimento epitelial hiperplásico com cristas alongadas, algumas em forma de tubo de ensaio, com freqüentes áreas de ausência de queratina, pequenos focos de reação liquenóide e de microabscessos, bem como extensas áreas de hiperplasia pseudoepiteliomatosa. Somente a hiperplasia papilar apresentou cristas epiteliais bífidas, revelando ainda maior freqüência de pérolas córneas-like e cristas em forma de tubo de ensaio, quando comparada com as outras formas de candidose bucal. O tecido conjuntivo fibroso subjacente, na candidose bucal, revelou intenso a moderado infiltrado inflamatório mononuclear predominante na lâmina própria e região perivascular. Não se observou marcação fúngica por meio das colorações especiais Grocott de prata e PAS. Assim, o diagnóstico microscópico da candidose bucal não deve depender da visualização do fungo nas camadas mais superficiais do revestimento epitelial. / Denture stomatitis is an inflammatory process affecting the oral mucosa in contact with acrylic resin of complete dentures or removable partial dentures. The disease has a multifactorial etiology, associate with local and systemic factors, including the presence of Candida albicans. The present study aimed to conduct a demographic, clinical and microscopic analysis of candidosis associated with the use of maxillary complete denture, in both atrophic and papillary hyperplastic forms and associated with inflammatory fibroepithelial hyperplasia. For that purpose, specimens from the files of the Anatomical Pathology Laboratory at the Department of Stomatology, Bauru Dental School, University of São Paulo, were microscopically reviewed in sections stained with hematoxylin and eosin (HE), Grocott\'s methenamine silver and periodic acid-Schiff (PAS), and compared to normal palatal tissues obtained from non-denture wearers. Clinical information was obtained and selected from clinical records. Regardless of the group, the specimens of oral candidosis were mainly obtained from aged individuals, with average age of 51 to 60 years, especially females and white individuals. In some cases, the clinical diagnosis of the atrophic denture stomatitis can be difficult and requires biopsy for confirmation. Papillary hyperplasia lesions are removed more frequently than atrophic denture stomatitis lesions, since they are generally recognized by clinicians as inflammatory fibroepithelial hyperplasia. Candidosis in inflammatory fibroepithelial hyperplasia does not present exclusive clinical signs of its presence; thus, clinical suspicion of this association is improbable. Different from the normal mucosa, microscopically, most cases of oral candidosis present hyperplastic epithelial lining with elongated rete pegs, some with \"test tube\" aspect, with frequent areas of absence of keratin, small foci of lichenoid reaction and microabscesses, as well as extensive areas of pseudoepitheliomatous hyperplasia. Only papillary hyperplastic lesions exhibited bifid rete pegs, besides high frequency of keratin pearls-like and long \"test tube\" rete pegs, when compared with the other forms of oral candidosis. The connective tissue underlying the oral candidosis presented moderate to intense mononuclear inflammatory infiltrate, predominantly at the lamina propria and perivascular region. Fungal hyphae and yeasts were not identified by special staining with Grocott\'s methenamine silver and (PAS). Thus, the microscopic diagnosis of oral candidosis should not depend on the visualization of fungal hyphae and yeasts at the most superficial layers of epithelial li pegs, when compared with the other forms of oral candidosis. The connective tissue underlying the oral candidosis presented moderate to intense mononuclear inflammatory infiltrate, predominantly at the lamina propria and perivascular region. Fungal hyphae and yeasts were not identified by special staining with Grocott\'s methenamine silver and (PAS). Thus, the microscopic diagnosis of oral candidosis should not depend on the visualization of fungal hyphae and yeasts at the most superficial layers of epithelial lining.

A estomatite por dentadura representa um processo inflamatório na mucosa oral em contato com a resina acrílica da prótese total ou parcial removível, sendo sua etiologia multifatorial, associada com fatores locais e sistêmicos, incluindo a presença de Candida albicans. O presente trabalho teve como objetivo a realização de uma análise demográfica, clínica e microscópica da candidose, associada ao uso da prótese total superior, nas formas atrófica, hiperplásica papilar e associada à hiperplasia fibrosa inflamatória. Para este fim, as amostras dos arquivos do laboratório de Anatomia Patológica do Departamento de Estomatologia - Área de Patologia - da Faculdade de Odontologia de Bauru, da Universidade de São Paulo, foram avaliadas microscopicamente, por meio das colorações de Hematoxilina e Eosina, Grocott de prata e Periodic Acid Schiffer (PAS), em comparação à mucosa normal de palato, oriunda de pacientes não usuários de prótese total ou removível superior. Foram resgatadas todas as informações contidas nas fichas clínicas correspondentes às amostras. As amostras de candidose bucal, independente do grupo, foram provenientes principalmente de indivíduos idosos, com médias variando de 51 a 60 anos, do gênero feminino e raça branca. Em alguns casos, o diagnóstico clínico da estomatite por dentadura atrófica pode ser difícil, necessitando de biópsia para confirmação. As lesões de hiperplasia papilar são removidas cirurgicamente com mais freqüência que aquelas de estomatite por dentadura atrófica, sendo geralmente reconhecidas pelo profissional clínico como hiperplasia fibrosa inflamatória. A candidose nas hiperplasias fibrosas inflamatórias não apresenta sinais clínicos exclusivos da sua presença; assim, torna-se improvável a suspeita clínica desta associação. De forma diferente da mucosa normal, microscopicamente, na maioria dos casos de candidose bucal, observaram-se revestimento epitelial hiperplásico com cristas alongadas, algumas em forma de tubo de ensaio, com freqüentes áreas de ausência de queratina, pequenos focos de reação liquenóide e de microabscessos, bem como extensas áreas de hiperplasia pseudoepiteliomatosa. Somente a hiperplasia papilar apresentou cristas epiteliais bífidas, revelando ainda maior freqüência de pérolas córneas-like e cristas em forma de tubo de ensaio, quando comparada com as outras formas de candidose bucal. O tecido conjuntivo fibroso subjacente, na candidose bucal, revelou intenso a moderado infiltrado inflamatório mononuclear predominante na lâmina própria e região perivascular. Não se observou marcação fúngica por meio das colorações especiais Grocott de prata e PAS. Assim, o diagnóstico microscópico da candidose bucal não deve depender da visualização do fungo nas camadas mais superficiais do revestimento epitelial. / Denture stomatitis is an inflammatory process affecting the oral mucosa in contact with acrylic resin of complete dentures or removable partial dentures. The disease has a multifactorial etiology, associate with local and systemic factors, including the presence of Candida albicans. The present study aimed to conduct a demographic, clinical and microscopic analysis of candidosis associated with the use of maxillary complete denture, in both atrophic and papillary hyperplastic forms and associated with inflammatory fibroepithelial hyperplasia. For that purpose, specimens from the files of the Anatomical Pathology Laboratory at the Department of Stomatology, Bauru Dental School, University of São Paulo, were microscopically reviewed in sections stained with hematoxylin and eosin (HE), Grocott\'s methenamine silver and periodic acid-Schiff (PAS), and compared to normal palatal tissues obtained from non-denture wearers. Clinical information was obtained and selected from clinical records. Regardless of the group, the specimens of oral candidosis were mainly obtained from aged individuals, with average age of 51 to 60 years, especially females and white individuals. In some cases, the clinical diagnosis of the atrophic denture stomatitis can be difficult and requires biopsy for confirmation. Papillary hyperplasia lesions are removed more frequently than atrophic denture stomatitis lesions, since they are generally recognized by clinicians as inflammatory fibroepithelial hyperplasia. Candidosis in inflammatory fibroepithelial hyperplasia does not present exclusive clinical signs of its presence; thus, clinical suspicion of this association is improbable. Different from the normal mucosa, microscopically, most cases of oral candidosis present hyperplastic epithelial lining with elongated rete pegs, some with \"test tube\" aspect, with frequent areas of absence of keratin, small foci of lichenoid reaction and microabscesses, as well as extensive areas of pseudoepitheliomatous hyperplasia. Only papillary hyperplastic lesions exhibited bifid rete pegs, besides high frequency of keratin pearls-like and long \"test tube\" rete pegs, when compared with the other forms of oral candidosis. The connective tissue underlying the oral candidosis presented moderate to intense mononuclear inflammatory infiltrate, predominantly at the lamina propria and perivascular region. Fungal hyphae and yeasts were not identified by special staining with Grocott\'s methenamine silver and (PAS). Thus, the microscopic diagnosis of oral candidosis should not depend on the visualization of fungal hyphae and yeasts at the most superficial layers of epithelial li pegs, when compared with the other forms of oral candidosis. The connective tissue underlying the oral candidosis presented moderate to intense mononuclear inflammatory infiltrate, predominantly at the lamina propria and perivascular region. Fungal hyphae and yeasts were not identified by special staining with Grocott\'s methenamine silver and (PAS). Thus, the microscopic diagnosis of oral candidosis should not depend on the visualization of fungal hyphae and yeasts at the most superficial layers of epithelial lining.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:56:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 parte1.pdf: 4341478 bytes, checksum: eb878149d43f55e365452357e6cb9560 (MD5) Previous issue date: 2019-12-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Objective: To evaluate the effectiveness of the gel Cymbopogon citratus (DC.) Stapf (lemon grass) in the treatment of oral candidiasis in patients weares of prosthesis, comparing the results with Daktarin® oral gel. To this end, we carried out a randomized, blinded, controlled. Methods: The sample consisted of 30 adult patients, volunteers of both sexes, who underwent clinical examination and laboratory tests (mycological) for diagnosis of oral candidiasis. Patients were randomly assigned to experimental group consisted of 20 patients who used the gel Cymbopogon citratus and control group comprised 10 patients who used Daktarin® oral gel. Both requirements were recommended for use three times daily for a period of 15 days. Clinical and mycological analysis of the oral mucosa were performed on day 1 before the start of treatment in the 8th and the 16th day after initiation of medication. Analysis was performed using descriptive statistics and applied chisquare and Kruskal-Wallis test, considering significant p <0.05. Results: In the experimental group after 15 days of treatment, 80% of patients were cured in the control group and the healing occurred in 90% of patients. Candida albicans was the most prevalent (76.6%). Conclusions: According to the results obtained in clinical research concluded that the gel base of the essential oil from leaves of Cymbopogon citratus was effective in the treatment of oral candidiasis in prosthesis users. The results are promising and indicate this as an alternative herbal treatment for oral candidiasis. / Objetivo: Avaliar a eficácia do gel de Cymbopogon citratus (DC.) Stapf (capim santo) no tratamento da candidose bucal em pacientes usuários de prótese, comparando os resultados com o Daktarin® gel oral. Para tanto, realizou-se um estudo randomizado, cego, controlado. Material e método: A amostra foi constituída por 30 pacientes adultos, voluntários, de ambos os sexos, submetidos a exame clínico e laboratorial (micológico) para diagnóstico de candidose bucal. Os pacientes foram distribuídos aleatoriamente em grupo experimental, composto por 20 pacientes que utilizaram o gel de Cymbopogon citratus e grupo controle, composto por 10 pacientes que utilizaram Daktarin® gel oral. Ambas as prescrições foram recomendadas para uso 3 vezes ao dia, durante um período de 15 dias. Avaliações clínicas e micológicas da mucosa bucal foram realizadas no 1° dia antes do início do tratamento, no 8º e no 16º dia após o início da medicação. Realizou-se análise estatística descritiva e aplicou-se teste qui-quadrado e teste kruskal-wallis, considerando significante p<0,05. Resultados: No grupo experimental, após 15 dias de tratamento, 80% dos pacientes obtiveram cura e no grupo controle a cura ocorreu em 90% dos pacientes. A Candida albicans foi a espécie mais prevalente (76,6%). Conclusões: De acordo com os resultados obtidos nessa pesquisa clínica conclui-se que o gel a base do óleo essencial das folhas de Cymbopogon citratus foi eficaz no tratamento da candidose bucal em usuários de prótese. Os resultados são promissores e indicam este fitoterápico como uma alternativa de tratamento para candidose bucal.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-28Bitstream added on 2014-06-13T20:56:27Z : No. of bitstreams: 1 rasteiro_vmc_me_sjc.pdf: 1221269 bytes, checksum: f3aeff19484ca0a9a263ca0d701959a9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo desse estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana in vitro e in vivo dos óleos essenciais de Cymbopogon citratus e Melaleuca alternifolia sobre Candida albicans. No estudo in vitro foi determinada a Concentração Inibitória Mínima (CIM) de M. alternifolia e C. citratus em culturas planctônicas de C. albicans de acordo com as normas da NCCLS. Os efeitos dos óleos essenciais também foram testados sobre biofilmes de C. albicans formados no fundo da placa de 96 poços por 48 horas. Para a realização do estudo in vivo, foram utilizados 42 camundongos imunossuprimidos por injeções de prednisolona. A indução de candidose experimental foi realizada por inoculações de C. albicans (108 células/mL) no dorso da língua dos animais e administração de tetraciclina na água de beber. A seguir, os camundongos foram tratados com 3 aplicações do óleo essencial de C. citratus, M. alternifolia ou solução fisiológica (grupo Controle) no dorso da língua. Foram realizadas coletas de amostras bucais, antes e após o tratamento, para recuperação de leveduras da cavidade bucal dos animais e contagem de UFC/mL. Após 5 dias da indução da candidose experimental, os animais foram submetidos à eutanásia para análise histológica e de microscopia eletrônica do dorso da língua. Os resultados foram analisados estatisticamente pelos testes de Tukey e Kruskal-Wallis (p ≤ 0,05). Os resultados obtidos nos testes realizados in vitro demonstraram que a CIM foi de 0,195% para M. alternifolia e menor que 0,01% para C. citratus. A redução microbiana observada nos biofilmes de C. albicans foi de 6,88 e 5,84 log, respectivamente, para M. alternifolia e C. citratus. Em relação à recuperação de C. albicans da cavidade bucal dos animais... / The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity in vitro and in vivo of essential oils of Cymbopogon citratus and Melaleuca alternifolia on Candida albicans. In vitro study was determined the minimum inhibitory concentration (MIC) of M. alternifolia and C. citratus in planktonic cultures of C. albicans according to NCCLS standards. The effects of essential oils were also tested on biofilms of C. albicans formed deep inside the 96-well plate for 48 hours. For the study in vivo, we used 42 mice immunosuppressed by injections of prednisolone. The induction of experimental candidiasis was performed by inoculation of C. albicans (108 cells / mL) on the back of the tongue of animals and administration of tetracycline in drinking water. Next, the mice were treated with three applications of the essential oil of C. citratus, M. alternifolia or saline (control group) on the back of the tongue. Samples were collected with mouth before and after treatment for recovery of yeasts from the oral cavity of animals and number of CFU / mL. 5 days after induction of experimental candidiasis, the animals were euthanized for histological and electron microscopy of the tongue. The results were statistically analyzed by Tukey's test and Kruskal-Wallis test (p ≤ 0.05). The results obtained in in vitro tests showed that the MIC was 0.195% for M. alternifolia and less than 0.01% for C. citratus. The microbial reduction observed in biofilms of C. albicans was 6.88 and 5.84 log, respectively, for M. alternifolia and C. citratus. Regarding the recovery of C. albicans from the oral cavity of animals, there was a reduction of 6.49 log for microbial M. alternifolia and 5.95 for log C. citratus. In the microscopic analysis of the tongue, there was... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2014-11-05T10:30:21Z No. of bitstreams: 2 Tese Luciano Alberto de Castro - 2013.pdf: 1800248 bytes, checksum: 271cbcb47ef9b1579e7794d1dd4e20e8 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-06T10:34:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese Luciano Alberto de Castro - 2013.pdf: 1800248 bytes, checksum: 271cbcb47ef9b1579e7794d1dd4e20e8 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-06T10:34:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese Luciano Alberto de Castro - 2013.pdf: 1800248 bytes, checksum: 271cbcb47ef9b1579e7794d1dd4e20e8 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-04-26 / Burning Mouth Syndrome (BMS) is a chronic painful condition which affects various sites in the oral cavity and is particularly common in the tongue. A process of exclusion must be used if a diagnosis of BMS is to be reached. Studies have suggested that a burning tongue in BMS patients may be caused by a candidal infection even when the tongue appears clinically normal. Aims: To make a precise diagnosis of BMS by means of anamnesis, physical examination, laboratory exams and therapeutic test and to know the clinical profile of these patients. To identify the occurrence and prevalence of Subclinical Atrophic Candidosis (SAC) in the tongue dorsum of BMS patients and to assess the effect of antifungal treatment on the burning tongue. Finally, this study aimed to evaluate the effect of clonazepam mouthwash on burning sensation of patients with final diagnosis of primary BMS. Materials and methods: All patients complaining of a burning mouth sensation were systematically evaluated over a during two-year period. Those BMS patients presenting burning in the tongue were submitted to sialometry and mycological tests. Those diagnosed with SAC received antifungal therapy based on susceptibility testing. The effects of antifungal treatment on the unstimulated salivary flow rate (SFR), colony counting and visual analogue scale (VAS) were assessed. Eighteen patients with final diagnosis of primary BMS were treated with clonazepam mouthwash. Results: Out of 54 patients, 42 (77.8%) were initially diagnosed with primary BMS and 12 (22.2%) were excluded because of local and general causative factors. The patients diagnosed with primary BMS were mainly women, with a mean age of 60.7 years, who presented tongue burning as an isolated symptom or accompanied by xerostomia, tingling or dysgeusia. Hyposalivation was detected in 30.5% of the BMS patients. Twenty-six patients (61.9%) diagnosed with BMS, and presenting burning in the tongue, were submitted to mycological tests. Culture tests indicated that 57.7% of the patients (15/26) exhibited a colony count equal to or more than 5 Candida colonies per agar plate, and were diagnosed with SAC. After a two-week antifungal regimen, there was no significant difference between pre-treatment (0.14 ml/min) and after treatment (0.13 ml/min) SFRs (P=0.706). The antifungal regimen proved effective in treating SAC, as only 3 patients showed more than 5 colonies per agar plate after treatment (P<0.001). There was a significant decrease in the mean VAS after treatment when compared with the pre-treatment rate although none of the patients showed complete remission of the burning sensation. As a general result, clonazepam mouthwash resulted in significant improvement in BMS symptomatology, since the mean VAS went from 5.56 ± 2.77 before treatment to 3.50 ±3.19 afterwards (P = 0.002, Wilcoxon Test). However, one-third of the patients did not respond to treatment. Conclusions: A systematic evaluation, which includes anamnesis and physical examination, of patients complaining of burning mouth sensation is imperative for the diagnosis of primary BMS. However, there are no international guidelines to establish which complementary tests should be used for its final diagnosis. Subclinical atrophic candidosis can often be identified in BMS patients as they may present predisposing factors for oral candidosis, such as low SFR, hyposalivation and the use of removable prostheses. Antifungal treatment improved the symptoms, but was incapable of completely eliminating the burning sensation. Topical treatment with clonazepam mouthwash resulted in significant improvement in BMS symptomatology, but not in all studied patients. / A síndrome da ardência bucal (SAB) é uma condição dolorosa crônica que pode afetar vários sítios da mucosa bucal, sendo especialmente frequente na língua. O diagnóstico da SAB deve ser realizado pelo método de exclusão. Estudos têm sugerido que a ardência lingual nos pacientes portadores de SAB pode ser causada por candidose, mesmo que a língua esteja clinicamente normal. Objetivos: Realizar diagnóstico da SAB utilizando os princípios da anamnese, exame físico, exames complementares e prova terapêutica; conhecer o perfil clínico desses pacientes; identificar a ocorrência e prevalência de Candidose Atrófica Subclínica (CAS) no dorso lingual e avaliar o efeito da terapia tópica com clonazepam nos pacientes com diagnóstico final de SAB primária. Materiais e métodos: Pacientes com queixa de ardência bucal, atendidos no período de 2 anos em um centro de referência em estomatologia na região centro-oeste, foram sistematicamente avaliados. Aqueles pacientes com SAB e apresentando ardência na língua foram submetidos à sialometria e exames micológicos. Os pacientes com diagnóstico de SAB e CAS receberam tratamento antifúngico, de acordo com o resultado dos testes de suscetibilidade. Foram avaliados os efeitos do tratamento antifúngico sobre o fluxo salivar não estimulado, a contagem de colônias de Candida e a sensação de ardência dos pacientes com SAB e CAS. E ainda, o efeito do clonazepam, na forma de colutório, sobre a sensação de ardência em pacientes com diagnóstico final de SAB primária. Resultados: Do total de pacientes avaliados (n=54), 42 (77,8%) tiveram diagnóstico inicial de SAB primária e 12(22,2%) foram excluídos devido a causas locais e gerais. Os pacientes diagnosticados com SAB primária eram formados principalmente por mulheres, com média de idade de 60,7 anos, apresentando queixa de ardência bucal isolada ou acompanhada de boca seca, formigamento e disgeusia. A hipossalivação foi detectada em 30,5% dos pacientes com SAB. Vinte e seis pacientes (61,9%) com diagnóstico de SAB e ardência na língua foram submetidos a exames micológicos. Destes, os testes de cultura indicaram que 57,7% (15/26) exibiram contagem de colônias ≥5 colônias de Candida por placa de ágar, sendo diagnosticados com CAS. Após 2 semanas de tratamento antifúngico, não foi observada diferença significativa nos valores do fluxo salivar não estimulado, antes (0,14 ml/min) e depois (0,13 ml/min) do tratamento (P=0,706). A terapia antifúngica foi eficaz para tratar a CAS, uma vez que apenas 3 pacientes exibiram contagem de colônias ≥ 5 após 2 semanas (P<0,001). Apesar de nenhum dos pacientes ter apresentado remissão total da ardência, houve redução na média da escala visual analógica numérica (EVA) de 6 para 4 (P=0,002, Teste de Wilcoxon). De modo geral, o colutório de clonazepam promoveu melhora significativa na ardência, alterando os valores médios da EVA de 5,56 ±2,77 para 3,50 ± 3.19 (P= 0,002, Teste de Wilcoxon). No entanto, um terço dos pacientes não respondeu a essa forma de terapia. Conclusões: O método sistemático de avaliação dos pacientes com ardência bucal por exclusão é essencial para o diagnóstico da SAB primária, entretanto não há padronização internacional para a escolha dos exames complementares a serem empregados. A CAS pode ser frequentemente identificada em pacientes com SAB já que muitos deles possuem fatores predisponentes para a candidose bucal, como o baixo fluxo salivar e o uso de próteses móveis. O tratamento antifúngico promoveu alívio dos sintomas, mas não foi capaz de eliminar a ardência completamente. O tratamento tópico com clonazepam promoveu melhora da sintomatologia da SAB, mas não em todos os pacientes.

Orientador: Cristiane Yumi Koga-Ito / Resumo: A crescente incidência da resistência às drogas antifúngicas tornou-se um grande desafio para áreas médica e odontológica, fazendo com que a busca por métodos de tratamento alternativos ou em combinação com as já utilizadas sejam urgentemente necessárias. O objetivo deste projeto foi avaliar os efeitos da associação entre o plasma frio em pressão atmosférica e antifúngicos poliênicos convencionais utilizados no tratamento tópico da candidose bucal. Para tanto, foram realizados: a) Determinação das concentrações inibitórias dos antifúngicos poliênicos nistatina e anfotericina B e do plasma frio em pressão atmosférica sobre biofilmes de C. albicans; b) Avaliação do efeito dos tratamentos isolados e associados em condições/concentrações sub-inibitórias para fins de comparação e c) Avaliação dos diferentes protocolos de aplicação dos tratamentos, visando a obtenção da condição experimental mais eficaz para o controle do biofilme fúngico. Os dados de unidades formadoras de colônia foram comparados estatisticamente entre os grupos por One-way ANOVA e post hoc Tukey, com nível de significância de 5%. A partir dos resultados obtidos, pode-se concluir que o jato de plasma apresentou efeito antifúngico similar quando aplicado isoladamente ou em associação com nistatina e anfotericina B. Ainda, foi possível concluir que o jato de plasma frio apresenta efeito antifúngico mais eficaz do que os tratamentos dos biofilmes utilizando nistatina e anfotericina B no tempo de 5 minutos. / Abstract: The increasing incidence of antifungal resistance represents a great challenge in the medical areas and Dentistry. For this reason, the search for alternative methods or combination with the conventional ones is urgently necessary. The aim of this project is to evaluate, the effects of association between atmospheric pressure cold plasma and conventional polyene antifungals used for the treatment of oral candidiasis will be studied. With this purpose, the following methodologies were be used: a) To determine the inhibitory concentrations of the polyene antifungals nystatin and amphotericin B and cold plasma on C. albicans biofilms, b) To evaluate the combination of treatments in subinhibitory conditions, including isolated treatments for comparison purposes and c) To evaluate different protocols of treatment application, aiming to obtain the most effective protocol against fungal biofilm. Data was compared by One-way ANOVA and post hoc Tukey, with a significance level of 5%. Considering the results, it could be concluded that cold plasma showed similar effects when applied alone or in association to nystatin and amphotericin B. Cold plasma showed more effective antifungal effect on biofilms when compared to nystatin and amphotericin B, after 5 min exposure. / Mestre

La candidose oropharyngée (COP) constitue l’infection fongique opportuniste la plus fréquente chez les patients infectés au VIH-1. Malgré la profonde immunosuppression causée par le VIH-1, l’infection à Candida albicans demeure confinée au niveau de la muqueuse buccale sans dissémination aux organes profonds. La souris transgénique (Tg) CD4C/HIVMut exprimant le génome tronqué du VIH-1 présente, suite à l’inoculation orale de C. albicans, une COP chronique reproduisant fidèlement l’infection chez les patients séropositifs. Cette souris Tg a donc été utilisée afin de déterminer si les macrophages contribuent au confinement de C. albicans à la muqueuse buccale. Cette étude a permis de démontrer que i) les macrophages sont recrutés aux muqueuses buccale et gastrique en réponse au champignon malgré l’expression du transgène, ii) les macrophages de ces souris Tg présentent une polarisation vers un phénotype d’activation alternative et iii) la production de monoxyde d’azote par les macrophages des souris Tg n’est pas requise pour limiter la prolifération de Candida à la muqueuse buccale et pour restreindre sa dissémination aux organes profonds. Les macrophages ne semblent donc pas directement responsables de l’établissement de l’infection chronique à Candida chez la souris Tg CD4C/HIVMut. / Oropharyngeal candidiasis (OPC) is the most frequent opportunistic fungal infection among HIV-infected patients. Despite the profound immunosuppression caused by HIV-1, Candida albicans infection is limited to the oral epithelium and rarely disseminates to deep organs. The CD4C/HIVMut transgenic (Tg) mice, which expresses the truncated HIV-1 genome, developed a chronic OPC after oral inoculation with C. albicans that closely reproduces infection in seropositive patients. Here, we used this Tg mouse to investigate the contribution of macrophages in limiting candidiasis to the oral mucosa. This study shows that i) macrophages are recruited to the oral and gastric mucosa in response to C. albicans despite transgene expression, ii) the macrophages of this Tg mouse exhibited a polarization toward an alternatively activated phenotype and iii) nitric oxide production by these macrophages is dispensable for limiting chronic oral carriage and for preventing systemic dissemination of the fungi in these Tg mice. Overall, these result indicate that macrophage do not directly determine the susceptibility to chronic carriage of Candida in these CD4C/HIVMut Tg mice.