LEAL, S. R. M. D. Estudo genotóxico e carcinogênico da exposição ao pó de cromo trivalente em Rattus norvegicus. 2017. 106 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Farmacologia Pós-Graduação (posgfarmacologia@gmail.com) on 2017-11-21T12:41:30Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_srmdleal.pdf: 2389234 bytes, checksum: c1f02d6da3ec53d5024297a33ac5fca8 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-11-21T13:20:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_srmdleal.pdf: 2389234 bytes, checksum: c1f02d6da3ec53d5024297a33ac5fca8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-21T13:20:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_srmdleal.pdf: 2389234 bytes, checksum: c1f02d6da3ec53d5024297a33ac5fca8 (MD5) Previous issue date: 2017-08-22 / Chromium-like metals are naturally occurring elements and in view of their multiple industrial, domestic, agricultural, medical and technological applications have led to their widespread distribution, raising concerns about their potential effects on human health and environment. OBJECTIVE: To evaluate the possible genotoxic and carcinogenic effects of exposure of male Rattus norvegicus to atmospheric trivalent chromium powder. METHODS: Male Rattus norvegicus were divided into acute exposure groups (250 and 500 μg/m3 for 8h, n=5/group) and subchronic (500 μg/m3, 1h30min/day for 45 days, n=8/group) to atmospheric trivalent chromium powder. As negative control group, animals were treated with dH2O 10 mL/kg (acute exposure) and exposed to filtered air (subchronic exposure); and as a positive, animals treated with cyclophosphamide 50 mg/kg, i.p. (acute exposure). At the end of the acute treatment, the comet assay was performed in peripheral blood and tests of micronuclei and chromosomal aberrations in bone marrow. At the end of the subchronic exposure period, histopathological analyzes of the pulmonary and hepatic tissues were performed. RESULTS: Acute exposure to trivalent chromium powder (250 and 500 μg/m3) induced (p<0.05) genotoxic damage to rat lymphocyte DNA by analysis of % of DNA in the tail, tail length and TailMoment. Mutagenic effects were also evidenced by the elevation of the micronucleus frequency in polychromatic erythrocytes, only for the group exposed to 500 μg/m3, compared to the negative control. In addition, acute treatment (500 μg/m3) induced a prominent increase in the number of chromosomal aberrations, especially dicentric chromosomes, chromosomal rings and chromosome fragments, compared to the non-exposed group. Histopathological analyzes of the subchronic exposed group revealed in the lung tissue metaplasia and epithelial desquamation in the bronchi and alveoli, accompanied by a focus of inflammatory activity in the alveoli and formation of granulomas. In hepatic tissue, mild or moderate hepatocyte lesions were observed, showing leukocyte infiltration, hydropic degeneration and/or necrosis and apoptotic hepatocytes. CONCLUSION: The data from the present study prove that exposure to atmospheric trivalent chromium powder may induce genotoxic events to cellular DNA, which in turn provoke genomic instability, which are determinant for the carcinogenesis processes. / Os metais, a exemplo do cromo, são elementos que ocorrem naturalmente e em face de suas múltiplas aplicações industriais, domésticas, agrícolas, médicas e tecnológicas levaram à sua ampla utilização, suscitando preocupações quanto aos seus potenciais efeitos na saúde humana e no meio ambiente. OBJETIVO: Avaliar os possíveis efeitos genotóxicos e carcinogênicos da exposição de Rattus norvegicus machos ao pó de cromo trivalente atmosférico. METODOLOGIA: Rattus norvegicus machos foram distribuidos em grupos de exposição aguda (250 e 500 µg/m3 por 8h, n=5/grupo) e subcrônica (500 µg/m3, 1h30min/dia durante 45 dias, n=8/grupo) ao pó de cromo trivalente atmosférico. Compuseram o grupo controle negativo, animais tratados com água destilada (exposição aguda) e expostos ao ar filtrado (exposição subcrônica); e como positivo, animais tratados com ciclofosfamida 50 mg/kg, i.p (exposição aguda). Ao final do tratamento agudo foram realizados o ensaio cometa em sangue periférico e testes de micronúcleos e aberrações cromossômicas em medula óssea. Ao final do período de exposição subcrônica foram realizadas análises histopatológicas dos tecidos pulmonar e hepático. RESULTADOS: A exposição aguda ao pó de cromo trivalente (250 e 500 µg/m3) induziu (p<0,05) danos genotóxicos ao DNA de linfócitos de ratos por meio da análise do % de DNA na cauda, comprimento da cauda e TailMoment. Foram também evidenciados efeitos mutagênicos, pela elevação da frequência de micronúcleos em eritrócitos policromáticos, apenas para o grupo exposto à 500 µg/m3, comparado ao controle negativo. Além disso, o tratamento agudo (500 µg/m3) induziu aumento proeminente do número de aberrações cromossômicas, especialmente do tipo cromossomos dicêntricos, anéis cromossômicos e fragmentos de cromossomos, comparado ao grupo não exposto. As análises histopatológicas do grupo exposto de forma subcrônica revelaram no tecido pulmonar metaplasia e descamação epitelial em brônquios e alvéolos, acompanhados de foco de atividade inflamatória em alvéolos e formação de granulomas. No tecido hepático foram evidenciadas lesões discretas ou moderadas em hepatócitos, que exibiram infiltração de leucócitos, degeneração hidrópica e/ou necrose e hepatócitos apoptóticos. CONCLUSÃO: Os dados do presente estudo demonstraram que a exposição ao pó de cromo trivalente atmosférico induz eventos genotóxicos ao DNA celular, que por sua vez suscitam instabilidade genômica, as quais são determinantes para os processos de carcinogênese.

Orientador: Noeme Sousa Rocha / Banca: Maria de Fátima Rodrigues Moutinho Gärtner / Banca: Alaor Aparecido de Almeida / Banca: Sheila Canevese Rahal / Banca: Júlio Lopes Sequeira / Resumo: O comportamento biológico altamente metastático e localmente agressivo é marca dos tumores ósseos malignos do cão, sua importância deve-se à dificuldades na conduta terapêutica. Para testar a hipótese, o trabalho se propôs a investigar a Cox2, proteína alvo para tratamento, com identificação e quantificação dos marcadores da proliferação: Ki-67; apoptose: caspase-3, p53, Bcl-2 e Bax; invasão: MMP-2 e MMP-9; e formação de vasos: VEGF. Cinco cães com suspeitas clínicas e radiológicas, e posterior diagnóstico citopatológico e histopatológico de osteossarcoma de ocorrência espontânea, que foram submetidos à cirurgia. Obtive-se de cada animal o isolamento e caracterização dos cultivos primários. Os diferentes cultivos foram expostos a inibidor seletivo da Cox2, o celecoxibe, no qual houve diferença (p ≤ 0,05) para os cultivos Cox2 positivos em relação aos negativos, com maior indução à necrose. Em 72h observou-se maior porcentagem de células vivas, menor de células em apoptose e maior de células em necrose em relação aos grupos de 24h e 48h. Houve tendência (p=0,08) na redução da porcentagem de células em necrose para os grupos de 100M.L-1 quando comparados aos grupos de 10M.L-1. Independente do método, os fatores que induzem crescimento vascular, proliferação, morte e invasão, inerentes as etapas da carcinogênese, são complexos Não foi possível determinar o papel individual de cada um destes fatores. A metodologia empregada se mostrou eficaz para determinar o padrão histológico das amostras. Logo, o cultivo primário se comportou como modelo ideal para estudo do OSA, visto que suas características de agressividade tumoral não se perderam quando comparados aos métodos citados / Abstract: A high metastatic behavior and site aggressiveness are common features of bone malignant tumors in the dog and they are important owing to their therapeutic difficulties. The objective of this study was to validate such hypothesis by investigating the Cox2 (therapy's target protein) via the identification and quantification of markers for proliferation (Ki-67), apoptosis (caspase-3, p53, Bcl-2 and Bax), invasion (MMP-2 and MMP-9) and vessel formation (VEGF). Five dogs diagnosed as having spontaneous osteosarcoma (clinical, radiological, cytopathological and histopathological diagnosis) underwent tumor removal surgery and it was isolated and characterized the primary culture of each animal. All cultures were exposed to a Cox2 selective inhibitor named celecoxibe. There was difference (p ≤ 0,05) between Cox2 positive cultures and Cox2 negative ones. The positive ones presented higher necrosis induction. The 72h group presented higher percentage of live cells and cells undergoing necrosis when compared to the 24h and 48h groups. Nevertheless, the 72h group presented lower percentage of cells in apoptosis. Cells undergoing necrosis tended be in a lower percentage (p=0,08) for the 100M.L-1 groups when compared to the 10M.L-1. Regardless of methodology, the factors that induce vascular growth, proliferation, death, and invasion in different phases of the carcinogenesis are complex. It was no yet possible to determine the individual role from each of these factors. The methodology applied in this experiment was efficient in determining the histological standard of these samples. Hence, the primary culture may be used as an ideal model for the OSA study as the tumor aggressive characteristics were not lost when compared to the previously mentioned methods / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2014. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2014-10-16T17:52:23Z No. of bitstreams: 1 2014_RafaelaSalgadoFontenele.pdf: 2451245 bytes, checksum: d7204757e42ab3fbfadafd3651c181fd (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-10-16T17:53:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_RafaelaSalgadoFontenele.pdf: 2451245 bytes, checksum: d7204757e42ab3fbfadafd3651c181fd (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-16T17:53:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_RafaelaSalgadoFontenele.pdf: 2451245 bytes, checksum: d7204757e42ab3fbfadafd3651c181fd (MD5) / O câncer de próstata é a segunda neoplasia mais frequente em homens no mundo e também no Brasil. Os fatores de risco mais consolidados para o seu desenvolvimento são a idade avançada, histórico familiar e fatores ambientais. Um dos fatores ambientais mais estudados é a inflamação, que pode ser desencadeada por agentes infecciosos, hábitos alimentares, mudanças hormonais, alterações fisiológicas como refluxo de urina ou traumas físicos. Entretanto, em alguns casos, amostras histopatológicas da próstata podem apresentar infiltrado inflamatório sem motivo aparente. Neste contexto, a proposta foi avaliar o papel dos mediadores inflamatórios presentes no microambiente inflamatório tumoral e a sua relação com a dinâmica celular do câncer de próstata. Para simular o microambiente inflamatório tumoral, foi utilizado meio condicionado de células mononucleares de sangue periférico humano, estimuladas ou não com moduladores inflamatórios, nas linhagens celulares de câncer de próstata DU145 e LNCaP. Das citocinas avaliadas, foi detectada a secreção de IL-1β e IL-6. A secreção de IL-1β indica que há formação do inflamassoma e ativação de caspase1. Observou-se aumento da expressão do receptor NLRP3 nas linhagens celulares DU145 e LNCaP e também aumento ou diminuição na clivagem de PARP1 dependendo do estímulo inflamatório. Esses dados juntamente com a observação de fragmentação de DNA, indicam que pode estar ocorrendo morte celular por piroptose. O estímulo inflamatório também levou à modulação da expressão de PPAR-γ nas linhagens tumorais, no entanto essa modulação parece não estar correlacionada a nenhum dos outros eventos observados. Quanto às propriedades tumorais, observou-se após estímulos inflamatórios um aumento na população de células tronco tumorais na linhagem DU145 e aumento de células CD44+/CD24+ na linhagem LNCaP, o que indica um maior potencial metastático nessas células. Foi observado também, uma redução da taxa de proliferação celular apenas na linhagem LNCaP e não foram identificadas mudanças significativas na dinâmica do ciclo celular em ambas as linhagens estudadas. Com base nestes resultados podemos sugerir que o microambiente inflamatório exerce um papel regulatório nas linhagens tumorais de próstata DU145 e LNCaP. Esse processo parece estar relacionado à ativação do inflamassoma e consequente secreção IL-1β aumentando a população de células tronco tumorais, o que está diretamente relacionado com o agravo da doença. Desta forma nossos dados sugerem que os processos inflamatórios no câncer da próstata podem levar a eventos de impacto negativo para os portadores da doença, favorecendo fenótipos associados à metástase. Por outro lado, nossos resultados também mostram um provável horizonte a ser explorado no tratamento do câncer de próstata com o uso de agentes anti-inflamatórios adjuvantes aos tratamentos tradicionais. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Prostate cancer is the second leading cause of cancer in men worldwide and also in Brazil. The most well known risk factors for the development of this cancer are advanced age, family history and environmental factors. Inflammation is one of the most studied environmental factors and can be triggered by infections, dietary factors, hormonal changes and others environmental factors such as physical trauma or urine reflux. However, in some cases, histopathological prostate cancer samples can exhibit immune infiltrate without any apparent reason. In this context, our proposal was to evaluate the role of inflammatory mediators observed in the inflammatory tumor microenvironment and its relationship with the prostate cancer cell dynamics. To simulate the inflammatory tumor microenvironment, conditioned medium of human peripheral blood mononuclear cells stimulated or not with inflammatory modulators was used. From the cytokines evaluated, the secretion of IL-1β and IL-6 was detected. The secretion of IL-1β indicates inflammasome assemble and caspase1 activation. We observed increased expression of NLRP3 receptor in DU145 and LNCaP cells and also increase or decrease in PARP1 cleavage depending on the inflammatory stimuli. These data plus the DNA fragmentation detected, indicates that cell death may be occurring by pyroptosis. The inflammatory stimuli also led to modulation of PPAR-γ expression in the prostate cancer cell lines, however this modulation does not appears to be correlated with any of the others analyzed properties. Regarding the tumor properties, after inflammatory stimuli it was observed a population increase of cancer stem cells from DU145 and CD44+/CD24+ phenotype increase in LNCaP cells, which indicates an amplified metastatic potential in these cells. It was also observed in LNCaP, a reduction in cell proliferation rates and no significant changes were identified in the cell cycle dynamics from both cell lines studied. Based on these results we can suggest that the inflammatory microenvironment plays a regulatory role in prostate cancer cell lines. This process seems to be related to the inflammasome activation and consequent IL-1β secretion leading to increased cancer stem cells population, which is directly related to a poor prognostic for this disease. Thus our data indicated that inflammatory processes in prostate cancer might lead to adverse events with negative disease impact for patients, favoring phenotypes associated with metastasis. Furthermore, indirectly our results also suggest that the use of anti-inflammatory drugs as adjuvants to traditional treatments for prostate cancer may improve the patient’s prognostic.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-20T17:46:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Paulo Biblioteca.pdf: 5289982 bytes, checksum: 296199c66ec4fbabe54d4a6992960ca7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-20T17:46:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Paulo Biblioteca.pdf: 5289982 bytes, checksum: 296199c66ec4fbabe54d4a6992960ca7 (MD5) Previous issue date: 2014-08-28 / O imiquimode é uma droga imunomoduladora que tem sido empregada no tratamento de neoplasias cutâneas. Sua ação em carcinoma oral não está bem definida. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos do imiquimode, associado ou não ao LASER de baixa intensidade λ(808nm), em carcinomas orais induzidos quimicamente em camundongos. Vinte animais foram induzidos a carcinogênese através do N-óxido de 4-nitroquinoleína (4NQO) na água de beber. Após 16 semanas, foram divididos aleatoriamente em quatro grupos, com cinco camundongos cada. Os animais do grupo 1 (controle positivo) não receberam intervenção. No grupo 2 (Laser) os amimais foram irradiados com LASER de baixa intensidade (λ808nm), 12 aplicações em dias alternados. No grupo 3 (imiquimode) os animais receberam 12 aplicações de imiquimode creme em dias alternados. Já os animais do grupo 4 receberam as 12 aplicações do imiquimode seguidas da irradiação com o LASER. Ao final do tratamento os animais foram submetidos a eutanásia e as amostras encaminhadas para estudo histológico através de microscopia. Os resultados demonstraram a presença de tumores malignos em todos os grupos, tendo o G3 os maiores índices 100% e o G1, G2 e G4 60%. Além disso, segundo o grau histológico, o G3 apresentou diferença estatisticamente significante superior ao G1 (p=0,022). Neste trabalho, o tratamento com imiquimode potencializou o desenvolvimento dos carcinomas e o LASER estimulou a proliferação de células malignas. A associação do imiquimode com o LASER necessita de maiores investigações futuras. / Imiquimod is a drug used in cutaneous neoplasics treatment. Its mechanism of action in oral carcinoma is not well defined. The aims of this study were to evaluate the potential of 4- nitroquinoline 1-oxide (4NQO) to induce cancer, as well as, to investigate the effects of imiquimod and laser treatments applied to such lesions. 20 mice were randomly divided into four groups (n=5) and cancerous lesions induced with a 4NQO in drink water solution. In Group 1mice (control) lesions were not subjected to any form of treatment. In Group 2, the laser group, lesions were irradiated with a low density laser beam ((λ808nm) following the same protocol used for group 2. In Group 3, they were treated with 12 applications of imiquimod cream, administered locally on alternate days.In Group 4 mice, lesions were initially treated with imiquimod (12 applications) followed by laser irradiation. 2 days post-treatment, the mice were euthanized, dissected and tissue samples subjected to histological analysis by optical microscopy. The presence of malignant lesions was observed in all groups with a higher prevalence in Group 3 (100%) followed by Groups 1, 3 and 4 (60%). The 4NQO was effectiv in induce experimental oral carcinogenesis. Also, when compared to those of Group 1, Group 3 lesions were also of a higher histological grade (p=0.022) . These results suggest both that imiquimod does not reduce the occurence of SCCs and that laser treatment increased malignant cell proliferation. Additional atudies are needed for further clarification of the effects of combined imiquimode /laser treatment.

Made available in DSpace on 2018-08-01T21:35:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10018_Dissertação_Leonardo Oliveira Trivilin.pdf: 1983897 bytes, checksum: 051b7b600c586ff7e4d2338ee991af31 (MD5) Previous issue date: 2016-05-19 / O tabagismo é um fator de risco para o desenvolvimento de câncer colorretal e pode interferir na expressão de proteínas envolvidas na progressão tumoral, prognóstico e resposta terapêutica. Assim, objetivou-se estudar a expressão de PHD3, HIF1-&#945; e SOD1, bem como resposta a radioterapia em modelo experimental para câncer colorretal tabagista. Utilizou-se 53 ratos Wistar, machos jovens, pesando em média 181,35g (±18,7g). Cinco animais foram mantidos como controle negativo DMH-/tabaco- (G0). Induziu-se carcinogênese colorretal com DMH durante cinco semanas, em 48 animais, que foram divididos em grupos experimentais contendo 12 animais cada: grupo DMH+ (G1), grupo DMH+/radioterapia (G2), grupo DMH+/tabaco+ (G3) e grupo DMH+/tabaco+/radioterapia (G4). A exposição dos grupos G3 e G4 à fumaça do cigarro ocorreu em câmara de inalação equipada com puff de fumaça, e correspondeu a 12 cigarros/dia divididos em dois turnos de exposição de 60 minutos cada, durante 143 dias. Na 21ª semana de experimento os animais dos grupos G2 e G4 foram submetidos à três sessões de radioterapia na dose de 700 cGy cada, totalizando 2500 cGy. Na 22ª semana, os animais foram eutanasiados para a retirada das lesões acima de 0,1 centímetro em sua maior porção, que foram fixadas, processadas histologicamente e coradas com Hematoxilina-eosina para diagnóstico. Selecionou-se as amostras classificadas como adenocarcinoma tubular (G1, G2, G3 e G4) e mucosa normal (G0) para a aplicação da técnica imunohistoquímica para as proteínas PHD3, HIF1-&#945;, SOD1 e Caspase 3 clivada. A resposta à radioterapia foi obtida por meio do índice apoptótico das amostras pertencentes aos grupos G2 e G4. No grupo G1 encontrou-se lesões displásicas, benignas e malignas, inflamação moderada a severa e pleomorfismo moderado a severo. No grupo G3 encontrou-se lesões displásicas e malignas, inflamação branda a moderada e pleomorfismo brando a moderado. A PHD3 foi subexpressa nos grupos G1, G3 e G2, sendo mais expressa no grupo G4 (p=0,0011). A HIF1-&#945; foi menos expressa no grupo G1 (p=0,0005) e após radioterapia aumentou sua expressão nesse grupo, em relação aos outros. A SOD1 foi mais expressa no grupo G1, e após radioterapia no grupo G4 (p=0,005). O índice apoptótico foi significativamente maior no grupo G4 (p=0,0289). Neoplasias malignas predominaram no modelo experimental de câncer colorretal exposto à fumaça do cigarro indicando sua utilização em estudos prognósticos e sobrevida de pacientes tabagistas, pelo uso de ferramentas moleculares, e que a subexpressão de PHD3, a superexpressão de HIF1-&#945; e níveis de expressão de SOD1 abaixo daquele de neoplasia de animais não expostos, culminaram com melhor resposta radioterápica. Palavras-chave: carcinogênese, neoplasia, tabaco, biomarcadores, cólon e reto

Orientador: Nelson Adami Andreollo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T11:32:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sallet_JoseAfonso_M.pdf: 7029934 bytes, checksum: dd808db6eacd46ee33400f8065528e3b (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Esta pesquisa refere-se ao estudo da histogênese do carcinoma espidermóide do esôfago. Para tal foi utilizado como modelo experimental o rato WISTAR ingerindo o carcinógeno dietilnitrosamina (DEN) na dose de 10mglkg de peso. Os animais foram divididos em gaiolas contendo cinco cada uma, separados pelo sexo. Objetivando reconhecer alterações morfológicas distintas nas lesões, foi estabelecido um cronograma de sacrificios de acordo com o tempo de exposição a droga, à saber: TO - grupo controle (dez animais), só ingeriram água durante todo o tempo do experimento; T90 - (dez animais); T120 - (vinte animais); T150 - (cinco animais); T200 - (Vinte animais), que ingeriram DEN, e foram sacrificados nesses tempos determinados. O estudo macroscópico e coloração com lugol foram realizados à fresco, sendo que a classificação macroscópica seguiu a Escola Japonesa. Foram diagnosticados, nos trinta animais sobreviventes. dos grupos T120, T150 e T200, 183 carcinomas esofágicos, com média de 6.1 % focos de carcinoma por esôfago examinado. As lesões macroscópicas diagnosticadas foram: tipo Ip - onze carcinomas (6,0 1 %), tipo Ipl - oito carcinomas (4,37%), tipo 11 a 33 carcinomas (18,05%), tipo 11 b - 102 carcinomas (55,73%), tipo 11 c cinco carcinomas (2,73%), tipo misto - nove carcinomas (4,92%), BORRMANN I - três carcinomas (1,64%), BORRMANN 11 - cinco carcinomas (2,73%) e BORRMANN 111 sete carcinomas (3,82%). A classificação microscópica desses 183 carcinomas também seguiu os parâmetros da Escola Japonesa. Foram diagnosticados 119 carcinomas ln situ, restritos ao epitélio (65,02%) e 24 carcinomas microinvasivos os quais invadiam a mucosa (13,11%). Desses, sete eram mml (3,82%), 15 mm2 (8)9%1 e dois mm3 (1,09%). Os carcinomas submucosos apresentavam níveis de invasão diferentes da submucosa. Foram diagnosticados 25 carcinomas submucosos (13,66%), destes 12 eram sml (16,55%); dez sm2 (5,46%) e três sm3 (1,63%). Ocorreram 15 carcinomas invasivos (8,19%). O teste estatístico do Qui-Quadrado mostrou uma diferença significativa (p<0,05) entre os níveis de invasão dos carcinomas dos grupos T120 e T150 versus T200, sendo que o grupo T200 apresentou maior número de lesões invasivas. Foi observado que as lesões elevadas tipo Ip e Ipl, apresentaram níveis de invasão predominantemente de submucosa em 61,11% dos casos, (11/18). Por outro lado as lesões superficiais tipo 11 a apresentaram níveis de invasão restritos predominantemente à mucosa em 70,8% dos casos (17/24) e as lesões superficiais tipo 11 b foram todas restritas ao epitélio representando 85,7% (102/119) dos carcinomas In situ. Os resultados desse estudo Estão em concordância com a literatura no sentido de 'que as lesões elevadas tendem a serem mais invasivas, enquanto que as lesões planas tipo 11 b e 11 a são restritas predominantemente ao epitélio e a mucos a respectivamente. Um dos objetivos desse estudo foi obter as possíveis diferenciações histológicas entre displasias e carcinoma In situ (neoplasia intra-epitelial). A análise histológica não mostrou nenhum caso de displasia, sendo que as alterações de maturação celular nas neoplasias epiteliais foram semelhantes aos carcinomas microinvasivos, submucosos e invasivos, portanto foram classificadas como carcinoma In situo É importante considerar que talvez ocorra a presença de um genótipo tumoral já no í~icio da multiplicação celular que atinge uma expressão fenotípica de carcinoma podendo então ser diretamente reconhecida. A principal dificuldade na terminologia consiste em usar duas expressões (displasia e carcinoma In situ), para designar o mesmo processo biológico. O problema mais significativo decorrente disso é que dependendo da terminologia usada, pode-se determinar condutâs terapêuticas distintas para uma mesma doença, com prejuízos óbvios para o paciente / Abstract: This research was scheduled to study the histogenesis of the epidermoid carcinoma of the esophagus. For so, the Wistar rats and the diethilnitrosamine carcinogen (DEN), in the dosage of 10 mg/kg of weight, were used as an experimental mo deI. The animaIs were kept in separeted cages, helding 5 in each, according to their sexo Aiming to recognise the distinct morfological alterations in the lesions, a chronogram of animal sacrificies was established as follows: TO - control group (ten animaIs) ; T90 (ten animaIs) ; T120 (twenty animaIs) ; T150 (five animaIs) and T200 (twenty animaIs). The control group ingested only water during the experiment, while the others ingested DEN solution, and were sacrificed in those determined intervals. The macroscopic study and the lugol staining for temporary observation were performed, and its classification obeyed the Japanese School. Among the animals that survived in groups T120, T150 and T200, 183 esophageal carcinomas were found, with an average of 6.1 % focus of carcinomas per esophagus examined. The macroscopic lesions diagnosed were: type Ip - eleven carcinomas (6.01%) ; type Ipl - eight carcinomas (4.37%) : type lIa - thirty three carcinomas (18.05%) ; type IIb - one hundred and two carçtnomas (55.73%) ; type 11 - five carcinomas (2.73%) ; mixed type - nine carcinomas (4.92%) ; Bomnann I - three carcinomas (1.64%) ; Bomnann 11 - five carcinomas (2.73%) and Bomnann 111 - seven carcinomas (3.82%). The microscopic classification of these } 8H carcinomas also followed the Japanese School parameters. It was diagnosed 119 carcinomas In situ, limited to the mucosa (65.02%), and 24 microinvading carcinomas which did invade the muscularis mucosa (13.11%). Among the latest, seven were mm1 (3.82%), fiften mm2 (8.19%), and two mm3 (1.09%). The submucous carcinomas presented different levels of submucosa invasion. Twenty five carcinomas were diagnosed (13.66%), from which 12 were sml (16.55%), ten sm2 (5,46%), and three sm3 (1.63%). Fiften (8.19%) invading carcinomas did occur. The statistical X2 test showed a sig'llificant difference (p < 0.05) between the levels of carcinoma invasion of groups T120 and T150 versus T200, with the latest showing a greater number of invading lesions. It was observed that the elevated lesions of type Ip and Ipl presented levels of Invasion mainly of submucosa (11/18 = 61.11% of the cases). In contrast, the Tia superficiallesions presented levels of invasion limited mainly to the mucosa in 70.8% of the cases (17/24), while the type IIb superficiallesions were alllimited to the epithelium, representing 85.7% (119/162) of the In situ carcinomas. The results of this study are in accordance with the consulted literature. While the elevated lesion tends to be more invasive, the type IIb and IIa flat lesions are limited mainly to the epithelium and the mucosa. One of the objectives of this study was to obtain the possible histological differentiation between dysplasia and In situ carcinoma (intraepithelial). The histological analysis did not show any case of dysplasia. and the alterations of celular maturation in the epithelial lesion were similar to the microinvading carcinomas, submucous and invading, so they were classified as ln situ carcInomas. It is important to consider that, probably, at the very beginning of the celular multipliction there is already a tumoral genotype which reaches a phenotypical expression of carcinoma that can be recognised at once. The main difficult in terminology consists 'in using two expressions (dysplasia and In situ carcinoma) to nominate the same biological processo The most significant problem that arises is that, depending on the terminology employed, distinct therapeutic conducts may be dictated to the same illness, with evident detriment to the patient / Mestrado / Mestre em Cirurgia

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-10-20T15:47:02Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2360926 bytes, checksum: dab15119f9bb0ca43af43ccecb8cedc6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-20T15:47:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2360926 bytes, checksum: dab15119f9bb0ca43af43ccecb8cedc6 (MD5) Previous issue date: 2004-03-26 / O estudo de nutrientes dietéticos tem sido cada vez mais necessário para o entendimento do seu papel nas doenças crônicas degenerativas não transmissíveis. Entre estas se encontra o câncer, sendo o câncer colorretal, um dos tipos mais comuns em todo o mundo, contribuindo significativamente para morbidade e mortalidade. O estudo do papel dos lipídios na etiologia e prevenção da carcinogênese colorretal tem sido um grande desafio nos últimos anos. Evidências experimentais sugerem a possibilidade dos ácidos graxos polinsaturados ômega-3 terem um papel preventivo na carcinogênese colorretal. Os efeitos dos ácidos graxos ômega-3 podem ser pesquisados através dos focos de criptas aberrantes (FCA), lesões pré-neoplásicas, que podem sofrer remodelação, inibição do crescimento, regressão ou eliminação quando tratadas por agentes específicos. O desenvolvimento da carcinogênese colorretal, através dos FCA, induzidos pela administração de quatro injeções subcutâneas da DMH, na dose de 40mg/Kg de peso, foi avaliado em ratos Wistar, machos, adultos, que receberam dieta AIN-93M suplementada com ácido graxo ômega-3 (10g/100g de dieta), sendo comparados a animais controle que tiveram o mesmo tratamento e consumiram dieta AIN-93M. O peso e o consumo dietético dos animais foram monitorados semanalmente. Os ratos foram sacrificados em diferentes períodos de intervenção dietética, sendo estes 6a, 13a e 30a semanas. O intestino grosso dos animais foi retirado para quantificação, caracterização da distribuição e categorização dos FCA em ≤ ou > que 3 criptas aberrantes. O fígado e a gordura visceral foram retirados para análise do perfil dos ácidos graxos. O peso dos animais do grupo ômega-3 apresentou-se menor (p<0,05) em relação ao grupo controle em diversas semanas experimentais, sendo verificado maior consumo de dieta pelo grupo controle. Foram encontrados FCA nos dois grupos, sendo observada diferença estatística (p<0,05) somente na 30a semana, na qual foi visualizada uma porcentagem de redução de FCA de 55,34% e de FCA > 3 de 57,14% no grupo ômega-3, em relação ao grupo controle. O maior número de FCA foi notado na região medial, seguido da região distal. Em relação ao perfil lipídico dos ácidos graxos, foram observadas baixas concentrações de EPA e DHA na gordura visceral dos animais ômega-3, com 30 semanas experimentais e uma alta conversão do ácido EPA a DHA no tecido hepático desses animais. Estes resultados nos sugerem que o ômega-3 poderá atuar na diminuição da evolução na fase de promoção da carcinogênese colorretal, prevenindo o seu desenvolvimento. / It has been increasingly necessary to study diet nutrients so as to understand their role in non-transmissible degenerative chronic diseases such as malignancies. Among the latter, colorectal cancer is one of the most common types worldwide, with significant morbidity and mortality. The role of lipids in the etiology and prevention of colorectal cancer has been a great challenge in recent years. Experimental evidence suggests that omega-3 polyunsaturated fatty acids might have a preventive role in colorectal carcinogenesis. The effects of omega-3 fatty acids may be studied through the analysis of aberrant crypt foci (ACF), premalignant lesions amenable to remodelling, growth inhibition, regression, or elimination when treated with specific agents. The development of colorectal carcinogenesis, through dimethylhydrazine-induced ACF (40mg/Kg weight, 4 subcutaneous doses), was studied in male adult Wistar rats receiving omega-3 fatty acid (10g/100g diet) supplemented AIN-93M diet, with similarly treated animals receiving AIN-93M diet as controls. Weight and diet intake were monitored every week. The rats were sacrificed after 6, 13, and 30 weeks. The large bowel was removed for ACF quantification, distribution description, and classification according to the number of aberrant crypts (3 or fewer, and more than 3). The liver and visceral fat were removed for analysis of fatty acid profile. The animals in the omega-3 group weighed less (p<0.05) than controls at several weeks, the latter having had grater diet intake. ACF were found in both groups, statistically significant differences (p<0.05) being noticed only after 30 weeks, with a 55.34% reduction of ACF and a 57.14% reduction of ACF>3 in the omega-3 group compared with controls. The greatest number of ACF was in the medial region, followed by the distal one. As for the fatty acid lipid profile, low EPA and DHA concentrations were noticed in the visceral fat of omega-3 animals after 30 weeks, with a high EPA to DHA conversion rate in the liver tissue of these animals. These results suggest that omega-3 may prevent colorectal carcinogenesis by reducing evolution of the promotion phase. / Não foi localizado o cpf do autor.

Orientador: Silvia Regina Rogatto / Banca: Maria Inês de Moura Campos Pardini / Banca: Carlos Eduardo Bacchi / Resumo: O câncer de mama (CM) ocupa o primeiro lugar em incidência e o segundo em mortalidade entre as mulheres no mundo. É considerada uma doença heterogênea com alterações em diversas vias de sinalização molecular. Os fatores prognósticos atuais são incapazes de predizer a evolução da totalidade dos pacientes, assim como os marcadores preditivos não conseguem evitar que grande parte das pacientes com CM sejam submetidas à tratamento desnecessário. A busca de outros marcadores tumorais, tanto prognósticos quanto preditivos tem sido alvo de inúmeras pesquisas, que buscam predizer a evolução clínica de um número maior de pacientes. Dois marcadores tumorais com possíveis implicações clínicas são o TGFB1 e o seu receptor TGFBR2. No entanto, o papel do TGFB1 na carcinogênese e na progressão do câncer de mama ainda não é totalmente conhecido. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a expressão do TGFB1 e do TGFBR2 em tumores de mama e correlacionar com os dados clínicos e histopatológicos. Para tanto, foram analisadas 49 amostras de carcinomas ductais invasivos primários e sete amostras de mamas normais como controles pelas técnicas de RT-PCR quantitativa em tempo real (qRTPCR) e imunohistoquímica (IHQ). Os resultados mostraram que baixos níveis de expressão protéica de TGFB1 nas células tumorais estavam associados a menor sobrevida livre de doença. Os tumores apresentaram acentuada diminuição da expressão do transcrito TGFBR2 quando comparados ao controle normal. Além disso, foram observados baixos níveis dos transcritos TGFB1 e TGFBR2 nos tumores com fenótipos mais agressivos (alto índice proliferativo e estadio avançado). Esses dados sugerem que o TGFB1 atua como supressor tumoral em CMs e que a diminuição da expressão TGFB1 e TGFBR2 é um evento importante na carcinogênese mamária. A detecção dos níveis de expressão protéica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Breast cancer (BC) is the leading female cancer in incidence and the second one in mortality worldwide. BC is considered a heterogeneous disease, that presents abnormalities in several molecular pathways. The known prognostic markers are not capable to predict the outcome of all the patients, as well as the predictive markers are not capable to avoid unnecessary treatments. It is necessary to search for other tumor markers, even prognostic and predictive, regarding the prediction of a higher number of patient's outcome. Two tumor markers with possible clinical implications are TGFB1 and its receptor TGFBR2. However the role of TGFB1 in carcinogenesis and in the BC progression is not totally understood yet. In this way, the aim of this study was to analyze the expression of TGFB1 and TGFBR2 in breast tumors and to correlate it with clinical and histopathological data. For this, it were analyzed 49 ductal invasive carcinomas and 7 normal breast tissues as controls with quantitative real time PCR (qRT-PCR) and immunohistochemistry (IHC) technologies. The results showed that low expression levels of TGFB1 protein in tumor cells were associated with a lower disease-free survival. Tumors presented highly diminished TGFBR2 transcript expression when compared with normal controls. Moreover, low levels of TGFB1 and TGFBR2 transcripts were observed in tumors with aggressive phenotypes (high proliferation index and advanced stage). These results suggests that TGFB1 acts like a tumor supressor in BCs and that the TGFB1 and TGFBR2 lowering expression is an important event in mammary carcinogenesis. The detection of tumor TGFB1 protein expression levels can be helpful in clinical practice like a prognostic marker in mammary carcinomas. / Mestre

Orientador: João Lauro Viana de Camargo / Banca: Luis Fernando Barbisan / Banca: Heloisa Maria de Siqueira Bueno / Resumo: Um ensaio de média-duração em múltiplos órgãos de roedores, baseado no paradigma iniciação-promoção da carcinogênese, foi proposto por pesquisadores japoneses como alternativa ao ensaio convencional de longaduração para detecção de cancerígenos químicos. Esse ensaio alternativo, denominado DMBDD (acrônimo para os 5 agentes iniciadores da carcingênese neste protocolo), foi originalmente padronizado com a linhagem de ratos Fischer 344. Em 1996, o IBAMA adotou oficialmente uma variação (DMBDDb), proposta por nosso laboratório, como fonte de evidência do potencial cancerígeno de praguicidas agrícolas. O protocolo adotado pelo IBAMA tem algumas particularidades, como o uso de ambos os gêneros de ratos da linhagem Wistar e dois grupos controle positivo (tratados com fenobarbital - FB ou com 2'-acetoaminofluoreno -2'-AAF). Este protocolo foi utilizado ao longo de seis anos em nosso laboratório (TOXICAN) para a realização de cinco bioensaios sob contratos com empresas do setor agroquímico. O presente estudo consiste da revisão dos diagnósticos de três órgãos desses ensaios - o fígado, rins e intestinos - escolhidos porque foram os que apresentaram mais lesões na análise de cada um daqueles ensaios. A capacidade indutora enzimática dos agentes do protocolo foi avaliada pela expressão imunohistoquímica das enzimas hepáticas CYP 2B1/2B2 e 1A2. Os resultados indicam atividade promotora do FB, embora menos evidente que a do 2'-AAF, particularmente nos ratos machos. Apesar da alta variabilidade da linhagem de rato Wistar , este estudo permitiu estabelecer um banco de informações sobre as lesões que caracteristicamente são encontradas naqueles órgãos dos animais Wistar submetidos ao protocolo DMBDDb. / Abstract: A medium-term multi-organ rat bioassay based on the initiation-promotion carcinogenesis paradigm has been proposed by Japanese researchers as an alternative to the conventional long-term assay for chemical carcinogenesis detection. This alternative bioassay, designated DMBDD (after the five carcinogenic initiators of this protocol), was originally standardized with the male Fischer 344 strain of rats. In 1996, the Brazilian Agency for the Environment (IBAMA) officially recognized a variation (DMBDDb), proposed by our laboratory, as a valid source of evidence of the carcinogenic potential of agrochemicals. The protocol adopted by IBAMA has some modifications, such as the use of both sexes of the Wistar strain of rats and two positive controls (Phenobarbital - PB, 2'-acetoaminofluorene - 2'-AAF). During six years, five different bioassays managed under contract with agrochemical companies were developed by our laboratory (TOXICAN). This study presents the revised results obtained from three organs of this protocol - liver, kidney and intestines -, chosen because they most frequently presented lesions through those assays analyses. Besides, the induction of the CYP 2B1/2B2, 1A2 isoforms was also immunohistochemically evaluated in the liver. Our results document the promoting activity of PB, otherwise less evident than 2'-AAF, especially in male rats. Although a high variability of the Wistar rat strain tested was evident, this study allowed building up a data bank of characteristic lesions in those selected organs of Wistar rats under the DMBDDb protocol treatment. / Mestre

Orientador: Noeme Sousa Rocha / Resumo: O tumor venéreo transmissível (TVT) canino é uma neoplasia transplantável, considerada um alo-enxerto. Entretanto, pouco se sabe a respeito da origem e processo de cacinogênese. Atualmente, postula-se que alguns tumores originem-se de células iniciadoras tumorais, classicamente descritas nas leucemias mielóide humanas. As características intrínsecas do TVT fornecem indícios de uma possível participação de células iniciadores tumorais no processo de carcinogênese nesse tumor. Foi realizado estudo de fenotipagem do TVT canino para avaliar a marcação das proteínas CD44, CD133, CD90 e CD34, comumente associadas ao potencial iniciador tumoral. Para tanto utilizou-se a citometria de fluxo, imuno-histoquímica e RTq-PCR. Foram analisados também as frações de crescimento pelo Ki-67) e o número de células em apoptose pela caspase-3 clivada. Trinta e oito amostras de TVT foram obtidas de pacientes sem tratamento quimioterápico prévio. As amostras foram classificadas em plasmocitóide ou mistas, de acordo com o subtipo citológico; as células positivas na citometria de fluxo foram representadas em termos percentuais para os marcadores CD44, CD34, CD90 e CD133; a fração de crescimento foi representada pela técnica do H-Score; a quantidade de células apoptóticas foi representada pelo somatório de células positivas para a caspase-3 clivada; as imuno-marcações das proteínas CD44 e CD34 foram representadas por escores semi-quantitativos baseados na intensidade e percentual de células positivas;... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The canine transmissible venereal tumor (CTVT) is a transplantable neoplasia considered an allograft. Information about the origin and carcinogenesis process is scarcely known. Currently, some neoplasms are believed to arise from a tumor-initiating cell (TIC's) classically described in human myeloid leukemia. TVT intrinsic characteristics provide evidence of a possible TIC's participation in carcinogenesis process of this malignancy. Thus, a phenotyping study of CTVT was conducted to assess the immunophenotyping properties of the proteins CD44, CD133, CD90 and CD34, already known to be associated to tumor initiator potential. The use of flow cytometry and immunohistochemistry contributed to this purpose. In addition, growth fractions and cells undergoing apoptosis were examined by Ki-67 and caspase-3 cleaved, respectively. Thirty-eight samples were chosen from patients having no previous chemotherapy and cytological diagnosis of CTVT. Samples were classified into plasmacytoid or mixed according to cytological subtype. Positive cells in the flow cytometry were expressed in percentage for the markers CD44, CD34, CD90 and CD133. H-score technique helped to represent growth fractions. Apoptotic cell quantity was calculated by summing positive cells. Immunohistochemical marking of CD44 and CD34 proteins were determined by semiquantitative scores based on the intensity and percentage of positive cells. Moreover, specimens were divided into resistant and non-resistant groups and com... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor