A matriz extracelular (MEC) dos tecidos uterinos é altamente remodelada na gestação de camundongos. Os objetivos deste estudo foram avaliar a influência dos hormônios ovarianos estrógeno (E2) e progesterona (P4) sobre a estrutura dos tecidos uterinos de camundongo e a deposição dos proteoglicanos decorim, biglicam, fibromodulim, lumicam, perlecam e versicam nestes tecidos. Para isto, utilizamos um modelo de castração e reposição hormonal, e o ciclo estral como parâmetro fisiológico. Verificamos que, como na gestação, durante o ciclo estral ocorre intensa remodelação na estrutura e na MEC dos tecidos uterinos. Verificamos ainda que a resposta aos hormônios ovarianos é: compartimento-específica; hormônio-específica e molécula-específica. Notável foi a modulação do versicam pelos hormônios ovarianos. P4 induz a deposição de versicam no estroma, enquanto o miométrio responde apenas a E2. A modulação dos proteoglicanos pelos hormônios ovarianos mostra a relevância destas moléculas para a composição de um ambiente uterino propício para o desenvolvimento do embrião. / The extracellular matrix (ECM) of the mouse uterine tissues is highly remodeled during pregnancy. The aim of this study was to demonstrate the influence of estrogen (E2) and progesterone (P4) on the uterine structure and on the deposition of the proteoglycans decorin, biglycan, fibromodulin, lumican, perlecan and versican in these tissues. For that purpose, we used a model of castration e hormone replacement as main strategy, and the estrous cycle as physiological parameter. We verified that, as in pregnancy, during the estrous cycle an intense remodeling occurs on the structure and the ECM of the uterine tissues. We also showed that the response to the ovarian hormones is: compartment-; hormone- and molecule- specific. Noteworthy was the modulation of versican by the hormones: P4 induces the deposition of versican in the stroma, whereas the myometrium responds only to E2. The modulation of proteoglycans by the ovarian hormones indicates the relevance of these molecules for the composition of a proper microenvironment for embryo development.

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcello de Aguiar Rodrigues Cembranelli.pdf: 194658 bytes, checksum: 96ad43f9ea940a3c13431279e5bdc24b (MD5) Previous issue date: 2005-08-02 / Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nïvel Superior / The synchronization of estrus in bovines through the administration of luteolytic agents as prostaglandin F2 (PGF2) or its analogues has been widely used in reproductive programs of embryos transfer (ET) The luteolytic agents cause lysis of the corpus luteum resulting in the manifestation of estrus It is a practical and less expensive method when compared to other synchronization techniques and exhibits fertility indexes which are similar to the natural ones since there is no interference of factors such as bodily condition and nutrition among others The purpose of this paper was to verify the efficiency of the intramuscular administration of different doses (normal and reduced) of a luteolytic agent in different phases of the estrous cycle (dioestrus) and the responsivity time (interval administration-estrus) The experiment was carried out in Água Limpa farm in the city of Fama State of Minas Gerais Brazil in the period between November 2004 and January 2005 Two-hundred and eighty-eight applications of sodic D-cloprostenol were made whit the aim of synchronizing the estrus in crossbred heifers used as receptors in an embryo-transfer program The animals were observed in the natural estrus classified and grouped in accordance with the day of the cycle Group A corresponded to the animals injected on the 6th-8th day of deoestrus day 0 being considered as estrus Group B on the 9th-11th day Group C on the 12th-14th day and Group D the heifers on the 15th-17th day of dioestrus All the groups were subdivided into two some animals received 75 g (1ML) of sodic d-cloprostenol by intramuscular injection others received 150 g (2ML) As for total efficiency the 2ML dose showed a better response (p<0,01) 77,15% than the 1ML dose 50,55% Groups A (6 to 8) and B (9 to 11) showed nearly equal values (p<0,05) for total efficiency 66,67% for 2ML and 36.36% for 1ML in Group A and 78.43% and 56.67% respectively for Group B Groups C (12 to 14) and D (15 to 17) showed no differences (p<0,05) in efficiency between groups or doses 73.58% (2ML) and 52.00% (1ML) for Group C and 73.58% and 52.00% respectively for Group D For interval application to the beginning of estrus the following results were found Group A presented an average interval of 58 hours significantly differing (p<0,05) from the other groups 73.43 hours for Group B 79.06 hours for Group C and 75.23 hours for Group D The present study demonstrated that the dose of 1ML of D-cloprostenol is similar to the dose of 2ML as of the 12th day of the cycle Therefore a subdose may be an alternative to reduce costs in an ET program since one knows the stage of the estral cycle of the females / A sincronização do estro em bovinos através da aplicação de agentes luteolíticos como prostaglandina F2 beta (PGF2 beta) ou seus análogos tem sido amplamente utilizadas em programas reprodutivos e de transferência de embriões (TE)Os agentes luteolíticos causam lise do corpo lúteo resultando na manifestação de estro Consiste de um método prático e de menor custo quando comparado a outros métodos de sincronização e apresenta índices de fertilidade comparados ao natural desde que não haja interferências de fatores como condição corporal nutrição entre outros O objetivo deste trabalho foi o de verificar a eficiência da aplicação de diferentes doses (normal e reduzida) de um agente luteolítico via intramuscular em diferentes fases do ciclo estral (diestro) bem como o tempo de responsividade (intervalo aplicação-estro) O experimento foi realizado na fazenda Água Limpa no município de Fama-MG no período de novembro de 2004 a janeiro de 2005 Foram realizadas 288 aplicações de D-Cloprostenol sódico visando à sincronização de estro em novilhas mestiças utilizadas como receptoras num programa de transferência de embriões Os animais foram observados em estro natural classificados e distribuídos para o experimento de acordo com o dia do ciclo O grupo A correspondeu aos animais que estavam no dia da aplicação do 6° ao 8° dia do diestro considerando dia 0 como o estro O grupo B do 9° ao 11° dia do diestro O grupo C do 12° ao 14° dia do diestro e o grupo D as novilhas do 15° ao 17° dia do diestroTodos os grupos foram subdivididos em dois onde alguns animais receberam 75 miligramas (1ML) de D-cloprostenol sódico via intramuscular e o restante recebeu 150 miligramas (2ML) de D-cloprostenol sódico também intramuscular Para eficiência total a dose de 2ML apresentou melhor resposta (p<0,01) de 77,15% contra 50,55% da dose de 1ML Os grupos A (6 a 8) e B (9 a 11) apresentaram resultados próximos (p<0,05) da eficiência total sendo de 66,67% para 2ML e 36,36% para 1ML no grupo A e 78,43% e 56,67% respectivamente para o grupo B Portanto com melhor eficiência para o grupo que recebeu 2ML Os grupos C (12 a 14) e D (15 a 17) não mostraram diferença (p<0,05) na eficiência entre os grupos ou entre as doses com os seguintes resultados 73,58% (2ML) e 52,00% (1ML) para o grupo C e 73,58% e 52,00% respectivamente para o grupo D Para intervalo aplicação ao início do estro encontraram-se os seguintes resultados o grupo A apresentou intervalo médio de 58 horas diferindo significativamente (p<0,05) dos demais grupos que resultaram em 73,43 horas para o grupo B 79,06 para o grupo C e 75,23 para o grupo D O presente estudo mostrou que a utilização da dose de 1ML de D-cloprostenol sódico é semelhante à dose de 2ML a partir do decimo segundo dia do ciclo Portanto a utilização da subdose pode ser mais uma alternativa para se reduzir custos em um programa de TE desde que se conheça o momento da fase do ciclo estral das receptoras envolvidas no programa

A poluição do ar é um importante fator ambiental de risco para muitos desfechos gestacionais e reprodutivos negativos. Neste estudo nós investigamos os efeitos da poluição particulada em dois períodos de exposição (antes da concepção e durante a gestação) sobre alguns desfechos reprodutivos e gestacionais em camundongos. Utilizando câmaras de exposição, uma recebendo ar filtrado (F) e outra ar não-filtrado (nF), observamos que as fêmeas expostas ao ar não filtrado apresentaram alterações na duração do ciclo estral, estro persistente e o número de folículos antrais reduziu cerca de 36% (75±35,2, P=0,04) comparado às expostas ao ar filtrado (118,6 ±18,4). Nossos resultados mostram ainda um aumento significativo no tempo necessário para que o acasalamento ocorra, uma diminuição nos índices de fertilidade e gestação (P=0.003) nos casais expostos ao ar não filtrado (nF). A taxa média de perdas pós implantacionais (PPI) está aumentada em 70% (P0,005) no grupo de fêmeas expostas ao ar não filtrado antes e durante a gestação quando comparada ao grupo exposto antes de durante a gestação ao ar filtrado. O peso fetal (PF) é significativamente maior no grupo exposto nos dois períodos ao ar filtrado quando comparado aos demais grupos expostos antes e/ou durante a gestação ao ar não filtrado. O PF e a taxa média de PPI são influenciados tanto pela exposição durante a gestação quanto a exposição que ocorre antes da gestação. A exposição materna prévia a gestação e durante a primeira fase gestacional são críticas para o aumento no risco de baixo peso em camundongos. Nós também verificamos que a exposição ao ar não filtrado está associada a uma redução no volume, calibre e área de superfície dos espaços sanguíneos maternos, a um aumento na área de superfície dos capilares fetais, e na condutância de difusão da placenta. Alterações morfológicas no cordão umbilical também foram encontradas. Este estudo demonstra que a exposição aos níveis ambientais de poluição particulada de origem veicular afeta diferentes funções e estágios do processo reprodutivo. Nossos resultados também indicam que a exposição materna prévia está ligada a desfechos gestacionais negativos mesmo quando a exposição ocorre somente antes da concepção / Air pollution is an important environmental health risk factor for many different gestational and reproductive negative outcomes. In this study we have investigated the effects of two different timing of exposure (before conception and during pregnancy) to urban ambient particulate matter on reproductive and pregnancy outcomes in mice. Using exposure chambers receiving filtered (F) and non-filtered (NF) we observed that exposed females presented changes in the length of estrus cycle, extended estrus and antral follicles number declined by 36% (P=0.04) in mice exposed to non filtered air (75±35.2) compared to mice exposed to filtered air(118.6 ±18.4). Our results further indicate a significant increase in time necessary to mating and decreased fertility and pregnancy indices (P=0.003) in NF couples. Mean postimplantation loss (PIL) rate was increased by 70% (P0.005) in the group exposed before and during pregnancy to non-filtered air when compared to the group exposed before and during pregnancy to filtered air. Fetal weight (FW) was significantly higher in group exposed during both periods to filtered air when compared to other groups exposed before and/or during pregnancy to non filtered air. FW and PIL mean rate were influenced by both pre-gestational (p<0.01) and gestational (p<0.01) period exposure. Maternal pre-gestational and the first stage of pregnancy exposure are critical to increased risk for low birth weight in mice. We also found that gestational exposure to non-filtered air was associated with reduced volumes, calibres and surface areas of maternal blood spaces and with greater fetal capillary surfaces and diffusive conductances of the placenta. Umbilical cord morphology was also altered. This study demonstrated that exposure to ambient levels of urban traffic generated particulate matter negatively affects different functions and stages of the reproductive process. Our results also indicate that maternal exposure to air pollution is linked to negative pregnancy outcomes even if maternal exposure occurs only before conception

Extensos dados na literatura têm assinalado a importância da serotonina (5-HT) na modulação de comportamentos de medo e ansiedade em roedores, a grande maioria utilizando ratos machos como sujeitos experimentais. No presente trabalho, foi analisada a influência da neurotransmissão 5-HT periférica e central sobre a expressão da resposta de medo condicionado e incondicionado de ratos machos e fêmeas, previamente selecionados pelo fenótipo como animais de baixa (BA) ou de alta (AA) reatividade emocional. Para este fim foi utilizado o teste do sobressalto potencializado pelo medo (SPM). A influência global e central de 5-HT foi avaliada pela utilização da administração sistêmica ou intraventricular aguda do inibidor irreversível da enzima triptofano hidroxilase PCPA (p-clorofenilalanina) nas doses de 200 mg/mL (i.p.) e 200 µg/5 µL (i.v.), ou através de infusões locais de 5-HT (10 nmol/0.2 µL) ou do agonista seletivo de receptores 5-HT1A 8-hidroxi-2-(di-n-propilamino)-tetralina (8-OH-DPAT) na dose de 0,3 µg/0.2 µL, diretamente em áreas encefálicas conhecidas por sua influência na modulação do medo e ansiedade a saber: o córtex pré-limbico (CPL), o núcleo basolateral da amígdala (BLA), e a substância cinzenta periaqueductal dorsal (SCPd) do mesencéfalo. As variáveis dependentes registradas foram a amplitude e a latência das respostas incondicionadas e condicionadas de sobressalto e a amplitude do SPM. / Extensive data in the literature have signaled the importance of serotonin (5-HT) on the modulation of fear and anxiety-like behaviors in rodents. In the present study, we have analyzed the influence of peripheral and central 5-HT neurotransmission on the expression of the conditioned and unconditioned fear, and on the fear-potentiated startle in male and female rats previously selected as low- (LA) or high-anxiety (HA). For this purpose, we used the fear-potentiated startle (FPS) test. The global and central influence of 5-HT was evaluated by using the acute systemic or intraventricular administration of the irreversible tryptophan hydroxylase inhibitor PCPA (p-chlorophenylalanine - 200 mg/mL i.p., or 200 µg/5 µL i.v.). Local effects were evaluated through local infusions of 5-HT itself (10 nmol/0.2 µL) or the selective 5-HT1A receptors agonist 8-hydroxy-2-(di-n-propylamino)-tetralin (8-OH-DPAT 0.3 µg/0.2 µL) in the prelimbic cortex (PrL), basolateral amygdala (BLA) or the dorsal periaqueductal gray (DPAG). These brain regions were chosen for the present study based on their great importance in the modulation and expression of conditioned and unconditioned fear. Dependent variables recorded were the amplitude and latency of unconditioned and conditioned fear, and fear-potentiated startle (FPS).

Estudos hodológicos sugerem um dimorfismo sexual das projeções da área incerto-hipotalâmica (IHy), com áreas relevantes para o controle reprodutivo mais densamente inervadas em fêmeas. Estudos funcionais mostraram que o RNAm do precursor do hormônio concentrador de melanina (ppMCH) varia apenas na IHy, durante o ciclo estral e é reduzido em ratas em anestro induzido por restrição alimentar (RA). Nosso objetivo foi analisar em camundongos fêmeas, as alterações na morfologia de útero e ovários e na expressão do RNAm do ppMCH da IHy ocasionadas pelo anestro induzido por RA. Para isso, camundongos fêmeas C57BL/6 foram distribuídas em controle (C), restrito (R; ração = 70% do C) e realimentado (RR). Os animais R foram perfundidos após 4, 8 e 12 dias para coleta de encéfalo, útero e ovários. Houve um aumento no número de folículos antrais nos animais R12 comparados ao R4 e redução da área uterina nos animais R8 com recuperação dos RR. Não foi possível detectar alterações na expressão do RNAm do ppMCH na IHy. / Hodological studies suggest a sexual dimorphism of the incerto-hypothalamic area (IHy) projections since relevant areas to the reproductive control are more densely innervated in females. Functional studies have shown that the MCH precursor mRNA (ppMCH) varies only in the IHy during the estrous cycle of an intact rat and is decreased in anestrus rats induced by food restriction. We aim to analyze, in female mice, the changes in uterine and ovarian morphology and expression of IHy ppMCH mRNA in anestrus induced by food restriction. For this, C57BL/6 female mice were distributed in control (C), food restricted (FR) and refed (RR). FR were perfused after 4, 8 and 12 days to collect the brain, uterus and ovaries. Our results show an increased number of antral follicles of R12 compared to R4 and a reduction in the uterine area of R8 with restoration in RR. It was not possible to detect changes in ppMCH mRNA expression in IHy.

A poluição do ar é um importante fator ambiental de risco para muitos desfechos gestacionais e reprodutivos negativos. Neste estudo nós investigamos os efeitos da poluição particulada em dois períodos de exposição (antes da concepção e durante a gestação) sobre alguns desfechos reprodutivos e gestacionais em camundongos. Utilizando câmaras de exposição, uma recebendo ar filtrado (F) e outra ar não-filtrado (nF), observamos que as fêmeas expostas ao ar não filtrado apresentaram alterações na duração do ciclo estral, estro persistente e o número de folículos antrais reduziu cerca de 36% (75±35,2, P=0,04) comparado às expostas ao ar filtrado (118,6 ±18,4). Nossos resultados mostram ainda um aumento significativo no tempo necessário para que o acasalamento ocorra, uma diminuição nos índices de fertilidade e gestação (P=0.003) nos casais expostos ao ar não filtrado (nF). A taxa média de perdas pós implantacionais (PPI) está aumentada em 70% (P0,005) no grupo de fêmeas expostas ao ar não filtrado antes e durante a gestação quando comparada ao grupo exposto antes de durante a gestação ao ar filtrado. O peso fetal (PF) é significativamente maior no grupo exposto nos dois períodos ao ar filtrado quando comparado aos demais grupos expostos antes e/ou durante a gestação ao ar não filtrado. O PF e a taxa média de PPI são influenciados tanto pela exposição durante a gestação quanto a exposição que ocorre antes da gestação. A exposição materna prévia a gestação e durante a primeira fase gestacional são críticas para o aumento no risco de baixo peso em camundongos. Nós também verificamos que a exposição ao ar não filtrado está associada a uma redução no volume, calibre e área de superfície dos espaços sanguíneos maternos, a um aumento na área de superfície dos capilares fetais, e na condutância de difusão da placenta. Alterações morfológicas no cordão umbilical também foram encontradas. Este estudo demonstra que a exposição aos níveis ambientais de poluição particulada de origem veicular afeta diferentes funções e estágios do processo reprodutivo. Nossos resultados também indicam que a exposição materna prévia está ligada a desfechos gestacionais negativos mesmo quando a exposição ocorre somente antes da concepção / Air pollution is an important environmental health risk factor for many different gestational and reproductive negative outcomes. In this study we have investigated the effects of two different timing of exposure (before conception and during pregnancy) to urban ambient particulate matter on reproductive and pregnancy outcomes in mice. Using exposure chambers receiving filtered (F) and non-filtered (NF) we observed that exposed females presented changes in the length of estrus cycle, extended estrus and antral follicles number declined by 36% (P=0.04) in mice exposed to non filtered air (75±35.2) compared to mice exposed to filtered air(118.6 ±18.4). Our results further indicate a significant increase in time necessary to mating and decreased fertility and pregnancy indices (P=0.003) in NF couples. Mean postimplantation loss (PIL) rate was increased by 70% (P0.005) in the group exposed before and during pregnancy to non-filtered air when compared to the group exposed before and during pregnancy to filtered air. Fetal weight (FW) was significantly higher in group exposed during both periods to filtered air when compared to other groups exposed before and/or during pregnancy to non filtered air. FW and PIL mean rate were influenced by both pre-gestational (p<0.01) and gestational (p<0.01) period exposure. Maternal pre-gestational and the first stage of pregnancy exposure are critical to increased risk for low birth weight in mice. We also found that gestational exposure to non-filtered air was associated with reduced volumes, calibres and surface areas of maternal blood spaces and with greater fetal capillary surfaces and diffusive conductances of the placenta. Umbilical cord morphology was also altered. This study demonstrated that exposure to ambient levels of urban traffic generated particulate matter negatively affects different functions and stages of the reproductive process. Our results also indicate that maternal exposure to air pollution is linked to negative pregnancy outcomes even if maternal exposure occurs only before conception

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pre textuais.pdf: 419949 bytes, checksum: 16c33c78cc5fa05473d5d08f666f2827 (MD5) Previous issue date: 2009-08-21 / Bovine estrous cycle activates the pathways of MAPKs (mitogen activated protein) via oscillation of hypothalamus-pituitary-gonad axis hormones. The objective of this work was to evaluate in vivo the frequency of expression of active (phosphorylated) form, of p-MEK 1/2 and p-ERK1/2 in all types of ovarian follicles and corpora lutea in different phases of the estrous cycle of cattle. Bovine ovaries were harvested in a local slaughterhouse and the phase of the estrous cycle was determined, considering seven stages, defined as experimental groups: days 1-3 (n = 2), 4-6 (n = 5), 7-9 (n = 5), 10-12 (n = 3), 13-15 (n = 5), 16-18 (n = 5) and 19-21 (n = 5). After processing, the histological sections were subjected to immunohistochemistry using antibodies that specifically recognize the phosphorylated form of MEK 1/2 and ERK 1/2. Histological sections containing corpora lutea were also subjected to immunohistochemistry with antibodies that recognize p-BCL2 (B cell phospho lymphoma 2) and COX-2 (COX-2). The frequency of marked follicles was evaluated for the presence or absence of markup for the two cellular enzymes. The fragments of the corpus luteum were evaluated according to the scores of intensity for positive staining of the four antibodies. The frequencies of the markers studied in the follicles were compared using the chi-square. In preantral follicles, both MEK and ERK 1/2 showed high levels between 16 to 18 days. In the case of p-MEK, the greater activation of primordial follicles and primary held from 7 to 9. In secondary follicles, the less marked for p-MEK occurred in group 4 to 6. Levels of p-ERK began to rise from 13 to 15 days and subsequently decreased. Comparing the frequencies of MEK and ERK, there was statistic difference (p <0.0001) in antral follicles compared to other types of follicles. It was concluded that the intensity of activation of MAPKs MEK / ERK varies with the phases of the estrous cycle and follicular class studied. Since the corpora lutea were evaluated by analysis of variance after transforming the data, it was observed that the proteins studied showed variation in expression profile, in relation to the development, survival and death of the corpus luteum. Since COX-2, a precursor of prostaglandin, is capable of activating the pathways of MEK / ERK 1/2, it reduces the frequency of expression of cell survival factor BCL-2, leading to the corpus luteum at luteolysis. The in vivo evaluation of the activation profile of MAPKs without the use of hormonal protocols demonstrated the importance of this enzyme during the physiological reproductive process, raising new inquiries and providing opportunities to expand knowledge about the functioning of the hormone and its association with the cellular mechanisms activated by hormones / A ocorrência do ciclo estral bovino, a partir de variações dos hormônios do eixohipotálamo- hipófise-gônadas, ativa as vias das MAPKs (proteína ativada por mitógenos) O objetivo desta tese foi avaliar in vivo a freqüência de expressão da forma ativa (fosforilada), de todos os tipos foliculares ovarianos e corpo lúteo para p- MEK 1/2 e p-ERK1/2, em diferentes fases do ciclo estral de bovinos. Para tal, foram coletados em abatedouros locais ovários de bovinos e determinada a fase do ciclo estral, caracterizando sete fases, definidas como grupos experimentais: dias 1-3 (n=2), 4-6 (n=5), 7-9 (n=5), 10-12 (n=3), 13-15 (n=5), 16-18 (n=5) e 19-21 (n=5). Após o processamento histológico os cortes foram submetidos à imunoistoquímica, utilizando anticorpos que reconhecem especificamente a forma fosforilada da MEK 1/2 e ERK 1/2. Cortes histológico que apresentavam corpos lúteos foram submetidos ainda a imunoistoquímica com anticorpos que reconhecem p-BCL2 (fosfo células B de linfoma 2) e COX-2 (ciclooxigenase 2). As freqüências de folículos marcados foram avaliadas em relação à presença ou não de marcação celular para as duas enzimas. Já os fragmentos de corpo lúteo foram avaliados de acordo com escores de intensidade de marcação para os quatro anticorpos. As freqüências das marcações nos folículos estudados foram comparadas por meio do teste qui-quadrado. Em folículos pré-antrais, tanto a MEK quanto a ERK 1/2 apresentaram níveis elevados entre os dias 16 a 18. No caso da p-MEK, a maior ativação dos folículos primordiais e primários ocorreu entre os dias 7 a 9. Em folículos secundários, a menor presença de folículos marcados para p-MEK ocorreu no grupo 4 a 6. Os níveis de p-ERK começaram a se elevar a partir de 13 a 15 dias, e posteriormente diminuíram. Quando comparadas as freqüências de MEK e ERK, foram registradas diferenças (p<0,0001) nos folículos antrais em comparação aos demais tipos foliculares. Concluiu-se que a intensidade de ativação das MAPKs MEK/ERK varia de acordo com as fases do ciclo estral e com a classe folicular estudada. Já os corpos lúteos foram avaliados por meio de análise de variância, após transformação dos dados, na qual foi observada que as proteínas estudadas apresentam variação no perfil de expressão, estando relacionada com o desenvolvimento, sobrevivência e morte do corpo lúteo. Sendo que o COX-2, um precursor da prostaglandina, tem capacidade de ativar as vias das MEK/ERK 1/2, diminuindo a freqüência de expressão do fator de sobrevivência celular BCL-2, levando o corpo lúteo ao momento da luteólise. Assim a avaliação do perfil de ativação das MAPKs in vivo, sem a utilização de protocolos hormonais, demonstrou a importância desta via enzimática durante o processo fisiológico reprodutivo, abrindo espaço para futuras indagações e possibilidades de ampliação de conhecimento a cerca do funcionamento hormonal e sua associação com os mecanismos celulares ativados pelos hormônios

Extensos dados na literatura têm assinalado a importância da serotonina (5-HT) na modulação de comportamentos de medo e ansiedade em roedores, a grande maioria utilizando ratos machos como sujeitos experimentais. No presente trabalho, foi analisada a influência da neurotransmissão 5-HT periférica e central sobre a expressão da resposta de medo condicionado e incondicionado de ratos machos e fêmeas, previamente selecionados pelo fenótipo como animais de baixa (BA) ou de alta (AA) reatividade emocional. Para este fim foi utilizado o teste do sobressalto potencializado pelo medo (SPM). A influência global e central de 5-HT foi avaliada pela utilização da administração sistêmica ou intraventricular aguda do inibidor irreversível da enzima triptofano hidroxilase PCPA (p-clorofenilalanina) nas doses de 200 mg/mL (i.p.) e 200 µg/5 µL (i.v.), ou através de infusões locais de 5-HT (10 nmol/0.2 µL) ou do agonista seletivo de receptores 5-HT1A 8-hidroxi-2-(di-n-propilamino)-tetralina (8-OH-DPAT) na dose de 0,3 µg/0.2 µL, diretamente em áreas encefálicas conhecidas por sua influência na modulação do medo e ansiedade a saber: o córtex pré-limbico (CPL), o núcleo basolateral da amígdala (BLA), e a substância cinzenta periaqueductal dorsal (SCPd) do mesencéfalo. As variáveis dependentes registradas foram a amplitude e a latência das respostas incondicionadas e condicionadas de sobressalto e a amplitude do SPM. / Extensive data in the literature have signaled the importance of serotonin (5-HT) on the modulation of fear and anxiety-like behaviors in rodents. In the present study, we have analyzed the influence of peripheral and central 5-HT neurotransmission on the expression of the conditioned and unconditioned fear, and on the fear-potentiated startle in male and female rats previously selected as low- (LA) or high-anxiety (HA). For this purpose, we used the fear-potentiated startle (FPS) test. The global and central influence of 5-HT was evaluated by using the acute systemic or intraventricular administration of the irreversible tryptophan hydroxylase inhibitor PCPA (p-chlorophenylalanine - 200 mg/mL i.p., or 200 µg/5 µL i.v.). Local effects were evaluated through local infusions of 5-HT itself (10 nmol/0.2 µL) or the selective 5-HT1A receptors agonist 8-hydroxy-2-(di-n-propylamino)-tetralin (8-OH-DPAT 0.3 µg/0.2 µL) in the prelimbic cortex (PrL), basolateral amygdala (BLA) or the dorsal periaqueductal gray (DPAG). These brain regions were chosen for the present study based on their great importance in the modulation and expression of conditioned and unconditioned fear. Dependent variables recorded were the amplitude and latency of unconditioned and conditioned fear, and fear-potentiated startle (FPS).

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:37:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DiegoSS_DISSERT.pdf: 636795 bytes, checksum: 620ad21d2b47550b5781855775d7f30a (MD5) Previous issue date: 2011-05-17 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Memory and anxiety are related phenomena. Several evidences suggest that anxiety is fundamental for learnining and may facilitate or impair the memory formation process depending of the context. The majority of animal studies of anxiety and fear use only males as experimental subjects, while studies with females are rare in the literature. However, the prevalence in phobic and anxiety disorders is greater in women than in men. Moreover, it is known that gender maybe influence benzodiazepine effects, the classic drugs used for anxiety disorders treatment. In this respect, to further investigate if fear/anxiety aspects related to learning in female subjects would contribute to the study of phobic and anxiety disorders and their relationship with learning/memory processes, the present work investigates (a) the effects of benzodiazepine diazepam on female rats performance in a aversive memory task that assess concomitantly anxiety/emotionality, as the interaction between both; (b) the influence of estrous cycle phases of female rats on diazepam effects at aversive memory and anxiety/emotionality, and the interaction between both and (c) the role of hormonal fluctuations during estrous cycle phases in absence of diazepam effects in proestrus, because female rats in this phase received or not mifepristone, the antagonist of progesterone receptor, previously to the diazepam treatment. For this purpose, the plus maze discriminative avoidance task, previously validated for studies of anxiety concomitantly to learning/memory, was used. The apparatus employed is an adaptation of a conventional plus maze, with two opens arms and two closed arms, one of which presenting aversive stimulation (noise and light). The parameters used were: time in non-aversive arm compared to time in aversive and percentage of time in aversive arm on several temporal divisions, in order to evaluate memory; percentage of time in open arms, risk assessment, head dipping and end exploring to evaluate anxiety ; and distance traveled for locomotion. In experiment I, we found anxiolytic effect of diazepam only for 4 mg/kg dose, however the amnestic effect appear at a dose of 2 mg/kg. In second experiment, rats were divided in groups according estrous cycle phase (metaestrus/diestrus, proestrus e estrus). In this experiment, when we considered estrous cycle phase or diazepam treatment, the results did not demonstrate any differences in anxiety/emotionality parameters. The amnestic effects of diazepam occur in female rats in metestrus/diestrus and estrus and is absent in proestrous rats. Proestrous female rats that received mifepristone exhibited the amnestic effect of diazepam and also anxiolytic effects, that it was not previously observed in this dose. The results have demonstrated dissociation of anxiolytic and amnestic diazepam effects, not previously observed in males; the absence of amnestic effect of diazepam in proestrous phase; and the possible role of progesterone in aversive memory over diazepam effect, because the mifepristone, associated with diazepam, caused amnestic effect in proestrus / A mem?ria e a ansiedade s?o fen?menos relacionados. Diversas evid?ncias sugerem que a ansiedade ? fundamental para o aprendizado, podendo facilitar ou prejudicar a forma??o de mem?rias dependendo da situa??o, o que se constitui num fator relevante tanto para o funcionamento normal dos processos cognitivos quanto para a compreens?o dos transtornos de ansiedade. A maioria dos estudos com modelos animais que se prop?e a estudar medo e ansiedade usa machos como sujeitos experimentais existindo, assim, escassez no estudo de f?meas na literatura. Entretanto, a preval?ncia para transtornos f?bico-ansiosos ? maior em mulheres do que em homens. Al?m disso, sabe-se que o g?nero pode influenciar o efeito de benzodiazep?nicos, f?rmacos classicamente utilizados no tratamento de transtornos de ansiedade. No intuito de contribuir para o estudo de transtornos f?bico-ansiosos e sua rela??o com processos de mem?ria e aprendizado, o presente trabalho investigou (a) os efeitos do benzodiazep?nico diazepam sobre o desempenho de ratas em uma tarefa de mem?ria aversiva com concomitante avalia??o da ansiedade/emocionalidade; (b) a influ?ncia das fases do ciclo estral de ratas no efeito do diazepam na ansiedade/emocionalidade e mem?ria aversiva, assim como a intera??o entre ambas e (c) o papel de flutua??es hormonais ao longo das fases do ciclo sobre aus?ncia do efeito do diazepam no proestro, pois ratas nessa fase receberam ou n?o o antagonista do receptor da progesterona, mifepristona, previamente ao tratamento com diazepam. Para isso, foi utilizado o modelo da esquiva discriminativa em labirinto cruz elevado, previamente validado para estudos envolvendo ansiedade e aprendizagem. O aparato utilizado ? uma adapta??o do labirinto em cruz elevado convencional, constitu?do de dois bra?os abertos e dois bra?os fechados sendo que um dos fechados tem uma estimula??o aversiva com som e luz. Foram utilizados os par?metros: tempo no bra?o n?o-aversivo comparado ao tempo no aversivo e percentual de tempo no bra?o aversivo em diferentes divis?es temporais para avaliar mem?ria; percentual de tempo nos bra?os abertos, avalia??o de risco, mergulhos de cabe?a e explora??o da ponta do bra?o aberto para ansiedade ; e dist?ncia percorrida para locomo??o. A partir da curva dose-resposta, no primeiro experimento, observamos o efeito ansiol?tico (4mg/kg) e amn?stico (2mg/kg) do diazepam. No segundo experimento, as ratas foram separadas de acordo com as fases do ciclo estral (metaestro/diestro, proestro e estro). N?o foram observadas diferen?as significativas na ansiedade/emocionalidade, nem entre fases do ciclo, nem do tratamento com diazepam (2mg/kg). O efeito amn?stico do diazepam ocorreu nas ratas em metaestro/diestro e estro, estando ausente nas ratas em proestro. Na presen?a da mifepristona as ratas em proestro exibiram o efeito amn?stico do diazepam e tamb?m passaram a apresentar efeito ansiol?tico, o qual n?o havia sido observado previamente nesta dose. Os resultados demonstraram dissocia??o de efeitos amn?sticos e ansiol?ticos em f?meas, n?o previamente observada em machos; aus?ncia do efeito amn?stico do diazepam no proestro, que ocorre nas outras fases e o poss?vel papel da progesterona na mem?ria aversiva sob efeito do diazepam, uma vez que a mifepristona possibilitou o efeito amn?stico no proestro, fase na qual os n?veis de progesterona est?o elevados