MACEDO, Francisco Yuri Bulcão de. Efeito protetor da interleucina-4 (IL-4) na cistite hemorrágica induzida por ifosfamida em camundungos. 2010. 110 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-27T13:46:30Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_fybmacêdo.pdf: 3656863 bytes, checksum: 84341da892038b754485e73365adc15a (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-27T15:57:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_fybmacêdo.pdf: 3656863 bytes, checksum: 84341da892038b754485e73365adc15a (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-27T15:57:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_fybmacêdo.pdf: 3656863 bytes, checksum: 84341da892038b754485e73365adc15a (MD5) Previous issue date: 2010 / Hemorrhagic cystitis (HC) is a limiting side effect from the clinic use of chemotherapy agents, mainly cyclophosphamide (CYP) and ifosfamide (IFS). This is due to the fact that acrolein is a urinary metabolite of CYP and IFS, which has been demonstrated to be the causative agent of hemorrhagic cystitis (HC) induced by these compounds. Based on previous experimental studies, most of them from the Laboratory of Pharmacology of Inflammation and Cancer of Federal University of Ceará, it was demonstrated the participation of inflammatory cytokines such as TNF-α, IL-1β, and the expression of iNOS and COX-2 in ifosfamide-induced HC. Thus, knowing that interleukin-4 (IL- 4) is an anti-inflammatory cytokine able to prevent the production of TNF-α, IL-1β, and decrease the expression of inflammatory enzymes such as iNOS and COX-2, we investigated whether IL- 4 is capable of reducing inflammatory changes seen with ifosfamide-induced HC. For this, male Swiss mice (25-30 g; 6 per group) were treated with saline or ifosfamide (400 mg/kg, intraperitoneally (ip) and analyzed by changes in bladder wet weight (BWW), macroscopic and microscopic parameters, exudate, and hemoglobin quantification. In other groups, IL- 4 (0,4; 2 or 10 ng) was administered ip 1h before ifosfamide administration. In other experimental groups, C57BL/6 WT (wild type) and C57BL/6 WT IL- 4 (-/-) knockout animals were treated with ifosfamide and analyzed for changes in BWW. Immunohistochemistry to TNF-α and IL-1β as well as protein identification by Western blot assay for iNOS and COX-2 were carried out on ifosfamide and IL- 4 treated animals. In other experimental groups, anti-IL- 4 serum was given (50 µL/animal, ip) 30 min before ifosfamide. In IL- 4 treated animals, BWW change was significantly less in animals treated with ifosfamide administration only, being reduced by 27% and 39% (2 and 10 ng respectively). Vascular permeability was reduced by 29% and 24%, and hemorrhage by 47% and 61% in those animals treated with IL- 4 (2 and 10 ng respectively). Exogenous IL- 4 also attenuated TNF-α, IL-1 β, iNOS and COX-2 expression on ifosfamide treated bladders. Moreover, knockout animals for IL- 4 (-/-) and animals treated with anti-IL- 4 serum exhibit a more severe degree of inflammation when compared to the wild type mice (approximately 44% and 28% respectively). IL- 4, an anti-inflammatory cytokine, can attenuate the inflammation seen with ifosfamide-induced hemorrhagic cystitis. / A cistite hemorrágica (CH) é um efeito indesejado limitante do uso clínico dos agentes quimioterápicos do grupo das oxazafosforinas, principalmente ciclofosfamida (CFS) e ifosfamida (IFS). Isto se deve à formação de acroleína como subproduto do metabolismo dessas drogas. A partir de prévios trabalhos conduzidos no Laboratório de Farmacologia da Inflamação e do Câncer da Universidade Federal do Ceará, sabe-se que o óxido nítrico (NO) através da ativação de iNOS, o fator de ativação plaquetária, citocinas, como o TNF-α e IL-1β, e prostaglandinas, pela ativação da enzima ciclooxigenase-2 (COX-2), são mediadores chave envolvidos nos eventos inflamatórios da CH, evidenciados pelo dano urotelial, edema e hemorragia. Sabendo-se que interleucina- 4 (IL- 4) é uma citocina antiinflamatória capaz de prevenir a produção de TNF-α, IL-1β e de atenuar a expressão de enzimas inflamatórias como iNOS e COX-2, foi investigado se IL- 4 é capaz de reduzir as alterações inflamatórias vistas na CH induzida por IFS. Para tanto, camundongos Swiss (25-30 g; n=6 por grupo) foram tratados com salina ou IFS (400 mg/kg, ip), e foram analisados por alterações no peso úmido vesical (PUV), mudanças macroscópicas e microscópicas, além da quantificação de edema e hemoglobina vesical. Em outros grupos experimentais, IL- 4 (0,4; 2 ou 10 ng) foi administrada ip uma hora antes à administração de IFS. Em outro experimento, camundongos C57BL/6 selvagens e C57BL/6 nocaute para o gene da IL- 4 (-/-) foram tratados com IFS e analisados quanto a mudanças no PUV. Imunohistoquímica para IL-1β e TNF-α, bem como identificação de proteínas pela técnica de Western blot para iNOS e COX-2 foram conduzidos nos animais tratados com IL- 4. Também avaliou-se a administração de soro anti-IL- 4 (50 µl/animal, ip) em animais selvagens meia hora antes IFS. Nos animais tratados com IL- 4 (2 e 10 ng), o PUV foi significativamente reduzido em 27% e 39% respectivamente quando comparados ao grupo tratado apenas com IFS. O extravasamento vascular foi reduzido em 29% e 24% e a hemorragia em 47% e 61% nos animais tratados com IL- 4 (2 e 10 ng respectivamente para ambos). A administração de IL- 4 exógena também atenuou a expressão de TNF-α, IL-1β significativamente, e a expressão de iNOS em 27% (dose de 10 ng) e COX-2 em 80% e 76% (doses de 2 e 10 ng, respectivamente), sendo ambos resultados significantes estatisticamente. Em adição, animais nocaute para IL- 4 (-/-) e camundongos tratados com soro anti-IL- 4 exibiram um grau de CH pior quando comparados aos camundongos tratados com IFS apenas, em torno de 44% e 28% respectivamente. IL- 4, uma citocina antiinflamatória, pode reduzir os fenômenos inflamatórios vistos na CH induzida por IFS.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental / Made available in DSpace on 2012-10-23T06:23:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 246643.pdf: 4402939 bytes, checksum: d69efc992ab8c5897662a2b4f0cf54e0 (MD5) / A ciclofosfamida (CF) é um antineoplásico derivado da mostarda nitrogenada, utilizada no tratamento de vários tipos de câncer. Esse fármaco é incorporado ao meio ambiente, principalmente por excreção urinária de pacientes em tratamento antineoplásico. A CF apresenta uma baixa biodegradabilidade em estações de tratamento de esgoto que operam com sistema aeróbio (KÜMMERER, 2001), indicando que a mesma pode retornar aos corpos d'água. Esse antineoplásico foi selecionado para realização deste estudo por ser amplamente utilizado em estabelecimentos de saúde dedicados ao tratamento de câncer. Este trabalho tem como objetivo estabelecer o grau de biodegradabilidade desse fármaco, verificando também a sua interferência sobre o processo anaeróbio. O teste de biodegradabilidade foi realizado em escala laboratorial. A efetividade do processo de biodegradação da CF foi avaliada através de medição de biogás, análises cromatográficas e toxicológicas utilizando amostras dos efluentes antes e após o tratamento. Os resultados obtidos mostraram que a taxa de remoção de CF variou entre 75,00 a 98,17 %, não sendo detectados metabólitos da degradação da CF. A produção de biogás entre as amostras ocorreu de forma análoga, indicando que a CF não interferiu negativamente na atividade dos microrganismos anaeróbios, essenciais para o sistema. Já, nos ensaios toxicológicos, as amostras de após o tratamento apresentaram uma redução da toxicidade de até 77,5 % em relação às amostras antes do tratamento. No entanto, os valores de CE50 48h encontrados nas amostras indicam que elas ainda possuem uma alta toxicidade, mesmo após o processo de tratamento anaeróbio. The cyclophosphamide (CF) is an antineoplasic derivate from the hydrogenated mustard, used in various type of cancer treatment. This drug is integrated into the environment mainly through the urine from patients under cancer treatment. It presents a low biodegradability in wastewater treatment plants operated through aerobic system (KÜMMERER, 2001), indicating that the same is able to return to the water bodies. The CF was selected for the achievement of this study due to its extended use in the cancer health establishments. The objective of this work is to assess its biodegradability degree as well as to verify its possible interference on the anaerobic process. The biodegradability test was performed on a laboratorial scale. The CF biodegradation efficiency was determined by measuring the produced biogas and through chromatographic and toxicology analysis on effluent samples before and after the treatment. The obtained results showed that the CF removal rate, for different samples, varied between 75,00 and 98.17%, sub products of CF degradation were not detected. The biogas production between tested samples occurred in a similar form, indicating that the CF does not interfere with the activity of the anaerobic microorganisms, essentials for the system. On the other hand in the toxicological tests, the samples after the treatment exhibited a toxicity decrease of 77.5% related to the samples of before the treatment, however, the obtained values of CE50 48h in the effluents still prove its high toxicity of all the samples, even after the anaerobic treatment.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:35:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 324637.pdf: 1897248 bytes, checksum: b9dbb12df301eef47b15a90504d1db3d (MD5) Previous issue date: 2013 / A proposta do presente estudo foi avaliar a participação dos receptores CXCR2 e TRPV1 na cistite induzida por ciclofosfamida (CYP) em ratos. A CYP é um quimioterápico cujo principal efeito adverso é a urotoxicidade, caracterizada pelo desenvolvimento de cistite hemorrágica e fibrose da bexiga urinária. A administração sistêmica de CYP causou inflamação da bexiga urinária, disfunção do processo de micção e comportamento de dor visceral. A cistite induzida por CYP foi caracterizada por aumento do peso úmido da bexiga urinária, edema, hemorragia, infiltração de neutrófilos e dano urotelial. Além disso, ocorreu um aumento nos níveis de citocinas inflamatórias como a IL-1ß e o TNF-a. A presença de dor visceral foi evidenciada através do aumento do comportamento nociceptivo, bem como pela presença de hipersensibilidade mecânica referida avaliada na pata e na região abdominal A cistite induzida por CYP alterou os parâmetros urodinâmicos do processo de micção. Ainda, a cistite induzida por CYP induziu aumento nos níveis do RNAm dos receptores CXCR2 e TRPV1 na bexiga urinária. Ensaios de imunofluorescência revelaram um aumento na expressão dos receptores CXCR2 e TRPV1 na bexiga urinária, em especial no urotélio e fibras nervosas, e nos neurônios do GRD (gânglio da raiz dorsal) após o tratamento com CYP. O pré-tratamento dos animais com os antagonistas seletivos dos receptores CXCR2 (SB225002) e TRPV1 (SB366791) reduziu o edema e a hemorragia, o peso úmido, a infiltração de neutrófilos determinada através dos níveis de atividade da enzima mieloperoxidase (MPO), bem como os níveis das citocinas IL-1ß e TNF-a na inflamação da bexiga urinária. Curiosamente, os antagonistas SB225002 e SB366791, ou a combinação de ambos, reduziu significativamente os escores comportamentais nociceptivos e a hipersensibilidade mecânica na pata e na região abdominal, causados pela CYP. Além disso, o aumento dos níveis de RNAm dos receptores CXCR2 e TRPV1 na bexiga após a administração de CYP, foi inibido pelo pré-tratamento com o SB225002, SB366791 ou pela combinação de ambos os antagonistas. A disfunção da bexiga urinária, avaliada através de cistometria, foi evidenciada pelo aumento do número de contrações não associadas à micção (CNMs) e nas pressões vesicais e também pela redução da capacidade da bexiga, do volume de urina eliminado e da eficiência de esvaziamento vesical. O pré-tratamento com o antagonista SB225002 ou a sua combinação com SB366791, reduziu as pressões vesicais, enquanto que os antagonistas SB225002 e SB366791, administrados isoladamente ou a combinação de ambos, causaram um aumento da capacidade da bexiga, do volume eliminado e da eficiência de esvaziamento da bexiga urinária, além de reduzir o número de CNMs. Tomados em conjunto os resultados obtidos no presente estudo sugerem um potencial efeito benéfico dos antagonistas seletivos dos receptores CXCR2 e TRPV1 na inflamação, na dor e nas alterações funcionais da bexiga urinária após a cistite induzida pela CYP.<br> / Abstract : The purpose of this study was to evaluate the role of CXCR2 and TRPV1 receptors in the rat model of cyclophosphamide (CYP) induced cystitis. CYP is a chemotherapeutic agent that induces urotoxicity characterized by the development of hemorrhagic cystitis and urinary bladder fibrosis. Systemic administration of CYP induced bladder inflammation, voiding dysfunction and visceral pain behavior. CYP-induced cystitis was characterized by edema, hemorrhage, increased neutrophil infiltration, urothelial damage, increased bladder wet weight. Furthermore, there was an increase in the levels of inflammatory cytokines such as IL-1ß and TNF-a. Visceral pain was determined by the increase in the nociceptive behavior as well as mechanical hypersensitivity measured by von Frey filaments applied in the paw and abdominal area. CYP-induced cystitis altered bladder contractility and urodynamic parameters involved in voiding function. Also, CYP-induced cystitis increased the mRNA levels of CXCR2 and TRPV1 receptors in the urinary bladder. Immunofluorescence assays revealed an increase in the expression of CXCR2 and TRPV1 receptors in the urinary bladder, particular in the urothelium, and in DRG neurons (dorsal root ganglia) after CYP treatment. Pretreatment of animals with selective antagonists of CXCR2 (SB225002) and TRPV1 (SB366791) receptors significantly reduced the edema and hemorrhage, the bladder wet weight, neutrophil infiltration, myeloperoxidase activity (MPO) and the cytokines levels in the urinary bladder. Interestingly, the administration of the antagonists, SB225002 and SB36679, or the combination of both, significantly reduced the behavioral nociceptive scores and the mechanical hypersensitivity in the paw and in the abdominal area, caused by CYP. In addition, increased levels of CXCR2 and TRPV1 mRNA in the bladder after CYP administration, was inhibited by the pre-treatment with SB225002, SB366791 or the combination of both antagonists. The urinary bladder dysfunction was assessed by cystometry and determined by an increase in the number of non-voiding contractions (NVCs) and in bladder pressure and also by the reduction in bladder capacity, voided volume and bladder efficiency. Of note, the pretreatment with the antagonist SB225002 or its combination with SB366791 significantly reduced the bladder pressure, whereas the antagonists SB225002 and SB366791, administered alone or in combination resulted in an increased bladder capacity, voided volume and bladder efficiency, and reduced the number of NVCs. Taken together, these results indicate a potential role for CXCR2 and TRPV1 receptors antagonists in inflammation, pain and functional alterations in the bladder after CYP -induced cystitis.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-09-05T04:11:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 348078.pdf: 1068588 bytes, checksum: db47e704a25f47d27aa2871de405437f (MD5) Previous issue date: 2017 / Uma das principais aplicações da entomologia forense médico-legal é a estimativa do intervalo pós-morte (IPM). Entretanto, certas substâncias químicas presentes em um cadáver podem interferir no desenvolvimento dos insetos que se alimentam dele, sendo importante conhecer estes efeitos para uma estimativa mais precisa do IPM. Entomotoxicologia é o ramo da entomologia forense que estuda o uso de insetos necrófagos na detecção e análise de drogas e outras substâncias em tecidos em decomposição, além de investigar seus possíveis efeitos no desenvolvimento destes artrópodes. Sendo assim, o objetivo principal deste trabalho foi investigar o impacto dos quimioterápicos ciclofosfamida (CF) e metotrexato (MTX) no desenvolvimento pós-embrionário de Chrysomya megacephala. Para isso, foram feitos experimentos in vitro com diferentes concentrações destas drogas incorporadas em carne bovina moída, simulando as dosagens injetadas em humanos que passam por quimioterapia. Foram feitos cinco tratamentos para a alimentação das larvas em cada experimento, sendo um controle negativo (água destilada). Para a CF foram utilizadas ½ Dose inicial intravenosa - DIIv (25 mg/kg), 1 DIIv (50 mg/kg), 2 DIIv (100 mg/kg) e 4 DIIv (200 mg/kg); e para o MTX foram utilizadas ½ Dose Inicial Intraperitoneal - DIIp (5 mg/kg), 1 DIIp (10 mg/kg), 2 DIIp (20 mg/kg) e 4 DIIp (40 mg/kg). Todos os tratamentos foram realizados em triplicata e mantidos a 25°C em estufa BOD. A cada 12 horas eram retiradas três larvas de cada tratamento, sacrificadas e o comprimento total de cada uma era medido com auxílio de um paquímetro digital, até o abandono da dieta para pupariação. Foi também realizado um experimento a parte sem manipulação das larvas para calcular as taxas de sobrevivência larval e total para cada tratamento, além da proporção sexual das moscas emergidas. ANOVA e teste Tukey foram realizados para comparar o efeito das drogas sobre o desenvolvimento de C. megacephala. Os resultados indicaram claramente que ambos os medicamentos afetaram o desenvolvimento e sobrevivência de C. megacephala, porém de forma heterogênea. Além disso, houve um desvio da razão sexual esperada nas larvas expostas ao MTX, emergindo uma quantidade significativamente maior de fêmeas do que machos. Estes fatores de interferência negativa devem ser considerados em casos de morte suspeita de pessoas que faziam uso destes medicamentos para que não haja uma subestimativa de IPM.<br> / Abstract : One of the main applications of medico-legal forensic entomology is the estimation of the postmortem interval (PMI). However, certain chemical substances present in a cadaver can interfere in the development of the insects that feed on it, thus it is important to know these effects for a more accurate estimation of PMI. Entomotoxicology is the branch of forensic entomology that studies the use of scavenger insects in the detection and analysis of drugs and other substances in decomposing tissues, in addition to investigating their possible effects on the development of these arthropods. Therefore, the main purpose of this work was to investigate the impact of the chemotherapeutic drugs cyclophosphamide (CF) and methotrexate (MTX) on the post-embryonic development of Chrysomya megacephala. For this, in vitro experiments were performed with different concentrations of these drugs incorporated in minced beef, simulating the dosages injected in humans that undergo chemotherapy. Five treatments were done to feed the larvae in each experiment, with one as a negative control (distilled water). For CF, ½ initial intravenous dose - DIIv (25 mg/kg), 1 DIIv (50 mg/kg), 2 DIIv (100 mg/kg) and 4 DIIv (200 mg/kg) were used; and for MTX ½ Initial Intraperitoneal Dose - DIIp (5 mg/kg), 1 DIIp (10 mg/kg), 2 DIIp (20 mg/kg) and 4 DIIp (40 mg/kg) were used. All treatments were performed in triplicate and maintained at 25°C in a BOD chamber. At every 12 hours three larvae of each treatment were removed, sacrificed and the total length of each one was measured with the aid of a digital caliper until the abandonment of the diet for pupariation. A separate experiment without manipulation of the larvae was also performed to calculate the larval and total survival rates for each treatment, in addition to the sex ratio of the emerged flies. ANOVA and Tukey test were performed to compare the effect of drugs on the development of C. megacephala. The results clearly indicated that both drugs affected the development and survival of C. megacephala, but in a heterogeneous manner. In addition, there was a deviation in the expected sex ratio in MTX-exposed larvae, with significantly more females than males emerging. These negative interference factors should be considered in cases of suspected death of people using these drugs so that there is no underestimation of PMI.

A farmacocinética dos enantiômeros da ciclofosfamida (CPA) foi avaliada em pacientes portadores de nefrite lúpica distribuídos em dois grupos de acordo com o clearance da creatinina: Grupo 1 90,6-144,6mL/min/1,73m2 e Grupo 2 42,8-76,4mL/min/1,73m2. Os pacientes foram tratados com doses de 0,75 a 1,3g de ciclofosfamida racêmica sob forma de infusão com duração de 2h e com 1mg de midazolam (MDZ) administrado via endovenosa para a avaliação da atividade in vivo do CYP3A. As concentrações plasmáticas dos enantiômeros da CPA e do MDZ foram avaliadas por LC-MS/MS. Os enantiômeros da CPA foram resolvidos na coluna Chiralcel OD-R, com fase móvel constituída por mistura de acetonitrila e água (75:25, v/v) adicionada de 0,2% de ácido fórmico. Os enantiômeros da CPA foram extraídos do plasma com recuperações maiores que 95% e o limite de quantificação obtido foi de 2,5ng de cada enantiômero da CPA/mL plasma. As seguintes diferenças (teste de Wilcoxon, p<0,05) foram observadas nos parâmetros farmacocinéticos entre os enantiômeros (S)-(-)-CPA e (R)-(+)-CPA para os pacientes do Grupo 1: AUC do tempo 0 ao infinito 152,41 vs 129,25g.h/mL; Cl 3,28 vs 3,89L/h; Vd 31,38 vs 29,74L e t1/2 6,79 vs 5,56h e para os pacientes do Grupo 2: AUC do tempo 0 ao infinito 167,20 vs 139,08g.h/mL; Cl 2,99 vs 3,59L/h e t1/2 6,15 vs 4,99h. Não foi observada diferença (teste de Mann-Whitney, p<0,05) nos parâmetros farmacocinéticos de ambos os enantiômeros entre os grupos 1 e 2. Não foi observada corrrelação entre o clearance do MDZ (2,92-16,40ml/min.kg) e o clearance de cada enantiômero da CPA. Concluindo, a farmacocinética da CPA é enantiosseletiva em pacientes portadores de nefrite lúpica com acúmulo plasmático do enantiômero (S)-(-)-CPA e a farmacocinética de ambos os enantiômeros da CPA não é alterada pela agravamento da função renal. / The pharmacokinetics of cyclophosphamide (CYC) enantiomers was evaluated in patients with lupus nephritis distributed in two groups according to creatinine clearance; Group 1 - 90.6-144.6mL/min/1.73m2 and Group 2 - 42.8- 76.4mL/min/1.73m2. All patients were treated with 0.75 to 1.3g of racemic CYC as a 2-hour infusion and with 1mg intravenous midazolam as a drug marker. CYC enantiomers and midazolam concentrations in plasma were measured by LC-MS/MS. CYC enantiomers were separated on a Chiralcel OD-R column, with the mobile phase consisting of a mixture of acetonitrile and water (75:25, v/v) plus 0.2% formic acid. Recovery rates were higher than 95% and the quantification limit was 2.5ng/ml plasma for both enantiomers. The coefficients of variation and the relative errors obtained for the validation of intra- and interassay precision and accuracy were less than 10%. The following differences in the pharmacokinetic parameters (Wilcoxon test, p<0.05) were observed between the (S)-(-) and (R)-(+) enantiomers for Group 1 AUC from time 0 to infinity 152.41 vs 129.25g.h/mL, Cl 3.28 vs 3.89L/h, Vd 31.38 vs 29.74L and t1/2 6.79 vs 5.56h and for Group 2 AUC from time 0 to infinity 167.20 vs 139.08g.h/mL, Cl 2.99 vs 3.59 L/h and t1/2 6.15 vs 4.99 h. No differences (Mann-Whitney test, p<0.05) were observed between Groups 1 and 2 in the pharmacokinetics parameters of both enantiomers. No significant relationship was observed between midazolam clearance (2.92-16.40 ml/min.kg) and clearance of each CYC enantiomer. In conclusion, CYC kinetic disposition is enantioselective resulting in higher exposure of (S)-(-)-CYC in lupus nephritis patients and the pharmacokinetic parameters of both enantiomers are not altered by the worsening of renal condition.

El objetivo del estudio fue determinar la incidencia de reacciones adversas medicamentosas (RAM) producidas por el uso de ciclofosfamida endovenoso (CFA- EV) en un grupo de 30 pacientes con Lupus Eritematoso Sistémico en el Servicio de Reumatología del Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen que iniciaron el tratamiento entre enero de 1999 a diciembre del 2001, los datos se obtuvieron por la evaluación de las historias clínicas entre los meses de junio a septiembre del 2002 determinándose que el 100% de los pacientes presentaron RAM. La leucopenia fue la RAM más frecuente presentándose en el 76,7% de los pacientes durante el tratamiento. Utilizando el Algoritmo de Decisión aplicado por el Centro Nacional de Farmacovigilancia e Información de Medicamentos de la Dirección General de Medicamentos, Insumos y Drogas del Ministerio de Salud (CENAFIM – DIGEMID – MINSA), determinamos que del total de las RAM identificadas el 38,2% fueron de causa definida y el 58,4% corresponde a RAM serias. El medico clínico tuvo que suspender definitivamente el tratamiento con CFA-EV a 9 de los 30 pacientes, por presentar RAM severas. A través de la medida de asociación estadística Odds Ratio se determinó que existe relación entre las dosis administradas por superficie corporal de CFA-EV y la presencia de náuseas, vómitos y leucopenia. Se propone una guía para el manejo de las RAM a CFA-EV en los pacientes con LES, elaborada en base a la experiencia recogida durante nuestro estudio. / The goal of this study was to determine the effect of drug adverse reactions (DAR) produced by the use of intravenous cyclophosphamide in a group of 30 patients with Systemic Lupus Erythematosus (SLE) in the Rheumatology's Service of the National Hospital Guillermo Almenara Irigoyen from Lima-Perú. These patients initiated the treatment between January 1999 to December 2001, the information was obtained by the evaluation of the clinical histories between June to September 2002. We determined that 100 % of the patients presented DAR. The leucopenia was the most frequent DAR appearing in 76,7 % of the patients during the treatment. Using the Algorithm of Decision applied by Farmacovigilancia's National Center and Information of Dirección General de Medicamentos, Insumos y Drogas - Ministerio de Salud (CENAFIM - DIGEMID - MINSA), of the identified DARs, 38,2 % was from definite cause and 58,4 % corresponds to serious DAR The clinical doctor had to suspend definitively the treatment with intravenous cyclophosphamide to 9 of 30 patients, for presenting severe RAM. By the measurement of statistical association Odds Ratio we determined that it exists relation between the administered doses by cyclophosphamide's corporal surface and the presence of nauseas, vomits and leucopenia. We propose a guide for the managing of DAR to intravenous cyclophosphamide in patients with SLE, elaborated on the basis of the experience gathered along the present study. / Tesis

El objetivo del estudio fue determinar la incidencia de reacciones adversas medicamentosas (RAM) producidas por el uso de ciclofosfamida endovenoso (CFA- EV) en un grupo de 30 pacientes con Lupus Eritematoso Sistémico en el Servicio de Reumatología del Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen que iniciaron el tratamiento entre enero de 1999 a diciembre del 2001, los datos se obtuvieron por la evaluación de las historias clínicas entre los meses de junio a septiembre del 2002 determinándose que el 100% de los pacientes presentaron RAM. La leucopenia fue la RAM más frecuente presentándose en el 76,7% de los pacientes durante el tratamiento. Utilizando el Algoritmo de Decisión aplicado por el Centro Nacional de Farmacovigilancia e Información de Medicamentos de la Dirección General de Medicamentos, Insumos y Drogas del Ministerio de Salud (CENAFIM – DIGEMID – MINSA), determinamos que del total de las RAM identificadas el 38,2% fueron de causa definida y el 58,4% corresponde a RAM serias. El medico clínico tuvo que suspender definitivamente el tratamiento con CFA-EV a 9 de los 30 pacientes, por presentar RAM severas. A través de la medida de asociación estadística Odds Ratio se determinó que existe relación entre las dosis administradas por superficie corporal de CFA-EV y la presencia de náuseas, vómitos y leucopenia. Se propone una guía para el manejo de las RAM a CFA-EV en los pacientes con LES, elaborada en base a la experiencia recogida durante nuestro estudio. / The goal of this study was to determine the effect of drug adverse reactions (DAR) produced by the use of intravenous cyclophosphamide in a group of 30 patients with Systemic Lupus Erythematosus (SLE) in the Rheumatology's Service of the National Hospital Guillermo Almenara Irigoyen from Lima-Perú. These patients initiated the treatment between January 1999 to December 2001, the information was obtained by the evaluation of the clinical histories between June to September 2002. We determined that 100 % of the patients presented DAR. The leucopenia was the most frequent DAR appearing in 76,7 % of the patients during the treatment. Using the Algorithm of Decision applied by Farmacovigilancia's National Center and Information of Dirección General de Medicamentos, Insumos y Drogas - Ministerio de Salud (CENAFIM - DIGEMID - MINSA), of the identified DARs, 38,2 % was from definite cause and 58,4 % corresponds to serious DAR The clinical doctor had to suspend definitively the treatment with intravenous cyclophosphamide to 9 of 30 patients, for presenting severe RAM. By the measurement of statistical association Odds Ratio we determined that it exists relation between the administered doses by cyclophosphamide's corporal surface and the presence of nauseas, vomits and leucopenia. We propose a guide for the managing of DAR to intravenous cyclophosphamide in patients with SLE, elaborated on the basis of the experience gathered along the present study.

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Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-11-06T19:03:45Z No. of bitstreams: 1 Daniel Huber Pessina Análise imuno fenotípica de animais nod estudo da proteção ao diabetes..pdf: 2399319 bytes, checksum: 3fc4e57719b71c97883626a074b31ce3 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-06T19:03:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Daniel Huber Pessina Análise imuno fenotípica de animais nod estudo da proteção ao diabetes..pdf: 2399319 bytes, checksum: 3fc4e57719b71c97883626a074b31ce3 (MD5) Previous issue date: 2013 / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Os animais NOD representam o principal modelo experimental de estudo do diabetes autoimune. Apesar do progressivo número de estudos realizados, muitos aspectos imunes da promoção e regulação desta doença continuam obscuros. Utilizando o modelo (pela primeira vez aqui descrito) de proteção induzida pelo T. cruzi, bem como o modelo de aceleração pela ciclofosfamida, fizemos um estudo imuno-fenotípico em animais NOD com o objetivo de elucidar mecanismos imunes responsáveis pela regulação do diabetes tipo I. Demonstramos que a infecção de camundongos NOD com o T. cruzi os protege do desenvolvimento do diabetes. Estes animais desenvolvem uma resposta ao parasita caracterizada por uma pobre expansão de células T CD8 efetoras, bem como uma menor migração destas para os sítios parasitários. Estudo do perfil de citocinas mostraram ainda uma reduzida produção inicial de IFN no baço, mas elevada produção tardia nos tecidos inflamados, comparado a animais BALB/c. Estes dados, associados a uma maior produção inicial de IL-10 por esplenócitos, justificam a maior susceptibilidade à infecção observada nos animais NOD. O estudo de populações celulares com atividade regulatória mostrou que há aumento de Treg no início da infecção. Contudo a proteção ao diabetes desencadeada pelo T. cruzi não se correlaciona ao número de células Treg, pois há uma redução destas ao longo da infecção. Este fato, associado à observação de que a ciclofosfamida é incapaz de induzir diabetes nos animais infectados, apontaram para um papel limitado destas células na proteção ao diabetes pelo T. cruzi. Entretanto, houve aumento de células Gr1+, e a depleção destas reverte a proteção ao diabetes causada pela infecção, além de induzir a expansão de células T CD8+ efetoras e sua produção de IFN. Verificamos ainda, que níveis aumentados da expressão de PD-L1 relacionaram-se com a proteção ao diabetes proporcionado pelo T. cruzi, enquanto níveis reduzidos se relacionaram ao seu desenvolvimento espontâneo. Contudo, o tratamento com ciclofosfamida não reduz a expressão de PD-L1 em linfócitos, mas induz rapidamente o diabetes em animais NOD não infectados e leva a uma drástica diminuição de células Tregs CD25+ esplênicas. Os resultados, aqui tomados em conjunto, apontam para um complexo mecanismo de controle do diabetes, que envolve diferentes populações celulares que atuam de maneira variada com o modelo estudado. / The NOD mice are the most used experimental model for the study of autoimmune diabetes. Despite progressive number of studies, many aspects about the immune regulation and disease onset remains unclear. Using our model (described here for the first time) of diabetes protection induced by T. cruzi, as well as cyclophosphamide acceleration, we performed a immunophenotypic analysis of NOD animals, aiming to elucidate the immune mechanisms responsible for regulation of type I diabetes. We demonstrated that infection of NOD mice with T. cruzi protects them from diabetes onset. These mice develop a poor expansion of effector CD8 T cells in response to parasite, and have lower percentage of those lymphocytes in inflammatory sites, when compared to BALB/c mice. Cytokine profile's analysis also revealed a reduced initial production of IFN in spleen, but high late production in inflamed tissues. Those data associated to an elevated production of IL-10 by spleen cells could explain the increased susceptibility observed in infected NOD mice. Further analysis showed an increased Treg cells rates early after infection, followed by a progressive reduction thereof along infection. This fact, coupled with the observation that cyclophosphamide is unable to induce diabetes in infected mice, indicates a limited role for these cells in diabetes protection by T. cruzi. However, increased Gr1 + cells numbers was also found in infected mice, and its depletion reverses the protection of diabetes related to infection. That reversion was associated to an expansion of effector CD8 + T cells and their production of IFN. We also found that increased expression of PD-L1 were also related to diabetes protection provided by T. cruzi infection, while low levels were related to spontaneous diabetes development. Treatment with cyclophosphamide however did not reduce PD-L1 expression on lymphocytes, despites rapidly set diabetes in NOD uninfected animals. On the other hand, cyclophosphamide leads to a drastic decrease of CD25 + Treg cells in the spleen of NOD mice. These results, taken together, point to a complex mechanism of diabetes control, which involves different cell populations acting variously with the model.

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