Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2015. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-05-20T16:15:58Z No. of bitstreams: 1 2015_JulioCesarEloiBitencourt.pdf: 1806458 bytes, checksum: 0a8d7f915ee4b218ac6e545c68b94610 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-05-20T16:54:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_JulioCesarEloiBitencourt.pdf: 1806458 bytes, checksum: 0a8d7f915ee4b218ac6e545c68b94610 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-20T16:54:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_JulioCesarEloiBitencourt.pdf: 1806458 bytes, checksum: 0a8d7f915ee4b218ac6e545c68b94610 (MD5) / Os agentes de contraste iodados atuais causam diversos efeitos adversos e não proporcionam imageamento por período maior que trinta minutos surgindo a necessidade pela busca por agentes de contraste que diminuam os efeitos adversos e propiciem um imageamento de longo prazo. Nesse sentido o desenvolvimento de um agente de contraste iodado nanoestruturado torna-se promissor uma vez que sua estrutura nano traz por si a diminuição dos efeitos adversos e esta permite controlar o tempo que o agente de contraste permanecerá no organismo fornecendo assim um imageamento mais prolongado. O presente estudo desenvolveu uma nova formulação nanoestruturada contendo agentes de contraste iodados para a utilização em raio-x utilizando duas vias de síntese, uma com carreadores nanoestruturado lipídicos, o que posteriormente demonstrou ser inviável, e a utilização das Bases de Schiff, que demonstrou ser promissora. Os carreadores nanoestruturados lipídicos demonstraram a impossibilidade de ligação covalente do iodo ao ácido graxo, fazendo com que o iodo se deslocasse facilmente para o meio, o que é inviável para um agente de contraste. As Bases de Schiff formadas se ligaram covalentemente ao iodo fazendo com que este não fosse para o meio fornecendo a formação de um agente de contraste seguro. Antes da iodação as base de Schiff foram acopladas a moléculas de ácido graxo de sete carbonos para conferir hidrofobicidade, o que é perfeito para formação de nanoemulsão. Logo após a Base de Schiff foi iodada. As estruturas, tanto lipídicas como a Base de Schiff com acoplamento com cadeia de sete carbonos e a estrutura iodada, tiveram suas capacidades de absorção de raio-x medidas no aparelho IVIS® LUMINA XR Series III. A base de Schiff iodada demonstrou uma capacidade de absorção de raio-x de cerca de 2,17 vezes maior que a água demonstrando ser excelente para a finalidade proposta. A base de Schiff iodada com cadeias C7 nanoemulsionada obteve a absorção de raio-x de cerca de 1,22 vezes maior que a água. O acoplamento com cadeias C7 à base de Schiff trouxe a inversão da densidade do óleo fazendo com que esta se tornasse mais pesado que a água provavelmente devido ao alto peso molecular conferido a base de Schiff com o acoplamento. A partir dos resultados obtidos foi observado que a base de Schiff iodada acoplada com cadeias C7 e nanoemulsionada é promissora como agente de contraste necessitando tão somente testes in vivo para completa certificação de um novo tipo de agente de contraste nanoemulsionado no mercado. / Due to the current iodinated contrast agents cause many adverse effects and not offering imaging for a period longer than thirty minutes, there is a need for the search for contrast agents that reduce the adverse effects and conducive to long-term imaging. Therefore the development of a nanostructured iodinated contrast agent becomes promising since their nano structure in itself brings the reduction of adverse effects, and this allows to control the time that the contrast agent remains in the body thereby providing a longer imaging. The objective of this study was to develop a new formulation containing nanostructured iodinated contrast agents for use in computed tomography using two synthetic routes, one with nanostructured lipid carriers, which subsequently proved to be impracticable, and another synthetic route was the use of Schiff Bases which proved to be promising. The Schiff bases had their characteristics evaluated for their preparation, iodination thereof, coupling of carbon chains to give to these lipid solubility and obtaining of X-ray image by IVIS® LUMINA XR Series III machine. The Schiff base iodinated showed an x-ray absorbing capability to approximately 2,17 times greater than the water proving to be excellent for the proposed purpose. The coupling of the C7 chains brought to the Schiff base a density inversion of the oil causing it to become heavier than water probably due to the high molecular weight given to Schiff base with the coupling. This coupled Schiff sample was taken to IVIS® LUMINA XR Series III (28 Kv 100 uA) and had demonstrated its large absorption by x-ray which shows be great for a contrast agent. The Schiff base with iodine and coupling C7 was nanoemulsioned and tested in by IVIS® LUMINA XR Series III (28 Kv 100 uA) and demonstrated x-ray absorption but not as intensely as the Schiff base iodine C7 not nanoemulsioned, probably due to the dilution that the nanoemulsion suffered. From the results obtained it was observed that the Schiff base iodinated coupled with C7 and nanoemulsioned is promising as a contrast agent requiring solely in vivo tests for full certification of a new type of contrast agent in the market nanoemulsioned.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-31 / O rim é responsável pela maior parte da excreção de substâncias, tornando-se alvo de componentes tóxicos, tais como os meios de contrastes (MCTR). Os MCTR a base de iodo são substâncias utilizadas na angiografia, urologia ou tomografia computadorizada. Essas substâncias não deveriam interagir com o organismo, porém, na prática clínica, demonstram certo grau de interação orgânica onde são filtradas e metabolizadas livremente pelos rins, podendo ocasionar insuficiência renal aguda (IRA) devido a vasoconstrição e a isquemia medular O objetivo do presente estudo foi identificar, por meio de análise bidimensional, proteínas da célula mesangial imortalizada (CMI), que poderiam eStar sub ou supra expressas quando em contato com o MCTRH e, por conseqOência desta alteração, estejam envolvidas no processo de nefrotoxicidade Essas células foram divididas em 3 grupos" controle (Ct), manitol (Man) e tratado com HexabrixR (Hx), as quais foram tratadas e em seguida, aplicou-se a análise por gel de eletroforese bidimensional (2-DE). O método inicia-se pela focalização isoelétrica (1. dimensão), onde as proteínas são separadas de acordo com seu pl. Em seguida, essas proteínas são submetidas a uma separação de acordo com sua massa molecular (2. dimensão). Como os parâmetros usados anteriormente são independentes, uma grande resolução de spots (marcações protéicas) foi atingida. Os géis bidimensionais foram corados com Coomassie. Após a identificação dos spots nos géis 2-DE, extração das proteínas e análise por espectrometria de massa, constatamos o aparecimento de algumas proteínas com expressões variadas entre os géis Ct, Man e Hx. Dentre as proteínas identifica das localizamos algumas apenas nos géis submetidos à Hx, como. Canal de tropomiosina-1alfa (TPMA), e antígeno de proliferação de núcleo celular (PCNA). Outras localizadas nos géis Man e H x estavam supra expressas em relação ao gel Ct, como a proteína de controle da translação tumoral. Em contrapartida, houve proteínas que foram apenas expressas nos géis Ct e Man, evidenciando que provavelmente o iodo contido no HexabrixR tenha ocasionado uma sub expressão dessas proteínas, tais como anexina3 e Dna ligase. Finalmente houve a identificação de proteínas que estavam expressas nos três géis (Ct, Man e Hx) embora em concentrações variáveis, como Hsp27, Erp57 e Beta actina-1. De maneira geral, fatos relevantes foram analisados, um deles é de que todas as proteínas que foram expressas nos géis Ct e Hx, também foram detectadas nos géis Man, permitindo- nos enfatizar a possibilidade de descartar o papel da osmolaridade no aumento da expressão das proteínas que foram identificadas somente no gel Hx, sugerindo, portanto, ser o iodo e não a osmolaridade o fator desencadeador das alterações da expressão protéica. Em contrapartida supõe- se ainda que a osmolaridade tenha sido a causadora do aumento da expressão de algumas proteínas apenas nos géis Man e Hx, e não no CT. Sendo assim sugerimos que o MCTR, tanto pela sua osmolaridade como por outros fatores entre eles a influência da molécula do iodo, pode regular a síntese e/ou expressão das proteínas nas células mesangiais. / The kidney is a common target organ for toxic agents, like contrast media (CM). The CM with iodine is normally used in angiography, urography and tomography. CM is filtrated and metabolized in the kidney, being the major cause of acute renal failure (ARF). Nowadays, proteome is actually a powerful tool in the Nephrology Research, mainly in the identification of protein modifications when in contact with toxic agents. This technique also gives the possibility of biomarkers identification to help the physicians in the patient treatments. The aim of this study was to separate by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2D-PAGE) and to identify by matrix-assisted laser desorption ionization-time-of-flight (MALDI-TOF) mass spectrometry the proteins that were up- or down-regulated in immortalized mesangial cell in culture (IMC) in the presence of CM. We evaluated three groups of IMC: control (CT), manitol (Man) and HexabrixTM (Hx). The samples were treated and submitted to the 2D-PAGE analysis, where the proteins were separated according to their isoelectric points and molecular weights. We identified by MALDI-TOF around 11 proteins. Some proteins were expressed only in the Hx group (Proliferating Cell Nuclear Antigen and Masp 1); others were more expressed in the Man group when compared with Hx and Ct groups (Translationally Controlled Tumor Protein). On the other hand, some proteins were expressed only in the Ct and Man groups (Annexin A3 and DNA ligase), suggesting that probably the Hx caused injury in these cells and it was responsible for the down-regulation of these proteins. Finally, we identified proteins that were expressed in the three cell groups (Heat Shock Protein 27, Heat Shock Protein 84), but with different levels. We concluded that the osmolarity of manitol and Hx could influenciate the alterations in the concentration of a specific protein. We believe that osmolarity and other factors of the CM could be responsible for the nephrotoxicity observed in this model. Proteomic analysis is a promising tool to study the renal pathophysiology making possible in the future the identification of biomarkers of renal diseases that can constitute therapeutically targets, minimizing the actual damages for the ARF. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Submitted by MARJURY CRISTINA MARONEZI null (marjury_mah@hotmail.com) on 2016-03-03T18:59:26Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Marjury.pdf: 1008361 bytes, checksum: 61c06a0623c77a91cd63571d5a013b0d (MD5) / Approved for entry into archive by Sandra Manzano de Almeida (smanzano@marilia.unesp.br) on 2016-03-04T12:49:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 maronezi_mc_me_jabo.pdf: 1008361 bytes, checksum: 61c06a0623c77a91cd63571d5a013b0d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-04T12:49:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 maronezi_mc_me_jabo.pdf: 1008361 bytes, checksum: 61c06a0623c77a91cd63571d5a013b0d (MD5) Previous issue date: 2016-02-12 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O baço é um órgão que desenvolve inúmeras funções importantes no organismo e é um dos principais locais para o desenvolvimento de tumores primários, metastáticos e afecções do sistema hematopoiético, por isso realizar uma avaliação apurada neste órgão é de suma importância, em Medicina veterinária, particularmente em cães devido à importância econômica, afetiva e de similaridade cientifica para o homem. Todavia, a maioria dos métodos utilizados para o diagnóstico conclusivo de enfermidades esplênicas são métodos invasivos, sendo que os nãos invasivos perdem em sensibilidade e especificidade, dificultando que se proceda a um correto diagnóstico. Sendo assim, este estudo prospectivo visou avaliar a aplicabilidade das novas técnicas ultrassonográficas para avaliação esplênica de caninos, utilizando a elastografia ARFI (qualitativa e quantitativa), Doppler e ultrassonografia por contraste com microbolhas, com o intuito de determinar valores ainda não descritos na veterinária, as quais forneçam subsídios suficientes para se obter um diagnóstico conclusivo sobre a condição esplênica, nesta espécie. Os resultados obtidos nos cães saudáveis, por meio da ultrassonografia modo B apresentaram-se normais, sendo que na elastografia qualitativa, as porções esplênicas avaliadas apresentaram-se não deformáveis, com parênquima homogêneo de cor cinza escuro (hard). Na elastografia quantitativa os valores médios da velocidade de cisalhamento foram de 2,32 m/s para a cabeça, 2,16 m/s para o corpo e 2,25 m/s para a cauda do baço, não apresentando diferença estatística (P > 0,05). Ao exame contrastado, foram avaliados animais com erliquiose na fase subclínica, e estes apresentaram ao exame modo-B, esplenomegalia com presença de bordas arredondadas, ecotextura heterogênea e ecogenicidade mista do baço. Ao Doppler, verificou-se valores para os índices vasculares da artéria esplênica: velocidade sistólica: 22,59 ± 8,07 cm/s; velocidade diastólica: 5,25 ± 4,66 cm/s; e índice de resistência: 0,71 ± 0,14. Pela ultrassonografia com contraste observaram-se valores para wash-in de 5,31 ± 0,7s, pico de realce de 18,56 ± 2,90s e wash-out: 94,56 ± 35,21s. A elastografia ARFI é um método recente que pode fornecer dados de base para o baço e permitir a utilização futura desta técnica, na avaliação de cães com doença esplênica. A ultrassonografia convencional do baço de cães com erliquiose associado com a utilização do método Doppler e ultrassonografia contrastada são importantes ferramentas na triagem diagnóstica e podem auxiliar a monitoração e evolução de animais na fase subclínica. / The spleen is an organ develops much important functions in the body and the spleen is one of the main organs prone to the development of primary tumors, metastasis and a broad range of diseases of the hematopoietic system perform assessment of spleen is important. In veterinary medicine, principally in dogs because of economic importance, affective and scientific similarity to humans. However, the most of the methods used for conclusive diagnosis of splenic diseases are invasive methods, noninvasive lose in sensitivity and specificity difficulting proceed to a correct diagnosis. Thus, this study aimed to perform the ultrasound scan of dogs spleen using the elastographic (qualitative and quantitative) Doppler and contrast enhanced ultrasonography. Determining values not described in veterinary, which provide sufficient subsidies to get a conclusive diagnosis of the splenic condition in this species. The results in healthy dogs showed, all splenic segments visualized with the B-mode ultrasonography appeared normal. Different splenic segments examined with qualitative elastography were free of any detectable malformations and the images appeared as homogeneous dark areas. The mean shear velocity values were 2.32 m/s for head, 2.16 m/s for body and 2.25 m/s for tail of the spleen, and they did not vary between the different age groups (P>0.05). In dogs with ehrlichiosis in subclinical phase showed, by B-mode examination, observed splenomegaly with presence of rounded borders and heterogeneous echotexture and mixed echogenicity in spleen. For Doppler found values for vascular indices of the splenic artery: systolic velocity: 22.59 ± 8.07 cm/s; diastolic velocity: 5.25 ± 4.66 cm/s; and resistance index: 0.71 ± 0.14. For contrast enhanced ultrasonography observed values for wash-in: 5.31 ± 0.7s, peak enhancement: 18.56 ± 2.90s and wash-out: 94.56 ± 35.21s. The ARFI elastography is a new method and it may aid in the diagnosis and evaluation of splenic abnormalities routinely assessed in veterinary practice. The conventional ultrasonography of the spleen in dogs with ehrlichiosis associated with hemodynamic evaluation by Doppler and contrast enhanced ultrasonography are important tools for diagnosis trial and could help the monitoring clinical evolution in subclinical phase. / FAPESP: 2013/26197-5

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2587.pdf: 15699339 bytes, checksum: 794c69f89b80c603d2997058e50fae01 (MD5) Previous issue date: 2009-05-13 / Chromatic contrast is a technique used in some areas of medicine to provide better visualization of biological tissues. Based on principles of color composition, a new illumination system was constructed using colored emitting diodes to reproduce the spectral range of the visible light. This technique was devised to be used into indirect ophthalmoscopes to improve the visualization of the posterior segment of the eye. / O contraste cromático é uma técnica usada em algumas áreas da medicina com o objetivo de melhorar o realce de imagens biológicas, proporcionando uma melhor visualização das estruturas presentes no tecido vivo. Baseado em princípios de composição de cores, um novo sistema de iluminação foi construído usando-se LEDs (do inglês, Light Emitting Diodes) coloridos de alto brilho, cuja função é reproduzir os comprimentos de onda situados na região visível do espectro. Este recurso será adaptado a um equipamento denominado Oftalmoscópio Binocular Indireto, com o intuito de se estudar as reações dos tecidos biológicos que compõem o fundo do olho humano quando iluminados por cores diferentes.

Este trabalho apresenta um estudo sobre a utilização da Transformada de Wavelet para o realce de contraste de estruturas de interesse mamográfico (nódulos e microcalcificações), visando o desenvolvimento de um sistema computacional para auxílio ao diagnóstico do câncer de mama. Este sistema compõe-se basicamente de 3 etapas: pré-processamento, detecção e classificação, sendo que este trabalho insere-se na etapa de pré-processamento. Nessa etapa as estruturas de interesse foram realçadas de forma a propiciar um melhor desempenho nas etapas seguintes. No trabalho aqui descrito as estruturas de interesse contidas em mamogramas digitalizados foram realçadas pela Transformada de Wavelet através de dois métodos distintos: Ganho Adaptativo Multiescala e Reconstrução Parcial. Na técnica Ganho Adaptativo Multiescala a imagem é decomposta em sub-imagens pela Transformada de Wavelet. As sub-imagens decompostas são realçadas por uma função não linear e então a imagem realçada é obtida pela aplicação da Transformada Inversa de Wavelet. Na técnica Reconstrução Parcial, a imagem é decomposta em sub-imagens pela Transformada de Wavelet. São selecionadas as sub-imagens onde as estruturas de interesse são mais representativas e então a imagem realçada é obtida pela aplicação da Transformada Inversa de Wavelet à estas sub-imagens. A avaliação dos resultados é feita por um quantificador da melhoria de contraste das imagens e pela análise do histograma. / In the present work, we presents a study about using of Wavelet Transform in contrast enhancement of mammographic features(mass and microcalcifications), as part of developing a Computerized System proposed to aid in diagnosis of breast cancer. This system is composed of 3 main stages: early processing, detection and classification, and this work is into the early processing stage. In this stage structures of interest have been enhanced to improve performance at following stages. In this work, mammographic features have been enhanced by application of 2 distinct methods using Wavelet Transform: Multiscale Adaptive Gain and Partial Reconstruction. Multiscale Adaptive Gain decomposes the original image in subimages by application of Wavelet Transform. These subimages are enhanced throw the application of a non linear function and the enhanced image is obtained by application of Inverse Wavelet Transform. Partial Reconstruction decomposes the original image in subimages by application of Wavelet Transform. The subimages more representative for mammographic features are selected and the enhanced image is obtained by application of lnverse Wavelet Transform in these subimages. The final results obtained are evaluated by a Contrast Improvement Quantifier and histogram analysis.

Submitted by João Arthur Martins (joao.arthur@ufpe.br) on 2015-03-10T19:14:48Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Hugo Albuquerque.pdf: 7422850 bytes, checksum: 3133c927702ab38bd7ee89b9c3f5cc73 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-03-10T19:43:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Hugo Albuquerque.pdf: 7422850 bytes, checksum: 3133c927702ab38bd7ee89b9c3f5cc73 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T19:43:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Hugo Albuquerque.pdf: 7422850 bytes, checksum: 3133c927702ab38bd7ee89b9c3f5cc73 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-08-20 / A fus~ao de imagens tem-se destacado na area de processamento de imagens, atrav es da ideia de combinar duas ou mais imagens que apresentem caracter sticas distintas (provenientes de diferentes sensores) ou alguma degrada c~ao (regi~oes desfocadas, mal iluminadas, com baixo contraste). O foco e uma propriedade intimamente relacionada com a qualidade da imagem. Em algumas situa c~oes, n~ao e poss vel manter simultaneamente todas as regi~oes da paisagem bem focadas. Uma alternativa e utilizar a fus~ao de imagens para combinar os focos diferentes de uma foto em apenas uma imagem com todas as regi~oes melhor focadas. Este trabalho apresenta uma ideia de utilizar diferentes t ecnicas de fus~ao de imagens em conjunto para compor o resultado nal. Para tanto, as imagens de entrada s~ao divididas em blocos, nos quais s~ao aplicados os algoritmos de fus~ao escolhidos. Em seguida, escolhe-se a t ecnica que atuou melhor em cada bloco, atrav es de uma m etrica de qualidade de imagem (como a PSNR (Peak Signal to Noise Ratio)), formando um mosaico com os melhores resultados. Dois algoritmos existentes na literatura envolvendo a fus~ao de imagens no dom nio da frequ^encia baseados em foco s~ao descritos: Contraste no dom nio da DCT (Transformada Discreta de Cosseno) e Frequ^encia Espacial. Modi ca c~oes s~ao feitas em ambas as t ecnicas a m de melhorar os crit erios de sele c~ao para cada bloco, por meio da de ni c~ao da escolha de um bloco inteiro ou dos pixels (ou coe cientes) individualmente. A qualidade da imagem nal e avaliada utilizando m etricas conhecidas, como a PSNR, RMSE (Root Mean Square Error), SSIM (Structural Similarity), entre outras. Tanto para as melhorias quanto para a combina c~ao de algoritmos, os resultados s~ao equivalentes ou superiores quando comparados aos das t ecnicas originais. Em caso de igualdade da qualidade, o algoritmo melhorado possui execu c~ao mais r apida que o original, justi cando assim o seu uso. O tempo de execu c~ao de cada algoritmo e avaliado, mostrando que as t ecnicas de combina c~ao aumentam o tempo de processamento, pois os algoritmos s~ao executados sequencialmente. Nesse caso, a utiliza c~ao de paralelismo pode acelerar a execu c~ao. Uma vez que a combina c~ao adiciona um processamento extra, estudos de viabilidade podem ser realizados para cada caso, a m de considerar a real necessidade do aumento da qualidade da imagem fundida, em detrimento dos recursos a serem utilizados.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2015-05-04T14:11:51Z No. of bitstreams: 2 Tese de doutorado - Jákina - UFPE (2015).pdf: 5450888 bytes, checksum: be70c5d853589046ebea48775fe8773d (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-04T14:11:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese de doutorado - Jákina - UFPE (2015).pdf: 5450888 bytes, checksum: be70c5d853589046ebea48775fe8773d (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2015-03-03 / CAPES / Introdução: A Esclerose Múltipla (EM) é uma doença do sistema nervoso central, desmielinizante, inflamatória, degenerativa e com fator autoimune associado. O diagnóstico precoce da EM ainda apresenta desafios e depende da exclusão de outras doenças neurológicas com características clínicas semelhantes como a Síndrome Clínica Isolada (SCI). Os prejuízos visuais estão entre os sintomas clínicos mais comuns à EM e à SCI. A sensibilidade ao contraste (SC) é um parâmetro importante para avaliação do sistema visual. A Rede Neural Artificial (RNA) é uma técnica de aprendizagem de máquinas útil na classificação de padrões, emulando o cérebro humano na tarefa de armazenar conhecimento e torná-lo disponível para uso. Objetivo: Estimar a SC de adultos com e sem EM e verificar se a RNA é capaz de classificar adultos com EM e controle com menor número possível de frequências espaciais. Método: Participaram da pesquisa 27 voluntários na faixa etária de 22 a 50 anos, sendo 12 deles com EM, com e sem história de neurite óptica (NO), três com SCI e 12 do Grupo Controle (GC). Os dados somente foram coletados após a assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido. Para estimar a SC foram utilizadas as frequências 1, 3, 4, 24 e 48 ciclos/360° do estímulo de frequência angular e 0,5; 1,0; 3,0; 4,0 e 7,5 ciclos por grau de ângulo visual (cpg); da grade senoidal. O método empregado foi o psicofísico da escolha forçada de dois intervalos temporais. A estrutura da retina e do disco óptico foi avaliada pela tomografia por coerência óptica. Para classificar pessoas com EM e controle foi empregada uma RNA do tipo perceptron de múltiplas camadas, com aprendizagem supervisionada e com algoritmo de retropropagação de erro. Resultados/Discussão: A SC foi melhor no GC, seguida por SCI, EM e EMNO. A análise com o teste t para amostras independentes mostrou diferença p < 0,0001 em todas as frequências 1, 3, 4, 24 e 48 ciclos/360º quando se avalia o GC com a SCI, EM e a EMNO. O mesmo foi observado p < 0,0001 em todas as frequências 0,5; 1,0; 3,0; 4,0 e 7,5 cpg da grade senoidal. Quando a comparação foi feita entre SCI e GC as diferenças foram menores. As frequências 24 ciclos/360º e 4,0 cpg foram as que melhor diferenciam os grupos pesquisados. A RNA 44221 conseguiu classificar pessoas com EM e controle através das frequências 24 ciclos/360º e 4,0 cpg com resultados equivalentes aos da RNA 412661. Conclusões: Suscita o interesse em saber como a SC se comporta no período de diagnóstico diferencial da EM e da SCI. A aplicação da tecnologia de RNA tornou mais rápida a classificação de pessoas com EM e controle, por meio da análise do prejuízo visual da EM à partir da SC, apenas com as frequências 24 ciclos/360º e 4,0 cpg.

Nanomateriais têm sido amplamente estudados, como resultado de suas propriedades físicas e químicas diferenciadas, que oferecem um grande número de possibilidades para aplicações em biomedicina, principalmente na terapia de câncer e no desenvolvimento de estratégias de diagnóstico não invasivo. O óxido de ferro superparamagnético (SPION) é o principal material estudado como agente de contraste para imagem por ressonância magnética, devido à sua capacidade de reduzir o tempo de relaxação transversal (T2) em diferentes tecidos e sua menor toxicidade que os complexos de Gd3+ e Mn2+ usados atualmente. Entretanto, o acumulo de SPIONs pode ser facilmente confundido com sinais referentes à calcificação, depósito de metais pesados e sangramentos, e a alta susceptibilidade magnética do material promove distorções na imagem. Assim, alguns aspectos são desejáveis em material para que este tenha potencial para substituir o SPION, tais como forma nanoparticulada, para fácil modificação de superfície e possibilidade de funcionalização com agentes biosseletivos, e contraste positivo em T1. As nanopartículas (NPs) antiferromagnéticas de MnO atendem a todos os requisitos necessários para substituir o óxido de ferro. As NPs de MnO foram sintetizadas a partir da decomposição térmica do acetilacetonato de manganês(II) em uma variação do método poliol modificado, resultando na formação de NPs com tamanho médio de 21 ± 3,9 nm. Foi realizada a substituição de ligantes de superfície para que se substituísse o ácido oleico adsorvido sobre o material por 3-aminopropiltrimetoxisilano (APTMS) e foi determinada a concentração de grupamentos amino sobre a superfície das NPs. Posteriormente, obteve-se uma estrutura do tipo \"core/shell\" dispersível em meio aquoso e biocompatível pela reação dos grupos amino livres com o carboxilato da carboximetil dextrana (CMDex). O potencial de superfície e a estabilidade coloidal das NPs funcionalizadas foram caracterizados por mobilidade eletroforética e por espalhamento de luz dinâmico em água deionizada e em condições que mimetizavam o sangue. As NPs apresentaram toxicidade em células cancerosas de carcinoma cervical humano (HeLa). Entretanto, não foi observada toxicidade significativa na linhagem de células não cancerosas NCTC clone L929. Tanto as NPs como sintetizadas quanto as recobertas com CMDex apresentaram controle de tamanho e forma, apresentando distribuição de tamanho compatível com o esperado para as aplicações em biomedicina. / Nanomaterials have been widely studied as a result of their interesting physical and chemical properties, which offer a large number of possibilities for applications in biomedicine mainly in cancer therapy and the development of strategies for non-invasive diagnosis. The superparamagnetic iron oxide nanoparticles (SPION) is the main studied material as contrast agent for magnetic resonance imaging (MRI) due to its ability to reduce the transverse relaxation time (T2) in different tissues and lower toxicity than Gd3+ and Mn2+ complexes currently used. However, this SPIONs accumulation can be confused with signals from calcification, bleeding or metal deposits, and the high magnetic susceptibility distorts the background image because its ferromagnetic behavior. Some aspects are desirable to replace SPIONs, such as nanoparticulate form for simple surface modification and labeling with targeting agents, and positive longitudinal T1 relaxation time contrast ability. The antiferromagnetic MnO NPs attend all these requirements and overcome the drawback of using SPION. In our study, MnO NPs were synthesized by the thermal decomposition of Mn(II) acetylacetonate by a variation of the modified polyol process resulting in spherical nanoparticles with average size of 21 ± 3,9 nm. The ligand-exchange step was used to replace the oleic acid adsorbed on the as-synthesized NPs surface by 3-aminopropyltriethoxysilane (APTMS) and the total free amine groups on the NPs surface was determined. After that, a biocompatible and water-dispersible core/shell structure was obtained by coating with carboxymethyl dextran (CMDex) using the free amine-terminal group from APTMS and the carboxylate groups present in the CMDex molecules conjungation. Surface potential and colloidal stability of these functionalized NPs were evaluated by electrophoretic mobility and dynamic light scattering techniques in both water and artificial blood by using the Simulated Body Fluid (SBF) medium. While the water-dispersible NPs have shown toxicity in the human cell line derived from cervical cancer (HeLa), they have not shown significantly cytotoxicity in the healthy fibroblast cells (cell line L929). Both the as-synthesized and coated NPs present controlled size and shape and the final NPs size distribution and magnetic properties are compatible with the expected for biomedical applications.

O vírus de Leishmania 1-4 ( do inglês Leishmania RNA virus 1-4 ou LRV1-4) é um vírus da família Totiviridae, e que possui capsídeo icosaédrico e RNA dupla-fita que codifica duas proteínas (proteína capsidial e RNA polimerase). Dados recentes indicam o envolvimento do LRV1-4 na patogênese de Leishmania no hospedeiro humano, tornando seu estudo de fundamental importância para o entendimento dessa doença e de seu papel na relação parasito-hospedeiro. Há relatos sobre a purificação do vírus a partir do seu hospedeiro natural (Leishmania guyanensis) e a partir de sistemas de expressão heteróloga. Este trabalho tem por objetivo estabelecer os métodos de purificação para posteriores estudos estruturais por Microscopia Eletrônica de Transmissão por Contraste Negativo (NS-TEM) e por Crio-Microscopia Eletrônica (Cryo-EM). Os estudos aqui propostos irão permitir a construção de um modelo estrutural do capsídeo do LRV1-4 e sua identificação correta dentre os totivírus. Além das contribuições ao conhecimento da biologia/patogenia do LRV1-4 este estudo representa a primeira caracterização estrutural de um capsídeo viral realizada no Brasil, e assim um avanço importante para a área de virologia e biologia estrutural no pais. Foram realizadas ultracentrifugações biológicas, utilizando gradientes de sacarose, para a purificação do vírus a partir do extrato celular de L. guyanensis. As frações que apresentaram RNA viral foram analisadas por Microscopia Eletrônica de Transmissão (Campinas LNNano CNPEM). Além disso, foram realizadas tentativas de expressar a proteína do capsídeo (ORF2) em Leishmania tarentolae e Escherichia coli. Foram também realizados esforços para a obtenção de anticorpos a partir de peptídeos sintetizados após análise computacional da sequência de aminoácidos da proteína do capsídeo. As amostras obtidas a partir do hospedeiro natural do vírus se apresentaram heterogêneas quando analisadas por NS-TEM, de modo que não foi possível a realização de uma análise estrutural. Porém, a presença de partículas do tamanho esperado para o vírus em amostras em que foi detectado o RNA viral indicam que são necessários esforços para obtenção de uma amostra de maior pureza e homogênea. Além disso, não foi possível obter a proteína do capsídeo nos sistemas de expressão heteróloga. A presença de 25 resíduos de cisteína pode estar levando a proteína à degradação rápida em bactéria. Os experimentos de expressão em células de Leishmania ainda não foram conclusivos. Foi obtido um anticorpo anti-peptídeo que reconhece a proteína do capsídeo, tornando possíveis experimentos como imunolocalização e imunoprecipitação do vírus. / The Leishmania RNA virus 1-4 (LRV1-4) belongs to the Totiviridae family. It has an icosahedral capsid and a double-strand RNA encoding two proteins (capsid protein and RNA polymerase). Recent data indicate the involvement of LRV1-4 in the pathogenesis of Leishmania in the human host, making their study of fundamental importance for the understanding of this disease and its role in host-parasite relationship. There are reports on the purification of the virus from its natural host (Leishmania guyanensis) and from the same heterologous expression systems such as Escherichia coli.This work aims to stablish purification methods for further structural studies by Negative Stain Transmission Microscopy (NS-TEM) and Cryo-Electron Microscopy (Cryo-EM). The studies proposed here will allow the construction of a structural model of the coat protein of LRV1-4 and their correct identification amongst the Totiviridae. In addition to the contributions to the knowledge of the biology and pathogenesis of LRV1-4, this study represents the first structural characterization of a viral capsid held in Brazil and thus an important step forward for the field of virology and structural biology in the country. Sucrose for virus purification gradients were performed from the cell extract of L. guyanensis. Fractions that showed viral RNA were analised by Transmission Electron Microscopy (Campinas LNNano - CNPEM). Furthermore, attempts have been made to express the capsid protein (ORF2) in Leishmania tarentolae and Escherichia coli. There has also been made efforts to obtain antibodies from peptides synthesized accordingly to the computer analysis of the amino acid sequence of the capsid protein. The samples obtained from the natural host of the virus showed a heterogeneous distribution of particles when examined by NS-TEM so that it was not possible to perform a structural analysis. However, the presence of particles of the size expected for the virus particles in samples where the viral RNA was detected indicate that efforts are necessary to obtain a more homogeneous and pure sample. Moreover, it was not possible to obtain the capsid protein in heterologous expression systems. The presence of 25 cysteine residues could have led to the protein rapid degradation in the bacteria host. The expression experiments in Leishmania cells were not yet conclusive. It was also possible to obtain an anti-peptide antibody recognizing the capsid protein, enabling immunoprecipitation and immunolocalization experiments.

A opacificação do cristalino presente ao nascimento ou nos primeiros meses de vida é denominada de Catarata Congênita (CC). As primeiras semanas de vida são importantes no desenvolvimento visual, já que há diferença significativa no desempenho visual de crianças que passaram pela cirurgia até seis semanas de vida (com melhor desempenho visual) em relação às crianças que realizaram a cirurgia após seis semanas de vida. Crianças que tiveram privação visual durante a primeira infância por catarata bilateral apresentam redução da visão espacial. O objetivo deste trabalho foi verificar o impacto na Função de Sensibilidade ao Contraste (FSC) em crianças de tratamento cirúrgico de Catarata Congênita, durante a fase de desenvolvimento visual. Foram avaliados três grupos: 11 crianças do grupo controle (média idade =6,83; DP=1,38), 9 crianças do grupo CC (média idade =6,87; DP=2,03) e 15 indivíduos adultos (média idade =27,63; DP=4,16). Foi utilizado o software Metropsis para avaliação da sensibilidade ao contraste de luminância de grade senoidal nas frequências espaciais de 0,2 cpg; 0,5 cpg; 1,0 cpg; 2,0 cpg; 4,2 cpg e 8,9 cpg e luminância média de 34,4 cd/m². Houve redução em toda a curva de sensibilidade ao contraste (SC) do grupo CC quando comparado ao grupo controle e não houve relação entre o tempo de privação e a redução da SC / The opacification of the lens present at birth is called Congenital Cataract (CC). The first weeks of life are important in visual development since there is not any significant difference in visual performance of children who had surgery within six weeks of life (with better visual performance) compared with children who underwent surgery after this period. Children who have visual deprivation during infancy due to bilateral cataracts have reduced spatial vision. The aim of this study was to assess the impact on Contrast Sensitivity Function (CSF) in children with Congenital Cataract surgery during the visual development age range. We evaluated three groups: 11 control children (mean age = 6.83, SD = 1.38), 9 children in the CC group (mean age = 6.87, SD = 2.03) and 15 adults (mean age = 27.63, SD = 4.16). Metropsis software was used to evaluate sensitivity to luminance contrast of the sinusoidal grating spatial frequencies of 0.2 cpd, 0.5 cpd, 1.0 cpd, 2.0 cpd, 4.2 cpd and 8.9 cpd with an average luminance of 34.4 cd / m². There was a reduction in the contrast sensitivity function (CSF) of the CC group compared to the control group and there was no correlation between the duration of deprivation and the impairment in the SC