Orientador: Carlos Frederico Wilcken / Resumo:O presente trabalho teve por objetivo caracterizar um novo vírus isométrico, possivelmente do grupo do "CrP-like viruses", isolado de Thyrinteina arnobia (Stoll, 1782) (Lepidoptera: Geometridae), a lagarta parda do eucalipto, e avaliar seu potencial como bioinseticida viral. Os experimentos foram conduzidos nos Laboratórios da FCA/UNESP, Botucatu, SP e ESALQ/USP, Piracicaba, SP. Thyrinteina arnobia Vírus (TaV), proveniente de lagartas doentes coletadas na região de Itatinga em 1996 e Lençóis Paulista SP em 1997, foi multiplicado em lagartas de T. arnobia da criação estoque do laboratório. A mortalidade em lagartas de primeiro ao quarto instar foi de 100%. Fêmeas provenientes de lagartas infectadas no sexto instar originaram adultos com fertilidade bastante reduzida quando comparadas com fêmeas sadias. Através de análises de sobrevivência verificou-se a suscetibilidade em cada instar de lagartas de T. arnobia ao TaV. As lagartas em todos os instares exibiam sintomas característicos de virose. Amostras das suspensões do vírus purificado foram observadas ao microscópio eletrônico de transmissão, sendo visualizada uma grande quantidade de partículas do tipo picornavirus, de aproximadamente 30 nm em diâmetro. Partículas menores de 15 nm, sugerindo vírus satélite, também foram detectadas. As proteínas da capa protéica do TaV foram sorologicamente detectadas usando antissoro produzido em coelho. A capa protéica do vírus é composta de três proteínas de pesos moleculares 47, 60 e 66 kDa. O tamanho do RNA genômico varia entre 4 a 6 kb. Através de secções ultrafinas, verificou-se que a infecção de lagartas de T. arnobia pelo TaV parece limitar-se ao epitélio do tubo digestivo, onde ocorre acúmulo dos vírions. Um efeito citopático característico foi a formação de corpos multivesiculares, aparentemente derivados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The present work aimed to characterize a new virus, possibility belonging to CrPV like viruses group, isolated from Thyrinteina arnobia (Stoll, 1782) (Lepidoptera: Geometridae), the eucalyptus brown looper, and to evaluated its potencial to use as virus bioinsecticide. The experiments were carried out at the laboratory from FCA/UNESP Botucatu - SP and ESALQ/USP Piracicaba- SP. Thyrinteina arnobia virus (TaV) came from sick caterpillars collected in Itatinga, SP in 1996 and in Lençóis Paulista SP in 1997 and colonies were replicated in T. arnobia caterpillars reared in laboratory. The caterpillars mortality from the first to the fourth instar was 100%. Caterpillars infected in the sixth instar and could reach the adult stage showed females with reduced fertility when compared to health ones. Through the survivorship analysis was possible to verify the caterpillars susceptibility to TaV in each T. arnobia instar. All larvae instars exhibited viruses characteristic symptoms. Purified virus suspension samples were observed at the transmission eletronic microscopy and it was visualized a large quantity of picornavirus particles measuring about 30 nm of diameter. Shorter particles with 15 nm were detected, suggesting the existence of satellite virus. The TaV virus cover proteins was serologically detected using antisera produced in rabbit. This cover is composed by three proteins with molecular weight of 47, 60 and 66 kDa. The genomic RNA size varies from 4 to 6 kb. Through ultraslim sections, it was possible to verify that T. arnobia caterpillars infection due to TaV seem to be limited to midgut epithelium, where there has the virions accumulation. The characteristic cytopathic effect was multivesicular bodies formation, apparently due to mitochondrial derivation. Preliminaries assays indicated that TaV did not infect Bombyx mori and Spodoptera... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

Orientador: Manoel Victor Franco Lemos / Banca: Edgar Augusto de Toledo Picoli / Banca: Fernando Hercos Valicente / Banca: Jaime Maia dos Santos / Banca: Flávia Maria de Souza Carvalho / Resumo: A produção de alimentos é prejudicada devido a incidência de diversas pragas e doenças. A fim de poder controlá-las, utilizam-se uma grande quantidade e variedade de produtos químicos. Em muitos casos, esses produtos incidem sobre uma vasta gama de organismos, fato este que causa um grande impacto no meio ambiente. A fim de minimizar os efeitos negativos do uso de produtos químicos com grande espectro de ação, há grande empenho no desenvolvimento de produtos cujos alvos sejam específicos. Neste sentido, o uso do controle biológico tem se apresentado como uma alternativa bastante interessante. Dentre os vários sistemas utilizados no controle biológico de pragas, a bactéria Bacillus thuringiensis é a opção de maior destaque. No entanto, inúmeros casos de resistência têm surgido ao longo destes últimos anos, devido aos produtos codificados pelos genes com ação entomopatogênica estarem sendo utilizados de maneira descontrolada. Desse modo, a busca par novas proteínas Cry é tarefa importante dentro da estratégia de controle biológico de pragas agrícolas. Com o intuito de se identificar novas genes cry par meio de análises de PCR Múltiplas, seguida de análise por RFLP, identificaram-se 3 isolados de B. thuringiensis cujos fragmentos de genes analisados diferiram entre si e das linhagens padrão conhecidas até o momento. Ao analisar essas sequências gênicas depositadas no GenBank, verificou-se que dois desses fragmentos de DNA pertencentes aos isolados 113 e 133 possuíam alta similaridade com os genes efetivos contra nematoides, uma terceira sequência caracterizada a partir do isolado 123 não foi similar a nenhuma outra sequência depositada no GenBank atualmente. Os isolados cuja sequência de aminoácidos de suas proteínas Cry predita "in silica" mostraram-se similares a genes cry... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Food production is strongly harmed by a large amount of plant pests and diseases. Aiming to control these problems, a large quantity and variety of chemical compounds have been used. In many cases, these products cause a severe environmental impact over a wide range of non-target organisms. In order to minimize the negative effects of using chemical products with great action spectrum, there is a great effort to develop products of which targets are specific. Therein, the biological control has been presenting itself as a very interesting alternative. Among the various systems used in biological control, the bacteria Bacillus thuringiensis is the option pinpointed as the best notability. However, some resistance towards its use as a biological controlling agent have been reported recently due to the uncontrolled use of products decoded by genes of entomopathogenic action. Thus, the search of new Cry proteins is an important task inside the strategy of biological control of field pests. In order to overcome these situations efforts on the isolation and characterization of new B. thuringiensis isolates using molecular techniques such as PCR and RFLP were adopted and three B. thurigiensis isolates were compared among them and were considered different among the known and described standard type strains up to the present time. When part of the obtained gene sequences were compared to those deposited on the GeneBank, it was possible to observe that for two of them, isolate 113 and 133, a high degree of similarity with sequences described as active against nematodes; the third isolate, 123, had no similarity to any deposited sequence up to date. The isolates, which aminoacid sequence of their Cry proteins "in silico" were similar to cry genes earlier deposited on GenBank, had their respective gene fully characterized. To this, several... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: José Moacir Marin / Banca: Ruben Pablo Schocken-Iturrino / Banca: Maria Cristina Monteiro de / Resumo: Um total de 109 cepas de Staphylococcus coagulase-negativa foi isolado de mastite bovina clinica e subclinica em 35 fazendas de leite situadas em 9 estados brasileiros no período de fevereiro a maio de 2005, elas foram investigadas em relação a sua susceptibilidade in vitro a diversos agentes antimicrobianos. Entre as cepas obtidas, a resistência a penicilina foi a mais freqüente (93,5%), seguida pela resistência a sulfonamida (88,9%), novobiocina (88,6%) e ampicilina (85,3%). Todas as cepas examinadas mostraram resistência a pelo menos 1 das drogas antimicrobianas testadas. Cepas apresentando resistência múltipla foram extremamente comuns, com 10,0% dos isolados apresentando resistência a todas as drogas antimicrobianas. Os resultados obtidos indicaram que as cepas de Staphylococcus coagulase-negativas isoladas no Brasil apresentaram um alto grau de resistência a antimicrobianos. Estes resultados são provavelmente uma conseqüência da pressão devido ao uso intensivo de drogas antimicrobianas e eles são um motivo de preocupação em relação a saúde pública. / Abstract: A total of 109 strains of coagulase-negative Staphy/ococci were isolated from bovine clinical and subdinical mastitic cattle in 35 dairy farms, in 9 states of Brazil from february to may 2005, and investigated for in vitro susceptibility to several antimicrobial agents. Among the isolates, resistance to penicillin was most frequent (93.5%), followed by resistance to sulphonamide (88.9%), novobiocin (88.6%) and ampicillin (85.3%). Ali isolates exhibited resistance to at least 1 of the antimicrobial drugs tested. Multidrug resistant isolates were quite common, 10.0% of the isolates showing resistance to ali antimicrobial drugs tested. This indicates that coagulase-negative Staphy/ococci in 3razil exhibit a high degree of antimicrobial agents' resistance, probably as a :onsequence of the pressure of the intensive use of antimicrobial drugs, a practice that :onstitute a public health concem. / Mestre

Orientador: Carlos Frederico Wilcken / Coorientador: Leonardo Rodrigues Barbosa / Banca: Regiane Cristina O. de Freitas Bueno / Banca: Valmir Antonio Costa / Banca: Luís Cláudio Paterno Silveira / Banca: José Cola Zanúncio / Resumo: O potencial de Trichospilus diatraeae Cherian & Margabandhu, 1942 (Hymenoptera: Eulophidae) como agente de controle biológico no Brasil é pouco conhecido e, por isso, esta pesquisa avaliou a viabilidade de pupas de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) como hospedeiro alternativo. Devido à sua facilidade de criação em dieta artificial esse inseto tem sido utilizado na criação massal de parasitoides em vários programas de controle biológico. Estudos sobre o comportamento dos parasitoides devem incluir a interferência direta do alimento sobre o parasitismo. Pupas de S. frugiperda, com 48 horas de idade, foram individualizadas em tubos de vidro e submetidas ao parasitismo em seis tratamentos com mel puro, mel a 10%, hemolinfa, hemolinfa + mel, água destilada e ausência de alimentação. Os parâmetros avaliados foram taxa de parasitismo, emergência, número de parasitoides emergidos, não emergidos, progênie total, duração do ciclo ovo-adulto e razão sexual. Quando alimentado, T. diatraeae teve suas taxas de parasitismo e emergência acima de 85%. O número de parasitoides emergidos e a progênie total aumentaram quando T. diatraeae foi alimentado com mel puro, com 264 parasitoides emergidos e progênie total de 267 parasitoides. A alimentação teve grande influência na longevidade de T diatraeae. Nos tratamentos onde foram oferecidos alimentos açucarados a longevidade foi acima de 18 dias . Porém, no tratamento onde não foi oferecido alimento a longevidade média foi de quatro dias, e no tratamento com oferecimento de água destilada aos parasitoides a longevidade foi de apenas 2,9 dias. O mel mostrou ser o alimento mais adequado, por propiciar altos níveis de parasitismo, emergência, progênie total e longevidade, sendo de fácil aquisição, pouco dispendioso e interfere positivamente na biologia destes insetos. / Abstract: The potential of Trichospilus diatraeae Cherian&Margabandhu, 1942 (Hymenoptera: Eulophidae) as a biological control agent in Brazil is little known; thus, this research evaluated the viability of pupae of Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) as an alternative host since its ease of production on an artificial diet has led to its use in mass cultivation of parasitoids in several biological control programs. Studies on parasitoid behavior must include the direct interference of diet in parasitism. Pupae of S. frugiperda, at 48 hours of age, were individualized in glass tubes and submitted to parasitism in six treatments: pure honey, 10% honey, hemolymph, hemolymph + honey, distilled water and absence of food. The parameters evaluated were parasitism rate, emergence, numbers of emerged and non-emerged parasitoids, total progeny, egg-adult cycle duration and sex ratio. When fed, T. diatraeae showed parasitism and emergence rates above 85%. The numbers of emerged parasitoids and total progeny increased when T. diatraeae were fed pure honey, with 264 emerged parasitoids and total progeny of 267 parasitoids. The diet exerted great influence on T diatraeae longevity. In treatments where they were offered sweetened diets, longevity exceeded 18 days. However, in the treatment where food was not offered, the mean longevity was four days, while the distilled water treatment produced parasitoid longevity of only 2.9 days. Honey was demonstrated the most suitable food, by providing high levels of parasitism, emergence, total progeny and longevity, and is easily acquired, inexpensive and interferes positively in the biology of these insects / Doutor

Avaliou-se, por testes in vitro, a fungitoxicidade dos produtos Cabrio Top, Captan SC, Comet, Derosal 500, Derosal Plus, Frowncide 200 SC, Nativo, Opera, Stratego e Vitavax-Thiram 200 SC em isolados de Trichoderma sp. (T1R, T2R, T4R, T6R, T7R, TSV e PCT). Os fungicidas foram adicionados em meio de cultura BDA e em discos de papel filtro na dosagem recomendada pelo fabricante, metade e dobro desta dose. Os tratamentos foram mantidos a 23 ± 1ºC e fotoperíodo de 14 horas. Após sete dias de incubação foi medido o diâmetro da colônia dos fungos na presença dos fungicidas e o halo de inibição formado em torno do disco de papel filtro. Os fungicidas Cabrio Top, Captan SC, Comet, Stratego e Vitavax-Thiram 200 SC não se mostraram tóxicos aos isolados. O isolado T4R foi o menos sensível aos fungicidas e os isolado T6R e PCT foram os mais sensíveis. Avaliou-se também, a fungitoxicidade in vitro destes mesmos defensivos agrícolas a Fusarium oxysporum f.sp. phaseoli, agente causal da murcha do feijoeiro e o potencial antagônico dos isolados de Trichoderma sp. ao fitopatógeno. Os fungicidas, Derosal 500, Derosal Plus, Nativo, Opera e Vitavax-Thiram 200 SC foram efetivos no controle de F. oxysporum f.sp. phaseoli in vitro. Experimentos in vitro, testando o potencial antagônico dos isolados T4R, TSV e PCT de Trichoderma sp. ao fitopatógeno mostraram que os isolados são efetivos no controle de F. oxysporum f.sp. phaseoli quando inoculados 48 horas antes e simultaneamente com o fitopatógeno. Em experimento de casa de vegetação, sementes de feijão foram tratadas com os fungicidas Vitavax-Thiram 200 SC e Derosal Plus, com os isolados T4R, TSV e PCT e com o fitopatógeno F. oxysporum f. sp. phaseoli. Somente o isolado TSV foi efetivo no controle do fitopatógeno. Todos os isolados de Trichoderma sp. foram recuperados de raízes de plantas cujas sementes foram tratadas com fungicidas. / The fungitoxicity of the products Cabrio Top, Captan SC, Comet, Derosal 500, Derosal Plus, Frowncide 200 SC, Nativo, Opera, Stratego and Vitavax-Thiram200 SC was evaluated through in vitro tests in strains of Trichoderma sp. (T1R, T2R, T4R, T6R, T7R, TSV and PCT). The fungicides were added in a PDA culture medium and on discs of filter paper following manufactures recommended dosages, half and the double of this dose. The treatments were maintained at 23±1ºC and at a photophase of 14 hours. After 7 days of incubation the diameter of the fungus colony in the presence of fungicides and the halo of inhibition formed around the disc of paper filter were measured. The fungicides Cabrio Top, Captan SC, Comet, Stratego and Vitavax-Thiram 200 SC were not toxic towards the isolates. The isolate T4R was less sensitive towards the fungicide while the isolates T6R and PCT were the most sensitive ones. The fungitoxicity in vitro of these same agricultural defensives towards Fusarium oxysporum f.sp. phaseoli (the casual agent of Fusarium Wilt and the antagonistic potential of the isolates of Trichoderma sp. towards the pathogen) was evaluated. The fungicides Derosal 500, Derosal Plus, Nativo, Opera and Vitavax-Thiram 200 SC were effective in the control of F. oxysporum f.sp. phaseoli in vitro. Experiments in vitro, testing the antagonistic potential of the isolates T4R, TSV and PCT of Trichoderma sp. towards the pathogen have shown that the isolates are effective in the control of F. oxysporum f.sp. phaseoli when inoculated before 48 hour period and simultaneanously with the pathogen. In experiment in greenhouse bean seeds were treated with the fungicides Derosal Plus and Vitavax-Thiram200 SC with the isolates T4R, TSV and PCT and with the pathogen Fusarium oxysporum f.sp. phaseoli. Only the isolated TSV was effective in the control of the pathogen. All isolated of Trichoderma sp. Tested they had been recouped of roots of plants whose seeds had been with fungicides.

Anastrepha fraterculus (Wiedemann) e Ceratitis capitata (Wiedemann) estão entre as principais pragas da fruticultura do Rio Grande do Sul. O controle biológico destes insetos surge como alternativa ao químico, que tem sido o mais utilizado. O braconídeo, Diachasmimorpha longicaudata (Ashmead), utilizado em programas de controle biológico clássico nas Américas e em outras partes do mundo, foi introduzido no Brasil em 1994. Entretanto, até o presente não há registro da sua biologia em A. fraterculus. O objetivo deste trabalho foi avaliar a biologia de D. longicaudata, em laboratório, tendo como hospedeiros A. fraterculus e C. capitata, e determinar as exigências térmicas deste parasitóide, nos dois hospedeiros, em diferentes temperaturas (15, 18, 21, 25, 28 e 31 °C). Os insetos utilizados foram provenientes de criações mantidas em laboratório (25 ± 2 °C; 65 ± 10% UR; 14 horas de fotofase). Constatou-se que A. fraterculus é hospedeiro de D. longicaudata. O ciclo biológico (ovo-adulto) de indivíduos de D. longicaudata criados em A. fraterculus não diferiu dos mantidos em C. capitata. A longevidade, razão sexual, períodos de pré-oviposição, oviposição e pós-oviposição, assim como a fecundidade e a fertilidade foram semelhantes entre os parasitóides criados nos dois hospedeiros O número médio de casos de superparasitismo em larvas de A. fraterculus (1,6 ± 0,22) foi significativamente maior (P = 0,0002) que em C. capitata (0,4 ± 0,07). A taxa líquida de reprodução (Ro) de D. longicaudata foi significativamente maior quando mantida em A. fraterculus. Os indivíduos de D. longicaudauta criados em A. fraterculus foram maiores. Em ambos hospedeiros, na temperatura de 15 °C, indivíduos de D. longicaudata não se desenvolveram, e a 31 °C, o desenvolvimento não foi observado quando o hospedeiro foi A. fraterculus. A maior viabilidade do parasitóide, em ambos hospedeiros, foi em 25 °C. Indivíduos de D. longicaudata oriundos de C. capitata têm limiar térmico inferior (7,34 °C) menor do que os criados em A. fraterculus (12,5 °C). A velocidade de desenvolvimento de D. longicaudata, mantida em ambos hospedeiros aumentou com a elevação da temperatura. Os resultados indicam que, a 25 °C, A. fraterculus é um melhor hospedeiro, oferecendo melhores condições para o parasitóide se multiplicar e aumentar a população. / Anastrepha fraterculus (Wiedemann) and Ceratitis capitata (Wiedemann) are among the major pests of fruit trees in Rio Grande do Sul. Biological control is an alternative to the chemical control, which has been used as the main way to combat these insects. The braconid, Diachasmimorpha longicaudata (Ashmead), used in classical biological control programs in the Americas and other parts of the world, was introduced in Brazil in 1994. However, to date there is no record of its biology in A. fraterculus. The objective of this study was to evaluate the life history of D. longicaudata in laboratory (25 ± 2 ° C, 65 ± 10% RH and 14 hours photophase) in A. fraterculus and C. capitata, and determine the thermal requirements of this parasitoid in two hosts, at temperatures 15, 18, 21, 25, 28 and 31 ° C (65 ± 10% RH and 14 hours photophase). The insects were kept in creations from the laboratory. Was recorded that A. fraterculus is host to D. longicaudata. The biological cycle (egg to adult) individuals of D. longicaudata created in A. fraterculus was significantly greater than those maintained in C. capitata. . The longevity, sex ratio, pre-oviposition, oviposition and post-oviposition periods, and fecundity and fertility were similar between the parasitoids reared in two hosts Females reared on both hosts can perform superparasitism. The net reproductive rate (Ro) of D. longicaudata was higher when maintained at A. fraterculus. Individuals of D. longicaudauta created in A. fraterculus were higher. In both hosts at 15 ° C, individuals of D. longicaudata not developed, and 31 ° C, development was not observed when the host was A. fraterculus. The higher viability of the parasitoid in both hosts, was at 25 ° C. Individuals of D. longicaudata from C. capitata have lower threshold temperature (7.34 ° C) lower than those reared on A. fraterculus (12.5 ° C). The rate of development of D. longicaudata, maintained in both hosts increased with increasing temperature. The results indicate that, at 25 ° C, A. fraterculus is a better host, offering better conditions for the parasitoid to multiply and increase the population.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-23Bitstream added on 2014-06-13T19:16:43Z : No. of bitstreams: 1 sanromanlazo_ml_me_botfca.pdf: 660872 bytes, checksum: b2391cdc6d5e50a1a60ccfdabe324f73 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A área de plantio de Eucalyptus no mundo tem aumentado nas últimas décadas. Em 2011 a área total de plantio de eucalipto no Brasil foi de 4.873.952 ha. Os insetos nativos são o principal problema nas plantações de eucalipto no Brasil. Entretanto,nos últimos anos novas pragas têm sido introduzidas e disseminadas causando perdas na cultura. O percevejo bronzeado Thaumastocoris peregrinus foi detectado pela primeira vez no Brasil em maio de 2008 em São Francisco de Assis, RS. Esse inseto afeta a produtividade dos plantios de eucalipto. As ninfas e os adultos se alimentam sugando as folhas, provocando pontos cloróticos nas folhas, que evoluem para um aspecto bronzeado. É necessário o estabelecimento e quantificação dos danos nas florestas de eucalipto bem como o desenvolvimento e implantação de um sistema integrado de controle para T. peregrinus. O desenvolvimento do controle microbiano como o uso de fungos entomopatogênicos, é uma opção de manejo da praga. As possibilidades são a utilização bioinseticidas comerciais existentes no mercado ou a obtenção de isolados nativos a partir da ocorrência de epizootias naturais no campo, para posterior desenvolvimento de novos inseticidas biológicos. Diante do problema que essa praga vem causando em plantios de eucalipto e das limitadas alternativas para seu controle o presente trabalho teve os seguintes objetivos: Obter isolados de fungos entomopatogênicos a partir de indivíduos de T. peregrinus mortos coletados em campo; selecionar isolados e realizar sua caracterização biológica (velocidade de crescimento e aspecto geral da colônia... / The area of Eucalyptus plantations in the world has increased in recent decades. In 2011 the total area of eucalyptus plantations in Brazil was 4.873.952 ha. The native insects are a major problem in eucalyptus plantations in Brazil, but in recent years, new pests have been introduced and causing widespread crop losses. In May, 2008,Thaumastocoris peregrinuswas detected first time in Brazil, in São Francisco de Assis, State of Rio Grande do Sul. This pest reduces and affects the productivity of eucalyptus plantations. Nymphs and adults feed by sucking the leaves, causing chlorotic spots, which develop inbronzed look. The development of microbial control using microrganisms, as entomopathogenic fungi, as an option. Testsevaluatingcommercial bioinsecticides and isolating native fungi speciesfrom the natural epizootics in the field,are an important tool for its control. Nowadays there is a few control alternatives for the problem caused by this pest in eucalyptus plantations. The present work aimed to obtain isolates of entomopathogenic fungi from dead individuals of T. peregrinus collected in field; selecting isolatesand evaluated them considering characteristics of biology (growth rate and general appearance of the colony) morphology (size and shape of spores and the presence / absence of specialized structures) and molecular; verify the sensitivity of fungi isolate against potential insecticides used to eucalyptus bronze bug control; evaluate colonization of fungi isolated when inoculated directly into the bronze bug using scanning electron microscopy. Many fungi were isolated, but for practical purposes only two were chosen... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003-06Bitstream added on 2014-06-13T19:37:29Z : No. of bitstreams: 1 garcia_lc_me_botfca.pdf: 627408 bytes, checksum: 6e8090157ad35eb0a16ecfae89cd91f4 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A tecnologia de aplicação desenvolvida para produtos químicos têm sido utilizada para organismos entomopatogênicos sem o estudo prévio das necessidades de adaptações que visem a manutenção da viabilidade desses agentes de controle biológico. O experimento teve por objetivo avaliar a influência da pressurização e despressurização da calda de pulverização na viabilidade dos seguintes microrganismos entomopatogênicos: Metarhizium anisopliae, Bacillus thuringiensis, AgMNPV e Steinernema glaseri. Foi utilizado o sistema hidráulico de um pulverizador, sem filtros, equipado com ponta de pulverização de jato cônico JA-2, com 15 minutos de agitação da calda antes da coleta. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com sete tratamentos: pressurização da calda em zero; 175,8; 351,6; 527,4; 703,2; 1.054,9; 1.406,5 kPa (zero, 25, 50, 75, 100, 150 e 200 lbf.pol-2). A avaliação da viabilidade de M. anisopliae se deu através da porcentagem de conídios germinados. Para B. thuringiensis foi considerado o número de colônias formadas. A eficácia do AgMNPV foi estimada indiretamente, pela mortalidade causada às lagartas de Anticarsia gemmatalis no início do terceiro ínstar, alimentadas com dieta artificial impregnada com a suspensão viral. No experimento com o S. glaseri foi calculada a porcentagem de indivíduos vivos, determinada através de microscopia óptica, em lâmina de peters. Conclui-se que se pode pulverizar os entomopatógenos M. anisopliae, B. thuringiensis, AgMNPV e S. glaseri, até a pressão de 1.406,5 kPa, sem que haja perda na viabilidade desses organismos utilizados como agentes de controle biológico. / Application technology developed to chemical products has been employed for entomopathogenic organisms without the previous studies on the necessities of adaptations aiming at viability maintenance of these biological control agents. The objective of the research was to evaluate the influence of pressurization and decompression of spraying suspension in the viability of the following entomopathogenic microorganisms: Metarhizium anisopliae, Bacillus thuringiensis, AgMNPV and Steinernema glaseri. The sprayer hydraulical system was used without filters and equipped with JA-2 hollow-cone nozzle type with 15 minutes of spray agitation before it collects. The experimental design was completely randomized, with seven treatments: pressurization of spraying suspension at 0.0; 175.8; 351.6; 527.4; 703.2; 1,054.9 and 1,406.5 kPa. Evaluation of the viability of M. anisopliae was estimated by the percentage of conidia germinated. For B. thuringiensis, the number of colonies formed. Efficiency on AgMNPV was estimated indirectly, by means of mortality caused to velvet bean caterpillar (Anticarsia gemmatalis) in early third ínstar; the specimens were fed with artificial diet impregnated with viral suspension. For the experiment with the S. glaseri it was calculated the percentage of live specimens; observation were performed through optic microscopy, on Peters slide-blade. It was concluded that the entomopathogens M. anisopliae, B. thuringiensis, AgMNPV and S. glaseri can be sprayed up to the pressure of 1,406.5 kPa without loss in the viability of those organisms as agents of biological control.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003-02Bitstream added on 2014-06-13T18:35:06Z : No. of bitstreams: 1 colmenarez_yc_me_botfca.pdf: 214314 bytes, checksum: 6e85d2098f54ae999a6fd76ac5157948 (MD5) / Este estudo teve por objetivo avaliar a eficiência do Thyrinteina arnobia vírus (TaV) e de Bacillus thuringiensis quando submetidos a diferentes condições de pH e temperatura no controle da lagarta parda Thyrinteina arnobia (Stoll, 1782) (Lepidoptera: Geometridae). Foram testadas 4 temperaturas (18, 22, 26 e 30º C) e 4 pHs diferentes (5, 6, 7 e 8). Os ovos de Thyrinteina arnobia foram provenientes de uma criação em dieta artificial, mantida em laboratório. Os entomopatógenos foram aplicados em folhas de Eucalyptus grandis, para posterior oferecimento à lagartas do 3º. e 5º. instares. O ensaio de pH foi conduzido em sala climatizada (temperatura: 25 ± 1oC ; UR: 70 ± 10 % e fotofase de 13 horas), enquanto que os ensaios de temperatura os tratamentos foram conduzidos em câmaras de BOD e fotofase de 13 horas. Os experimentos foram instalados no delineamento experimental inteiramente casualizado e a distribuição dos tratamentosem esquema fatorial 4x3, com 10 repetições de 5 lagartas cada uma, sendo avaliadas 150 lagartas para cada tratamento. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste t (LSD) ao nível de 5 % de probabilidade. A variável avaliada foi a mortalidade acumulada das lagartas. As observações foram feitas diariamente porém, para a análise estatística consideraram-se as avaliações realizadas aos 4, 6, 8, 10 e 15 dias. Os dados foram corrigidos utilizando-se a raiz quadrada de x + 1. No experimento sobre a influência da temperatura, foi verificado que quanto maior a temperatura, maior a mortalidade causadas pelo TaV e pelo B. thuringiensis, tanto para lagartas de 3o. instar quanto para lagartas de 5o. instar de T. arnobia. As temperaturas mais favoráveis para a expressão da ação de ambos os patógenos foi 26 e 30ºC. No experimento sobre o efeito do pH da calda de pulverização... . / The objective of this work was to evaluate the efficiency of Thyrinteina arnobia virus (TaV) and Bacillus thuringiensis when exposed to different conditions of pH and temperature to the eucalyptus brown looper control Thyrinteina arnobia (Stoll, 1782) (Lepidoptera: Geometridae). It was evaluated at 4 different temperatures (18, 22, 26 and 30ºC) and 4 different pHs (5, 6, 7 and 8). T. arnobia larvae were reared in an artificial diet and maintained in the laboratory. The entomopathogens were applied to Eucalyptus grandis leaves, and these were offered to larvae at the 3rd and 5th instars. The pH assay was conducted in a controlled conditions (temperature of 25 ± 1oC ; RH: 70 ± 10 % and photophase of 13 hours). The temperature assays were conducted at a controlled temperatures, in a BOD room with photophase of 13 hours. The experiments were installed in the following factorial analysis 4x3, with a experimental design completely randonized, with 10 replications with 5 larvae each one. The data obtained were submitted to ANOVA and means compared by t test (LSD) (P£ 0.05). The variable evaluated was the accumulative larvae death. The observations were made daily, but for the statistical analysis only the evaluations in 4, 6, 8, 10 and 15 days were considered. The temperature experiment showed that higher temperature caused higher mortality to both 3rd and 5th instars of T. arnobia larvae. The more favorable temperatures were 26ºC and 30ºC for the expression of both pathogens. The results of suspention pH experiment showed that pH 7,0 was the most adequated for the B. thuringiensis action for both instars of T. arnobia. However, the TaV action in T. arnobia larvae was not affected for the different pHs evaluated. In different experiments carried out, 3rd instar larvae were more susceptible than to 5th instar. Also for the different temperatures and of different pHs, B. thuringiensis... (Complete abstract, click electronic address below).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-23Bitstream added on 2014-06-13T18:44:30Z : No. of bitstreams: 1 goncalves_jf_dr_jabo.pdf: 1447890 bytes, checksum: 213f62c5c0d5c7deaaea4b29c3aa4e09 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A produção de alimentos é prejudicada devido a incidência de diversas pragas e doenças. A fim de poder controlá-las, utilizam-se uma grande quantidade e variedade de produtos químicos. Em muitos casos, esses produtos incidem sobre uma vasta gama de organismos, fato este que causa um grande impacto no meio ambiente. A fim de minimizar os efeitos negativos do uso de produtos químicos com grande espectro de ação, há grande empenho no desenvolvimento de produtos cujos alvos sejam específicos. Neste sentido, o uso do controle biológico tem se apresentado como uma alternativa bastante interessante. Dentre os vários sistemas utilizados no controle biológico de pragas, a bactéria Bacillus thuringiensis é a opção de maior destaque. No entanto, inúmeros casos de resistência têm surgido ao longo destes últimos anos, devido aos produtos codificados pelos genes com ação entomopatogênica estarem sendo utilizados de maneira descontrolada. Desse modo, a busca par novas proteínas Cry é tarefa importante dentro da estratégia de controle biológico de pragas agrícolas. Com o intuito de se identificar novas genes cry par meio de análises de PCR Múltiplas, seguida de análise por RFLP, identificaram-se 3 isolados de B. thuringiensis cujos fragmentos de genes analisados diferiram entre si e das linhagens padrão conhecidas até o momento. Ao analisar essas sequências gênicas depositadas no GenBank, verificou-se que dois desses fragmentos de DNA pertencentes aos isolados 113 e 133 possuíam alta similaridade com os genes efetivos contra nematoides, uma terceira sequência caracterizada a partir do isolado 123 não foi similar a nenhuma outra sequência depositada no GenBank atualmente. Os isolados cuja sequência de aminoácidos de suas proteínas Cry predita in silica mostraram-se similares a genes cry... / Food production is strongly harmed by a large amount of plant pests and diseases. Aiming to control these problems, a large quantity and variety of chemical compounds have been used. In many cases, these products cause a severe environmental impact over a wide range of non-target organisms. In order to minimize the negative effects of using chemical products with great action spectrum, there is a great effort to develop products of which targets are specific. Therein, the biological control has been presenting itself as a very interesting alternative. Among the various systems used in biological control, the bacteria Bacillus thuringiensis is the option pinpointed as the best notability. However, some resistance towards its use as a biological controlling agent have been reported recently due to the uncontrolled use of products decoded by genes of entomopathogenic action. Thus, the search of new Cry proteins is an important task inside the strategy of biological control of field pests. In order to overcome these situations efforts on the isolation and characterization of new B. thuringiensis isolates using molecular techniques such as PCR and RFLP were adopted and three B. thurigiensis isolates were compared among them and were considered different among the known and described standard type strains up to the present time. When part of the obtained gene sequences were compared to those deposited on the GeneBank, it was possible to observe that for two of them, isolate 113 and 133, a high degree of similarity with sequences described as active against nematodes; the third isolate, 123, had no similarity to any deposited sequence up to date. The isolates, which aminoacid sequence of their Cry proteins in silico were similar to cry genes earlier deposited on GenBank, had their respective gene fully characterized. To this, several... (Complete abstract click electronic access below)