As craniossinostoses, resultantes da fusão precoce de uma ou mais suturas cranianas, representam um grupo heterogêneo de doenças que ocorre aproximadamente em 1:2000 nascidos vivos. Caracterizam-se por grande variabilidade clínica e heterogeneidade genética, com raras exceções como a Síndrome de Apert. As craniossinostoses podem ser classificadas em não sindrômicas, quando o único problema do paciente é a fusão precoce da sutura, e sindrômica quando outros problemas estão presentes. Dentre as craniossinostoses sindrômicas, as mais comuns são a Síndrome de Crouzon, Pfeiffer e Apert. O diagnóstico diferencial entre estas 3 síndromes é dado principalmente pelo grau de comprometimento dos membros, sendo que na Síndrome de Crouzon, a mais leve, não há comprometimento de membros, enquanto que na Síndrome de Apert, a mais grave, os membros estão sempre comprometidos. O mecanismo mutacional é identificado em aproximadamente 58% dos pacientes Síndrome de Crouzon, sendo que o gene FGFR2 corresponde à 48% desse total e mutações nos genes TWIST1 e FGFR3 correspondem aos 10% dos casos restantes. Assim sendo, cerca de 42% dos casos com características clínicas compatíveis com a Síndrome de Crouzon, não apresentam mutações em nenhum destes três genes, e, portanto, mutações em outros genes podem ser responsáveis por este quadro clínico.Aproximadamente 45% dos casos de Pfeiffer não estão relacionadas a mutações nos genes FGFR1 e FGFR2, indicando que outros genes também podem estar envolvidos. Por outro lado, todos os casos de Síndrome de Apert são causados por mutações no gene FGFR2. As mutações em FGFR2 apresentam uma correlação parcial entre genótipo e fenótipo, contudo, casos graves, como aqueles com Síndrome de Pfeiffer tipo II ou III são ainda muito pouco caracterizados. Experimentos utilizando-se inserção retroviral em camundongos levaram a identificação de um fenótipo semelhante à síndrome de Crouzon, o qual parece ter sido causado por um aumento da expressão do produto dos genes FGF3 e FGF4. Além disso, a implantação de beads contendo FGF4 em crânios de camundongos neonatais acelerou o fechamento das suturas, em decorrência do aumento da proliferação e diferenciação dos osteoblastos. Assim sendo, é possível que mutações nos genes FGF3 e FGF4 possam causar um fenótipo semelhante à Síndrome de Crouzon ou craniossinostoses sindrômicas.A identificação de mutações patogênicas do gene TWIST1 em pacientes com síndrome de Saethre-Chotzen, tem colaborado para a caracterização de domínios funcionais da proteína codificada por este gene. Até o momento, estas mutações, que podem ser do tipo substituição de aminoácido ou que criam códigos de parada prematura, levam a perda da função da proteína por diferentes processos, e, portanto, o mecanismo responsável pela síndrome é o da haploinsuficiência. Até o momento, apenas mutações em regiões codificadoras têm sido associadas à doença e há muita pouca informação a respeito do efeito de mutações na região reguladora do gene TWIST1.Em vista do exposto acima, julgamos importante testarmos os genes FGF3 e FGF4 em pacientes com Síndrome de Crouzon e craniossinostose sindrômica sem mutações nos genes candidatos, com o objetivo de verificar se mutações nesses possam ser responsáveis pelo fenótipo dos pacientes. Julgamos também importante verificar se uma paciente com Pfeiffer tipo 3 era portadora de mutação patogênica no gene FGFR2 bem como identificar mutações em 7 pacientes com a síndrome de Saethre-Chotzen. Ainda, realizamos estudos funcionais para verificar se uma mutação nova localizada em região reguladora do gene TWIST1 é responsável pelo fenótipo da paciente. / Craniosynostosis, defined as the premature fusion of one or more cranial suture, are a very heterogeneous group of disorders, with an occurrence of about 1: 2000 live births. Except for rare syndromes, such as Apert, most of the cranioysnostotic conditions are characterized by wide clinical variability and genetic heterogeneity. Craniosynostosis can be classified into non syndromic forms - premature suture fusion is the only clinical alteration, and syndromic ones - premature cranial suture fusion associated with other anomalies. Apert, Pfeiffer, Crouzon and Saethre-Chotzen are the most common syndromic forms of craniosynostosis. The mutational mechanism is identified in approximately 58% of patients with Crouzon syndrome: FGFR2 mutations account for most of the cases (more than 80%) while mutations in TWIST1 and FGFR3 causes the remaining of them. Therefore, about 42% of the cases with clinical characteristics of Crouzon syndrome do not harbor mutations in any of these 3 genes and other mutational mechanisms might be responsible for the phenotype. Approximately 45% of Pfeiffer syndrome cases is not caused by mutations in the FGFR1 or FGFR2 genes, thus also suggesting genetic heterogeneity for this phenotype. On the other hand, all cases with Apert syndrome are caused by specific mutations in FGFR2. FGFR2 mutations show a partial genotype-phenotype correlation; however, severe cases, such as Pfeiffer types II and III are still very poorly characterized. Retroviral insertion experiments in mouse lead to the identification of animals with a phenotype that resembles Crouzon syndrome. It was suggested that this phenotype was caused by upregulation of the FGF3 and FGF4 genes as a consequence of the insertion of the retrovirus between these 2 genes . In addition, implantation of beads with FGF4 in the cranium of neonatal mice has increased the fusion of the cranium sutures . Therefore, it is possible that gain of function mutations in the FGF3 e FGF4 genes might lead to Crouzon or syndromic craniosynostosis.Characterization of pathogenic mutations in the TWIST1 gene among patients with Saethre-Chotzen syndrome has contributed for a better understanding of the protein domains of the corresponding protein. These mutations, which are missense or null, cause loss of function of the protein and haploinsufficiency of the TWIST1 gene has been postulated as the mechanism model for Saethre-Chotzen syndrome.Up to now, only pathogenic mutations in coding regions have been associated with the disease and there is very little information about the effect of mutations on the regulatory regions of the TWIST1 gene on the phenotype.Considering the above information, the aims of the present work were: a) verify if mutations in FGF3 and FGF4 can cause craniosynostosis; b) verify if the severe phenotype in a patient Pfeiffer type 3 is due to a specific mutation in FGFR2; c) identify mutations in 7 patients with Saethre-Chotzen syndrome; d) verify if a mutation in the regulatory region of the TWIST1 gene can cause craniosynostosis.

As craniossinostoses, resultantes da fusão precoce de uma ou mais suturas cranianas, representam um grupo heterogêneo de doenças que ocorre aproximadamente em 1:2000 nascidos vivos. Caracterizam-se por grande variabilidade clínica e heterogeneidade genética, com raras exceções como a Síndrome de Apert. As craniossinostoses podem ser classificadas em não sindrômicas, quando o único problema do paciente é a fusão precoce da sutura, e sindrômica quando outros problemas estão presentes. Dentre as craniossinostoses sindrômicas, as mais comuns são a Síndrome de Crouzon, Pfeiffer e Apert. O diagnóstico diferencial entre estas 3 síndromes é dado principalmente pelo grau de comprometimento dos membros, sendo que na Síndrome de Crouzon, a mais leve, não há comprometimento de membros, enquanto que na Síndrome de Apert, a mais grave, os membros estão sempre comprometidos. O mecanismo mutacional é identificado em aproximadamente 58% dos pacientes Síndrome de Crouzon, sendo que o gene FGFR2 corresponde à 48% desse total e mutações nos genes TWIST1 e FGFR3 correspondem aos 10% dos casos restantes. Assim sendo, cerca de 42% dos casos com características clínicas compatíveis com a Síndrome de Crouzon, não apresentam mutações em nenhum destes três genes, e, portanto, mutações em outros genes podem ser responsáveis por este quadro clínico.Aproximadamente 45% dos casos de Pfeiffer não estão relacionadas a mutações nos genes FGFR1 e FGFR2, indicando que outros genes também podem estar envolvidos. Por outro lado, todos os casos de Síndrome de Apert são causados por mutações no gene FGFR2. As mutações em FGFR2 apresentam uma correlação parcial entre genótipo e fenótipo, contudo, casos graves, como aqueles com Síndrome de Pfeiffer tipo II ou III são ainda muito pouco caracterizados. Experimentos utilizando-se inserção retroviral em camundongos levaram a identificação de um fenótipo semelhante à síndrome de Crouzon, o qual parece ter sido causado por um aumento da expressão do produto dos genes FGF3 e FGF4. Além disso, a implantação de beads contendo FGF4 em crânios de camundongos neonatais acelerou o fechamento das suturas, em decorrência do aumento da proliferação e diferenciação dos osteoblastos. Assim sendo, é possível que mutações nos genes FGF3 e FGF4 possam causar um fenótipo semelhante à Síndrome de Crouzon ou craniossinostoses sindrômicas.A identificação de mutações patogênicas do gene TWIST1 em pacientes com síndrome de Saethre-Chotzen, tem colaborado para a caracterização de domínios funcionais da proteína codificada por este gene. Até o momento, estas mutações, que podem ser do tipo substituição de aminoácido ou que criam códigos de parada prematura, levam a perda da função da proteína por diferentes processos, e, portanto, o mecanismo responsável pela síndrome é o da haploinsuficiência. Até o momento, apenas mutações em regiões codificadoras têm sido associadas à doença e há muita pouca informação a respeito do efeito de mutações na região reguladora do gene TWIST1.Em vista do exposto acima, julgamos importante testarmos os genes FGF3 e FGF4 em pacientes com Síndrome de Crouzon e craniossinostose sindrômica sem mutações nos genes candidatos, com o objetivo de verificar se mutações nesses possam ser responsáveis pelo fenótipo dos pacientes. Julgamos também importante verificar se uma paciente com Pfeiffer tipo 3 era portadora de mutação patogênica no gene FGFR2 bem como identificar mutações em 7 pacientes com a síndrome de Saethre-Chotzen. Ainda, realizamos estudos funcionais para verificar se uma mutação nova localizada em região reguladora do gene TWIST1 é responsável pelo fenótipo da paciente. / Craniosynostosis, defined as the premature fusion of one or more cranial suture, are a very heterogeneous group of disorders, with an occurrence of about 1: 2000 live births. Except for rare syndromes, such as Apert, most of the cranioysnostotic conditions are characterized by wide clinical variability and genetic heterogeneity. Craniosynostosis can be classified into non syndromic forms - premature suture fusion is the only clinical alteration, and syndromic ones - premature cranial suture fusion associated with other anomalies. Apert, Pfeiffer, Crouzon and Saethre-Chotzen are the most common syndromic forms of craniosynostosis. The mutational mechanism is identified in approximately 58% of patients with Crouzon syndrome: FGFR2 mutations account for most of the cases (more than 80%) while mutations in TWIST1 and FGFR3 causes the remaining of them. Therefore, about 42% of the cases with clinical characteristics of Crouzon syndrome do not harbor mutations in any of these 3 genes and other mutational mechanisms might be responsible for the phenotype. Approximately 45% of Pfeiffer syndrome cases is not caused by mutations in the FGFR1 or FGFR2 genes, thus also suggesting genetic heterogeneity for this phenotype. On the other hand, all cases with Apert syndrome are caused by specific mutations in FGFR2. FGFR2 mutations show a partial genotype-phenotype correlation; however, severe cases, such as Pfeiffer types II and III are still very poorly characterized. Retroviral insertion experiments in mouse lead to the identification of animals with a phenotype that resembles Crouzon syndrome. It was suggested that this phenotype was caused by upregulation of the FGF3 and FGF4 genes as a consequence of the insertion of the retrovirus between these 2 genes . In addition, implantation of beads with FGF4 in the cranium of neonatal mice has increased the fusion of the cranium sutures . Therefore, it is possible that gain of function mutations in the FGF3 e FGF4 genes might lead to Crouzon or syndromic craniosynostosis.Characterization of pathogenic mutations in the TWIST1 gene among patients with Saethre-Chotzen syndrome has contributed for a better understanding of the protein domains of the corresponding protein. These mutations, which are missense or null, cause loss of function of the protein and haploinsufficiency of the TWIST1 gene has been postulated as the mechanism model for Saethre-Chotzen syndrome.Up to now, only pathogenic mutations in coding regions have been associated with the disease and there is very little information about the effect of mutations on the regulatory regions of the TWIST1 gene on the phenotype.Considering the above information, the aims of the present work were: a) verify if mutations in FGF3 and FGF4 can cause craniosynostosis; b) verify if the severe phenotype in a patient Pfeiffer type 3 is due to a specific mutation in FGFR2; c) identify mutations in 7 patients with Saethre-Chotzen syndrome; d) verify if a mutation in the regulatory region of the TWIST1 gene can cause craniosynostosis.

Orientador: Vera Lucia Gil da Silva Lopes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T14:39:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Passarinho_BernardoLamartineNogueira_M.pdf: 1529378 bytes, checksum: 50b6bc3b336a69747186f002deac57e3 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A família dos genes FGFRs está envolvida na via molecular que participa na modulação do desenvolvimento craniofacial e de membros em humanos. Mutações nos genes FGFR1, FGFR2 e FGFR3 têm sido associadas a uma variedade de fenótipos diferentes com presença de craniossinostose ou outras deformidades ósseas. O gene FGFR2 codifica um receptor do fator de crescimento de fibroblastos. No éxon IIIa deste gene, foi identificada a mutação Q289P, a qual foi descrita em casos isolados e em famílias com craniossinostoses sindrômicas, incluindo uma com S. de Jackson-Weiss, outra com S. de Pfeiffer e uma, relatada por nosso grupo de pesquisa, com quadro clínico de S. de Saethre-Chotzen. Nesta última, entretanto, como nem todos os indivíduos afetados apresentavam esta mutação, algumas hipóteses foram aventadas. Entre elas, a de que esta mutação produza uma proteína moduladora do mecanismo do fechamento prematuro das suturas, ou, ainda que esta seja, na verdade, um polimorfismo de baixa freqüência não relacionado a craniossinostoses. O presente trabalho teve como objetivo testar estas hipóteses. Foi realizada a análise populacional da referida mutação em dois grupos constituídos por 40 indivíduos portadores de síndromes de craniossinostoses e 200 indivíduos de uma amostra da população. Foram pesquisadas mutações nos principais pontos relacionados à craniossinostoses nos genes FGFR1, FGFR2 e FGFR3 nos indivíduos da família-índice que já havia sido previamente investigada para mutações no gene TWIST1. Foram também aplicados testes in silico, a fim de simular os efeitos da mutação Q289P na proteína e prever seu potencial deletério. A mutação Q289P não foi identificada nos grupos controle e de portadores de síndromes de craniossinostoses. De acordo com os achados obtidos, sugere-se que a mutação Q289P seja deletéria, rara e associada apenas ao fenótipo craniano, e não fortemente associada com o fenótipo facial e neurológico presente em alguns membros da família estudada. Existem fortes indícios de que a mutação Q289P no gene FGFR2 esteja relacionada à ocorrência de craniossinostoses. Estudos futuros de investigação experimental da função protéica poderão contribuir para melhor esclarecer os mecanismos patogênicos envolvidos na fusão precoce das suturas cranianas / Abstract: The FGFRs family is involved in the molecular pathway which plays a role in modulation of the craniofacial and members development in humans. Mutations in genes FGFR1, FGFR2 and FGFR3 have been associated to different phenotypes presenting craniosynostosis and other bone diseases. The FGFR2 gene codifies a fibroblast growth factor receptor. The mutation Q289P was identified in the IIIa exon of this gene, described in isolated cases and some craniosynostosis syndromes, including a Jackson-Weiss family, a Pfeiffer family, a Crouzon family and a Saethre-Chotzen family. The latter family was previously reported by FREITAS et al. (2006). In this specific family, all of the patients who had the Q289P mutation presented craniosynostosis, but not all of those who had facial and neurological features had the mutation, therefore some hypothesis were suggested. The mutation could generate a modified regulatory protein of skull sutures closure, or the mutation could be a low frequency polymorphism or it can be completely responsible for the Saethre-Chotzen features found in the affected members of the family. The aim of this study was to test those hypotheses. A population analysis was performed in a group of 200 control individuals and a group of 40 nonrelated syndromic craniosynostosis individuals. Secondary mutations were searched in the FGFR1, FGFR2 and FGFR3 genes in the family first described by FREITAS and in the craniosynostosis group. The TWIST1 gene was investigated in the syndromic craniosynostosis individual¿s group but, in the analyzed family, this gene has been previously tested by NASCIMENTO et al., (2004). Also, computational approaches were applied to simulate the effects of the analyzed mutation in the protein and predict its deleterious potencial. According to those findings, we suggest that the Q289P mutation is deleterious and associated to the craniosynostosis phenotype only, and not strongly related to the facial and neurological phenotype / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

As craniossinostoses são malformações craniofaciais caracterizadas pelo fechamento precoce de uma ou mais suturas cranianas. Elas são doenças congênitas e são causadas por mutações em diversos genes devido ao grande número de vias envolvidas na formação e manutenção das suturas cranianas. Embora mutações em 53 genes já tenham sido descritas o conhecimento da genética e da patofisiologia das craniossinostoses ainda é incompleto. Nesse trabalho tivemos como objetivo a identificação de novas mutações associadas às craniossinostoses bem como o aprofundamento do conhecimento sobre a atuação dessas mutações em células humanas por meio de estudos funcionais. Para identificarmos novas mutações utilizamos metodologias de sequenciamento em larga escala conhecidas como sequenciamento de noiva geração (NGS). Identificamos a mutação causal em uma paciente proveniente de um casamento consanguíneo portadora da síndrome de Raine (p.P496L em FAM20C). Também delimitamos a poucas mutações candidatas outros onze casos atípicos de craniossinostose. Por fim estudamos os efeitos de diferentes FGFs sobre o comportamento de células com a mutação mais comum causadora da S. de Apert, p.S252W em FGFR2. Descobrimos que os FGFs10 e 19 têm ações distintas sobre o perfil transcricional e sobre a taxa de proliferação de células mutantes. Também descobrimos que as células tronco mesenquimais e as células fibroblastóides têm comportamentos distintos ao serem tratadas com FGF19. Os resultados aqui apresentados serão de grande serventia para o melhor delineamento da biologia das suturas cranianas e da patofisiologia das craniossinostoses / Craniosynostosis are craniofacial malformations defined by early closure of the cranial sutures. They are congenital diseases caused by mutations in several genes due to the diversity of pathways involved in the development and maintenance of the cranial sutures. Even though 53 genes have already been linked to various forms of craniosynostosis, the knowledge about the genetics and pathophysiology is incomplete. In this work we aimed to identify new mutations associated with craniosynostosis as well as to further the knowledge of how those mutations act in human cells. To identify new variants associated with craniosynostosis we used large scale sequencing techniques known as next generation sequencing (NGS). We were able to identify the causal mutation in one patient from a consanguineous marriage with Raine syndrome (p.P496L in FAM20C). We also were able to elect candidate mutations in other eleven cases of atypical craniosynostosis. Lastly, we studied the effects of different FGFs over the behavior of human cells harboring the most common Apert syndrome mutation, p.S252W in FGFR2. We discovered that FGFs 10 and 19 have different effects over the transcriptional profile and proliferation rate of mutant cells. We also found that FGF19 have opposite effects in mesenchymal stem cells and fibroblastoid cells osteogenic differentiation. The results shown here will be of great service to better understand the biology of cranial suture and the pathophysiology of craniosynostosis

As craniossinostoses são malformações craniofaciais caracterizadas pelo fechamento precoce de uma ou mais suturas cranianas. Elas são doenças congênitas e são causadas por mutações em diversos genes devido ao grande número de vias envolvidas na formação e manutenção das suturas cranianas. Embora mutações em 53 genes já tenham sido descritas o conhecimento da genética e da patofisiologia das craniossinostoses ainda é incompleto. Nesse trabalho tivemos como objetivo a identificação de novas mutações associadas às craniossinostoses bem como o aprofundamento do conhecimento sobre a atuação dessas mutações em células humanas por meio de estudos funcionais. Para identificarmos novas mutações utilizamos metodologias de sequenciamento em larga escala conhecidas como sequenciamento de noiva geração (NGS). Identificamos a mutação causal em uma paciente proveniente de um casamento consanguíneo portadora da síndrome de Raine (p.P496L em FAM20C). Também delimitamos a poucas mutações candidatas outros onze casos atípicos de craniossinostose. Por fim estudamos os efeitos de diferentes FGFs sobre o comportamento de células com a mutação mais comum causadora da S. de Apert, p.S252W em FGFR2. Descobrimos que os FGFs10 e 19 têm ações distintas sobre o perfil transcricional e sobre a taxa de proliferação de células mutantes. Também descobrimos que as células tronco mesenquimais e as células fibroblastóides têm comportamentos distintos ao serem tratadas com FGF19. Os resultados aqui apresentados serão de grande serventia para o melhor delineamento da biologia das suturas cranianas e da patofisiologia das craniossinostoses / Craniosynostosis are craniofacial malformations defined by early closure of the cranial sutures. They are congenital diseases caused by mutations in several genes due to the diversity of pathways involved in the development and maintenance of the cranial sutures. Even though 53 genes have already been linked to various forms of craniosynostosis, the knowledge about the genetics and pathophysiology is incomplete. In this work we aimed to identify new mutations associated with craniosynostosis as well as to further the knowledge of how those mutations act in human cells. To identify new variants associated with craniosynostosis we used large scale sequencing techniques known as next generation sequencing (NGS). We were able to identify the causal mutation in one patient from a consanguineous marriage with Raine syndrome (p.P496L in FAM20C). We also were able to elect candidate mutations in other eleven cases of atypical craniosynostosis. Lastly, we studied the effects of different FGFs over the behavior of human cells harboring the most common Apert syndrome mutation, p.S252W in FGFR2. We discovered that FGFs 10 and 19 have different effects over the transcriptional profile and proliferation rate of mutant cells. We also found that FGF19 have opposite effects in mesenchymal stem cells and fibroblastoid cells osteogenic differentiation. The results shown here will be of great service to better understand the biology of cranial suture and the pathophysiology of craniosynostosis

Orientador: Cassio Menezes Raposo do Amaral / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:27:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Buzzo_CelsoLuiz_M.pdf: 5169253 bytes, checksum: 75e30febb232d04518750f5feaa487b9 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Há aproximadamente 10 anos desenvolvemos nosso trabalho clínico e cirúrgico no Hospital da Sobrapar, temos tido a oportunidadede acompanhar um grande número de pacientes portadores de craniossinostose, doença altamente complexa que necessita de acompanhamento multidisciplina comum pessoal altamente qualificado. Denomina-se craniossinostose o conjunto de anomalias que apresentam ossificação prematura das suturas dos ossos do crânio e da face. Este distúrbio pode ocorrer de forma parcial ou completa, como pode também comprometer uma ou mais suturas. O grau de comprometimento e as suturas envolvidas manifestam-se nas mais variadas formas clínicas, podendo comprimir o cérebro, impedindo seu crescimento, o que denominamos de cranioestenose,ocasionando efeitos de letérios sobre o sistema nervoso central. Estas formas, às vezes bizarras, que o crânio assume,já eram há muito conhecidas,tendo sido descritas por Hipócrates na antiguidade. O objetivo deste estudo é avaliar a correlação entre a pressão do líquor no interior do canal raquimedular e a pressão do crânio, no pré-operatório imediato à craniectomia .descompressiva. Haja vista as dificuldades técnicas e controvérsias encontradas na literatura,com relação à indicação cirúrgica para descompressão do encéfalo,e havendo a possibilidade de se saber o valor da pressão intracraniana comum a simples punção lombar, através da medida direta da pressão dentro do canal raquimedular,tal fato faciltiaria na indicação do procedimento cirúrgico. Foram operados 10 pacientes com cranioestenose, sendo registradas medidas da pressão liquórica por punção lombar e por trepanação do crânio, momentos antes de se proceder à craniectomia descompressiva. Após análise estatística dos resultados,observamos haver correlação significativa entre as pressões do líquor no canal raquimedular e intracraniana nos pacientes com cranioestenose, possibilitando-nos diagnosticar e quantificar a pressão intracraniana, sem a necessidadede uma trepanação no crânio / Abstract: For about ten years we have developed our surgical operation and clinic job at Sobrapar Hospital and we have had the oportunit of following a great number of "Cranium-synostoses" holder pacients, this pathology has huge complexity, and needs multidiscipline following by a high qualified personal group. "Cranium-synostoses" is the name of the anomalies that show up premature ossification of cranio bones suture and of the face. This disturb can occur in a complete or partical way, as can implicate one or more sutures. The degree of the implication and the suture involved show up itself in the most diverse clinic forms, it can compress the brain, obstructing its growing for this we named "Craniumsynostoses", occasioning deleterious efects upon the Central nervous system. Those forms, sometirnes bizarre that the cranium change was known many years ago, it was described in the antiquity by Hipocrates. The aim of this study is to evaluate the correlations between the liquor pressure into the internal spinal medullary duct, and the cranium, in the immediate moment before . of surgery of reduction compress craniectomy. As seen, the tecnical difticulties andocontroversies found in the specific literature related to surgical indication to uncompress the encephalon and there being possibility of knowing the size of intracranial pressure with a simple lumbar puncture with the direct measurement of pressure inside the internal. spinal medullary duct, this make easy the indication ofthe surgical proceeding. There were operated ten pacients with "Cranium-stenosis", and there being under register the liquor pressure by lumbar puncture and for cranium trepaning moments before ofthe procedure a reduction compress craniectomy. Afier statistics analysis results, we observed there is significant corelation between the liquor pressure into the internal spinal medullary duct and intracranial, in the pacients with "Cranium-stenosis", this enable us to quantify and diagnose the intracranial pressure without the cranium trepaning / Mestrado / Cirurgia / Mestre em Cirurgia

Orientadores: Vera Lucia Gil da Silva Lopes, Fernando Cendes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T22:58:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Giffoni_SilvyoDavidAraujo_D.pdf: 9854477 bytes, checksum: 334b9adf98f93498ac8e78601503011c (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Foram estudados 31 indivíduos com anomalias crânio faciais utilizando protocolo previamente definido, composto por avaliação clínica, citogenética, avaliação morfológica (ressonância magnética [RM] com reformatação multiplanar [MPR]) e investigação funcional (Eletroencefalografia [EEG] e/ou Tomografia por emissão de fóton único [SPECT]). Destes, 17 apresentavam defeitos de linha média facial com hipertelorismo (DLMFH), 10, síndrome de Saethre-Chotzen (SCS) e 4, síndrome blefaroqueilodôntica (BCD). Nos indivíduos com DLMFH foi observado, na avaliação neurológica, anormalidades na forma craniana (17/17), hipotonia (16/17), distúrbios de coordenação motora (10/17) e alteração no equilíbrio (6/17). A RM evidenciou anormalidades em todos os casos que incluíram alterações comissurais (16/17), malformações de desenvolvimento cortical (10/17), alterações no fechamento de tubo de neural (7/17), e anormalidades de fossa posterior (6/17). O EEG mostrou distúrbio epileptiforme em 6/17 e anormalidades de fundo em 5/17 pacientes. O SPECT evidenciou hipoperfusão em cerebelo (8/11) e ponte (8/11), o que explicaria as alterações observadas no exame neurológico. Na SCS a avaliação neurológica mostrou braquicefalia (10/10), hipotonia muscular (6/10) hipomimia (3/10) e descoordenação motora (2/10). A avaliação neurorradiológica (RM com MPR) mostrou alterações no crânio (10/10), anomalias comissurais (6/10), perturbações de fechamento de tubo de neural (4/10), malformações de desenvolvimento cortical (4/10), alterações na fossa posterior (3/10). Na BCD, foi observada hipotonia na movimentação passiva em todos os indivíduos. A RM mostrou afílamento da porção hipocampal posterior em um caso e malformações girais e vasculares no lobo frontal em outro caso. O SPECT foi realizado em dois pacientes, sendo observado, em um deles, hipoperfusão de lobos frontais, giro do cíngulo, porção mesial do lobo temporal e hemisfério cerebral direito. Sistema nervoso central e face são intrinsecamente ligados, possivelmente por iniciarem sua formação e desenvolvimento em um tempo embriológico comum e sofrerem influência de um mesmo campo de desenvolvimento. Assim, estes estudos reforçam a teoria da linha média como campo de desenvolvimento, podendo prover base para investigações futuras em anomalias crâniofaciais / Abstract: 31 individuals were studied with different cranium-facial anomalies using a previously defined protocol, composed by clinical and cytogenetics evaluation, morphological evaluation (magnetic resonance image [MRI] with multiplanar reformatting [MPR]) and of functional investigation (Electroencephalogram [EEG] and/or single-photon emission computed tomographic imaging [SPECT]). Seventeen presented Midline facial defects with ocular hypertelorism (MFDH), 10 with Saethre-Chotzen Syndrome (SCS) and 4 with Blefarocheilodontic Syndrome (BCD). In MFDH individuals, it was observed in neurological evaluation, abnormalities in cranial shape (17/17), motor coordination (10/17) and equilibrium (6/17). MRI showed central nervous system (CNS) abnormalities in all cases, which included commissural alterations (16/17), malformations of cortical development (10/17), disturbances of neural tube closure (7/17) and posterior fossa abnormalities (6/17). EEGs showed epileptiform abnormalities in 6/17 and background abnormalities in 5/17 patients. The SPECT evidenced cerebellar (8/11) and pons (8/11) hipoperfusion, what would explain the alterations observed in the neurological evaluation. In SCS cases, neurological evaluation showed brachycephaly (10/10), hypotonia (6/10) frontal hypomimia (3/10) and motor incoordination (2/10). Neuroradiologic exams (MRI with MPR) showed skull alterations (10/10), comissural anomalies (6/10), disturbances of neural tube closure (4/10), malformations of cortical development (4/10), alterations of posterior fossa (3/10). In BCD, passive hypotonia was detected in all cases, at neurological evaluation. MRI showed thin posterior hippocampal portion in one case and vascular and gyri malformatios in frontal lobe in another case. The SPECT was performed in two, being observed a discreet hipoperfusion of frontal lobes, cinguli gyrus, and mesial portion of right temporal lobe and cerebral hemispheres. CNS and face are intrinsicly linked by a common embryological time. Thus these studies reinforce the midline development fíeld theory, providing base for future investigations in craniofacial anomalies / Doutorado / Genetica Medica / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Vera Lucia Gil da Silva Lopes, Cristina Broglia Feitosa de Lacerda / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T23:27:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Meirelles_AnaPaulaArduino_M.pdf: 3078308 bytes, checksum: 68c1968bf1e63700782f2ee657c087f4 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A Síndrome de Saethre-Chotzen (SSC) é caracterizada por craniossinostose e diversas e importantes alterações faciais tais como: implantação baixa de cabelo na fronte, assimetria, hipoplasia maxilar, prognatismo mandibular, além de orelhas pequenas, dismórficas e de baixa implantação. Entre as alterações oculares, destacam-se blefaroptose, estrabismo, epicanto, estenoses de ductos lacrimais e deficiência visual secundária à atrofia do nervo óptico. O seu mecanismo de transmissão é autossômico dominante com uma alta penetrância e de expressividade variável. Em vista de sua grande variabilidade clínica, nem sempre seu diagnóstico é suspeitado. Desse modo, a prevalência estimada é de 1/25.000-1/50.000 nascidos vivos. O presente trabalho objetivou investigar as possíveis alterações fonoaudiológicas encontradas nesta condição, no que se refere à linguagem oral (fala), motricidade orofacial, voz e audição. Para tal, foram avaliados 10 indivíduos com SSC por meio de uma avaliação fonoaudiológica padronizada de curta duração composta por uma anamnese, exame clínico das principais estruturas orofaciais e funções motoras orais, análise perceptiva de voz, audiometria e PAETE (Potencial auditivo evocado de tronco encefálico). Esta investigação foi precedida por exame dismorfológico, citogenético e investigação molecular do exon 1 do gene TWIST, mutação P250R do gene FGFR3 e exons 8 e 10 do gene FGFR2, mutação P252R do gene FGFR1 e também uma região descrita do gene MSX2, além de avaliação neuropsicológica por meio da Bateria Lúria Nebraska (WISC e WAIS). Os resultados do estudo mostraram que 4/10 apresentam certo comprometimento intelectual, destes 3 apresentam sinais de disfunção cerebral e 2, déficit neuropsicológico comprovado. Nenhum dos indivíduos apresentou alterações cromossômicas e apenas 2/10 apresentaram a mutação P250R do gene FGFR3. Na avaliação fonoaudiológica propriamente dita, foram observadas 9/10 com fala inteligível, 5/10 com sialorréia abundante, 6/10 com alterações na morfologia nasal e 6/10 de palato duro, 6/10 alterações no tônus das bochechas e 6/10 com alterações mastigatórias. Na análise vocal, 4/10 apresentaram articulação imprecisa, 3/10 Picth agudo, 3/10 qualidade vocal alterada, 2/10 inteligibilidade de fala comprometida, 2/10 fluência alterada por repetição e prolongamento, quanto ao aspecto da ressonância, 2/10 apresentaram hipernasalidade, 1/10 mista, 1/10 laríngea, já quanto a velocidade apenas 1 apresentou velocidade reduzida. Quanto à avaliação auditiva, 6/10 apresentam limiares auditivos dentro da normalidade para a faixa etária e em 3/10 foram detectadas alterações no PAETE. As alterações fonoaudiológicas detectadas neste estudo sugerem ser parte do espectro clínico da SSC e devem ser investigadas em todas as faixas etárias, a fim de permitir intervenção precoce, quando necessário / Abstract: Saethre-Chotzen Syndrome (SCS) is characterized by craniosynostosis and several important facial alterations such as: low hair implantation at the front, asymmetry, maxillary hypoplasia, mandibular prognathism, in addition to small, dysmorphic and low-set ears. Among the ocular alterations are: blepharoptosis, strabismus, epicanthus, lachrymal duct stenosis and visual deficiency secondary to the optical nerve atrophy. The mechanism of transmission is autosomal dominant presenting a high penetrance with variable expressivity. Considering its clinical variability, its diagnosis is not always considered. Therefore, the prevalence is estimated in 1/25.000-1/50.000 born alive. The objective of the present work was to investigate possible phonoaudiological alterations presented in this condition, regarding oral language (speaking), orofacial movement, voice and audition. Ten individuals with SCS were evaluated by means of a standardized phonoaudiological procedure of short duration, including one anamnesis, a clinical examination of main orofacial structures and oral motor functions, perceptive analysis of voice and audiometry and BERA (Brainstem evoked responses audiometry). This investigation was preceded by dysmorphologic, cytogenetic examination and molecular investigation that included: screening for mutations in the exon 1 of the TWIST gene; screening for P250R mutation in the FGFR3 gene and exons 8 and 10 of the FGFR2 gene; screening for P252R mutation of the FGFR1 gene and also an analysis of the described region of the MSX2 gene. In addition, a neuropsychological evaluation by means of the Luria Nebraska Battery (WISC and WAIS) was performed. The results of the study showed that 4/10 presented a certain intellectual impairment, among them 3/10 presented cerebral dysfunction and 2, confirmed neuropsychological deficit. None of the individuals presented chromosomal alterations and only 2/10 presented P250R mutation in the FGFR3 gene. The phonoaudiological evaluation showed 9/10 individuals with intelligible speech, 5/10 with abundant sialorrhea, 6/10 with alterations in the nasal morphology and 6/10 of the hard palate, 6/10 with alterations in the cheek tonus and 6/10 with masticatory alterations. In the vocal analysis, 4/10 presented inexact joint, 3/10 acute Picth, 3/10 disturbed voice quality, 2/10 compromised comprehensive speech, 2/10 abnormal fluency by repetition and prolongation particularly related to resonance, 2/10 presented hypernasality, 1/10 mixed, 1/10 laryngeal, whereas the velocity was reduced in only one individual. Regarding the auditive evaluation, 6/10 presented auditive intensities in accordance with the normality for the age group and in 3/10 were detected BERA alterations. The phonoaudiological alterations detected in this study suggest being part of the clinic spectrum of SCS and should be investigated in all age groups, aiming to allow a precocious intervention when it is necessary / Mestrado / Saude da Criança e do Adolescente / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente

Orientadores: Vera Lucia Gil da Silva Lopes, Maricilda Palandi de Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T04:28:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Freitas_ErikaCristinaLopesBurronede_M.pdf: 6151764 bytes, checksum: 0f3baa2446e8049ec633d62c987a92a4 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Craniossinostose pode ser definida como a fusão prematura de uma ou mais suturas dos ossos chatos do crânio, afetando cerca de 0,4-1:1000 nascidos vivos. Mais de 100 síndromes diferentes com a presença de craniossinostose já foram descritas" sendo a maioria de transmissão autossômica dominante e expressividade variável. O diagnóstico clínico geralmente é dificultado pela sobreposição de sinais clínicos nas diversas síndromes. A morfogênese do crânio está relacionada a um complexo mecanismo de regulação gênica, do qual fazem parte os genes FGFR1, FGFR2, FGFR3, MSX2 e TWIST. Mutações nesses genes são causas conhecidas de craniossinostoses. Na intenção de se identificarem mutações nas principais regiões destes genes em indivíduos com craniossinostoses sindrômicas ou isoladas, 13 famílias e 8 casos isolados foram investigados. O protocolo de investigação incluiu avaliação dismorfológica e análise citogenética. A investigação molecular baseou-se num algoritmo previamente descrito e em revisão da literatura. Incluiu a busca pela mutação P252R do gene FGFR1, mutações nos exons 8 e 10 do gene FGFR2, a mutação P250R do gene FGFR3 , e mutações no exon 1 do gene TWIST. A mutação L154P no gene MSX2também foi investigada em indivíduos com forame parietal. Em um indivíduo com SSC foi encontrada uma alteração cromossômica envolvendo a região do gene TWIST (46, XX add 7(p21)). No gene FGFR2, mutações no exon 8" foram detectadas em 3/21, sendo que uma delas foi num caso de Apert, outra num caso de Pfeiffer tipo I e no terceiro, uma mutação nunca antes descrita na SSC (FGFR2 Q289P); mutações no exon 10 foram detectadas em 2/21, num caso de Crouzon e outro de Pfeiffer tipo 111.Uma família com SSC apresentava a mutação P250R no gene FGFR3 e 3 alterações foram encontradas no exon 1 do gene TWIST, sendo que todos os casos apresentavam SSC. Investigações no gene FGFR1 foram normais, assim como no gene MSX2. Dentre os indivíduos MCA, nenhuma alteração molecular foi encontrada nas regiões estudadas. Esse estudo reforça a heterogeneidade das craniossinostoses e sugere que sejam feitas investigações no gene FGFR2em casos de SSC. Futuros estudos poderão elucidar a etiologia dos casos de forame parietal e também dos casos MCA / Abstract: Craniosynostosis refers to the premature fusion of one or more of the cranial sutures, affecting about 0,4-1/1000 newborns. More than 100 distinct genetic syndromes with craniosynostosis have been described. Most of them exhibit autosomal dominant transmission and variable expressivity. Clinical diagnostic is also ofien difficulted by the overlapping features among different conditions. Maintenance of suture patency depends on regulating a complex array of factors, including FGFR1, FGFR2, FGFR3, MSX2 and TWIST. Mutations in these genes are know to cause craniosynostosis, the former by constitutive activation and the latter by haploinsufficiency. In order to identify mutations in the main regions of these genes in individuais with syndromic or isolated craniosynostosis, 13 families and 8 isolated cases were screened. The investigation protocol included dysmorphological evaluation and high resolution citogenetics analysis. Molecular investigation was based upon an algorrithm previously described and literature review. It included the P252R mutation of FGFR1, mutations in exon 8 and 10 of FGFR2 gene, P250R of FGFR3 gene, and mutations in exon 1 of TWIST gene. The mutation L154P in MSX2 were investigated in individuais with parietal foramina. One individual with SCS showed an chromosomal aberration involving the region of TWIST gene (46, XX add 7(p21». In FGFR2, mutations in exon 8 were detected in 4/21, including a previously undescribed one on SSC (FGFR2 Q289P); mutations in exon 10 were detected in 2/21. One family with SCS had a P250R FGFR3 mutation and 3 alterations in exon 1 of the TWIST gene. Investigations in FGFR1 were normal, as well as the MSX2 gene in individuais with parietal foramina. Among MCA individuais, no molecular abnormalities were found in the studied regions. This study reinforces the molecular heterogeneity of craniosynostosis and suggests the screening of FGFR2 gene as complementar step in SCS investigation. In the future, studies could elucidate the etiology of parietal foramina and MCA individuais herein evaluated. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Para melhor conhecer as condições de saúde bucal, associação com fissuras labiopalatinas, alterações de tecido mole e prevalência de anomalias dentárias em pacientes com síndromes craniofaciais, foram avaliados dois grupos de pacientes, sendo 19 com craniossinostoses múltiplas sindrômicas (síndromes de Apert, Crouzon, Pfeiffer e Saethre-Chotzen) e 15 com síndrome de Treacher Collins. O estudo foi realizado por meio de exame clínico e radiográfico e avaliação de índices de placa (PHP e índice de placa visível), cárie (ceo e CPOD) e gengival. Também foi investigada a eficácia do controle de higiene bucal realizado pelos pacientes. Ambos os grupos apresentaram alto índice de placa e baixa eficácia de escovação dentária, sem diferença estatisticamente significativa entre pacientes com e sem sindactilia no grupo de craniossinostoses múltiplas sindrômicas. Apesar do acúmulo de placa, os índices de cárie e gengival encontrados não foram expressivos. A maioria dos pacientes com síndrome de Treacher Collins apresentava fissura labiopalatina, especialmente fissura isolada de palato. Não foi observada presença de fissura labiopalatina no grupo de craniossinostoses múltiplas sindrômicas, que por sua vez apresentou ocorrência bastante freqüente de hiperplasia da mucosa palatina, notadamente em pacientes com síndromes de Apert e Crouzon. Houve alta prevalência de anomalias dentárias em ambos os grupos, especialmente opacidades de esmalte e agenesias dentárias, que poderiam ser características adicionais relacionadas às síndromes não relatadas na literatura até o momento. Com base nestes resultados, é proposto um protocolo de conduta terapêutica odontológica para pacientes com as referidas síndromes. / Two groups of patients were evaluated in an attempt to achieve more information on the oral health status, association with cleft lip and palate, soft tissue alterations and prevalence of dental anomalies in patients with craniofacial syndromes. One group comprised 19 patients with craniosynostosis syndromes (Apert, Crouzon, Pfeiffer and Saethre-Chotzen syndromes) and the other group included 15 patients with Treacher Collins syndrome. The study was conducted by means of clinical and radiographic examination and evaluation of plaque (PHP and visible plaque index), caries (dmf-t and DMFT) and gingival indexes. The efficacy of oral hygiene control performed by the patients was also investigated. Both groups displayed high plaque index and poor efficacy of toothbrushing, with no statistically significant difference between patients with and without syndactyly in the group with craniosynostosis syndromes. Despite the plaque accumulation, the caries and gingival indexes found were not meaningful. Most patients with Treacher Collins syndrome had cleft lip and palate, especially isolated cleft palate. No cases of cleft lip and palate were found in the group of craniosynostosis syndromes, which in turn displayed frequent occurrence of lateral palatal swellings, especially among patients with Apert and Crouzon syndromes. There was a high prevalence of dental anomalies for both groups, especially enamel opacities and tooth agenesis, which might be additional characteristics related to the syndromes that have not been reported in the literature so far. Based on these results, a dental therapeutic protocol is proposed for patients with the aforementioned syndromes.