O desenvolvimento de uma vacina para o controle da dengue é uma prioridade em todo o mundo. O domínio helicase da proteína NS3 (NS3H) viral alberga epítopos reconhecidos por linfócitos T citotóxicos, os quais tem papel importante na eliminação de células infectadas. Esse trabalho propôs a obtenção de uma forma recombinante, produzida em linhagens de Escherichia coli, da NS3H do DENV2 com características similares à proteína nativa e sua utilização como um potencial antígeno vacinal. A NS3H foi obtida na forma solúvel, foi reconhecida por anticorpos de camundongos e de humanos infectados e foi capaz de interagir com o RNA viral. Camundongos imunizados com NS3H coadministrada com diferentes adjuvantes desenvolveram respostas imunológicas específicas mas não foram protegidos após desafio. Em conjunto, os resultados indicam que a proteína NS3H recombinante preserva conformação e determinantes antigênicos da proteína viral nativa e pode ser útil em estudos sobre a biologia viral e na busca de estratégias anti-virais voltadas para o controle da dengue. / The development of a dengue vaccine is a worldwide priority. The helicase domain of viral NS3 protein (NS3H) preserves epitopes recognized by cytotoxic T lymphocytes, which plays an important role in the elimination of infected cells. This study aimed the generation of a recombinant NS3H form of a type 2 dengue virus (DENV2) lineage, in Escherichia coli strains, with properties similar to the native protein and its use as a potential vaccine antigen. The NS3H was obtained in soluble form, was recognized by antibodies from mice and human subjects and was able to interact with the viral RNA. Mice immunized with NS3H combined with different adjuvants developed specific immune responses but did not confer protection to a lethal challenge. Altogether, the results indicate that the recombinant NS3H protein preserves conformational and antigenic determinants of the native protein and may be a useful tool for studies dealing with the DENV biology and the search for anti-virus approaches.

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:06:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6474_1.pdf: 823040 bytes, checksum: eea42d0b38f2a3c4391bf6f4fc14f650 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / A interdisciplinaridade do conhecimento moderno cria a oportunidade para o desenvolvimento de novas ferramentas de investigação, da mesma forma que cria novas áreas de conhecimento. A Geografia Moderna reflete este grau de desenvolvimento científico, pois correlaciona os elementos tipicamente geográficos com informações oriundas de outras áreas do conhecimento, como por exemplo, o conceito de Geografia da Saúde que correlaciona os conceitos e dados geográficos com questões pertinentes à saúde pública. O objetivo principal deste trabalho foi investigar o relacionamento dos registros da doença com elementos do clima no estado de Pernambuco através das variáveis climatológicas, precipitação média, temperatura média mínima e temperatura média máxima, relacionadas com o número de casos notificados de dengue no Estado. Por outro lado as variáveis observadas foram confrontadas com suas respectivas normais climatológicas para verificar o comportamento das mesmas durante o período de estudo. O período temporal de análise desta pesquisa abrange os anos de 1995 a 2006. Foram utilizados dados da Secretaria de Saúde do Estado de Pernambuco e do Laboratório de Meteorologia de Pernambuco (LAMEPE). Posteriormente, foi realizada a padronização dos dados utilizando o programa SigmaStart 3.5. Após realizou-se o processamento dos dados no programa Statistical Package for the Social Sciences (SPSS), obtendo, deste modo, o Teste de Pearson (paramétrico) e o Teste de Spearmen (não-paramétrico). A fraca relação estatística encontrada entre as variáveis e o número de casos notificados de dengue no Estado mostrou que os presentes dados disponíveis não são suficientes para explicar as epidemias no Estado de Pernambuco. Considera-se que não só os fatores climáticos influenciam a proliferação da doença, mas também fatores outros como os de caráter biológico (por exemplo, surgimento de novos subtipos do vírus). Por outro lado é preciso considerar-se também os fatores sócio-ambientais da população (acúmulo doméstico inadequado de água, em descartáveis, pneus, latas, garrafas, lixo em terrenos baldios, escoamento ineficiente das chuvas nas cidades), uma vez que esse comportamento pode exercer papel relevante na proliferação dos casos de dengue.

Orientador: Carlos Fernando Salgueirosa de Andrade / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T19:27:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brassolatti_RejaneCristina_M.pdf: 8586810 bytes, checksum: 96d5ba730c16964eb8719652d0663173 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Atualmente o crescente número de epidemias de dengue em vários países do mundo tem obrigado muitos especialistas a reavaliar as formas básicas de controle do principal vetor dessa doença, o Aedes aegypti. A educação que visa a participação da comunidade na eliminação de criadouros dos vetores da dengue tem sido defendida como a melhor, senão única proposta que possa resultar num efetivo controle dessa doença nos países em desenvolvimento. Embora tenham se tomado muito comum esforços dispendiosos com as informações educativas através dos veículos de comunicação, a experiência têm mostrado que isso não resulta em ações efetivas e conseqüente redução da prevalência da dengue. E ainda, pouco ou quase nada se tem feito no sentido de avaliar o resultado entomológico dessas intervenções, o que poderia contribuir muito para a sua adequação. O presente trabalho visou avaliar em um primeiro momento o conhecimento da dengue para vários segmentos sociais bem como quanto a dengue e a pediculose capitis, para professores e alunos do ensino fundamental de Campinas. Avaliou-se a adequação desses conhecimentos e a disposição em reformulá-los, bem como a existência e adequação de claros objetivos entomológicos que levariam à redução do risco de dengue. Usou-se um método de abordagem qualitativa baseado em questionários, entrevistas e exercícios de campo ou simulados em salas de aula. Também foram feitas observações diretas no ambiente de estudo. No período entre 1995-97, quando a região encontrava-se em uma situação pré-epidêmica de dengue, encontrou-se que de maneira geral, professores, alunos, bem como seus familiares, e outros segmentos sociais avaliados, normalmente tinham entre "BAIXO" e "MEDIO" conhecimento sobre os temas, não tomando atitudes que estariam de acordo com um pressuposto objetivo entomológico. Num segundo momento ao final de 1997, foi avaliada uma intervenção educativa especial para o controle da dengue, baseada em um curso teórico-prático de 40 horas dado na UNICAMP, para 40 educadores municipais e 6 agentes de saúde de Campinas, SP. Esse grupo foi avaliado por até 1 ano como multiplicadores dos novos conhecimentos adquiridos e ações propostas para seus alunos. Também foi avaliada tal multiplicação a partir dos estudantes para seus familiares. Adicionalmente foram também oferecidas condições para uma vigilância e controle biológico dos vetores pela comunidade nas escolas. Os professores, seus alunos e familiares destes foram entrevistados e os ambientes escolares e domiciliares foram visitados. Depois das três avaliações iniciais (1, 2 e 3 meses após o curso), 68,8% dos professores declararam ter reduzido em suas escolas possíveis criadouros do mosquito da dengue. A maioria dos alunos (92,9%) afumou que já se sentiam capazes de controlar o vetor em qualquer ambiente, por evitar água parada e por ensinar sobre a doença para outras pessoas. Os estudantes declararam também que 47,1 % dessas pessoas que eles ensinavam tinham mudado suas atitudes devido à instrução que eles receberam. Cem porcento das famílias entrevistadas afumaram que o aluno estava ensinando sobre a dengue às pessoas da casa, porém somente 8,3% das residências visitadas foi observado "diminuição" e em 12,5% "eliminação total" dos possíveis criadouros do vetor. Um ano após a intervenção, foram entrevistados e visitados 20 professores nas suas respectivas escolas. Em um total de 55% dessas não havia qualquer potencial criadouro. A maioria desses professores afumou que seu aluno continuava insistindo quanto a total eliminação de criadouros em casa (objetivo entomológico), e tal comportamento foi confirmado pelos próprios depoimentos dos alunos e dos pais. Foram entrevistados 92 alunos nessa época, e a grande maioria afirmou que o professor ainda estava envolvendo a comunidade da escola com o tema dengue. Um total de 54,4% destes alunos indicaram que suas casas tinham potenciais criadouros, mas que eram quase diariamente cuidados de forma a não se tomarem criadouro. Foram avaliadas 90 famílias de alunos, e a maioria afirmou que a criança tem alertado com insistência os riscos de criadouros do vetor em casa. De acordo com suas informações, em 64,3% das residências "não havia criadouro algum", e em 17,3% haviam "potenciais criadouros" mas que eram cuidadosamente vistoriados, representando um total de 81,6% de residências mais próximas de um objetivo entomológico realista. Pôde-se observar durante as visitas que em 41 % das casas realmente não haviam nenhum possível criadouro, situação que segundo o parente entrevistado, foi em função do comportamento insistente da criança. Conclui-se que o processo educativo avaliado e a conseqüente mudança de atitudes foi evoluindo ao longo desse tempo, aumentando significativamente o que em um sentido geral seria uma suposta proteção contra a dengue para a comunidade da escola, para as crianças e para os seus familiares. Baseando-se em dados epidemiológicos discute-se que tal proteção na verdade não deve ser suficiente para a prevenção da dengue / Abstract: Nowadays the raising number of dengue epidemics through many countries around the world has compelled many experts to reevaluate the basic ways to control the main vector - Aedes aegypti. An education that aim community participation in eliminating breeding sites of the dengue vector has been defended as the best, unless the unique proposal that can result in effective control of this disease in developing countries. Although expensive efforts on educational information through the communication vehicles have been very common, the experience has showed that they do not result in effective actions and consequent reduction in dengue prevalence. And indeed, few or almost nothing has been done in order to evaluate the entomological results from such interventions, that could contribute a lot for its adequacy. The present work aimed to evaluate at first time the knowledge about dengue of various social segments as well as about dengue and the pediculosis capitis of teachers and students from the elementary education of Campinas, SP, Brazil. It was evaluated the suitability of such knowledge and the will in reformulating it, as well as the existence and suitability of clear entomological goals that could address the reduction of dengue risk. It was used a qualitative approach method based on questionnaires, interviews and field exercises or their simulations in classrooms. It was also done direct observations upon the studied environment. In the period of 1995-97, when the region was under a dengue pre-epidemic situation, it was found that in general, teachers, students as well as their familiars, and other evaluated social segments, common1y have from "LOW" to "MEDUM¿ knowledge about the subjects and lacking attitudes in accordance to pre-supposed entomological goals. In a second moment at the end of 1997, it was evaluated a special educational intervention for dengue control, based on a theoretical-practical 40 hours course offered in UNICA1 / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Ciências Biológicas

edgarod6@gmail.com / Letter to editor / Cartas al editor

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2016 / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:11:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340462.pdf: 1505088 bytes, checksum: a16e2e2d9a9e92fde60d1010eb026ecc (MD5) Previous issue date: 2016 / A dengue é considerada um grande problema de saúde pública em regiões tropicais e subtropicais do mundo. O principal alvo de anticorpos para o vírus da dengue (DENV) é a proteína do envelope (E). Áreas da proteína E que são conservadas estruturalmente e funcionalmente podem ser alvos de anticorpos neutralizantes contra os quatro sorotipos. Dados de bioinformática da proteína E do DENV identificaram a presença de um peptídeo altamente conservado na estrutura de todos os quatro sorotipos virais, localizado no E-DII da proteína viral. O peptídeo E250-270 constitui a maior porção conservada e é exposto na conformação trimérica da proteína E. Acredita-se que anticorpos direcionados contra ele possam ser neutralizantes. O presente trabalho avaliou a presença de anticorpos anti-E250-270 em soro de pacientes infectados. Para tanto, um ELISA indireto contra E250-270 foi desenvolvido. Inicialmente foram expressas as proteínas GST e KLH fusionadas ao peptídeo e ambas foram utilizadas como antígenos de imunização para obtenção de anticorpo monoclonal contra o E250-270. Para o ELISA indireto, foram selecionadas 82 amostras, 54 positivas para dengue (DV) e 28 de doadores saudáveis. A área sob a curva (ASC) foi calculada para cada amostra através de uma leitura cinética de 30 minutos (DO 450 nm) e a curva ROC foi construída visando o critério de máxima sensibilidade e especificidade. Os grupos testados diferiram entre si em relação à média da ASC (t = - 2,9722, df = 80, p = 0,0039). O ponto de corte sugerido pela curva ROC foi de 10,386, com sensibilidade de 59,2 % e especificidade de 64 %, VPP = 74,4 % e VPN = 45,0 %. Entre as amostras positivas para DV, 34 delas ficaram acima do ponto de corte, indicando a presença de anticorpos IgG anti E250-270. Entre os doadores saudáveis, 10 amostras ficaram acima do ponto de corte, entretanto foi verificado que sete delas haviam sido vacinadas contra a febre amarela, que também é um Flavivirus. Isso pode explicar o reconhecimento de E250-270, uma vez que existem similaridades entre as sequências do peptídeo com a sequência do vírus atenuado da vacina. Dessa forma, o estudo demonstrou a presença de anticorpos contra E250-270 em amostras positivas para DV. Estudos futuros poderão correlacionar a presença desses anticorpos com gravidade ou proteção da doença. <br> / Abstract : Dengue represents a large-scale public health problem in tropical and subtropical regions of the world. The main target of antibodies against dengue virus (DENV) is the envelope protein (E). Structurally and functionally preserved regions of the E protein can be target of neutralizing antibodies against all four serotypes. Bioinformatics data on the E protein of DENV identified the presence of a highly conserved peptide in all four serotypes structure located on the E-DII of the viral protein. E250-270 peptide is the most conserved portion of the E protein and is exposed in its trimeric conformation. It is thought that antibodies directed against it might be neutralizing. Therefore, this study evaluated the presence of anti-E250-270 antibodies in serum of infected patients through an indirect ELISA. E250-270 fused to GST and KLH proteins were expressed and used as immunizing antigens to obtain monoclonal antibodies against E250-270. For indirect ELISA, we selected 82 samples, 54 positive for dengue (DV) and 28 healthy donors. The area under the curve (AUC) was calculated for each sample from kinetic readings up to 30 minutes (OD 450 nm) and a ROC curve was built using maximum sensitivity and specificity criteria. Tested groups differed among each other in comparison to AUC mean (t = - 2.9722, df = 80, p = 0.0039). The suggested cut-off point for the ROC curve was 10.386, with a sensitivity of 59.2 % and specificity of 64 %, PPV = 74.4 % and NPV = 45.0 %. Among positive samples for DV, 34 of them were above the cut-off point, indicating the presence of IgG antibodies anti- E250-270. Among healthy donors, 10 samples were above the cut-off; however, seven of them had been vaccinated against yellow fever, which is also caused by a Flavivirus and has a similar peptide sequence. Thus, the study showed the presence of antibodies against E250-270 in positive samples for DV. Future studies could correlate the presence of these antibodies with gravity or protection against the disease.

Orientador : Angelo Zanaga Trape / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:02:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_ValmirRoberto_M.pdf: 4565850 bytes, checksum: fd38c1cfe9f9f861ea8c6b8a0c35bb8c (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: o uso de praguicidas no controle de artrópodes e vetores de doenças vem sendo uma preocupação dos responsáveis pela Saúde Pública. O número de casos de dengue tem aumentado a cada ano, ocasionando cada vez mais uma maior utilização do controle químico. Com isso, os funcionários que executam atividades de controle estão expostos de manen-a habitual no controle destas pragas urbanas, com a utilização de praguicidas. O objetivo deste trabalho foi analisar as condições de trabalho e de saúde dos funcionários de campo da Sucen - Regional de Campinas, com relação ao uso de praguicidas no Programa de Controle do Aedes aegypti no Estado de São Paulo. A metodologia utilizada constituiu na aplicação de um questionário aos funcionários de campo como desinsetizadores, encarregados de turma e de setor e mecânicos, distribuídos em setores e bases de equipe da Sucen, avaliando o perfil profissional e aspectos de segurança do trabalho. Foi também realizada uma pesquisa histórica da Sucen, sua formação e sua estrutura organizacional, assim como uma análise dos editais dos concursos públicos e os processo licitatórios para compra de materiais como: equipamentos de pulverização, viaturas, praguicidas e equipamentos de proteção individual e coletiva. Foram também examinadas documentações oficiais e bibliografia sobre o processo de descentralização do Programa de Controle do Aedes aegypti aos municípios com os financiamentos ocorridos através do Plano de Erradicação do Aedes aegypti (pEAa), a partn- de 1998 e a Programação Pactuada e Integrada e Epidemiologia e Controle de Doenças (pPI-ECD), a partn- de 2000. Da análise dos questionários (66 dos 69 funcionários existentes) observou-se que uma porcentagem elevada (80 %) apresentou mais de uma vez problemas com o uso direto ou indireto dos praguicidas com sintomas específicos do uso de pn-etróides, sem evidências de que possa estar ocorrendo intoxicação crônica. Com relação a intoxicações agudas, não foram encontrados graves problemas de saúde com afastamentos, abertura de comunicação de acidente no trabalho (CATs), etc., decorrentes das atividades de controle do Aedes aegypti. Por outro lado, constatou-se a necessidade de uma série de medidas preventivas com relação ao número de conjunto de roupas, tratamento dos efluentes da limpeza dos pulverizadores, medidas severas de obrigatoriedade do uso de EPIs, etc., planejamento e organização das atividades para diminuir os impactos à saúde dos trabalhadores, população e meio ambiente. Por fim, este trabalho também visou propor recomendações de medidas preventivas relacionadas ao uso de praguicidas no combate à dengue nos âmbitos municipal e estadual / Abstract: The use of pesticides to control arthropods and disease vectors has been of great concem to those responsible for Public Health. The number of cases of dengue fever has increased every year, resulting in the increased use of chernical controls. Consequently, those workers who carry out control activities are ttequently exposed to it, by using pesticides to control these urban pests. The objective of this study was to analyze the working conditions and health of the field workers at Sucen, in the Campinas region, in relation to the use of pesticides in the Aedes aegypti Control Prograrn in the State of São Paulo. The methodology used involved giving a questionnaire to the field workers who worked as "insect removers", tearn and sector foremen, and mechanics, distributed through the sectors and work teams at Sucen, to evaluate their professional profile and the safety aspects of their jobs. A historical study of Sucen, its origins and its organizational structure was also carried out, as was an analysis of the terms of the public examinations and the public tender processes used for purchasing materiaIs such as: pulverization equipment, vehicles, pesticides and individual and collective protection equipment. Official documents and bibliographies dealing with the process which decentralized the Aedes aegypti Control Program to the municipalities were also examined as was the financing which carne about through the Aedes aegypti Erradication Plan (pEAa), ttom 1998 onwards and the Coordinated and Integrated Epidemology and Disease Control Plan (PPI-ECD), ttom 2000 onwards. On analyzing the questionnaires (66 ofthe 69 members ofthe workforce) it was observed that a high percentage (80%) showed signs of more than one problem caused by the direct or indirect use of pesticides with specific symptoms resulting ttom the use of pyrethroids, without there being any evidence that chronic intoxication was taking place. As far as acute intoxication is concemed, no serious health problems resulting in time off work, communications of accidents at work (CATs) etc. resuhed ttom Aedes aegypti control activities. On the other hand, the need for a series of preventative measures conceming the number of sets of working clothes, treatment of the cleaning efiluent ttom the pulverizers, severe measures to ensure the use of the Individual Protection Equipment etc., planning and organization of the activities so as to reduce the impact on the health of the workforce, population and environrnent were identified. Finally, this studyalso aimed to propose recommendations and safety measures related to the use of pesticides in the fight against dengue fever at both the municipal and state leveI / Mestrado / Saude Coletiva / Mestre em Saude Coletiva

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-04-18T19:08:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Nataly Diniz de Lima Santos.pdf: 10292410 bytes, checksum: 26c8d3a16e9515dbf18fb5acfd5d739d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-18T19:08:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Nataly Diniz de Lima Santos.pdf: 10292410 bytes, checksum: 26c8d3a16e9515dbf18fb5acfd5d739d (MD5) Previous issue date: 2013-05-29 / FACEPE / O mosquito Aedes aegypti é o vetor de três arboviroses denominadas febre Chikungunya, febre amarela e dengue. Esta última é uma das doenças infecciosas mais importantes mudialmente e epidemias de dengue vêm ressurgindo em países tropicais e subtropicais. O controle do vetor é a melhor estratégia de combate à doença. Os inseticidas químicos atualmente utilizados são tóxicos para o meio ambiente e seu uso excessivo tem levado ao desenvolvimento de populações resistentes. Neste cenário, tem aumentado a busca por inseticidas naturais para controle de populações de A. aegypti. Lectinas, proteínas que reconhecem carboidratos, isoladas de plantas apresentam atividade inseticida. A lectina solúvel em água isolada de sementes de Moringa oleifera (WSMoL) promoveu mortalidade (CL50 de 0,197 mg/mL) contra larvas de A. aegypti no quarto estágio (L4) e extrato das sementes contendo WSMoL retardou o desenvolvimento larval. Uma vez conhecidos os efeitos deletérios de WSMoL sobre as larvas dessa espécie de mosquito, o presente trabalho investigou: 1) o efeito de WSMoL sobre a oviposição de fêmeas grávidas de A. aegypti em condições de laboratório e utilizando ovitrampas (armadilhas para captura de ovos) em ensaios de campo simulado; 2) a eficácia de WSMoL em aumentar a eficiência de armadilhas para captura de fêmeas (MosquiTRAPTM); 3) a atividade ovicida de WSMoL sobre ovos de A. aegypti frescos e estocados; 4) o envolvimento de sensores olfatórios das fêmeas na resposta de oviposição frente a WSMoL; 5) a influência de diferentes doses de radiação gama nos efeitos da lectina sobre larvas, ovos e oviposição. A lectina foi isolada através de protocolo previamente estabelecido. Ensaio de oviposição em laboratório foi realizado em gaiolas (33 x 21 x 30 cm) contendo um par de recipientes de vidro, sendo um deles preenchido com 50 mL do extrato de sementes, fração proteica 0-60% ou WSMoL isolada (concentração final: 0,1 mg/mL de proteínas) e o outro com 50 mL de água destilada (controle negativo). Cada recipiente continha uma peça de papel de filtro como suporte para oviposição. As fêmeas grávidas (25) foram liberadas no interior das gaiolas e após 16 h o número de ovos foi determinado. A eclodibilidade dos ovos depositados pelas fêmeas foi também avaliada. Para isso, 50 ovos foram selecionados e imersos na mesma solução em que foram depositados. Após 144 h, o número de larvas foi registrado. A resposta de oviposição das fêmeas grávidas em condições de campo simulado foi avaliada em uma área experimental localizada no campus da Universidade Federal de Minas Gerais contendo grandes gaiolas (2,5 x 2,5 x 2 m) em seu interior. Em cada gaiola foram colocadas duas ovitrampas contendo palhetas de madeira, uma preenchida com WSMoL (0,1 mg/mL) e outra com água de torneira (controle negativo). Em seguida, 40 fêmeas grávidas previamente selecionadas em laboratório foram liberadas no centro da gaiola. Após 2 h, as ovitrampas foram retiradas e o número de ovos determinado. Ensaios utilizando par de ovitrampas contendo infusão de Panicum maximum (um eficiente estimulante de oviposição) e água destilada foram realizados como controle positivo. Amostra da lectina foi avaliada quanto à presença de compostos voláteis por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS) e ensaio de olfatometria utilizando olfatômetro horizontal de dupla escolha foi realizado para investigar o envolvimento de sensores olfatórios na resposta das fêmeas frente a WSMoL. MosquiTRAP™ (versão 1.0) foi utilizada para avaliar a eficácia de WSMoL como um atraente para captura de fêmeas de A. aegypti em condições de campo simulado. As armadilhas foram preenchidas com WSMoL (teste), infusão de P. maximum (controle positivo) ou água de torneira (controle negativo). Quarenta fêmeas grávidas foram liberadas no centro de cada gaiola contendo um par de armadilhas. O número de fêmeas capturadas foi avaliado após 180 min. A capacidade do extrato de sementes, fração 0-60% e WSMoL em impedir a eclosão de ovos estocados de A. aegypti foi também avaliada. Por fim, foi determinado o efeito da irradiação gama de WSMoL, nas doses de 10 mGy e 10 Gy, sobre as atividades larvicida, ovicida e efeito na oviposição. As preparações brutas (extrato de sementes e fração proteica 0-60%) não afetaram a oviposição de A. aegypti. Diferentemente, WSMoL apresentou significante (p<0,05) efeito estimulante sobre a oviposição tanto em condições de laboratório (73 ± 2,1%) quanto em condições de campo simulado (65 ± 14%) utilizando ovitrampas. O efeito de WSMoL em condições de campo foi similar ao da infusão de P. maximum (67 ± 11 %). Nas ovitrampas contendo WSMoL, o número de ovos presentes na superfície do líquido foi maior que o de ovos depositados na palheta. A presença de compostos voláteis não foi detectada na solução de WSMoL e os resultados do ensaio de olfatometria revelaram que as fêmeas não foram atraídas por WSMoL através de resposta envolvendo sensores olfativos. A não-volatilidade de WSMoL, a presença da maioria dos ovos na superfície do líquido nas ovitrampas contendo WSMoL e os resultados do ensaio de olfatometria indicam que os mecanismos de percepção de WSMoL pelas fêmeas provavelmente envolvem sensores de contato (gustatórios). WSMoL não interferiu na eficiência da armadilha MosquiTRAPTM para captura de fêmeas grávidas, provavelmente devido ao fato de que nesse tipo de armadilha, as fêmeas não podem entrar em contato com a solução. Extrato de sementes, fração proteica 0-60% e WSMoL reduziram a eclosão dos ovos depositados no ensaio de oviposição em condições de laboratório. Extrato, fração e WSMoL também apresentaram atividade ovicida contra ovos estocados, sendo os valores de CE50 (concentração efetiva de proteínas necessária para reduzir em 50% o número de ovos eclodidos) de 0,28, 0,18 e 0,1 mg/mL de proteínas, respectivamente. Análise por microscopia óptica revelou que WSMoL interferiu no desenvolvimento do embrião em ovos frescos, bem como causou a morte dos embriões presentes nos ovos estocados. A irradiação de WSMoL na dose de 10 mGy potencializou as atividades hemaglutinante, larvicida e ovicida da lectina, enquanto o efeito estimulante de oviposição foi abolido. Em conclusão, o presente trabalho relata, pela primeira vez, os efeitos ovicida e estimulante de oviposição de uma lectina e demonstra a atuação de uma molécula fixa (não volátil) como uma pista química utilizada pelas fêmeas grávidas de A. aegypti para seleção do sítio de oviposição. As atividades estimulante de oviposição, ovicida e larvicida de WSMoL fazem desta lectina uma molécula com excelentes características para controle de A. aegypti. / The mosquito Aedes aegypti is the vector of three arboviruses named Chikungunya fever, yellow fever and dengue. This last is one of the most important infectious diseases worldwide and dengue epidemics are re-emerging in tropical and subtropical countries. The vector control is the best strategy to combat the disease. The chemical insectides currently used are toxic to environment and their excessive use has led to developing of resistant populations. In this scenario, the search for natural insecticides for A. aegypti control has increased. Lectins, carbohydrate-binding proteins, isolated from plants show insecticidal activity. The watersoluble lectin isolated from Moringa oleifera seeds (WSMoL) promoted mortality (LC50 of 0.197 mg/mL) of A. aegypti fourth-stage larvae (L4) and seed extract containing WSMoL delayed larval development. Once known the deleterious effects of WSMoL on larvae of this mosquito species, the present work investigated: 1) the effect of WSMoL on oviposition by A. aegypti gravid females under laboratory conditions and using ovitraps (traps to capture eggs) in assays under semi-field conditions; 2) the efficacy of WSMoL in enhance the efficiency of traps used to capture females (MosquiTRAPTM); 3) the ovicidal activity of WSMoL on fresh and stored A. aegypti eggs; 4) the involvement of female olfactory sensilla in the oviposition response toward WSMoL; 5) the influence of different doses of gamma radiation on the effects of lectin on larvae, eggs and oviposition. Oviposition assay in laboratory was performed in cages (33 x 21 x 30 cm) containing a pair of glass vessels; one filled with 50 mL of seed extract, 0-60% protein fraction or isolated WSMoL (final concentration: 0.1 mg/mL of protein) and the other with 50 mL of distilled water (negative control). Each vessel contained a piece of filter paper as support for oviposition. The gravid females (25) were released inside the cages and after 16 h the number of eggs was determined. The hatchability of the eggs laid by females was also evaluated. For this, 50 eggs were selected and imersed in the same solution at which they were laid. After 144 h, the number of larvae was recorded. The oviposition response by gravid females under semi-field conditions was evaluated in an experimental area located at the campus of the Universidade Federal de Minas Gerais containing wide cages (2.5 x 2.5 x 2 m) inside. In each cage, two ovitraps containing a wood paddle were placed and one was filled with WSMoL (0.1 mg/mL) and another with tap water (control). Next, 40 gravid females previously selected in laboratory were released in the center of the cage. After 2 h, the ovitraps were removed and the number of eggs was determined. Assays using a pair of ovitraps containing Panicum maximum infusion (an effective oviposition-stimulant) and tap water were performed as positive control. Lectin sample was evaluated for presence of volatile compounds by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) and olfactometry assay using double-choice horizontal olfactometer was performed aiming to investigate the involvement of olfactory sensilla in the response of females toward WSMoL. The MosquiTRAP™ (Version 1.0) was used to evaluate the efficacy of WSMoL as an attractant for capturing A. aegypti females under semi-field conditions. The traps were filled with WSMoL (test), P. maximum infusion (positive control) or tap water (negative control). Forty gravid A. aegypti females were released in the center of each cage containing a pair of traps. The number of captured females was evaluated in the cages after 180 min. The ability of seed extract, 0-60% fraction and WSMoL to impair the hatching of stored A. aegypti eggs was also evaluated. Finally it was determined the effect of gamma irradiation of WSMoL, at doses of 10 mGy and 10 Gy, on the larvicidal and ovicidal activities as well as effect on oviposition. The crude preparations (seed extract and 0-60% fraction) did not affect the A. aegypti oviposition. Differently, WSMoL showed a significant (p<0.05) oviposition-stimulant effect both under laboratory conditions (73 ± 2.1 %) and in ovitraps at field-simulated conditions (65 ± 14 %). The effect at field conditions was similar to that of P. maximum infusion (67 ± 11 %). In ovitraps containing WSMoL, the number of eggs found at liquid suface was higher than that of eggs laid on the paddles. The presence of volatile compounds was not detected in WSMoL solution and the results from olfatometry assay revealed that the females were not attracted by WSMoL through response involving olfactory sensilla. The non-volatilty of WSMoL, the presence of eggs majority at the liquid surface in WSMoL ovitraps and the results from olfatometry assay indicated that the mechanisms of WSMoL perception by females probably involve contact (gustatory) sensilla. WSMoL did not interfere in the efficiency of MosquiTRAPTM in capture gravid females, probably due to the fact that in this type of trap the females cannot have contact with the solution. Seed extract, 0-60% protein fraction and WSMoL reduced the hatching of eggs laid in the oviposition assay under laboratory conditions. Extract, fraction and WSMoL also showed ovicidal activity against stored eggs, being the EC50 (effective protein concentration required to reduce the number of hatched eggs in 50%) values of 0.28, 0.18 and 0.1 mg/mL, respectively. Analysis by optical miscroscopy revealed that WSMoL interfered on embryo developmente in fresh eggs as well as caused the death of the embryos present in stored eggs. The irradiation of WSMoL at 10 mGy dose potencialized the hemagglutinating, larvicidal and ovicidal activities of the lectin while the oviposition-stimulant effect was abolished. In conclusion, the present work reports for the first time the ovicidal and oviposition-stimulant effects of a lectin and demonstrate the acting of a fix (non-volatile) molecule as a chemical cue used by A. aegypti gravid females for selection of the oviposition site. The ovipositionstimulant, ovicidal and larvicidal activities of WSMoL make this lectin a molecule with excellent characteristics for A. aegypti control.

Orientador: Ricardo Augusto Monteiro de Barros Almeida / Resumo: Introdução: Grande número de transplantados renais encontram-se expostos a regiões endêmicas e epidêmicas da dengue, porém, dados sobre o comportamento desta infecção nesta população específica ainda são escassos na literatura. Métodos: Estudo de série de casos, no qual foram incluídos todos os transplantados renais diagnosticados com dengue em nosso serviço dentro do período de janeiro de 2013 a julho de 2016. Foram avaliadas características demográficas, clínicas, laboratoriais gerais, sorológicas e antigênicas. Sempre que possível, foi avaliado o comportamento a longo prazo do antígeno NS1 e dos anticorpos das classes IgG e IgM através de teste de imunocromatografia comercial. Resultados: Foram incluídos 16 pacientes. Houve predomínio do sexo masculino (87,5%), da cor branca (81,2%) e a média de idade foi de 42,0 anos. Metade de doadores eram falecidos. O esquema de manutenção da imunossupressão com tacrolimo, micofenolato sódico e prednisona foi o mais utilizado (62,5%). A mediana de tempo entre o transplante renal e o início dos sintomas foi de 1.426 dias. Apenas um paciente (6,3%) com suspeita de transmissão do vírus da dengue através do enxerto foi classificado como grave e necessitou enxertectomia. Nenhum óbito foi identificado. A disfunção renal ocorreu em 66,7% dos pacientes, mostrando-se transitória em 93,8% das vezes. Dentre os 13 (86,7%) pacientes com NS1 reagente, este mostrou-se ainda detectável até 28 dias após o início dos sintomas. Anticorpos IgM foram ident... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: A large number of renal transplant recipients are exposed to endemic and epidemic areas for dengue fever, but data on the behavior of this infection in this specific population are still scarce in the literature. Methods: A case series study that included all renal transplant recipients with confirmed diagnosis of dengue fever followed at our institution between January 2013 and July 2016. Demographic, clinical, laboratory, serological and antigenic characteristics were evaluated. Whenever possible, the long-term behavior of NS1 antigen and IgG and IgM class antibodies were evaluated by commercial immunochromatographic test. Results: We included 16 patients. There was a predominance of males (87.5%), caucasians (81.2%) and mean age was 42.0 years. Half of donors were deceased. The most used immunosuppression regimen was tacrolimus, mycophenolate sodium and prednisone (62.5%). The median time between kidney transplantation and the onset of symptoms was 1,426 days. Only one patient (6.3%) with suspected transmission of the dengue virus through the graft was classified as severe and required removal of the graft. No deaths were identified. Graft dysfunction occurred in 66.7% of the patients and was transient in 93.8% of cases. NS1 antigen was detected in 13 patients (86.7%) and it was still detectable up to 28 days after the onset of symptoms. IgM antibodies were identified in 93.3% of the patients. In 85.7% of the patients who had IgM antibodies, they remained det... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Luiz Jacintho da Silva / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-20T15:22:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Donalisio_MariaRitadeCamargo_D.pdf: 10399849 bytes, checksum: f51728baa3ca2a2afe04775260d82cff (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: As epidemias podem ser examinadas sob. diferentes perspectivas, que exigem universos explicativos e metodológicos distintos, com diversos raios de visão e instrumentos de análise. Dentro de cada uma destas perspectivas, foram avaliadas as possibilidades de controle da epidemia de Dengue. Na sua dimensão biológica-ecológica (Mundo da Materialidade), as epidemias carregam particularidades do micro universo orgânico e clínico, da medida do tempo e do espaço biológico da relação do parasita, do hospedeiro e do "meio ambiente". Esta dimensão tem um horizonte de visibilidade próprio, onde está à disposição um arsenal tecnológico de grande utilidade para o enfrentamento da transmissão. Neste trabalho foram recuperadas experiências epidêmicas de outros países que deixam lições sobre o comportamento biológico e epidemiológico da doença. Diante de uma epidemia, a sociedade mostra como vê e simboliza a sua ocorrência (Mundo" da Subjetividade). Desastroso é o programa de controle e prevenção de um surto que não leva em consideração as questões subjetivas do que significa previnir-se, adoecer, ou ser um individuo transmissor. As epidemias têm uma historicidade e são determinadas pela estrutura social, (organização do espaço, movimentos populacionais), além de softer influência das práticas de intervenção e controle que a sociedade adota para enfrenta-las (Munda das Relações Sociais). Foi estudado o dengue no espaço urbano, identificando os,deslocamentos populacionais e as rotas de comércio e da riqueza, como estratégicos para explicar a disseminação da doença. Foram apontadas algumas lições das grandes campanhas do passado e a necessidade de repensar as estratégias para erradicação da doença hoje, na conjuntura da descentralização das ações de saúde pública e vigilância epidemiológica. A municipalização da vigilância epidemiológica e controle de vetores tem sido fundamental para ampliar a cobertura dos serviços e dar eficácia às medidas. Porém há necessidade de se reforçar os níveis regionais de controle e integrar as instâncias de combate às endemias e epidemias. Essas estratégias exigem planos regionais e macro-regionais articulados que dêm coerência às ações e maior racionalidade às medidas / Abstract: Epidemics may be examined under a variety of perspectives, that require distinct explanatory universes, each one with a different reach and distinguished analytical instruments. In the bio-ecological dimension (World of Materiality), the epidemic brings particularities from the micro-organic and clinical universe as well as from the relations between parasite, host and the environment. This dimension has a particular horizon of visibility, in which there is a technological arsenal of great utility for the control of the transmission. In this work, lessons were taken ftom the epidemiological behavior of Dengue epidemics ftom other countries. Facing an epidemic, society shows how it sees and symbolizes the event (World of Subjectivity). It is a disaster when a program of control and prevention of a disease outbreak doesn't consider questions like what it means to prevent, to get sick or to be the transmitting individual. Epidemics have a historicity and are determined by social structures (space organization and migration). Epidemics are also influenced by the interventionist practices and by the control methods used during the combat. (World of Social Relations). Dengue was studied in the urban context, identifying the population displacements and the commercial routes, as being strategic to explain the disease dissemination. 'Lessons from the past great eradication campaigns were pointed as well as the necessity to ponder the illness elimination in the context of health services decentralization. The municipalization of the epidemiological surveillance and of the vector control program has been fundamental to give efficacy to the health strategies. It's necessary though, to reinforce the role of the regional instances of health services and to integrate the combat to endemic and epidemics. This strategies requires macro-regional plans that brings coherence and rationality to the adopted control measures / Doutorado / Saude Coletiva / Doutor em Ciências Médicas

Dengue mitigation is a major research area among scientist who are working towards an effective management of the dengue epidemic. An effective dengue mitigation requires several other important components. These components include an accurate epidemic modeling, an efficient epidemic prediction, and an efficient resource allocation for controlling of the spread of the dengue disease. Past studies assumed homogeneous response pattern of the dengue epidemic to climate conditions throughout the regions. The dengue epidemic is climate dependent and also it is geographically dependent. A global model is not sufficient to capture the local variations of the epidemic. We propose a novel method of epidemic modeling considering local variation and that uses micro ensemble of regressors for each region. There are three regressors that are used in the construction of the ensemble. These are support vector regression, ordinary least square regression, and a k-nearest neighbor regression. The best performing regressors get selected into the ensemble. The proposed ensemble determines the risk of dengue epidemic in each region in advance. The risk is then used in risk-based resource allocation. The proposing resource allocation is built based on the genetic algorithm. The algorithm exploits the genetic algorithm with major modifications to its main components, mutation and crossover. The proposed resource allocation converges faster than the standard genetic algorithm and also produces a better allocation compared to the standard algorithm.