A poluição das águas tem sido um problema para a sociedade. Atualmente as bacias hidrográficas são áreas geográficas de grande preocupação para os setores públicos e privados e as degradações antrópicas, se refletem no âmbito social e econômico. A preferência pelo rio Corumbataí neste estudo se deu pela grande diversidade de impactos sobre a qualidade da água, pois o mesmo abastece a região de Piracicaba. Neste trabalho foi avaliada a água do rio em seis pontos de amostragem, com freqüência mensal, que se estenderam pelo período de um ano. Além disso, foram realizadas coletas de fauna bentônica por seis meses, na época de seca e chuvas sendo três meses de cada. Para todos os pontos foram verificados o pH, oxigênio dissolvido e temperatura da água que se apresentaram satisfatórios, salvo a condutividade que aumentou no sentido da montante para a jusante. Também foram realizados testes de toxicidade crônica com Ceriodaphnia dubia, e na maioria das amostras a reprodução foi menor em relação ao controle. Os metais detectados com maior freqüência, das maiores para as menores concentrações foram: Zn, Pb, Cd e Ni. O processo de eutrofização foi avaliado por meio das análises de Clorofila a e fósforo total. O rio Corumbataí se encontra no início de um processo de eutrofização, constatado pelas concentrações de clorofila a, testes de toxicidade e a evidencia de macroinvertebrados bentônicos indicadores de condições eutróficas. As concentrações de fenóis analisadas foram acima e surfactantes abaixo dos limites normatizados. / Water pollution has been a problem for society. Currently, watersheds are geographic areas of great concern to the public and private sectors and the anthropic degradations can reflect in the society and economy. The preference to this study be realized in the Corumbataí river was due to the great diversity of impacts on the water quality and it supplies the region of Piracicaba. In the present work, montly was evaluated the river water using six sampling sites during one year. In addition, benthonic fauna samples were collect for about six months, three months in the dry season and three months in the rain season. For all sites were verified pH, dissolved oxygen, water temperature that presented satisfactory results, except the conductivity that increased from downstream to upstream. Were also conduced chronic toxicity tests with Ceriodaphnia dubia and in the most samples reproduction was lower compared to control. The metal most frequently detect from the largest to smallest concentrations were: Zn, Pb, Cd and Ni. The eutrophication process was evaluated by analysis of Chlorophyll a and total phosphorus concentration and can be concluded that the Corumbataí river is in the beginning of the eutrophication process evidenced by Chlorophyll a, toxicity test and presence of benthonic macroinvertebrates that indicates eutrophic conditions. Concentrations of phenol has been above and surfactants below the standardized limits.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O camu-camu (Myrciaria dubia) é um representante das Myrtaceae, uma das famílias botânicas mais importantes para a fruticultura e que faz parte de várias formações da vegetação brasileira. M. dubia é uma planta Amazônica, encontrada com maior frequência na Amazônia peruana. A espécie possui frutos com elevado teor de vitamina C, sendo a polpa utilizada na indústria farmacológica, de cosméticos e nutricional. É uma espécie pouco estudada e que ainda há necessidade de estudos para melhor compreensão da espécie quanto a sua diversidade. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo verificar a ocorrência e distribuição do camu-camu no estado de Roraima e caracterizar a fenologia de frutificação desta espécie na sua área natural. Para o registro da ocorrência, distribuição e georreferenciamento da espécie, foram realizadas excursões para prospecção das populações nativas de camu-camu em todos os municípios de Roraima nos anos de 2010 a 2012. Também se avaliou a fenologia de frutificação do camu-camu no Lago da Morena, localizado no munícipio do Cantá-RR no período de dezembro de 2010 a abril de 2011. Para a realização deste estudo, foram escolhidas aleatoriamente plantas de camu-camu distribuídas dentro da população e estas foram marcadas e acompanhadas semanalmente. Aproximadamente 4 mil inflorescências que se encontravam no estádio pós-antese foram marcadas e a partir da 9 semana desta fase, avaliou-se o desenvolvimento dos frutos. Paralelamente, houve avaliação física e química dos frutos até a 16 semana quando os mesmos atingiram a maturação. A ocorrência de populações nativas de camu-camu foi registrada em oito municípios, Normandia, Bonfim, Amajari, Boa Vista, Cantá, Caracaraí, Caroebe e Rorainópolis, sendo essas plantas encontras nas margens dos principais rios e seus afluentes do estado e em diversos tipos de solos e sistemas não florestais, florestais e áreas de transição, demonstrando que a espécie apresentam uma boa adaptação e rusticidade. Foi constatado que nas condições do lago da Morena o camu-camu tem um ciclo de maturação total de 102 dias pós a antese, sendo que eles atingem seu ponto máximo de crescimeno aos 84 dias, assim obtendo uma escala fenológica com 98 estádios de frutificação para a espécie. / The camu-camu (Myrciaria dubia) is a representative of the family Myrtaceae, one of the botanical families most important to fruit growing and which is part of several communities of the Brazilian vegetation. M. dubia is an Amazonian plant, found most often in the Peruvian Amazon. The species possesses fruits with a high content of vitamin C, the pulp being utilized in the pharmacological industry, cosmetic and nutritional industry. It is a poorly studied species and that still there is need of studies for better understanding of this species as to its diversity. Under this context, this work as intended to verify the occurrence and distribution of the camu-camu in the state of Roraima and characterize the fruit set phenology of this species in its natural area. For the record of the occurrence, distribution and georeferencing of the species, excursions for the prospecting of the native populations of camu-camu were carried out in all the municipalities of Roraima in the years of 2010 to 2012. Also, the fruit set phenology of the camu-camu was evaluated on Lago da Morena, situated in the municipality of Cantá-RR over the period of December of 2010 to April of 2011. For the fulfillment of this study, camu-camu plants distributed inside the population were randomly chosen and these were marked and recorded and monitored weekly. About 4 thousand inflorescences which were at the post-anthesis stage were marked and from the 9th week of this phase, the fruit development was evaluated. Parallelly, there was a physical and chemical evaluation of the fruits till the 16th week when they reached maturation. The occurrence of native populations of camu-camu was recorded in eight municipalities, Normandia, Bonfim, Amajari, Boa Vista, Cantá, Caracaraí, Caroebe and Rorainópolis, those plants being found on the banks of the main rivers and their affluents of the state and in several sorts of soils and non-forest, forest systems and transition areas, showing that the species present a good adaptation and rusticity. It was found that under the conditions of the Morena Lake, the camu-camu has a cycle of total maturation of 102 days post-anthesis, whereby they reach their maximum growth point at 84 days, so obtaining a phonological scale with 98 fruit set stages for the species.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O camu-camuzeiro (Myrciaria dubia (H. B. K.) McVaugh) é uma espécie frutífera pertencente à família Myrtaceae, de ocorrência espontânea nas margens de rios e lagos da Amazônia. Apresenta potencial econômico, uma vez que o fruto é considerado a maior fonte natural de vitamina C, chegando a atingir 6112 mg de ácido ascórbico por 100 g de polpa, despertando interesse comercial por parte dos produtores e consumidores. Apesar da importância econômica, pouco se sabe sobre os aspectos da multiplicação in vitro desta espécie, o que poderia elevar significativamente a sua produtividade. Neste sentido, objetivou-se com o presente trabalho testar diferentes concentrações de produtos pra desinfestação e estabelecimento de uma cultura asséptica, utilizando explantes de segmentos caulinares de camu-camu provenientes de plantas mães, mantidas em ambiente ex vitro. O trabalho foi dividido em quatro experimentos: 1) Avaliação do efeito do hipoclorito de sódio na assepsia dos explantes de segmentos caulinares de camu-camu in vitro; 2) Avaliação de diferentes concentrações de cloreto de mercúrio na desinfestação in vitro de segmentos caulinares de camu-camu; 3) Determinação da melhor concentração e tempo de imersão de dióxido de cloro na desinfestação in vitro de segmentos caulinares de camu-camu; 4) Uso de antibióticos para o controle da contaminação bacteriana em culturas in vitro de segmentos caulinares de camu-camu. Após 30 dias, avaliou-se o percentual de contaminação e a porcentagem de explantes estabelecidos. A utilização de hipoclorito de sódio a 1,5 % de cloro ativo, por 12 minutos, proporcionou maiores porcentagens de descontaminação (98%), o que resultou na obtenção de bons índices de estabelecimento (87,9%). O cloreto de mercúrio mostrou-se tóxicos aos explantes, mesmo nas menores concentrações. Com a utilização do dióxido de cloro na concentração de 50%, em exposição no tempo de 30 minutos, obteve-se 60% dos explantes desinfestados e 60% estabelecidos. Quanto aos antibióticos, menores índices de contaminação e maiores de estabelecimento (0% e 50% respectivamente) foram obtidos quando utilizou ampicilina na concentração de 100 mg.L-1. Portanto, para desinfestação in vitro de camu-camuzeiro, via segmentos caulinares, deve-se utilizar hipoclorito de sódio a 1,5 % por 12 minutos, com adição no meio de cultura de 100 mg.L-1 de antibiótico ampicilina. / The camu-camu tree (Myrciaria dubia (H.B.K.) McVaugh) is a fruit-bearing species belonging to the family Myrtaceae of spontaneous occurrence on the banks of rivers and lakes of Amazonia. It presents economic potential, since its fruits are thought the greatest natural source of vitamin C, bordering 6,112g of ascorbic acid per 100 g of pulp, arising commercial interest on the part of the farmers and consumers. In spite of the economic importance, little is known about the aspects of the in vitro multiplication of this species, which could raise significantly its yield. In this sense, it was aimed through this work to test different concentrations of products for disinfestation and establishment of an aseptic culture by utilizing explants of stem segments of camu-camu coming from mother plants kept in ex vitro environment. The work was divided into four experiments: 1) evaluation of the effect of sodium hypochlorite upon the asepsis of the explants of stem segments of camu-camu in vitro; 2) to evaluate different concentrations of mercury chlorite in the in vitro disinfestation of camu-camu stem segments; 3) to determine the best concentration and immersion time of chlorine dioxide in the in vitro disinfestations of camum-camu stem segments; 4) Use of antibiotics for the control of bacterial contamination in in vitro cultures of camu-camu stem segments. After 30 days‟ time, the percent of contamination and the percentage of established explants were evaluated. The use of sodium hypochlorite at 1.5%of active chlorine for 12 minutes provided highest percentages of decontamination (98%), which resulted into the obtaining of good establishment indices (87.9%). Mercury chlorite proved toxic to the explants even at the lowest concentrations. Through the use of chlorine dioxide at the concentration of 50% under exposition in the 30 minutes‟ time, 60% of the disinfected explants and 50% of the established ones were obtained. As to the antibiotics, decreased contamination indices and increased establishment indices (0% and 50%, respectively) were reached when ampicillin at the concentration of 100 mg/ L was utilized. Therefore, for in vitro disinfection of camu-camu tree via stem segments, one should utilize 1.5% sodium hypochlorite for 12 minutes, with addition in the culture medium of 100 mg/ L of antibiotic ampicillin.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O camu-camuzeiro (Myrciaria dubia (Kunth) Mc Vaugh) é uma espécie frutífera pertencente à família Myrtaceae. Possui potencial econômico, por se tratar do fruto com maior quantidade de vitamina C, chegando a atingir 6.112 mg de ácido ascórbico por 100 g-1 de polpa. Objetivou-se com o presente trabalho caracterizar os frutos de camu-camu detectando-se o melhor ponto de colheita para o fruto, assim como testar tecnologias pós-colheita e de armazenamento em sua conservação. Foram realizados dois experimentos. O primeiro, objetivou a determinação do ponto de colheita onde os frutos foram colhidos em três diferentes estádios de maturação (imaturo, semi-maturo e maturo) e armazenados por oito dias. No segundo, foram testadas embalagens e temperaturas de armazenamento constituindo os seguintes tratamentos: T1 (sem embalagem a temperatura ambiente, 22 C); T2 (sem embalagem a 15 C); T3 (sem embalagem a 20 C); T4 (PET a temperatura ambiente, 22 C); T5 (PET a 15 C); T6 (PET a 20 C); T7 (PVC a temperatura ambiente, 22 C); T8 (PVC a 15 C); e T9 (PVC a 20 C). Os delineamentos utilizados foram inteiramente casualizados em arranjo fatorial. Os frutos foram analisados diariamente quanto a: perda de massa fresca, pH, teores de sólidos solúveis (SS), acidez titulável (AT), ácido ascórbico (AA), vitamina C total, carotenoides, antocianinas, clorofilas A e B, flavonoides e compostos fenólicos totais, assim como a atividade antioxidante (FRAP e DPPH) e o índice de maturação (SS/AT). No estádio semi-maturo houve uma maior conservação dos atributos de qualidade (SS, AT e menor perda de massa), assim como do teor de ácido ascórbico e da atividade antioxidante (FRAP). Os pigmentos carotenoides, flavonoides e antocianinas, assim como o teor de vitamina C apresentaram maiores conteúdos nos frutos colhidos maturos, sendo esse estádio considerado o indicado para a extração desses biocompostos funcionais. Esse ponto de colheita também correspondeu ao maior conteúdo médio de fenólicos totais e da atividade antioxidante (DPPH). Assim o melhor ponto de colheita para a extração de pigmentos e biocompostos antioxidantes do camu-camu é o estádio maturo. Quando a intenção for obter maior vida de prateleira, o melhor ponto de colheita é o semimaturo, por conservar os atributos qualitativos por mais tempo. No armazenamento pós-colheita do camu-camu concluiu-se que a melhor conservação dos atributos qualitativos e a melhor conservação dos pigmentos e biocompostos antioxidantes ocorreu quando os frutos foram armazenados a 15 C em conjunto com a bandeja de poliestireno expandido recoberta com filme de PVC. / The camu-camu tree (Myrciaria dubia (Kunth) Mc Vaugh) is fruit-bearing tree belonging to the family Myrtaceae. It possesses economic potential for being concerned with the fruit of greatest amount of vitamin C, coming to reach 6.112 mg of ascorbic acid per 100 g-1 of pulp. It was aimed through the present wok to characterize the camu-camu fruit by detecting the best harvest date for the fruit as well as to test post-harvest and storage technologies in their conservation. Two experiments were conducted. The first one aimed at the determination of the harvest date where the fruits were collected at three different ripening stages (unripe, semiripe and ripe) and stored for eight days. In the second one, packages and storage temperatures constituting the following treatments were tested: T1 (with no package at room temperature, 22 C); T2 (with no package at 15 C); T3 (with no package at 20 C); T4 (PET at room temperature, 22 C); T5 (PET at 15 C); T6 (PET at 20 C); T7 (PVC at room temperature, 22 C); T8 (PVC at 15 C); and T9 (PVC at 20 C). The designs utilized were completely randomized in factorial arrangement. The fruit were analyzed daily as to: the loss of fresh mass, pH, contents of soluble solids (SS), titrable acidity (TA), ascorbic acid (AA), total vitamin C, carotenoids, anthocyanins, chlorophylls A e B, flavonoids and total phenolic compounds as well as the antioxidant activity (FRAP and DPPH) and the maturation index (SS/TA). At the semiripe stage, there was a greater conservation of the quality attributes (SS, TA and less mass loss) as well as of the ascorbic acid content and of the antioxidant activity (FRAP). The pigments carotenoides, flavonoids and anthocyanins as well as the content of vitamin C presented higher amounts in the fruit collected matures; that stage being regarded as the appropriate for the extraction of those functional biocompounds. That harvest date also corresponded to the highest average content of total phenolics and of the antioxidant activity (DPPH). So, the best harvest date for the extraction of both pigments and antioxidant biocompounds of camu-camu is the ripe stage. When the intention is obtaining longest shelf-life, the best harvest date is the semi-ripe, for conserving the qualitative attributes for longer. In the post-harvest storage of the camu-camu, it follows that the best conservation of the qualitative attributes and the best conservation of the pigments and antioxidant biocompounds occurred when the fruit were stored at 15 C jointly with the expanded polystyrene tray covered with PVC film.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O camu-camu (Myrciaria dubia (Kunth). Mc. Vaugh), fruteira nativa da bacia Amazônica, chama a atenção pelo seu alto teor de vitamina C em seus frutos que pode superar 4000 mg em 100 g de polpa integral. Seu potencial econômico está nos mercados de fármacos, cosmético e nutricional, principalmente no Peru e Brasil. Como a maioria dos programas de melhoramento de espécies nativas, apresenta grande limitação pela pouca atenção que recebem e escassas experiências de pesquisas, a prospecção, coleção e conservação da espécie através dos Bancos de Germoplasma são uma garantia para realizar trabalhos de seleção entre e dentro das progênies, baseado nas características de ideótipos para a utilização comercial dessa fruteira. Neste sentido, objetivou-se com o presente trabalho a caracterização intraespecífica da variabilidade agronômica de populações nativas de camu-camu, prospectados no estado de Roraima. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, onde foram avaliados 247 acessos provenientes de 16 populações com três repetições e 10 frutos por repetição em cada acesso. Os frutos foram avaliados individualmente, quanto a altura de fruto, diâmetro de fruto, massa média do fruto, rendimento de polpa, rendimento de casca, rendimento de semente, teor de sólidos solúveis (expressos em Brix), número médio sementes por fruto e o teor de ácido ascórbico. As análises estatísticas foram auxiliadas mediante a técnica multivariada de componentes principais e análise de agrupamento. As análises multivariadas, de componentes principais e de agrupamento, permitiram determinar quais as variáveis de maior importância e as que aportaram à maior variabilidade intraespecífica nas características avaliadas. As análises sugerem que a massa total de frutos, rendimento de polpa, teor de sólidos solúveis e ácido ascórbico apresentam os caracteres com maior capacidade discriminatória para a seleção intraespecífica de camu-camu. As populações oriundas da região do baixo rio Branco apresentaram os maiores teores de ácido ascórbico, representando uma grande potencialidade na obtenção de acessos promissores para este caráter. / The camu-camu (Myrciaria dubia (Kunth). Mc. Vaugh), fruit native to the Amazon basin, draws attention for its high content of vitamin C that can exceed 4000 mg in 100 g of pulp. Its economic potential is in the markets of pharmaceuticals, cosmetics and nutrition, primarily in Peru and Brazil. The case of camu-camu, as in most breeding programs for native species, presents the major limitation that receive little attention and scant research experiences. The exploration, collection and conservation of the species through the Gene bank are a guarantee for performing selection among and within progenies, based on the characteristics of ideotypes for the commercial use of this fruit. In this sense, the aim of the present work the characterization of intraspecific variability of agronomic native populations of camu-camu prospected in the state of Roraima. The experimental design was randomized, were evaluated in 247 accessions from 16 populations with three replications of 10 fruits per replicate at each access. Fruits were evaluated individually height fruit, fruit diameter, average fruit weight, pulp yiel, Yield bark, seed yield, content solid solubility (expressing am Brix) Average number seeds per fruit and the content of ascorbic acid. Statistical analyzes were aided by multivariate technique of principal components and cluster analysis. Multivariate analyzes of components and major grouping, which allowed them to determine the most important variables and that landed the largest intraspecific variability in the characteristics evaluated. The analyzes suggest that the variable total fruit mass, pulp yield, content solid solubility , and ascorbic acid have the greatest discriminating characters for selection of intraspecific camu-camu. The populations from the region of the lower Rio Branco showed the highest levels of ascorbic acid, representing a large potential in obtaining access to this promising character.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Uma das tendências do mundo moderno é a orientação ao consumo de produtos naturais com alto valor nutritivo e vitamínico. O camu-camu é uma fruteira nativa da Amazônia, que chama a atenção pelo alto conteúdo de vitamina C (até 6.116 mg/100 g de polpa). Esta espécie está em processo de domesticação, pelo qual ainda, não se dispõe de informações técnicas sobre o manejo agronômico em terra firme, nos primeiros anos de cultivo. Assim, objetivou-se determinar o efeito do nitrogênio e potássio aplicados por nove meses via fertirrigação no crescimento inicial de plantas de camu-camu irrigadas em condições de terra firme durante (janeiro-setembro, 2013). Para tal, foram realizados dois experimentos: o primeiro consistiu na aplicação de cinco doses de nitrogênio: 0; 40; 80; 120; 160 kg ha-1; e no segundo, foram testadas cinco doses de potássio: 0; 40; 80; 120; 160 kg ha-1. Os delineamentos utilizados foram em blocos casualizados em esquema de parcelas subdivididas no tempo para as variáveis: altura (cm), diâmetro do coleto (mm) avaliados a cada 30 dias; número e comprimento total de ramos avaliados a cada 90 dias (cm) e blocos casualizados simples para o teor de clorofila a, massa seca (g) das folhas, dos ramos, das raízes, massa seca total (g), índice de qualidade de Dickson (IQD), teor e acúmulo de macro e micronutrientes avaliados ao final dos experimentos. Diante dos resultados, verificou-se que a fertilização nitrogenada e potássica aplicada via fertirrigação ocasionaram maior qualidade das plantas de camu-camu na dose aproximada de 128 kg ha-1 de N e 160 kg ha-1 de K. A fertilização nitrogenada aumentou os teores de N, K e Ca e reduziu os teores de B e Mn e a fertilização potássica elevou os teores de N, K e S e reduziu os teores de Ca, Mg, B e Mn nas folhas de camu-camu. Considerando as partes da planta, o maior acúmulo de nutrientes foi verificado na parte aérea (ramos e folhas) para N, P, K, Ca, Mg, S, B e Mn, e para as raízes foi Fe, Cu e Zn em função das doses crescentes de N e K. / One of the trends of the present world is the orientation to the consumption of natural products with a high nutritive and vitamin value. The camu-camu is a fruit-bearing tree native to the Amazon rainforest, which calls the attention for its high vitamin C content (up to 6,116 mg/100 g of pulp). This species is in domestication process; for this reason, technical information about the agronomical management on firm earth in the early years of cultivation is not available. So, it was aimed to determine the effect of both nitrogen and potassium applied for nine months via fertigation on the early growth of camu-camu plants irrigated under firm earth conditions (January-September, 2013). For such a purpose, two experiments were carried out: the former consisted in the application of five doses of nitrogen: 0; 40; 80; 120 and 160 kg ha-1; and in the latter, five doses of potassium: 0, 40, 80, 120 and 160 kg ha-1 were tested. The designs utilized were in randomized blocks in split plot scheme in time for the variables: height (cm), stem diameter (mm) evaluated every 30 days; number and total length of twigs evaluated every 90 days (cm) and simple randomized blocks for the a chlorophyll content, dry mass (g) of leaves, of the twigs, of the roots, total dry mass (g), Dickson quality index (IQD), content and accumulation of macro and micronutrients evaluated at the end of the experiments. Based upon the results, it was found that nitrogen and potassium fertilization applied via fertigation brought about improved quality of the camu-camu plants at the approximate dose of 128 kg ha-1 of N and 160 kg ha-1 of K. Nitrogen fertilization increased the contents of N, K and Ca and reduced the contents of B and Mn, the potassium fertilization raised the contents of N, K and S and reduced the contents of Ca, Mg, B and Mn in the camu-camu leaves. Considering the parts of the plant, the greatest accumulation of nutrients was found in the shoot (twigs and leaves) for N, P, K, Ca, Mg, S, B and Mn and for the roots was Fe, Cu and Zn as a result of the growing doses of N e K.

Os corantes são amplamente utilizados nas indústrias têxteis, farmacêuticas, alimentícias, cosméticas, fotográficas, entre outras. Contudo, essas substâncias podem ser tóxicas, mutagênicas e resistentes a muitos processos de degradação utilizados em estações de tratamento. Estima-se que cerca de 15% dos corantes utilizados no mundo sejam perdidos durante o processo de tingimento e lançados no ambiente, atingindo principalmente os corpos d\'água. No entanto, apesar da grande quantidade de corantes comerciais disponíveis e da alta quantidade lançada no ecossistema aquático, os estudos sobre a toxicidade dessas substâncias são escassos e pouco se conhece sobre seus efeitos mutagênicos e principalmente ecotoxicológicos. Dentro deste contexto, o objetivo do trabalho foi avaliar a ecotoxicidade, bem como a capacidade dos corantes têxteis Reactive Blue 4 (RB 4) e Reactive Blue 15 (RB 15) de lesar o material genético, empregando ensaios de toxicidade aguda com Daphnia similis e Vibrio fischeri, toxicidade crônica com Ceriodaphnia dubia, genotoxicidade (Teste do Cometa) com fibroblastos de derme humana e mutagenicidade com Salmonella typhimurium. Adicionalmente, avaliou-se a concentração de cobre em Ceriodaphnia dubia expostas ao corante Reactive Blue 15, que possui esse metal na sua estrutura química. O corante RB 4 foi moderadamente tóxico e o corante RB 15 foi relativamente não tóxico para Daphnia similis. Ambos corantes reduziram a luminescência de Vibrio fischeri em elevadas concentrações, sendo o corante RB 4 mais tóxico para a bactéria quando comparado ao corante RB 15. O corante RB 4 induziu efeito hormesis nos ensaios com C. dubia, ou seja, houve um estímulo na reprodução nas menores concentrações, seguido por um decréscimo em concentrações mais elevadas, ao passo que, o corante RB 15 reduziu a fecundidade de C. dubia. Não houve acúmulo de cobre nos organismos expostos ao corante RB 15. Nenhum dos corantes foram genotóxicos para fibroblastos de derme humana e apenas o corante RB 4 induziu mutagenicidade, por substituição de pares de base. Os resultados obtidos mostram que os corantes podem causar efeitos adversos nos organismos mesmo em baixas concentrações e que o lançamento contínuo dessas substâncias nos corpos d\'água é preocupante. / Dyes are widely used in different types of industries, such as textile, pharmaceutical, food, cosmetics, photographic, among others. However, these substances can be toxic, mutagenic and resistant to many degradation processes used in wastewater treatment. It is estimated that about 15% of the dyes used in the world is lost during the dyeing process and released into the environment, affecting mainly water bodies. However, despite the large amount of commercial dyes available and high quantity released in the aquatic ecosystem, studies on the toxicity of these substances are scarce and little is known about their mutagenic and ecotoxicological effects. Considering that, the aim of this study was to evaluate the ecotoxicity, and the ability of the Reactive Blue 4 (RB 4) and Reactive Blue 15 (RB 15) textile dyes to damage the genetic material, using acute toxicity tests with Daphnia similis and Vibrio fischeri, Ceriodaphnia dubia chronic toxicity, genotoxicity (Comet assay) in human dermal fibroblasts and mutagenicity with Salmonella typhimurium. Additionally, we assessed the concentration of copper in Ceriodaphnia dubia exposed to the Reactive Blue 15 dye, which has this metal in its chemical structure. The RB 4 dye was moderately toxic and RB 15 dye was relatively non-toxic to Daphnia similis. Both dyes reduced the Vibrio fischeri luminescence in high concentrations, and the RB 4 was more toxic to bacteria when compared to dye RB 15. The RB 4 dye induced hormesis effect in the C. dubia tests. We observed that the reproduction was stimulated at lower concentrations followed by a decrease at higher concentrations. While the RB 15 dye reduced fecundity of Ceriodaphnia dubia. There was no accumulation of copper in organisms exposed to the RB 15 dye. None of the dyes were genotoxic to human dermal fibroblasts, and only the RB 4 dye induced mutagenicity, by base-pair substitution. The results show that the dyes can cause adverse effects on organisms even at low concentrations and that the continuous release of these substances in water bodies is worrying.

A água é um importante recurso natural que contribui para melhorias no bem-estar social e desenvolvimento inclusivo. A presença de produtos químicos, rejeitos radioativos e agentes infecciosos pode comprometer a qualidade desse recurso, afetando a biodiversidade e a subsistência de milhões de pessoas. A Ecotoxicologia Aquática é uma ciência que surgiu para dar suporte no enfrentamento dos problemas de contaminação dos corpos d\'água por compostos tóxicos. Seus instrumentos de análise são capazes de avaliar a toxicidade de compostos químicos, sinalizando os potenciais efeitos ecotoxicológicos e seus mecanismos de ação em organismos vivos em ambientes impactados. A Bacia Hidrográfica do Rio Pardo (UGRHI 04) abrange 27 municípios com um importante contingente populacional (1.092.477 habitantes), inserido em uma região cuja prática agrícola baseia-se na cultura de cana-de-açúcar para a produção de etanol e açúcar. Dentro desse contexto, o objetivo do estudo foi avaliar a toxicidade para organismos bioindicadores de amostras de água superficial do Rio Pardo, principal afluente da Bacia Hidrográfica do Rio Pardo. Foram realizados ensaios de toxicidade aguda com Daphnia similis e Vibrio fischeri, e toxicidade crônica com Ceriodaphnia dubia. Adicionalmente, analisaram-se Oxigênio Dissolvido (OD), pH e Temperatura da água. Os resultados obtidos mostraram que, os parâmetros físico-químicos analisados estão de acordo com os limites estabelecidos pela Resolução CONAMA 357/2005 [OD (>= 5 mgO2/L); pH (6 a 9)]. Nos ensaios de toxicidade aguda realizados com Daphnia similis, tanto na estação chuvosa quanto na estação seca, não observou-se toxicidade sobre os organismos testados. Todas as amostras foram classificadas como Não Tóxicas (NT). Nos ensaios de toxicidade crônica com Ceriodaphnia dubia, na estação chuvosa, nenhuma das amostras analisadas apresentou toxicidade. Das amostras analisadas na estação seca, 50% apresentaram Efeito Crônico (EC); os resultados mostraram diferença estatisticamente significante entre o número médio de neonatos produzidos por adulta no grupo controle (19,2) e nas amostras dos pontos de coleta 2 (10,7), 3 (10,5) e 5 (8,1). No entanto, não houve diferença estatisticamente significante nas amostras dos pontos de coleta 1 (13,7), 4 (12,3) e 6 (14,3), classificadas como NT. A comparação entre os resultados obtidos no presente estudo, nos ensaios de toxicidade crônica com Ceriodaphnia dubia, mostrou similaridade com a série histórica de dados (2010-2015) fornecida pela Agência Ambiental do Governo do Estado de São Paulo (CETESB). Nos ensaios de toxicidade aguda realizados com Vibrio fischeri, nas estações chuvosa e seca do ano de 2016, não observou-se toxicidade sobre a bactéria após os períodos de 5 e 15 minutos de exposição; todas as amostras foram classificadas como NT. Apesar do Rio Pardo estar inserido em área com reconhecido uso de produtos agrícolas e pouca proteção de Áreas de Preservação Permanente (APP), os resultados mostraram toxicidade apenas para o organismo Ceriodaphnia dubia, na estação seca do ano de 2016, possivelmente relacionada com a diminuição da vazão média e a concentração de poluentes na água. Cabe destacar a importância da manutenção do monitoramento periódico pela CETESB, considerando o Art. 14 da Resolução CONAMA 357/2005, que prevê a \"não verificação de efeito tóxico crônico a organismos\" para águas doces de Classe 1 e 2 no contexto brasileiro. / Water is an important natural resource that contributes to improvements in social well-being and inclusive development. The presence of chemicals, radioactive waste and infectious agents can compromise the quality of this resource, affecting the biodiversity and livelihoods of millions of people. Aquatic Ecotoxicology is a science that has emerged to support the problems of contamination of water bodies by toxic compounds. Its analytical instruments are able to evaluate the toxicity of chemical compounds, signaling the potential ecotoxicological effects and their mechanisms of action in living organisms in impacted environments. The Pardo River Hydrographic Basin (UGRHI 04) covers 27 municipalities with a significant population (1.092.477 inhabitants), inserted in a region whose agricultural practice is based on the cultivation of sugarcane for the production of ethanol and sugar. In this context, the objective of the study was to evaluate the toxicity to bioindicators organisms of surface water samples of the Pardo River, main tributary of the the Pardo River Hydrographic Basin. Acute toxicity tests were performed with Daphnia similis and Vibrio fischeri, and chronic toxicity with Ceriodaphnia dubia. In addition, dissolved oxygen (DO), pH and water temperature were analyzed. The obtained results showed that the physical-chemical parameters analyzed are in accordance with the limits established by CONAMA Resolution 357/2005 [DO (>= 5 mgO2 / L); pH (6 to 9)]. In the acute toxicity tests performed with Daphnia similis, both in rainy season and in dry season, no toxicity was observed on the organisms tested. All samples were classified as Non-Toxic (NT). In the chronic toxicity tests with Ceriodaphnia dubia in the rainy season none of the analyzed samples presented toxicity. Of the samples analyzed in the dry season, 50% presented Chronic Effect (CE); The results showed a statistically significant difference between the mean number of neonates produced by the adult in the control group (19,2) and the collection points 2 (10,7), 3 (10,5) and 5 (8,1). However, there was no statistically significant difference in the samples from collection points 1 (13,7), 4 (12,3) and 6 (14,3), classified as NT. The comparison between the results obtained in the present study in the chronic toxicity tests with Ceriodaphnia dubia showed similarity with the historical data series (2010-2015) provided by the Environmental Agency of the State of São Paulo (CETESB). In the acute toxicity tests performed with Vibrio fischeri in the rainy and dry seasons of 2016, no toxicity was observed on the bacteria after periods of 5 and 15 minutes of exposure; All samples were classified as NT. Although Rio Pardo is inserted in an area with recognized use of agricultural products and little protection from Permanent Preservation Areas (PPA), the results showed toxicity only for the Ceriodaphnia dubia organismo, in the dry season of 2016, possibly related to the decrease in average flow and the concentration of pollutants in the water. It is important to highlight the importance of Maintenance of periodic monitoring by CETESB, considering Art. 14 of CONAMA Resolution 357/2005, which provides for \"non-verification of chronic toxic effect to organisms\" for Class 1 and 2 fresh waters in the Brazilian context

A espécie Ceriodaphnia dubia tem sido amplamente utilizada em testes de toxicidade crônica. Como a água constitui um fator essencial à sua manutenção, procurou-se avaliar a influência de três tipos de meio no cultivo e na resposta toxicológica deste microcrustáceo a três substâncias de referência. Foram acompanhadas, durante 13 a 18 gerações, a sobrevivência e a reprodução dos organismos em água natural (Reservatório de Ribeirão do Piraí, município de Salto, São Paulo, Brasil) e em dois meios reconstituídos (um simples - água mole reconstituída acrescida de selênio - e um complexo, denominado MS), avaliando-se, a cada 4 ou 5 gerações, as condições e a sensibilidade de cada cultura em testes com cloreto de sódio, dicromato de potássio e fenol. Os resultados evidenciaram um desempenho similar nos meios reconstituídos (em que padrões mínimos para sobrevivência e fecundidade nem sempre foram atendidos) e diferenciado do obtido em água natural - a mais eficiente para manutenção das culturas, onde tais padrões foram, geralmente, superados. Constatou-se a similaridade entre organismos provenientes da água natural e do meio OMS. Observou-se, também que a variabilidade dos resultados do teste ecotoxicológico difere conforme a água de diluição e a substância química utilizada, permitindo reconhecer o NaCI como substância de referência mais apropriada à avaliação da precisão deste método de ensaio, cujo coeficiente de variação máximo aceitável poderia ser estabelecido em 35%. / The species Ceriodaphnia dubia has been widely used in chronic toxicity tests. As water represents as essential factor to its maintenance, as evaluation was made of the influence of three different media in the culture and toxicological response of this microcrustacean to three reference toxicants. Survival and reproduction of this organism, reared in natural water (from Ribeirão do Piraí Reservoir), São Paulo State, Brazil) and in two reconstituted media (a simple one - reconstituted soft water, supplemented with selenium - and a complex one, called MS), were accompanied during 13 to 18 generations; at each 4 or 5 generations such cultures were evaluated in relation to health and sensitivity in toxicity tests with sodium chloride, potassium dichromate and phenol. The results indicated a similar performance in the reconstituted media (where the minimum patterns for survival and fecundity were not always reached) and differentiated from that obtained in natural water - the most suitable culture medium, where such patterns were, usually, exceeded. It was found a comparable sensitivity between natural water and MS cultures. It was also verified that the variability of the results among ecotoxicological test differs according to dilution water and chemical substance, allowing to recognize NaCl as the most suitable reference toxicant to measure the precision of this test method, whose maximum coefficient of variation could be established in 35%.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:42:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SamantaCC_TESE.pdf: 1799576 bytes, checksum: cb7da23d45f604db518addfb2da4a069 (MD5) Previous issue date: 2013-06-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Soil contamination by pesticides is an environmental problem that needs to be monitored and avoided. However, the lack of fast, accurate and low cost analytical methods for discovering residual pesticide in complex matrices, such as soil, is a problem still unresolved. This problem needs to be solved before we are able to assess the quality of environmental samples. The intensive use of pesticides has increased since the 60s, because the dependence of their use, causing biological imbalances and promoting resistance and recurrence of high populations of pests and pathogens (upwelling). This has contributed to the appearance of new pests that were previously under natural control. To develop analytical methods that are able to quantify residues pesticide in complex environment. It is still a challenge for many laboratories. The integration of two analytical methods one ecotoxicological and another chemical demonstrates the potential for environmental analysis of methamidophos. The aim of this study was to evaluate an ecotoxicological method as "screening" analytical methamidophos in the soil and perform analytical confirmation in the samples of the concentration of the analyte by chemical method LC-MS/MS In this work we tested two soils: a clayey and sandy, both in contact with the kinetic methamidophos model followed pseudo-second order. The clay soil showed higher absorption of methamidophos and followed the Freundlich model, while the sandy, the Langmuir model. The chemical method was validated LC-MS/MS satisfactory, showing all parameters of linearity, range, precision, accuracy, and sensitivity adequate. In chronic ecotoxicological tests with C. dubia, the NOEC was 4.93 and 3.24 for ng L-1 of methamidophos to elutriate assays of sandy and clay soils, respectively. The method for ecotoxicological levels was more sensitive than LC-MS/MS detection of methamidophos, loamy and sandy soils. However, decreasing the concentration of the standard for analytical methamidophos and adjusting for the validation conditions chemical acquires a limit of quantification (LOQ) in ng L-1, consistent with the provisions of ecotoxicological test. The methods described should be used as an analytical tool for methamidophos in soil, and the ecotoxicological analysis can be used as a "screening" and LC-MS/MS as confirmatory analysis of the analyte molecule, confirming the objectives of this work / A contamina??o de solos por agrot?xicos ? um problema ambiental que precisa ser monitorado e evitado. Por?m, a falta de m?todos de an?lise r?pidos, precisos e de baixo custo, para res?duos de agrot?xicos em matrizes complexas, como o solo, ? um problema ainda sem solu??o e precisa ser resolvido para que se possa avaliar a qualidade de amostras ambientais. O uso intensivo de agrot?xicos tem aumentado desde a d?cada de 60, causando a depend?ncia do seu uso, provocando desequil?brios biol?gicos e favorecendo a resist?ncia e a reincid?ncia de altas popula??es das pragas e pat?genos (ressurg?ncia), o que contribui com o aparecimento de novas pragas que anteriormente estavam sob o controle natural. O desenvolvimento de m?todos anal?ticos que atendam as legisla??es ambientais de quantificar res?duos de pesticidas em matrizes complexas ambientais continua sendo um desafio para v?rios laborat?rios. O objetivo deste trabalho foi avaliar um m?todo ecotoxicol?gico como screening anal?tico do metamidof?s em solos e realizar a confirma??o anal?tica das concentra??es do analito nas amostras pelo m?todo qu?mico LC-MS/MS.A integra??o de dois m?todos anal?ticos, um ecotoxicol?gico e outro qu?mico, demonstra potencial para a an?lise ambiental do metamidof?s. Neste trabalho foram testados dois solos: um argiloso e outro arenoso, ambos seguiram o modelo cin?tico de pseudo-segunda ordem para a adsor??o do metamidof?s. O solo argiloso apresentou maior adsor??o de metamidof?s e seguiu o modelo de Freundlich, enquanto o arenoso, o modelo de Langmuir. O m?todo qu?mico LC-MS/MS validado foi satisfat?rio, apresentando todos os par?metros de linearidade, intervalo, precis?o, exatid?o e sensibilidade adequados. Nos ensaios ecotoxicol?gicos cr?nicos com Ceriodapnhia dubia, as CENO foram 4,93 e 3,24 ng L-1 de metamidof?s para os elutriatos dos solos arenoso e argiloso, respectivamente. O m?todo ecotoxicol?gico apresentou-se mais sens?vel que o LC-MS/MS na detec??o do metamidof?s, nos solos argiloso e arenoso. No entanto, diminuindo-se a concentra??o do padr?o anal?tico do metamidof?s e ajustando-se as condi??es de valida??o qu?mica, adquire-se um limite de quantifica??o (LOQ) em ng L-1, compat?vel com o estabelecido no ensaio ecotoxicol?gico. Os m?todos utilizados apresentam-se como uma boa ferramenta anal?tica para o metamidof?s em solos, sendo que a an?lise ecotoxicol?gica poder? ser utilizada como um screening e o LC-MS/MS como an?lise confirmat?ria da mol?cula do analito, confirmando os objetivos desse trabalho