Made available in DSpace on 2014-06-12T15:54:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo66_1.pdf: 3939030 bytes, checksum: d6bb63543008e02891aa193513c2045e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / A Dietilcarbamazina (DEC) tem sido utilizada como o principal fármaco filaricida, mas seu mecanismo de ação permanece controverso. Alguns autores têm demonstrado suas propriedades anti-inflamatórias, como um resultado de sua interferência no metabolismo do ácido araquidônico, que inclui as enzimas lipooxigenase e ciclooxigenase. Outros trabalhos demonstram a alta incidência de alcoolismo e da desnutrição na população de baixa renda do nordeste brasileiro, população esta também afetada pela filariose linfática. O presente estudo verificou a ação da DEC sobre hepatócitos de camundongos desnutridos e alcoolizados para possíveis analogias com casos humanos. Os camundongos foram divididos em nove grupos experimentais (n=8): grupo controle (C, DEC25 e DEC50), grupos desnutridos (CD, DD25 e DD50) e grupos alcoolizados (CEtOH, EtOH25 e EtOH50). Após a indução dos modelos de desnutrição e alcoolismo, os animais dos respectivos grupos foram submetidos ao tratamento com DEC nas concentrações de 25 e 50mg/kg por 12 dias. Foram realizadas análises bioquímicas e fragmentos hepáticos foram processados para microscopia óptica e microscopia eletrônica de transmissão. A dosagem enzimática de AST apresentou diferenças significativas entre os grupos etílicos, e os níveis de fosfatase alcalina e albumina sérica apresentaram valores significativos apenas entre os grupos desnutridos. Nas análises histológicas do grupo controle desnutrido (CD), observou-se a presença marcante de esteatose hepática. Após o tratamento com a DEC, os grupos DD25 e DD50 apresentaram redução da esteatose. Os grupos alcoólicos e tratados com DEC também houve uma redução bastante evidente dos danos causados pela ingestão crônica de etanol. A análise ultratestrutural confirmou a redução de gotículas lipídicas nos animais desnutridos e tratados com DEC, da mesma forma, os grupos etílicos apresentaram diminuição dos danos e suas organelas se encontraram bem preservadas. A imunohistoquímica revelou expressão bastante evidente dos marcadores inflamatórios IL-6, eNOS, CCR2, VCAM e ICAM no grupo alcoolizado, no entanto o grupo que recebeu DEC não apresentaram imunoexpressão evidente desses marcadores. Dessa forma, a DEC torna-se um fármaco de potencial hepatoprotetor para o tratamento da inflamação crônica induzida pelo alcoolismo, bem como da desnutrição

Submitted by Haroudo Xavier Filho (haroudo.xavierfo@ufpe.br) on 2016-04-05T15:42:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Luís final (2).pdf: 2354969 bytes, checksum: 99edddc3a89f16f62d7e6fc6517c4a93 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-05T15:42:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Luís final (2).pdf: 2354969 bytes, checksum: 99edddc3a89f16f62d7e6fc6517c4a93 (MD5) Previous issue date: 2013-09-09 / FACEPE / As lectinas são proteínas conhecidas por sua capacidade de ligar específica e reversivelmente a carboidratos resultando em uma variedade de propriedades biológicas. Este trabalho tem por objetivo avaliar os efeitos imunomodulador e citoprotetor das lectinas Cramoll 1,4 (pCramoll) e rCramoll 1 (rCramoll). Na determinação da ação imunomoduladora macrófagos peritoneais de camundongos Balb/c foram tratados com diferentes concentrações das lectinas (0,625-10 μM) e foram analisados os efeitos na produção óxido nítrico (NO), viabilidade celular, produção de ânion superóxido, alterações no potencial de membrana mitocondrial (ΔΨm) e na fagocitose de Staphylococcus aureus. A produção de citocinas pró-inflamatorias (IL-1β, IL-6, INF-γ e TNF-α) foi avaliada em macrófagos infectados e não infectados com S. aureus. Ambas lectinas induziram significantemente a produção de NO e de citocinas. As proteínas foram consideradas não-citotóxicas pelo ensaio com MTT, entretanto a análise por Citometria de Fluxo revelaram um aumento de células mortas. A produção de superóxido foi estimulada pelas lectinas o que foi confirmado pelas mudanças induzidas no ΔΨm. A ação fagocítica dos macrófagos foi aumentada em 27,1% e 22,47% após o tratamento destes com pCramoll e rCramoll . Por fim, as lectinas inibiram a expressão de TNF-α e IL-6 e estimularam a produção de IL-1β e INF-γ por macrófagos infectados por S. aureus. Paralelamente, o potencial protetor das lectinas contra a morte celular induzida pelo estresse oxidativo foi avaliada. Para tanto, células Vero (fibroblastos renais de macaco) foram pré-tratadas com crescentes concentrações das lectinas (0,625-10 μM) por 30 minutos e em seguida foram expostas ao H2O2 (1 mM). Após 24 horas, o efeito citoprotetor foi avaliado. Os mecanismos celulares envolvidos foram determinados por citometria de fluxo envolvendo: proteção contra morte celular, danos nos lisossomos e DNA, produção de ânion superóxido (MitoSOX), alterações no potencial de membrana mitocondrial (ΔΨm) e proliferação celular. pCramoll e rCramoll atenuaram a citotoxicidade induzida por H2O2 de forma dose-dependente, os efeitos máximos foram 96.85 ± 15.59% (rCramoll) e 59.48 ± 23.44% (pCramoll). A análise com Live/Dead mostrou redução da morte celular de 65.04 ± 3.29% (H2O2) para 39.77 ± 2.93% (pCramoll) e 13.90 ± 9.01% (rCramoll). Os efeitos deletérios de H2O2 na proliferação celular foram reduzidos em 10.83% (pCramoll) e 24.17% (rCramoll). As lectinas atenuaram a produção excessiva de superóxido, o collapso do ΔΨm e os danos lisossomais e ao DNA das células Vero expostas à H2O2. Em conclusão nossos estudos demonstram que pCramoll e rCramoll possuem elevado potencial imunomodulador e citoprotetor. / This study aims to evaluate the immunomodulatory effects on macrophages and cytoprotector action against oxidative stress of Cramoll 1.4 (pCramoll) and rCramoll 1 (rCramoll). In the determination of the immunomodulory action, peritoneal macrophages from Balb/c mice were treated with different concentrations of lectins (0.625 to 10 mM) and we analyzed the effect on NO production (Griess Reagent), cell viability (MTT Reagent), induction of apoptosis (Kit Live/Dead and Acridine orange), superoxide anion production (MitoSOX), changes in mitochondrial membrane potential (ΔΨm) and phagocytosis of Staphylococcus aureus. The production of proinflammatory cytokines (IL-1β, IL-6, INF-γ e TNF-α) was analyzed in S. aureus infected and non-infected macrophages. Both lectins significantly enhanced Macrophages NO production and cytokines. The lectins were not cytotoxic as observed by MTT assay. However Live/Dead analysis revealed an increase of apoptosis in treated cells, the reduction of lysosomal activity was also reduced. The superoxide production was stimulated by both lectins, which was confirmed with the reduction on ΔΨm. S. aureus phagocytic activity of macrophages were enhanced in 27.1% and 22.47% by pCramoll and rCramoll, respectively. Finally, pCramoll and rCramoll downregulated the production of IL-6 and TNF-α and upregulated the expression of IL-1β, INF-γ during S. aureus infection of macrophages. In addtion, the protective effects of lectins against cell death induced by oxidative stress were evaluated. For this purpose, Vero cells (monkey kidney fibroblasts) were pretreated with increasing concentrations of lectins (0.625 to 10 μM) for 30 minutes and then were exposed to H2O2 (1mM). After 24 hours, the cytoprotective effect was evaluated and the cellular mechanisms involved were determined by flow cytometry involving: protection against cell death (Live/Dead kit), damage to lysosomes (Acridine Orange) and DNA (TUNEL), superoxide anion production (MitoSOX), changes in mitochondrial membrane potential (ΔΨm) (Rhodamine 123) and cell proliferation. pCramoll and rCramoll significantly attenuated the H2O2-induced cytotoxicity in a dose-dependent way, the maximum protective effects were 96.85 ± 15.59% (rCramoll) and 59.48 ± 23.44% (pCramoll). The Live/Dead analysis showed a reduction in apoptotic cells from 65.04 ± 3.29% to 39.77 ± 2.93% (pCramoll) and 13.90 ± 9.01% (rCramoll). The deleterious effects of H2O2 on cell proliferation were reduced 10.83% (pCramoll) and 24.17% (rCramoll). The lectins attenuated the excessive superoxide production, the collapse of ΔΨm, lysosomal and DNA damage that occurred in Vero cells exposed to H2O2. In conclusion, our results show that pCramoll and rCramoll have high immunomodulatory potential on macrophages and cytoprotective effects against H2O2.

Submitted by Claudia Rocha (claudia.rocha@udesc.br) on 2018-02-26T14:34:34Z No. of bitstreams: 1 PGPV14MA199.pdf: 646661 bytes, checksum: d059bad8109ad64370d1387bc525b456 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-26T14:34:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV14MA199.pdf: 646661 bytes, checksum: d059bad8109ad64370d1387bc525b456 (MD5) Previous issue date: 2014-08-11 / Tomato (Solanum lycopersicum L.) is the second major horticultural crop in the world and it is necessary a high technological level and intensive labor for develop it, which increase its economic and social values. Several plant pathogenic fungi affect this crop, which causes an excessive use of chemicals, thereby increasing the cost of production. Septoria lycopersici, causal agent of Septoria leaf spot, occur in all tomato-producing areas around the world and causes severe losses on high humidity conditions. Management techniques as crop rotation, chemical seed treatment, systemic and contact fungicides has been used to control the disease. The aims of this work were: a) to evaluate the protective and curative activity of the fungicides b) to determinate the effective dose (ED50);. Septoria strains were obtained from symptomatic tomato leaves of tomato cultivars located at several production areas. Active ingredients used in the assay of the curative effect were thiophanate-methyl, mancozebe, difenoconazol and metconazol, in commercial rates. The fungicides were applied to plant at 12; 24; 36; 48; 72 and 96 hours after inoculation. To evaluate the protective activity were used the fungicides azoxystrobin, chlorothalonil, mancozebe and captan, in commercial rates. Plants were sprayed with spore suspension at 12; 24; 36; 48; 72 and 96 hours after the application of fungicides. Germination index was evaluated in the in vitro assays, using different concentrations of thiophanate-methyl and mancozebe (0,1;1;10;100 e 1000 mg.L-1 active ingredient). Data were subjected to analysis of variance and differences assessed using the method of Tukey (p < 0,05). All analysis were performed using the software R. Difenoconazol and metconazol were the more effective curative treatments, while azoxystrobin and chlorothalonil showed the best protective activity / O tomate (Solanum lycopersicum L.) é a segunda hortaliça mais produzida no mundo e o seu cultivo exige alto nível tecnológico e intensa mão de obra, o que eleva a importância econômica e social da cultura. Essa hortaliça é afetada por doenças fúngicas, exigindo gastos adicionais com agrotóxico, elevando os custos de produção. A septoriose ou mancha-de-septoria causada pelo fungo Septoria lycopersici possui importância no tomateiro em locais de alta pluviosidade ocorrendo em quase todas as regiões produtoras do Brasil e do mundo. O presente trabalho teve como objetivos: a) avaliar a ação curativa preventiva e dos fungicidas testados a) avaliar a eficiência in vitro de fungicidas sobre a germinação de conídios de S. lycopersici, c) indicar a dose efetiva - ED50; para cada isolado;. Foram obtidos isolados de S. lycopersici a partir de folhas de tomate com sintomas de septoriose de diferentes cultivares na Região do Alto Vale do Rio do Peixe. Os princípios ativos utilizados para o ação curativa foram tiofanato metílico, mancozebe, difenoconazol e metconazol nas doses comerciais. As plantas foram tratadas com os fungicidas 12; 24; 36; 48; 72 e 96 horas após a inoculação. Para avaliar ao ação preventiva os tratamentos utilizados foram azoxistrobina, clorotalonil, captana e mancozebe nas doses comerciais. Pulverizou-se a suspensão de conídios sobre todas as folhas com 12; 24; 36; 48; 72 e 96 horas após o tratamento com os fungicidas. Para o experimento in vitro avaliou-se a germinação de conídios em relação aos princípios ativos tiofanato metílico e mancozebe nas concentrações de ingrediente ativo de 0,1;1;10;100 e 1000mg.L-1. Avaliou-se a germinação de conídios. Os dados foram submetidos à análise de variância (p <0,05), e quando significativos, á análise de regressão. Foram realizadas contrastes de médias por meio de teste de Tukey a 5% de significância para comparação das médias, utilizando o programa R. Os tratamentos curativos com eficiência foram difenoconazol e metconazol. Clorotalonil e azoxistrobina apresentaram controle como preventivo. Nos testes in vitro verifica-se que os isolados coletados na Região do Alto vale do Rio do Peixe são insensíveis ao princípio ativo mancozebe e tiofanato metílico, indicando uma possível resistência a esses fungicidas

Made available in DSpace on 2014-07-29T14:42:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao de Francys.pdf: 490777 bytes, checksum: 1a41f3eab607d1bd2cf202a07554883f (MD5) Previous issue date: 2010-06-28 / The current work aimed to study the deleterious effects of different aluminum concentrations in the production rate of CO2, growing of biomass, viability and germination of Saccharomyces cerevisiae PE-2 yeast and the protector effect of citric acid and magnesium. Six different experiments were conducted, using a synthetic YED medium (1.0% of extract of yeast strains and 2.0% of sucrose). Each experiment consisted of four treatments of aluminum in the form of AlCl3.6H2O, in the following proportion: 0, 50, 100, 150 mg/L. The first experiment meant to consider the control, pointing out only doses of aluminum. The 2nd, 3rd and 4th experiments pointed out different doses of aluminum in function of different doses of citric acid (100, 200 e 400 mg/L respectively). The 5th and 6th ones were enriched with magnesium (50 and 100 mg/L, respectively) with different doses of aluminum. Three repetitions were used for each treatment, the medium pH was standardized to 4.0. Whereas the established standards were tested every 2 hours, in the following breaks: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 and 16 hours after the inoculation of the yeast in the synthetic medium. The obtained results were taken to the analyses of variance, when meaningful to the point of 5% to regression. It is concluded that the aluminum showed cytotoxicity in the development of yeast in equal or superior doses of 50 mg/L. The citric acid and the magnesium promoted protector effect of S. cerevisiae PE-2 in relation to the deleterious effect of aluminum. The use of citric acid and magnesium, even promoting a little drop of viability of the yeast, they clearly demonstrated their efficiency and use as a protection mechanism, minimizing the deleterious effect of aluminum. / O presente trabalho teve por objetivo estudar os efeitos deletérios de diferentes concentrações de alumínio na taxa de produção de CO2, crescimento de biomassa, viabilidade e brotamento da levedura Saccharomyces cerevisiae PE-2 e o efeito protetor de diferentes concentrações de ácido cítrico e magnésio. Foram realizados seis diferentes ensaios, utilizando-se meio sintético YED (1,0% de extrato de levedura e 2,0% de sacarose). Cada ensaio foi constituído de quatro tratamento de alumínio na forma de AlCl3.6H2O, nas seguintes proporções: 0, 50, 100 e 150 mg/L. O 1° ensaio foi considerando o controle, apresentando apenas doses de alumínio. O 2°, 3° e 4° apresentaram meios com diferentes doses de alumínio em função de diferentes doses de ácido cítrico (100, 200 e 400 mg/L respectivamente). O 5° e 6° ensaio foram enriquecidos com magnésio (50 e 100 mg/L respectivamente), frente a diferentes doses de alumínio. Foram utilizadas 3 repetições para cada tratamento. O pH do meio foi padronizado a 4,0, sendo que osparâmetros estabelecidos foram avaliados a cada 2 horas, nos seguintes intervalos: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 e 16 horas após a inoculação da levedura em meio sintético. Os resultados obtidos foram submetidos à análise de variância, quando significativo ao nível de 5% à regressão. Concluiu-se que o alumínio apresentou citotoxicidade no desenvolvimento da levedura em dose igual ou superior a 50 mg/L. O ácido cítrico e magnésio promoveram efeito protetor da S. cerevisiae PE-2 em relação ao efeito deletério do alumínio. A utilização de ácido cítrico e magnésio, mesmo promovendo uma pequena queda da viabilidade das leveduras, demonstraram claramente sua eficácia e utilização como mecanismos de proteção, minimizando os efeitos deletérios do alumínio.