Orientador: Daniel Mario Ugarte / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Fisica Gleb Wataghin / Made available in DSpace on 2018-08-08T03:21:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nakabayashi_DeniseBasso_D.pdf: 11254474 bytes, checksum: 322d16fa27f12c3eba14b8083c744b09 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Há grandes expectativas de que, no futuro, componentes de alta tecnologia sejam baseados em novas e inesperadas propriedades físicas e químicas de objetos nanométricos. Muitas aplicações exigem que nano-objetos sejam posicionados precisamente em áreas bem definidas de um componente. Entretanto, os métodos estabelecidos de manipulação física usados na escala macroscópica não são aplicáveis na escala nanométrica. Muitas questões continuam em aberto e os avan»cos no estudo de nanossistemas são lentos. Muitos experimentos tem explorado a manipulação física usando microscopias de força atômica (AFM) e de tunelamento (STM), mas, nestes métodos, manipulação e observação não podem ser realizadas simultaneamente. Os microscópios eletrônicos de varredura (SEM) e de transmissão (TEM) são equipamentos essenciais no estudo de nano-objetos devido µa sua alta resolução e µa possibilidade de observar os movimentos realizados in situ em tempo real. Unindo esta técnica ao uso de nanomanipuladores, obtemos uma ferramenta poderosa para manipular e caracterizar nano-objetos. Existem diversos nanomanipuladores comerciais que operam em SEMs. Entretanto, o custo destes instrumentos é elevado, e os mesmos ficam restritos a grandes centros de pesquisa. Nesta tese, descrevemos o desenho, construção e aplicação de nanomanipuladores com uma ou duas pontas de prova, cujos sistemas são baseados em mecânica simples e materiais de baixo custo. Estes sistemas operam dentro de um SEM equipado com um canhão por emissão de campo (FEG-SEM, JSM-6330F, resolução nominal 1.5 nm a 25 kV). Os movimentos grosseiros são baseados em um sistema elásticos (um eixo de movimento) e em uma modificação inovadora deste sistema. Em tal modificação, dois sistemas elásticos são acoplados, o que gera movimentos em dois eixos. Quanto aos movimentos finos, um conjunto de elementos piezoelétricos é responsável pelo deslocamento preciso em três eixos independentes de cada ponta de prova. O porta-amostra possui um grande deslocamento (15 mm), o que nos permite trabalhar com várias amostras em um mesmo experimento. Os instrumentos desenvolvidos permitem uma grande variedade de experimentos de nanomanipulação e nanocaracterização, incluindo a medicão de correntes e a aplicação de voltagens. Os sistemas foram usados em diversos experimentos, tais como: a) fabricação de pontas de AFM de alta razão de aspecto baseadas em nanotubos de carbono multi-camadas; b) coletar, mover e posicionar nanofios semicondutores (100 - 300 nm de diâmetro, microns de comprimento) em contatos elétricos pré-definidos ou em áreas específicas de uma amostra; c) fabricação e caracterização elétrica de dispositivo eletrônico baseado em nanofios semi-condutores; d) caracterização das propriedades mecânicas de nano-objetos unidimensionais, como nanotubos de carbono e nanofios; etc. Finalmente, nossos resultados de manipulação demonstram que existem muitas oportunidades para a aplicação de manipulação física no método "bottom-up"em nanotecnologia / Abstract: It is expected that, in the future, high-technology devices should be based on new and unexpected physical and chemical properties of nanometric objects. Many applications require nano-objects to be selectively positioned at well-defined positions of a device. However, the well-established methods of physical manipulation used in the macroscopic scale are not applicable in nanoscale. Here, there are lots of open questions and the progress is still rather slow. Several experiments have exploited physical manipulation using atomic force microscopy (AFM) and scanning tunnelling microscopy (STM), but, in these techniques, manipulation and observation can not be performed simultaneously. The scanning (SEM) and transmission (TEM) electron microscopes are essential equipments for studying nano-objects due to their high resolution and to the possibility of observing performed movements in real time. Those techniques, together with the use of nanomanipulators, are powerful tools to manipulate and characterize nano-objects. There are several commercial nanomanipulators for SEMs. However, the price of these instruments is reasonably high, and they become restricted to a few research groups. In this work, we report the development and applications of home-made nanomanipulators (with one or two probe tips) whose systems are based on simple mechanics and on low-cost materials. They operate inside a FEG-SEM (JSM-6330F, 1.5 nm nominal resolution at 25 kV). The coarse movements rely on parallel guiding spring based mechanics (one axis of movement) and on two overlapped parallel guiding spring based mechanics (two axes of movement). The precise movements are due to an ensemble of piezoelectric elements that has three independent axes of movement for each probe tip. The sample support has a large range (15 mm) on one axis, which allows working with several samples during the same experiment. The instruments are suitable for a wide spectrum of nanomanipulation and nanocharacterization experiments, including measuring currents and applying voltages. The systems have been used for a variety of applications, such as: a) fabricating high aspect-ratio AFM tips based on multi-walled carbon nanotubes; b) collecting, moving, and positioning semiconductor nanowires (100 - 300 nm in diameter, microns in length) on predefined electrical contacts or special sample sites; c) fabrication and electrical characterization of an electronic device based on semiconductor nanowires; d) characterization of mechanical properties of one-dimensional nano-objects, as carbon nanotubes and nanowires; etc. Brie°y, our manipulation results demonstrate that there are plenty of opportunities for applications of physical manipulation in the bottom-up approach to nanotechnology / Doutorado / Física da Matéria Condensada / Doutor em Ciências

Orientador: Sergio Tonini Button / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecanica / Made available in DSpace on 2018-08-09T12:42:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Caminaga_Celio_D.pdf: 45945732 bytes, checksum: 36b9f4a15a23ccd9e0ad12b26cfe5931 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A exigência por parte das montadoras por produtos com maior qualidade, a preços mais baixos e com diminuição do prazo de entrega, faz com que as indústrias de autopeças concentrem esforços na busca de processos e materiais alternativos. Os processos de forjamento a quente aliados aos aços microligados, que também são conhecidos como aços de alta resistência e baixa liga (ARBL), tem uma extensa aplicação em componentes automotivos. A proposta deste trabalho é estudar o comportamento microestrutural e mecânico (resistência e tenacidade) do aço microligado 27MnSiVS6, quando empregado no processo ausforming, a fim de analisar-se o desempenho do processo e a qualidade dos produtos, comparando-o com os processos de forjamento a quente e a morno. Os produtos forjados proveniente do processo de ausforming que foram submetidos aos ensaios de tração unidirecional, dureza, fadiga em flexão rotativa e tenacidade a fratura apresentaram as melhores propriedades mecânicas. A microscopia óptica e microscopia eletrônica (varredura e transmissão) que foram utilizadas para caracterização microestrutural dos produtos forjados demonstraram o refino dos grãos ferríticos, a presença de inclusões não metálicas (MnS) e a contribuição dos mecanismos de endurecimento ao limite de escoamento. Os testes estatísticos aplicados aos resultados permitiram concluir, que os produtos obtidos pelo processo de forjamento ausforming apresentam a melhor combinação de resistência mecânica e qualidade superficial dos produtos forjados, sem aumentar a carga de forjamento / Abstract: The demand of the automotive industry for parts with high overall quality, low costs and reduced time to market, forced the suppliers to search alternative materials and manufacturing processes. Hot forgings with microalloyed steels, also known as HSLA (High Strength Low Alloy), represent an extensive application in automotive parts. The main objective of this work is to study the workability of a microalloyed steel deformed by ausforming and compare the products microstructures and forming loads to those obtained by hot and warm forging. Results from preliminary upsetting tests confirmed the viability of this study. Finally forgings tests were held to define the forming load and to analyze products microstructures for these three processes. Forgings were analyzed by tensile tests, fatigue under cyclic flexion tests, and fracture toughness tests. Optical and electronic microscopy (SEM and TEM) applied to evaluate the forgings microstructure showed the ferritic grain refinement, the presence of non-metallic inclusions (MnS) and confirmed the contribution of hardening mechanisms to increase the yield strength of forging products. The statistical analysis of the experimental results showed that ausforming is a suitable process to substitute hot and warm forging since ausforming presented lower loads when compared to warm forging, and ausformed forgings presented the best combination of mechanical strength and surface quality, without a significant increase of the forging loads / Doutorado / Materiais e Processos de Fabricação / Doutor em Engenharia Mecânica

Submitted by Geandra Rodrigues (geandrar@gmail.com) on 2018-01-26T18:42:50Z No. of bitstreams: 0 / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2018-01-29T11:01:37Z (GMT) No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2018-01-29T11:01:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2017-06-09 / - / Bacteria are important components of the food web structure in aquatic ecosystems in which they influence the flow of carbon and energy. Populations of bacteria in these ecosystems comprise a diverse spectrum of individual cells able to respond to many factors such as nutrient supply, temperature and virus infection, which regulate bacterial life and death. Bacterial death is a key cellular event involved in the control and production of bacteria in aquatic ecosystems with functional meaning in the carbon and nutrient cycles. Therefore, the study of bacterial structural features and cellular mechanisms underlying bacterial death is crucial to understand processes affecting the entire population. However, both bacterial structure and cellular events of death in aquatic ecosystems are still poorly understood. In the present work, we used single cell approaches to study the structural organization of bacteria as well as to characterize cellular processes of death in these organisms. First, by using fluorescence and transmission electron microscopy (TEM), we provided a general panorama of how microscopy techniques, especially TEM, are powerful tools to understand bacterial structure and their responses to environmental stresses. We showed that bacteria from aquatic ecosystems have remarkable ultrastrutural diversity with components such as bacterial envelope of individual cells differing in structure within the same population. Second, we sought to identify and characterize mechanisms of bacterial cell death. Because our TEM analyses revealed morphological signs of apoptosis, a type of program cell death (PCD), in aquatic bacteria directly collected from natural ecosystems, we applied different techniques to detect apoptosis in bacteria cultured from natural samples. We used TEM as well as different probes to detect this type of PCD in cultured bacteria exposed to increased temperature and viral infection, which are recognized inducers of bacterial death. TEM showed, in both situations, ultrastructural changes indicative of apoptosis, such as cell retraction and condensation, similar to those reported for eukaryotic cells. Assays for membrane permeability, DNA fragmentation, phosphatidilserine exposition and caspase activation were significantly increased in treated bacteria compared to the control group. Altogether, our data demonstrate, for the first time, that PCD occur in aquatic bacteria, and that this event may be a basic mechanism for regulation of bacterial communities in these ecosystems.

Submitted by JÚLIO HEBER SILVA (julioheber@yahoo.com.br) on 2017-08-22T17:14:03Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Darling Mélany de Carvalho Madrid - 2017.pdf: 9281142 bytes, checksum: 7c28bb567493636c0dd23e77fa2de0ff (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-09-15T12:12:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Darling Mélany de Carvalho Madrid - 2017.pdf: 9281142 bytes, checksum: 7c28bb567493636c0dd23e77fa2de0ff (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-15T12:12:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Darling Mélany de Carvalho Madrid - 2017.pdf: 9281142 bytes, checksum: 7c28bb567493636c0dd23e77fa2de0ff (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-07-31 / Trypanosoma vivax (Ziemann, 1905) is a protozoon responsible for causing trypanosomiasis in bovines, a disease currently increasing in Brazil and, in the state of Goiás, it was first identified in 2015. As it causes abortion, lethality and greatly diminishes milk production, trypanosomiasis may cause significant losses to farmers, especially those working with milk production. However, there is not much information about this protozoon in Brazil. As it is necessary to gather more knowledge about isolates in the country to evaluate the disease real prevalence, impact in economy and, more importantly, develop control programs, this work proposed evaluate the morphometry of this parasite in scanning electron microscopy and the efficacy of different disinfectants in its elimination. Scanning electron microscopy is a highresolution technique used to analyze the external structures of the parasite, which shows morphometric differences between Latin America and Brazilian isolates. In this work, it was shown that there is no size difference among isolates found in Brazil and Goiás. The results of disinfectants efficacy evaluation to eliminate this agent have shown that many disinfectants commonly found in the market may be used. This information may be applied directly in farms to help control infection focus and contribute in reducing the disease impact in Brazilian milk production. / Trypanosoma vivax (Ziemann, 1905) é o protozoário responsável por causar a tripanossomíase em bovinos, doença que atualmente expressa caráter epidêmico no Brasil e, no estado de Goiás, foi identificada pela primeira vez em 2015. Por ocasionar aborto, letalidade e grande queda de produção de leite, a tripanossomíase pode gerar grandes prejuízos ao produtor, principalmente os que trabalham com bovinocultura de leite. Apesar disto, ainda não há muitas informações disponíveis sobre este protozoário no Brasil. Considerando a necessidade de conhecer mais as características dos isolados presentes no país a fim de avaliar sua prevalência real, impacto na economia e, principalmente, desenvolvimento de programas de controle, este trabalho se propôs avaliar a morfometria do parasito em microscopia eletrônica de varredura e a eficácia de diferentes desinfetantes na sua eliminação. A microscopia eletrônica de varredura é uma técnica de alta resolução empregada para analisar a estrutura externa do parasito, que apresenta diferenças morfométricas entre os isolados na América Latina e no Brasil. Neste trabalho, ficou evidenciado que não há diferença de tamanho entre os isolados encontrados no Brasil e em Goiás. Os resultados da avaliação da eficácia dos desinfetantes em eliminar o agente demonstram que diversos desinfetantes comumente encontrados no mercado podem ser empregados. Estas informações podem ser aplicadas diretamente em propriedades para auxiliar no controle de surtos e contribuir na redução dos impactos causados nos rebanhos bovinos de leite brasileiros.

Este estudo in vitro teve como objetivo avaliar a quantidade de perda de tecido dental após ciclos de erosão e abrasão com diferentes cremes dentais contendo ingredientes ativos para o tratamento da hipersensibilidade dentinária. Para tanto, quarenta amostras de dentina radicular (4x4x1,5 mm) foram confeccionadas a partir de terceiros molares humanos hígidos. Estes foram divididos aleatoriamente em 4 grupos (n=10): 1-controle negativo com água destilada, 2-controle positivo com Colgate Total 12, 3-Colgate Pró-Alivio e 4-Sensodyne Repair and Protect. Para o modelo de ciclagem erosiva foi utilizado o refrigerante Coca-Cola® por 5 minutos (4x/dia) a 37?C; e para a ciclagem abrasiva os espécimes foram submetidos a ciclos diários de escovação (2x/dia) com escova elétrica com pressão padronizada (15s). Os espécimes foram avaliados em Perfilometria óptica (n=10) e Microscopia Eletrônica de Varredura Ambiental (n=3) em duas fases distintas. Os dados de ambas as fases foram submetidos à análise estatística. Para a avaliação por perfilometria, a análise de variância ANOVA dois fatores para medidas repetidas mostrou que em todos os tratamentos a superfície dentinária foi afetada com o passar do tempo, havendo progressão da perda dentinária. Porém, não houve diferença estatística para cada tratamento realizado (p<0,05). Para avaliação em MEV, análises qualitativas e quantitativas foram realizadas. Para análise quantitativa, o teste Friedman demonstrou que os examinadores estavam calibrados. A análise de variância ANOVA mostrou que o Sensodyne Repair and Protect foi o creme dental mais eficaz na obliteração dos túbulos dentinários. Conclui-se que o desafio abrasivo combinado ao efeito erosivo apresenta-se como um potencial causador de lesões não cariosas e que os cremes dentais que contém dessensibilizantes apresentam comportamentos similares em termos de perda de substrato dentinário, quando comparados aos grupos controle, entretanto, mostram-se mais favoráveis para a oclusão tubular. / This in vitro study had the main objective to evaluate the amount of dental tissue loss after erosion and abrasion cycles with different toothpastes with active ingredients for the treatment of dentin hypersensitivity. Forty samples of root dentin (4x4x1.5 mm) were prepared from human third molars and randomly divided into 4 groups (n=10): 1-negative control- distilled water, 2- positive control - Colgate Total 12, 3- Colgate Pro-Relief and 4- Sensodyne Repair and Protect. For the erosion model it was used Coca-Cola® for 5 minutes (4x/day). For the abrasion model, specimens were subjected to daily brushing cycles (2x/day) with electric toothbrush with standard pressure (15s). Specimens were evaluated in Optical Profilometry (n=10) and Electron Microscopy Environmental Scan (n=3) in two distinct phases. Data from both phases were analyzed statistically. For evaluation by profilometer examination, analysis of variance for repeated measures ANOVA showed that all treatments were affected in the course of time, with progression of dentin loss. However, there was no statistical difference among treatments (p <0.05). For SEM evaluation, qualitative and quantitative analyzes were performed. For quantitative analysis, Friedman test showed that the examiners were calibrated. The ANOVA showed that Sensodyne Repair and Protect was more effective in tubules obliteration. It can be concluded that the abrasive challenge combined with the erosive effect is presented as a potential cause of non-carious lesions and toothpastes containing desensitizing agents have similar behavior in terms of loss of dentin when compared to control groups. However, it showed more favorable results to tubular occlusion.

Os primatas neotropicais, ou primatas do novo mundo, são pertencentes a um grupo diverso e variado de animais, com características anatômicas, comportamentais e taxonômicas próprias, que os diferem dos primatas do velho mundo. Estima-se que representem 31% dos primatas não-humanos do planeta. Têm sofrido com as altas taxas de crescimento populacional e perturbação antrópica resultante do desflorestamento, agricultura e criação de gado. Com o intuito de reverter esta situação e maximizar o potencial reprodutivo das espécies, o desenvolvimento de biotecnologias associadas à reprodução tem sido amplamente justificado nos dias de hoje, por representarem importantes ferramentas reprodutivas, contribuindo para a preservação da biodiversidade e manutenção da diversidade genética. Assim, o objetivo do presente estudo foi padronizar a colheita de sêmen de Alouatta guariba clamitans por eletroejaculação por via retal com posterior análise do sêmen fresco, procedimentos nunca descritos para a espécie, e adaptar o método de preparo de sêmen de Leontopithecus chrysomelas, Alouatta caraya e Alouatta guariba clamitans para microscopia eletrônica de transmissão, permitindo a comparação da ultraestrutura dos espermatozoides das três espécies e apresentando resultados também inéditos na literatura científica. Para este estudo, foram utilizados quatro exemplares de L. chrysomelas, dois exemplares de A. caraya e dois exemplares de A.g. clamitans, machos adultos mantidos em cativeiro. L. chrysomelas tiveram o sêmen colhido por vibroestimulação peniana, e A. caraya e A.g. clamitans foram submetidos à eletroejaculação por via retal. Após a obtenção dos ejaculados, o sêmen foi avaliado quanto ao volume, pH, concentração, motilidade, integridade de membrana plasmática, integridade de membrana acrossomal e morfologia, e posteriormente preparado para microscopia eletrônica de transmissão. A análise dos 12 espermatozoides das três espécies estudadas revelou que todos apresentam os componentes básicos descritos para o espermatozoide humano cabeça, colo e cauda, formada pelas peças intermediária, principal e terminal com variações na forma e tamanho de cada componente. As diferenças mais significativas encontradas entre os espermatozoides comparados foram extensão de acrossomo, comprimento, largura e organização de peça intermediária. O presente estudo atingiu os objetivos propostos, apresentando resultados inéditos na literatura científica / The neotropical primates, also known as primates of the new world, are a diverse and varied group of animals, with unique anatomical and taxonomic characteristics, as well a unique behaviour, that distinguish those from the old world primates. It is estimated that these present 31% of the non-human primate population of the planet. High taxes of populational growth and anthropological disturbance have been undergoing due to deforestation, agriculture and cattle farms. In order to revert this situation and maximize the reproductive potential of the species, the development of biotechnologies associated to the reproduction are widely justified nowadays, for representing important reproductive tools, contributing to the preservation of the biodiversity and maintenance of genetic diversity. Hence, the purpose of this study was to collect Alouatta guariba clamitans semen by rectal electroejaculation then analyze the fresh semen, procedures never before described for the species, and adapt the preparation method of Leontopithecus chrysomelas, Alouatta caraya and Alouatta guariba clamitans semen for electron transmission microscope, allowing the comparison of the spermatozoa ultrastructure from the three species and also presenting new results to the scientific literature. For this study, it was used four specimens of L. chrysomelas, two specimens of A. caraya and two specimens of A.g. clamitans, adult males kept in captivity. L. chrysomelas had the semen taken by penine vibratory stimulation, and A. caraya and A.g. clamitans were submitted to rectal electroejaculation. After the semen was obtained, it was evaluated regarding the volume, pH, concentration, motility, sperm membrane integrity, acrosome integrity and morphology, and then prepared for electron transmission microscopy. The analysis of the spermatozoa of the three studied species revealed that all present the basic components described for the human spermatozoa - head, neck region and tail, formed by middle, principal and terminal pieces - with variations in 14 shape and size of each component. The most significant differences found between the compared spermatozoa were the acrosome extension and middle piece length, thickness and organization. The present study attained the proposed goals, presenting unprecedented results for the scientific literature

Este estudo representa a primeira avaliação ovariana, imunológica e hormonal realizada em duas espécies de felinos brasileiros ameaçados: L. pardalis (n=5) e L. tigrinus (n=4), antes e após 4 a 6 tratamentos alternados com as gonadotrofinas exógenas eCG/hCG e pFSH/pLH. Os animais foram submetidos a superovulação alternada com eCG-hCG e pFSH-pLH a cada quatro meses pelo período de dois anos, perfazendo um total de 6 intervenções. Os oócitos foram recuperados por vídeo laparoscopia, caracterizados quanto à morfologia e utilizados para determinação dos estágios do ciclo meiótico por análise citogenética e maturação pela caracterização de metáfase II. Avaliação ultra-estrutural por microscopia eletrônica de transmissão e varredura foi realizada para caracterização da morfologia dos oócitos. Antes e após cada intervenção sangue foi colhido e utilizado em análises hormonais séricas (progesterona e estradiol) por RIE e pesquisa de anticorpos para gonadotrofinas exógenas por ELISA. Comparando os tratamentos, não houve diferença significativa (p>0,05) no número total de estruturas ovarianas observadas em superovulações alternadas sucessivas, nas duas espécies estudadas. Também não houve diferença significativa em relação ao total de estruturas ovarianas encontradas em cada tratamento (5,7±1,2 eCG/hCG; 7,9±0,9 pFSH/pLH) para L. pardalis e (eCG/hCG 2,6±0,7; pFSH/pLH 2,0±0,5) para L. tigrinus. Embora L. pardalis tenham apresentado maior número de estruturas ovarianas por estimulação que L. tigrinus (p<0,05), a porcentagem de oócitos maduros em relação aos oócitos totais não diferiu, indicando que a metodologia utilizada foi eficiente. L. pardalis apresentaram maior número de oócitos totais e maduros nos tratamentos com pFSH/pLH (p<0,05), sendo que em L. tigrinus ambos tratamentos se comportaram de maneira semelhante (p>0,05). Não foi possível a caracterização dos estágios do ciclo meiótico pela avaliação da configuração cromossômica nos oócitos, sendo que nenhum oócito apresentou-se em metáfase II. Ultraestruturalmente os oócitos apresentaram características semelhantes aos observados em mamíferos de maneira geral. Dosagens hormonais séricas demonstraram um aumento de estradiol após as superovulações. Elevações de progesterona foram observadas em alguns momentos pré e pós superovulações. Embora alguns animais tenham demonstrado desenvolvimento de títulos para imunoglobulinas anti-gonadotrofinas exógenas, essa resposta imune humoral não parece interferir com a indução da atividade ovariana produzida pela superovulação, já que os animais responderam bem aos tratamentos alternados. Com estes resultados podemos concluir que essas espécies podem ser manejadas intensivamente usando tratamentos alternados com gonadotrofinas exógenas para procedimentos de reprodução assistida sem comprometer a resposta ovariana a esses hormônios. / This study represents the first assessment of ovarian, immunological and hormonal responses of two endangered Brazilian felids: L. pardalis (n=5) and L. tigrinus (n=4), treated with two exogenous gonadotropin regimens eCG/hCG and pFSH/pLH. Females were treated with four to six times alternating eCG/hCG and pFSH/pLH protocols using an interval of four months between each treatment. Ovarian follicular development and oocytes recovery were performed through laparoscopy. Recovered oocytes were submitted to the cytogenetical analysis and to the electron microscopy in order to evaluate the maturation (metaphase II) and the morphological and ultrastructural status, respectively. Blood samples were collected before each treatment and during the laparoscopy in order to measure progesterone and estradiol by RIA and to evaluate the immunological response to the exogenous gonadotropins by ELISA. Our results suggest that L. pardalis and L. tigrinus do not show a decrease (p>0.05) in ovarian response after repeated and alternate exposure to different gonadotropin treatments. In both L. pardalis and L. tigrinus, no differences were found regarding to the number of total ovarian structures (p>0.05) during successive gonadotropin treatments. When comparing the eCG/hCG and the pFSH/pLH treatments, there were no differences (p>0.05) regarding to the total number of ovarian structures in L. pardalis (5.7 ± 1.2 and 7.9 ± 0.9, respectively) or L. tigrinus (2.6 ± 0.7 and 2.0 ± 0.5, respectively). Despite the fact that the L. pardalis showed a higher number of follicles and CLs per stimulation (p<0.05) when compared to the L. tigrinus, no differences were found when analyzing the percentage of mature oocytes (p>0.05). Within species, both gonadotropin regimens were equally effective (p>0.05) to induce the follicular growth. No decreases (p>0.05) on the total number of ovarian structures and on the oocyte maturation percentages were observed between the sequential stimulations, but. L. pardalis showed a higher number of mature and total oocytes when treated with pFSH/pLH (p<0.05). L. Tigrinus didn’t show any differences regarding to the number of total and mature oocytes (p>0.05) when comparing both gonadotropin regimens. No oocytes in metaphase II were observed in the cytogenetic analyses. Oocytes histological evaluation showed that morphological characteristics were the same observed in others mammals. Hormonal analyses showed increased estradiol levels after superovulations. Higher levels of progesterone were observed before and after superovulations. Although some of these cats do demonstrate the development of anti-gonadotropin immunoglobulin titers, these humoral immune responses do not appear to interfere with gonadotropininduced ovarian stimulation. In this study, animals treated repeatedly with alternating regimens of eCG/hCG and pFSH/pLH showed no decrease in total ovarian structures after four to six successive treatments. These findings are potentially valuable for the ongoing efforts to develop and apply assisted reproductive technologies to the management and conservation of endangered felid populations.

O gênero Aegla Leach, 1820 representa o único táxon dentro de Decapoda Anomura com representantes adaptados exclusivamente a ambientes de água doce. As eglas são endêmicas da América do Sul e vivem em ambientes lóticos com alto nível de oxigenação. Estudos comparativos da morfologia de jovens recém-eclodidos podem contribuir para estabelecer relações de afinidade entre as cerca de 70 espécies já descritas que compõem a família Aeglidae. Porém, o número de trabalhos que descrevem a morfologia em detalhe nesta fase de vida é ainda escasso. O objetivo do presente estudo foi descrever detalhadamente a morfologia externa dos jovens recém-eclodidos das espécies Aegla paulensis e Aegla perobae, com base em Microscopia Óptica e em Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Fêmeas ovígeras foram coletadas e transferidas para o laboratório a fim de se obter os jovens recém-eclodidos dos ovos. A descrição detalhada da morfologia do jovem recém-eclodido incluiu a carapaça, o abdome, os apêndices cefalotorácicos (antênula, antena, mandíbula, maxílula, maxila, maxilípedes, pereópodes) e a região do télson juntamente com os urópodes. As cerdas foram analisadas em detalhe quanto ao número, localização e tipo morfológico com o auxílio da MEV. Os resultados obtidos foram analisados e comparados com os das espécies que já tiveram seus jovens recém-eclodidos descritos e também com os adultos. As principais descobertas do estudo foram: as lineae aeglicae, os pleópodes rudimentares, a riqueza de tipos de cerdas e os poros sensoriais / Genus Aegla Leach, 1820 represents the one taxon within Decapoda Anomura with representatives exclusively adapted to freshwater environments. Aeglids are endemic to South America and they live in lotic environments with high levels of dissolved oxygen. Comparative studies of the newly-hatched juvenile morphology may contribute to establish affinity relations among the 70 species of the Aeglidae family already described. However, the number of studies which describe the morphology at this life phase in detail is still scarce. The objective of this study was to describe the external morphology of the newly-hatched juvenile of Aegla paulensis and Aegla perobae in detail, using Light Microscopy and Scanning Electron Microscopy (SEM). Newly-hatched juveniles were obtained from ovigerous females kept under laboratory conditions. Detailed description of the newly-hatched juveniles included the carapace, the abdomen, the cephalothoracic appendages (antennule, antenna, mandible, maxillule, maxilla, maxillipeds, pereiopods), and the telson-uropods region. SEM was used to analyze setae number, location and type. The results were analyzed and compared with those from newly-hatched juveniles already described and with adults. The main findings in this study were: lineae aeglicae, rudimentary pleopods, setae morphology diversity, and pores sensilla.

A elasticidade do tecido conjuntivo desempenha uma função protetora agindo como uma mola tênsil durante o trabalho muscular, No entanto, existem poucos estudos sobre a distribuição das fibras do sistema elástico no coração. Considerando que: a) o estudo da distribuição destas fibras pode ajudar a compreender a mecânica cardíaca, e b) o rato tem sido usado como o melhor modelo animal para as disfunções cardiovasculares, o objetivo deste estudo é apresentar uma descrição sistemática da distribuição diferencial das fibras do sistema elástico do endocárdio, epicárdio e miocárdio ventricular. Cortes histológicos de ventrículo esquerdo obtido de ratos normais adultos foram estudados pela comparação do padrão ultraestrutural de cada um dos tipos fibrilares com coloração pela técnica da resorcina-fucsina com prévia oxidação, para microscopia de luz. As observações ultra-estruturais foram feitas em tecidos fixados com ácido tânico - glutaraldeído, que permite a identificação mais precisa das fibras oxitalânicas, elaunínicas e elásticas. Foi aplicado um sistema semiquantitativo de avaliação. A análise dos cortes histológicos corados pela Resorcina-fucsina com oxidação prévia mostrou um estrato de fibras elásticas em estreita associação ao endotélio no endocárdio e ao mesotélio no epicárdio. Quando observado ao microscópio eletrônico é possível identificar que nestas ambas localizações as fibras do sistema elástico estão arranjadas em dois estratos dispostos ortogonalmente. Ao nível ultraestrutural, notou-se a distribuição diferencial das fibras do sistema elástico nos três compartimentos do tecido conjuntivo associado ao miocárdio propriamente dito: epimísio, perimísio e endomísio. O epimísio apresenta fibroblastos, fibras colágenas grossas, fibras elaunínicas e elásticas entremeadas à substância amorfa. No perimísio, a microscopia eletrônica mostrou uma grande quantidade de microfibrilas associadas a fibras elásticas, elaunínicas e mesmo fibras colagênicas. Freqüentemente, neste compartimento, as microfibrilas estão compactadas formando feixes que correspondem ao padrão ultra-estrutural das fibras oxitalânicas. O endomísio é rico em fibras oxitalânicas associadas à lâmina basal dos cardiomiócitos. Uma rede microfilamentar conecta os elementos do endomísio entre si. Ainda que as implicações funcionais sejam especulativas, a distribuição diferencial das fibras do sistema elástico nos compartimentos da parede ventricular sugere que diferenças na elasticidade conferem versatilidade biomecânica ao tecido como um todo. A análise ultra-estrutural mostra que as fibras oxitalânicas (menos elásticas) se co-localizam com fibras colagênicas finas no endomísio e perimísio, enquanto que a presença de fibrilas colágenas mais grossas coincide com fibras elásticas e elaunínicas (com mais elasticidade) no endo- e epicárdio. Estas observações sugerem que o sistema elástico, em co-evolução com o sistema colagênico, contribui para acomodar a diversidade funcional / The connective tissue elasticity has a protective function acting as a tensile spring during muscular work. Nevertheless, few is known about the distribution of the elastic system fibers in the heart. Considering that a) the study of the distribution of these fibers may help understand the cardiac mechanics, and b) rat models are used to study cardiac dysfunctions, our aim is to study the distribution of elastic system fibers in the ventricular endocardium, epicardium and myocardium of normal rats. Histological tissue sections of left ventricle (obtained from adult rats) were studied by comparing the typical ultrastructural picture of each of the fiber types with Resorcinfuchsin staining technique for light microscopy. The ultrastructural observation was made in tissues fixed with tannic acid-glutaraldehyde, which provided a reliable means to identify the elastic system fibers, as oxytalan, elaunin and elastic fibers. A semiquantitative evaluation was performed. The analysis of the histological sections stained by Resorcin-fuchsin technique after oxidation shows a stratum of elastic system fibers in close association to the endothelium in the endocardium and to the mesothelium in the epicardium. When observed at the transmission electron microscope, it was possible to see that in both locations the elastic system fibers are arranged in two orthogonally disposed layers. At the ultrastructural level, the epimysium presents fibroblasts, thick collagen, elaunin and elastic fibers interspersed in the amorphous substance. In the perimysium, the electron microscope disclosed a great amount of microfibrils, surrounding all fibrilar components: elastic fibers, elaunin fibers and even collagen fibers. Frequently, at this location, the microfibrils are closely packed, forming bundles devoid of elastin that correspond to the ultrasctructural picture of the oxytalan fibers. The endomysium is rich in oxytalan fibers in a close association with the basal lamina of the myocytes. A microfibrilar network interconnects the endomysium elements each other. In spite of the functional implications being speculative, the differential distribution of the elastic system fibers in the compartments of the ventricular wall suggests that the differences in elasticity provide biomechanical versatility to the intire system. Ultrastructural analysis shows that oxytalan fibres and thin collagen fibrils are co-localized in endomysium and perimysium, whereas, the presence of thicker collagen fibrils coincides with elaunin and elastic fibers in endo- and epicardium. These specific co-localizations suggest that elastic system, in co-evolution with collagen, has contributed to accommodating functional diversity

Este estudo teve como objetivo verificar a possibilidade de utilizar o esmalte bovino, em teste resistência de união, substituindo o esmalte humano, bem como, analisar a resistência de união, morfologia de interface e padrão de condicionamento de sistemas adesivos autocondicionantes aplicados ao esmalte intacto e asperizado. Foram usados 40 dentes humanos e 40 dentes bovinos. Cada dente foi dividido em quatro regiões, de maneira a permitir a obtenção dos corpos-de-prova de todas as condições experimentais. Três sistemas adesivos autocondicionates; Clearfil Protect Bond (Kuraray Medical inc), Adper Prompt L-Pop (3M-ESPE), i Bond (Heraeus-Kulzer) foram testados, sendo utilizado um sistema de condicionamento total, Excite (Ivoclar-Vivadent), como controle positivo. A resina Tetric Ceram foi utilizada para a confecção dos corpos-de-prova, para resistência de união e amostras de microscopia eletrônica de varredura (MEV). As médias de resistência de união foram avaliadas por análise de variância e Tukey. Não houve diferença estatística, na resistência de união, entre os substratos, embora, as médias em esmalte humano tenham sido mais altas. A interação tripla; sistema Adesivo x Tratamento x Esmalte, também não foi significante, no entanto, manteve-se a tendência dos autocondicionantes de passo único apresentar as menores médias de resistência de união, principalmente no esmalte intacto. Houve diferença estatística para o fator sistema adesivo, sendo que o menor resultado foi obtido com o adesivo i Bond, na interação sistema adesivo x tratamento, a menor média também foi obtida pelo adesivo i Bond, quando aplicado ao esmalte intacto. O fator tratamento foi significante, sendo que, na variável de esmalte asperizado constatou-se a maior média de resistência de união, evidenciando que a asperização da superfície de esmalte, quando um sistema adesivo autocondicionante é aplicado no esmalte, constitui um passo operatório essencial. As imagens de MEV evidenciaram maior porosidade no dente bovino, independente do sistema adesivo utilizado e maior descalcificação do esmalte, tanto asperizado, quanto intacto, para os adesivos Excite e Adper Prompt L-Pop. Em relação à interface observou-se, que a camada de adesivo, no esmalte asperizado, tanto humano, quanto bovino, mostrou-se mais espessa, não importando o tipo de sistema adesivo; autocondicionante ou convencional. Os prismas de esmalte, no substrato bovino, mostraram um arranjo diferenciado, do observado no esmalte humano, porém esta diferença não promoveu alteração na resistência de união, visto que, não houve diferença estatística entre os substratos. Assim na impossibilidade de se obter esmalte humano, para testes de microtração, a utilização do esmalte bovino é viável. / The aim of this study was to verify the possibility in use the bovine enamel, as a substitute to human enamel, in the microtensile bond strength test, as well as analyze the bond strength, interface morphology and etch pattern of the self etching primers (SEP) applied in the cut and uncut, bovine and human, enamel. For this 40 human teeth and 40 bovine teeth were used, each tooth was divided in four halves to obtain all experimental conditions in the same tooth. Three SEP; Clearfil Protect Bond (CPB) (Kuraray Medical Inc), Adper Prompt L-Pop (LP) (3M-ESPE), i Bond (IB) (Heraeus-Kulzer) were tested, using a conventional adhesive system, Excite (EX) (Ivoclar Vivadent), as a positive control. A bulk of composite resin, Tetric Ceram (Ivoclar Vivadent), was build up for the specimens of microtensile test and SEM. In all above trials, some specimens were randomly selected and prepared for SEM. The data collected was submitted for statistical analyze ANOVA and Tukey test. It was possible to verify that there were no statistically differences between the substrate and triple interaction Adhesive Systems x Substrate x Treatment, but in the booth conditions, the SEP, i Bond, showed the lowest means, as same as, all means in bovine enamel were lowest than in human enamel. There were statistically differences between the systems adhesives and for treatment, cut and uncut. For adhesive systems the lowest value was observed for i Bond, in booth substrate and treatment. In the treatment conditions the greater means were observed in the cut enamel, showing that the cutting enamel is essential condition, to improve the bond strength of SEP, applied in the enamel. The SEM images, for etch pattern showed that in the bovine enamel the porosity was more thickness, for all adhesives and cut and uncut treatment. It was possible to verify, trough SEM of morphology interface, that the all adhesives in cut enamel, had adhesive layer more thickness, as and exception was the SEP, I Bond, that showed adhesive layers thinner. The bovine enamel showed a different arrangement for prisms that showed in the human enamel. We conclude that when the use of human enamel, in the microtensile test, is unviable, it is possible to use the bovine enamel as a substrate.