Orientador: Wesley A. C. Godoy / Banca: Cláudio José Vanzuben / Banca: Marcelo Nougueira Rosa / Resumo: A Entomologia Forense é a ciência que aplica o estudo dos insetos a procedimentos legais. As pesquisas nesta área são feitas desde 1850 e nas últimas décadas vêm obtendo progressos. Esse trabalho visa constituir um banco de dados regional que possa servir como referencial científico nas investigações criminais e estimativas pós-morte, como também no estudo de casos reais que chegaram até o NPML (Núcleo de Perícias Médico-legais) Bauru, Estado de São Paulo. Análises faunísticas foram realizadas em 23 corpos, que foram conduzidos até o NPML. Os corpos eram de vítimas que sofreram morte violenta ou morte natural, para investigação da causa morte, atendendo a solicitação de autoridade competente. Na análise realizada foram encontradas duas famílias de dípteros necrófagos: Calliphoridae e Sarcophagidae. Dentre os exemplares de dípteros coletados da família Calliphoridae a espécie mais abundante foi Chrysomya albiceps (49,30%), seguida, por C. megacephala (30,56%), e Lucilia eximia (8,13%). Além destas espécies, foram também encontradas Lucilia cuprina (5,69%), Cochliomyia macellaria (1,45%) e Lucilia sericata (1,21%). Espécimes da família Sarcophagidae totalizaram 3,66% dos insetos coletados. Os vinte e três corpos analisados constituíram-se em 23 casos detalhadamente investigados, associando a presença dos insetos com as informações dos laudos necroscópicos / Abstract: Forensic entomology is the science, which applies insects for legal proceedings. Researches in this area have been performed since 1850 and in the last years researchers have obtained success. In this study a regional data set is presented to be used as a scientific reference in criminal investigations and post mortem interval estimates, as well as to be employed in real cases from the NPML (Núcleo de Perícias Médico-legais) of Bauru, São Paulo. Fauna analysis was performed in 23 corpses, which were led to the NPML. Corpses were victims, which have suffered violent or natural death, separated to investigate the death cause in response to requirements by authorities. In the analysis performed two families of necrophagous dipterans were found, Calliphoridae and Sarcophagidae. The most abundant Calliphoridae species was Chrysomya albiceps (49.30%), followed by C. megacephala (30,56%) and Lucilia eximia (8.13%). Other species were also found such as Lucilia cuprina (5.69%), Cochliomyia macellaria(1 ,45%) and Lucilia sericata (1.12%). The percentage of Sarcophagidae individuais was 3.66%. The twenty-three corpses analyzed resulted in 23 cases investigated in detail, associating the presence of insects with death data / Mestre

Orientador: Claudio José Von Zuben / Banca: Patricia Jacqueline Thyssen / Banca: Guilherme Gomes / Resumo: Entomologia forense é a ciência que faz uso de insetos e demais artrópodes associados a carcaças de animais em decomposição, buscando obter informações relevantes sobre local, causa ou tempo de morte. Dentre os insetos de interesse forense, os dípteros em geral são os primeiros a serem atraídos e os mais abundantes a colonizarem uma carcaça em decomposição. O presente estudo teve como objetivo principal analisar quais são os padrões de decomposição, para Sus scrofa, de acordo com um aumento de perfurações corporais artificiais, visando inferir uma possível aplicação do mesmo para as Ciências Forenses, simulando casos letais ocasionados através de injúrias no tecido e hemorragia devido à utilização de armas brancas, por exemplo. Foi utilizado um total de seis porcos, três para a estação de Inverno e três para o Verão, nos quais, para cada estação, um dos porcos não apresentava perfurações (Controle), outro apresentando uma perfuração abdominal medindo cerca de 15cm (P1) e um terceiro porco apresentando cinco perfurações abdominais (P5), com cerca de 3cm cada. Para a análise visual do efeito destas perfurações no processo de decomposição, para cada situação, fotos digitais e térmicas foram tiradas diariamente, dataloggers específicos de temperatura (TidBits) foram colocados em vários pontos das carcaças para mensurar as médias de temperaturas diárias ao longo de todo o processo de decomposição. Dípteros adultos foram coletados diariamente, visando-se obter uma check-list dos insetos desta ordem que visitaram as carcaças durante todo o experimento, para cada uma das duas estações propostas, inverno e verão. Os resultados mostraram que houve diferença significativa entre cada um dos tratamentos dentro de uma única estação, de forma que, quanto maior a quantidade de perfurações, maior foi a quantidade e velocidade de atração de dípteros para a carcaça, acelerando assim o processo... / Abstract: Forensic entomology is the science that uses insects and other arthropods associated with animal carcasses under decomposition, seeking relevant information to the body, such as location, cause or time of death. Among the insects of forensic interest, the flies are usually the first and most abundant to colonize a carcass. This study aimed to analyze what are the patterns of decomposition, for Sus scrofa, according to a execution of artificial body perforations, aimed the correlation whit forensic sciences, since they cause injury and hemorrhage in the tissues, caused mainly by sidearms, or white weapons. Where used a total of six pigs, three for the winter season and three for the summer, in which, for each season, one of the pigs had no perforations (Control), another had an abdominal perforation measuring about 15cm (P1) and a third pig featuring five abdominal perforations (P5), measuring about 3cm each one. For visual analysis of the effect of these perforations in the decomposition process, in each situation, thermal and digital photos were taken daily, as well as special thermal dataloggers (TidBITS) were placed in various parts of carcasses, to measure the average daily temperatures during the decomposition process. Diptera adults where collected daily in this decomposition sites, aiming to get a check-list of the insects of the order Diptera who visited the carcasses in the period of the experiment, for each season, winter and summer. The results reveals that occurs a significant differences between each treatment for each season: the greater is the number of abdominal perforations, greater is the quantity of decaying flies and the speed of attraction to the substrate too, accelerating, therefore, the decomposition process. Regarding the differences between the two seasons, the decomposition is about four times faster in the summer, a fact that can be understood by the amount of flies collected in this station had been infinitely ... / Mestre

Orientador: Claudio José Von Zuben / Banca: Roland Koberle / Banca: Augusto Shinya Abe / Banca: Wesley Augusto Conde Godoy / Banca: Cleo Alcantara Costa Leite / Resumo: Chrysomya megacephala (Fabricius) (Diptera: Calliphoridae) foi introduzida no Brasil há algumas décadas atrás, e é uma espécie de mosca-varejeira de considerável importância médico-sanitária por ser veiculadora de enteropatógenos, poder causar miíases secundárias, e também ter grande importância em estudos forenses por auxiliar na estimativa do intervalo pós-morte (IPM) em cadáveres, além de ter importância agrícola, como polinizadora. Desta forma, diversos trabalhos utilizam esta espécie como modelo de estudo, avaliando suas características biológicas e processos ecológicos envolvidos. Porém, poucos estudos analisaram processos fisiológicos nas diferentes fases da vida deste inseto. O estudo desses processos é fundamental para auxiliar na compreensão da biologia e comportamento da espécie, o que facilitaria a elaboração de desenhos experimentais em trabalhos envolvendo C. megacephala, além de fornecer embasamento para a proposição de métodos de controle para esta espécie. Por este motivo, o objetivo deste trabalho foi estudar aspectos de alguns processos fisiológicos de C. megacephala, sob a influência de diferentes tratamentos nas diferentes fases de seu ciclo de vida, focando em três áreas de estudo da fisiologia: metabolismo energético, termorregulação e neurofisiologia sensorial. Os resultados do presente estudo mostraram que existe uma grande alteração no metabolismo ao longo dos diferentes estágios do ciclo de vida de C. megacephala, sendo que o estágio larval apresenta o maior consumo de O2, que é refletido na grande quantidade de calor dissipado durante este estágio. O ciclo de atividade dos adultos de C. megacephala é influenciado pelo fotoperíodo e temperatura do ambiente, sendo que esta espécie utiliza comportamentos de termorregulação quando ocorre aumento da temperatura ambiental ou alterações... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Chrysomya megacephala (Fabricius) (Diptera: Calliphoridae) was introduced into Brazil a few decades ago, and has medical, criminal and also agricultural importance, because this species presents a secondary role in pollination, however, it is of great importance for public health, as a vehicle for pathogens, or as causative agent of secondary myiasis, and for forensic studies by helping to estimate the postmortem interval (PMI) of corpses. Thus, this species is used as a model in several studies, which aim to observe biological and ecological aspects of its life cycle. However, few studies have addressed physiological processes in different life stages of this insect. Studies of such processes are essential to understand biological and behavioral aspects of species, which, in this case, could contribute to provide bases for proposing efficient methods of control for this species. In this context, the objective of this research was to study the metabolism, thermoregulation and neural-physiology of C. megacephala, under the influence of different treatments at different stages of its life cycle. The results of this study showed that there was a major change in metabolism during different stages of the life cycle of C. megacephala, and the consumption of O2 was higher during the larval stage, which was reflected by the large amount of heat dissipated during this stage. The activity cycle of adults of C. megacephala is influenced by photoperiod and environment temperature: according to an increase of the ambient temperature or the presence and absence of light, the individuals exhibited thermoregulatory behaviors to adjust their body temperature with the environmental stimuli. The presence and the type of drugs used at the different stages of the life cycle of C. megacephala also affected the physiological response of this species: (a) increased (Citalopram treatment)... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Patrícia Jacqueline Thyssen / Banca: Wesley Augusto Conde Godoy / Banca: Carolina Reigada / Resumo: A Entomologia Forense utiliza dados de desenvolvimento e aspectos ecológicos de insetos que se alimentam de corpos em decomposição com o objetivo de auxiliar a resolução de casos na área forense. Uma das principais aplicações, entre outras, é a estimativa do intervalo pós-morte (IPM) que pode ser baseada no ciclo biológico de uma dada espécie. Porém, a falta de informação ou conhecimento sobre as variáveis que interferem de forma direta ou indireta sobre a taxa de desenvolvimento de diferentes espécies pode gerar dados imprecisos em relação à idade do inseto e, consequentemente, ao IPM. Recentemente, devido ao aumento no número de óbitos relacionados ao abuso de drogas, análises toxicológicas têm sido direcionadas a insetos necrófagos, visando complementar informações acerca da causa da morte, assim como garantir maior acurácia ao cálculo do IPM, uma vez que certas substâncias ingeridas antes do óbito podem alterar a taxa de desenvolvimento de algumas espécies que se alimentam dos tecidos de cadáveres. Esse ramo mais recente da entomologia forense é conhecido como Entomotoxicologia. No presente estudo objetivou-se observar o efeito de diferentes concentrações de metanfetamina e ecstasy, derivados anfetamínicos que tiveram seu consumo aumentado nas últimas décadas no Brasil, na taxa de desenvolvimento de imaturos dos califorídeos Chrysomya albiceps (Wiedemann), Chrysomya megacephala (Fabricius) e Chrysomya putoria (Wiedemann), quando acrescidos em dieta artificial apropriada. A anfetamina, metabólito da metanfetamina, não afetou de forma significativa o desenvolvimento larval de C. megacephala, no entanto, aumentou o tempo de desenvolvimento de imaturos de C. putoria, em especial a fase de pupa. O MDMA, principal componente do ecstasy, não alterou a taxa de desenvolvimento larval de C. albiceps e C. putoria, mas acelerou consideravelmente... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Forensic Entomology uses data about development and ecology of insects that feed on corpses aiming to assist to solve forensic cases. One of its main aplication, among others, is to estimate the pos-mortem interval (PMI) that can be based on the life cycle of a specific species. However, the lack of information or knowledge about the variables that can change directly or indirectly the development rate of different species can lead to inaccurate data about the age of the insect and, consequently, the PMI. Recently, due to the increasing number of death related to drug abuse, toxicological analyses have been directed to necrophagous insects intending to provide complementary information about the cause of death, as well as to asure a more acurate estimate of PMI, once some substances ingested before death can modify the development rate of some species that feed on cadaver tissues. This new branch of Forensic Entomology is known as Entomotoxicology. The aim of the present study was to observe the effect of different concentrations of methamphetamine and ecstasy, two amphetamine-like drugs which abuse rose among Brazilians in the last decades, on the development rate of immature of Calliphoridae Chrysomya albiceps (Wiedemann), Chrysomya megacephala (Fabricius) and Chrysomya putoria (Wiedemann), when added to artificial diet proper for them to complete their development. Amphetamine, methamphetamine's metabolite, did not affect significantly the larval development of C. megacephala, although it increased the time of development of C. putoria maggots, specially the pupa stage. MDMA, the main compound of ecstasy, did not alter the larval development rate of C. albiceps nor C. putoria but it accelerated, considerably, the development rate of C. megacephala. Through immunohistochemical analyses it was tried to detect amphetamine in larvae of C. megacephala and C. putoria, but the results were... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-06-14T15:03:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Ana Cecilia Gomes Mayer.docx certo.pdf: 2724679 bytes, checksum: f697f3531b4e56af6e7e351d28cbbfd0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-14T15:03:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Ana Cecilia Gomes Mayer.docx certo.pdf: 2724679 bytes, checksum: f697f3531b4e56af6e7e351d28cbbfd0 (MD5) Previous issue date: 2011-02-24 / CAPEs / Na natureza, cadáveres são colonizados por espécies de Diptera e Coleoptera, que se sucedem ao longo de cada estágio de decomposição. Considerando-se a escassez de inventários sobre insetos necrófagos na caatinga, esta pesquisa buscou estudar a fauna de Coleoptera associada à carcaça de suínos em área de caatinga hiperxerófila de Serra Talhada - PE. Carcaças de porcos foram colocadas em gaiolas circundadas por armadilhas de queda. Para comparação, armadilhas foram montadas em local controle. Os coleópteros associados à carcaça foram ainda coletados com pinças e por bandejas colocadas sob o animal. O experimento foi conduzido no primeiro semestre/2010. Coletaram-se 4.279 coleópteros de 13 famílias e 56 espécies, de diversos hábitos alimentares. Scarabaeidae foi a família mais abundante com 2.601 indivíduos. Deltochilum verruciferum foi a espécie mais abundante (2.407 exemplares) e dominante durante o experimento. A quantidade de insetos foi significativamente maior na carcaça que no controle (p < 0.0001). Houve diferenças significativas na riqueza e abundância ao longo da decomposição; a fase de putrefação escura atraiu maior diversidade e a fase seca, a maior abundância. Necrobia rufipes e Dermestes maculatus (necrófagos) estiveram presentes em maior abundância nas fases avançadas da decomposição. A adição de uma carcaça provoca aumento na população local de coleópteros e afeta a estrutura de comunidades. A colonização começa logo após a morte e as espécies se sobrepõem durante as fases de decomposição. / In nature, corpses are colonized by species of Diptera and Coleoptera, which succeed throughout each stage of decomposition. Considering the shortage of inventories on necrophagous insects in a region of Caatinga, this research attempted to study the fauna of Coleoptera associated with pig carcasses in an extreme enviroment of Caatinga in the municipality of Serra Talhada, state of Pernambuco, Brazil. Pig carcasses were placed inside metal cages surrounded by pitfall traps. For comparison, traps were assembled in a local far from carcasses, the control treatment. Coleopterans associated with the carcasses were also collected with tweezers and trays placed under the animals. The experiment was conducted in the first semester of 2010. 4.279 beetles were collected from 13 families and 56 species of diverse feeding habits. The Scarabaeidae family was the most abundant in richness and in number of individuals, with 2.601 collected specimens. Deltochilum verruciferum was the most abundant species (2.407 individuals) and was dominant during all the experiment. The number of insects was significantly higher in the traps around the carcasses than in control traps (p < 0.0001). There were significant differences in richness and abundance along the decomposition, the dark putrefaction stage attracted the most diversity while dry stage, the most abundant. Necrobia rufipes and Dermestes maculatus (necrophagous) were present in higher abundance in the advanced stages of decomposition. The addition of a decomposing carcass causes an increase in a local population of beetles and affects the community structure. The colonization begins soon after death and the species overlap along the decomposition stages.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-06-15T14:13:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Roberta Luiza Salgado Oliveira BCentral.pdf: 1516470 bytes, checksum: 15f8bd93e354db3b3b15a90212d5290b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-15T14:13:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Roberta Luiza Salgado Oliveira BCentral.pdf: 1516470 bytes, checksum: 15f8bd93e354db3b3b15a90212d5290b (MD5) Previous issue date: 2012-02-28 / FACEPE / A fauna encontrada em carcaças animais é composta por pequenos invertebrados, que possuem a necessidade de descobrir, colonizar e usufruir rapidamente deste substrato. Este trabalho descreve o primeiro inventário sistematizado de dípteros necrófagos em um ambiente de Caatinga, bioma exclusivamente brasileiro e sujeito a temperaturas altas, umidade e pluviosidade baixa. Utilizando como modelo três carcaças de suínos, 15 kg cada um, depositada dentro de uma armadilha modificada de Shannon. As coletas foram realizadas em uma área conservada de Caatinga no município de Serra talhada, estado de Pernambuco, em abril e maio/2010. Insetos adultos foram coletados diariamente utilizando com redes entomológicas, do primeiro dia depois da morte até a completa esqueletização da carcaça. A decomposição foi dividida em cinco fases: fresca (1 dia), inchada (2 dias), decomposição ativa (4 dias), decomposição avançada (5 dias) e seco (14 dias). Foram coletadas 19, 736 adultos pertecentes a 20 familias o qual dez possuem registro prévio de necrofagia, abrangendo 57% do total de abundância e 59% do total de riqueza. A família necrófaga mais abundante foi Calliphoridae (47,3% dos espécimes), Sarcophagidae (20,8%) e Muscidae (15,5%). As espécies mais abundantes com hábitos necrófagos foram Cochliomyia macellaria (25,4% do total de indivíduos necrófagos), Chrysomya albiceps (22,3%) (Calliphoridae) e Musca domestica (15,1%) (Muscidae). Embora estágios iniciais de decomposição sejam associados com alta abundancia de indivíduos necrófagos, uma lata riqueza foi registrada nos estágios finais. A abundância de C. macellaria e Chloroprocta idioidea parecem estar associada com uma preferência por ambiente selvagem. Relatamos pela primeira vez a presença da espécie invasora C. albiceps na Caatinga, embora sua proporção na assembléia não foi tão dominante como registrado para outras áreas neotropicais. É possível inferir que, apesar das duras condições ambientais na Caatinga, o bioma abriga uma rica assembléia de dípteros necrófagos que desempenham um papel fundamental na decomposição da matéria animal. / The fauna found in animal carcasses consists of small invertebrates, which have the need to discover, colonize and rapidly take advantage of this substrate. This paper describes the first systematic inventory of necrophagous Diptera in an environment of Caatinga biome of Brazil and exclusively subjected to high temperatures, low humidity and rainfall. Using as a model three carcasses of pigs, 15 kg each, placed inside a modified Shannon trap. Field trials were performed in a preserved area of caatinga in the municipality of Serra Talhada, State of Pernambuco, in April and May/2010. Adult insects were collected daily using entomological nets, from the first day after death until the complete skeletonization of the carcass. Decomposition was divided into five stages: fresh (1 day), bloated (2 days), active decay (4 days), advanced decay (5 days) and dry (14 days). We collected 19.736 adults belonging to 20 families of which 10 have previous register necrophagy, and make up 57% of total abundance and 59% of total richness. The most abundant necrophagous families were Calliphoridae (47,3% of specimens), Sarcophagidae (20,8%) and Muscidae (15,5%). The most abundant species with necrophagous habits were Cochliomyia macellaria (25,4% of total necrophagous individuals), Chrysomya albiceps (22,3%) (Calliphoridae) and Musca domestica (15,1%) (Muscidae). Although early stages of decomposition were associated with higher abundance of necrophaguos individuals, a higher richness was registered at the final stages. The abundance of C. macellaria and Chloroprocta idioidea seems to be associated with a preference for wild environment. We report for the first time the presence of the invasive species C. albiceps in the caatinga, although its proportion in the assemblage was not as dominant as registered for other Neotropical areas. It is possible to infer that despite the harsh environmental conditions at the Caatinga, this biome harbours a rich assemblage of necrophagous Dipterans that play a key role in animal matter decomposition.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-07-19T13:40:55Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) tese final.pdf: 4052323 bytes, checksum: 74297c119131b87a26908be1d213027a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-19T13:40:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) tese final.pdf: 4052323 bytes, checksum: 74297c119131b87a26908be1d213027a (MD5) Previous issue date: 2015-12-01 / CAPEs / O uso de insetos visando responder aos quesitos levantados em investigações criminais ganhou espaço nas últimas décadas entre os pesquisadores e profissionais desta área, assim como a combinação de técnicas de genética forense para a obtenção de DNA humano a partir destes organismos, em especial dos dípteros necrófagos. Desse modo, neste estudo objetivou-se obter e testar um protocolo de identificação de DNA humano extraído a partir de larvas de dípteros coletadas em cadáveres no Instituto de Medicina Legal de Pernambuco Antonio Persivo Cunha (IMLAPC/PE). Inicialmente, espécimes imaturos foram coletados no IMLAPC/PE e criados em dieta a base de carne moída bovina para possibilitar a identificação da espécie mais abundante e frequente que se cria neste substrato. A espécie Chrysomya albiceps (Diptera: Calliphoridae) foi selecionada como modelo experimental. Grupos de larvas dessa espécie foram submetidos a uma dieta baseada em carne moída e sangue humano por 48 horas, dissecadas e submetidas a extração de DNA, utilizandose duas metodologias comumente adotadas pelos laboratórios de genética forense: Kit DNA IQ™ e Método Fenol-Clorofórmio. O DNA extraído foi quantificado através de Nanodrop® e Real-Time PCR 7500 com uso do Quantifiler® Duo DNA Quantification. Para amplificação do DNA foram usados os kits para STR (short tandem repeats): AmpFℓSTR® Identifiler® Plus PCR Kit, Argus X-12® Kit e PowerPlex® Fusion System kit. As amostras amplificadas foram analisadas por eletroforese capilar em ABI PRISM 3500, permitindo observar que, para os kits utilizados houve perfis íntegros e compatíveis com a amostra referência, a partir da extração com kit DNA IQ™ e/ou método Fenol- Clorofórmio. Além disso, foram testados quatro meios de armazenagem comumente utilizados em zoologia: etanol 70%, etanol 95%, formol 4% e via seca. Após 24 horas de armazenagem, as amostras foram submetidas aos processos de análise de DNA e o formol 4% apresentou os melhores perfis de DNA. O fato de haver perfis passíveis de comparação confirma a utilidade das larvas de dípteros usadas para este fim, as quais podem futuramente ser usadas para correlacionar perfis genéticos com uma cena criminal. O aprimoramento destas técnicas é necessário para que o uso das larvas de dípteros muscóides com emprego para a entomogenética tenha mais difusão entre os meios acadêmico e forense. / The use of insects for investigations has gained ground in recent decades among researchers and criminal professionals. Recently, the use of these animals has been combined with forensic genetics techniques for obtaining human DNA from these. Among the main focus groups for this technique are the carrion flies that have the host DNA extracted from intestinal contents. Because the visibility of this branch of forensic biology, this study aimed to obtain and test a protocol for identifying human DNA extracted from larvae of Diptera at the Instituto de Medicina Legal de Pernambuco Antonio Persivo Cunha (IMLAPC/PE). The species Chrysomya albiceps (Diptera: Calliphoridae) was selected as an experimental model. Groups of larvae of this species were subjected to diet ground meat and human blood for 48 hours, dissected and subjected to DNA extraction using two methods commonly used by forensic genetics laboratories: DNA IQ™ Kit and Method phenol-chloroform. The extracted DNA was quantified by Nanodrop® and Real-Time PCR 7500 with use of Quantifiler® Duo DNA Quantification. For DNA amplification kits for STR (short tandem repeats) were used: AmpFℓSTR® Identifiler® Plus PCR Kit, Argus X-12® Kit and PowerPlex® Fusion System kit. The amplified samples were analyzed by capillary electrophoresis in ABI PRISM 3500, allowing to observe for kits used there have upright profiles and compatible with the reference sample, from the IQ™ DNA extraction kit and/or phenol-chloroform method. In addition, four storage means commonly used in zoology were tested: 70% ethanol, 95% ethanol, 4% formaldehyde and dry. After 24 hours of storage, the samples were submitted to DNA analysis processes and the 4% formaldehyde DNA showed the best profile. The fact that there be comparable profiles confirms the usefulness of dipteran larvae used for this purpose, which can further be used to correlate genetic profiles and a criminal scene. The improvement of these techniques is required for the use of larvae dipterae with employment for the entomogenetics have more diffusion among academic and forensic means.

Submitted by Natalia de Souza Gonçalves (natalia.goncalves@ufpe.br) on 2016-09-23T12:27:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Bárbara - Dissertação (1).pdf: 1256778 bytes, checksum: f7860c2ccf9b24ebb97f4ef0f9969fa5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-23T12:27:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Bárbara - Dissertação (1).pdf: 1256778 bytes, checksum: f7860c2ccf9b24ebb97f4ef0f9969fa5 (MD5) Previous issue date: 2016-03-11 / CNPq / A Entomologia Forense é a aplicação de insetos, ácaros e outros artrópodes em investigações criminais. Na Medicina Legal, sua principal aplicação é na elucidação de crimes violentos. Para tanto, faz-se necessária a correta identificação das espécies, o que, por muitas vezes é uma tarefa difícil, principalmente na fase larval por apresentarem poucas diferenças morfológicas. Tendo em vista esta dificuldade para identificação, o presente trabalho objetivou identificar através de técnicas de biologia molecular espécimes imaturos de dípteros com interesse forense. Foram coletados dípteros imaturos em dez cadáveres decompostos recém-admitidos aos Serviços de Medicina Legal dos estados da Paraíba e Pernambuco. O DNA foi isolado a partir da técnica de extração orgânica. Em seguida, foram realizadas reações de amplificação e sequenciamento de um segmento do gene citocromo B. As sequências foram identificadas através da busca por homologia contra sequências depositadas no GenBank a partir do BLASTn; os grupos monofiléticos foram agrupados através do modelo K2P, conduzidos no programa MEGA e a diversidade genética estimada no DNAsp. Por meio das análises foi possível identificar seis espécies pertencentes a três famílias, estando a espécie Chrysomya albiceps presente em seis cadáveres decompostos; as análises de diversidade genética para C. albiceps revelaram baixo polimorfismo, propondo ausência de barreiras genéticas entre as populações. Conclui-se que o marcador é eficiente para a identificação de espécies, no entanto para diversidade genética faz-se necessária a utilização de marcadores alternativos. / Forensic Entomology is the application of insects, mites and other arthropods in criminal investigations. In Legal Medicine, its main application is in the elucidation of violent crimes. Therefore, the correct identification of the species is needed, which in is often a difficult task, especially in the larval stage when they have little morphological differences. In view of this difficulty in identification, this study aimed to identify, by molecular biology techniques, immature specimens of Diptera with forensic interest. Were collected immature Diptera in ten decomposing corpses newly admitted to the Legal Medicine Services of the states of Paraiba and Pernambuco. DNA was isolated from the organic extraction method with phenol-chloroform. Then, were performed amplification and sequencing reactions in a segment of the cytochrome B gene. The sequences were identified by homology search against sequences deposited in GenBank throught BLASTn; the monophyletic groups were grouped by the K2P model, conducted in the MEGA program and the genetic diversity estimated in DNAsp. Through the analysis was possible to identify six species belonging to three families, being the kind Chrysomya albiceps present in six decomposing corpses; the analysis of genetic diversity for C. albiceps showed low polymorphism, suggesting the absence of genetic barriers between populations. It concludes that the marker is effective for identifying species, however for genetic diversity is necessary the use of alternative markers.

Orientador: Odair Benedito Ribeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T23:07:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moretti_ThiagodeCarvalho_M.pdf: 4612356 bytes, checksum: 7362c6da7a5ec7b1bd039076672a68d2 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Embora estudos do destino post-mortem de cadáveres humanos sejam de interesse forense, e na natureza grandes animais se tomem disponíveis à colonização por insetos logo após a morte, o destino do vasto número de carcaças de animais pequenos em alguns habitats, bem. como os parâmetros que conduzem este processo, ainda são pouco estudados. Em vista deste quadro, foram conduzidos estudos sobre a decomposição de carcaças de pequenos roedores em uma área de vegetação secundária dentro do campus da Universidade Estadual de Campinas - UNICAMP (22°49'15"S, 47°04'08"W) na cidade de Campinas - SP (Brasil), de agosto de 2003 a junho de 2004, para analisar a composição da fauna de invertebrados que visitam e colonizam os cadáveres. Quatro carcaças de camundongo de laboratório (Mus musculus) e quatro carcaças de rato (Rattus norvegicus) foram expostas em cada estação, durante o período acima estabelecido. As carcaças foram acondicionadas em aparato adequado para coleta de insetos imaturos e adultos. No curso da decomposição das 32 carcaças, foram coletados 6514 exemplares (820 adultos e 5694 imaturos) de 53 espécies de artrópodes pertencentes às famílias Sarcophagidae, Calliphoridae, Muscidae, Fanniidae, Syrphidae, Richardiidae, Sepsidae, Micropezidae, Otitidae, Drosophilidae, Phoridae, Dolichopodidae, Anthomyiidae, Asilidae e Lauxaniidae (Diptera), Formicidae, Ichneumonidae, Encyrtidae e Apidae (Hymenoptera), Staphylinidae (Coleoptera) e Gonyleptidae (Opiliones). As espécies colonizadoras mais abundantes foram Luci/ia eximia (Wiedemann, 1819) (Diptera: Calliphoridae), bem como as espécies de Sarcophagidae Pec/da (pattonella) intermutans (Walker, 1861) e Sarcophaga (Liopygia) ruficornis (Fabricius, 1794), as quais são raramente vistas criando-se em carcaças de grandes animais. Este comportamento pode sugerir uma especialização destas espécies em colonizar carcaças pequenas, possivelmente como estratégia de escape à competição com outras espécies de dípteros necrófagos em carcaças de grandes animais / Abstract: Although studies of the post-mortem fate of human corpses are of forensic interest, and in natural environments large animals become available to insect colonization soon after death, the fate of the vast number of small carcasses in some habitats, as well as the parameters that lead this process, are not objective of important investigations. Due to this situation, decomposition studies of small rodent carcasses were conducted in a secondary wood area within the Campus of Campinas State University - UNlCAMP (22°49' 15"S, 47°04'08"W) in the municipality of Campinas (Brazil), fTom August 2003 to June 2004, to analyze the composition of the local carrion visiting and colonizing invertebrate fauna. Four laboratory mouse carcasses (Mus musculus) and four rat carcasses (Rattus norvegicus) were exposed in each season, during the set period. AlI the carcasses were placed in an iron-mesh cage, which was adequate to collect adult and immature insects. In the course of the decomposition of the 32 rodent carcasses, 6514 specimens (820 adults and 5694 immatures) of 53 aqhropod species fTom the families Sarcophagidae, Calliphoridae, Muscidae, Fanniidae, Syrphidae, Richardiidae, Sepsidae, Micropezidae, Otitidae, Drosophilidae, Phoridae, Dolichopodidae, Anthomyiidae, Asilidae and Lauxaniidae (Diptera), Formicidae, Ichneumonidae, Encyrtidae e Apidae (Hymenoptera), Staphylinidae (Coleoptera) and Gonyleptidae (Opiliones) were collected. The most abundant species breeding on the carcasses were Lucilia eximia (Wiedemann, 1819) (Diptera: Calliphoridae) and some Sarcophagidae species, such as Pec/da (pattonella) intermutans (Walker, 1861) and Sarcophaga (Liopygia) ruficomis (Fabricius, 1794), which are rarely seen breeding on carcasses of large animals. This behavior can suggest a specialization of these species in colonizing small carcasses, possibly an attempt to avoid competition with other species of necrophagous Diptera in carcasses of large animals / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Parasitologia

Orientador: Aricio Xavier Linhares / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T18:18:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soto_DoraAmparoEstrada_D.pdf: 2535722 bytes, checksum: 550a33ae626a5a9a30ff32773e785904 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A Entomologia Forense utiliza dados de desenvolvimento e aspectos ecológicos de insetos necrófagos com o objetivo de auxiliar as investigações criminais, entre outros, no cálculo da estimativa do intervalo pós-morte (IPM). Igualmente, pode-se caracterizar a causa da morte quando essas drogas são detectadas em insetos imaturos que se alimentam dos corpos em decomposição. Além disso, os insetos podem servir como uma ferramenta alternativa para análises toxicológicas na ausência de tecidos e fluídos coletados habitualmente para este fim. Trabalhos recentes têm demonstrado que a presença de drogas ou toxinas em tecidos em decomposição pode alterar a taxa de desenvolvimento de insetos que usam este recurso como fonte alimentar. A ausência de conhecimentos dos possíveis interferentes no ciclo biológico pode gerar dados imprecisos sobre a idade do inseto, o que prejudicaria a estimativa do IPM. O ramo da Entomologia Forense que estuda os aspectos acima mencionados é denominado Entomotoxicologia. Rotineiramente, é necessário fazer testes preliminares em laboratório com dieta artificial e com certas substâncias para criar um banco de dados que possa ser útil como um padrão para investigar e quantificar as modificações que podem ocorrer com insetos coletados numa cena criminal. O objetivo principal deste estudo foi observar o efeito dos barbitúricos, fenobarbital (Gardenal®) e tiopental (Thiopentax®) em diferentes dosagens no desenvolvimento de imaturos de três espécies de califorídeos ¿ Chrysomya albiceps (Wiedemann), Chrysomya megacephala (Fabricius) e Chrysomya putoria (Wiedemann) (Diptera). Foi observado que os dois barbitúricos afetaram significativamente o desenvolvimento larval das três espécies, sendo que na maior dosagem a taxa de mortalidade foi elevada e na menor, o desenvolvimento retardou em até duas vezes, quando comparado ao grupo controle (sem adição de substância química). O conhecimento da ação destes barbitúricos no desenvolvimento dos imaturos dessas espécies de interesse forense pode contribuir para evitar erros no cálculo da estimativa do IPM. Também foi avaliada a taxa de desenvolvimento de Chrysomya albiceps (Wiedemann) e Chrysomya megacephala (Fabricius) (Diptera) criadas em diferentes dietas artificiais contendo tecidos de origem animal e comparadas a uma dieta já descrita em literatura, a qual não contém tecido animal, e a um grupo controle, onde foi usada somente a carne moída. A eficiência de cada dieta foi observada levando em conta o ganho de massa dos imaturos, o tempo de desenvolvimento larval, a taxa de sobrevivência de pupas e adultos, o intervalo de emergência e o tamanho dos adultos. Assim, foi proposta uma nova dieta artificial proporcionando uma melhor uniformidade para a adição de drogas e sobrevivência das espécies estudadas, tornando mais eficiente a criação e os testes biológicos com os dípteros necrófagos em laboratório / Abstract: The Forensic entomology utilizes developmental data and ecological aspects of necrophagic insects with the aim of helping criminal investigations, being able to, for instance, estimate the post mortem interval (PMI). Likewise, the death cause may be detected when these drugs are detected in immature insects from the same substrate. Besides, the insects can work as an alternative tool for toxicological analyses in the absence of tissues and fluids usually collected for this purpose. Recent investigations have been demonstrating that the presence of drugs or toxins in decomposing tissues may alter the development rate of insects that use such resource as a food substrate. The non-observance of this knowledge may lead to imprecise conclusions on the insect age, producing mistakes on the PMI estimative. This field of forensic entomology is named entomotoxicology. On routine basis, laboratory preliminary tests using artificial diet and certain substances are necessary to create a data bank that could be useful as a pattern to investigate and quantify the modifications that may occur with insects collected from death scenes. The present study aimed to verify the effect of the barbiturics phenobarbital (Gardenal®) and thiopental (Thiopentax®) in three concentrations, in the development of immatures of three Calliphoridae species ¿ Chrysomya albiceps (Wiedemann), Chrysomya megacephala (Fabricius) and Chrysomya putoria (Wiedemann) (Diptera). The barbiturics significantly affected the larval development of the three species, when the highest mortality rate occurred with the highest concentrations, and in the other concentrations the development retarded twice as much compared to the control group (without chemic substance). The knowledge on the action of these barbiturics in the immature development of these species of forensic interest can contribute to minimize the errors in the estimative of the PMI. A comparison of the developmental rate of the blowflies Chrysomya albiceps (Wiedemann), and Chrysomya megacephala (Fabricius) (Diptera) reared on: a) artificial diets containing animal tissues; b) artificial diet without animal tissue; and c) a control group (which contained only meat) was thus carried out. The efficiency of each diet was evaluated by observing the gain of immatures¿ weight, larvae developmental time, viability percentage obtained from pupae and adults, emergence interval and adult size. To make the rearing and biological tests with the necrophagic dipterans in laboratory more efficient, a new artificial diet was proposed, leading to a better uniformity and increased survivorship of the species studied. / Doutorado / Parasitologia / Doutor em Parasitologia