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Organização cromatinica, fragmentação de DNA e morte celular em eritrocitos circulantes de algumas especies de serpentesMiyamoto, Maristela 08 January 2003 (has links)
Orientador: Maria Luiza Silveira Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:39:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2003 / Resumo: A freqüência e a intensidade de fragmentação do DNA, relacionadas à morte celular programada, variam nos eritrócitos nucleados dos vários vertebrados. Como os dados de fragmentação de DNA em répteis são escassos, no presente trabalho foram estudados eritrócitos de serpentes (Crotalus durissus terrificus, Bothrops jararaca, B. alternatus e B. neuwiedii) em termos de fragmentação de DNA relacionada à supraorganização da cromatina e morte celular. O estudo foi estendido a espécimes de C. d. terrificus infectados por Hepatozoon sp.. Foram realizados análise de imagem da cinética de hidrólise de Feulgen, ensaio de TUNEL, ensaio Cometa e observações em microscopia eletrônica de transmissão. Poucos eritrócitos foram encontrados em morte celular. O DNA das serpentes, especialmente de C. d. terrificus e B. neuwiedii, mostrou ser mais resistente à hidrólise ácida de Feulgen e à fragmentação do DNA pelo ensaio TONEL, quando comparados ao anfíbio Rana catesbeiana. Dados de ensaio Cometa mostraram que B. neuwiedii também teve menor fragmentação de DNA, enquanto C. d. terrificus apresentou maior freqüência de células com danos, talvez por abundância de sítios álcali-sensíveis em seu DNA e não por fragmentação de DNA ligada à morte celular. A ultraestrutura dessas células sugere alguma atividade metabólica devido à presença de mitocôndrias, Complexos de Golgi e nucléolo. B. jararaca e B. alternatus apresentaram diferenças na fragmentação de DNA/morte celular quando comparados com C. d. terrificus e B. neuwiedii, sugerindo-se relação com especiação selecionada por diferentes hábitats. Nos espécimes infectados foram encontrados eritrócitos infectados e não-infectados pelo protozoário. A presença de Hepatozoon sp. como parasita em serpentes, inclusive no interior dos eritrócitos circulantes, induz um aumento da fragmentação de DNA em C. d. terrificus induzindo células, inclusive não infectadas, à morte celular / Abstract: The frequency and intensity of the DNA fragmentation, related to programmed cell death, varies in nucleated erythrocytes of various vertebrates. As data on DNA fragmentation in reptiles are scarce, in the present work erythrocytes of snakes (Crotalus durissus terrificus, Bothrops jararaca, B. alternatus and B. neuwiedii) were studied in terms of DNA fragmentation related to chromatin supraorganization and cell death. The study was extended to C. d. terrificus specimens infected by Hepatozoon sp. Image analysis of Feulgen hydrolysis kinetics, the TONEL assay, the single cell gel electrophoresis, and electron microscopy observations were undertaken. A few circulating erythrocytes were found committed to cell death. The snake's DNA, especially of C. d. terrificus and B. neuwiedii, showed to be more resistant to the Feulgen acid hydrolysis and to the DNA fragmentation revealed by the TONEL assay, when compared to the amphibian Rana catesbeiana. Data on the Comet assay showed that B. neuwiedii had less DNA fragmentation, although C. d. terrificus showed more frequency of damaged cells, perhaps of due to abundance of alkali-sensitive DNA sites and not to the DNA fragmentation related to the cell death. The ultrastructure of these cells suggested a certain cell metabolic activity due to the presence of mitochondria, Golgi complexes and nucleolus. B. jararaca and B. alternatus showed differences in DNA fragmentation/cell death as compared to C. d. terrificus and B. neuwiedii, possibly related to the selected speciation by the different habitas. In the infected specimens erythrocytes were found infected and non-infected by the protozoon. The presence of Hepatozoon sp. as a snake parasite, inclusive inside the circulating erythrocytes, induces increase in the DNA fragmentation of C. d. terrificus erythrocytes even of non-infected cells, to cell death / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Ação das drogas trifluoperazina e papaverina e do estresse oxidativo em eritrocitosRuggiero, Ana Celia 19 July 2018 (has links)
Orientadora: Nilce Correa Meirelles / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T21:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1994 / Resumo: As drogas fenotiazínicas são amplamente utilizadas clinicamente como neuroléticos e antipsicóticos. A interação dessas drogas com a membrana eritrocitária induz a mudanças na forma bem como na permeabilidade do eritrócito. A atividade biológica dos fenotiazínicos pode perturbar a estrutura da membrana por ligação direta com os lipídios ou pela interação com as proteínas, perturbando a interação lipídio-proteína. Nesse trabalho estudamos o efeito de duas drogas de efeitos clínicos diversos e de estruturas químicas diferenciados, a trifluoperazina, um derivado fenotiazínico e a papaverina, um vaso dilatador inespecífico (Goodman & Gilman, 1975), sobre os eritrócitos. Através de medidas supressão de fluorescência, dos resíduos de triptofano das proteínas da membrana eritrocitária, em suspensões de ghosts, causada pela sonda de membranas ANS, observamos que a trifluoperazina interage com as proteínas da membrana eritrocitária. Nessa interação ocorre um rearranjo na membrana, expondo os resíduos de triptofano das proteínas da membrana, ao meio mais hidrofílico alterando de alguma forma a interação lipídio-proteína. Além disso, através de medidas de Ressonância Paramagnética Eletrônica com marcadores de spin derivados do ácido esteárico verificamos um aumento na fluidez da membrana, pela ação da trifluoperazina. Em condições semelhantes, a papaverina, apresentou efeitos discretos sobre a fluidez da membrana, não sendo possível assinalar alterações na ordem ou mobilidade da membrana eritrocitária. Em ghosts isolados de eritrócitos depletados de ATP ou em suspensões de células íntegras depletadas também foram detectadas alterações, na fluidez da membrana, sendo que essas modificações não parecem estar relacionadas a regiões específicas da membrana eritrocitária. Numa segunda abordagem, avaliamos o efeito da TFP sobre a oxidação da hemoglobina provocada por peróxido de hidrogênio. Nos processos oxidativos a que a Hb foi submetida pelo peróxido de hidrogênio obtivemos um efeito protetor da TFP. Esse efeito é mais evidente para a hemoglobina oxigenada (oxiHb). A TFP se liga à oxiHb, protegendo a proteína da ação do peróxido de hidrogênio, antes da formação de qualquer intermediário, sendo que somente 10% da quantidade relativa inicial da Hb é transformada nas espécies oxidadas: meta e ferrilHb / Abstract: Phenothiazines drugs are mainly used as neuroleptics and antihistamines. These drugs disturb biological membranes, modifying the form and permeability of the membranes. Biologically active phenothiazines may perturb membrane lipid structure through two possible mechanisms, a direct interaction of the drug with membrane proteins, reflected in the lipid bilayer, and a perturbation of lipid structure that leads to perturbation of proteins via lipidprotein interactions. In this work we studied the effect of two drugs with different clinical and chemical structure: trifluoperazine (TFP) a phenothiazine derivative, and papaverine, an inespecific vasodilator (Goodman & Gilman, 1975), upon erythrocytes. Measurements of the quenching of tryptofan residues of the proteins of the erythrocyte membrane, by ANS, a membrane probe, proved that TFP interactes with membrane proteins of the erythrocytes membrane. In this interaction, a change in the protein were tridimensional arranjement exposes the tryptophan residues to a more hydrofilic region, and caused changes on the lipid-protein interaction of the erythrocyte membrane. Also the membrane fluidity in increase, as demonstrated by spin labeliing, Eletron Paramagnetic Ressonace experiments. At the same conditions papaverine was demonstrated, papaverine demonstrated a slight effect, that can not be assigned to a change in the membrane tluidity. In the ghosts depletead from A TP or in suspensions ot erythrocytes (also submited to the ATP depletion) we found alterations in the membrane fluidity. This changes seens to be different, dependig on the membrane regions, as seeen by EPR experiments. Hemoglobin, treated with TFP, and submited to the action ot hydrogen peroxide, showed a protective effect of this phenothiazine drug on its oxidation, this effect being more pronounced for oxigenated Hb (oxiHb). TFP interacts with Hb and protect the protein from the peroxide action, before the formation of any intermediary species. Only 10% of the Hb was transformed in the oxidated species: meta and ferril Hb / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas
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Antioxidantes como aditivos para concentrados de hemácias: propriedades bioquímicas e avaliação biomecânica por pinças ópticasSILVA, Carlos Antônio Lima da 06 February 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-02-06 / FACEPE / Os eritrócitos sofrem alterações bioquímicas e biomecânicas ao longo do período de armazenamento para fins transfusionais, que têm sido associadas ao estresse oxidativo. As soluções preservantes atuais suprem em geral as necessidades energéticas, mas ainda precisam de aditivos antioxidantes mais eficazes. Neste sentido, a fim de prevenir, ou atenuar, o estresse oxidativo ao longo do armazenamento de concentrados de hemácias (CHs), na tentativa de diminuir tais alterações celulares, nesse trabalho foi avaliada a ação dos antioxidantes: vitamina E e polifosfato de sódio. A vitamina E, encontrada nas membranas biológicas, atua prevenindo a lipoperoxidação. Já os polifosfatos são polímeros hidrofílicos associados à resistência ao estresse oxidativo nos seres vivos, e a propriedades tamponantes e bioenergéticas. Primeiramente, os CHs foram divididos em duas partes e, posteriormente, uma delas foi pré-tratada de forma asséptica, com vitamina E ou polifosfato de sódio e a outra foi usada como controle. A vitamina E foi emulsionada com os Tweens 20 e 80, em SAG-Manitol (SAG-M) de forma a atingir uma concentração final de 0,2 mg/mL por CH. As caracterizações das emulsões mostraram a existência de partículas na escala nanométrica e confirmaram a presença de vitamina E estruturalmente intacta na formulação preparada. Os resultados de produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), avaliada por DCFH-DA indicaram uma diminuição relativa na produção de ROS de pelo menos 35% durante o armazenamento. A elasticidade dos eritrócitos foi em seguida avaliada usando pinças ópticas e os resultados mostraram que a capacidade de deformação dessas hemácias não diferiu significativamente do controle durante todo o armazenamento, possivelmente pela atuação da vitamina E ser mais localizada nos fosfolipídeos, uma vez que a oxidação das proteínas do citoesqueleto eritrocitário vem mostrando ser um fator mais crítico para a deformabilidade. Enquanto isso, eritrócitos estocados tratados com polifosfato de sódio (n = 9), na concentração de 0,4 mg/mL apresentaram uma deformabilidade ca. 25% maior quando comparados com o controle, na 5ª semana de armazenamento. A literatura também indica que polifosfatos podem acelerar a coagulação sanguínea. No entanto, as análises dos tempos de tromboplastina parcialmente ativada e de protrombina demonstraram que ao aumentar a concentração de polifosfato de sódio, o tempo de coagulação cálcio dependente também tende a aumentar e não o contrário. Os resultados do controle de qualidade dos CHs contendo polifosfato de sódio, ou as formulações de vitamina E, também não demonstraram alterações significativas quando comparados ao controle. Espera-se que a presente pesquisa possa fornecer suporte para uma compreensão mais profunda e fomentar discussões sobre os mecanismos e consequências da atividade de antioxidantes sobre CHs armazenados para transfusão. Além disso, um capítulo de revisão sobre a avaliação de propriedades biofísicas eritrocitárias utilizando pinças ópticas, aplicadas na hematologia e na hemoterapia, foi produzido. / Erythrocytes undergo biochemical and biomechanical changes throughout the storage period for transfusion purposes, which have been associated with oxidative stress. Current preservative solutions supply energy needs but still need effective antioxidant additives. In this sense, in order to prevent, or attenuate, the oxidative stress during the storage of packed red blood cells (pRBC), in an attempt to reduce such cellular alterations, the antioxidant actions of vitamin E and sodium polyphosphate was evaluated. Vitamin E, lipophilic, is found in biological membranes and acts to prevent lipoperoxidation. Polyphosphates, however, are hydrophilic polymers associated with resistance to oxidative stress in living organisms, and to buffering and bioenergetic properties. Firstly, pRBCs were divided into two parts, one of them was pre-treated aseptically with vitamin E or sodium polyphosphate and the other one was used as a control. Vitamin E was emulsified with Tweens 20 and 80 in SAG-Mannitol (SAG-M) to reach a final concentration of 0.2 mg/mL per pRBC. The characterizations of the emulsions showed the existence of particles on the nanometric scale and confirmed the presence of vitamin E structaly intact in the prepared formulation. The results of production of reactive oxygen species (ROS), evaluated by DCFH-DA, showed a relative decrease in the production of ROS of at least 35% during storage. The elasticity of the erythrocytes was then evaluated by optical tweezers and the results showed that the deformation capacity of these red blood cells did not differ significantly from the control throughout the storage, possibly because the action of vitamin E is more localized in the phospholipids, and the oxidation of erythrocyte cytoskeletal proteins has shown to be a major critical factor for deformability. Meanwhile, stored erythrocytes treated with sodium polyphosphate (n = 9) at a concentration of 0.4 mg/mL showed a deformability ca. 25% higher when compared to the control, in the 5th week of storage. The literature also indicates that polyphosphates can accelerate blood clotting. However, analyses of the activated partial thromboplastin and prothrombin times demonstrated that with the increasing of the sodium polyphosphate concentration, the calcium-dependent coagulation time also tends to increase, not decrease. The quality control results of pRBCs containing sodium polyphosphate, or vitamin E formulations, also did not show significant changes when compared to control. It is expected that the present research may provide support and encourage discussion for a deeper understanding of the mechanisms and consequences of antioxidant activity on stored RBCs for transfusion purposes. In addition, a review chapter on the evaluation of erythrocyte biophysical properties using optical tweezers, applied in hematology and hemotherapy, was also produced.
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Avaliação da variabilidade interobservadores da morfologia das hemácias no sedimento urinárioComerlato, Liriane January 2003 (has links)
Resumo não disponível
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Avaliação da variabilidade interobservadores da morfologia das hemácias no sedimento urinárioComerlato, Liriane January 2003 (has links)
Resumo não disponível
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Avaliação da variabilidade interobservadores da morfologia das hemácias no sedimento urinárioComerlato, Liriane January 2003 (has links)
Resumo não disponível
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Niveis de glutationa reduzida e atividade da catalase, superoxido dismutase e glicose-6-fosfato desidrogenase em individuos expostos ao vapor de mercurioPenna, Socrates Calvoso 11 December 1995 (has links)
Orientador: Sara T. O. Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-20T23:31:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1995 / Resumo: O Mercúrio (Hg) é empregado em diversas atividades humanas. A exposição primária ao metal ocorre através da alimentação contaminada e da liberação de mercúrio pelo amálgama dentário. A exposição ocupacional ao vapor de mercúrio, substância inodora e incolor, é hoje a via mais freqüente de intoxicação. O Hg associa-se fortemente aos grupamentos sulfidrilas (SH) presentes nas proteínas da membrana plasmática, enzimas, substâncias de baixo peso molecular, como a cisteína e glutationa, também pode formar ligações covalentes com o enxofre. Quando se liga aos eritrócitos, atua como um agente oxidante. O presente estudo teve o objetivo de avaliar o sistema antioxidativo eritrocitário através da medida da atividade da Superóxido Dismutase, Catalase e Glicose-6-Fosfato-Desidrogenase e da concentração da Glutationa Reduzida nos seguintes grupos de trabalhadores: Grupo 1 (Expostos) - 16 trabalhadores, sendo 14 do sexo masculino e 2 do feminino, expostos ao vapor de Hg por um período variá~el de 0.5 a 8 anos (3.37 :I: 2.40) na faixa etária de 18 a 48 anos (32:1: 8.86), e que apresentaram concentração urinária de Hg de 1.6 a 35 (10.73:1: 9.88) 1l9/g creatinima. Grupo 2 (Afastados) - 7 trabalhadores do sexo masculino(M) trabalhadores com idade variando de 42 a 61 (46.42:1: 8.61) anos afastados da exposição ocupacional há pelo menos 6 meses e que ficaram expostos ao metal por um período de 4 a 10 anos, apresentaram uma concentração urinária do metal 5.0 -19.1 1l9/g creatinima. Grupo 3 (controle Normais) - constituídos de 8 técnicos e alunos (6 do sexo masculino e 2 do sexo feminino) do Departamento de Hematologia e Farmacologia da FCM-UNICAMP, com idade variando de 22 a 45 anos, possuidores de próteses dentárias conténdo Hg , não expostos ocupacionalmente ao metal. Nestes indivíduos não foi avaliada a concentração urinária do Hg. Em todos os grupos foi realizado hemograma completo e no G1 também levamos a efeito a análise da presença de corpos de Heinz. Nossos resultados demonstram que a atividade da SOD do G1 e G2 apresentou-se igual à do grupo G3. Por outro lado, a atividade da Catalase do G1 está aumentada sigmificativamente quando comparada ao G2 e teve uma forte tendência de aumento quando comparada ao G3. Já os níveis de GSH estiveram reduzidos significativamente no grup? G1, mas normal no G2, quando comparados ao G3. Assim os resultados apresentados neste trabalho indicam que níveis urinários de mercúrio dentro do Limite de Tolerância Biológica podem comprometer o sistema antioxidante eritrocitário / Abstract: Mercury (Hg) is used in different human activities. The primary exposition to this metal has its origin from the ingestion of contaminated food and odontologic amalgam. The occupational exposure is the most frequent via in cantamination. Mercury tightly binds to sulfidric groups (SH) presenting cell membrane proteins, enzymes, and low molecular weight substances such as cistein and gluthation. It can form cavalent bonds with sulphur and acts as an oxidant agent when it binds to erythrocytes. The purpose of this study is to investigate the erythrocyte antioxidative system by measurement of Catalase, Superoxide Dismutase (SOD) , Gluthation (GSH) and Glicose-6-Phosphate Dehydrogenase activities in the following groups: Group 1 (EXPOSED)- 16 workers, 14 men and 2 women, exposed to mercury vapors over a period of 0.5 - 8 (3.37 :t 2.40) years. These individuais had 18-48 (32 :t 8.86) years and presented urinary concentrations of mercury lower than the Limit of Biological Tolerance (LBT) 35 - 1.6 (10.73 :t 9.88) ~g/g creatinin. Group 2 (No-EXPOSED)- 7 (M) workers with 42 - 61 ( 46.42 :t 8.61) years without occupational exposed ave r a period of 6 months. They were previously exposed to Hg for 4 to 10 years and presented urinary concentration of mercury of 5.0-19.1 ~g/g creatinin.' Group.3 (Normal controls)- composed by technicians and students, 6 men and 2 women, from the Department of Hematology and Pharmacalogy of the State University of Campinas, with 22 - 45 years. They had dental prothesis containing Hg and were not occupationally exposed to this metal. There were no urinary concentrations of mercury in these individuais. Hematologic analysis was carried out in ali the previous groups besides the detection of Heinz bodies. Our results demonstrate that the activity of SOD in exposed and non-exposed individuais presented the same values of the contrai group. Conversely the Catalase activity demonstrated an increasement in group 1 when compared with group 3 and a significantly augmented when compared to group 2. The levels of GSH were significantly reduced in group 1 and normal in group 2. We conclude that the urinary levels of mercury inside the Limit of Biological Tolerance can affect the erytrocyte antioxidant system / Mestrado / Mestre em Farmacologia
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Estudo sobre a participação dos eritrocitos na regulação da glicemia : armazenamento e mobilização de glicogenio em eritrocitos de ratos normais e diabeticos e suas relações com o metabolismo de carboidratos no figadoSilva, Carlos Alberto da 13 June 1997 (has links)
Orientador: Antonio Ari Gonçalves / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T05:48:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1997 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar in vivo e in vitro o conteúdo de glicogênio em eritrócitos de ratos, relacionando este conteúdo com as variações na concentração de glicose e/ou hormônios, tendo em vista a sua possível participação na homeostasia glicêmica. Por isso, estendemos este estudo aos eritrócitos de ratos diabéticos e aos efeitos de substâncias como a metformina e fenobarbital utilizadas no tratamento de diabéticos. Eritrócitos de ratos normais (in vivo e in vitro) aumentaram o conteúdo de glicogênio linearmente à elevação da glicemia e depletaram suas reservas durante a hipoglicemia. O conteúdo eritrocitário de glicogênio é maior na veia supra-hepática e nas artérias de que no ramo venoso. Em ratos submetidos a jejum durante 24h, as reservas eritrocitárias de glicogênio foram depletadas, mas recuperam-se parcialmente durante o jejum de 48 h, mostrando um comportamento idêntico ao dos hepatócitos. Em resposta a uma condição indutora de estresse (natação forçada durante 50 min), também houve depleção das reservas hepáticas e eritrocitárias de glicogênio. "In Vitro" a insulina não modificou o conteúdo de glicogênio dos eritrócitos. No entanto, hormônios glicogenolíticos promoveram intensa depleção das reservas; mesmo na presença de altas concentrações de glicose. Eritrócitos de ratos diabéticos, os quais, apresentam redução na captação e no metabolismo de glicose possuem baixo conteúdo de glicogênio e demonstraram baixa capacidade de incorporar glicose às reservas de glicogênio, in vivo e in vitro. Esta capacidade foi restabelecida parcialmente (in vivo e in vitro), pelo tratamento com fenobarbital ou com metformina. De maneira semelhante, o conteúdo de glicogênio no fígado de ratos diabéticos foi restabelecido. Os ratos controle e diabéticos tratados com metformina e fenobarbital não apresentaram redução na glicemia mostrando que o tratamento não induz hipoglicemia. Quanto à concentração plasmática de lactato, não observamos hiperlactatemia nos ratos tratados com metformina. Nossos resultados mostraram que os eritrócitos são importantes reservatórios de glicose, captando-a durante a passagem pelo fígado e distribuindo-a na periferia. Também foi demonstrado que as reservas eritrocitárias de glicogênio são sensíveis a ação dos hormônios glicogenolíticos, à semelhança do que ocorre nos hepatócitos. Esta propriedade dos eritrócitos pode ser importante durante a hipoglicemia. Este trabalho também mostrou diversas semelhanças entre hepatócitos e eritrócitos no que se refere ao metabolismo de carboidratos de ratos normais e diabéticos. A avaliação periódica do conteúdo de glicogênio eritrocitário poderia constituir um bom índice de avaliação das alterações metabólicas (particularmente dos carboidratos) em estudos ou tratamentos que requerem frequente retiradas de amostras e naqueles em que tais amostragens são postergadas para épocas de sacrifícios ou após a morte natural do animal ou sujeito / Abstract: The major objective in the development of this work was demonstrate that erythrocytes participates in the glycemic homeostasis. The following parameters was evalueted in erythrocytes: glucose consumption, glycogen storage, transport and mobilization and transport of lactate/pyruvate. The hepatic storage and mobilization of glycogen in certain condition was studied, too. In vivo, we showed that erythrocyte glycogen content changed according to glycaemia in vessels. Arteriovenous difference and difference between portal and suprahepatic veins in glycogen content is parallel to glycemia differences. These are evidencies for the occurrence of hydrolysis of glycogen and release to plasma when glycemia falls and that erythrocyte take glucose up and synthetize glycogen when crossing the liver. Also, we presented evidences for an exchange of lactate for glucose between erythrocytes and liver. In accordance to the results above mentioned, erythrocytes incubated in saline at 37°C increased, linearly, their content of glycogen with increase in extracellular glucose concentration and reduced it when glucose concentration diminished. 80th, charge and discharge are well correlated to extracellular glucose concentration (r = 0.942), similarly to that measured " in vivo". Stressing condictions, as 24h fasting or heavy exercise (50 min swiming) almost deplete the erythrocytes glycogen content. Those conditions also acutely deplete glycogen liver stores. This response is characteristic of erythrocytes because they responded " in vitro " to hyperglycemic hormones, glucagon (1 U/ml), adrenaline (200 ng.ml-1 noradrenaline (200 ng.ml-1) and corticosterone (22 µg.ml-1 reducing their content of glycogen, even in the presence of high glucose concentration. This resembles the hepatocytes response to the same hormones. On the other hand, insulin do not affect erythrocyte glycogen content. In contrast to normal, erythrocytes from aloxanized rats showed a pronouced reduction in their hability to store glucose as glycogen. This results suggest that glycogen synthesis is deficient in aloxanized rats, even in the presence of high glucose concentration. Metformin and phenobarbital, substances used as coadjuvant for the treatment of diabetes, also stimulated the accumulation of glycogen in diabetic erythrocytes, in vivo and in vitro. This is another similarity between liver and erythrocytes since those substances are known to recovery the hability of liver to sinthetize and store glycogen. Those data confirm in rats the effects observed in human liver. Our data demonstrated that glucose metabolism is defective in erythrocyte from diabetic rats, affecting both free and stored glucose metabolism. As shown in liver and skeletal muscle, this defect is reversed in erythrocytes by treatment with metformin or Phenobarbital / Doutorado / Fisiologia e Biofisica / Doutor em Ciências Biológicas
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Avaliação de um protocolo utilizado em um ambulatorio de nefrologia pediatrica na investigação de pacientes em hematuriaCarvalho, Neyla Liborio Pergentino 14 August 1997 (has links)
Orientador: Vera Maria Santoro Belangero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-22T16:03:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1997 / Resumo: A utilização de um protocolo de investigação de Hematúria foi avaliada após ser aplicado a 79 pacientes com queixa de hematúria que haviam sido encaminhados ao ambulatório de Nefrologia Pediátrica do HC-Unicamp no período de janeiro de 1986 à dezembro de 1992. Para investigação etiológica da hematúria foi seguido um protocolo previamente estabelecido, sendo excluídos os casos com evidências de Síndrome N efrítica ou N efrótica. Todos os pacientes apresentavam função renal normal e tinham idade entre 2 a 16 anos. Foram distribuídos em 2 grupos e foi possível o esclarecimento etiológico da hematúria em 61 casos: com hematúria de origem glomerular (Síndrome de Alport- 7, Nefropatia IgA- 4, Doença de Membrana Fina- 3, hematúria glomerular ainda não esclarecida- 5) e com hematúria de origem não glomerular (hipercalciÚfia- 45, hematúria associada à hiperuricosÚfia-2, hematúria não glomerular não esclarecida- 13). O tempo médio de investigação foi de 30,3 meses para hematúria de origem glomerular e . de 18,3 meses para hematúria não glomerular. Observou-se que a hematúria assintomátca foi mais frequente no grupo glomerular, enquanto hematúria sintomática foi mais comum no grupo não glomerular, sendo dor abd0minal a queixa mais referida. No grupo glomerular, 74% dos pacientes tinham antecedentes familiares de insuficiência renal crônica, hematúria e surdez, enquanto no grupo não glomerular 61% apresentavam história familiar de litíase renal. Após a utilização do protocolo de investigação pôde-se observar que os parâmetros que mais contribuíram para indicar a origem glomerular da hematúria foram os antecedentes familiares e a proteinÚfia 24 horas. Como exame de triagem, a avaliação do dismorfismo eritrocitário, no presente estudo, não demonstrou elevada sensibilidade / Abstract: The efficacy of a investigation protocol for hematuria was evaluated after being employed in 79 children with hematuria of a Pediatric Nephrology Unit, during the last six years (01/1986 to 12/1992). The patients diagnosed as having Nephrotic Syndrome or Nephritic Syndrome were excluded. It was possible to find 61 defmitive diagnostics during long-term evaluation (:1:30,2 months). The patients were divided in two groups. The first group included patients with glomerular hematuria and the other group patients with non glomerular hematuria. There were 7 cases of Alport's Syndrome, 4 of 19A Nephropathy and 3 cases of Thin -Membrane Nephropaty. Forty-five patients had hypercalciuria and 02 HyperuricosQria. A family history of renal failure, hematuria and hearing loss had a specificity and predictive value of 86,7% and 62%, respectively. The evaluation of urinary erythrocytes morphology showed sensibility of 36,7%. The RBCs casts in urinary sediment and presence of proteinuria showed . sensibility of 6,8% and 52,4% respective1y / Doutorado / Doutor em Pediatria
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Estudo do componente hemolitico da anemia do cancer : efeito do estresse osmotico e metabolico nos eritrocitos de ratos portadores de tumor de Walker 256Vido, Alessandra Archilha 30 November 2000 (has links)
Orientador: Tereza Cristina Samico Cavalcanti / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T23:36:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2000 / Resumo: A anemia do câncer é classificada como a anemia de doenças crônicas, embora às vezes seja o primeiro sintoma do câncer. Anemia do câncer inclui um componente hemolítico importante na fase terminal mesmo quando células transfundidas são destruídas rapidamente. A presença de um componente crônico e as complicações terminais da doença limita o estudo do componente hemolítico. o modelo multifocal (várias inoculações simultâneas de células tumorais de Walker 256) de crescimento tumoral foi usado aqui para simular a fase de disseminação metastática terminal. O componente hemolítico da anemia iniciou 3 4 dias após as inoculações em 100% dos ratos e após isto progrediu rapidamente: os níveis de Hb diminuíram de 14,9 :!: 0,02 para 8,7 :!: 0,06 g/dL entre os dias 7 e 11 e 5 vezes a taxa fisiológica normal em ratos) na ausência de hemorragia. O desenvolvimento de anemia foi correlacionado (r=O,86) com o desenvolvimento. de outros efeitos sistêmicos como a anorexia. Houve um decréscimo significativo na fragilidade osmótica dos eritrócitos circulantes: a concentração de NaCI que causou 50% lise foi reduzida de 4,52 :!: 0,06 para 4,10 !:: 0,01 g/L (P <0,01) no dia 7, indicando uma redução no volume dos eritrócitos. Porém, com moderado estresse metabólico (4h de incubação a 37°C), os eritrócitos mostraram um maior aumento na fragilidade osmótica que nos controles, sugerindo uma marcada alteração na homeostasia dos eritrócitos. Também foi observado aumento significativo na fragilidade osmótica das hemácias de ratos normais quando incubadas com o líquido ascítico (baixa concentração de glicose e provavelmente alta de moléculas produzidas pelo tumor). Outros resultados significativos encontrados foram o aumento do consumo de glicose e conteúdo de A TP das hemácias dos animais portadores de tumor em relação aos controles. Estes efeitos podem ser devido a alterações primárias na membrana plasmática (transporte elou permeabilidade elou pode ser secundário às mudanças metabólicas). Este modelo multifocal é adequado para o estudo do componente hemolítico da anemia do câncer visto que ele é rápido, altamente reprodutível e causa sofrimento mínimo ao animal / Abstract: Cancer anemia is an anemia of chronic diseases, although it is sometimes the first symptom of cancer. Cancer anemia includes a hemolytic component, important in the terminal stage YJhen even transfused cells are rapidly destroyed. The presence of a chronic component and the terminal complications of the iIIness limit studies of the hemolytic component. A multifocal model of tumor growth was here to simulate the terminal metastatic dissemination stage (several simultaneous inoculations of Walker 256 cells). The hemolytic component of anemia began 3-4 days afier inoculations in 100 % of the rats and progressed rapidly thereafier: Hb levels dropped 14.9 :f: 0.2 to 8.7 :f: 0.6 g/dL from days 7 to 11 e 5 times the physiological rate in rats) , in the absence of bleeding. The development of anemia wa correlated (r=0.86) with the development of other systemic effects such as anorexia. there was a significant decrease in the osmotic fragility to circulating erythrocytes: the NaCI concentration causing 50% Iysis was reduced from - 0.42 :f: 0.06 g/L, (P<0.01), on day 7, indicating a reduction in erythrocyte volume. However, with mild metabolic stress (4 h- incubation at 37°C), the erythrocytes showed a greater increase in osmotic fragility than the controls, suggesting marked alteration of erythrocyte homeostasis. It was also observed a significative increase in osmotic fragility of normal donors red blood cells YJhen incubated with ascitic liquid (Iow glucose concentration, and probably, a high concentration of molecules produced by tumor). These effects may be due to primary plasma membrane alterations (transports andlor permeability) and/or be secondary to metabolic changes. This multifocal model is adequate for studying the hemolytic component of cancer anemia since it is rapid, highly reproducible causes minimal animal suffering. Another observed significative results were the increase of glucose consumption and red blood cells ATP content in tumor bears animais / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular
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