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Ação imunomoduladora do esteroide dehidroepiandrosterona (DHEA) na resposta efetora de neutrófilos infectados in vitro por Salmonella enterica serovar Typhimurium / immunomodulatory action of steroid dehydroepiandrosterone (DHEA) in the effector response of neutrophils infected in vitro with Salmonella enterica serovar TyphimuriumBrauer, Verônica Soares 31 March 2016 (has links)
Dehidroepiandrosterona (DHEA) é um hormônio esteroide secretado pelas glândulas adrenais, gônadas e cérebro, que juntamente com sua forma sulfatada (DHEAS) constituem os esteroides mais abundantes da circulação. É um importante precursor para hormônios sexuais e exerce funções diretas sob diversos sistemas do corpo, dentre eles, o sistema imune. A relação entre sistema endócrino e imune já é bem estabelecida, tendo hormônios a capacidade de modular a resposta imune e vice-versa. Dentre os componentes da resposta imune, estão os neutrófilos, importantes células da imunidade inata que reconhecem e eliminam patógenos através de diversos mecanismos efetores como fagocitose, produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), desgranulação, neutrophil extracellular traps (NETs). Já é descrito que o avanço da idade é acompanhado pela redução dos níveis plasmáticos de DHEA, assim como a redução da atividade efetora de neutrófilo, podendo estes dois mecanismos estarem relacionados com estado de senescência e aumento da suscetibilidade de idosos à infecções. Porém, poucos estudos existem mostrando relação entre DHEA e neutrófilos. Desta forma, o objetivo do nosso trabalho, foi avaliar a influência do hormônio DHEA nas diversas funções efetoras de neutrófilos. Para tanto, neutrófilos humanos isolados do sangue periférico foram submetidos a um pré-tratamento com DHEA e infectado com Salmonella enterica serovar Typhimurium ou estimulados com LPS. Observamos que o tratamento prévio dos neutrófilos com 0,01 ?M de DHEA é capaz aumentar a fagocitose da S. Typhimurium, assim como aumento da atividade microbicida destas células. Para investigar o mecanismo pelos quais a capacidade microbicida foi aumentada, avaliamos a produção de EROs e formação de NETs. Curiosamente o hormônio não influenciou em nenhum destes processos. Então, por fim, avaliamos o perfil de produção de citocinas in vitro produzidas pelos neutrófilos tratados com DHEA e infectados com S. Typhimurium ou estimulados com LPS (lipopolissacarídeo). Nosso estudo mostrou que os neutrófilos infectados ou estimulados reduzem a produção de quimiocinas como IL-8, MIP-1? e MIP-1?, quando comparados aos neutrófilos sem tratamento. Em adição, neutrófilos tratados com esteroide e estimulados com LPS tiveram a produção de TNF-? reduzida, a produção da IL-4 foi aumentada nos neutrófilos tratados com DHEA e infectados e a relação entre IFN-?/IL-4 foi reduzida. Nossos dados mostram que o DHEA pode estar contribuindo para o controle da infecção por S. Typhimurium, principalmente através da fagocitose e killing intracelular. Apesar dos dados de citocinas mostrarem que o DHEA está direcionando a resposta de neutrófilos para um caráter menos inflamatório, acreditamos que este possa ser um mecanismo protetor ao organismo, a fim de evitar uma resposta inflamatória exacerbada que poderia causar lesões teciduais. Concluímos então, que o DHEA é um importante esteroide com atividades imunorreguladoras que podem estar contribuindo para o controle da infecção por S. Typhimurium, porém mais estudos são necessários para o entendimento dos mecanismos utilizados por este esteroide para modular a resposta de neutrófilos, células tão importantes ao organismo humano. / Dehydroepiandrosterone (DHEA) is a steroid hormone secreted by the adrenal glands, gonads and brain, which along with its sulfated form (DHEAS) are the most abundant circulating steroid. It is an important precursor to sex hormones and exerts direct roles in several body systems, including the immune system. The relationship between the endocrine and immune system is already well established, with the hormone modulating the immune response and vice versa. Among the components of the immune response, neutrophils are important innate immunity cells that recognize and eliminate pathogens through various effector mechanisms such as phagocytosis, production of reactive oxygen species (ROS), degranulation, neutrophil extracellular traps (NETs). It is reported that advanced age is accompanied by the reduction of plasma levels of DHEA as well as the reduction of the effector activity of neutrophils, these two mechanisms may be related to the state of senescence and increase in susceptibility of the elderly to infections. However, few studies exist showing the relationship between DHEA and neutrophils activity. Thus, the aim of our study was to evaluate the influence of the hormone DHEA in the several effector functions of neutrophils. To that end, human neutrophils isolated from peripheral blood were subjected to a treatment with DHEA and infected with Salmonella enterica serovar Typhimurium or stimulated with LPS (lipopolysaccharide). We observed that the treatment of neutrophils with 0.01 ?M of DHEA can increase phagocytic rates of S. Typhimurium, as well as increase the microbicidal activity of these cells. To investigate the mechanism by which the microbicidal capacity has been increased, we evaluated the production of ROS and formation of NETs. Interestingly the hormone did not influence in any of these processes. Then, we finally evaluated in the cytokine production profile produced by neutrophils treated in vitro with DHEA and infected with S. Typhimurium or stimulated with LPS. Our study showed that pré-treated and infected neutrophils or LPS-stimulated cells reduced the production of chemokines such as IL-8, MIP-1? and MIP-1? compared to untreated neutrophils. In addition, when steroid treated neutrophils were stimulated with LPS, a reduced TNF-? production was observed and the levels of IL-4 was increased in treated neutrophils with DHEA and infected with S. Typhimurium. The ratio of IFN-? / IL-4 was reduced. Our data show that DHEA may be contributing to the control of infection by S. Typhimurium, mainly by phagocytosis and intracellular killing. Although cytokines data show that DHEA is directing the neutrophil response to a less inflammatory response, and we believe that this may be a protective mechanism of the organism in order to avoid an exacerbated inflammatory response that could cause tissue damage to the body. We conclude then, that DHEA is a steroid with important immunoregulatory activities that may be contributing to the control of infection by S. typhimurium, but more studies are needed to understand the mechanisms used by this steroid to modulate neutrophil response, cells so important to the human body.
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Efeito do estresse oxidativo no espermatozoide e relação com o desenvolvimento embrionário / Effects of oxidative stress on spermatozoa and relationship with embryo developmentLetícia Signori de Castro 27 November 2014 (has links)
O status oxidativo do espermatozoide atua sobre ele de diferentes formas, desde a capacitação até a fecundação do oócito. No entanto, as espécies reativas de oxigênio (EROs) podem ser benéficas ou prejudiciais dependendo do contexto celular. Tendo em vista a baixa proteção antioxidante do sêmen criopreservado, associado às sucessivas manipulações que antecedem a fecundação in vitro, entender como esta célula se comporta em um ambiente oxidante e os impactos deste sobre o embrião é de suma importância. Com isto, o objetivo deste trabalho foi propor um modelo dose-dependente para o estudo do estresse oxidativo sobre o espermatozoide e possível impacto no desenvolvimento embrionário. Para isto, no experimento 1, palhetas de sêmen criopreservado de touros (n=5) da raça Nelore foram submetidas à incubação por 1 hora a 38,5 ºC e 5% CO2, com doses crescentes de peróxido de hidrogênio (0; 12,5; 25; e 50 µM). Ao final da incubação, os parâmetros de motilidade foram avaliados pelo sistema Computer Assisted System Analysis (CASA). No experimento 2, foram escolhidas duas doses de peróxido de hidrogênio com base nos resultados do experimento 1: alta (50 µM), baixa (12,5 µM) e também um controle (0 µM). Os espermatozoides foram incubados com as respectivas doses de peróxido de hidrogênio por 1 hora, e ao final da incubação foram utilizados para a fecundação in vitro (D=0). Neste experimento, além das análises do CASA, foram feitas avaliações do status oxidativo (CellROX® green e 2'-7'diacetato de diclorofluoresceína - DCFH), do potencial mitocondrial (JC-1), da cromatina (LA) e da capacitação espermática (clortetraciclina). Os embriões foram avaliados com relação à taxa de clivagem rápida (30 horas pós-inseminação), taxa de clivagem (D=3), taxa de desenvolvimento (D=5) e taxa de blastocisto (D=8). Para análise estatística foi utilizado o modelo de regressão polinomial, considerando p≤0,05. Tanto no experimento 1 quanto no experimento 2 houve detrimento dose-dependente do peróxido de hidrogênio sobre o padrão de movimento e de porcentagem de células móveis. Houve aumento dose-dependente da porcentagem de células positivas para CellROX® células capacitadas e positivas para o LA. Com relação às taxas de clivagem e de blastocisto, houve diminuição da porcentagem de embriões clivados e de blastocistos, conforme a dose de peróxido de hidrogênio foi aumentada. Referente à taxa de desenvolvimento embrionário, houve bloqueio das estruturas em 2-4 células. Nestas condições, o espermatozoide quando exposto a um ambiente oxidante, apresenta alterações no padrão de motilidade, no status oxidativo e na capacitação, sendo que estas interferem de forma negativa no desenvolvimento embrionário, desde o início da clivagem até a formação do blastocisto. / Oxidative status may influence spermatozoa by distinct mechanisms, from capacitation to oocyte fertilization. However, reactive oxygen species (ROS) could be beneficial or harmful depending on cellular context. Due to the low levels of antioxidant enzymes of cryopreserved semen, associated to successive manipulations prior to in vitro fertilization (IVF), it is momentous to understand the mechanism involved on sperm status in such conditions and the further impact on embryo development. The present study aimed to assess the possible impact of a dose-dependent model for sperm oxidative stress on embryo development. In experiment 1, straws from five Nelore bulls were subjected to a 1 hour incubation at 38,5 ºC and 5% CO2, with increase doses of hydrogen peroxide (0; 12,5; 25; e 50 µM). At the end of incubation period, motility parameters were evaluated by Computed Assisted System Analysis (CASA). Based on the results of the experiment 1, experiment 2 was designed to study a high (50 µM) and a low (12,5 µM) dose of hydrogen peroxide and also a control (0 µM). Sperm samples were incubated with each dose for 1 hour and subsequently used for in vitro fertilization (D=0). Samples were analyzed by CASA, oxidative status (CellROX® green and 2'-7' diclorofluorescein diacetate - DCFH), mitochondrial potential (JC-1), chromatin (LA) and sperm capacitation status (chlortetraciclin). Embryos were evaluated based on fast cleavage rate (30 hours pos-insemination), cleavage rate (D=3), development rate (D=5) and blastocyst rate (D=8). Statistical analysis was performed by polynomial regression model, considering significant a p≤0,05. A dose-dependent deleterious effect of hydrogen peroxide was observed on most motility variables evaluated by CASA, including the percentage of motile cells. Similarly, a dose-dependent increase was observed on the percentages of positive cells for CellROX®, capacitated sperm and also for LA. A decrease on the percentage of cleaved embryos and blastocyst was observed as hydrogen peroxide increased. Interestingly, a blockage was detected during the 2-4 cell stage. In these conditions when exposed to oxidative environment, sperm may present disabled motility characteristics, oxidative status and premature capacitation and such abnormalities result on impaired embryo development, from the first cleavage to blastocyst.
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EMC1 contribui para a malignidade em células de câncer de mama / EMC1 contributes to breast cancer cells malignancyRoberto Augusto Silva Molina 25 September 2014 (has links)
O câncer de mama é uma das principais causas de morte por câncer em mulheres em todo o mundo, apresentando-se como uma doença heterogênea composta por distintos subtipos associados a diferentes prognósticos clínicos, mas as bases moleculares que sustentam sua progressão tumoral ainda não estão completamente elucidadas. Evidências de estudos em larga escala apontam uma potencial participação da proteína EMC1 no desenvolvimento do câncer de mama, mas falham em avaliam seu papel específico na progressão e manutenção deste tipo de tumor. EMC1 faz parte de um complexo definido por dez proteínas presente no retículo endoplasmático denominado Endoplasmic Reticulum Membrane Complex, caracterizado recentemente com potencial papel no enovelamento e maturação de proteínas de membrana e na via secretória. Investimos deste modo na caracterização de EMC1 e no seu envolvimento com o câncer de mama. Utilizando um pequeno painel de linhagens tumorais de mama, mostramos por meio de qPCR que os níveis de RNAm de EMC1 estavam aumentados em linhagens consideradas mais agressivas. Duas linhagens tumorais de mama, MCF-7 e SKBR-3 foram utilizadas para expressão estável de EMC1 mediada pelo vetor plasmidial pcDNA3.1. Os efeitos foram notáveis apenas para a linhagem SKBR-3, que apresenta amplificação no locus HER-2, um receptor do tipo tirosina quinase da família EGFR envolvido em vias de invasão e proliferação celular. Observamos uma nítida alteração morfológica após a superexpressão de EMC1 nesta linhagem, sugerindo uma reprogramação para um fenótipo mesenquimal. As células adquiriram filopódios mais proeminentes e mostraram aumento em sua capacidade proliferativa e crescimento clonogênico, sob condições adesivas ou não, bem como aumento nas capacidades invasiva (transwell) e migratória (wound healing). Análises do ciclo celular por iodeto de propídeo indicaram um ligeiro aumento nas populações celulares nas fases S e G2/M em células superexpressando EMC1, corroborando os ensaios funcionais. Notamos também após a superexpressão de EMC1 um aumento na liberação de MMP-2, justificando o aumento na capacidade invasiva destas células. Os resultados dos ensaios funcionais comprovam as análises in silico realizadas nas quais identificamos uma correlação da expressão de EMC1 com proteínas envolvidas em funções no retículo endoplasmático e no processo de transição epitélio-mesenquimal. Avaliamos ainda o metabolismo celular quanto a funções mitocondriais como consumo de oxigênio utilizando um oxígrafo e quanto a geração de espécies reativas de oxigênio (EROs) através da marcação por DHE. A superexpressão de EMC1 levou à diminuição da respiração, ou seja, no consumo de oxigênio e também da produção de EROs, ao passo que os níveis de lactato foram aumentados, características associadas a maior malignidade de células tumorais de mama. Por fim, mostramos através de ensaio de tumorigênese in vivo utilizando camundongos nude que a superexpressão de EMC1 conduziu a formação de tumores mais agressivos e de maior volume. Em conjunto os dados sugerem um importante papel de EMC1 na progressão tumoral do câncer de mama, sobretudo na transição para estágios mais invasivos, servindo como potencial marcador diagnóstico e alvo para terapias futuras. / Breast cancer is a leading cause of cancer death in women worldwide. It presents as a heterogeneous disease composed of distinct subtypes associated with different clinical prognoses, but the molecular basis underlying their tumor progression are not yet fully comprehended. Evidence from large-scale studies suggests a potential involvement of EMC1 protein in the development of breast cancer, but fail to assess its specific role in the progression and maintenance of this type of tumor. EMC1 is part of a protein complex composed of ten different subunits associated to the endoplasmic reticulum (ER) and recently proposed to play a potential role in the folding and maturation of membrane proteins in the secretory pathway. Thus, our aim here was to do a functional characterization of EMC1 in breast cancer. Using a small panel of breast cancer cell lines, we showed higher EMC1 mRNA expression levels in the most aggressive cell lines, by qPCR. Two breast tumor cell lines, MCF - 7 and SKBR -3 were used for stable expression of EMC1 mediated by the plasmidial vector pcDNA3.1. The effects were remarkable only for the SKBR-3 cell line, which carries an amplification of the HER-2 locus, a tyrosine kinase receptor of the EGFR family, involved in cell proliferation and invasion. We observed a clear morphological change after overexpression of EMC1 in this cell line, suggesting a reprogramming to a mesenchymal phenotype. The cells acquired more prominent filopodia and showed an increase of their proliferative capacity and clonogenic growth upon adhesive and non-adhesive conditions, as well as an increase of invasive (collagen-coated transwell) and migratory (wound healing) properties. Analysis of the cell cycle by propidium iodide showed a slight increase in the cell population in S phase and G2/M for EMC1-overexpressing cells, corroborating other functional assays. Also, EMC1-overexpressing cells showed an increase in the release of MMP-2, which could explain the increase in the invasive capacity of these cells. The results of the functional assays confirm the in silico analysis performed in which we identified a correlation between the EMC1 expression with proteins involved in functions in the endoplasmic reticulum and in the epithelial-mesenchymal transition. We also evaluated the cellular metabolism and mitochondrial functions such as oxygen consumption using an oxygraph and the generation of reactive oxygen species (ROS) with DHE dye. Overexpression of EMC1 led to decreased respiration, i.e. oxygen consumption and also ROS production whereas lactate was increased, characteristics associated with increased malignancy of breast tumor cells. Finally, we show through in vivo tumorigenesis assay using nude mice that overexpression of EMC1 led to formation of more aggressive tumors. Together the data suggest an important role of EMC1 in tumor progression of breast cancer, especially in the transition to more invasive stages, serving as a potential prognostic marker and target for future therapies.
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Avalia??o da Cobertura e Perdas de Solo na Bacia Hidrogr?fica Palmares-Ribeir?o do Saco, em Paty do Alferes e Miguel Pereira-RJ, Atrav?s de T?cnicas de Sensoriamento Remoto e SIG / Evaluation of soil cover and soil losses in a watershed in Paty do Alferes and Miguel Pereira-RJ through remote sensing and GIS techniques.Durigon, Valdemir L?cio 25 February 2016 (has links)
Submitted by Leticia Schettini (leticia@ufrrj.br) on 2016-10-10T13:01:19Z
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2011 - Valdemir Lucio Durigon.pdf: 4431691 bytes, checksum: bc255769946a67387959db9cc02dbb28 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-10T13:01:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2016-02-25 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior-CAPES / Soil erosion is a growing problem in today's world, virtually in every continent, mainly due to
the rising demand for food, fibers and biofuels. On the other hand, the correct planning of
land use, avoiding farming lands with high erosion risk, could minimize the erosion process
without compromising food security. The aim of this study was to evaluate erosion risk and
soil losses in a watershed using remote sensing and GIS, coupled with temporal evolution of
vegetation cover and occupation of land, in areas of the municipalities of Paty do Alferes and
Miguel Pereira, Rio de Janeiro State. For this, the RUSLE (Revised Universal Soil Loss
Equation) was used as model to predict soil loss, combined with remote sensing data and the
derived NDVI (Normalized Difference Vegetation Index), to determine the soil coverage in a
GIS (Geographic Information System). Satellite images used in this research included: TM
sensor of Landsat-5, ETM+ of Landsat-7, CCD of CBERS-2, and CCD and HRC from
CBERS 2B, obtained for the study period. The processed remotely sensed data and the
geographic information system, integrated with models for predicting soil loss, showed good
performance for environmental analysis. The use of NDVI was a suitable tool for determining
the vegetation coverage, to be applied in soil loss prediction models. The soil losses and
erosion risks were strongly associated with characteristics of relief, and they can be used for
planning land usage and occupation, in urban and rural areas. More studies should be
conducted linking GIS, erosion prediction models, and remote sensing data in order to better
predict the occurrence of environmental disasters, also to create databases about soil?s
response in relation to different causative erosional agents. / A eros?o do solo ? um problema crescente no mundo atual, em praticamente todos os
continentes, que se deve ao crescimento da demanda por alimentos, ao mau uso dos solos e a
necessidade de produ??o de fibras e combust?veis. Por outro lado, o planejamento correto do
uso e cobertura dos solos evitando utilizar ?reas para a agricultura que tenham alto risco de
eros?o e alto potencial natural de eros?o pode minimizar o processo, sem comprometer a
seguran?a alimentar. O objetivo deste trabalho foi avaliar o risco de eros?o e a perda de solo
em uma bacia hidrogr?fica utilizando t?cnicas de sensoriamento remoto e SIG, associados ?
evolu??o temporal dos ?ndices de cobertura e ocupa??o do solo, em ?reas nos munic?pios de
Paty do Alferes e Miguel Pereira, Estado do Rio de Janeiro. Para isso, utilizou-se o modelo de
predi??o de perdas de solos, no caso a RUSLE (?Revised Universal Soil Loss Equation?),
associado a t?cnica de sensoriamento remoto integrada ao ?ndice de vegeta??o NDVI
(?Normalized Difference Vegetation Index?) para determinar a cobertura dos solos em um
SIG (Sistema de Informa??o Geogr?fica). Para tal, foram utilizadas imagens de sat?lite dos
sensores TM Landsat-5, ETM+ Landsat-7 CCD CBERS-2 e CCD e HRC do CBERS 2B
coletadas no per?odo considerado. Os dados de sensoriamento remoto e do sistema de
informa??es geogr?ficas integrados a modelos de predi??o de perdas de solos caracterizaramse
como importantes instrumentos na an?lise do meio ambiente. A utiliza??o de NDVI
constitui-se em ferramenta adequada para a determina??o da cobertura, para aplica??o em
modelos de predi??o de perda de solo. As perdas de solo, o potencial natural de eros?o e o
risco mostraram forte rela??o com as caracter?sticas do relevo, podendo ser utilizados no
planejamento do uso e ocupa??o do solo em ?reas urbana e rural. Mais estudos devem ser
realizados associando SIG, modelos de predi??o de eros?o e t?cnicas de sensoriamento
remoto no sentido de melhor prever a ocorr?ncia de desastres ambientais, tamb?m para criar
bancos de informa??es sobre o comportamento dos solos em rela??o aos diversos agentes
causadores do processo erosivo.
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Caracteriza??o morfom?trica da sub-bacia do Ribeir?o Cachimbal, RJ e atributos ed?ficos condicionantes no processo erosivo em pedoformas c?ncava e convexa / Morphometric characterization of the sub-basin of Ribeir?o Cachimbal, RJ and edaphic conditioners attributes of the erosion process on concave and convex landformsGOMES, Jo?o Henrique Gaia 23 February 2017 (has links)
Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-08-17T17:49:24Z
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2017 - Jo?o Henrique Gaia Gomes.pdf: 3515689 bytes, checksum: 6a7151f0e574d679527cd2a45c6c5668 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-17T17:49:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1
2017 - Jo?o Henrique Gaia Gomes.pdf: 3515689 bytes, checksum: 6a7151f0e574d679527cd2a45c6c5668 (MD5)
Previous issue date: 2017-02-23 / CAPES / As a result of activities such as agriculture, pastures for cattle raising, mining areas, logging and improper occupation in urban areas, about 28% of the Brazilian territory is classified as degraded. In some regions of Brazil, due to their geomorphological aspects associated to the intense precipitations that occur in summer, degradation problems such as erosive processes and slope slides can be verified. The Pinheiral-RJ region currently has only 18% of its territory under native forest cover at different levels of alteration and regeneration, with 88% of its area classified as high or very high vulnerable to erosion. Therefore, the objective of this work was to evaluate the effect of soil attributes and morphology of the sub-basin of the CachimbalRiver as conditions to the erosive process in different topographic features (pedoforms), concave and convex, in the Middle Vale do Para?ba do Sul -RJ, in order to generate information that contributes to the recovery programs of degraded areas. The digital elevation model (DEM) was generated using topographic maps of the municipalities of Volta Redonda (Page SF-23-Z-A-V-2) and Pira? (Page SF-23-Z-VI-1) using ArcGis 10.2 software. The quantification of gull numbers was performed through Google Earth. Morphometric characterization, trench opening for soil classification, collection of soil samples, physical and routine fertility analysis and analysis of soil attributes variability were performed based on literature criteria. It was verified that there is no susceptibility to flood in the studied area due to its elongated shape. The sub-basin has a dendritic drainage pattern, flow order of 5th degree, and very large drainage density(Dd). In particular, the average hydrographic density (Hd) value indicates a high potential for generating new channels. Although roughness coefficient (Cr)indicates agricultural capacity for agriculture, roughness index (Ir) demonstrates the need to adopt more nuanced agricultural practices that take into account the particular characteristics of the area and recognize variations in the terrain and soil characteristics. 30 gullies were quantified throughout the sub-basin, 24 being in the convex pedoform and 6 in the concave. The physical and chemical attributes differ in the environments. / Em decorr?ncia de atividades como agricultura, pastagens destinadas a pecu?ria, ?reas de minera??o, explora??o madeireira e ocupa??o impr?pria nas regi?es urbanas, cerca de 28% do territ?rio brasileiro ? classificado como degradado. Em algumas regi?es do Brasil, em fun??o dos seus aspectos geomorfol?gicos associados ?s intensas precipita??es ocorridas no ver?o, s?o verificados problemas de degrada??o como processos erosivos e deslizamentos de encostas. A regi?o de Pinheiral-RJ apresenta atualmente, apenas 18 % de seu territ?rio sob cobertura florestal nativa em diferentes n?veis de altera??o e regenera??o, possui88% de sua ?rea classificada como alta ou muito alta vulnerabilidade ? eros?o. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito dos atributos do solo e da morfologia da sub-bacia do ribeir?o Cachimbal como condicionantes no processo erosivo em diferentes fei??es topogr?ficas (pedoformas), c?ncava e convexa, na Regi?o do M?dio Vale do Para?ba do Sul-RJ, com finalidade de gerar informa??es que contribuam para os programas de recupera??o de ?reas degradadas. Foi gerado o modelo digital de eleva??o (MDE)atrav?s das cartas topogr?ficas dos munic?pios de Volta Redonda (Folha SF-23-Z-A-V-2) e Pira? (Folha SF- 23-Z-VI-1), utilizando o software ArcGis 10.2. A quantifica??o do n?mero de vo?orocas foi realizada atrav?s do Google Earth. A caracteriza??o morfom?trica, a abertura de trincheiras para classifica??o do solo, a coleta das amostras de terra, as an?lises f?sicas e de rotina da fertilidade e a an?lise da variabilidade dos atributos do solo foram realizadas baseando-se em crit?rios da literatura. Verificou-se que n?o h? susceptibilidade de enchente na ?rea estudada, devido a sua forma alongada. A sub-bacia tem um padr?o de drenagem dendr?tico, ordem de fluxo de 5? grau, e Densidade de drenagem (Dd) muito boa. Em particular, o valor da densidade de hidrogr?fica (Dh) indica um elevado potencial para gerar novos canais.Embora o Coeficiente de rugosidade (Cr) indique capacidade agr?cola para a agricultura, o ?ndice de rugosidade (Ir) demonstra a necessidade de adotar pr?ticas agr?colas mais nuan?adas que levem em conta as caracter?sticas particulares da ?rea e que reconhe?am varia??es no terreno e caracter?sticas do solo. Foram quantificadas 30 vo?orocas em toda a sub-bacia, sendo 24 na pedoforma convexa e 6 na c?ncava. Os atributos f?sicos e qu?micos diferiram quanto aos ambientes.
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EMC1 contribui para a malignidade em células de câncer de mama / EMC1 contributes to breast cancer cells malignancyMolina, Roberto Augusto Silva 25 September 2014 (has links)
O câncer de mama é uma das principais causas de morte por câncer em mulheres em todo o mundo, apresentando-se como uma doença heterogênea composta por distintos subtipos associados a diferentes prognósticos clínicos, mas as bases moleculares que sustentam sua progressão tumoral ainda não estão completamente elucidadas. Evidências de estudos em larga escala apontam uma potencial participação da proteína EMC1 no desenvolvimento do câncer de mama, mas falham em avaliam seu papel específico na progressão e manutenção deste tipo de tumor. EMC1 faz parte de um complexo definido por dez proteínas presente no retículo endoplasmático denominado Endoplasmic Reticulum Membrane Complex, caracterizado recentemente com potencial papel no enovelamento e maturação de proteínas de membrana e na via secretória. Investimos deste modo na caracterização de EMC1 e no seu envolvimento com o câncer de mama. Utilizando um pequeno painel de linhagens tumorais de mama, mostramos por meio de qPCR que os níveis de RNAm de EMC1 estavam aumentados em linhagens consideradas mais agressivas. Duas linhagens tumorais de mama, MCF-7 e SKBR-3 foram utilizadas para expressão estável de EMC1 mediada pelo vetor plasmidial pcDNA3.1. Os efeitos foram notáveis apenas para a linhagem SKBR-3, que apresenta amplificação no locus HER-2, um receptor do tipo tirosina quinase da família EGFR envolvido em vias de invasão e proliferação celular. Observamos uma nítida alteração morfológica após a superexpressão de EMC1 nesta linhagem, sugerindo uma reprogramação para um fenótipo mesenquimal. As células adquiriram filopódios mais proeminentes e mostraram aumento em sua capacidade proliferativa e crescimento clonogênico, sob condições adesivas ou não, bem como aumento nas capacidades invasiva (transwell) e migratória (wound healing). Análises do ciclo celular por iodeto de propídeo indicaram um ligeiro aumento nas populações celulares nas fases S e G2/M em células superexpressando EMC1, corroborando os ensaios funcionais. Notamos também após a superexpressão de EMC1 um aumento na liberação de MMP-2, justificando o aumento na capacidade invasiva destas células. Os resultados dos ensaios funcionais comprovam as análises in silico realizadas nas quais identificamos uma correlação da expressão de EMC1 com proteínas envolvidas em funções no retículo endoplasmático e no processo de transição epitélio-mesenquimal. Avaliamos ainda o metabolismo celular quanto a funções mitocondriais como consumo de oxigênio utilizando um oxígrafo e quanto a geração de espécies reativas de oxigênio (EROs) através da marcação por DHE. A superexpressão de EMC1 levou à diminuição da respiração, ou seja, no consumo de oxigênio e também da produção de EROs, ao passo que os níveis de lactato foram aumentados, características associadas a maior malignidade de células tumorais de mama. Por fim, mostramos através de ensaio de tumorigênese in vivo utilizando camundongos nude que a superexpressão de EMC1 conduziu a formação de tumores mais agressivos e de maior volume. Em conjunto os dados sugerem um importante papel de EMC1 na progressão tumoral do câncer de mama, sobretudo na transição para estágios mais invasivos, servindo como potencial marcador diagnóstico e alvo para terapias futuras. / Breast cancer is a leading cause of cancer death in women worldwide. It presents as a heterogeneous disease composed of distinct subtypes associated with different clinical prognoses, but the molecular basis underlying their tumor progression are not yet fully comprehended. Evidence from large-scale studies suggests a potential involvement of EMC1 protein in the development of breast cancer, but fail to assess its specific role in the progression and maintenance of this type of tumor. EMC1 is part of a protein complex composed of ten different subunits associated to the endoplasmic reticulum (ER) and recently proposed to play a potential role in the folding and maturation of membrane proteins in the secretory pathway. Thus, our aim here was to do a functional characterization of EMC1 in breast cancer. Using a small panel of breast cancer cell lines, we showed higher EMC1 mRNA expression levels in the most aggressive cell lines, by qPCR. Two breast tumor cell lines, MCF - 7 and SKBR -3 were used for stable expression of EMC1 mediated by the plasmidial vector pcDNA3.1. The effects were remarkable only for the SKBR-3 cell line, which carries an amplification of the HER-2 locus, a tyrosine kinase receptor of the EGFR family, involved in cell proliferation and invasion. We observed a clear morphological change after overexpression of EMC1 in this cell line, suggesting a reprogramming to a mesenchymal phenotype. The cells acquired more prominent filopodia and showed an increase of their proliferative capacity and clonogenic growth upon adhesive and non-adhesive conditions, as well as an increase of invasive (collagen-coated transwell) and migratory (wound healing) properties. Analysis of the cell cycle by propidium iodide showed a slight increase in the cell population in S phase and G2/M for EMC1-overexpressing cells, corroborating other functional assays. Also, EMC1-overexpressing cells showed an increase in the release of MMP-2, which could explain the increase in the invasive capacity of these cells. The results of the functional assays confirm the in silico analysis performed in which we identified a correlation between the EMC1 expression with proteins involved in functions in the endoplasmic reticulum and in the epithelial-mesenchymal transition. We also evaluated the cellular metabolism and mitochondrial functions such as oxygen consumption using an oxygraph and the generation of reactive oxygen species (ROS) with DHE dye. Overexpression of EMC1 led to decreased respiration, i.e. oxygen consumption and also ROS production whereas lactate was increased, characteristics associated with increased malignancy of breast tumor cells. Finally, we show through in vivo tumorigenesis assay using nude mice that overexpression of EMC1 led to formation of more aggressive tumors. Together the data suggest an important role of EMC1 in tumor progression of breast cancer, especially in the transition to more invasive stages, serving as a potential prognostic marker and target for future therapies.
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善的倫理: 論艾利斯.摩達克「善的信徒」中的藝術、愛、與性意識 / Ethics of Good: Art, Eros, and Sexuality in Iris Murdoch's The Good Apprentice陳怡芬, Chen, Yi-fen Unknown Date (has links)
本論文以「善的信徒」為例,旨在探討艾利斯.摩達克的倫理學系統。摩達
克認為,當今西方世界的道德淪喪,人類心靈的荼毒,價值觀的幻滅與善惡
分野的喪失,其根本原因,全都肇因於基督教傳統神學的沒落。面對懷疑主
義與虛無主義的挑戰,基督徒對上帝與耶穌基督的信仰已無法提出令人信
服的佐證,也導致由宗教戒律衍生而出的倫理學系統崩潰瓦解。於是人迷
失了對自己的認識,也不再了解自己存在的意義。要解決人類心靈及精神
的危機,其根本之道,就在於重新確立人生的價值與生命的意義。因此摩達
克提出重新詮釋基督教神學的必要性,並闡述以善為中心的倫理學,以因應
當前社會文化的劇變。她的學說融合了柏拉圖的道德哲學與近代心理學家
對人性的分析,駁斥康德「絕對義務」的律令(the categorical
imperative)與意志自由的主張,並反對沙特存在主義中以人為一切道德律
令之創造者的觀點。摩達克認為康德與沙特對人類的理性與意志過於樂
觀,忽略了人往往沉溺於自我塑造的假象中。摩達克以「善的信徒」說明
善代表了至高無上的絕對真理,而以善為出發點的倫理實踐也摒棄了傳統
基督教神學中祈求救贖與靈魂永生等等以自身利益為前提的道德行為。她
並闡述愛具有雙重本質, 一為高貴純淨;另一為肉慾之愛。摩達克強調,只
要人的心靈一旦被為善的熱望所趨使,就可以獲得真知,不再為事物的假象
所蒙蔽;只要有心為善,人人都可以成為耶穌基督。相對於為善的信仰者,
藝術家則多半以自我為中心,創造戲劇化與情緒化的幻象而沉醉其中。史
都亞特.古諾即為摩達克之倫理體系中典型的為善人物。其謙卑純真的性
情與無私無欲的大愛不但使他能洞察事物的真相,更能滌淨藝術家的靈魂,
使他(她)走出幻影,勇敢面對事實與自身的責任。此外本文也運用米歇爾.
傅柯的觀點,對於小說中人物所呈現的性意識加以分析。 / This thesis aims at explorating Iris Murdoch's ethical system.
For Murdoch, the great crises in modern society arise from the
deterioration of the precepts of religion. When the superhuman
power of providence is questioned, it follows that the moral
system which strictly attaches its codes to Christianity to
regulate humankind will be challenged ineluctably. With the
decline of religious observance, the yardsticks for moral
comportment give way to skepticism and nihilism. For the reason
that the traditional approaches to Christianity have now become
partial and ineffective, Murdoch propounds the pressing
necessity to reinterpret Christianity and reintroduce the
concept of Good. In contradiction to Kant and the
existentialists who identify a moral agent with unlimited
freedom and rational will, Murdoch poses a problem of human
nature. She insists that man has a strong propensity for being
self-contained and self-interested. In The Good Apprentice,
Murdoch highlights the supremacy of Good and chants the eulogy
of the good figure Stuart Cuno. Deeply rooted in Plato's moral
philosophy, Murdoch's ethical system expatiates on the dual
nature of Eros. Whereas the saint is activated by the purified
Eros moving toward the transcendent reality of Good, the artist
indulges himself in the dramatized fantasies. Murdoch
accentuates that once man is motivated by the desire for good,
he can unmask the veiled consciousness and procure the ability
to perceive the turth.
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Recherche d'événements de microlentille gravitationnelle dans les bras spiraux de la galaxie avec EROS IIDerue, Frédéric 15 April 1999 (has links) (PDF)
NIL
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The Dynamical Spin Vector Evolution of the AsteroidsSkoglöv, Erik January 2002 (has links)
<p>The dynamical evolution of the spin axis direction due to gravitational and thermal factors is examined. It is found that the spin axis variations generally are regular and relatively small for the bodies in the asteroid main belt. There are also reasons to believe that this is the case for minor objects beyond the main belt. However, it is found that these regular variations are larger when the orbital inclination of the objects is increased. This effect may explain certain features in the spin vector distribution of the main belt asteroids, not possible to explain by collisional factors. The spin vector evolution of the asteroids in the inner solar system, including the Earth- and Mars-crossing objects, is often subjected to strong forces related to frequencies in the orbital evolution. The variations in the spin vector direction are then very large and often subjected to chaos. The larger frequency related obliquity zones of the Mars-crossers are usually regular while the zones of the Earth-Mars-crossers often are of a chaotic nature. The spin vector evolution of asteroids with comet-like orbits is often chaotic regardless of initial obliquity. For the inner solar system asteroids, it is often possible for an initial prograde spin to turn into a retrograde one, or vice versa, due to the frequency related phenomena. Though some spin vector directions seem to be more probable than other ones over time, there are no indications for an evolution towards a more prograde or a more retrograde spin vector distribution.</p><p>The effects on the spin vector evolution from the thermal Yarkovsky force are examined for objects with radii larger than 50 m. This force will affect the orbital evolution and thus indirectly affect the spin vector evolution. However, it is found that the studied effects are minor as compared to the gravitationally related ones. This is true both for the diurnal and the seasonal variants of the Yarkovsky force.</p>
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The Dynamical Spin Vector Evolution of the AsteroidsSkoglöv, Erik January 2002 (has links)
The dynamical evolution of the spin axis direction due to gravitational and thermal factors is examined. It is found that the spin axis variations generally are regular and relatively small for the bodies in the asteroid main belt. There are also reasons to believe that this is the case for minor objects beyond the main belt. However, it is found that these regular variations are larger when the orbital inclination of the objects is increased. This effect may explain certain features in the spin vector distribution of the main belt asteroids, not possible to explain by collisional factors. The spin vector evolution of the asteroids in the inner solar system, including the Earth- and Mars-crossing objects, is often subjected to strong forces related to frequencies in the orbital evolution. The variations in the spin vector direction are then very large and often subjected to chaos. The larger frequency related obliquity zones of the Mars-crossers are usually regular while the zones of the Earth-Mars-crossers often are of a chaotic nature. The spin vector evolution of asteroids with comet-like orbits is often chaotic regardless of initial obliquity. For the inner solar system asteroids, it is often possible for an initial prograde spin to turn into a retrograde one, or vice versa, due to the frequency related phenomena. Though some spin vector directions seem to be more probable than other ones over time, there are no indications for an evolution towards a more prograde or a more retrograde spin vector distribution. The effects on the spin vector evolution from the thermal Yarkovsky force are examined for objects with radii larger than 50 m. This force will affect the orbital evolution and thus indirectly affect the spin vector evolution. However, it is found that the studied effects are minor as compared to the gravitationally related ones. This is true both for the diurnal and the seasonal variants of the Yarkovsky force.
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