Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Exercise can represent a physical stress that disrupts the homeostasis. Elevated muscle oxygen consumption increases reactive oxygen species (ROS) and inflammatory proteins production, leading to oxidative stress and systemic inflammation. Nowadays, both caffeine, a commonly compound present in many commercial beverages and medicines, and the non-steroidalanti-inflammatory drugs (NSAIDs), including diclofenac, have been used in sports competitions events. Considering that athletes intent to improve their sports performance, mainly on high intensity competitions and short duration that can lead to inflammation and pain, a great number of athletes consume caffeine and NSAIDs due they ergogenic effects or avoid inflammation and loss of performance. However, little is known about the physical exercise and concomitant use of caffeine/diclofenac. Considering the sport specificity, most authors have focused exercise in skeletal muscle studies. In view of the important role of liver during physical activities, one of the goals of this work was to analyze the effect of caffeine and diclofenac on cell damage, hepatic inflammation and oxidative stress markers in exercised rats. In two papers, we highlight the effect of caffeine on the oxidative damage, inflammation and tissue adaptation in liver, muscle and plasma of training rats. The experimental protocol included four groups: sedentary-saline, sedentary-diclofenac, exercise-saline, and exercise-diclofenac. The exercised groups performed a 4-week aerobic swimming training protocol and were treated with saline or caffeine (6 mg/kg). We found significant changes on citrate synthase (CS), superoxide desmutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx) and acetylcholinesterase (AChE) enzyme activities and aspartate aminotransferase (AST) and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) levels after training. These modifications were reverted by caffeine treatment. In the manuscript, we highlight the effects of diclofenac (10 mg/kg) on the inflammation induced by an acute exercise. Rats were divided in 4 groups: control-saline (CS), control-diclofenac (CD), exercise-saline (ES) and exercise-diclofenac (ED). The animals from the C and E groups received saline, while the groups CD and ED received diclofenac treatment during seven days previous to the exercise bout, which consisted in an acute bout of eccentric exercise lasting 90 min. We identified an increase in both gene expression and levels of proteins TLR4, MyD88, TRIF, NFκB, p65, IL-6, TNF-α and iNOS in the exercised groups. Diclofenac treatment blunted these responses exercised-induced. Taken together, the data indicate that diclofenac and caffeine interfere on oxidative and inflammation responses induced by physical exercise, altering the adaptive mechanisms of tissues under exercise. / O exercício físico pode representar um tipo de estresse por alterar a homeostase corporal. O elevado consumo de oxigênio pelo músculo esquelético durante o exercício físico aumenta a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) e proteínas inflamatórias, desencadeando estresse oxidativo e inflamação sistêmica. Atualmente, a cafeína, um composto presente em diversas bebidas e medicamentos, e os anti-inflamatórios não-esteroidais (AINEs), incluindo o diclofenaco, têm sido amplamente usados em competições esportivas. Considerando que os atletas treinam com o objetivo de melhorar o seu desempenho esportivo, principalmente em provas de alta intensidade e curta duração e que essas podem levar à sensação de dor e processo inflamatório, um grande número desses atletas usa tanto cafeína e AINEs como recursos ergogênicos ou até mesmo para evitar perdas de performance em suas provas. No entanto, pouco se sabe sobre os efeitos da associação entre treinamento físico e o uso concomitante de cafeína/diclofenaco nos tecidos. Levando em consideração a especificidade esporte, a maioria dos estudos são referentes a associação exercício físico e músculo esquelético. Entretanto, as respostas adaptativas ao exercício físico não são restritas ao tecido muscular. Considerando o importante papel do fígado durante a atividade física, um objetivo desta tese foi analisar os efeitos da cafeína e, em um segundo momento, do diclofenaco, sobre marcadores hepáticos de estresse oxidativo, dano tecidual e inflamação em ratos treinados. Nos artigos destacamos o papel da cafeína em modular as respostas de dano, estresse oxidativo, inflamação e adaptação causadas pelo treinamento físico em fígado, músculo e plasma. O protocolo experimental foi realizado com 4 grupos distintos: sedentário-salina, sedentário-cafeína, exercício-salina e exercício-cafeína. Os grupos exercício foram submetidos a 4 semanas de treinamento aeróbio de natação e os grupos tratados foram suplementados com cafeína (6 mg/kg), durante o treinamento. Identificamos mudanças significativas na atividade das enzimas citrato sintase (CS), superóxido desmutase (SOD), glutationa peroxidase (GPx) e acetilcolinesterase (AChE), e nos níveis da aspartato aminotransferase (AST) e substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) após treinamento. Todas essas alterações foram revertidas pelo tratamento com cafeína. No manuscrito destacamos o papel modulador do diclofenaco sobre a inflamação gerada por exercício agudo. O protocolo consistiu em uma sessão de 90 mim de exercício excêntrico agudo em esteira em ratos tratados previamente com salina ou diclofenaco (10mg/kg) (grupos: controle-salina, exercício-salina, controle-diclofenaco, exercício-diclofenaco). Após o exercício, foi identificado um aumento na expressão gênica e níveis da proteínas TLR4, MyD88, TRIF, NFκB p65, IL-6, TNF-α e iNOS. Essas respostas geradas pelo exercício excêntrico foram bloqueadas pelo tratamento com diclofenaco. Os dados obtidos nos permitem concluir que o diclofenaco e a cafeína interferem nas respostas adaptativas de cunho oxidativo/inflamatório geradas pelo exercício físico, podendo assim alterar os mecanismos de hormesis dos tecidos ao exercício físico.

Made available in DSpace on 2016-12-06T17:07:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lilian.pdf: 1551232 bytes, checksum: c1c7318479a8b0ae5bf784930ff5f056 (MD5) Previous issue date: 2009-10-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study was to investigate the effects of taurine supplementation on biomarkers of oxidative stress after eccentric exercise. Twenty four male rats Wistar were divided into the following groups (n=6): control (C); eccentric exercise (EE); eccentric exercise plus taurine (EET); eccentric exercise plus saline (EES). Taurine was administered with solution of 1ml water 300mg/Kg body weight (BW)/day by oral lavage, for two weeks before and 2, 12, 24 and 48 hours after the exercise session. The animals were submitted to one downhill run session with duration of 90 minutes and velocity constant of 16,6 m.min-1. Forty-eight hours after the exercise session, the animals were killed and the quadriceps muscle were surgically removed. Production of superoxide anion, lipoperoxidation, carbonylation, total thiol content and antioxidant enzyme were analyze. The results show the EET group had a significant reduction (p <0.05) in the production of superoxide anion (0,09 + 0.2 nmol / min / mg protein) when compared with the EE group (1.62 0.3 nmol / min / mg protein) and the EES group (1,55 0,3 nmol/ min/ mg protein). Lipid peroxidation was diminished as EET showed 0,13 0,001nmol/ mg protein of tiobarbituric acid reactive species (TBARS) significantly lower (p < 0,05) than other groups (EES - 0,18 0,03 nmol/mg protein and EE - 0,18 0,05 nmol/mg protein). The total thiol content were higher (p < 0,05) in EET (18,8 0,3 nmol TNB/ mg protein) when compared with EES (13,8 1 nmol TNB/ mg protein) and EE (12,2 1 nmol TNB/ mg protein). The EET group showed a lower value (p < 0.05) of proteins carbonyl (0,20 0,2 nmol/ mg protein) compared to other groups (EES - 0,30 0,03 nmol/ mg protein and EE - 0,30 0,025 nmol/ mg protein). The activity of antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) had no significant difference (p <0.05) with supplementation of taurine. The values of SOD activity in the groups were: EE 1,22 0,25 U of SOD/ mg protein; EET 1,18 0,15 U of SOD / mg protein; EES 1,22 0,12 U of SOD / mg protein; and the values of CAT were: EE - 6,12 0,19 U of CAT/ mg protein; EET- 5,85 0,62 U of CAT/ mg protein; EES 5,61 0,45 U of CAT/ mg protein. In conclusion, the present study demonstrates that taurine supplementation decreased damage oxidative but did not affect antioxidant enzyme activity after eccentric exercise. / O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos da suplementação de taurina sobre biomarcadores do estresse oxidativo após o exercício excêntrico. Vinte e quatro ratos da raça Wistar machos foram divididos nos seguintes grupos (n = 6): controle (C); exercício excêntrico (EE); exercício excêntrico com a suplementação de taurina (EET); exercício excêntrico com a suplementação de salina (EES). A quantidade de taurina administrada foi de 300mg/Kg de peso corporal / dia em solução de 1 ml de água deionizada por gavagem oral, por duas semanas antes e 2, 12, 24 e 48 horas após a sessão de exercício. Os animais foram submetidos a uma sessão única de corrida em declive com duração de 90 minutos e velocidade constante de 16,6 m.min-1. Quarenta e oito horas após a sessão de exercício, os animais foram sacrificados e os músculos do quadríceps removidos cirurgicamente. Produção do ânion superóxido, lipoperoxidação, carbonilação das proteínas, conteúdo total de tióis e atividade de enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT) foram analisados. Os resultados mostram que o grupo EET apresentou uma redução significativa (p<0,05) na produção do ânion Superóxido (0,9 0,2 nmol/min/mg proteína) quando comparado com o grupo EE (1,62 0,2 nmol/min/mg proteína) e o grupo EES (1,55 0,3 nmol/min/mg proteína). A lipoperoxidação foi diminuída já que EET apresentou quantidade de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) de 0,13 0,001nmol/mg proteína, significativamente menor (p<0,05) aos outros grupos (EES - 0,18 0,03 nmol/mg proteína e EE - 0,18 0,05 nmol/mg proteína). O conteúdo total de tióis apresentou-se aumentado (p<0,05) no grupo EET (18,8 0,3 nmol TNB/mg proteína) em comparação com EES (13,8 1 nmol TNB/mg proteína) e EE (12,2 1 nmol TNB/mg proteína). O grupo EET demonstrou um valor menor (p<0,05) na carbonilação de proteínas (0,20 0,2 nmol/mg proteína) em relação aos demais grupos (EES - 0,30 0,03 nmol/mg proteína; e EE - 0,30 0,025 nmol/mg proteína). Entretanto, a atividade das enzimas antioxidantes SOD e CAT não teve diferença significativa (p<0,05) com a suplementação da taurina. Os valores da atividade da SOD nos grupos foi de: EE 1,22 0,25 U de SOD/mg proteína; EET 1,18 0,15 U de SOD /mg proteína; EES 1,22 0,12 U de SOD /mg proteína; e da CAT foi: EE - 6,12 0,19 U de CAT/mg proteína; EET- 5,85 0,62 U de CAT/mg proteína; EES 5,61 0,45 U de CAT/mg proteína. Em conclusão, o estudo demonstra que a suplementação de taurina diminuiu o dano oxidativo, mas não afetou a atividade das enzimas antioxidantes após exercício excêntrico.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-27T17:10:28Z No. of bitstreams: 1 WILLIAN DA SILVA.pdf: 1484606 bytes, checksum: b09c4375bb0dae5662922161c28677b5 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-27T17:10:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 WILLIAN DA SILVA.pdf: 1484606 bytes, checksum: b09c4375bb0dae5662922161c28677b5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-27T17:10:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 WILLIAN DA SILVA.pdf: 1484606 bytes, checksum: b09c4375bb0dae5662922161c28677b5 (MD5) Previous issue date: 2017 / O extrato de chá verde possui potencial antioxidante e anti-inflamatório, que pode contribuir para recuperar o equilíbrio metabólico e estresse oxidativo pós-exercício intenso, colaborando assim para diminuir episódios de dor muscular de início tardio (DMIT). Neste estudo, buscamos determinar os efeitos da suplementação com extrato de chá verde sobre a DMIT, dano muscular e oxidativo e status antioxidante. Em um ensaio randomizado, triplo cego, placebo controle, 20 homens não treinados com idade média de 24 (±5) anos realizaram exercício para indução da DMIT no tríceps sural antes e depois de 15 dias de suplementação com extrato de chá verde (500 mg/dia) (GT, n=10) ou placebo (PL, n=10). A DMIT foi determinada pela escala visual analógica de dor (pré e pós-suplementação) antes, imediatamente após e 48 horas após o exercício. Amostras sanguíneas foram tomadas para determinar marcadores bioquímicos de dano muscular como creatina quinase (CK), lactato desidrogenase (LDH) e marcadores de estresse oxidativo como níveis de malondialdeido (TBARS), produção de espécies reativas de oxigênio (DCFH-DA), juntamente com a carbonilação de proteínas e status antioxidante como capacidade antioxidante total do plasma (FRAP) e atividade da glutationa (GSH) além da atividade da acetilcolinesterase (AChe). O exercício induziu DMIT e a suplementação com GT reduziu um marcador de dano estrutural (CK), mas não atenuou a DMIT e marcadores de estresse oxidativo e status antioxidante. Este efeito protetivo ao dano estrutural interessa especialmente ao uso desta suplementação como possível fator adjunto para a prevenção de dano muscular e auxílio na recuperação de esforços intensos. / Green tea extracts supplementation (GT) is recognized as a source of antioxidants and anti-inflammatory substances that may contribute to the recovery after intense exercise when muscle soreness (MS) occurs. In this study we determine the effects of GT on MS, muscle damage, oxidative stress and antioxidant status. Here we present a randomized trial triple blind placebo control including 20 adults aged 25 (5) years and physically active that underwent sessions exercise for induction of muscle damage in the triceps sural before and after 15 days of supplementation with GT at dose of 500 mg/day (GT, n=10) or placebo (PL, n=10). MS was determined using a visual analogic scale. Blood samples were collected to determination of biochemical markers of damage considering activity of creatine kinase (CK) and lactate dehydrogenase (LDH), oxidative stress considering levels of malondialdehyde (TBARS), reactive species of oxygen (DCFH), protein carbonylation, and antioxidant status considering total antioxidant capacity (FRAP), glutathione activity (GSH), and acetylcholinesterase (AChE) activity. Exercise induced MS and GT reduces a marker of structural muscle damage without effects on oxidative stress and antioxidant status. This protective effect may be support the use of this supplementation as a possible correlate strategy to prevent muscle damage and therefore contribute to the recovery of intense exercise.

As contrações excêntricas causam lesão muscular envolvendo a ruptura dos sarcômeros. Todavia, uma sessão repetida de exercício excêntrico acarreta na redução dessa lesão. Esse mecanismo protetor é conhecido como efeito da carga repetida (ECR). Visando contribuir para o melhor entendimento do ECR, em especial, a expressão de genes pró e anti-inflamatórios após o dano promovido pelo exercício excêntrico, camundongos foram submetidos a uma ou duas sessões de exercício. Os músculos sóleos foram avaliados após 24 horas e 3 dias. A análise histológica mostra que houve lesão de fibras dos animais submetidos à 1ª sessão, com atenuação do dano após a 2ª sessão. A expressão gênica das citocinas pró-inflamatórias (TNF-&alpha;, iNOS e IL-1&beta;) e anti-inflamatórias (IL-10, YM1, Fizz-1 e Arginase-1) foi alta em 24 h após a 1ª sessão, e reduziu aos níveis basais em 24 h após a 2ª sessão. Nossos resultados sugerem que a elevação da expressão gênica dessas citocinas no músculo antes da 2ª sessão pode ter contribuído para o ECR. / The eccentric contractions cause muscle injury involving rupture of the sarcomeres, with subsequent activation of proteolysis. However, repeated session of eccentric exercise cause attenuation of this damage. This protective mechanism is known as \"repeated bout effect\" (RBE). In order to contribute to a better understanding of the RBE, in particular, the gene expression of pro and anti-inflammatory after injury induced by eccentric exercise, mice were subjected to one or two sessions of exercise and soleus muscles were evaluated after 24 h or 3 days. Histological analysis shows that there was injury of myofiber from animals subjected to the 1st session, with attenuation of damage after 2nd session. The gene expression of pro-inflammatory (TNF-&alpha;, iNOS and IL-1&beta;) and anti-inflammatory (IL-10, YM1, Fizz-1 and Arginase-1) cytokines was high at 24h after the 1st session, and reduced to baseline levels at 24 h after 2nd session. Our results suggest that the elevated gene expression of these cytokines in muscle before the 2nd session may have contributed to the RBE.