Orientador: Beatriz Bojikian Matsubara / Banca: Dirceu Rodrigues de Almeida / Banca: Luis Cuadrado Martin / Resumo: A contribuição do peptídeo natriurético tipo B (BNP) para a definição da etiologia cardíaca nos casos de dispnéia aguda têm sido amplamente validada, porém, quando a função sistólica está preservada, especialmente em idosos, o papel do peptídeo ainda não está bem estabelecido. Verificar o comportamento dos valores de BNP em idosos com função sistólica preservada. Também foi proposto associar os valores de BNP a variáveis clínicas e Doppler- ecocardiográficas e avaliar desfechos clínicos após 12 meses de seguimento. A casuística de 76 indivíduos com 60 anos ou mais foi submetida a avaliação clínica, ecocardiográfica e dosagem do BNP. As associações entre o BNP e as variáveis clínicas e ecocardiográficas foram verificadas pelo Teste do x2, Coeficiente de Correlação de Pearson e Modelo logístico com resposta multinomial e logits acumulados. Em todos os casos foi adotado o nível de significância p<0,05. Os valores do BNP em idosos com função sistólica preservada apresentaram distribuição ampla e não normal, com mediana(percentil 25 e 75) de 74,32 pg/mL (39,2 - 157,7). Usando os valores transformados por função logarítmica, houve significante correlação entre os níveis do peptídeo e a idade (Pearson=0,280; p=O,O1). Os níveis de BNP correlacionaram-se com a massa miocárdica (Pearson=0,287; p=0,013) e a pós-carga (Pearson=0,321; p=0,005). A regressão logística univariada mostrou que a elevação do BNP aumentou o risco de disfunção diastólica (OR: 2,78; IC95%:1,36- 5,68, p=0,004). De acordo com o modelo logístico multinomial com logits acumulados de chances proporcionais a presença de disfunção renal aumentou a chance de encontrar-se BNP elevado (OR: 2,62; IC95%: 1,002 - 6,893). Neste mesmo modelo, vericou-se que a presença de aumento de volume do átrio esquerdo quase triplicou a chance de BNP elevado (OR: 2,917; IC95%: 1,067 - 7,973)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The contribution from B-type natriuretic peptide (BNP) for defining cardiac etiology in cases of acute dyspnea has been amply validated, however when systolic function is preserved, especially in the elderly, the role of this peptide has still not been established. To verify the behaviour of BNP values in elderly individuals with preserved systolic function; also to associate BNP values with clinical variables and Doppler echocardiographs, and evaluate clinical outcomes after 12 months follow-up. Seventy-six individuals of 60 years or over were submitted to clinical evaluation, echocardiograph, and BNP levels. Associations between BNP and clinical variables and echocardiographs were verified by the x2 test, Pearson coefficient of correlation, and logistic model with multinomial response and accumulated logits. In all cases significance level was p<0.05. BNP values in elderly individuals with preserved systolic function presented wide non-normal distribution with median (25th, 75th percentiles) of 74,34 pg(ml (39,2 - 157,7). Using log function of the values, there was a significant correlation between peptide levels and age (Pearson coeficient=0.280; p=O.OI). BNP levels correlated with myocardial mass (Pearson=0.287; p=0.013) and afterload (Pearson=0.321; p=0.005). Univariate logistic regression showed that elevated BNP increased the risk of diastolic dysfunction (OR: 2.78; IC95%:1.36-5.68; p=0.004). According to the multinomial logistic model with accumulated logits of proportional chances, the presence of renal dysfunction increased the chance of finding high BNP (OR: 2,62; IC95%:1,002 - 6,863). In the same model, increased left atrium volume almost tripled the chance of elevated BNP (OR: 2,91; IC95%:1,067 - 7,9730). There were no relevant clinical outcomes after 12 months follow-up, independent of BNP values. BNP levels in the elderly with preserved systolic function... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Paulo Eduardo de Abreu Machado / Resumo: Com o objetivo de contribuir para o esclarecimento de alguns pontos obscuros nas relações existentes entre a atividade da via das pentoses e a redução das metahemoglobina pela cistamina, em indivíduos normais e doentes com malária, causada pelo Plasmodium falciparum, bem como a relação entre a atividade da glutationa redutase e o efeito do tratamento pela riboflavina, foi proposto novo método de pesquisa pouco dispendioso, simples e que permitisse aplicação em estudo de campo. Com o método padronizado, foram estudados indivíduos normais de Botucatu, Amazônia e Anhembi e doentes com malária causada pelo Plasmodium falciparum, atendidos em Humaitá... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Click electronic access below. / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-04-14T20:22:26Z No. of bitstreams: 1 2009_PenhaCristinaZaidanAlves.pdf: 890016 bytes, checksum: 7ca157433c8395959f0765b44a782f73 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-05-18T04:47:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_PenhaCristinaZaidanAlves.pdf: 890016 bytes, checksum: 7ca157433c8395959f0765b44a782f73 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-18T04:47:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_PenhaCristinaZaidanAlves.pdf: 890016 bytes, checksum: 7ca157433c8395959f0765b44a782f73 (MD5) Previous issue date: 2009 / Organismos aeróbicos estão sujeitos aos intermediários reativos gerados durante a respiração celular. Esses são caracterizados como EROS (Espécies Reativas ao Oxigênio) responsável pelo aumento do estresse oxidativo e conseqüentes danos ao DNA. O organismo desenvolveu um mecanismo de detoxificação no qual as enzimas antioxidantes endógenas, catalase, superóxido dismutase, glutationa peroxidase, e haptoglobina agem sobre os EROS reduzindo possíveis danos no DNA. Diversos estudos associam o polimorfismo dessas enzimas ao risco do desenvolvimento de patologias. O presente estudo observou se a variabilidade genética da região promotora da catalase (21A/T), hGPX1 (Pro198Leu), SOD2(Val-9Ala) e haptoglobina confere diferença na proteção ao estresse oxidativo promovido pelo peróxido de hidrogênio nas concentrações de 250μM e 1mM em indivíduos jovens e saudáveis de Brasília. A variação das enzimas antioxidantes endógenas avaliadas, sugere conferir diferentes graus de proteção ao DNA contra o estresse oxidativo, induzido in vitro pelo peróxido de hidrogênio em indivíduos jovens e saudáveis da população de Brasília. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Aerobic organisms are subjected to reactive intermediaries that are generated during cell breathing. They are characterized as ROS (Reactive Oxygen Species), which are responsible for oxidative stress increase and damages to DNA. T h e organism developed a detoxification mechanism in which the endogenous anti-oxidant enzymes catalase, superoxide dismutase, glutathione peroxidase and haptoglobin act on ROS reducing possible damages to DNA. Many studies have associated these enzyme polymorphisms and the development of pathologies. T he present study observed if the genetic variability of the promoting catalase region (21A/T), hGPX1 (Pro/Leu), SOD2 ( Val/9Ala) and haptoglobin concede difference in the protection of oxidative stress, by H2O2 within concentrations of 250μM and 1mM in healthy, young subjects from Brasilia. T he variation by endogenous anti-oxidants enzymes avaliated in this study, suggest confer levels differents the DNA protection to oxidative stress, in vitro, by H2O2.

Embora há muito tempo se considere que alterações neurobiológicas tenham um papel central no transtorno bipolar (TB), os mecanismos moleculares ligados à sua fisiopatologia permanecem desconhecidos. A hipótese atual sugere que alterações nos circuitos cerebrais associados à regulação do humor e alterações em sistemas de sinalização intracelular associados à plasticidade e sobrevivência neuronal estão envolvidas no TB. Modelos animais são ferramentas úteis que nos permitam testar estas hipóteses e a resposta aos agentes farmacológicos. Um dos mais bem estabelecidos modelos animais de mania é o de hiperatividade induzida por psicoestimulantes. Portanto, o objetivo dos nossos estudos foi desenvolver um modelo animal de mania avaliando os efeitos do tratamento agudo e crônico com d-anfetamina (ANF) na atividade locomotora em ratos Wistar adultos. Em paralelo, nós investigamos o estresse oxidativo induzido pela ANF no córtex pré-frontal (CPF), hipocampo (HIPO) e estriado. A atividade locomotora foi avaliada através do teste de campo aberto e o malondialdeído (TBARS), proteinas carbonila, superóxido dismutase (SOD) e a catalase (CAT) foram usados como parâmetros de estresse oxidativo. O uso agudo e crônico de ANF aumentou a atividade locomotora e induziu um estado de estresse oxidativo no CPF, HIPO e estriado. Além disso, o tratamento crônico com ANF aumentou a formação de superóxido e TBARS em partículas submitocondriais no CPF e HIPO. Em conjunto, estes resultados sugerem que o tratamento crônico com ANF induz hiperatividade e aumenta o estresse oxidativo no cérebro de ratos. Em uma segunda etapa, estudamos se os estabilizadores de humor litio (Li) e valproato (VPT) previnem e revertem a hiperatividade e as alterações dos marcadores bioquímicos induzidos pela ANF no HIPO de ratos. Com este modelo, observamos que o Li e o VPT reverteram e preveniram a hiperatividade e o estresse oxidativo induzidos pela ANF. Ainda, observamos que o Li e o VPT aumentaram o fator neurotrófico derivado do cérebro e que este efeito pode estar envolvido com o comportamento locomotor. Entretanto, embora o Li tenha aumentado o fator de crescimento neural no HIPO dos ratos, este efeito foi independente ao comportamento locomotor. Nós também estudamos os níveis de SOD, CAT, TBARS e o dano em DNA no soro de duas gemas monozigóticas durante episódio maníaco. As gêmeas bipolares apresentaram elevação em SOD, TBARS e dano ao DNA e redução da CAT que o controle. Os níveis de SOD e de TBARS normalizaram após o tratamento com Li e antipsicóticos. Estes achados estão de acordo com os resultados do modelo animal e indicam que o estresse oxidativo pode estar associado à fisiopatologia do TB. Em conclusão, nossos estudos sugerem que nosso modelo animal apresenta uma boa validade aparente, interpretativa e preditiva como um modelo animal de mania. / Although it has long been considered that neurobiological changes play a critical role in bipolar disorder (BD), the molecular mechanisms underlying its pathophysiology remain largely unknown. Current hypothesis suggests that changes within the brain circuits associated with mood regulation, and altered intracellular signaling system associated with neuronal plasticity and survival are involved in BD. Animal models are useful tools that allow us to test these hypotheses and the response to pharmacological agents. One of the best established animal models of mania is the psychostimulant-induced hyperactivity. Therefore, the aim of our studies was to develop an animal model of mania assessing the effects of acute and chronic treatment of d-amphetamine (AMPH) on locomotor activity in adult Wistar rats. In parallel, we investigated AMPH-induced oxidative stress in the prefrontal cortex (PFC), hippocampus (HIPPO), and striatum. Locomotor activity was assessed using the open field test and malondialdehyde (TBARS), protein carbonyl, superoxide dismutase (SOD), and catalase (CAT) were used as oxidative stress parameters. Acute and chronic AMPH exposure increased the locomotor activity and induced an oxidative stress status in the PFC, HIPPO, and striatum. Moreover, chronic AMPH treatment increased superoxide and TBARS formation in submitochondrial particles in the PFC and HIPPO. Taken together, these results suggest that chronic AMPH treatment induces hyperactivity and increased oxidative stress in rat brain. As a second step we studied whether the mood stabilizers lithium (Li) and valproate (VPT) prevent and reverse AMPH-induced hyperactivity and changes in biochemical markers in rat HIPPO. Using this model, we observed that Li and VPT reversed and prevented AMPH-induced hyperactivity and oxidative stress. Further, we found that Li and VPT increased brain-derived neurotrophic factor, and that this effect may be associated with the locomotor behavior. However, although Li was able to increase nerve growth factor level in rat HIPPO, this effect was independent on locomotor behavior. We also studied serum SOD, CAT, TBARS, and DNA damage levels in two monozygotic twins during a manic episode. The bipolar twins had higher SOD, TBARS and DNA damage, and lower CAT than the control. SOD and TBARS levels were normalized after treatment with Li and antipsychotics. These findings are in accordance with the results from the animal model, and further indicate that oxidative stress may be associated with the pathophysiology of BD. In conclusion, our studies suggest that our model presents adequate face, construct, and predictive validity as an animal model of mania.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-18Bitstream added on 2014-06-13T19:40:53Z : No. of bitstreams: 1 leopoldo_apl_dr_botfm.pdf: 2253115 bytes, checksum: 28ca3088b9d995d2eab4a88eb473ac7d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Atualmente mais de um bilhão de pessoas apresentam sobrepeso, sendo que, mais de 30% desta população é obesa. Diversas alterações estruturais e funcionais do coração em humanos tem sido frequentemente associadas com a obesidade. Modelos experimentais, por dieta hiperlipídica, têm sido utilizados para estudar a relação obesidade e coração. O trânsito de cálcio miocárdico tem sido extensivamente estudado em diversos modelos experimentais e frequentemente relacionado com disfunção cardíaca. Entretanto, a literatura mostra escassez de estudos que avaliaram a relação entre o tempo de exposição à obesidade por dieta hiperlipídica, o RNAm e as proteínas envolvidas na homeostase de Ca+2 miocárdico. Além disso, pesquisas relatam a influência dos hormônios tireoidianos nestas proteínas, podendo acarretar alterações na contração e relaxamento cardíaco.O objetivo principal desse estudo foi testar a hipótese que o aumento no tempo de exposição à obesidade acarreta diminuição na expressão e/ou fosforilação das proteínas e dos respectivos níveis de RNAm relacionados com o trânsito de Ca+2 miocárdico. Este estudo teve como objetivo secundário constatar se a diminuição na expressão gênica foi acompanhada de redução dos níveis hormonais tireoidianos. Os períodos de dieta hiperlipídica, utilizados nesse estudo, foram eficientes em promover obesidade, desde que o índice de adiposidade utilizado para caracterizar os animais como obesos foi 79,5%, 82% e 69,5% maior do que os respectivos controles, após 15, 30 e 45 semanas. O tempo de exposição à dieta hiperlipídica não promoveu alterações na gordura corporal total entre os grupos obesos; este resultado indica que, neste trabalho, não houve aumento na intensidade da obesidade ao longo do tempo. Neste estudo foram visualizadas algumas comorbidades frequentemente associadas com a obesidade... / Currently, greater than one billion people are overweight and 30% of the population is obese. Several structural and functional changes of the heart have often been associated with human obesity. Experimental models for high-fat diets have been used to study the relationship between obesity and the heart. Myocardial calcium (Ca2+) handling has been extensively studied in several experimental models and has often been shown to be related to cardiac dysfunction. However, few studies have evaluated the relationship between the duration of exposure to obesity and a high-fat diet, and mRNA and proteins involved in homeostasis of myocardial Ca2+. Some studies have reported the influence of thyroid hormones on these proteins, which may cause changes in cardiac contraction and relaxation. The main objective of the current study was to test the hypothesis that the increased duration of exposure to obesity leads to a reduction in the expression and/or phosphorylation of proteins and mRNA levels related to myocardial Ca2+ handling. This study had, as additional objective, to verify if the decrease in mRNA expression was accompanied by a reduction in thyroid hormone levels. The periods of exposure to a high-fat diet used in this study were effective in promoting obesity since the adiposity index used to characterize animals as obese was 79.5%, 82%, and 69.5% higher than controls after 15, 30, and 45 weeks, respectively. The duration of exposure to a high-fat diet did not change the total body fat between the obese groups. This result indicates that there was not an increase in the intensity of obesity over time. In this study, some co-morbidities often associated with experimental obesity existed, such as glucose intolerance, insulin resistance, hyperinsulinemia, hyperleptinemia, and dyslipidemia; however, the co-morbidities were not associated with changes in systolic blood pressure ...(Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Célia Regina Nogueira / Banca: André Ferreira do Nascimento / Banca: Glaucia Maria Ferreira da Silva Mazeto / Resumo:A causa básica da obesidade é multifatorial e é provavelmente uma combinação entre genética, meio ambiente e fatores psicossociais que determinam o balanço entre a ingestão alimentar e o gasto energético. Estudos clínicos mostram que obesidade está associada à disfunção ventricular, geralmente, diastólica. A relação entre obesidade e o trânsito de Ca2+ intracelular tem sido estudada por técnicas de biologia molecular, as quais tornam possível o entendimento dos mecanismos responsáveis pelas alterações no desempenho do miocárdio. O trânsito de cálcio intracelular é regulado pelo trocador Na+/Ca2+, Canal do tipo L do reticulo sarcoplasmático (SR), canal rianodina (RYR), bomba Ca2 + ATPase do RS (SERCA), fosfolambam (PLB). Os raros estudos que avaliaram as proteínas envolvidas na homeostase intracelular de Ca2+ do miocárdio em modelos experimentais de obesidade apresentaram resultados divergentes. Sabe-se que a administração de T3 pode alterar a expressão gênica e protéica de proteínas relacionadas ao trânsito de cálcio cardíaco. A restrição alimentar é a estratégia mais comum para tratar a obesidade e têm papel central na redução de gordura em indivíduos obesos. Poucos estudos têm analisado os mecanismos moleculares relacionados com o ciclo de Ca2+ do miocárdio no coração de animais submetidos à restrição. Assim, qualquer modificação na expressão dessas proteínas poderia levar a anormalidades da homeostase do Ca2+ e, consequentemente, disfunção contrátil no tecido cardíaco de ratos submetidos à restrição alimentar. O objetivo deste estudo foi analisar a influência da obesidade e na restrição alimentar em obesos com dieta hiperlípidica rica em ácidos graxos insaturados e administração de diferentes doses de hormônio tireoidiano na expressão gênica e protéica de proteínas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract:The underlying cause of obesity is multifactorial and is probably a combination of genetic, environmental and psychosocial factors that determine the balance between food intake and energy expenditure. Clinical studies show that obesity is associated with ventricular dysfunction, usually diastolic. The relationship between obesity and transit of intracellular Ca2+ has been studied by molecular biology techniques, which make possible the understanding of the mechanisms responsible for changes in myocardial performance. The transit of intracellular calcium is regulated by Na+ / Ca2+, L channel, sarcoplasmic reticulum (SR), channel ryanodine (RYR2), SR Ca2+ pump ATPase (SERCA2), phospholamban (PLB). Few studies that evaluated the proteins involved in intracellular Ca2+ homeostasis of the myocardium in model experimental showed divergent results in obesity. It is known that obesity and administration of T3 may alter the gene and protein expression of the transit of calcium in the heart. Food restriction is the most common strategy for treating obesity and has a central role in fat reduction in obese subjects. Few studies have examined the molecular mechanisms related to myocardial Ca2+ cycle in the heart of restricted animals. So any change in the expression of Ca2+ related genes could lead to abnormal Ca2+ homeostasis and, consequently, contractile dysfunction in heart tissue of rats restricted. The objective of this study was to analyze the influence of obesity and food restriction on administration of different doses of thyroid hormone on gene and protein expression of proteins related to the transit of cardiac calcium. For this, male Wistar rats were randomized and initially divided into two groups: control (C) and obese (OB). Group C received a standard diet and OB animals... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:45:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012 / Introdução: A esquistossomose e potencialmente a causa mais comum de hipertensao arterial pulmonar (HAP) no mundo. Apesar de semelhancas histopatologicas com a HAP idiopatica (HAPI), a HAP associada a esquistossomose (HAP-Esq) apresenta um curso clinico mais benigno, desconhecendo-se, no entanto, os mecanismos que justificam esse disparate. Como a HAP e uma doenca que manifesta-se prioritariamente aos esforcos, a hipotese central deste trabalho foi a de que pacientes com HAP-Esq apresentem respostas fisiologicas ao exercicio incremental, avaliadas atraves de teste de exercicio cardiopulmonar (TECP) em cicloergometro, menos comprometidas que pacientes com HAPI. Objetivos: Primariamente, objetivou-se contrastar as diferencas nos ajustes fisiologicos durante o exercicio dinamico entre pacientes com HAPI e HAP-Esq; secundariamente, objetivou-se correlacionar as variaveis hemodinamicas de repouso com os parametros do TECP e, ainda, avaliar a capacidade do teste de caminhada de seis minutos (TC6M) em identificar limitacoes no desempenho aerobico dos pacientes com HAPI e HAP-Esq. Metodos: Foram analisados TECP incremental em cicloergometro e TC6M de pacientes com HAPI e HAP-Esq, realizados ate 1 mes apos a avaliacao hemodinamica diagnostica, e sem que tratamento especifico para HAP tivesse sido iniciado. Houve duas fases distintas no delineamento do estudo: i) analise retrospectiva de pacientes que realizaram TECP como parte da rotina ambulatorial ou de protocolos de pesquisa; ii) fase prospectiva, na qual individuos com diagnostico recente de HAPI ou HAP-Esq foram submetidos a TECP incremental. Resultados: Foram avaliados 8 pacientes com HAP-Esq e 9 com HAPI. O indice cardiaco (IC), a resistencia vascular pulmonar e a pressao media de arteria pulmonar foram similares entre os grupos. Nao houve diferencas na estimativa da classe funcional da New York Heart Association e na distancia caminhada no TC6M entre os grupos. No entanto, no TECP, o O2pico foi maior em pacientes com HAP-Esq (75,5 ± 21,4 vs 54,1 ± 16,1 %previsto; p=0,016), assim como a inclinacao da relacao O2-W (8,2 ± 1,0 vs 6,8 ± 1,8 mL/min/W; p=0,03). Os individuos com HAP-Esq apresentaram maiores valores de pulso de oxigenio comparativamente a HAPI, alem de menor resposta taquicardica conforme a demanda metabolica (80,1 ± 20,6 vs 123,0 ± 39,2 batimentos/L/min; p=0,02). A inclinacao da relacao E- CO2 foi menor na HAPEsq (40,3 ± 3,9 vs 55,6 ± 19,8; p= 0,04). Houve correlacao entre o IC de repouso e O2pico, O2/W e E/ CO2 apenas nos pacientes com HAPI. Nao houve correlacao do O2pico com a distancia caminhada no TC6M. Conclusoes: Pacientes com HAPEsq apresentaram respostas fisiologicas ao exercicio incremental menos comprometidas que os pacientes com HAPI, mesmo com padrao hemodinamico similar ao repouso. Houve correlacao entre variaveis do TECP e hemodinamicas de repouso apenas nos pacientes com HAPI. O TC6M nao apresentou capacidade de detectar as disparidades funcionais entre os grupos. Os achados ao TECP sugerem que os pacientes com HAP-Esq possuam melhor capacidade em ajustar o debito cardiaco conforme a demanda metabolica durante o esforco, o que pode explicar o melhor curso clinico observado comparativamente a HAPI / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-02Bitstream added on 2014-06-13T20:53:43Z : No. of bitstreams: 1 marino_j_me_botfm.pdf: 842153 bytes, checksum: fe925662e50d895832365bfa494e4623 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / The underlying cause of obesity is multifactorial and is probably a combination of genetic, environmental and psychosocial factors that determine the balance between food intake and energy expenditure. Clinical studies show that obesity is associated with ventricular dysfunction, usually diastolic. The relationship between obesity and transit of intracellular Ca2+ has been studied by molecular biology techniques, which make possible the understanding of the mechanisms responsible for changes in myocardial performance. The transit of intracellular calcium is regulated by Na+ / Ca2+, L channel, sarcoplasmic reticulum (SR), channel ryanodine (RYR2), SR Ca2+ pump ATPase (SERCA2), phospholamban (PLB). Few studies that evaluated the proteins involved in intracellular Ca2+ homeostasis of the myocardium in model experimental showed divergent results in obesity. It is known that obesity and administration of T3 may alter the gene and protein expression of the transit of calcium in the heart. Food restriction is the most common strategy for treating obesity and has a central role in fat reduction in obese subjects. Few studies have examined the molecular mechanisms related to myocardial Ca2+ cycle in the heart of restricted animals. So any change in the expression of Ca2+ related genes could lead to abnormal Ca2+ homeostasis and, consequently, contractile dysfunction in heart tissue of rats restricted. The objective of this study was to analyze the influence of obesity and food restriction on administration of different doses of thyroid hormone on gene and protein expression of proteins related to the transit of cardiac calcium. For this, male Wistar rats were randomized and initially divided into two groups: control (C) and obese (OB). Group C received a standard diet and OB animals... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo: Atualmente mais de um bilhão de pessoas apresentam sobrepeso, sendo que, mais de 30% desta população é obesa. Diversas alterações estruturais e funcionais do coração em humanos tem sido frequentemente associadas com a obesidade. Modelos experimentais, por dieta hiperlipídica, têm sido utilizados para estudar a relação obesidade e coração. O trânsito de cálcio miocárdico tem sido extensivamente estudado em diversos modelos experimentais e frequentemente relacionado com disfunção cardíaca. Entretanto, a literatura mostra escassez de estudos que avaliaram a relação entre o tempo de exposição à obesidade por dieta hiperlipídica, o RNAm e as proteínas envolvidas na homeostase de Ca+2 miocárdico. Além disso, pesquisas relatam a influência dos hormônios tireoidianos nestas proteínas, podendo acarretar alterações na contração e relaxamento cardíaco.O objetivo principal desse estudo foi testar a hipótese que o aumento no tempo de exposição à obesidade acarreta diminuição na expressão e/ou fosforilação das proteínas e dos respectivos níveis de RNAm relacionados com o trânsito de Ca+2 miocárdico. Este estudo teve como objetivo secundário constatar se a diminuição na expressão gênica foi acompanhada de redução dos níveis hormonais tireoidianos. Os períodos de dieta hiperlipídica, utilizados nesse estudo, foram eficientes em promover obesidade, desde que o índice de adiposidade utilizado para caracterizar os animais como obesos foi 79,5%, 82% e 69,5% maior do que os respectivos controles, após 15, 30 e 45 semanas. O tempo de exposição à dieta hiperlipídica não promoveu alterações na gordura corporal total entre os grupos obesos; este resultado indica que, neste trabalho, não houve aumento na intensidade da obesidade ao longo do tempo. Neste estudo foram visualizadas algumas comorbidades frequentemente associadas com a obesidade ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Currently, greater than one billion people are overweight and 30% of the population is obese. Several structural and functional changes of the heart have often been associated with human obesity. Experimental models for high-fat diets have been used to study the relationship between obesity and the heart. Myocardial calcium (Ca2+) handling has been extensively studied in several experimental models and has often been shown to be related to cardiac dysfunction. However, few studies have evaluated the relationship between the duration of exposure to obesity and a high-fat diet, and mRNA and proteins involved in homeostasis of myocardial Ca2+. Some studies have reported the influence of thyroid hormones on these proteins, which may cause changes in cardiac contraction and relaxation. The main objective of the current study was to test the hypothesis that the increased duration of exposure to obesity leads to a reduction in the expression and/or phosphorylation of proteins and mRNA levels related to myocardial Ca2+ handling. This study had, as additional objective, to verify if the decrease in mRNA expression was accompanied by a reduction in thyroid hormone levels. The periods of exposure to a high-fat diet used in this study were effective in promoting obesity since the adiposity index used to characterize animals as obese was 79.5%, 82%, and 69.5% higher than controls after 15, 30, and 45 weeks, respectively. The duration of exposure to a high-fat diet did not change the total body fat between the obese groups. This result indicates that there was not an increase in the intensity of obesity over time. In this study, some co-morbidities often associated with experimental obesity existed, such as glucose intolerance, insulin resistance, hyperinsulinemia, hyperleptinemia, and dyslipidemia; however, the co-morbidities were not associated with changes in systolic blood pressure ...(Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Antonio Carlos Cicogna / Coorientador: Patrícia Chakur Brum / Banca: Alessandra Medeiros / Banca: Carlos Eduardo Negrão / Banca: Célia Regina Nogueira / Banca: Maeli Dal Pai Silva / Doutor

Orientador: Mario Jose Abdalla Saad / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T07:59:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalheira_JoseBarretoCampello_D.pdf: 29196532 bytes, checksum: 6adaf88914f9488a42fc234e6f8867f9 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Insulina e leptina atuam de forma semelhante e aditiva para controlar a homeostase energética. Entretanto, a base molecular desse sinergismo permanece desconhecida. A insulina sinaliza através de um receptor tirosina quinase que fosforila e ativa seus substratos (IRSs - substratos do receptor de insulina), enquanto a leptina e sua proteína tirosina quinase associada JAK2 (Janus Kinase 2) medeiam a fosforilação e ativação do fator de transcrição STAT3 (Signal Transducer and Activator of Transcription). Para investigar se a insulina e a leptina ativam as mesmas vias de sinalização e para determinar se esses hormônios interagem em hipotálamo, ratos Wistar machos foram estudados após implante de cânula no terceiro ventrículo através de imunoprecipitação, immunoblotting e gel shift. A administração aguda intracerebroventricular (icv) de insulina resultou em aumento da fosforilação do receptor de insulina (IR), substrato 1 do receptor de insulina (JRS-l), substrato 2 do receptor de insulina (IRS-2) e MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase), além da associação entre os IRSs e a PI 3-quinase e a fosforilação em serina da Akt. A administração icv de leptina resultou na fosforilação em tirosina da JAK2, OBR, STAT3, IRS-1, IRS-2 e MAPK, bem como da associação entre os IRSs e a PI 3-quinase mas não foi observada a fosforilação da Akt. O estímulo simultâneo com os dois hormônios não aumentou a fosforilação do IRS-1, IRS-2, Akt e MAPK quando comparado com a administração isolada de insulina. Em contrapartida, a insulina induziu a fosforilação da JAK2 e do receptor de leptina (OBR) que, em presença de leptina, aumentou a interação entre o STAT3 e o OBR com conseqüente aumento da ativação do STAT3. A leptina ativou as vias de sinalização classicamente induzidas pela insulina no hipotálamo, e essas vias se intercruzaram, mas foram utilizadas de forma distinta que quando utilizadas pela insulina. Por outro lado a insulina modulou positivamente a via de sinalização da leptina. Esses resultados proporcionam uma base molecular para os efeitos coordenados da insulina e leptina no controle do apetite e peso corporal. Para demonstrar interdependência entre as vias de sinalização da insulina e leptina em hipotálamo de ratos, a transmissão do sinal de insulina em direção às vias da PI 3-quinase e MAPK foi comparada em hipotálamo de ratos zucker obesos (modelo animal de resistência insulina causado pela mutação do receptor de leptina) e controle. A infusão icv de insulina reduziu a ingestão alimentar de ratos controle, o que não foi observado nos animais obesos. Constatamos redução da fosforilação do IR, IRS-1, IRS-2, da associação entre a subunidade p85 da PI 3-quinase com as proteínas IRSs, bem como da fosforilação em serina da Akt no hipotálamo de ratos obesos comparado com os ratos magros. Em contraste, a insulina estimulou a fosforilação em tirosina da MAPK de forma similar em ratos magros e obesos. Assim, documentamos resistência à sinalização da insulina em tecidos hipotalâmicos de ratos Zucker obesos. Esses resultados fortalecem a hipótese de que a insulina tem suas ações anti-obesidade através da via da PI 3-quinase e que a diminuição do sinal por esta via no hipotálamo pode contribuir para o desenvolvimento de obesidade em estados de resistência à insulina. Originalmente, pensava-se que o hipotálamo era o único tecido a expressar a forma longa do receptor de leptina. Entretanto, evidências recentes sugerem que órgãos periféricos, entre eles o figado, também expressam a forma longa do receptor. Assim, na segunda parte deste estudo investigamos os efeitos rápidos e diretos da leptina em figado e determinamos se a leptina interage com a insulina nesse órgão. Em figado de ratos a injeção aguda de leptina ou insulina estimulou a fosforilação da JAK2, STAT3 e STAT5b. A leptina foi menos efetiva que a insulina em estimular as proteínas IRS e a associação destas com a PI 3-quinase. O tratamento simultâneo com os dois hormônios não modificou a fosforilação máxima do STAT3, IRS-l, IRS-2 e Akt, mas causou aumento significativo da fosforilação da JAK2 e do STAT5b quando comparado com a administração isolada de insulina ou leptina. Assim, detectamos uma inter-relação positiva nas vias de sinalização desses hormônios nas proteínas JAK2 e STAT5b em figado de ratos. Concluindo, estes estudos caracterizaram as vias de transmissão do sinal de leptina em hipotálamo e figado, evidenciando mecanismos para a integração da sinalização de insulina e leptina bem como a modulação destas vias em modelo animal de resistência à insulina e leptina nesses tecidos / Abstract: Insulin and leptin have overlapping effects in the control of energy homeostasis and glucose metabolism, but the molecular basis of this synergism is unknown. Insulin signals through a receptor tyrosine kinase that phosphorylates and activates the docking proteins IRSs (insulin receptor substrates), whereas the leptin receptor and its associated protein tyrosine kinase JAK2 (Janus kinase 2) mediate phosphorylation and activation of the transcription factor STAT3 (signal transducer and activator oftranscription). To investigate whether insulin and leptin share common intracellular signal transduction pathways and to determine whether these hormonal signaling systems modulate each other's action in rat hypothalamus male Wistar rats were studied after chronic implantation of an intracerebroventricular (i.c.v.) catheter into the third ventricle. Immunoprecipitation, immunoblotting and EMSA assays were used to examine the activation of insulin and leptin signaling molecules in the rat hypothalamus. Acute i.c.v. administration of insulin resulted in a time-dependent increase in tyrosine phosphorylation of the insulin receptor (IR), insulin receptor substrate 1 (IRS-1), insulin receptor substrate 2 (IRS-2) and MAPK (mitogen activated proein kinase), PI 3 kinase docking and serine phosphorylation of Akt. The i.c.v. administration of leptin resulted in tyrosine phosphorylation of JAK2, IRS-1, IRS-2 and MAPK and PI 3 kinase docking but no phosphorylation of Akt was observed. Simultaneous stimulation with both hormones did not increment tyrosine phosphorylation of IRS-1, IRS-2, Akt and MAPK when compared with isolated administration of insulin. In addition insulin induced JAK2 tyrosine phosphorylation and leptin receptor phosphorylation, which in the presence of leptin, augmented the interaction between STAT3 and this receptor. Insulin also increased the leptin-induced phosphorylation of STAT3 and its activation. Leptin rapidly activates classically insulin signaling pathways directly at the level of hypothalamus, and these pathways overlap with, but are distinct from, those engaged by insulin. On the other side, insulin modulates the leptin signal transduction pathway, and may provide a molecular basis for the coordinated effects of insulin and leptin in feeding behavior and weight control. To demonstrate the interdependence between insulin and leptin signaling in rat hypothalamus in vivo insulin signaling through the phosphatidylinositol 3-kinase (pI 3-kinase), mitogen-activated protein (MAP) kinase were compared in the hypothalamictissues of lean (Fa/?) and obese Zucker (falfa) rats (animal model of insulin resistance, which has a defect in the leptin receptor). Icv insulin infusion reduced food intake in Iean rats but no effect was observed in obese Zucker rats. Pretreatment with PI 3-kinase inhibitors prevents insulin-induced anorexia in lean rats. Insulin-stimulated tyrosine phosphorylation of insulin receptor (IR), IR substrates (IRS-1, IRS-2), the associations of p85 subunit of PI 3-kinase to the IRS proteins and serine phosphorylation of Akt in the hypothalamus of obese rats were significantly decreased compared with the lean rats. In contrast, insulin stimulated tyrosine phosphorylation of MAP kinase was similar in lean and obese rats. This segment of the study provides direct measurements of insulin signaIing in hypothalamic tissues, and document selective resistance to insulin signaling in the hypothalamus of obese Zucker rats at the molecular leveI. These findings have provided support for the hypothesis that insulin may have anti-obesity actions mediated by the PI 3-kinase pathway and that the impaired PI 3-kinase signal pathway in the hypothalamus may Iead to the development of obesity in insulin resistance and diabetic patients. Originally, it was thought that the hypothalamus was the only tissue expressing OBRb. However, recent evidence at the level of messenger RNA expression and cellular function suggest that peripheral organs including liver also express OBRb. Therefore the second part of the study was designed to investigate the rapid and potentially direct effects of leptin on signal transduction in liver and to determine whether insulin and leptin share common intracellular signal transduction pathways. Chronic leptin treatment markedly enhances the action of insulin on hepatic glucose production out of proportion to the body weight loss and increased insulin sensitivity. In the present experiments the cross-talk between insulin and leptin was evaluated in rat liver. Leptin, upon stimulation of JAK2 tyrosine phosphorylation, induced JAK2 coimmunoprecipitation with STAT3, STAT5b, IRS-1 and IRS-2. This phenomenon parallels the leptin-induced tyrosine phosphorylation of STAT3, STAT5b, IRS-1 and IRS-2. Acutely injected insulin stimulated a mild increase in tyrosine phosphorylation of JAK2, STAT3 and STAT5b. Leptin was less effective than insulin at stimulating IRSs phosphorylation and their associations with PI 3-kinase. Simultaneous treatment with both hormones promoted no change in maximal phosphorylation of STAT3, IRS-l, IRS-2 and Akt, but led to marked increase in tyrosine phosphorylation of JAK2 and STAT5b when compared with isolated administration of insulin or leptin. Thus, there is a positive cross-talk between insulin and leptin signaling pathways at the level of JAK2 and STAT5b in rat liver. We have characterized the leptin signaling pathway in hypothalamus and liver and demonstrate various mechanisms for the integration between insulin and leptin in these tissues. We have also showed that the cross-talk between these hormones is tissue dependent and that the effects of this interaction affects the energetic homeostasis and glucose metabolism in the various steps / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica