Ett vanligt återkommande problem inom pappersindustrin är fläckar på den färdiga produkten. BillerudKorsnäs Gävle har genom undersökningar kommit fram till att en del fläckar som just nu uppkommer till stor del består av Alkyl keten dimer, AKD. AKD är ett lim som tillsätts i mälden för att öka hydrofobiciteten hos pappret eller kartongen. AKD partikeln skyddas av ett hölje bestående av katjonisk polymer för att partikeln lättare ska fästa på träfibrerna i processen. Om detta hölje blir instabilt ökar risken för bildning av agglomerat och en sämre retention på pappersmaskinen vilket i sin tur kan orsaka fläckar på den färdiga kartongen. Detta arbete för att undersöka stabiliteten hos AKD har därför gjorts.   För att undersöka stabiliteten hos AKD har olika processparametrars inverkan på AKD partikelns stabilitet undersökts. Tester gjordes på två olika AKD och de processparametrar som testats i detta arbete är temperatur, pH och salthalt. Även prover från processen har tagits ut för att undersöka om rena AKD prover kan relateras till processen. Proverna undersöktes i en flödescytometer för att detektera graden av hydrofobicitet hos partiklarna i proverna.   Resultaten visade att det testade temperaturspannet inte påverkade stabiliteten hos AKD partikeln nämnvärt. Försöken där pH förändrades kunde påvisa påverkan hos stabiliteten. Detta innebär att AKD i processen påverkas, och att uppkomsten av fläckar i kartongen delvis kan bero på instabiliteten hos AKD partikeln vid förändring av pH i processen. Stabiliteten hos ett utspätt prov påverkades inte nämnvärt under ett tidsintervall på 60 dagar. / A recurring problem in the paper industry is spots on the finished product. Through previous studies, Billerudkorsnäs Gävle has detected one of the sources of these stains to be Alkyl keten dimer (AKD). AKD is a glue that is added to the ground pulp to increase the hydrophobicity of the paper or cardboard. The AKD particle is protected by a cationic polymer to make it easier for the particle to attach to the fibers in the process. If the polymer becomes instable, the risk of the AKD particles forming agglomerate increases and the retention in the paper machine decrease, which can lead to stains on the finished cardboard. This work with the aim of investigation of the stability of AKD has therefore been done.   To investigate the stability of AKD, the impact of different process parameters on the AKD particle has been studied. Test has been done with two different AKD, and the process parameters tested in this work were temperature, pH and salinity. Samples from the process has also been studied to investigate if the pure AKD samples could be related to the process. All the samples were analyzed in a flow cytometry to detect the degree of hydrophobicity of the particles in the samples.   The result showed that the tested temperature range did not affect the stability of the AKD particles. The experiments where the pH were changed showed that the stability of the particles were affected. This means that AKD in the process is affected, and that the appearance of stains in the carton may partly be due to the instability of the AKD particle in changing the pH of the process. The stability of a diluted sample was not significantly affected over a 60 day time interval.

Flow cytometric methods are used to count leukocytes in quality control (QC) of blood components using the LeucoCount method. This involves using fluorescent dyes that bind to DNA/ RNA in combination with TruCount tubes. Flow cytometric can also be used to analyze lymphocyte subpopulations using the BD MultitestTM 6-color TBNK reagent and TruCount tubes. The study aimed to evaluate the stability of leukocyte counting QC samples and blood samples for lymphocyte subpopulation analysis within 48 hours of collection. In this study 10 erythrocytes concentrates, 10 thrombocytes concentrate, 10 blood doner samples and 14 patient samples was collected. The results showed that both the QC samples and patient samples can be stored for up to 48 hours without significant changes. Some variation was observed between the analysis conducted at 4, 24 and 48 hours, possibly due to instrument variation and manual gatening. However, statistical tests indicated no significant differences aiming the time points. Therefore, samples can be reliably analyzed within 48 hours from the time of collection.

Introduction: Hemostasis is a complex system in the body that maintains blood flow and prevents bleeding. Patients with platelet disorders are at the risk of mucocutaneous bleedings and at Clinical chemistry in Linköping platelet function is measured with flow cytometry. The platelet response to various agonists is measured with fluorescently labeled platelet antibodies. The aim of this study was to evaluate the stability of the frozen reagents used for platelet function testing. Further the durability of platelet antibodies after freezing and freeze-drying was tested.   Method: Platelet antibodies were prepared for freezing/freeze-drying in buffer and were analyzed at three different occasions using blood from 2 to 3 individuals with flow cytometry. Agonists and blood were added on the day of analysis. The reagent stability test was evaluated statistically using one-way ANOVA with Bonferronis post-hoc test. Results: The slight drop in percent positive platelets and median fluorescence intensity (MFI) seen over time in the reagent stability test was not statistically significant (p>0,05). All platelet antibodies could be used after freezing/freeze-drying. The results are showing a declining trend, especially for MFI values. Conclusion: The frozen reagents used for platelet function testing is stabile up to 36 months. The results from the freeze-drying/freezing indicate that all platelet antibodies keep some activity but that some are more sensitive than others. Some antibodies could not be evaluated due to concentration of agonist in the sample being too low to induce activation. Due to individual variations further studies with more participants and more agonists in their optimal concentrations are needed. / Bakgrund: Hemostas är ett komplext system i kroppen som upprätthåller blodflödet och förhindrar blödning. Mukokutana blödningar kan uppstå hos patienter som har problem i den primära hemostasen vilket kan bero på trombocydefekter. På Klinisk kemi i Linköping mäts trombocytfunktion med flödescytometri. Trombocyterna aktiveras med olika agonister och svaret på stimuli mäts genom detektion av fluoroforkonjugerade antikroppar. Syftet med denna studie var att utvärdera långtidsstabiliteten av de frysta reagens som används för trombocytfunktionsutredningen, att testa om nya trombocytantikroppar klarar att frysas och att utvärdera reagensens hållbarhet för frystorkning. Metod: Antikroppar frystorkades/frystes i buffert och analyserades vid tre tillfällen med blod från 2 till 3 personer med flödescytometri. Agonist och blod tillsattes på analysdagen. Långtidsstabilitetstestet utvärderades statistiskt med  one-way ANOVA med Bonferronis post-hoc test. Resultat: En svag nedgång över tid i procent positiva trombocyter och MFI i långtidsstabilitetstestet var inte statistiskt signifikant (p>0,05). Alla antikroppar gav signal efter frysning och frystorkning. Främst för MFI syns en nedåtgående trend över tid. Slutsats: Reagenset för trombocytfunktionsutredningen är stabilt upp till 36 månader. Resultat från frystorkningen tyder på att alla antikroppar klarar att frystorkas/frysas men vissa är känsligare än andra. Vissa antikroppar kunde inte utvärderas p.g.a. för låg agonistkoncentration för att inducera aktivering. Ytterligare försök måste göras med fler individer och fler agonister i optimal koncentration p.g.a. individuella skillnader i svar för agonister. Frystorkningsprocessen kan optimeras.

No description available.

Under vissa omständigheter kan bakterier kan ta sig in i blodbanan där de kan orsaka allvarliga infektioner (bakteriemi). Metoden som används för identifiering och resistensbestämning av bakterier i blododlingar kräver minst 16 timmars inkubation. Fram tills en resistensbestämning utförts kan empirisk antibiotikabehandling användas, men med ökande resistensutbredning blir det alltmer osäkert om denna behandling är verksam. Nyligen har en lappdiffusionsmetod för resistensbestämning direkt från blododling validerats, som kan läsas av efter 4, 6 och/eller 8 timmars inkubation. Det finns även publicerade arbeten där flödescytometriassisterad resistensbestämning används, men då krävs att bakterierna finns i tillräckligt hög koncentration, befinner sig i tillväxtfas och finns som renkultur. Syftet med examensarbetet var att optimera hantering av blododlingsflaskor så att bakterier från blododlingsflaskorna kunde isoleras med tillräcklig kvalitet och koncentration för att kunna utföra resistensbestämning med flödescytometri. Upprening av bakterierna utfördes med olika tvättbuffertar och sedan utfördes resistensbestämning med flödescytometri och  referensmetoden buljongspädning. Resultaten från uppreningen visade att sterilt vatten och Tween20 gynnade bakteriernas återhämtningsförmåga mest. Resistensbestämning utfördes med Klebsiella pneumoniae ATCC700603,  K. pneumoniae CCUG56233 och K. pneumoniae ATCC13882, som tvättats med sterilt vatten och Tween20. För CCUG56233 skiljde 1 spädningssteg i koncentrationsskalan mellan metoderna. ATCC-isolaten erhöll likartade MIC-värden (minimum inhibitory concentration) vid alla analyser men där fanns en skillnad på 2 spädningssteg mellan buljongspädning och analys med flödescytometri. Detta kan förklaras av skillnaden i inkubationstid mellan metoderna. Slutsatsen som kan dras är därför att resultaten från de två metoderna vid resistensbestämning är likartade och att sterilt vatten är mest lämpligt att använda vid upprening av bakterier. Fler undersökningar bör dock utföras.

Mjölksyrabakterier är mikroorganismer som bildar mjölksyra när de bryter ned socker. Dessa bakterier förekommer naturligt i människans kropp och tillhör tarmens normalflora. De hjälper dessutom till med att skydda människan från patogena mikroorganismer. Maten som intas idag innehåller mycket lite av mjölksyrabakterier och bör därför berikas på annat sätt. BioGaia som är ett svenskt bioteknikföretag, har forskat på mjölksyrabakterien Limosilactobacillus reuteri och substansen reuterin. BioGaias produkter innehåller mjölksyrabakterien Limosilactobacillus reuteri som bidrar till en balanserad tarmflora. Stabilitetsstudier är en viktig aspekt när en ny produkt utvecklas där produktens hållbarhet behöver undersökas under olika förhållanden. Haltbestämningen som är en del av stabilitetsstudien, görs idag på bakterier i de olika produkterna på BioGaia med plattmetoden, d.v.s. bakterieodlingar. Processen för plattmetoden tar cirka tre dagar tills att ett resultat kan fås. Syftet med studien var att jämföra plattmetoden med flödescytometri på probiotiska prover, för att se om resultatet av haltbestämningen av antalet levande bakterier blir samma med de olika metoderna och om det är möjligt att ersätta plattmetoden med flödescytometri för probiotiska prover. Studien har visat att skillnaden mellan resultatet från plattmetoden och flödescytometrin på probiotiska prover, är större än förväntat. Storleken på skillnaden varierar mellan prover. Resultatet har dock inte ett tydligt mönster som gör det möjligt att avgöra ifall det är möjligt att ersätta plattmetoden med flödescytometri.

Vitt snus ökande popularitet har skapat oro för dess påverkan på immunförsvaret. I föreliggande studie undersöks nikotinets påverkan på uttrycket av interleukin-2-receptorn alfa (IL-2R-alfa eller CD25) hos CD4+ T-celler under in vitro-stimulering. Tidigare studier indikerar negativa effekter såsom minskat antingen upptag hos antigenpresenterande celler, cytokinproduktion och uttryck av receptorer som CD28 och CTLA-4, vilka är viktiga för CD4+ T-cellernas aktivering, differentiering samt bromsning av aktiveringen. Andra studier har visat att alfa-4- samt alfa-7-nikotinerg acetylkolinreceptorer uttrycks på CD4+ T-celler, vilket i sin tur har visat sig påverka cytokin produktionen i närvaro av nikotin under stimulering. CD25 är en viktig receptor vid aktiveringen av T-celler och är överuttryckt vid exempelvis akut T-cells leukemi (ATL). Målet med denna studie är att förstå hur nikotin kan påverka CD25-uttrycket och därmed påverka immunförsvaret och effektiviteten av terapier. Med hjälp av flödescytometri och kvantitativ polymeraskedjereaktion (qPCR) kunde en tydlig skillnad detekteras mellan nikotin/PHA-stimulering och enbart PHA-stimulering hos en donator jämfört med de andra donatorerna. Metoderna inkluderar cellseparation, stimulering med fytohemagglutinin (PHA) i närvaro av nikotin, analys av uttrycket CD25 med flödescytometri och analys av genuttryck av CD25 med qPCR. Resultaten visade varierande svar mellan tre donatorer, med en tydlig skillnad mellan nikotin/PHA- och enbart PHA-stimulering för en donator jämfört med de andra donatorerna. Denna studie pekar på potentiella effekter av nikotin på immunförsvaret och betonar behovet av vidare undersökningar för att förstå mekanismerna bakom detta. / The increasing popularity of white snus has raised concerns about its impact on the immune system. The present study investigates the effect of nicotine on the expression of interleukin-2 receptor alpha (IL-2R-alpha or CD25) in CD4+ T cells during in vitro stimulation. Previous studies have indicated negative effects such as decreased uptake by antigen-presenting cells, cytokine production, and expression of receptors such as CD28 and CTLA-4, which are important for the activation, differentiation, and inhibition of CD4+ T cell activation. Other studies have shown that alpha-4 and alpha-7 nicotinic acetylcholine receptors are expressed on CD4+ T cells, which in turn has been shown to affect cytokine production in the presence of nicotine during stimulation. CD25 is an important receptor for T cell activation and is overexpressed in conditions such as acute T cell leukemia (ATL). The aim of this study is to understand how nicotine may affect CD25 expression and thereby influence the immune response and the effectiveness of therapies. Using flow cytometry and quantitative polymerase chain reaction (qPCR), a clear difference was detected between nicotine/PHA stimulation and PHA stimulation alone in one donor compared to the other donors. The methods include cell separation, stimulation with phytohemagglutinin (PHA) in the presence of nicotine, analysis of CD25 expression by flow cytometry and analysis of CD25 gene expression by qPCR. The results showed varying responses among three donors, with a clear difference between nicotine/PHA and PHA stimulation alone for one donor compared to the others. This study highlights potential effects of nicotine on the immune system and underscores the need for further investigations to understand the mechanisms behind this.

No description available.

No description available.

Flödescytometrisk analys av DNA-ploiditeten används vid diagnostisering av endometriecancer. DNA-ploidi reflekterar cellcykeln och avgör om tumörens cellpopulationen är diploid eller aneuploid, där aneuploiditet förknippas med sämre prognos. Vid analys av paraffininbäddat vävnadsmaterial används avparaffineringsmedlet xylen, vars toxiska egenskaper försämrar arbetsmiljön på laboratoriet. Den har en stark och obehaglig lukt som kan orsaka illamående och yrsel. Syftet med studien var att undersöka om xylen kan ersättas med xylensubstitutet Tissue Clear, ett isoparaffinskt kolväte som är mindre toxiskt. Studien omfattade paraffininbäddad humanvävnad från endometrioid carcinom (n=20), både diploid (n=15) och aneuploid (n=5) vävnad, som avparaffinerades med xylen respektive Tissue Clear innan DNA-ploidi utfördes. Eventuella skillnader inom de flödescytometriska parametrarna % CV-diploid, % S-fas, % debris och DI-aneuploid undersöktes och vid statistisk analys kunde ingen signifikant skillnad ses på samtliga parametrar. Eftersom analysen utförs sällan i rutin är antalet prover i studien relativt stor, trots att detta kan anses vara en liten kvantitet. Av dessa var endast 25 % av proverna aneuploida. Att en patient uppvisar aneuploiditet är ovanligt och därför ansågs även denna mängd som tillräckligt stor. Studien visar att avparaffinering med Tissue Clear är ekvivalent med xylen och därmed kan Tissue Clear ersätta xylen oavsett om vävnaden är diploid eller aneuploid. / DNA ploidy is used for endometrial cancer diagnosis. It reflects the cell cycle and determines whether the cell population in tumors is diploid or aneuploid. When analyzing paraffin embedded tissues xylene can be used for deparaffinization, whose toxicity impairs the laboratory´s work environment. Its strong and unpleasant smell can cause nausea and dizziness. The aim of this study was to investigate if xylene can be replaced with Tissue Clear, an isoparaffinic hydrocarbon that is less toxic. The study included paraffin embedded human tissues from endometrioid carcinoma (n=20), both diploid (n=15) and aneuploid (n=5), deparaffinized with xylene or Tissue Clear before DNA ploidy was performed. Potential differences between the parameters % CV-diploid, % S-phase, % debris and DI-aneuploid were statistically examined and showed no significant differences. The sample amount in this study might be considered low, though it is relatively high since the analysis is rarely performed routinely. Among these only 25 % were aneuploid. Patients showing aneuploidy is rare and the amount was therefore considered to be sufficient as well. The study shows that deparaffinization with Tissue Clear generates equivalent results as for xylene and can thereby replace xylene regardless if the tissue is diploid or aneuploid.