Análise proteômica da matriz do esmalte nos estágios de secreção e maturação em camundongos susceptíveis ou resistentes à fluorose dentária, expostos cronicamente ao fluoreto através da água de beber. Os mecanismos pelos quais a ingestão excessiva de fluoreto (F) durante a amelogênese levam à fluorose dentária ainda não são precisamente conhecidos. Tem sido demonstrado que determinadas linhagens de camundongos são mais susceptíveis que outras à fluorose dentária, o que faz destas linhagens o modelo ideal para se estudarem os fenômenos moleculares envolvidos nesta patologia. No presente estudo, foi empregada uma abordagem proteômica para avaliar alterações na expressão de proteínas da matriz do esmalte dentário nos estágios de secreção e maturação, em duas linhagens de camundongos com diferentes susceptibilidades à fluorose (A/J, susceptível e 129P3/J, resistente). Camundongos de ambos os gêneros, representantes das linhagens 129P3/J (n=200) e A/J (n=200) foram distribuídos em dois grupos para cada linhagem, que receberam ração com baixa concentração de F e água de beber contendo 0 (controle) ou 50 mg/L F por 6 semanas. A concentração de F foi analisada no plasma e no esmalte dos incisivos. Para a análise proteômica, foi realizada a raspagem da matriz do esmalte dos incisivos, nos estágios de secreção e maturação. Para a extração das proteínas do esmalte, foram pesados 15 mg de pó da matriz do esmalte, aos quais foi adicionado 1 mL de tampão de lise contendo uréia 7 M, tiouréia 2 M, CHAPS 4 %, DTT 1 %, anfólitos carreadores 0,5 % pH 3-10 e um coquetel de inibidores de proteases. As proteínas do esmalte extraídas para cada grupo foram separadas pela técnica de eletroforese bidimensional e posteriormente submetidas a LC-ESI-MS/MS. A concentração média (±DP) de F encontrada no plasma dos camundongos foi de 0,023±0,010 e 0,019±0,007 mg/L para os animais do grupo controle, das linhagens A/J e 129P3/J, respectivamente, e de 0,151±0,043 e de 0,252±0,060 mg/L de F para os animais das linhagens A/J e 129P3/J, respectivamente, tratados com água contendo 50 mg/L de F. A ANOVA a 2 critérios revelou que houve diferença significativa entre os tratamentos (F= 658,0, p<0,0001), mas não entre as linhagens (F=3,3 p=0,075), tendo havido interação significativa entre estes critérios (F=16,50, p=0,0002). Já a concentração média (±DP) de F incorporado no esmalte dos incisivos dos camundongos foi 471,4±215,8 mg/kg e 151,7±58,8 mg/kg para os animais do grupo controle das linhagens 129P3/J e A/J, respectivamente, e 2711,2±1019,2 mg/kg, 1756,9±921,6 mg/kg para os animais das linhagens 129P3/J e A/J, respectivamente, tratados com água contendo 50 mg/L de F. A ANOVA a 2 critérios encontrou diferença significativa entre as linhagens (F=11,36, p=0,0016) e entre os tratamentos (F=103,50, p<0,0001), sem interação significativa entre ambos (F=2,82, p=0,1004). Os resultados proteômicos mostraram redução na abundância de proteínas no estágio de maturação, quando comparado com o de secreção. Foi observado que o tratamento com F aumentou consideravelmente o número de spots proteicos detectados em ambos os estágios, sendo que este aumento foi maior para os animais da linhagem A/J, indicando uma tentativa de se combater os efeitos deletérios do F e reforçando a maior susceptibilidade aos seus efeitos desta linhagem. A identificação das proteínas com expressão diferencial revelou que tanto a linhagem quanto o tratamento com F levaram à expressão diferencial de proteínas pertencentes a todas as categorias funcionais. / The mechanisms by which excessive ingestion of fluoride (F) during amelogenesis leads to fluorosis are still not precisely known. It has been shown that certain strains of mice are more susceptible to dental fluorosis than others, which turns these strains the ideal model for studying the molecular phenomena involved in this pathology. In the present study, we employed a proteomic approach to identify and evaluate changes in protein expression of secretory and maturation-stage enamel matrix in two strains of mice with different susceptibilities to dental fluorosis (A/J, susceptible and 129P3/J, resistant). Mice of both genders, from 129P3/J (n=200) and A/J (n=200) strains were divided into two groups for each strain. They received a low-F diet and drinking water containing 0 (control) or 50 mg/L F for 6 weeks. The F concentration was analyzed in plasma and enamel incisors. For proteomic analysis, the enamel matrix of secretory and maturation stages (incisors) was scrapped. For the extraction of enamel proteins, 1 ml of lysis buffer containing 7 M urea, 2 M thiourea, 4% CHAPS, 1% DTT, 0.5% ampholytes carriers pH 3-10 and a cocktail of protease inhibitors was added to 15 mg of enamel matrix powder. The enamel proteins extracted for each group were separated by two-dimensional electrophoresis and subsequently subjected to LC-ESIMS/ MS. The mean (± SD) F concentrations found in plasma were 0.023 ± 0.010 and 0.019 ±0.007 mg/L for the control group, A/J and 129P3/J strains, respectively; and 0.151 ± 0.043 and 0.252 ± 0.060 mg/L F for A/J and 129P3/J mice, respectively, treated with water containing 50 mg/L F. Two-way ANOVA revealed significant differences between treatments (F = 658.0, p <0.0001), but not between strains (F = 3.3 p = 0.075), with was significant interaction between these criteria (F = 16.50, p = 0.0002). The mean (± SD) F concentrations in the enamel of the incisors were 471.4 ± 215.8 mg/kg and 151.7 ± 58.8 mg/kg for the control group of 129P3/J and A/J strains, respectively; and 2711.2 ± 1019.2 mg/kg and 1756.9 ± 921.6 mg/kg for 129P3/J and A/J mice, respectively, treated with water containing 50 mg/L F. Two-way ANOVA detected significant differences between the strains (F=11.36, p=0.0016) and between treatments (F=103.50, p <0.0001), without significant interaction between these criteria (F=2.82, p=0.1004). The proteomic results revealed a reduction in the abundance of proteins in the maturation stage, as compared with the secretory stage. Treatment with F greatly increased the number of protein spots detected in both stages. This increase was greater for A/J mice, indicating an attempt to fight the deleterious effects of F and, thus, reinforcing the susceptibility of this strain to the effects of F. The identification of differentially expressed proteins revealed that both the strain and the treatment with F led to differential expression of proteins belonging to all functional categories.

O flúor é um elemento natural encontrado em diversas concentrações tanto na água como no solo. É considerado um nutriente benéfico quando presente em níveis ótimos. Apesar de ser utilizado como medicamento em pacientes com osteoporose, sendo capaz de aumentar a densidade óssea, sua eficácia na redução de fraturas ainda apresenta muitas controvérsias, e a exposição a altos níveis e por tempo prolongado, pode levar à fluorose esquelética. Dessa forma o objetivo deste trabalho foi estudar in vitro o efeito do flúor no processo de mineralização por osteoblastos de duas espécies de camundongos com maior e menor densidade óssea, C3H/HeJ (C3) e C57BL/6J (B6) respectivamente. Os osteoblastos isolados da calvária através da digestão enzimática de animais recém nascidos foram expostos a diferentes doses de NaF, e os resultados mostraram que B6 foi mais suscetível ao NaF, apresentando redução da área mineralizada a partir da dose de 10M, enquanto que com C3, a dose significativa foi a partir de 50M, demonstrando que os osteoprogenitores mais diferenciados de C3, são mais resistentes à ação inibitória do flúor. Os testes de unidades formadoras de colônias indicaram um aumento do número de colônias de osteoprogenitores e do número de nódulos mineralizados com a exposição ao NaF. A atividade da metaloproteinase de matriz 2 (MMP-2) também foi aumentada no período de 7 dias em B6 e reduzida nos períodos de 14 e 21 dias em C3, evidenciando que a ação da MMP-2 nestes osteoblastos estão acopladas de forma distinta a diferentes pontos de restrição durante a progressão da diferenciação celular. A dualidade das respostas ao flúor apresentadas pelos modelos experimentais indica que a influência da ação anabólica do flúor, depende do número de alvos em potencial (quantidade de osteoprogenitores presentes na calvária, de células mesenquimais presentes na medula), da atividade intrínseca destes osteoblastos e do estágio de maturação dessas células. Desta forma, a abordagem in vitro fornece insights sobre as bases celulares e moleculares, o que permitirá um melhor diagnóstico e avaliação dos alvos terapêuticos. / Fluoride is a natural element found at varying concentrations in drinking water as well as in soil and it is considered a beneficial nutrient at optimal levels. However, although it is well recognized that the fluoride therapy is effective in increasing bone density and it has been used as therapeutic agent to treat osteoporosis, the efficacy in fracture reduction is highly controversial, and exposure to high levels and prolonged time can lead to skeletal fluorosis. The purpose of this study was to investigate the in vitro effects of fluoride exposure during mineralization of two inbread strains, C3H/HeJ (C3) and C57BL/6J (B6), with high and low bone mass respectively. The osteoblasts isolated from newborn mouse calvaria were exposed to several fluoride doses, and the results showed that B6 was more susceptible to NaF, as a reduction in the mineralized area with 10M was already seen; while in C3, the significative dose was with 50 M, indicating that more differentiated osteoprogenitors cells of C3 are more resilient to inhibitory fluoride action. The colony forming unit assays indicate an increase of colony numbers of osteoprogenitors cells and mineralized nodules with NaF treatment. The MMP-2 activity was up-regulated after 7 days of NaF exposure in B6 e down-regulated after 14 and 21 days in C3, showing the distinct coupled action of MMP-2 in different restrictions point during development sequence. The bifasic nature of fluoride responses present by these experimental models indicate that the anabolic action of fluoride is associated to the number of the potential targets (numbers of calvarial osteoprogenitors cells, mesenchymal stem cells), the intrinsic osteoblast activity and the maturation stage of these cells. The cell culture systems can provide molecular and cellular insights, and have the prospective to disclose potential targets and/or better efficacy and safety profile.

Apesar da grande utilização de alimentos industrializados à base de soja, não há relatos científicos conclusivos que demonstrem a possível influência do flúor contido nesses alimentos sobre a ocorrência de fluorose em dentes decíduos. São inúmeras as indicações desses alimentos, em especial nos casos de intolerância à lactose. Os objetivos deste estudo foram: 1) Identificar os alimentos industrializados à base de soja mais recomendados, por nutricionistas e médicos pediatras, para crianças; 2) Determinar as concentrações de flúor nesses alimentos; 3) Avaliar crianças com idade entre 4 a 6 anos quanto à prevalência de fluorose, na dentição decídua. Etapa 1. A amostra foi constituída por 20 médicos pediatras e 20 nutricionistas de Bauru-SP, que responderam um questionário dirigido, composto de questões objetivo-descritivas, sobre os alimentos à base de soja que eles mais indicam para crianças. Etapa 2. Foram relacionados os 10 alimentos mais citados, sendo analisadas as concentrações de flúor das amostras com eletrodo íon-específico (Orion 9409), após difusão facilitada por HMDS. Etapa 3. Foi realizado o levantamento epidemiológico de fluorose dentária em 6 escolas de Bauru-SP. Participaram 315 crianças com idade entre 4 e 6 anos, sendo identificadas neste grupo 26 crianças com intolerância à lactose. Os pais ou responsáveis responderam um questionário que abordou o perfil da criança e da família, permitindo identificar o uso ou não de alimentos à base de soja. Para verificar a prevalência e severidade de fluorose dentária foi utilizado o Índice de Dean. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente por meio dos testes do qui-quadrado e de regressão logística multivariada. O conteúdo de flúor nos alimentos analisados variou de 0,03 a 0,50 µg F/mL. Observou-se diferença estatisticamente significativa nas concentrações de flúor de diferentes lotes do mesmo alimento em 6 marcas comerciais analisadas. A fluorose foi detectada em cerca de 10% das crianças, sendo que a severidade variou de muito leve a leve. Observou-se maior prevalência de fluorose em crianças de escola privada (p=0,030). A fluorose dentária em dentes decíduos esteve associada à intolerância à lactose, embora não tenha sido demonstrada significância estatística com o uso de alimentos industrializados à base de soja. / Despite of the great use of manufactured soy food, scientific reports are not conclusive about the possibility of dental fluorosis in primary dentition caused by fluoride contained in these kind of food. Soy-based food is indicated especially in cases of lactose intolerance. The aims of this study were: 1) to identify the most recommended manufactured soy food for children, by Pediatricians and Nutritionists; 2) to determine the fluoride concentrations in these soy food; 3) to evaluate the prevalence of dental fluorosis in the primary dentition of 4-6-year-old children. Stage 1. The sample was composed of 20 Pediatricians and 20 Nutritionists from Bauru-SP, who answered objective-descriptive questions, about the most indicated soy food for children. Stage 2. The top 10 products were analyzed with ion-specific electrode (Orion 9409), after HMDS facilitated-diffusion. Stage 3. A dental fluorosis survey was performed at six schools in Bauru-SP with three hundred and fifteen children from 4 to 6 years old. In this group 26 children with lactose intolerance were identified. Their parents answered a questionnaire related to the child and his/her familys profile which allowed identifying the use of soy food. Deans index was used to verify the prevalence and severity of dental fluorosis. Data were statistically analyzed by chi-square and multivariate logistic regression tests. Fluoride concentrations ranged between 0.03 and 0.50 µg F/mL. It was observed statistical significant difference in the fluoride concentrations among different lots of the same brand in 6 commercial analyzed. Dental fluorosis was detected in 10% of the children, with very mild and mild degrees. The prevalence of dental fluorosis was higher in private schools children (p=0.030). Dental fluorosis in primary dentition was associated with lactose intolerance, however, did not showed statistical significance with the use of manufactured soy food.

Este estudo comparou a ingestão de flúor (F) de crianças de 2 a 6 anos residentes em área fluoretada (Bauru-SP, 0,6-0,8 ppm F) e não fluoretada (Pirajuí-SP), avaliada através do método da dieta duplicada associado à escovação simulada e do Questionário de Freqüência Alimentar semi-quantitativo (QFAsq) associado a questionário para estimativa de ingestão de F a partir do dentifrício. Inicialmente, o QFAsq foi aplicado em 398 crianças residentes no município de Pirajuí-SP. Posteriormente, foram avaliadas subamostras de 25 crianças residentes em Bauru e 24 residentes em Pirajuí. Nestas subamostras, a quantidade de F ingerida através da dieta foi determinada pelo QFAsq e também pela dieta duplicada, considerando seus diferentes constituintes (água, outros líquidos e sólidos). A ingestão de F através do dentifrício foi determinada pelo questionário para estimativa da ingestão de dentifrício e pela escovação simulada. O F foi analisado por eletrodo, depois de difusão facilitada por hexametildiloxano ou após tamponameno com TISAB. A analise estatística foi feita utilizando o software GraphPad InStat, aplicando os testes t pareado, t não pareado, Wilcoxon pareado, Mann-Whitney e estatística de correlação (p<0.05). O QFAsq aplicado à amostra de 398 crianças de Pirajuí encontrou valores de ingestão total de F significativamente menores que os relatados previamente para crianças residentes em Bauru (Miziara, 2006). Na subamostra de crianças avaliadas, a média (±DP, mg) da ingestão de F estimada a partir do QFAsq e da dieta duplicada, considerando-se a dieta total foi de 0,420±0,087 e 0,805±0,190 (Bauru) e 0,227±0,072 e 0,144±0,050 (Pirajuí), sendo a diferença entre os métodos significativa em ambos os municípios. Somente foi obtida uma correlação significativa entre os dois métodos no caso dos sólidos, para ambos os municípios. Considerando a estimativa da ingestão de F a partir do dentifrício obtida pela aplicação do questionário e pela escovação simulada, as médias (±DP, mg) compiladas (Bauru mais Pirajuí) foram 0,611±0,452 e 0,784±0,737, respectivamente, não havendo diferença e nem correlação significativas entre os métodos. Através da utilização dos questionários, foi possível detectar diferença significativa na ingestão total de F entre Bauru e Pirajuí. Entretanto, o mesmo não ocorreu quando se utilizou o método da dieta duplicada associado à escovação simulada. Face aos resultados obtidos, o QFAsq associado a um questionário para estimativa da ingestão de F a partir do dentifrício parece ter um bom potencial para utilização a nível epidemiológico, para se avaliar o risco de grupos de crianças à fluorose dentária. Alguns parâmetros do QFAsq podem ser melhor trabalhados para uma análise mais fidedigna, principalmente com relação à freqüência de ingestão de água e outros líquidos. Em adição, a aplicabilidade desses questionários a nível individual para detecção de risco à fluorose dentária ainda precisa ser melhor estudada. / This study compared the fluoride (F) intake of 2-6-year-old children, living in fluoridated (Bauru-SP, 0,6-0,8 ppm F) and non-fluoridated (Pirajuí-SP) areas. The methods used were the duplicate diet associated to simulated toothbrushing and the semi-quantitative food frequency questionnaire (sqFFQ) associated to a questionnaire for estimation of F intake from dentifrice. Initially, the sqFFQ was applied to 398 children living in Pirajuí. In another phase, subsamples of 25 children living in Bauru and 24 living in Pirajuí were evaluated. In these subsamples the F intake from diet was determined using the sqFFQ as well as the duplicate diet method, considering the different constituents of the diet (water, other liquids and solids). The F intake from the dentifrice was determined using the questionnaire for estimation of F intake, as well as simulated toothbrushing. F was analyzed with the electrode, following hexamethyldisiloxanefacilitated diffusion or after buffering with TISAB. For statistical analysis, the GraphPad InStat software was used. The applies tests were paired and unpaired t tests, paired Wilcoxon test, Mann-Whitney test and correlation analysis (p<0.05). The sqFFQ, when applied to the sample constituted by 398 children living in Pirajuí, found values of total F intake significantly lower when compared to previous data reported by Miziara (2006) for children living in Bauru. In the subsample of evaluated children, the mean (±SD, mg) F intakes estimated by the sqFFQ and duplicate diet (total diet) were 0.420±0.087 and 0.805±0.190 (Bauru) and 0.227±0.072 and 0.144±0.050 (Pirajuí), respectively. The difference between the methods was significant for both municipalities. For both municipalities, a significant correlation between the methods was obtained in the case of solids only. Considering the estimation of F intake from dentifrice obtained by the application of the questionnaire and simulated toothbrushing, the compiled (Bauru plus Pirajuí) means (±SD, mg) were 0.611±0.452 and 0.784±0.737, respectively. The difference as well as the correlation between the methods were not significant. By using the questionnaires, it was possible to detect a significant difference in the total F intake between Bauru and Pirajuí. However, the same did not occur when using the method of duplicate diet associated with simulated toothbrushing. Due to the results obtained, it seems that the sqFFQ associated to a questionnaire for estimation of F intake from dentifrice has a good potential for use at epidemiological level in order to evaluate the risk of groups of children to dental fluorosis. Some parameters of the sqFFQ need to be better addressed for a more precise analysis, mainly with respect to the frequency of water and other liquids intake. In addition, the applicability of these questionnaires at the individual level for the detection of risk to dental fluorosis requires further studies.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-04-12T16:26:31Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2772690 bytes, checksum: 9a432e9e1f3701eb84401f1e57fab1ca (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-12T16:26:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2772690 bytes, checksum: 9a432e9e1f3701eb84401f1e57fab1ca (MD5) Previous issue date: 2015-12-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente estudo teve por objetivo abordar o estado da arte da produção científica sobre a ocorrência de fluoreto nas águas de abastecimento para consumo humano no Brasil. Para tal, realizou-se uma revisão sistemática, cuja metodologia passou pela elaboração das perguntas de pesquisa e critérios de inclusão de estudos, busca e seleção dos trabalhos, avaliação da qualidade dos estudos, coleta, análise e apresentação dos dados. Foram selecionados 57 artigos que atenderam aos critérios de inclusão e de validade estabelecidos. Foi detectada forte disparidade regional, sendo a maioria dos trabalhos provenientes da região Sudeste. As regiões Nordeste e Sul também tiveram representatividade significativa, mas as regiões Centro-Oeste e Norte tiveram participação mínima no número de trabalhos selecionados, sendo que nenhum foi encontrado na região Norte. A região Sudeste apresentou os melhores resultados no que tange ao atendimento à legislação/critérios de literatura quanto ao teor de fluoreto nas águas de abastecimento, seguida pelas regiões Sul e Nordeste. A tendência foi de haver concentração dos trabalhos com baixo índice de adequação (0 a 40% de adequação/resultados ótimos dos níveis de fluoreto) na região Nordeste, os de nível intermediário (40% a 70% de adequação/resultados ótimos dos níveis de fluoreto) na região Sul e os de nível alto (70% a 100% de adequação/resultados ótimos dos níveis de fluoreto) na região Sudeste. Observou-se tendência de maior adequabilidade dos teores de fluoreto para estudos relacionados com a vigilância do que nos que não apresentaram relação com esta. Estudos com nível alto de adequação/níveis ótimos de fluoreto (70% - 100%) se concentraram nos trabalhos que tiveram relação com a vigilância e os de nível baixo (0-40%), nos trabalhos sem relação com a mesma. Em se tratando da relação do tamanho dos municípios com o teor de fluoreto, não foi possível observar uma tendência nos resultados. Foi observada carência de pesquisa nos municípios com população menor que 100.000 habitantes. Em nível de Brasil, verificou-se que parte considerável dos estudos encontrados (35,3%) apresentaram baixo nível de atendimento à legislação/critérios de literatura (0-40%), em detrimento de (19,1%) com alto índice (70%-100%). Estes dados podem indicar que parte considerável da população brasileira não recebe um serviço satisfatório de fluoretação das águas de abastecimento, o que pode acarretar consequências à saúde dos indivíduos, tanto em termos de cárie dentária, quanto de fluorose dental e outras complicações advindas da ingestão de teores inadequados do íon fluoreto. / This study aimed to address the state of the art of scientific production about fluoride occurrence in drinking water for human consumption in Brazil. To this end, it was carried out a systematic review whose methodology has the preparation of the research questions and study inclusion criteria, search and selection of studies, assessing the quality of studies, data collection, analysis and presentation of data. It were selected 57 articles that met the inclusion and validity criteria. Strong regional disparities were seen, once most of the studies selected belongs to the Southeast region. The Northeast and South regions also had significant representation, but the Midwest and North regions had minimal participation in the number of selected works, wherein none was found in the North. The Southeast region had the best results with respect to legislature / literature criteria compliance in the occurrence of fluoride in drinking water, followed by the South and Northeast. The tendency found was the concentration of works with low adequacy (0 to 40% of adequate / excellent results of fluoride levels) results in the Northeast, the intermediate level (40% to 70% % of adequate / excellent results of fluoride levels) in the South and the high level (70% to 100% % of adequate / excellent results of fluoride levels) in the Southeast. There was a tendency of greater suitability of fluoride levels in studies related to surveillance than in those not related to it. Studies with high levels of adequacy / optimal fluoride levels (70% -100%) was concentrated in researches related to the surveillance and the studies with low levels of adequacy / optimal fluoride levels (0-40%) were concentrated in the works unrelated to it. In the case of the relationship of the size of the municipalities with the fluoride content in drinking water, it was not possible to observe a trend in the results. Lack of research was observed in the cities with population lower than 100,000. In Brazil, it was found that a considerable part of the studies (35.3%) had low level of legislature / literature criteria compliance (0-40%), rather than (19.1%) with high legislature / literature criteria compliance (70% -100%). These data may indicate that a considerable part of the population does not receive a satisfactory service of fluoridation of drinking water, which can cause consequences to the health of individuals, both in terms of dental cavitys, as of dental fluorosis and other complications from ingesting inadequate levels of fluoride ion.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Com a introdução do flúor como o principal agente anticariogênico e, talvez, um aumento do flúor na nossa cadeia alimentar, a fluorose dentária tornou-se um problema mundial. Os mecanismos que conduzem à formação do esmalte fluorótico são desconhecidos, mas devem envolver modificações nas reações físico-químicas básicas de desmineralização e remineralização do esmalte dentário. O aumento daquantidade de flúor no cristal apatita resulta no aumento dos parâmetros de rede. O objetivo deste trabalho é caracterizar o esmalte dentário humano saudável e fluorótico usando difração de raios X com luz síncrotron. Todos os perfis de espalhamento foram medidos na linha de difração de raios X (XRD1) do Laboratório Nacional de Luz Síncrotron, Campinas SP. Os experimentos foram realizados usando amostras em pó e em lâminas polidas. As amostras em pó foram analisadas a fim de obter a caracterização do esmalte dentário saudável. As lâminas foram analisadas em áreas do esmalte específicas identificadas como fluoróticas. Todos os perfis foram comparados com amostras de esmalte de controle e também com a literatura. A evidente similaridade entre os perfis de difração mostraram a analogia entre as estruturas do esmalte dentário e a hidroxiapatita padrão. Fica evidente que os perfis de difração do esmalte dentário das amostras em lâmina são diferentes daqueles obtidos para o esmalte em pó. As diferenças encontradas incluem variação na cristalinidade e orientação preferencial. Os valores encontrados para as distâncias interplanares para o esmalte de controle e fluorótico das amostras em lâmina não apresentaram diferenças estatisticamente significativas. Isto pode ser explicado pelo fato que a hidroxiapatita e a fluoropatita formam cristais com a mesma estrutura hexagonal, mesmo grupo de simetria e têm parâmetros de rede muito próximos, os quais a habilidade do sistema não foi suficiente para resolver. Finalmente, este trabalho mostra que a difração de raios X usando radiação síncrotron é uma técnica poderosa para o estudo da cristalografia e microestrutura do esmalte dentário e, ainda, pode ser igualmente aplicada no estudo de outros tecidos biológicos duros e de biomateriais sintéticos. / With the introduction of fluoride as the main anticaries agent used in preventive dentistry, and perhaps an increase in fluoride in our food chain, dental fluorosis has become an increasing world-wide problem. The mechanisms that conduct the formation of fluorotic enamel are unknown, but should involve modifications in the basic physical-chemistry reactions of demineralisation and remineralisation of the enamel of the teeth. The increase of the amount of fluoride inside of the apatita will result in gradual increase of the lattice parameters. The aim of this work is to characterize the healthy and fluorotic enamel in human tooth using technique Synchrotron X-ray diffraction. All the scattering profile measurements were carried out at the X-ray diffraction beamline (XRD1) at the National Synchrotron Light Laboratory - LNLS, Campinas. X-ray diffraction experiments were performed both in powder samples and polished surfaces. The powder samples were analyzed to obtain the characterization of typical pattern healthy enamel. The polished surfaces were analyzed in specific areas that have been identified as fluorotic ones. X-ray diffraction data were obtained for all samples and these data were compared with the control samples and also with the literature data. The evident similarities of the diffraction patterns point out the analogy between the structures of the human enamel and standard hydroxyapatite (HAp). According to our analysis, it is clear that the X-ray diffractogram f r powder enamel for enamel in the flat samples are different. The differences found include varied crystallinity and crystal preferred orientation. The values found for the interplanar distances for the control and fluorotic enamel in the flat samples revealed no significant statistical differences. It can be explained because of hydroxyapatite and fluorapatite have the same hexagonal structures and lattice parameters too close, which the ability of the system cannot resolve. Finally, we have shown through this work that synchrotron X-ray diffraction is a powerful technique in the study of the crystallography and microstructure of dental enamel and it could be equally successful in the study of other biological hard tissues and in the study of synthetic biomaterials.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-15Bitstream added on 2014-06-13T19:03:51Z : No. of bitstreams: 1 tiano_avp_dr_araca.pdf: 1276848 bytes, checksum: 96187df5ff4acd6ea158644871a8f69b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A primeira infância é uma fase importante para instituição de hábitos alimentares saudáveis que irão influenciar a qualidade da saúde bucal dos futuros adultos. Nessa fase a ingestão excessiva de flúor pode resultar no desenvolvimento de fluorose dentária e o consumo descontrolado de açúcares aumenta o risco de desenvolvimento de cárie precoce de infância. Nesta pesquisa os objetivos foram estudar a ingestão de flúor por crianças com até 36 meses de vida, matriculadas em duas creches públicas de municípios com diferentes concentrações de flúor na água de abastecimento, no período de permanência na creche, e a prevalência de cárie e sua relação com algumas variáveis. Amostras das refeições servidas para 80 crianças foram coletadas durante uma semana. As concentrações de flúor das amostras de alimentos sólidos e leite foram determinadas por eletrodo específico (Orion 9409BN) combinado a eletrodo de referência (Accumet 1362079) após difusão facilitada por hexametildisiloxano. Os alimentos líquidos adicionados com igual volume de total ionic strenght adjustment buffer (TISAB II) foram analisados por um eletrodo combinado (Orion 9609BN). Os resultados foram comparados por meio do teste Mann-Whitney. Para se determinar a prevalência de lesões de cárie dentária com cavidade (LCC) e cárie precoce de infância (CPI), e a contribuição de algumas variáveis, um total de 68 crianças foram examinadas, utilizando-se os códigos e critérios preconizados pela OMS e pela ADA (American Dental Association). Os pais das crianças foram entrevistados. O teste exato de Fisher (p<0,05) foi aplicado. Quanto à concentração de flúor, as refeições continham em média 0,204 ± 0,179 e 0,322 ± 0,242 μgF/mL (p<0,05), respectivamente nos municípios com teor reduzido... / The early childhood is an important phase to establish healthy eating habits that will influence the quality of the oral health for the future adults. At this phase, excessive fluoride intake may result in dental fluorosis development and uncontrolled consumption of sugar increases the risk of developing early childhood caries. This survey aimed to study the fluoride ingestion by children up to 36 months of life, registered in two public daycare centers from municipalities with different fluoride concentrations in the water supply, during the period of stay in daycare, and the caries prevalence and its relationship with some variables. Samples of meals served to 80 children were collected during one week. The fluoride concentrations of solid foods and milk were determined by a specific electrode (Orion 9409BN) combined with a reference electrode (Accumet 1362079) after diffusion facilitated by hexamethyldisiloxane. The beverages added with an equal volume of total ionic strength adjustment buffer (TISAB II) were analyzed by a combined electrode (Orion 9609BN). The results were compared using the Mann-Whitney test. In order to determine the prevalence of cavitated caries lesions (CCL) and early childhood caries (ECC), and the contribution of some variables, a total of 68 children were clinically examined using the same codes and criteria established by the WHO (World Health Organization) and ADA (American Dental Association). Their parents were interviewed. Fisher’s exact test (p<0.05) was applied. Mean fluoride concentrations of the meals were of 0.204 ± 0.179 and 0.322 ± 0.242 μgF/mL (p<0.05) in the municipality with low fluoride content (LFC) and in the municipality with adequate fluoride content (AFC), respectively. Daily fluoride intake in the former was 0.013 ± 0.003 mg/kg body weight/day and 0.012 ± 0.001 mg/kg body weight/day in the... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-08-14Bitstream added on 2014-06-13T20:44:31Z : No. of bitstreams: 1 santos_nb_dr_araca.pdf: 486492 bytes, checksum: ee801e0b89ebab07fe599f4eaad17a0f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A utilização do flúor como medida preventiva e terapêutica tem mudado o perfil da doença cárie dentária, no entanto o aumento da exposição a múltiplas fontes de flúor tem proporcionado uma preocupação constante sobre o aumento da prevalência e severidade da fluorose dentária. O objetivo da presente pesquisa foi analisar a ingestão total de flúor e avaliar o risco de desenvolvimento de fluorose dentária. A amostra foi composta por 55 crianças, de 18 a 36 meses de idade, que freqüentavam as creches (n=25) municipais e outras que residiam em um bairro (n=30) do município de Penedo-Al, tendo o mesmo a água de abastecimento público fluoretada. Foi aplicado, aos pais e/ou responsáveis, um questionário sobre os hábitos de higiene bucal das crianças. Para a análise da ingestão de flúor na dieta, a metodologia aplicada foi a técnica de duplicata da dieta sólida e líquida, durante dois dias consecutivos, enquanto que a ingestão de flúor pelo uso de dentifrício fluoretado foi estimada através da subtração do conteúdo de flúor contido na escova pelo conteúdo de flúor expectorado pela criança. Também foi analisada a regularidade da concentração de flúor adicionada à água da rede pública do referido município. Não existiu diferença significativa em função da ingestão total de flúor entre as crianças da creche e do bairro, respectivamente (lDP) 0,11l0,0463 e 0,09l0,0424 mgF/Kg peso/dia (Teste-t; p>0,05). A quantidade de flúor ingerida na dieta não ultrapassou a dose de risco para o desenvolvimento de fluorose preconizada de 0,05 a 0,07 mgF/Kg peso/dia. A ingestão de flúor através do dentifrício correspondeu a 64,5% do total ingerido nas creches. Fatores como: freqüência de escovação, quantidade de dentifrício colocado na escova, níveis de expectoração e a concentração de flúor solúvel do dentifrício utilizado tiveram correlação... / The use of fluoride as a preventive and as a therapeutic measure has changed the dental caries profile. However, exposure to multiple sources of fluoride and an increase in its consumption has brought about a greater and ongoing concern regarding the increase in the prevalence and incidence of dental fluorosis. The objective of this study were to assess the total fluoride ingestion by small children and the subsequent risk of developing dental fluorosis. Fifty five (55) children aged 18 to 36 months of age took past in this study. From those, 25 were enrolled in a nursery school and 30 were lifelong residents of suburbs of the city of Penedo - AL, Brazil. All children drank tap water from the public water system of Penedo, which is artificially fluoridated. All parents answered a questionnaire about the oral hygiene habits of their children. During two consecutive days all food and water ingested by each child was collected using the duplicated-plate technique. Fluoride ingestion from dentifrice was estimated by subtracting of the fluoride content in the toothbrush plus the child expectorated toothpaste-saliva slurry from the total fluoride contained in amount of toothpaste placed in the toothbrush. Fluoride in the public water system was also analyzed. There was no significant difference in total fluoride ingestion between nursery-enrolled and non-nursery-enrolled children. The meanlSD total fluoride ingestion in both groups were 0.11l0.0463 and 0.09l0.0424 mgF/Kg body weight/day, respectively (t-Test; p>0,05). Fluoride ingestion from diet did not reach the theoretical dose of 0.05-0.07 mgF/Kg body weight/day which is used to determine the risk for dental fluorosis. Fluoride ingestion from dentifrice amounted to 64.5% of total fluoride ingestion by nursery children. Factors such: toothbrushing frequency, amount of toothpaste placed in the toothbrush, quantity expectorated and ...(Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-06-25Bitstream added on 2014-06-13T21:05:35Z : No. of bitstreams: 1 zina_lg_dr_araca_prot.pdf: 4162883 bytes, checksum: 7d06640dedf17f5b91065d9db8fc6d66 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O consumo de fórmula infantil durante a primeira infância tem sido considerado um fator de risco em potencial para a fluorose e cárie dentária. O objetivo desta tese de doutorado foi avaliar, por meio de duas revisões sistemáticas e meta-análises, a relação entre o consumo de fórmula infantil e o risco de fluorose e cárie dentária. Para isso, foram consultadas oito bases de dados e listas de referências de artigos. A análise da relevância e abstração de dados foram realizadas em duplicata e independentemente por dois revisores. A qualidade dos estudos foi avaliada e os odds ratios, quando obtidos, foram combinados utilizando-se modelos de efeito aleatório. Na revisão sobre fluorose dentária, 41 de 969 publicações potencialmente elegíveis avaliaram o impacto da fórmula infantil no risco de fluorose dentária. Quatorze publicações não apresentaram os achados nos resultados. As restantes 27 publicações relataram os resultados em 19 estudos observacionais. Dezessete destes 19 estudos apresentaram odds ratio (OR) e entre eles o consumo de fórmula infantil esteve associado com uma maior prevalência de fluorose dentária na dentição permanente (OR global=1,8; intervalo de confiança de 95%=1,4-2,3). Observou-se significativa heterogeneidade entre os estudos (I-quadrado=66%) e evidência de viés de publicação (p=0,002). A metarregressão indicou que o odds ratio associado à fórmula infantil com a fluorose dentária aumentou em 5% para cada aumento de 0,1 ppm nos níveis de flúor da água de abastecimento (OR=1,05; intervalo de confiança de 95%=1,02-1,09). Na revisão sobre cárie dentária, 31 de 1.695 publicações elegíveis avaliaram o impacto da fórmula infantil no risco de cárie dentária. Duas publicações não apresentaram os achados nos resultados. As restantes 29 publicações relataram os resultados em 26 estudos... / Infant formula consumption during childhood has been considered a potential risk factor for enamel fluorosis and dental caries. The aim of this doctorate thesis was to evaluate, through two systematic reviews and meta-analysis, the relationship between infant formula consumption and the risk of enamel fluorosis and dental caries. Eight databases and reference list of articles were searched. Assessment of relevance and data abstraction were conducted in duplicate and independently by two reviewers. Study quality was assessed and odds ratios, when obtainable, were combined using a random-effects model. In the fluorosis systematic review, 41 out of 969 potentially eligible publications evaluated the impact of infant formula on enamel fluorosis risk. Fourteen publications did not report the findings in the results. The remaining 27 publications reported on 19 observational studies. Seventeen of these 19 studies reported odds ratio (OR) and among these infant formula consumption was associated with a higher prevalence of enamel fluorosis in the permanent dentition (summary OR=1.8; 95% confidence interval=1.4-2.3). There was significant heterogeneity among studies (I-squared=66%) and evidence of publication bias (p=0.002). A metaregression indicated that the odds ratios associating infant formula with enamel fluorosis increased by 5% for each 0.1 ppm increase in the reported levels of fluoride in the water supply (OR=1.05, 95% confidence interval=1.02-1.09). In the dental caries systematic review, 31 out of 1695 eligible publications evaluated the impact of infant formula on dental caries risk. Two publications did not report the findings in the results. The remaining 29 publications reported on 26 observational studies. General (summary OR=1.7; 95% confidence interval=1.2-2.4) and nocturnal (summary OR=2.0; 95% confidence interval=1.3- 3.0) infant... (Complete abstract, click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003-11-18Bitstream added on 2014-06-13T20:44:34Z : No. of bitstreams: 1 frossard_wtg_dr_araca.pdf: 634961 bytes, checksum: f52c4837530ad8480d5ae39ea95b39c2 (MD5) / O objetivo do presente estudo foi identificar fatores associados à fluorose dentária, em uma localidade com níveis de concentração de flúor variando de 0,07 a 2,06 mgL/F. Das 727 crianças, de 6 a 10 anos de idade, matriculadas na rede de ensino público do município de Itambaracá, PR, no ano de 2001, examinaram-se 602 e, após computadas as perdas e as exclusões, 353 permaneceram como população de estudo. Os pais ou responsáveis responderam um formulário sobre a história médica e gestacional da criança, dieta láctea e fontes de exposição ao flúor no primeiro ano de vida. Os exames clínicos foram realizados nas próprias escolas, por dois cirurgiões dentistas previamente treinados e calibrados, sendo que um avaliou as opacidades difusas nos molares decíduos, através do Índice DDE e outro, a fluorose dentária na dentição permanente, pelo Índice de Dean. A análise bivariada mostrou haver relação entre a patologia e: os níveis de flúor no município, uso de dentifrício fluorado e a presença de doenças no primeiro ano de vida. Na análise multivariada foram considerados como fatores de risco: a presença de doenças e o uso de leite em pó diluído em água fluorada, no primeiro ano de vida, além do fator mais fortemente associado à fluorose, a presença de opacidades difusas nos molares decíduos (odds ratio = 22,97). A obtenção criteriosa de informações sobre a história médica e o padrão de consumo de leite, associados ao exame clínico dos molares decíduos, tão logo erupcionem, podem contribuir na identificação das crianças com maiores possibilidades de desenvolver a fluorose dentária, na dentição permanente. / The aim of this study was to identify association factors of dental fluorosis in a community where the amount of fluoride in drinking water vary from 0,07 to 2,06ppmF. Among the 727 children aged 6 to 10 year-old regularly enrolled in public schools at Itambaracá-PR in 2001, 602 were examined, and after excluding criteria and loses were computed, 353 remained as study population. A questionnaire about gestational and medical histories, pattern of milk consumption and fluoride exposition in the first year of life was answered by the child's parents. Clinical examination was performed at the schools, by two previously trained and calibrated dentists. One evaluated enamel opacities in deciduous teeth through DDE index, and the other dental fluorosis in permanent teeth by Dean's index. Bivariate analysis displayed a relationship of dental fluorosis and place of residence according to the amount of fluoride in drinking water, use of fluorided dentifrice and systemic diseases in the first year of life. In multivariable analysis the observed risk factors were the use of powered milk reconstituted with fluorided water, and systemic diseases, both in the first year of life, and the most strongly associated one was the presence of diffused opacities in primary molars (odds ratio=22,97). To achieve standard information about medical history and pattern of milk consumption and a clinical examination of the deciduous molars as soon as they erupt can contribute in identifying children that have larger possibilities of developing dental fluorosis in permanent teeth.