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Desenvolvimento de biocerâmicas porosas para regeneração óssea. / Development of porous bioceramics for bone refeneration.FOOK, Ana Carolina Brasil Marcelino., MARCELINO, Ana Carolina Brasil. 18 October 2018 (has links)
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ANA CAROLINA BRASIL MARCELINO FOOK - DISSERTAÇÃO PPGCMat 2008..pdf: 7663913 bytes, checksum: 64b5bf9a06563efc6a355578e171b98e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-18T18:02:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2008-02-26 / Atualmente na área de biomateriais destinados à regeneração óssea, existe um interesse no desenvolvimento de materiais capazes de estimular a resposta biológica necessária para restabelecer as funções do tecido ósseo em caso de perda, falta ou mau funcionamento. A hidroxiapatita (HA, Caio(P04)6(OH)2) que apresenta semelhança com a fase mineral dos ossos e dos dentes, é biocompatível e osteocondutiva, e tem excelente afinidade química e biológica com os tecidos ósseos. Este trabalho teve como objetivo
desenvolver biocerâmicas porosas para regeneração óssea utilizando a técnica réplica da esponja polimérica. Foram utilizadas esponjas de poliuretano com densidades variadas para a obtenção dos suportes porosos. Os resultados de espectroscopia no infravermelho e difração de raios X revelaram a formação da HA monofásica e confirmaram a eficiência da reação de neutralização utilizada na obtenção da pasta cerâmica. As análises por microscopia eletrônica de varredura revelaram suportes com poros interconectados com tamanhos variados na ordem de macro (>100um) e microporosidade (1-20um) em menor
ou maior grau dependendo da densidade da esponja utilizada na produção das amostras. Estes resultados foram comprovados pela análise de porosimetria de mercúrio. Os suportes porosos HAPU-28 destacaram-se por apresentar maior porosidade total em comparação com os suportes produzidos com esponja de menor densidade (HAPU-20 e HAPU-25). Os resultados apontam os suportes porosos de HA desenvolvidos nesse estudo como materiais em potencial para aplicação como substitutos ósseos por apresentarem alta porosidade (>70%), composição química, interconectividade e tamanhos dos poros adequados à regeneração óssea. / Currently in the area of biomateriais destined for bone regeneration, exists an interest in the development of materiais capable to stimulate the biological reply necessary to reestablish the functions of the bone tissue in loss, lack or bad functioning case. The hydroxyapatite (HA, Caio(P04)6(OH)2) that shows similarity with the mineral phase of bone and teeth, it is biocompatible and osteoconductive, and has excellent chemical and biological affinity with the bone tissue. This study aimed to develop porous bioceramics for bone regeneration using the replica of the polymeric sponge technique. Polyurethane
sponges were used with varying densities to obtain the scaffolds. Results of infrared spectroscopy and X-ray diffraction analysis revealed the formation of the HA monophasic and confirmed the efficiency of the neutralization reaction used in obtaining the slurry ceramics. Analyses by scanning electron microscopy revealed scaffolds with interconnected pores with different sizes on the order of macro and microporosity to a lesser or greater degree depending on the density of foam used in the production of samples. These results were proven by the analysis of the mercury porosimetry. The porous scaffold HAPU28 detached by showing higher total porosity compared to scaffold produced with sponge of lower density (HAPU-20 and HAPU-25). The results indicate the
porous HA scaffolds developed in this study as potential materiais for application as bone substitutes to have high porosity (> 70%), chemical composition, interconnectivity and pore sizes appropriate to the bone regeneration.
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Utilização de efluente de piscicultura na irrigação De pimentão cultivado com fosfato natural e Esterco bovino / Use of fish effluent to irrigate bell pepper plants cultivated with natural phosphate and cow manureLima, Cybelle Barbosa de 06 February 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-02-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The fish effluent discharge in the environment may causing soil and water pollution resulting in environment impacts. One alternative to solve the problem of fish effluent discharge is their use to irrigate plants. The use of fish effluent to irrigate plants can be also one alternative to solve the problem of water scarcity in arid and semi-arid regions, making the system more sustainable and bringing incomes to the producer. Since the fish effluent is rich in microorganisms, organic mater and nutrients, as phosphorus and nitrogen, the effluent may function as a fertigation for the plants. The objective of this experiment was to evaluate the use of fish effluent to irrigate bell pepper, fertilized with cow manure andnatural phosphate to determine the advantage of this integration in a semi-arid region. A randomized complete block design, with two replications within of each block, in a split plot the scheme was used. To the plots were assigned two types of water (well water and fish effluent) and to the subplots, treatments of a 2X2 factorial arrangement, resulting from the combination of two levels of phosphate (with and without natural phosphate) with two levels of organic matter (with and without cow manure). The total experiment area was 768 m2. Each experimental unit consisted of four rows with a total area of 16 m2. The harvest area of the experimental unit was 6 m2, constituted for two central rows. In each row final part disregarded 0,50m. The cro management practices were performed according to the region recommended techniques for bell pepper plants. The following characteristics were evaluated: number of flowers per plant, number of fruits per plant, relationship fruit and flower, fruit number, fruit weight, fruit mean weight and productivity. The cow manure or natural phosphate fertilization, as well as the bell pepper plants irrigation with fish effluent irrigation, not provided significant increase in the number of flowers and fruits for plant. The natural phosphate fertilization and the bell pepper plants irrigation with fish effluent reduced the fruits productivity. Did not observe any significant interaction between water types and the natural phosphate or cow manure fertilization in the number of flowers or fruits for plants and bell pepper productivity / A descarga de efluentes de piscicultura no meio ambiente pode causar a poluição do solo e de mananciais, gerando impactos ambientais. Uma alternativa que vem surgindo
para resolver o problema da eliminação desses efluentes é a sua utilização na irrigação de hortaliças. A reutilização dessas águas pode ser também uma alternativa para resolver o
problema da escassez de água para irrigação em regiões semi-áridas, tornando o sistema mais sustentável e complementando a renda do produtor. O fato do efluente ser rico em matéria orgânica e nutrientes, como nitrogênio e fósforo, além de microorganismos que podem ser transferidos para o solo, possibilita que a irrigação com essas águas funcione como uma fertirrigação para as plantas. Este trabalho teve como objetivo estudar o efeito da irrigação com efluente de piscicultura na cultura do pimentão adubado com fosfato natural e esterco bovino, visando determinar as vantagens dessa integração nas condições do semi-árido nordestino. O experimento foi delineado em parcela subdivididas em blocos casualizados completos com duas repetições por bloco. Nas parcelas foram designados os
tipos de água (água de poço e efluente de piscicultura) e nas subparcelas os tratamentos do fatorial 2x2, resultante da combinação de dois níveis de fósforo (com e sem fosfato
natural) com dois níveis de matéria orgânica (com e sem esterco bovino). A área total do experimento foi de 768 m2. Cada unidade experimental foi constituída de quatro fileiras,
com uma área total de 16 m2. A área útil desta unidade experimental foi de 6 m2, constituída das duas fileiras centrais, se desprezando 0,5 m da cabeceira de cada fileira. O
plantio e condução do experimento foram feitos de acordo com as práticas culturais em uso na região. As características avaliadas foram: a) flores/planta; b) frutos/planta; c) relação
fruto/flor (%); d) produtividade; e) número de frutos; f) peso dos frutos; e g) peso médio de fruto. A adubação com esterco ou fosfato, bem como a irrigação de plantas de pimentão com efluente de piscicultura, não proporcionaram aumento significativo no número de flores e de frutos por planta. A adubação com fosfato natural e a irrigação de plantas de pimentão com efluente, reduziram a produtividade de frutos. Não se observou qualquer interação significativa entre os tipos de água e a adubação tanto com fosfato como com esterco no número de flores ou frutos por plantas e na produtividade de pimentão
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Utilização de efluente de piscicultura na irrigação De pimentão cultivado com fosfato natural e Esterco bovino / Use of fish effluent to irrigate bell pepper plants cultivated with natural phosphate and cow manureLima, Cybelle Barbosa de 06 February 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-02-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The fish effluent discharge in the environment may causing soil and water pollution resulting in environment impacts. One alternative to solve the problem of fish effluent discharge is their use to irrigate plants. The use of fish effluent to irrigate plants can be also one alternative to solve the problem of water scarcity in arid and semi-arid regions, making the system more sustainable and bringing incomes to the producer. Since the fish effluent is rich in microorganisms, organic mater and nutrients, as phosphorus and nitrogen, the effluent may function as a fertigation for the plants. The objective of this experiment was to evaluate the use of fish effluent to irrigate bell pepper, fertilized with cow manure andnatural phosphate to determine the advantage of this integration in a semi-arid region. A randomized complete block design, with two replications within of each block, in a split plot the scheme was used. To the plots were assigned two types of water (well water and fish effluent) and to the subplots, treatments of a 2X2 factorial arrangement, resulting from the combination of two levels of phosphate (with and without natural phosphate) with two levels of organic matter (with and without cow manure). The total experiment area was 768 m2. Each experimental unit consisted of four rows with a total area of 16 m2. The harvest area of the experimental unit was 6 m2, constituted for two central rows. In each row final part disregarded 0,50m. The cro management practices were performed according to the region recommended techniques for bell pepper plants. The following characteristics were evaluated: number of flowers per plant, number of fruits per plant, relationship fruit and flower, fruit number, fruit weight, fruit mean weight and productivity. The cow manure or natural phosphate fertilization, as well as the bell pepper plants irrigation with fish effluent irrigation, not provided significant increase in the number of flowers and fruits for plant. The natural phosphate fertilization and the bell pepper plants irrigation with fish effluent reduced the fruits productivity. Did not observe any significant interaction between water types and the natural phosphate or cow manure fertilization in the number of flowers or fruits for plants and bell pepper productivity / A descarga de efluentes de piscicultura no meio ambiente pode causar a poluição do solo e de mananciais, gerando impactos ambientais. Uma alternativa que vem surgindo
para resolver o problema da eliminação desses efluentes é a sua utilização na irrigação de hortaliças. A reutilização dessas águas pode ser também uma alternativa para resolver o
problema da escassez de água para irrigação em regiões semi-áridas, tornando o sistema mais sustentável e complementando a renda do produtor. O fato do efluente ser rico em matéria orgânica e nutrientes, como nitrogênio e fósforo, além de microorganismos que podem ser transferidos para o solo, possibilita que a irrigação com essas águas funcione como uma fertirrigação para as plantas. Este trabalho teve como objetivo estudar o efeito da irrigação com efluente de piscicultura na cultura do pimentão adubado com fosfato natural e esterco bovino, visando determinar as vantagens dessa integração nas condições do semi-árido nordestino. O experimento foi delineado em parcela subdivididas em blocos casualizados completos com duas repetições por bloco. Nas parcelas foram designados os
tipos de água (água de poço e efluente de piscicultura) e nas subparcelas os tratamentos do fatorial 2x2, resultante da combinação de dois níveis de fósforo (com e sem fosfato
natural) com dois níveis de matéria orgânica (com e sem esterco bovino). A área total do experimento foi de 768 m2. Cada unidade experimental foi constituída de quatro fileiras,
com uma área total de 16 m2. A área útil desta unidade experimental foi de 6 m2, constituída das duas fileiras centrais, se desprezando 0,5 m da cabeceira de cada fileira. O
plantio e condução do experimento foram feitos de acordo com as práticas culturais em uso na região. As características avaliadas foram: a) flores/planta; b) frutos/planta; c) relação
fruto/flor (%); d) produtividade; e) número de frutos; f) peso dos frutos; e g) peso médio de fruto. A adubação com esterco ou fosfato, bem como a irrigação de plantas de pimentão com efluente de piscicultura, não proporcionaram aumento significativo no número de flores e de frutos por planta. A adubação com fosfato natural e a irrigação de plantas de pimentão com efluente, reduziram a produtividade de frutos. Não se observou qualquer interação significativa entre os tipos de água e a adubação tanto com fosfato como com esterco no número de flores ou frutos por plantas e na produtividade de pimentão
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Obtenção e caracterização de α-fosfato tricálcico por síntese de combustão e aplicação em cimentos ósseos e arcabouços de criogéisVolkmer, Tiago Moreno January 2011 (has links)
Os cimentos de fosfato de cálcio apresentam uma série de vantagens de utilização em ortopedia e traumatologia, sendo as mais destacadas a sua biocompatibilidade e bioatividade, as quais permitem a osteocondução dos tecidos ósseos e o endurecimento “in situ”, permitindo maior facilidade de manipulação. Entretanto; através dos métodos convencionais de reação no estado sólido há uma grande dificuldade em se obter a fase α- fosfato tricálcico pura. Com o desenvolvimento deste trabalho foi possível sintetizar a fase α-fosfato tricálcico nanoestruturado com elevado grau de pureza, utilizando-se o método de síntese de combustão em solução. Após os estudos da influência do pH, da natureza do combustível (uréia ou glicina) e dos teores estequiométricos de combustível (0,75; 1,0; 1,5 e 2,0) foi possível definir os melhores parâmetros de síntese (pH 1,5 e combustível uréia em teor duas vezes maior do que o estequiométrico). Com a definição dos parâmetros ótimos de reação, estudou-se a viabilidade de sua utilização como cimento de fosfato de cálcio. Nesta etapa verificou-se a influência do tamanho de partícula através do tempo de moagem. Para tempo de moagem de 180 minutos foram obtidos valores de resistência mecânica à compressão de até 30,4 MPa. Porém após a imersão em solução de plasma sanguineo simulado (SBF) em tempos crescentes de até 28 dias, ocorreu a diminuição desta propriedade o que é indicativo da alta solubilidade dos pós de α-fosfato tricálcico obtidos via síntese de combustão em solução. O ensaio de citotoxicidade In Vitro demonstrou que o CFC sintetizado neste trabalho não apresentou efeito tóxico para as células. Na sequência do trabalho, investigou-se a viabilidade da aplicação do CFC como substituto ósseo e como carga cerâmica em criogéis poliméricos para utilização em engenharia de tecidos. Inicialmente utilizou-se o sistema dimetilaminoetil metacrilato (DMAEMA) com a adição de 5% de um ácido acrílico (ácido acrílico ou ácido metacrílico), porém tal sistema se mostrou muito instável e apresentou baixa reprodutibilidade. Dessa forma, substituiu-se o ácido acrílico pelo monômero hidroxietil metacrilato (HEMA), pelo fato de o último possuir maior estabilidade química e melhores propriedades mecânicas. Com o uso deste sistema foram obtidos arcabouços porosos através do método de criopolimerização com porosidade de até 75% e poros de até 1 milímetro de diâmetro. A adição de α-fosfato tricálcico às estruturas porosas pouco influenciou nas propriedades físicas da rede polimérica e nas propriedades mecânicas dos arcabouços porosos, porém aumentou significativamente a biocompatibilidade destes, permitindo a adesão e a proliferação de células tronco mesenquimais. A presença de colágeno do tipo I e de fosfatase alcalina são bons indicativos de que as células tronco mesenquimais estão se diferenciando em tecido ósseo e demonstram o potencial destes materiais para o seu uso como biomaterial e mais especificamente como substitutos ósseos. / The calcium phosphate cements have a large number of advantages regarding its use in orthopedics and traumatology, being the most prominent its biocompatibility and bioactivity, which allows the osteoconductive of bone tissue and in situ hardening, allowing greater ease of handling. However, the use of conventionals synthesis methods, e.g. solid state reactions, brings great difficulty to the obtainment of highly pure α- tricalcium phosphate phase. In this thesis, the use of the solution combustion synthesis method allowed to synthesize nanostructured α-tricalcium phosphate with high purity. Further studies on pHs influence, fuel natures (urea or glycine) and fuel ratio (0.75, 1.0, 1.5 and 2.0) allowed to define the best synthesis parameters (pH 1.5 and urea fuel content in two times higher than the stoichiometric). After choosing the best paramaters to the obtainment of higly pure α-tricalcium phosphate, we studied the feasibility of their use as calcium phosphate cement (CFC) by studing the influence of particle size by increasing the milling time from 30 to 180 minutes. The better results were found for the milling time of 180 minutes. Compressives strength of up to 30.4 Mpa were obtained for this formulation. However, after soaking the calcium phosphate cements in simulated blood plasma (SBF) in growing times up to 28 days, a decrease in the compressive strenght was noticed, which is an indicative of the high solubility of the α-tricalcium phosphate powders obtained by solution combustion synthesis. After the obtainment of the calcium phosphate cements, its application as bone substitute and as ceramic load in polymeric cryogels for use in tissue engineering were studied. Initially, the system dimethylaminoethyl methacrylate (DMAEMA) with 5% of an acrylic acid (acrylic acid or methacrylic acid) was used, but due its great instability and lack of reproductbility this system was abandoned. Since it has greater chemical stability and good mechanical properties, the monomer hydroxyethyl methacrylate (HEMA) was chosen as pair to the DMAEMA monomer. With the use of this polymeric system, porous scaffolds with porosity of up to 75% and pores up to 1 mm in diameter were obtained by the method of cryopolymerization. The addition of α-tricalcium phosphate to the porous scaffolds did not showed a significant influence on physical properties of the polymer network nether on mechanical properties of porous structures. However, it increased significantly the biocompatibility of the scaffolds, allowing the adhesion and proliferation of mesenchymal stem cells. The presence of type I collagen and alkaline phosphatase are good indicators that mesenchymal stem cells are differentiating into bone tissue and demonstrate the potential application of these materials as biomaterials, more specifically as bone substitutes.
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Síntese e caracterização de cerâmicas bifásicas de fosfato de cálcio (Hap - ß-TCP) puras e dopadas com magnésio / Synthesis and characterization of two-phase calcium phosphate ceramics (Hap - ß-TCP) pure and doped with magnesiumWebler, Geovana Dresch 06 July 2015 (has links)
The calcium phosphates have been extensively studied for biomedical applications due to their chemical and structural similarities with our mineral phase of teeth and bones. In this work, biphasic calcium phosphate ceramics - BCP (mixture of hydroxyapatite and β-tricalcium phosphate, Hap/β-TCP) pure and doped with magnesium were obtained by solid state reaction. Magnesium (Mg) is known as an important element in the composition of bones and teeth. Recent research has shown that the addition of Mg in BCP structure improves consists mainly in bone metabolism and mechanical properties, without affecting its biocompatibility. The samples were prepared by solid-state reaction, using calcium carbonate, monobasic ammonium phosphate and magnesium nitratehexahydrate, as precursorssource of calcium, phosphate and magnesium, respectively. For pure BCP samples,it was investigated the influence of heat treatment on the formation of the material and for samples doped with magnesium,it investigated the different doping levels in the BCP structure. Several characterization techniques were used. The composition of the crystalline phase and morphology of the prepared materials were characterized by X-ray Diffraction and Electron Scanning Microscopy, respectively. The functional groups were analyzed using Fourier Transform Infrared Spectroscopy and Raman Spectroscopy. Cytotoxicity tests were carried out and the results suggested that the materials prepared in this work have for biological application as biomaterials. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Os Fosfatos de cálcio têm sido amplamente estudados para aplicações biomédicas devido à sua similaridade química e estrutural com a fase mineral dos nossos ossos e dentes. Neste trabalho, cerâmicas bifásicas de fosfato de cálcio - BCP (mistura de hidroxiapatita e β-fosfato tricálcico, Hap/β-TCP) purase dopadascom magnésio foram obtidas através da síntese de reação de estado sólido. O magnésio (Mg) é conhecido como um importante elemento na composição dos ossos e dentes. Recentes pesquisas tem mostrado que a adição de Mg na estrutura BCP melhora o composto, principalmente, no metabolismo ósseo e nas propriedades mecânicas, sem afetar a sua biocompatibilidade. As amostras foram preparadas através da síntese reação de estado sólido, usando carbonato de cálcio, fosfato de amônio monobásico e nitrato de magnésio hexahidratado, como fonte precursora de cálcio, fosfato e magnésio, respectivamente. Para as amostras de BCP puras, foi investigada a influência do tratamento térmico na formação do material e para as amostras dopadas com magnésio, investigamos os diferentes teores de dopantes na estrutura do BCP. Diferentes técnicas de caracterizações foram utilizadas. A composição da fase cristalina e a morfologia dos materiais preparados foram caracterizadas por Difração de Raios-X e Microscopia Eletrônica de Varredura, respectivamente. Os grupos funcionais foram analisados usando Espectroscopia de infravermelho por Transformada de Fourier e Espectroscopia Raman. Testes de Citotoxicidade foram realizados e os resultados sugerem que os materiais preparados neste trabalho, apresentam potenciais como biomaterial em aplicações biológicas.
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Expressão gênica em complexos cumulus-oócito bovinos selecionados pela atividade da glicose-6-fosfato desidrogenase / Genetic expression in bovine cumulus oocyte complexes selected by activity of glucose-6-phosphate dehydrogenaseLopes, Eliana Franco January 2013 (has links)
O objetivo desse trabalho foi avaliar a expressão de genes envolvidos no transporte de monocarboxilatos (Mct1, Mct2, Mct3 e Mct4) e de genes específicos da oogênese (Bmp15, Gdf9 e Has2) em complexos cumulus-oócito (CCOs) selecionados pelo teste BCB. Após seleção morfológica com base no grau de compactação das células do cumulus (CCs) e no grau de homogeneidade do citoplasma, os CCOs foram corados com 26 μM BCB (azul cresil brilhante) por 90 min e divididos em dois grupos: BCB+, que apresentavam o ooplasma corado de azul, e BCB-, com ooplasma não corado. Foram utilizados dois grupos controles não expostos ao BCB: o grupo holding foi submetido às mesmas condições que os grupos corados e o outro grupo controle foi diretamente submetido à maturação in vitro (MIV), após a seleção morfológica dos CCOs. A expressão gênica relativa foi determinada por RT-PCR em CCOs coletados antes e ao final da maturação. A expressão também foi avaliada, separadamente, em oócitos desnudos (ODs) e células do cumulus (CCs) antes e após a maturação. A análise dos transcritos demonstrou que houve aumento significativo (p < 0,05) na expressão relativa de Gdf9 e Bmp15 nos grupos BCB+, BCB- e holding antes da MIV, enquanto Has2 teve aumento significativo (p < 0,01) após a MIV apenas no grupo controle. Os outros genes analisados (Mct1, Mct2 e Mct4) mantiveram-se estáveis durante a maturação. O aumento na abundância relativa de alguns transcritos durante a MIV pode ser atribuído as condições de incubações durante o teste BCB. Nossos resultados demonstraram, pela primeira vez, a expressão de Mct1, 2 e 4 em CCOs bovinos. Enquanto o mRNA de Mct1 e Mct4 estava presente em ODs e em CC, o Mct2 foi detectado somente em CCs. Não detectamos a expressão de transcritos de Mct3 em CCOs. As diferenças na expressão dessas três isoformas sugerem um papel único para esses transportadores durante a maturação. / The aim of this study was to determine the relative expression of genes involved in transport of monocarboxylates (Mct1, Mct2, Mct3 e Mct4) and oogenesis specific genes (Bmp15, Gdf9 and Has2) in immature and mature bovine cumulus-oocyte complexes (COC) after selection by BCB. Immature COCs underwent morphological selection and were stained with 26 mM BCB for 90 min. Based on ooplasm staining, oocytes were distributed in two groups BCB+ (blue color) and BCB- (non-stained). The holding control group was exposed to the same incubation conditions as stained COCs, but without BCB. Control group was submitted to in vitro maturation (IVM) immediately after morphological selection. mRNA expression was investigated by RT-PCR in COCs before and after IVM. No relationship was observed in the relative expression of Has2, Gdf9, Bmp15 or Mct1, 2 and 4 transcripts between BCB- and BCB+ COCs. Transcripts analysis showed that Gdf9 and Bmp15 in BCB+, BCB- and holding groups were upregulated (p < 0.05) before IVM, while Has2 was up-regulated (p < 0.01) after IVM in the control group. Others genes remained stable during maturation (Mct1, 2 and 4). The increase in relative abundance of some transcripts during IVM may be attributed to incubation conditions during the BCB test. Our results showed, for the first time, Mct1, 2 and 4 expression in bovine COCs. Mct1 and Mct4 transcripts were present in denuded oocytes and cumulus cell, while Mct2 was detected only in cumulus cells. These differences between the three isoforms in localization suggest unique roles for each in monocarboxylate transport during maturation.
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DESENVOLVIMENTO E VALIDAÇÃO DE METODOLOGIA PARA AVALIAÇÃO DE FOSFATO DE SITAGLIPTINA / DEVELOPMENT AND VALIDATON OF METHODOLOGY TO EVALUATE SITAGLIPTIN PHOSPHATERavanello, Aline 16 April 2010 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Sitagliptin Phosphate is an oral anti-hyperglycemic belonging to a new class of
medicine used in type 2 diabetes treatment, the dipeptidyl dipetidase -4 (DPP-4) enzyme
inhibitors. This drug besides being safe and tolerated, stimulates the insulin secretion, lowers
the glucagon release, delays the gastric emptiness and increases beta cells life. It is
commercially available as covered pills. So far, there is not any monograph to analyze
sitagliptin phosphate in its pharmaceutical form. In this work some methods were developed
and validated to evaluate and quantify the drug. The methods used to quantify it were high
pressure efficiency liquid chromatography (HPLC) and spectrophotometry. The system
through HPLC was carried out in room temperature and in an isocratic way with Phenomenex
C 18 (15 cm x 4.6mm) reverse phase column and the mobile phase composed by 0.025M pH
6.8 phosphate buffer: acetronytril (60:40, v/v) with 0.8 mL /min. flow. The detection was
accomplished in PDA in 267nm. With the spectrophotometric method the solvent used was
HCI 0.01N and its detection was accomplished in 267nm wave length. The methods show a
good linearity, precision and accuracy and having no significant difference between them.
Later, some dissolution tests were carried out with different bacthes of drug and with similar
results. / O Fosfato de sitagliptina é um anti-hiperglicemico oral pertencente a uma nova classe
de medicamentos utilizados para o tratamento da diabete tipo 2, os inibidores da enzima
dipeptidil dipetidase-4 (DPP-4). Este medicamento além de ser seguro e bem tolerado
estimula a secreção de insulina, diminuí a liberação de glucagon, retarda o esvaziamento
gástrico e prolonga a vida das células beta. Encontra-se comercialmente disponível na forma
de comprimidos revestidos. Não existem monografias até o presente momento para a análise
do fosfato de sitagliptina em sua forma farmacêutica. Neste trabalho foram desenvolvidos e
validados métodos para a avaliação e quantificação do fármaco. Os métodos utilizados para a
quantificação do fármaco foram à cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE) e a
espectrofotometria. O sistema por CLAE foi realizado em temperatura ambiente e de maneira
isocrática com coluna de fase reversa Phenomenex C18 (15cm x 4.6mm) e fase móvel
composta por tampão fosfato 0.025M pH 6.8 : acetonitrila (60:40, v/v) com vazão de
0.8mL/min. A detecção foi realizada no PDA em 267nm. No método espectrofotométrico o
solvente utilizado foi o HCl 0.01N e sua detecção foi realizada no comprimento de onda de
267nm. Os métodos mostram boa linearidade, precisão e exatidão e não demonstraram
diferença significativa entre eles. Posteriormente foram realizados testes de dissolução com
resultados semelhantes com medicamentos de diferentes lotes.
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Avaliação do efeito da associação da irradiação laser Er:YAG com flúor no esmalte dental submetido à erosão / Evaluation of the association effect of the Er:YAG laser irradiation with fluoride on enamel submitted to the erosionJuliana dos Reis Derceli 10 January 2011 (has links)
A erosão dental é uma lesão causada pela dissolução mineral do esmalte, através da ação de ácidos oriundos do suco gástrico ou da alimentação. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do laser Er:YAG na prevenção da erosão do esmalte associado ou não ao flúor e avaliar alterações químicas e morfológicas do esmalte após os tratamentos preventivos. Para tanto, foram obtidos 95 espécimes a partir de esmalte bovino (4x4mm), os quais foram planificados, polidos e divididos aleatoriamente em 5 grupos de acordo com os tratamentos preventivos realizados (G1- laser Er:YAG; G2- laser + flúor; G3- flúor + laser; G4- laser simultaneamente flúor; G5- flúor). A metade da superfície do esmalte de cada espécime foi isolada com esmalte cosmético e cera utilidade (área controle) e a outra metade exposta ao tratamento superficial. O laser foi irradiado por 10 segundos, sem refrigeração, modo focado, não contato, 4 mm de distância focal e 60 mJ/cm2 e 2Hz, o gel fluoretado foi aplicado por 4 minutos. O desafio erosivo ocorreu em Coca-Cola à temperatura ambiente, 4x/dia, por 1 minuto, durante 5 dias. O grau de desmineralização do esmalte foi avaliado por meio da microscopia óptica, do desgaste e da microdureza, as alterações químicas e morfológicas através da MEV/EDS. Os dados da microscopia óptica e microdureza foram analisados por meio da Análise de Variância a 1 Critério, para o desgaste foi utilizado o método não-paramétrico Kruskal-Wallis e para a MEV/EDS foi realizada a análise descritiva dos dados. Nos resultados da microscopia óptica observou-se que os grupos 3 e 4, F+L e FeL respectivamente, apresentaram menor desmineralização em relação aos demais grupos, nos resultados do desgaste observou-se que os grupos 4 e 5, FeL e F respectivamente, apresentaram menor desgaste, os grupos 2 e 3 apresentaram maior desgaste e o grupo 1 foi semelhante ao grupo 4. Os resultados de dureza não demonstram diferença estatística entre os grupos, tendo ocorrido diminuição da dureza em relação ao grupo controle, exceto pelo o grupo L. Na análise da EDS o grupo 5 (FeL) apresentou maior retenção de flúor, cerca de 174%, seguido pelos grupos 4 (F) e 3 (F + L), os quais aumentaram o conteúdo de flúor em 27% e 10% respectivamente, os grupos 1 (L) e 2 (L+F) apresentaram diminuição do conteúdo de flúor de 39% e 7,5%, respectivamente. Todos os grupos apresentaram diminuição do conteúdo de Ca e P, exceto o grupo 2 (L+F). Na MEV observou-se áreas ablacionadas. Concluí-se a irradiação laser utilizada simultaneamente à aplicação tópica de flúor foi capaz de promover maior retenção de flúor ao esmalte dental, menor desmineralização e desgaste do esmalte dental, o emprego do flúor isoladamente e do flúor aplicado simultaneamente ao laser proporcionaram menor desgaste do esmalte, o laser Er:YAG promoveu ablação superficial do esmalte quando irradiado com fluência de 60mJ/cm2, 2Hz e sem refrigeração. / The dental erosion is a lesion caused by loss of enamel mineral due to the acids action originated from gastric juice or dietary. The aim of this study was to evaluate the effectiveness of the Er:YAG laser on the prevention of enamel erosion associated or not to the fluoride, and to evaluate chemical and morphological changes of enamel after preventive treatments. Thus, 95 bovine enamel samples (4X4 mm) were ground flat, polished and randomly divided into 5 groups according to the preventive treatments: G1- Er:YAG laser; G2- laser + fluoride; G3- fluoride + laser; G4- laser simultaneously fluoride; G5- fluoride. Half of the enamel surface was covered with nail varnish and wax (control area) and the other half exposed to the treatments. The laser was irradiated (focused mode, without water cooling, 10 s, 60 mJ/2Hz and focal distance of 4mm) and the fluoride gel was applied for 4 min. Each specimen was individually exposed to soft drink Coca-Cola 4 times/day, during 1 minute, for 5 days. It was evaluated the enamel demineralization degree (optical microscopy), wear depth (perfilometer) and microhardness. Chemical and morphological alterations were evaluated by SEM/EDS. Optical microscopy and microhardness data were analyzed by one-way ANOVA, for wear depth was used Kruskal-Wallis non-parametric method and for SEM/EDS was performed descriptive data analysis. For optical microscopy, G3 and G4 presented lower demineralization than the other groups; for wear, G4 and G5 exhibited lower values, G2 and G3 presented higher values and G1 did not differ from G4. The microhardness results did not show statistical difference among the groups. Microhardness decreasead in relation to the control group, except for G1. In the EDS analysis, G5 presented higher fluoride retention, about 174%, followed by G4 and G3 which increased the fluoride content in 27% and 10% respectively, G1 and G2 presented decrease of the fluoride content of 39% and 7.5% respectively. All the groups presented decrease of the Ca and P content, except G2. In the MEV, ablated areas were observed. It can be concluded that laser irradiation used simultaneously to the fluoride was able to promote higher fluoride retention to enamel, lower demineralization and wear. The use of the fluoride alone and fluoride applied simultaneously to the laser provided lower wear. The Er:YAG laser caused enamel superficial ablation when irradiated with 60mJ/cm2 fluence, 2 Hz, and without refrigeration.
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Prospecção de rizobactérias promotoras de crescimento em quatro espécies arbóreas nativas do BrasilLemos, Maria Teresa Oliverio [UNESP] 01 July 2009 (has links) (PDF)
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lemos_mto_me_jabo.pdf: 967680 bytes, checksum: a6c9fc3231a065465ff531a2097edf51 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A conservação da biodiversidade, implica em cultivar espécies arbóreas nativas que possam ser utilizadas em projetos de reflorestamento, recuperação de áreas degradadas e com o objetivo de obter produtos secundários importantes como madeira e produtos medicinais. O uso de rizobactérias promotoras de crescimento em plantas, vem sendo muito estudado em culturas de importância econômica, devido a sua aplicabilidade em beneficiar o desenvolvimento destas. Neste trabalho foram escolhidas quatro espécies arbóreas nativas, leguminosas não nodulantes: Pterogyne nitens (Amendoim-bravo), Albizia hasslerii (Farinha-seca), Copaifera langsdorffii (Copaíba), e Stryphnodendron adstringens (Barbatimão). O objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro as diferentes bactérias isoladas destas espécies florestais que possam ter efeito benéfico no crescimento e desenvolvimento inicial das plantas e caracterizálas pelo sequenciamento do gene 16S rRNa e perfil eletroforético do gene BOX-A 1R. As bactérias foram isoladas da rizosfera e da raiz de mudas de cada espécie, em meio de cultura NFb. No total, 29 isolados foram cultivados em meio de cultura DYGS enriquecido com triptofano. A estimativa colorimétrica do Ácido Indolacético (AIA) foi feita no espectrofotômetro, utilizando o sobrenadante da cultura de células e solução de Salkowski, com resultado positivo para o isolado Pn 6 Sphingobium chlorophenolicum com 61,69 μg.mL-1. Os isolados também foram testados para a eficiência de solubilização de fosfato de cálcio que foi realizado e contabilizado até o 15° dia após a inoculação em placas de Petri com meio de cultura NBRIP sólido, onde 27 isolados apresentaram resultados positivos. A caracterização genética permitiu a diferenciação em gêneros e também em espécies de um mesmo gênero. Os isolados que deram resultados positivos para AIA e solubilização de fosfato... / The biodiversity conservation implies cultivating native forest species that can be used in reforestation projects, recovery of degraded areas as well as getting others like wood and medicinal products. The plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) use is being studied in cultures of economic importance. In this work four native forest species, no nodulating leguminous had been chosen: Pterogyne nitens, Albizia hasslerii, Copaifera langsdorffii, and Stryphnodendron adstringens. The aim of this work was the in vitro evaluation of the different isolates from those forest species with beneficial effects in growth and initial development of the plants and characterizes them by 16S rRNA gene sequencing and BOX-A 1R. The bacteria had been isolated from the rhizosphere and from the roots (endophytic) of each species seedlings on NFb growth media. A total of 29 isolates had been cultivated in growth media DYGS enriched with tryptophan. The indolacetic acid (IAA) production was estimated by colorimetric test in the spectrophotometer, using the supernatant of the cells culture and Salkowski´s reagent, with positive result for the isolated Pn 6 Sphingobium chlorophenolicum with 61,69 μg.mL-1. Isolates had been also tested for the efficiency of P- solubilizing that was carried through and measured until the 15 º day after the inoculation in Petri plates with solid growth media NBRIP, where 27 isolates had presented positive results. The genetic characterization allows us to differentiate by the genus and species from the same genus. The isolates that had positive results for IAA and P-solubilizing had not matched between itself, what suggests nursery tests with combinations between them to evaluate the isolate efficiency as a possible PGPRs.
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Características bioquímicas e microbiológicas do biofilme dentário formado in situ sobre materiais que contêm flúor ou fosfato de cálcio amorfoFerreira, Lilian [UNESP] 24 February 2010 (has links) (PDF)
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ferreira_l_me_araca.pdf: 1328677 bytes, checksum: e8654f5c6e3eb77d8eb2d430f398667d (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Muito tem se avaliado a respeito das propriedades físicas e químicas dos selantes de fóssulas e fissuras, mas pouco sobre seus efeitos no biofilme dentário. O objetivo deste estudo foi analisar as características bioquímicas e microbiológicas do biofilme dentário formado in situ sobre materiais que liberam flúor ou cálcio e fosfato. Dez voluntários utilizaram dispositivo intrabucal palatino contendo corpos-de-prova de materiais (Fuji IX GP, Auralay XF e Aegis) ou blocos de esmalte bovino. A fase experimental consistiu de 4 etapas de 8 dias cada e a utilização de sacarose para formação do biofilme. No 7º dia dos períodos experimentais foi determinado o pH do biofilme e no 8º dia, o biofilme dentário formado foi coletado para determinação de flúor (F), cálcio (Ca), fósforo (P) e polissacarídeos extracelulares insolúveis (PEI) além da microbiota. Verificou-se a liberação de F, Ca e P de cada material e dos blocos de esmalte após ciclagem de pH. Após a verificação da homogeneidade dos dados, testes paramétricos e não-paramétricos foram realizados para análise dos resultados (p<0,05). O biofilme dentário formado sobre os materiais que liberam flúor apresentou maior presença de F, Ca e P e menor número de estreptococos do grupo mutans quando comparado ao bloco de esmalte. Após o uso da sacarose (7º dia), o pH do biofilme foi maior na presença do material ionomérico. O biofilme sobre o material que contém fosfato de cálcio amorfo mostrou similar concentração de Ca e P, quando comparado aos materiais que contém flúor, e uma ação tamponante no meio, sem efeito na microbiota. Concluiu-se que os materiais que liberam flúor aumentaram as concentrações de F, Ca e P e diminuíram a de PEI e a microbiota cariogênica do biofilme dentário; e o que contém fosfato de cálcio amorfo aumentou as concentrações de Ca e P / The chemical and physical properties of the pit and fissures sealants have been widely evaluated but rare researches focus on the effects on dental plaque. The aim of this study was to evaluate the biochemical and microbiological characteristics of the in situ dental plaque formed on materials that release fluoride or calcium and phosphate. Ten volunteers wore an intraoral palatal device containing specimens of materials (Fuji IX GP, Auralay XF and Aegis) or bovine enamel blocks. The experimental phase consisted of 4 stages with duration of 8 days each and use of sucrose to form the dental plaque. The dental plaque pH was determined at the 7th day of the experimental periods and the dental plaque was collected at the 8th day to determine the fluoride (F), calcium (Ca), phosphorus (P), insoluble extracellular polysaccharides (EPS) and microbiota. It was observed release of F, Ca and P from each material and from the enamel blocks after pH cycling. After verification of data homogeneity, parametric and non-parametric tests were performed (p<0.05). The dental plaque formed on the materials that release fluoride presented more F, Ca and P and reduced number of Streptococcus mutans in comparison to the enamel block. After use of sucrose (7th day), the dental plaque pH was higher with the presence of ionomeric material. The dental plaque on the material containing amorphous calcium phosphate exhibited similar Ca and P concentration compared to the ones on fluoride materials, and buffering action with no effect on the microbiota. It was concluded that the materials that release fluoride increased F, Ca and P concentrations, decreased EPS concentration and the cariogenic microbiota of the dental plaque; the amorphous calcium phosphate material increased concentrations of Ca and P
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