O objetivo do presente trabalho foi estudar a morfologia da área da furca de pré-molares superiores, por meio da microscopia Confocal de varredura a laser, bem como analisar comparativamente a microdureza dessa região com às adjacentes vestibular e palatina. Dez pré-molares superiores com raízes divergentes tiveram suas coroas seccionadas transversalmente ao meio, descartando-se a porção oclusal. As raízes vestibluar e palatina foram cortadas próximas ao terço cervical, desprezando-se os terços médio e apical. O remanescente dental foi incluído em acrílico de rápida polimerização e cortado longitudinalmente no sentido vestíbulopalatino, obtendo-se duas hemi-secções. Uma foi destinada ao estudo da morfologia da dentina e outra à análise da microdureza Knoop, com carga de 10g por 15s. A área de furca foi estabelecida como sendo a região compreendida entre duas retas ortogonais traçadas a partir do ponto de máxima concavidade da superfície externa da bifurcação. A microdureza foi avaliada por camadas (externa, média e interna) bem como por regiões (vestibular, central e palatina) da furca e adjacentes (vestibular e palatina). As médias referentes às cinco mensurações de cada região foram submetidas à análise estatística (one-way ANOVA) (&alpha;=0,05). Os resultados mostraram não haver diferença significante entre as regiões analisadas (p>0,05), no entanto, a camada interna mostrou-se mais dura que a externa (p<0,05). As fotomicrografias evidenciaram que a camada externa apresenta-se bastante tubular, com canalículos amplos e visíveis, enquanto que na interna os canalículos estão totalmente calcificados. A camada média apresenta canalículos visíveis em quantidade bem menor que a externa. No sentido do assoalho da câmara em direção à camada interna, os canalículos assumem inicialmente uma trajetória sinuosa, tendendo a formar um entrelaçamento entre eles a medida que se aproximam da camada média. / The aim of this study was to study the morphology of furcation areas of maxillary premolars, by confocal laser scanning microscopy (CLSM), and to evaluate comparatively the microhardness in these regions to those adjacent on vestibular and palatine. Ten maxillary premolars with divergent roots had the crowns transversely sectioned and the occlusal portions were discarded. The vestibular and palatine roots were cut near to the cervical third ignoring the middle and apical thirds. The remaining teeth were included in rapid polymerization acrylic stubs and cut longitudinally resulting in two hemi-sections. One was designed to the morphology study and the other one to the microhardness using a Knoop device with load of 10g/15s. The furcation area was established as the region between two orthogonal lines drawn from the point of maximum concavity of the outer surface of the bifurcation. Microhardness was measured by layers (superficial, middle and inner) and by regions (vestibular, central and palatine) of furcation and adjacent (vestibular and palatine). The average for the five measurements for each region was subjected to statistical analysis (one way - ANOVA) (&alpha; = 0.05). The results showed no significant difference between the analyzed regions (p> 0,05), however the inner layer presented to be harder than the superficial one (p < 0,05). The CLSM images showed that the superficial layer is quite tubular with large and visible tubules while in the inner one the tubules are completely calcified. The middle layer showed a lower amount of visible dentin tubules than the superficial layer. From the chamber floor toward the inner layer, the tubules initially assume a winding trajectory, tending to form an interweaving among them as they approach to the middle layer.

Foram analisadas a capacidade seladora e a adaptação marginal in vitro, de alguns materiais quando utilizados em perfurações na região de furca. Utilizou-se cento e quatro dentes molares humanos extraídos superiores e/ou inferiores, dos quais oitenta e oito foram usados para analisar o selamento e dezesseis para a adaptação marginal dos materiais seladores utilizados sob M.E.V. Os dentes tiveram suas coroas eliminadas em um nível logo acima do assoalho da câmara pulpar, e as raízes, logo abaixo da região de furca. Em seguida, realizou-se a impermeabilização de toda a superfície externa dos espécimes, e a sua inclusão em uma base de silicona pesada. Ao centro do assoalho de cada espécime, foi realizada uma perfuração com 1,4 mm de diâmetro. Frontalmente às perfurações, na base de silicona, foram realizadas depressões onde foram posicionadas, imediatamente antes da obturação, bolinhas de algodão padronizadas umedecidas com água destilada. Em cada grupo, formou-se 2 subgrupos, um recebendo uma matriz de gesso Paris e o outro não. As obturações das perfurações foram, então, realizadas com os seguintes materiais: Grupo I (MTA – Angelus), Grupo II (ProRoot – MTA), Grupo III (Super-EBA), Grupo IV (MBP-c). Posteriormente, os espécimes foram imersos em solução corante rhodamine B 0,2% a 37°C, por 48 horas. Após lavagem dos espécimes e remoção da impermeabilização, os mesmos foram seccionados longitudinalmente, expondo-se as perfurações e as possíveis marcas de infiltração. A leitura da infiltração marginal, foi realizada por meio de um microscópio óptico, utilizando-se de escores numéricos – 0, 1, 2 e 3, para sua quantificação. Para visualização da adaptação marginal dos materiais obturadores às paredes dentinárias, os espécimes foram submetidos à mesma metodologia descrita anteriormente, exceto quanto à impermeabilização da superfície externa e a imersão na solução corante. Após a presa dos cimento os espécimes, foram submetidos ao M.E.V., obtendo-se fotomicrografias com aumento de 50 e 200X. Os resultados referentes à infiltração marginal, foram submetidos aos testes estatísticos, permitindo as seguintes conclusões: Quando utilizado isoladamente (sem a matriz), o cimento MBP-c apresentou os menores índices de infiltração marginal, seguido pelo Super-EBA, havendo diferença estatística entre esses e os cimentos ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,001). Na presença da matriz de gesso Paris, o cimento MBP-c apresentou os menores índices de infiltração marginal, havendo diferença estatística entre esse e os cimentos ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,05); A matriz de gesso Paris influenciou negativamente, com diferenciação estatística (p<0,05), o selamento produzido pelos cimentos Super-EBA e o MBP-c (p<0,05); A utilização da matriz de gesso Paris evitou o extravasamento dos materiais seladores; Foi observada uma relação direta entre a adaptação marginal e a capacidade de selamento do material. / This paper analyses the sealing capacity and the marginal adaptation in vitro of a few materials when utilized under furcal perforations. The experiment utilized a hundred and forty four extracted human mandibular and maxillary molars. From the total amount, eighty-eight were utilized for checking the sealing and sixteen for checking the marginal adaptation under M.E.V. The teeth had its crowns seccionated and removed in an upper level close to the top of the floor of the pulp chamber, and the roots close to the bottom of the furcal area. Following that , there was an impermeabilization of the whole external surface of the specimens, and the inclusion in a heavy silicon base. There was a 1.4mm perforation to the center of the floor of each specimen. Up front to the perforation, in the silicon base, depressions were made and little cotton pellets moisturized with distilled water were positioned before the obturation. In each group, subgroups were created. One receiving a Plaster of Paris matrix and the other no. The obturation of perforations were then, made with the following materials: Group I (MTA – Angelus), Group II (ProRoot – MTA), Group III (Super-EBA), Group IV (MBP-c). After that, the specimens were submerged in a rhodamine B 0,2% solution at 37°C, for 48 hours. After cleaning the roots and removing the impermeabilization, they were seccionated in the axis direction, thus revealing the perforations and possible leakage marks. The reading of the marginal adaptation was performed by an optical microscope utilizing numerical scores 0, 1, 2 e 3. In order to visualize the marginal adaptation of the obturation materials in regards to the dentinal walls, the specimens were introduced to the same methodology as described before, except for the steps of impermeabilization of the external surface and the submerging in dye. After cement placement, the M.E.V was applied and photos with 50X e 200X were obtained. The results regarding the marginal infiltration were statistically tested. Thus allowing the following conclusions: when isolated and tested (without the matrix), the cement MBP-c presented the smallest coefficient of marginal leakage, followed by the Super-EBA. There was a statistical significance between those and the cements ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,001). In the presence of the Plaster of Paris matrix, the cement MBP-c presented the smallest levels of marginal leakage, having statistical significance between those and the cements ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,05); There was a significant statistical variation, in the marginal leakage of the cements due to the presence of the Plaster of Paris matrix to the Super-EBA and to MBP-c (p<0,05). The utilization of the Plaster of Paris matrix avoided the leakage of the sealing materials. A direct relationship could be found between the marginal adaptation and the material sealing capacity

O presente trabalho teve como objetivo avaliar a microdureza dentinária da região da furca de molares inferiores, assim como estudar, por meio da MEV, a morfologia da dentina nessa região. Utilizaram-se 10 espécimes, os quais tiveram a coroa seccionada transversalmente ao meio, sendo descartada a porção oclusal. As raízes mesial e distal foram cortadas próximas ao terço cervical, desprezando-se os terços médio e apical. O remanescente dental foi incluído em acrílico de rápida polimerização e cortado longitudinalmente ao meio, obtendo-se duas hemi-secções. Uma foi destinada ao estudo da morfologia, na qual observaram-se as características da dentina e o sentido dos canalículos dentinários. Na outra, realizou-se a análise da microdureza, por meio de aparelho de dureza Knoop, com carga de 10g por 15s. A área de furca foi estabelecida como sendo a região compreendida entre duas retas ortogonais traçadas a partir do ponto de máxima concavidade da superfície externa da bifurcação. A microdureza foi avaliada nas camadas de dentina superficial (próxima ao assoalho), média e interna (mais próxima à concavidade externa da furca), assim como nos três eixos, mesial (paralelo à reta traçada junto à mesial da furca), central (paralela à bissetriz entre as retas) e distal (paralela à reta traçada junto à distal). Realizaram-se cinco medidas para cada eixo, obtendo-se uma média por eixo. As mensurações foram submetidas à análise estatística (oneway ANOVA) ( &alpha;= 0,05). Os resultados mostraram não haver diferença significante (p>0,05) entre a dureza das porções mesial (46,5±6,4), central (47,3±8,1) e distal (49,7±6,5). Em relação às camadas, o teste de Tukey evidenciou diferença significante apenas entre as camadas interna (51,7±2,5) e externa (41,4±2,4) (p<0,05). As imagens da MEV mostraram que os canalículos dentinários assumem trajetória centrípeta em direção à porção interna. Os canalículos dentinários na camada externa apresentam-se amplos e com a luz bastante evidente. Na camada média os canalículos são mais atresiados, ao passo que na interna, a dentina assemelha-se à dentina esclerótica. Conclui-se que a microdureza dentinária na área de furca é uniforme nos 3 eixos. A camada interna é mais dura que a externa. A dentina da região de furca parece ser um tecido bastante mineralizado, tendendo a uma maior calcificação dos canalículos à medida que se aproxima da camada interna. / The aim of this study was to evaluate the dentin microhardness in furcation areas of mandibular molars and to study the dentin morphology in these regions by scanning electron microscopy (SEM). The crows of ten specimens were transversely sectioned and the occlusal portions were discarded. The mesial and distal roots were cut near to the cervical third ignoring the middle and apical thirds. The remaining teeth were included in rapid polymerization acrylic stubs and cut longitudinally resulting in two hemi-sections. One was designed to study the morphology in which was possible to observe characteristics of the dentin and dentinal tubules direction. The other one was used to perform analysis of the microhardness using a Knopp device with load of 10g/15s. The furcation areas were established as the regions between two orthogonal lines drawn from the point of maximum concavity of the outer surface of the bifurcation. Microhardness was measured in the superficial layers of dentin (next to the floor), middle and inner (closest to the concavity of the external furcation), as well as in the three axes: mesial (parallel to the straight line along the mesial furcation), central (parallel to the bisectrix between the lines) and distal (parallel to the line drawn along the distal). Five measurements were performed for each axis yielding an average in each one. The measurements were subjected to statistical analysis (one way - ANOVA) (&alpha; = 0.05). The results showed no significant difference (p> 0,05) between the microhardness of the mesial (46.5±6.4), central (47.3±8.1) and distal portions (49.7±6.5). In relation to the layers, the Tukey test showed significant differences only between the inner (51.7±2.5) and outer (41.4±2.4) layers (p <0.05). The SEM images showed that the dentinal tubules assumes centripetal trajectory toward the inner portion. These ones, in the outer layer, presents larger and more evident. In the middle layer are thinner and in the inner layer the dentin is similar to sclerotic dentin. In this study was possible to observe that the microhardness of dentin in the furcation areas is uniform across to the three axes. The inner layer is harder than the outer. The dentin of the furcation areas appears to be a very mineralized tissue having a bigger calcification as it approaches to the inner layer.

Orientador: Sérgio Lucio Pereira de Castro Lopes / Resumo: O objetivo deste estudo foi comparar as possíveis alterações em parâmetros geométricos dimensionais das lesões de furca em molares superiores - área máxima de abertura da lesão (AMA), as angulações formadas entre as raízes (ANG), o volume e densidade da lesão (VDL) e a presença e altura de defeitos infraósseos relacionados com a lesão (DIO) – obtidos em imagens por tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC), de pacientes acometidos por periodontite grau C, após a terapia regenerativa com a utilização de proteínas derivadas da matriz do esmalte (EMD). Para tal, foram estudados 02 grupos: controle (cirurgia) (n=17) e grupo teste (cirurgia+EMD) (n=17). Adicionalmente, foi estudada a correlação entre os parâmetros e o sucesso da terapia adotada, avaliando-se a redução da profundidade de sondagem (∆PS) e o ganho do nível de inserção clínica horizontal (∆NICH). Utilizou-se os softwares OnDemand3D (Cybermed, Seul, Coréia do Sul) e itk-SNAP 3.4.0 (University of North Carolina, Chapel Hill, NC, EUA) para avaliação das imagens de TCFC. Para análise das características demográficas foram realizados Teste T, Mann-Whitney Rank Sum Test e Qui-Quadrado, indicando não haver diferenças estatísticas entre idade, número de dentes analisados e sexo (p>0,05). Os testes ANOVA e Teste T foram aplicados no intuito de estudar os parâmetros clínicos (∆PS e ∆NICH) no baseline e após 06 meses de tratamento nos dois grupos, não sendo observadas diferenças estatisticamente significantes entre os gr... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of this study is to compare the possible changes on geometric dimensional parameters of furcation lesions in maxillary molars - maximum area of lesion opening (AMO), angulations formed between roots (ANG), volume and density of the lesion (VDL) and the presence and height of lesion-related infra-osseous defects (DIO) - obtained on cone beam computed tomography (CBCT) images of patients with grade C periodontitis after regenerative therapy using enamel matrix derivative proteins (EMD). To this end, 02 groups were analyzed: control (surgery) (n = 17) and test group (surgery + EMD) (n = 17). Additionally, the correlation between the parameters and the success of the adopted therapy was studied, and the reduction of the depth pocket (ΔPD) and the relative horizontal clinical attachment level (ΔHCAL) were evaluated. Both software OnDemand3D (Cybermed, Seoul, South Korea) and the itk-SNAP 3.4.0 (University of North Carolina, Chapel Hill, NC, USA) were used to evaluate the CBCT images. In order to analyze the demographic characteristics, Mann-Whitney Rank Sum Test and Chi-Square were used, indicating that there were no statistical differences between age, number of teeth analyzed and gender (p> 0.05). The ANOVA and T-tests were applied in order to study the clinical parameters (ΔPD and ΔHCAL) at the baseline and after 06 months of treatment in both groups, no statistically significant differences were observed between the groups in both times (p > 0.05). The Pearson’s ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Objetivo: Avaliar in vivo a resposta tecidual de dentes de cães após perfuração de furca e recobrimento com Biodentine&trade;, em comparação ao MTA e à guta-percha, por meio de análise histopatológica, histoenzimológica, imunohistoquímica e por imunofluorescência. Métodos: Foram utilizados 30 dentes de 3 cães, divididos em 3 grupos: I - Biodentine; II - MTA; e III - Guta-Percha (controle). Após tratamento endodôntico e limpeza da câmara pulpar, perfurações no centro do assoalho foram realizadas intencionalmente em cada dente, as quais foram preenchidas com os diferentes materiais. Após 120 dias, os animais foram eutanasiados e as peças contendo os dentes e tecidos perirradiculares foram submetidas ao processamento histotécnico. Foram realizadas análises histopatológicas semi-quantitativas para avaliação da neoformação de tecido mineralizado e da reinserção de fibras, além de análise imunohistoquímica das proteínas osteopontina (OPN) e fosfatase alcalina (ALP) e imunofluorescência para proteína morfogenética óssea (BMP-2), proteína de adesão do cemento (CAP), sialoproteína óssea (BSP), osteocalcina (OCN) e proteína do cemento 1 (CEMP1) no tecido mineralizado neoformado e na região adjacente. Paralelamente, foi realizada a histoenzimologia para a atividade da TRAP e contagem dos osteoclastos. Os dados foram submetidos aos testes qui-quadrado e Kruskal-Wallis, com nível de significância de 5%. Resultados: Na avaliação do tecido mineralizado neoformado, o grupo controle foi significantemente diferente dos demais grupos (p<0,0001), sendo que não houve formação de tecido mineralizado em nenhum espécime desse grupo. Nos grupos tratados com MTA e Biodentine houve formação de tecido mineralizado em 88% e 92% dos espécimes, respectivamente, sem diferença entre eles (p>0,05). Ainda, o grupo controle apresentou fibras colágenas paralelas à perfuração. Nos grupos tratados com MTA ou Biodentine também houve fibras colágenas paralelas à perfuração, porém com algumas fibras reinseridas perpendicularmente em diferentes áreas do tecido mineralizado neoformado. Todos os tratamentos induziram a expressão de OPN e ALP, porém em menor intensidade no grupo controle e em maior intensidade no grupo tratado com MTA (p<0,05). Apenas o tecido mineralizado formado após o tratamento com MTA expressou BMP-2, BSP, OCN, CAP e CEMP1. Com relação à avaliação dos osteoclastos, não foi possível encontrar diferença estatística entre os grupos (p=0,97). Conclusão: Com base nos parâmetros analisados, pôde-se concluir que o MTA e a Biodentine apresentaram resposta tecidual satisfatória, com formação de tecido mineralizado e reinserção parcial de fibras, podendo ser indicados para o selamento de perfurações de furca. Além disso, o presente estudo elucidou alguns mecanismos de ação pelo quais o MTA e a Biodentine induzem a formação do tecido mineralizado, com expressão dos marcadores da mineralização ALP e OPN, sem interferência na quantidade de osteoclastos. Apenas o MTA estimulou a expressão de proteínas associadas à formação de tecido mineralizado semelhante ao cemento / Aim: This study evaluated in vivo tissue response in dogs teeth after sealing of furcation perforations with Biodentine&trade;, MTA and gutta-percha, by means of histopathological, histoenzymological, immunohistochemical and immunofluorescence analysis. Methods: Thirty teeth of 3 dogs were used, divided in 3 groups: I - Biodentine; II - MTA; and III - Guta-Percha (control). After endodontic treatment, perforations were made on the pulp chamber floor and filled with the different materials. The animals were euthanized after 120 days and the teeth and surrounding tissues were processed for histopathological analysis of new mineralized tissue formation and collagen fiber reinsertion, immunohistochemical analysis of osteopontin (OPN) and alkaline phosphatase (ALP) and immunofluorescence analysis for bone morphogenetic protein (BMP-2), cementum attachment protein (CAP), bone sialoprotein (BSP), osteocalcin (OCN) and cementum protein1 (CEMP1). Histoenzymology was performed for TRAP activity and osteoclast count. Data were submitted to chi-square and Kruskal-Wallis tests (=0.05). Results: Gutta-percha did not induce mineralized tissue formation. MTA and Biodentine formed mineralized tissue in 88% and 92% of specimens, respectively, with no significant difference (p>0.05). In addition, the control group had collagen fibers parallel to the perforation. In the groups treated with MTA or Biodentine there were also collagen fibers parallel to the perforation, but with some fibers reinserted perpendicularly in different areas of the neoformed mineralized tissue. All materials induced OPN and ALP expression, weakest for gutta-percha and strongest for MTA (p<0.05). Only MTA induced BMP-2, BSP, OCN, CAP and CEMP1 expression. Osteoclast count was similar in the groups (p=0.97). Conclusion: Thus, according to the parameters analyzed in this present study, MTA and Biodentine presented satisfactory tissue response, with formation of mineralized tissue and partial reinsertion of fibers, and could be indicated for sealing furcation perforations. In addition, the present study elucidated some mechanisms of action by which MTA and Biodentine induce the formation of mineralized tissue, with expression of ALP and OPN mineralization markers, without interference in number of osteoclasts. Only MTA stimulated the expression of proteins associated with the formation of a cement-like mineralized tissue

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta dos tecidos perirradiculares após perfuração de furca intencional e selamento com Biodentine (BD), agregado trióxido mineral (MTA) ou guta percha. Foram utilizados pré-molares de 3 cães, num total de 30 dentes, distribuídos em 3 grupos: experimental BD (n= 14), controle negativo (MTA) (n= 10) e controle positivo (guta percha) (n= 6), por um período de 120 dias. Radiograficamente foi analisada a área correspondente à perfuração de furca. Na análise histopatológica qualitativa foi avaliada a presença, ou não de tecido mineralizado no local da perfuração de furca e adjacências. Na análise histopatológica semi-quantitativa foram atribuídos escores para os parâmetros: presença ou ausência de tecido mineralizado, intensidade do processo inflamatório e reabsorção dos tecidos mineralizados. Na análise histopatológica quantitativa foi medida a espessura de tecido mineralizado na área de perfuração de furca. Foram realizados ensaios de imuno-histoquímica para os marcadores de mineralização: RANKL e osteoprotegerina (OPG). Ensaio de imunofluorescência indireta avaliou a expressão Runx-2 para a síntese de proteínas de mineralização. Os dados foram avaliados pelos testes qui-quadrado, teste exato de Fisher e teste de Mann Whitney, utilizando o programa estatístico Graph Pad Prism 6.0. Os grupos foram comparados entre sí pelo Teste de Kruskal Wallis com pós-teste de Dunn. O nível de significância adotado para todas as análises foi de 5%. Na análise radiográfica a (BD) apresentou melhor desempenho em relação ao MTA, em todos os aspectos analisados. Histologicamente, tanto o MTA quanto a BD induziram a formação de tecido mineralizado, quando comparado à guta percha, que não induziu a formação de tecido mineralizado (p<.001). O selamento completo das perfurações de furca foi mais frequente com o MTA, que induziu a deposição de tecido mineralizado com área e espessura maiores. Tanto as amostras seladas com BD, quanto com MTA, não apresentaram reabsorção óssea em área de furca, apresentaram poucas células inflamatórias e maior intensidade do imunomarcador RUNX2 quando comparadas com a guta percha. A OPG esteve presente em amostras seladas com BD e com MTA. Embora o MTA tenha apresentado maior frequência de selamento completo e maior área e espessura de tecido mineralizado recém-formado, a BD também apresentou bons resultados histopatológicos e pode ser considerada como um adequado material de selamento de perfuração de furca. / The objective of this study was to evaluate the periradicular tissue response after intentional furcation and sealing with Biodentine (BD), mineral trioxide aggregate (MTA) or gutta percha. Pre-molars of 3 dogs were used, in a total of 30 teeth, distributed in 3 groups: experimental BD (n = 14), negative control (MTA) (n = 10) and positive control (gutta percha), for a period of 120 days. The area corresponding to furcation was analyzed radiographically. In the qualitative histopathological analysis, the presence or not of mineralized tissue at the furcation site and adjacent areas was evaluated. In the semi-quantitative histopathological analysis, scores were assigned to the parameters: presence or absence of mineralized tissue, intensity of the inflammatory process and reabsorption of mineralized tissues. In the quantitative histopathological analysis the thickness of mineralized tissue in the furcation area was measured. Immunohistochemical assays were performed for the mineralization markers: RANKL and osteoprotegerin (OPG). Indirect immunofluorescence assay evaluated RUNX-2 expression for the synthesis of mineralization proteins. Data were evaluated by chi-square test, Fisher exact test and Mann Whitney test using the Graph Pad Prism 6.0 statistical software. The groups were compared by the Kruskal Wallis test with Dunn\'s post-test. The level of significance adopted for all analyzes was 5%. In the radiographic analysis the (BD) presented better performance in relation to the MTA, in all aspects analyzed. Histologically, both MTA and BD induced the formation of mineralized tissue when compared to gutta percha, which did not induce the formation of mineralized tissue (p <.001). The complete sealing of furcation holes was more frequent with the MTA, which induced the deposition of mineralized tissue with a larger and thickness area. Both the BD and MTA sealed samples did not show bone resorption in the furcation area, showed few inflammatory cells and a greater intensity of the RUNX2 immunomarker when compared to the gutta percha. OPG was present in samples sealed with BD and with MTA. Although the MTA presented higher frequency of complete sealing and greater area and thickness of newly formed mineralized tissue, BD also presented good histopathological results and can be considered as a suitable furcation perforation sealing material.

O objetivo do presente trabalho foi o de avaliar a capacidade seladora de diferentes materiais, associados ou não à irradiação laser, na região de furca de molares humanos, utilizando como microrganismo traçador o Enterococcus faecalis (ATCC 29212). Para tal, quarenta e oito molares inferiores humanos extraídos foram utilizados. As raízes foram seccionadas 4 mm abaixo da região da furca e a luz dos canais vedadas apicalmente com resina composta fotopolimerizável. A seguir, a cirurgia de acesso foi realizada e a câmara coronária preparada quimicamente com solução de hipoclorito de sódio a 1% reagindo com creme de Endo-PTC® durante 45 minutos. A irrigação final foi realizada com 5 mL de solução de EDTA-T 17%, durante 3 minutos, seguindo-se lavagem com 10 mL de solução de hipoclorito de sódio 1%. Após o preparo químico, os dentes foram divididos aleatoriamente em 5 grupos experimentais, de acordo com o agente impermeabilizante da furca: GI AHPlus ®; GII cianoacrilato de etila; GIII aplicação do laser Nd:YAG; GI associado aplicação do laser Nd:YAG + AH-Plus e GII associado aplicação do laser Nd:YAG + cianoacrilato de etila. Grupos controles positivo e negativo da esterilidade, da viabilidade bacteriana, foram desenvolvidos. Os dentes foram individualmente montados em seringas plásticas de 5 mL preparadas previamente e este aparato foi acoplado a uma câmara inferior, que continha meio de cultura TSB, sendo vedado com silicone. Esse conjunto foi esterilizado com radiação ionizante Co60 e os espécimes receberam 500 L do inóculo ajustado na escala Mc Farland 3 na câmara superior. A cada dois dias o meio de cultura foi renovado, estabelecendo-se um período de observação de 30 dias. Os resultados indicaram que a permeabilidade dentinária foi melhor controlada pela aplicação de cianoacrilato de etila na região da furca, não tendo o uso da irradiação laser contribuído para melhora do nível de impermeabilização da dentina. / The sealer capacity of differents materials, associated or not to the irradiation laser, in the furcal region of human molars, utilizing Enteroccocus faecalis ATCC 29212 whit micro-organism to inoculate this region, was the objective of the present research. For such forty-eight mandible human molars extracted were utilized. These roots were cute 4mm down the region of the furcal and the light of the canal roots sealed with resin composed. The surgery of access was carried out and the coronary camara prepared chemically with 1,0 % sodium hypochlorite reacting with Endo- PTC® cream during 45 minutes. The final irrigation by 17 % EDTA-T was performed, during 3 minutes, following the washing with 10 mL 1,0 % sodium hypochlorite. After the chemical preparation the teeth were divided randomly in 5 experimental groups, according to the material that turn the furcal region impermeability: GI AH-Plus®; GII cianoacrilato of etila; GIII Nd: YAG irradiation; GI associated Nd: YAG irradiation + AH-Plus® and GII associated Nd: YAG irradiation + cianoacrilato of etila. Groups controls of the sterility, positive and negative, were evaluated. The teeth individually were putted into the plastic syringes of 5 mL prepared previously, sterilized with Co60 radiation, and this apparatus was coupled to the lower chamber, that count TSB bacterial culture, being sealed with silicona of addition, Araldite® and Super Bonder®. The specimens were inoculated whit 500 L of the Enteroccocus faecalis adjusted in the Mc Farland 3 scale in the upper chamber. To each two days the environment of culture were renewed. The specimens of all of the groups presented microleakage in 11 days of observation. The results showed that the group whit cianoacrilato of etila gave better impermeability furcal region, followed by the AH Plus®, association of the laser Nd: YAG irradiation + cianoacrilato of etila, laser Nd: YAG irradiation and, finally, association of the laser Nd: YAG + AH Plus®.

O presente estudo teve como objetivo caracterizar a expressão da família SIBLING (Small Integrin-Binding Ligand, N-linked Glycoproteins) após tratamento regenerativo de furca com enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários. Para isto, os 2os e 3os pré-molares superiores foram extraídos em quatro cães s.r.d. Cinco dias após as extrações, defeitos padronizados de furca classe II foram criados nos 2os, 3os e 4os pré-molares inferiores, bilateralmente. Estes defeitos foram tratados imediatamente com raspagem, alisamento e polimento corono-radicular (RAPCR) e retalho deslocado coronariamente (RDC) (Grupo Controle) ou com RAPCR + RDC + enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários (Grupo Teste) em um experimento de boca-dividida. Após um período de 6 semanas de reparação, os animais foram sacrificados e foi realizada análise imuno-histoquímica para avaliar a localização dos membros da família de proteínas SIBLING, composta pelas seguintes proteínas nãocolágenas da matriz extracelular: osteopontina (OPN), sialoproteína óssea (BSP), proteína da matriz dentinária 1 (DMP1), sialofosfoproteína da dentina (DSPP) e fosfoglicoproteína da matriz extracelular (MEPE). Não foram encontradas diferenças na expressão da família SIBLING entre os grupos teste e controle. Todas as proteínas foram expressas no novo osso, novo cemento e novo ligamento periodontal, em ambos os grupos. Os osteoclastos demonstraram imunolocalização intracelular intensa somente para a OPN. Cementócitos e o novo ligamento periodontal demonstraram, particularmente, marcação intensa para a MEPE. Houve uma diferença evidente entre o padrão de marcação entre o lado tratado (vestibular) e o não-tratado (lingual) de todos os espécimes, com presença de maior marcação do lado vestibular, para todos os anticorpos testados. Podemos concluir que não houve diferenças no padrão de expressão da família SIBLING após o uso do enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários. A família de proteínas SIBLING é expressa durante o processo de reparação de defeitos de furca, indicando possíveis papéis e funções para as proteínas OPN, BSP, DMP1, DSP e MEPE como moléculas alvo em terapias de regeneração periodontal. / The present study aimed in characterizing the expression of the SIBLING (Small Integrin- Binding Ligand, N-linked Glycoproteins) family in a regenerative treatment of furcation defects with a reparative tissue graft obtained from extraction sockets. The second and third upper premolars were extracted in four mixed breed dogs. Five days later, standardized class II furcation defects were created in the second, third and fourth mandibular premolars, bilaterally. The defects were immediately treated with either debridement and root planning (DRP) combined with a coronally positioned flap (CPF) (Control Group), or with DRP+CPF + a reparative tissue graft derived from the second and third premolar extraction sockets (Experimental Group) in a split-mouth design. After 6 weeks period of healing, the animals were sacrificed and immunohistochemistry was carried out to assess the localization of members of the SIBLING family of noncollagenous extracellular matrix proteins, namely osteopontin (OPN), bone sialoprotein (BSP), dentin matrix protein 1 (DMP1), dentin sialophosphoprotein (DSPP) and matrix extracellular phosphoglycoprotein (MEPE). No differences in the SIBLING family of proteins expression were noted between the control and experimental group. All proteins were expressed in new bone, new cementum and new periodontal ligament in both groups. Osteoclasts exhibited intense intracellular localization only for OPN. Cementocytes and the newly formed periodontal ligament demonstrated particularly intense staining for MEPE. There was an evident difference between the staining pattern between the treated (buccal side) and non-treated (lingual) side of the specimens, with a more intense staining pattern in the buccal side, for all the tested antibodies. In conclusion, there were no differences in the pattern of SIBLING expression following the use of a reparative tissue graft obtained from extraction sockets. The SIBLING family of proteins is expressed during the healing process of furcation defects indicating possible roles and functions of OPN, BSP, DMP1, DSPP and MEPE as target molecules in periodontal regeneration therapies.

O presente estudo teve como objetivo caracterizar a expressão da família SIBLING (Small Integrin-Binding Ligand, N-linked Glycoproteins) após tratamento regenerativo de furca com enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários. Para isto, os 2os e 3os pré-molares superiores foram extraídos em quatro cães s.r.d. Cinco dias após as extrações, defeitos padronizados de furca classe II foram criados nos 2os, 3os e 4os pré-molares inferiores, bilateralmente. Estes defeitos foram tratados imediatamente com raspagem, alisamento e polimento corono-radicular (RAPCR) e retalho deslocado coronariamente (RDC) (Grupo Controle) ou com RAPCR + RDC + enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários (Grupo Teste) em um experimento de boca-dividida. Após um período de 6 semanas de reparação, os animais foram sacrificados e foi realizada análise imuno-histoquímica para avaliar a localização dos membros da família de proteínas SIBLING, composta pelas seguintes proteínas nãocolágenas da matriz extracelular: osteopontina (OPN), sialoproteína óssea (BSP), proteína da matriz dentinária 1 (DMP1), sialofosfoproteína da dentina (DSPP) e fosfoglicoproteína da matriz extracelular (MEPE). Não foram encontradas diferenças na expressão da família SIBLING entre os grupos teste e controle. Todas as proteínas foram expressas no novo osso, novo cemento e novo ligamento periodontal, em ambos os grupos. Os osteoclastos demonstraram imunolocalização intracelular intensa somente para a OPN. Cementócitos e o novo ligamento periodontal demonstraram, particularmente, marcação intensa para a MEPE. Houve uma diferença evidente entre o padrão de marcação entre o lado tratado (vestibular) e o não-tratado (lingual) de todos os espécimes, com presença de maior marcação do lado vestibular, para todos os anticorpos testados. Podemos concluir que não houve diferenças no padrão de expressão da família SIBLING após o uso do enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários. A família de proteínas SIBLING é expressa durante o processo de reparação de defeitos de furca, indicando possíveis papéis e funções para as proteínas OPN, BSP, DMP1, DSP e MEPE como moléculas alvo em terapias de regeneração periodontal. / The present study aimed in characterizing the expression of the SIBLING (Small Integrin- Binding Ligand, N-linked Glycoproteins) family in a regenerative treatment of furcation defects with a reparative tissue graft obtained from extraction sockets. The second and third upper premolars were extracted in four mixed breed dogs. Five days later, standardized class II furcation defects were created in the second, third and fourth mandibular premolars, bilaterally. The defects were immediately treated with either debridement and root planning (DRP) combined with a coronally positioned flap (CPF) (Control Group), or with DRP+CPF + a reparative tissue graft derived from the second and third premolar extraction sockets (Experimental Group) in a split-mouth design. After 6 weeks period of healing, the animals were sacrificed and immunohistochemistry was carried out to assess the localization of members of the SIBLING family of noncollagenous extracellular matrix proteins, namely osteopontin (OPN), bone sialoprotein (BSP), dentin matrix protein 1 (DMP1), dentin sialophosphoprotein (DSPP) and matrix extracellular phosphoglycoprotein (MEPE). No differences in the SIBLING family of proteins expression were noted between the control and experimental group. All proteins were expressed in new bone, new cementum and new periodontal ligament in both groups. Osteoclasts exhibited intense intracellular localization only for OPN. Cementocytes and the newly formed periodontal ligament demonstrated particularly intense staining for MEPE. There was an evident difference between the staining pattern between the treated (buccal side) and non-treated (lingual) side of the specimens, with a more intense staining pattern in the buccal side, for all the tested antibodies. In conclusion, there were no differences in the pattern of SIBLING expression following the use of a reparative tissue graft obtained from extraction sockets. The SIBLING family of proteins is expressed during the healing process of furcation defects indicating possible roles and functions of OPN, BSP, DMP1, DSPP and MEPE as target molecules in periodontal regeneration therapies.

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta dos tecidos perirradiculares após perfuração de furca intencional e selamento com Biodentine (BD), agregado trióxido mineral (MTA) ou guta percha. Foram utilizados pré-molares de 3 cães, num total de 30 dentes, distribuídos em 3 grupos: experimental BD (n= 14), controle negativo (MTA) (n= 10) e controle positivo (guta percha) (n= 6), por um período de 120 dias. Radiograficamente foi analisada a área correspondente à perfuração de furca. Na análise histopatológica qualitativa foi avaliada a presença, ou não de tecido mineralizado no local da perfuração de furca e adjacências. Na análise histopatológica semi-quantitativa foram atribuídos escores para os parâmetros: presença ou ausência de tecido mineralizado, intensidade do processo inflamatório e reabsorção dos tecidos mineralizados. Na análise histopatológica quantitativa foi medida a espessura de tecido mineralizado na área de perfuração de furca. Foram realizados ensaios de imuno-histoquímica para os marcadores de mineralização: RANKL e osteoprotegerina (OPG). Ensaio de imunofluorescência indireta avaliou a expressão Runx-2 para a síntese de proteínas de mineralização. Os dados foram avaliados pelos testes qui-quadrado, teste exato de Fisher e teste de Mann Whitney, utilizando o programa estatístico Graph Pad Prism 6.0. Os grupos foram comparados entre sí pelo Teste de Kruskal Wallis com pós-teste de Dunn. O nível de significância adotado para todas as análises foi de 5%. Na análise radiográfica a (BD) apresentou melhor desempenho em relação ao MTA, em todos os aspectos analisados. Histologicamente, tanto o MTA quanto a BD induziram a formação de tecido mineralizado, quando comparado à guta percha, que não induziu a formação de tecido mineralizado (p<.001). O selamento completo das perfurações de furca foi mais frequente com o MTA, que induziu a deposição de tecido mineralizado com área e espessura maiores. Tanto as amostras seladas com BD, quanto com MTA, não apresentaram reabsorção óssea em área de furca, apresentaram poucas células inflamatórias e maior intensidade do imunomarcador RUNX2 quando comparadas com a guta percha. A OPG esteve presente em amostras seladas com BD e com MTA. Embora o MTA tenha apresentado maior frequência de selamento completo e maior área e espessura de tecido mineralizado recém-formado, a BD também apresentou bons resultados histopatológicos e pode ser considerada como um adequado material de selamento de perfuração de furca. / The objective of this study was to evaluate the periradicular tissue response after intentional furcation and sealing with Biodentine (BD), mineral trioxide aggregate (MTA) or gutta percha. Pre-molars of 3 dogs were used, in a total of 30 teeth, distributed in 3 groups: experimental BD (n = 14), negative control (MTA) (n = 10) and positive control (gutta percha), for a period of 120 days. The area corresponding to furcation was analyzed radiographically. In the qualitative histopathological analysis, the presence or not of mineralized tissue at the furcation site and adjacent areas was evaluated. In the semi-quantitative histopathological analysis, scores were assigned to the parameters: presence or absence of mineralized tissue, intensity of the inflammatory process and reabsorption of mineralized tissues. In the quantitative histopathological analysis the thickness of mineralized tissue in the furcation area was measured. Immunohistochemical assays were performed for the mineralization markers: RANKL and osteoprotegerin (OPG). Indirect immunofluorescence assay evaluated RUNX-2 expression for the synthesis of mineralization proteins. Data were evaluated by chi-square test, Fisher exact test and Mann Whitney test using the Graph Pad Prism 6.0 statistical software. The groups were compared by the Kruskal Wallis test with Dunn\'s post-test. The level of significance adopted for all analyzes was 5%. In the radiographic analysis the (BD) presented better performance in relation to the MTA, in all aspects analyzed. Histologically, both MTA and BD induced the formation of mineralized tissue when compared to gutta percha, which did not induce the formation of mineralized tissue (p <.001). The complete sealing of furcation holes was more frequent with the MTA, which induced the deposition of mineralized tissue with a larger and thickness area. Both the BD and MTA sealed samples did not show bone resorption in the furcation area, showed few inflammatory cells and a greater intensity of the RUNX2 immunomarker when compared to the gutta percha. OPG was present in samples sealed with BD and with MTA. Although the MTA presented higher frequency of complete sealing and greater area and thickness of newly formed mineralized tissue, BD also presented good histopathological results and can be considered as a suitable furcation perforation sealing material.