Os corantes são muito usados na indústria alimentícia. Podendo ser de origem natural ou sintética, estes são utilizados na produção de alimentos no intuito de compensar a perda da cor durante a fabricação e estocagem, garantir a uniformidade da cor e também de atribuir coloração àqueles originalmente incolores. Dentre os pigmentos naturais, o beta-caroteno (BC) tem sido um dos mais adicionados em alimentos. Por outro lado, a utilização do BC é limitada devido à sua instabilidade. Por essa razão, técnicas de microencapsulamento são muito utilizadas, pois podem proteger o material microencapsulado de ações oxidantes, prolongando a propriedade do composto. Porém, nestes processos tecnológicos, as propriedades do composto encapsulado devem ser cuidadosamente estudadas. O objetivo deste trabalho foi comparar a possível ação antimutagênica do BC puro e na forma microencapsulada (BCM) por meio do teste do micronúcleo em células da medula óssea e sangue periférico, e por meio do ensaio do cometa em rins e fígado de ratos tratados com o antitumoral doxorrubicina (DXR). Para isso, o tratamento foi feito com duas doses do carotenóide (2,5 ou 5 mg/kg) puro ou microencapsulado, por gavagem durante 14 dias, seguida de injeção intraperitoneal de salina ou do antitumoral DXR (16 mg/kg), logo após a última gavagem. Ratos Wistar machos foram divididos em 14 grupos de tratamentos (n=6/grupo), e foram sacrificados 24h após a injeção intraperitoneal. Os resultados com o teste do micronúcleo nos dois tecidos mostram que o BC não foi mutagênico, exceto na dose de 5mg/kg. No BCM as doses não foram mutagênicas e na associação BCM+DXR apenas a maior dose foi antimutagênica. Os resultados com o teste do cometa nos rins e fígado mostram que o BC não foi genotóxico e quando associado à DXR obteve valores de proteção semelhantes aos resultados obtidos com o controle solvente (óleo de milho). O BCM também não foi genotóxico em qualquer dos tecidos. Quando associado à DXR as duas doses tiveram efeito protetor contra a fragmentação do DNA no fígado. No rim, a dose BCM 2,5mg+DXR foi genotóxica e a dose BCM 5mg+DXR foi antigenotóxica. A antimutagenicidade observada pode ser explicada pela ação antioxidante do beta-caroteno. No entanto, quando uma dose alta é utilizada, os produtos de clivagem do carotenóide podem aumentar a formação de espécies reativas de oxigênio induzindo ainda mais a formação de micronúcleos. A diferença entre os resultados obtidos com as duas doses do BC e do BCM indicam que, talvez, a biodisponibilidade do carotenóide foi alterada pelo processo de microencapsulamento. No entanto, o efeito protetor observado em uma das doses do BCM pode ser explicado pela capacidade antioxidante do beta-caroteno, mesmo na forma microencapsulada. Em conclusão, o BC puro não deve ser utilizado em altas doses, pois aumenta o dano ao DNA e quando microencapsulado não perde suas propriedades, porém uma dose maior deve ser utilizada para que o carotenóide tenha efeito antimutagênico. / Colorants are commonly used in the food industry. From natural or synthetic origin, these colorants are used in food production in order to recompense the loss of color during manufacturing and stowage processes, guarantee color uniformity and also attribute color to those colorless ones. Among natural pigments, beta-carotene (BC) has been one of the most added to food. On the other hand, the utilization of BC is limited due to its instability. On that account, microencapsulation techniques are more used, once they can protect the microencapsulated material from oxidizing actions, extending the composition property. Nevertheless, in these technological processes, the properties of the encapsulated compound must be studied carefully. The aim of this work was to compare the possible antimutagenic action of pure and microencapsulated BC (BCM) through micronucleus test in cells of bone marrow and peripheral blood, and through comet assay in kidneys and livers of rats treated with the antitumoral doxorubicin (DXR). For this, the treatment was made of two doses of pure and microencapsulated carotenoid (2.5 or 5 mg/kg), by gavage during 14 days, followed by saline intraperitoneal injection or antitumor DXR (16 mg/kg), right after the last gavage. Male Wistar rats were divided in 14 treatment groups (n=6/group), and were sacrificed 24 hours after the intraperitoneal injection. The micronucleus test results in both tissues show that BC was not mutagenic, except for the 5mg/kg dose. In BCM the doses were not mutagenic and in the association of BCM+DXR, only the higher dose was antimutagenic. The results of the comet assay in kidney and liver show that BC was not genotoxic and when associated to DXR it obtained protection values similar to the results obtained with the solvent control (corn oil). BCM was also not genotoxic in none of the tissues. Once associated to DXR, the two doses had protector effect against the DNA fragmentation in the liver. In the kidney, the BCM 2.5mg+DXR dose was genotoxic and the BCM 5mg+DXR dose was antigenotoxic. The observed antimutagenicity can be explained by the beta-carotene antioxidant action. However, when a higher dose is used, the carotenoid cleavage products can increase the formation of reactive oxygen species inducing the formation of micronucleus. The difference between the results obtained with the two doses, BC and BCM, indicates that, perhaps, the carotenoid biodisponibility was modified by the process of microencapsulation. Nevertheless, the protector effect observed in one of the BCM doses can be explained by the beta-carotene antioxidant capacity, even in the microencapsulated form. In conclusion, the pure BC should not be used in high dose, because it increases damage to DNA and while microencapsulated it does not lose its properties, but one higher dose must be used for the carotenoid to have antimutagenic effect.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CAROLINNE BORGES KHAYAT.pdf: 2297476 bytes, checksum: 992aa1b9dc7b17cdf96375464ab8d719 (MD5) Previous issue date: 2012-04-13 / The term pesticide is used to refer to a wide variety of chemicals used to kill weeds, insects and fungi. In Brazil, the use of pesticides in agriculture has been expanding continuously, and therefore the analysis of the effects of this type of environmental exposure begins to document an epidemiological profile of the distribution of cancer in both populations occupationally exposed to these chemicals as in the general population indirectly affected by contaminated food and water resources. The possible toxic effects of such exposures are unknown and the information related only to the toxicity of active ingredients are not sufficient to assess the risk of adverse effects of pesticides on human health and the environment. Workers exposed to pesticides when compared with the control group showed increased 8 times more micronucleus and 20 times more binucleated cells and increased DNA damage measured by comet assay. Variables such as smoking, alcohol consumption, age, sex, duration of exposure and type of pesticide did not affect the appearance of genetic damage. However, there was an increase of micronucleus in workers who did not use personal protective equipment. Pesticide exposure can cause genotoxicity and mutagenicity to individuals who deal with such agents. / O termo pesticida é usado para denominar uma ampla variedade de produtos químicos utilizados para destruir ervas daninhas, insetos e fungos. No Brasil, o uso de pesticidas na agricultura vem se ampliando de forma contínua e, consequentemente, a análise sobre os efeitos deste tipo de exposição ambiental começa a documentar um perfil epidemiológico da distribuição de câncer tanto em populações ocupacionalmente expostas a estes agentes químicos, como na população geral indiretamente afetada por contaminação alimentar e dos recursos hídricos. Os possíveis efeitos tóxicos de tais exposições ainda são desconhecidos e as informações da toxicidade relacionada apenas aos ingredientes ativos não são suficientes para avaliar o risco dos efeitos adversos dos pesticidas à saúde humana e ambiental. Os trabalhadores expostos a pesticidas, quando comparados ao grupo controle, tiveram aumento de 8 vezes mais micronúcleos e 20 vezes mais células binucleadas e maior dano ao DNA avaliado pelo ensaio cometa, em relação ao grupo controle (p<0,0001), como demonstrado pelo teste t e análises de regressão linear simples. Nesse estudo, variáveis como tabagismo, consumo de álcool, idade, sexo, tempo de exposição e tipo de pesticida não influenciaram o aparecimento de danos genéticos. Entretanto, houve aumento de micronúcleos em trabalhadores que não utilizavam equipamentos de proteção pessoal (p=0,006). Assim, a exposição a pesticidas, independente do tempo e tipo de agente utilizado, pode causar genotoxicidade e mutagenicidade aos indivíduos que os manipulam.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Macxuell Rosa dos Reis Oliveira.pdf: 1230845 bytes, checksum: 9ca756dde6dc4a9a9cde4f85bc8e0a66 (MD5) Previous issue date: 2014-05-12 / Agents to combat epidemics (ACEs) represent the most exposed group to the effects of the insecticides once exposure occurs from the preparation until the application inside and outside the houses. Factors such as lack of personal protective equipment (PPE) or ignorance of the correct way of handling each product increase the risk of intoxication. In this context, due to the scarcity of information on genotoxicity caused by pesticides, to combat the mosquito Aedes aegypti , the present study assessed the genomic damage of the ACEs, from Aparecida de Goiânia (GO). Therefore, the occupation exposure was associated with the use of PPE and the lifestyle of the worker, considering social factors such as gender, age, exposure duration to pesticides, smoking and alcohol. A group of 52 ACEs, working in the city of Aparecida de Goiânia, and 60 controls, who presented similar lifestyles, was selected. Genomic DNA was extracted from both groups being analyzed by the comet assay, a test of simple application, able to demonstrate DNA damage. To the evaluation of genomic damage, 04 parameters were analyzed and classified as follows: Tail length (CC) Percentage of DNA in tail (PDCA), tail moment (MC) and Olive tail moment (MCO). A questionnaire to evaluate the lifestyle and history of exposure was associated with genomic damage. The exposed group consisted of 52 ACEs, 26 (50 %) men and 26 (50 %) women and the control group consisted of 60 subjects, 33 (55 %) men and 27 (45 %) women, 17% of ACEs smoked and 38% drunk. The data indicated that 45 % of ACEs handled pesticides on average for 10 years. 31 (60 %) of ACEs used EPI s and 21 (40 %) did not use, although 95 % of ACEs consider the importance of PPEs usage. As for genomic damage, when comparing the 04 comet parameters between the exposed and control groups, statistically significant differences (p < 0.001) were detected. As for ACE´s lifestyle, smoking and drinking, , no statistically significant differences were detected ( p > 0.05) between the 04 comet assay parameters of evaluation of genomic damage , i.e. , individuals who smoked and or drank did not show larger DNA lesions, when compared to individuals who did not use such compounds. We also did not find statistically significance between CC and reports of poisoning in the ACEs (F = 1.7, p = 0.19). In addition, no statistically significant differences between PDCA, MC and MCO were observed, with reports of poisoning of ACEs, respectively (F = 2.5, p = 0.12, F = 1.9, p = 0.17 and F = 2.0, p = 0.16). Regarding the use of PPE, there was also no statistically significant differences (p > 0.05) between staff who used or not such equipment. By associating the use of PPE with reports of intoxication also no statistically significant differences were found (F = 0.17, p = 0.7). Finally, as to exposure time and association with the parameters of genetic damage, there was also no statistically significant difference (p > 0.05). Thus, the results found in this study provided information that ACEs have genetic risks associated with exposure to pesticides, highlighting the need for educational programs in order to reduce the occupational risk associated with the use of insecticides. / Os agentes de combate a endemias (ACEs) representam a categoria mais exposta aos efeitos dos inseticidas, pois a exposição se dá desde o preparo da calda até a aplicação nas áreas intra ou peridomiciliares. Fatores como a falta de equipamentos de proteção individual (EPI) ou desconhecimento da forma correta de manipulação de cada produto, aumentam os riscos de intoxicação. Neste contexto, mediante a escassez de informações sobre a genotoxicidade provocada pelo uso de pesticidas, de combate ao mosquito Aedes aegypti, o presente estudo avaliou danos à saúde de ACEs, do município de Aparecida de Goiânia (GO). Para tanto, a atividade profissional foi associada ao uso de Equipamentos de Proteção Individual (EPI) e ao estilo de vida do trabalhador, considerando fatores sociais, tais como: sexo, idade, tempo de exposição aos pesticidas, tabagismo e etilismo. Foi selecionado um grupo de 52 ACEs, atuantes no município de Aparecida de Goiânia, e 60 indivíduos do grupo controle, que apresentavam estilos de vida semelhantes. O DNA genômico foi extraído de ambos os grupos, sendo analisado pelo ensaio cometa, um teste de simples aplicação, capaz de demonstrar danos causados ao DNA. Para a avaliação dos danos genômicos, foram analisados 04 parâmetros, classificados como: Comprimento da cauda (CC), Porcentagem de DNA na Cauda (PDCA), Momento da Cauda (MC) e Momento da Cauda de Olive (MCO). Também foi aplicado um questionário, visando avaliar os hábitos de vida e histórico de exposição e associar com os danos genômicos encontrados. O grupo exposto compreendeu 52 agentes, sendo 26 (50%) homens e 26 (50%) mulheres e o grupo controle foi composto por 60 indivíduos, sendo 33 (55%) homens e 27 (45%) mulheres. Pode-se observar que 17% dos ACEs fumavam e 38% bebiam. Os dados indicaram que 45% dos ACEs manusearam algum tipo de pesticida, em média por 10 anos. Quando questionados sobre o uso dos EPIs, 31 (60%) dos ACEs utilizavam EPI´s e 21 (40%) não utilizavam, embora 95% dos ACEs considerassem importante o uso destes equipamentos. Quanto aos danos genômicos, ao se comparar os 04 parâmetros de dano, entre os grupos exposto e controle, foram detectadas diferenças estatisticamente significativas (p< 0,001). Quanto aos hábitos de vida (tabagismo e etilistmo) dos ACEs, não foram detectadas diferenças estatisticamente significativas (p>0,05) entre os 04 parâmetros de avaliação de dano genômico, ou seja, indivíduos que fumavam e ou bebiam não apresentaram maiores lesões ao DNA, em relação aos indivíduos que não faziam uso de tais compostos. Ao se associar o comprimento da cauda (CC) com os relatos de intoxicação dos ACEs não foram detectadas diferenças estatisticamente significativas (F =1,7, p=0,19). Também não foram evidenciadas diferenças estatisticamente significativas entre PDCA, MC e MCO, com relatos de intoxicação dos ACEs, respectivamente (F= 2.5, p= 0,12; F= 1,9, p=0,17 e F= 2.0 e p= 0,16). Quanto ao uso de EPIs, também não houve diferenças estatisticamente significativas (p>0,05) entre os agentes que utilizavam ou não tais equipamentos. Ao se associar a utilização de EPI´s com relatos de intoxicação também não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas (F=0,17; p= 0,7). Finalmente, quanto ao tempo de exposição e associação com os parâmetros de dano genético, também não houve uma associação estatisticamente significativa (p> 0,05). Assim, os resultados encontrados nessa pesquisa forneceram informações de que os ACEs apresentam riscos genéticos associados à exposição aos pesticidas, salientando a necessidade de programas educacionais, a fim de reduzir o risco ocupacional associado ao uso de inseticidas e demais produtos químicos.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:39:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Douglas Dantas Rodrigues.pdf: 1094258 bytes, checksum: be59e50a44653cbac4abda0ac7ca028f (MD5) Previous issue date: 2015-03-30 / The agent to combat epidemic (ACEs) are the more exposed classes to effect of pesticides, since their expositions is given to preparation to application of pesticides. The uses of PPE are essential to protection of these workers, yet they often dispense their uses. Factors such as lack of knowledge about the correct use of pesticides or no respect for the PPE uses may be related to the risk of intoxication. It is well known that pesticides may cause DNA damage in people who are occupationally exposed. Although there are many studies on the damage to farmers, few studies have been performed with ACEs. In this context, this study aimed to evaluate the genomic damage in ACEs of the city of Aparecida de Goiânia (GO) and to correlate the damage with intoxication reports and use of PPE and styles of life of the agents. We selected for research 39 ACEs and 39 people from the local community who were not occupationally exposed to pesticides. Based on a structured questionnaire was collected lifestyle information of the participants, such as age, gender, alcohol consumption, tobacco use, and data on the use of PPE and signs and symptoms of intoxication of ACEs. The evaluation of genomic damage was made by micronucleus technique, and the cholinesterase test was performed in ACEs to observe the presence of chronic intoxication. The exposed group consisted of 21 men (53.8%) and 18 women (46.2%). Of agents 39, 10 (25.6%) smoked and 29 (74.4%) did not smoke; 23 (58.9%) drank and 16 (41.1%) did not drink. The evaluation of cholinesterase was normal in all agents, but when comparing the frequency of micronuclei in the case group with control, a statistical difference (p> 0.05) was observed. By correlating the use of PPE with genomic damage, was not found a significant difference. Based on the findings of this research, it can be states that the use of pesticides by ACEs is a risk to it in genomic damage, which can lead to serious healths problems for the same. Worth pointing out that there are a need for education about the risk of using pesticides, particularly for occupationally exposed group. / Os agentes de combate a endemias (ACEs) são as categorias mais exposta aos efeitos de pesticidas, pois sua exposição se dá deste o preparo da calda dos pesticidas até a aplicação do mesmo. O uso de EPIs é essencial para a proteção desses trabalhadores, todavia eles muitas vezes os dispensam. Fatores como a falta de conhecimento acerca do uso correto dos pesticidas ou não respeito aos usos das EPIs podem estar relacionados com o risco de intoxicação. Sabe-se que os pesticidas podem causar danos no DNA em pessoas que são ocupacionalmente expostas. Apesar de existir muitos estudos sobre o dano em agricultores, poucos estudos foram realizados com ACEs. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o dano genômico em ACEs da cidade de Aparecida de Goiânia (GO) e correlacionar o dano com os quadros de intoxicação e com uso de EPIs e aos estilos de vidas dos agentes. Foram selecionados para pesquisa 39 ACEs e 39 pessoas da comunidade local que não foram ocupacionalmente expostos a pesticidas. Através de um questionário estruturado foram coletados dados sobre estilo de vida dos participantes, tais como idade, sexo, etilismo, tabagismo, além de dados acerca do uso de EPIs e sinais e sintomas de intoxicação dos ACEs. A avaliação do dano genômico foi realizada pela da técnica de micronúcleo, e o teste de colinesterase foi realizado nos ACEs para observar a presença de intoxicação crônica. O grupo exposto foi composto por 21 homens (53,8%) e 18 mulheres (46,2%). Dos 39 agentes, 10 (25,6%) fumavam e 29 (74,4%) não fumavam e 23 (58,9%) bebiam e 16 (41,1%) não bebiam. A avaliação da colinesterase foi normal em todos os agentes, porém, ao comparar a frequência dos micronúcleos do grupo caso com controle, foi observada uma diferença estatística (p<0,05). Ao correlacionar o uso de EPIs com dano genômico, não foi encontrada uma diferença significativa. Com base nos achados dessa pesquisa, pode-se afirmar que o uso de pesticidas por ACEs representa um risco de dano genômico, o que pode trazer sérios problemas de saúde para os mesmos. Vale salientar que há uma necessidade de educação sobre o risco do uso de pesticidas, principalmente para os grupos ocupacionalmente exposto.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:54:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dwight Assis Chaves.pdf: 1963972 bytes, checksum: a15ea173ac93c1534367c22dfc6105bd (MD5) Previous issue date: 2015-02-05 / The barbatimão (Stryphnodendron adstringens) is a medicinal plant, rich in tannins, found in the cerrado, which has anti-inflammatory, analgesic activity and a protective activity of gastric mucosa. In this work we evaluated the angiogenic activity and result from antiangiogenic, genotoxic and non-genotoxic of the barbatimão bark aqueous solution. Data from recent studies of the angiogênise using the CAM of hens egg to the barbatimão were not found in the literature. The barbatimão shells for the preparation of ASB (aqueous solution of barbatimão) were acquired in the city of Goiânia. Were used 30 grams of crushed shells to one litre of water. Angiogenic activities and result from antiangiogenic were evaluated by the experimental method of the corioalantoide membrane (CAM) and as positive control was used the Regederm product, which features angiogenic activity known. Genotoxic activity was evaluated from the barbatimão from aqueous solution using experimental model the micronucleus test in bone marrow of mice, and non-genotoxic activity was evaluated by the simultaneous treatment of the ASB and the compound known to be genotoxic Mitomycin C (MMC). The presented ASB tests, was considered genotoxic, angiogenic and features not non-genotoxic on concentration tested compared with the controls. The ASB presented a high vascularization in MCA (50.4) compared with the positive control (52.9). The dose of the barbatimãos peel solution (30 mg.ml -1) analyzed presented difference (p<0,05) at the EPCMN frequency relative to the negative control group.Comparing the frequency of dose EPCMN SABMMC concurrent treatment with the positive control, there was no significant difference (p>0,05). The results were promising, cooperating with future research for developing new medicines. It is noticed that the genus presents promising active principles for the development of new herbal medicines, that becomes necessary more studies and research for consumer safety. / O barbatimão (Stryphnodendron adstringens) é uma planta medicinal, rica em taninos, encontrada no cerrado,a qual possui atividade anti-inflamatória, analgésica e uma atividade protetora da mucosa gástrica. Neste trabalho foram avaliadas as atividades angiogênica e antiangiogênica, genotóxica e antigenotóxica da solução aquosa da casca do Barbatimão.Dados dos estudos recentes da angiogênise utilizando a MCA de ovo de galinha para o barbatimão não foram encontrados na literatura.As cascas de barbatimão para o preparo da SAB(Solução aquosa de barbatimão) foram adquiridas na cidade de Goiânia. Foram utilizadas 30 gramas de cascas trituradas para um litro de água. As atividades angiogênica e antiangiogênica foram avaliadas pelo método experimental da membrana corioalantoide (MCA) e como controle positivo foi utilizado o produto Regederm, que apresenta atividade angiogênica conhecida. A atividade genotóxica foi avaliada a partir da solução aquosa do barbatimão utilizando como modelo experimental o teste do micronúcleo em medula óssea de camundongos, sendo que a atividade antigenotóxica foi avaliada pelo tratamento simultâneo da SAB e do composto sabidamente genotóxico Mitomicina C (MMC). A SAB pelos testes apresentados foi considerada angiogênica, genotóxica e não possui características antigenotóxicas na concentração testada comparada com os controles. A SAB apresentou uma elevada vascularização na MCA (50.4%) quando comparada com o controle positivo(52,9%). A dose da solução da casca de barbatimão (30 mg.ml-1) analisada apresentou diferença (p<0,05) na frequência de EPCMN em relação ao grupo controle negativo.Comparando a frequência de EPCMN da dose do tratamento de SAB+MMC simultâneo com o controle positivo, não houve diferença significativa (p>0,05). Os resultados foram promissores, cooperando com pesquisas futuras para desenvolvimento de novos medicamentos.Percebe-se que o barbatimão apresenta princípios ativos promissores para o desenvolvimento de novos medicamentos fitoterápicos, para isso tornam-se necessários mais estudos e pesquisas para segurança do consumidor final.

Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2017-06-28T13:13:31Z No. of bitstreams: 1 ALINE CARNEIRO GOMES FIGUEIRA.pdf: 3048679 bytes, checksum: 610460de098973cae7cdf22a32c77b05 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-28T13:13:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ALINE CARNEIRO GOMES FIGUEIRA.pdf: 3048679 bytes, checksum: 610460de098973cae7cdf22a32c77b05 (MD5) Previous issue date: 2017-03-13 / The Lantana camara, popularly known as “Cambará”, is a plant that has many medicinal uses and biological properties as anti-inflammatory, wound healing, antioxidant, analgesic, antitumor actions, among others. Despite having many beneficial activities, the Lantana camara also has ill effects and is considered embryotoxic and hepatotoxic in some animals. On this, the present work aims to evaluate the angiogenic activity of the essential oil of Lantana camara (O.E.L.C) using the chick embryo chorioallantoic membrane (CAM) assay; evaluate the mutagenic and antimutagenic, anticytotoxic and cytotoxic, genotoxic and antigenotoxic activities of O.E.L.C using the micronucleus test in hematopoietic bone marrow of mice and comet assay in blood cells of mice. In the evaluation of angiogenic activity at MCA the O.E.L.C was tested at a concentration of 4,25 mg/ml. In the evaluation of mutagenic, cytotoxic, genotoxic activities the mice were individually treated with intraperitoneal doses of O.E.L.C (300 mg/kg, 600 mg/kg, 1200 mg/kg). In the evaluation of antimutagenic, anticytotoxic, antigenotoxic activities the mice were treated with doses of O.E.L.C (300 mg/kg, 600 mg/kg, 1200 mg/kg) together with doxorubicin 2 mg/kg. The results of the evaluation the angiogenic activity in the CAM show that O.E.L.C significantly increased the formation of new blood vessels when compared to the positive control (p < 0.05). The results evaluation of mutagenic and cytotoxic activities showed that the O.E.L.C exhibited mutagenic, cytotoxic and genotoxic effects at doses of 600 mg/kg and 1200 mg/kg when compared to the negative control (p < 0.05). The results of the evaluation of the antimutagenic, anticytotoxic and antigenotoxic activities showed that O.E.L.C did not exhibited antimutagenic, anticytotoxic and antigenotoxic effects (p > 0.05) for any of the administered doses when compared to the positive control. It is concluded that the experimental conditions of the present research the essential oil of Lantana camara (O.E.L. C) exhibited angiogenic activity, and mutagenic, cytotoxic and genotoxic activities. / A Lantana camara, popularmente conhecida como Cambará, é uma planta que possui diversos usos medicinais e propriedades biológicas como ação anti-inflamatória, cicatrizante de feridas, antioxidante, analgésica, antitumoral, entre outras. Apesar de possuir muitas atividades benéficas, a Lantana camara também possui efeitos maléficos, sendo considerada embriotóxica e hepatotóxica em alguns animais. Diante disto, o presente trabalho teve por objetivos a avaliar a atividade angiogênica do óleo essencial de Lantana camara (O.E.L.C) através do ensaio da membrana corioalantoide (MCA) no ovo embrionado de galinha; avaliar a atividade mutagênica e antimutagênica, citotóxica e anticitotóxica, genotóxica e antigenotóxica do O.E.L.C utilizando o ensaio do micronúcleo em medula óssea hematopoiética de camundongos e ensaio cometa em células sanguíneas de camundongos. Na avaliação da atividade angiogênica na MCA o O.E.L.C foi testado na concentração de 4,25 mg/ml. Na avaliação das atividades mutagênica, citotóxica, e genotóxica os camundongos foram individualmente tratados com doses intraperitoneais do O.E.L.C (300 mg/kg, 600 mg/kg, 1200 mg/kg). Na avaliação das atividades antimutagênica, anticitotóxica e antigenotóxica os camundongos foram tratados com doses do O.E.L.C (300 mg/kg, 600 mg/kg, 1200 mg/kg) juntamente com doxorrubicina 2 mg/kg. Os resultados da avaliação da atividade angiogênica na MCA mostram que o O.E.L.C aumentou significativamente a formação de novos vasos sanguíneos quando comparados ao controle positivo (p < 0,05). Os resultados da avaliação das atividades mutagênica e citotóxica mostraram que o O.E.L.C apresentou efeitos mutagênicos, citotóxicos e genotóxicos nas doses de 600 mg/kg e 1200 mg/kg quando comparadas ao controle negativo (p < 0,05). Os resultados da avaliação das atividades antimutagênica, anticitotóxica e antigenotóxica mostraram que o O.E.L.C não apresentou efeitos antimutagêncos, anticitotóxicos e antigenotóxicos (p > 0,05) para nenhuma das doses administradas quando comparadas ao controle positivo. Conclui-se que nas condições experimentais da presente pesquisa o óleo essencial da Lantana camara (O.E.L.C) apresentou atividades angiogênica, mutagênica, citotóxica e genotóxica.

A curcumina é um pigmento amarelo encontrado no rizoma da planta Curcuma longa Linn. que possui propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias e anticâncer. Embora tenha um grande potencial terapêutico, sua aplicação clínica é limitada pelas baixas concentrações plasmáticas obtidas após administração oral. A cisplatina é um agente quimioterápico utilizado no tratamento de vários tipos de cânceres, entretanto é inerente o desenvolvimento de sérios efeitos adversos. Seu principal mecanismo de ação em células tumorais envolve a interação direta com o DNA e formação de crosslinks, levando a célula a parada do ciclo celular e apoptose pela ativação da proteína p53. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito protetor da curcumina hidrossolúvel formulada na dispersão sólida curcumina/gelucire®50-13/aerosil® (curcumina DS) sobre a citotoxicidade, neurotoxicidade e genotoxicidade da cisplatina in vitro e in vivo, além da sua possível interferência na eficácia antitumoral da cisplatina in vitro. Os estudos in vitro foram realizados no modelo de neurotoxicidade em células PC12 e em células tumorais HepG2, derivadas de um hepatocarcinoma humano. Os experimentos in vivo foram realizados em ratos Wistar, comparando a absorção gastrintestinal e os efeitos da curcumina DS e da curcumina padrão. Nos estudos in vitro a curcumina DS reduziu a neurotoxicidade da cisplatina no ensaio de crescimento de neuritos. A expressão do gene Tp53 nas células PC12 não foi modulada pela curcumina DS. Na linhagem celular tumoral HepG2, a curcumina DS não reduziu a citotoxicidade da cisplatina. Os resultados dos experimentos in vivo mostraram que curcumina DS e a curcumina padrão reduziram significativamente a formação de micronúcleos induzidos pela cisplatina na medula óssea, porém, no ensaio do cometa, não alteraram a formação de crosslinks induzidos pela cisplatina no tecido renal. A curcumina DS e a curcumina padrão não modularam o estresse oxidativo e a expressão do gene Tp53 no tecido renal. Nossos resultados sugerem que a curcumina não interfere na atividade antitumoral da cisplatina, uma vez que a curcumina não reduziu a citotoxicidade da cisplatina nas células HepG2, e nem a expressão do gene Tp53 nas células PC12 e no tecido renal. Além disso, os resultados obtidos no ensaio do cometa mostraram que a curcumina não reduziu a formação de crosslinks platina-DNA, o principal mecanismo de citotoxicidade da cisplatina. A formulação da curcumina em dispersão sólida aumentou significativamente a sua biodisponibilidade, além de não apresentar redução dos efeitos antimutagênicos em relação à curcumina padrão. Os efeitos protetores da curcumina DS, como a redução da neurotoxicidade e mutagenicidade induzida pela cisplatina, poderia trazer benefícios à quimioterapia, possibilitando uma terapia mais eficaz e melhor qualidade de vida aos pacientes. Os resultados sugerem que os efeitos protetores da curcumina poderiam ser seletivos às células sadias, não reduzindo os efeitos da cisplatina em células tumorais. / Curcumin is a yellow pigment derived from the rhizome of Curcuma longa Linn. Its pharmacological effects include antioxidant, anti-inflammatory, and anti-cancer properties. Although curcumin possesses great therapeutic potential, its low oral bioavailability limits therapeutic application. Cisplatin is a chemotherapeutic drug with activity against a wide variety of tumors; however, it has notorious side effects. Its main mechanism of action in tumor cells involves direct interaction with DNA and formation of crosslinks, leading the cells to a cycle arrest and apoptosis through activation of p53. This study\'s aim was to evaluate the protective effects of watersoluble curcumin, which was formulated in a solid dispersion consisting of curcumin/gelucire®50-13/aerosil® (curcumin DS), on the cytotoxicity, neurotoxicity, and genotoxicity of cisplatin in vitro and in vivo beyond its possible interference in the antitumor efficacy of cisplatin in vitro. In vitro studies were performed on the model of neurotoxicity in PC12 cells and in HepG2 tumor cells derived from a human hepatocarcinoma. The in vivo experiments were performed on Wistar rats, comparing gastrointestinal absorption and the effects of curcumin DS and standard curcumin. In the in vitro studies, curcumin DS reduced neurotoxicity of cisplatin in the neurite outgrowth assay. Tp53 gene expression in PC12 cells was not modulated by curcumin DS. In the tumor cell line HepG2, curcumin DS did not reduce the cytotoxicity of cisplatin. Results of in vivo experiments showed that curcumin DS and standard curcumin significantly reduced micronucleus formation induced by cisplatin in bone marrow. However, on the comet assay, it did not affect the formation of crosslinks induced by cisplatin on renal tissue. Curcumin DS and standard curcumin did not modulate oxidative stress or the expression of the Tp53 gene in renal tissue. Our results suggest that curcumin DS does not compromise the antitumor activity of cisplatin, since curcumin did not reduced the cytotoxicity of cisplatin in HepG2 cells nor Tp53 gene expression in PC12 cells or in renal tissue. Furthermore, the results of the comet assay suggest that curcumin did not reduce the formation of platinum-DNA crosslinks, the major mechanism of cisplatin cytotoxicity. The formulation of curcumin in solid dispersion significantly increased its bioavailability and did not reduced its antimutagenic effect compared to standard curcumin. The protective effects of curcumin DS, such as reducing neurotoxicity and mutagenicity induced by cisplatin, could provide benefits to chemotherapy, including more effective therapy and improved quality of life. The findings suggest that the protective effects of curcumin could be selective to healthy cells without compromising the effects of cisplatin in tumor cells.

A irradiação de alimentos já foi aprovada e vem sendo utilizada em diversos países para aplicações e finalidades de uma ampla variedade de alimentos. Seus benefícios abrangem o aumento do prazo de validade, melhoria de higiene dos alimentos e consequentemente menor deterioração e perdas se comparado com alimentos que não sofrem radiação. Além disto, os alimentos após irradiados apresentam-se seguros em termos nutritivos e de redução de patógenos. Porém, alimentos que contem de médio a alto teor de gordura induzem a formação de um subproduto denominado 2-Alcilciclobutanonas, a qual sabemos que parte destes compostos ingeridos são normalmente excretados através das fezes, porém parte permanece depositada nos tecidos adiposos. Trabalhos realizados com estes compostos anteriormente apresentaram efeitos citotóxicos e genotóxicos em células de cólon. Desta forma, o objetivo do presente trabalho foi investigar os efeitos citotóxicos realizados em testes de viabilidade celular, testes genotóxicos em micronúcleo e testes mutagênicos com a técnica de Ames em condições experimentais in vitro dos compostos 2-dDCB e 2-tDCB. Para isso, o fígado foi o órgão de escolha para avaliar os possíveis efeitos destes compostos, uma vez que este órgão é geralmente acometido pelo acumulo de gordura. Foram utilizadas três linhagens hepáticas: HepG2, BRL3A e HTC. A análise dos resultados da viabilidade celular, revelou que as 2-dDCBs apresentaram discreto efeito citotóxico na concentração de 500 &mu;M e as 2-tDCBs apresentaram danos baixos a partir de 100 &mu;M e maiores em 500 &mu;M, mostrando ser dose dependentes. Nos resultados de mutagenicidade, os compostos não apresentaram quaisquer efeitos mutagênicos nas concentrações e doses utilizadas, detectados pelo teste de Ames. Por fim, o ensaio de micronúcleo correspondeu às expectativas não demonstrando efeitos genotóxicos na linhagem, doses e tempos testados. Com base nos resultados atingidos, as 2 ACBs podem ser consumidas com relativa segurança, sob a ótica de possíveis efeitos mutagênicos e genotóxicos nas concentrações avaliadas. / Food irradiation has already been approved and has been used in several countries for applications and purposes of a wide variety of foods. Its benefits include increased shelf life, improved food hygiene and consequently less deterioration and losses compared to foods that do not undergo into radiation. In addition, food after irradiation is safe in terms of nutrients and pathogen reduction. However, foods that contain medium to high fat levels, induce the formation of a by-product called 2-Alkylcyclobutanones, which we know that part of these ingested compounds are normally excreted through the feces, but part remains deposited in the adipose tissues. Work performed with these compounds previously showed cytotoxic and genotoxic effects on colon cells. Thus, the objective of the present work was to investigate the cytotoxic effects performed in cell viability tests, genotoxic tests in micronucleus and mutagenic tests with Ames technique under in vitro experimental conditions of 2-dDCB and 2-tDCB compounds. Hence, the liver was the chosen organ to evaluate the possible effects of these compounds, since this organ is usually affected by accumulation of fat. Three hepatic cell lines were used: HepG2, BRL3A and HTC. Analysis of the cell viability results revealed that the 2-dDCBs presented a discrete cytotoxic effect at the concentration of 500 &mu;M and the 2-tDCBs presented low damages from 100 &mu;M and larger at 500 &mu;M, showing to be dose dependent. In the mutagenicity results, the compounds did not show any mutagenic effects at the concentrations and doses used, detected by the Ames test. Finally, the micronucleus test corresponded to expectations demonstrating no genotoxic effects in the cell line, doses and times tested. Based on the results achieved, the 2 ACBs can be consumed with relative safety, from the perspective of possible mutagenic and genotoxic effects in the evaluated concentrations.

A homocistinúria é um erro inato do metabolismo dos aminoácidos causado principalmente pela deficiência na atividade da enzima cistationina-β-sintase (CBS), resultando em acúmulo de homocisteína (Hcy) e metionina nos fluidos biológicos. As manifestações clínicas incluem retardo mental, ectopia lentis, episódios tromboembólicos e osteoporose. Estudos realizados em modelos animais demonstram um possível papel do estresse oxidativo na fisiopatologia da homocistinúria. Mais recentemente, foram demonstradas alterações em alguns parâmetros de estresse oxidativo em pacientes homocistinúricos. Nesse trabalho, essas investigações foram ampliadas, no intuito de melhor entender os mecanismos fisiopatológicos e a terapêutica da homocistinúria por deficiência de CBS. Dessa forma, o objetivo principal desse trabalho foi avaliar os perfis lipídico, inflamatório e oxidativo, bem como a atividade das enzimas paraoxonase (PON1) e butirilcolinesterase (BuChE) em pacientes homocistinúricos tratados (dieta hipoproteica suplementada com vitamina B6, ácido fólico, betaína e vitamina B12) e não tratados, em comparação com indivíduos saudáveis, e adicionalmente avaliar a indução in vitro de mutagenicidade causada pela Hcy, através do teste de micronúcleos em leucócitos, e ainda avaliar o efeito in vitro do antioxidante N-acetil-L-cisteína na redução do dano ao DNA causado pelas altas concentrações de Hcy. No que se refere ao perfil sérico, foi verificada uma redução nos níveis de colesterol HDL, apolipoproteína A, bem como na atividade da enzima (PON1) em pacientes homocistinúricos tratados e não tratados. A atividade da enzima BuChE e os níveis de interleucina 6 (IL-6) estavam aumentados apenas nos pacientes não tratados. Correlações significativas positivas foram encontradas nos dois grupos de pacientes estudados entre a atividade da PON1 e o conteúdo de sulfidrilas; entre a atividade da PON1 e os níveis de vitamina B12; entre os níveis de HDL e apolipoproteína A1; entre os níveis de apolipoproteína A1 e vitamina B12; e entre os níveis de IL-6 e os níveis de carbonilas. Correlação significativa negativa foi encontrada entre os níveis de ácido fólico e de homocisteína total (tHcy). Em um segundo momento foram avaliados parâmetros de estresse oxidativo e níveis de nitritos na urina dos pacientes. Foram demonstrados níveis aumentados de 15-F2t-isoprostanos, di-tirosina e nitritos na urina de pacientes homocistinúricos tratados. Os níveis de 15-F2t-isoprostanos apresentaram uma correlação significativa positiva com os níveis de tHcy e os níveis de di-tirosina apresentaram correlação significativa negativa com os níveis de sulfidrilas. A atividade da enzima catalase encontrou-se aumentada no sangue de pacientes homocistinúricos tratados. Finalmente, demonstrou-se em estudo in vitro que a Hcy causa um aumento no dano cromossômico, avaliado pelo método de micronúcleos. Além disso, foi observado um efeito in vitro do antioxidante N-acetil-L-cisteína na redução do dano ao DNA causado pelas altas concentrações de Hcy. Avaliados em conjunto, nossos resultados indicam que o estresse oxidativo, acompanhado por alterações nos níveis urinários de nitritos, e por alterações nos perfis inflamatório e lipídico são fatores que possivelmente contribuam para o dano vascular encontrado na homocistinúria. Esses eventos parecem estar interconectados, e parecem ser decorrentes dos altos níveis de tHcy encontrados no sangue dos pacientes. Novas abordagens terapêuticas, além das atualmente utilizadas que incluem ácido fólico e vitamina B12, como o uso de antioxidantes, poderiam ser alternativas para atingir melhores resultados no tratamento de pacientes homocistinúricos. / Homocystinuria is an inborn error of metabolism of amino acids primarily caused by deficiency in the activity of cystathionine-β-synthase (CBS), resulting in accumulation of homocysteine (Hcy) and methionine in biological fluids. Clinical manifestations include mental retardation, ectopia lentis, thromboembolic events and osteoporosis. Studies in animal models show a possible role of oxidative stress in the pathophysiology of homocystinuria. More recently, changes in some parameters of oxidative stress have been demonstrated in homocistinuric patients. In this work, we expanded these investigations, in order to understand the mechanisms that lead to the development of clinical manifestations of disease and the therapeutic for homocystinuria due CBS deficiency. Thus, the main objective of this study was to evaluate the lipid, inflammatory and oxidative profiles as well as the activity of paraoxonase (PON1) and butyrylcholinesterase (BuChE) in treated homocistinuric patients (hypoproteic diet supplemented with vitamin B6, folic acid, betaine and vitamin B12) and untreated patients compared with healthy individuals, and to evaluate the in vitro induction of mutagenicity caused by Hcy, through the micronucleus test in leukocytes, and further, to evaluate the in vitro effect of N-acetyl-L-cysteine in reducing DNA damage caused by high concentrations of Hcy. With regard to the serum profile, was observed a reduction in HDL cholesterol, apolipoprotein A, and in enzyme activity (PON1) in both group of CBS-deficient patients. The activity of butyrylcholinesterase and levels of interleukin 6 (IL-6) were increased only in untreated patients. Positive significant correlations were found in both patients groups between PON1 activity and the content of sulfhydryl; between PON1 activity and vitamin B12 levels; between the levels of HDL and apolipoprotein A1; between the levels of apolipoprotein A1 and B12; and between IL-6 levels and levels of carbonyls. Negative significant correlation was found between folic acid levels and total homocysteine (tHcy). In a second moment were evaluated parameters of oxidative stress and the nitrite levels in the urine of patients. Increased levels of 15-F2t-isoprostanes, di-tyrosine and nitrite were demonstrated in the urine of treated homocistinuric patients. The 15-F2t-isoprostanes levels showed a significant positive correlation with tHcy levels; and di-tyrosine levels showed a significant negative correlation with the sulfhydryl levels. The catalase activity was found increased in the blood of treated homocistinuric patients. Finally, it was shown the in vitro effect of Hcy on increase of chromosomal damage assessed by micronuclei method. Furthermore, it was observed the in vitro effect of N-acetyl-L-cysteine antioxidant in reducing DNA damage caused by high concentrations of Hcy. Evaluated together, our results indicate that oxidative stress accompanied by changes in urinary nitrite levels and changes in inflammatory and lipid profiles are factors possibly contributing to vascular damage found in homocystinuria. These events appear to be interconnected, and appear to be due to the high tHcy levels found in the blood of patients. New therapeutic approaches in addition to the currently used which include folic acid and vitamin B12, as the use of antioxidants, could be alternatives to achieve best results in the treatment of homocistinuric patients. Furthermore, an early diagnosis and, consequently, an early treatment, could avoid that the patients remain for a long time subjected to exposure of high concentrations of tHcy.

A Colômbia tem uma das maiores reservas de carvão do mundo, sendo o quinto exportador mundial do carvão de tipo térmico. Nos processos de extração de carvão a céu aberto, uma grande quantidade de material particulado (PM), constituído por partículas de pó, hidrocarbonetos e metais pesados, é liberada à atmosfera, onde pode formar misturas complexas e constituir um risco significativo para a saúde, tanto dos indivíduos com exposição ocupacional quanto dos que habitam em proximidade das áreas de mineração. No entanto, em populações humanas, a grande maioria dos dados sobre os efeitos da exposição ao carvão tem sido gerada a partir de estudos em populações com exposição ocupacional, o que faz com que os possíveis efeitos sobre as populações com exposição ambiental sejam desconhecidos. Considerando a pouca informação sobre o tipo de efeitos gerados pela exposição ambiental à resíduos de mineração de carvão, e com a finalidade de melhorar o conhecimento sobre o possível mecanismo do dano em diferentes tecidos, este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos genotóxicos e citotóxicos em populações de indivíduos com exposição ambiental à misturas complexas geradas nos sistemas de mineração de carvão a céu aberto do Departamento de Guajira, Colômbia. Para isso, foram coletados sangue e mucosa oral de 98 indivíduos residentes nas proximidades de uma mina de carvão a céu aberto e de 41 indivíduos não expostos ao carvão. O teste de CBMN-Cyt em linfócitos e BMNCyt em mucosa oral, o ensaio cometa alcalino convencional e modificado com endonucleases (FPG, ENDO III), imunocoração com anticorpos anti-centrômero (CREST), bem como o conteúdo de elementos traço e metais pesados foram avaliados nas amostras. Adicionalmente, as concentrações de PM10 e PM2.5 nas áreas de coleta nas proximidades da mina foram estabelecidas e avaliadas para a presença de metais e matéria orgânica. A análise dos biomarcadores do CBMN-Cyt em linfócitos evidenciou um aumento significativo na frequência de micronúcleos em células binucleadas (MNBN) e células mononucleadas (MNMONO) dos indivíduos com proximidade residencial às áreas de exploração de carvão a céu aberto. As análises sobre a origem dos MN demostraram um aumento significativo de 45.27% na frequência de CREST+ MN nos indivíduos expostos, sugerindo a exposição à substâncias com potencial aneugênico. Particularmente, as frequências de MNBN e a indução de CREST+ MN em residentes expostos demonstraram uma correlação altamente significativa com os níveis de PM2.5, mas não com as concentrações de PM10. A análise geoespacial demonstrou que esta correlação é proporcional à distância entre as populações e as zonas de mineração e que o relevo e a velocidade do vento estão envolvidos na distribuição do PM e o nível de efeito observado em algumas áreas avaliadas. A composição química do PM2.5, avaliada pela técnica de PIXE, evidenciou a presença de elementos traço altamente enriquecidos como o S, e metais pesados moderadamente enriquecidos como Cr, Cu e Zn. O PM2.5 das regiões de mineração também apresentou altas concentrações de matéria orgânica (EOM) com características apolares. Da mesma forma que nos linfócitos, a mucosa oral também mostrou um aumento significativo na frequência de todos os parâmetros do BMNCyt, enquanto que a %Tail DNA, avaliadas no ensaio Cometa convencional e modificado com o uso de endonucleases (FPG e ENDO III), também mostrou um aumento significativo em indivíduos com proximidade residencial às minas de exploração de carvão à céu aberto. Entre os indivíduos expostos, foram detectadas elevadas concentrações sanguíneas de Cr, Ni, Mn e Br quando comparados com os indivíduos não expostos. Os valores de %Tail DNA no ensaio Cometa convencional foram altamente correlacionados com as concentrações de Al, Mn e Br no sangue, enquanto que o %Tail DNA no ensaio Cometa modificado com FPG foi relacionado com as concentrações de Mn. Assim, o dano ao DNA observado nos indivíduos com exposição ambiental à resíduos de mineração de carvão pode ser consequência do dano oxidativo resultante da exposição aos resíduos do carvão, especialmente metais e matéria orgânica contidos na fração fina do material particulado. / Colombia has one of the world's largest coal reserves being the fifth biggest thermal coal exporter world-wide. In opencast coal mining extraction, large amounts of particulate matter (PM) constituted by dust particles, hydrocarbons and heavy metals are released into the atmosphere, where they can form complex mixtures, representing a significant health risks to both, occupationally exposed workers and populations living in proximity to mining areas. However, in human populations, most of the data on the effects of exposure to coal residues have been obtained from studies involving occupationally exposed populations, causing a scarcity of data examining the impact of these industrial operations in populations with environmental exposure. Considering the lack of information in regard to the effects of environmental exposure to coal mining residues, and in order to improve our knowledge on the possible damaging mechanism, the aim of this study was to evaluate the genotoxic and cytotoxic effects caused by environmental exposure to complex mixtures generated in open-cast coal mining systems located in the Department of Guajira-Colombia. We collected blood and oral mucosa cells from 98 individuals residents in proximity to an open-pit coal mine and 41 unexposed individuals. We assessed the CBMN-Cyt parameters in lymphocytes and BMNCyt parameters in oral mucosa, the alkaline and endonucleases modified comet assay (FPG, ENDO III), the immunofluorescent antikinetochore staining (CREST) and trace and heavy metals content in samples from exposed individuals. Additionally, PM10 and PM2.5 concentrations were established in sampling areas around the mining zone and metals and organic matter content determined. Analysis of CBMN-Cyt parameters revealed a significant increase in micronuclei frequency in binucleated (MNBN) and mononucleated (MNMONO) cells of individuals with residential proximity to open-pit coal mines compared to residents from non-mining areas. Results on the mechanism of micronucleus formation, showed a statistically significant increase in CREST+ MN (45.27%) in exposed individuals, suggesting the exposure to aneuploidy-inducing substances. Particularly, MNBN frequency and CREST+ MN induction were highly correlated to PM2.5 levels but not to PM10. Spatial interpolation analysis showed that this correlation is proportional to the distance between populations and mining areas. Local wind speed and topography were identified as major contributors to PM dispersion and damage distribution in some areas. Chemical composition of PM2.5 by PIXE demonstrated the presence of highly enriched elements like S and moderate enrichment of heavy metals like Cr, Cu and Zn. Mining regions had also higher concentrations of extractable organic matter (EOM) related to nonpolar and polar compounds. Like in lymphocytes, oral mucosa cells also showed a significant increase of all BMNCyt parameters, while %TailDNA in conventional and endonuclease modified comet assay (FPG and ENDO III) also showed a significant increase in individuals living in proximity to open-pit coal mining areas. Exposed individuals showed higher concentrations of Cr, Ni, Mn and Br in blood compared to unexposed controls. %Tail DNA in conventional Comet assay was highly correlated with Al, Mn and Br concentrations, while %Tail DNA in the FPG Comet assay was correlated to Mn concentrations. These results suggest that DNA damage detected in environmentally exposed individuals may be caused by oxidative damage caused by exposure to coal mining residues, particularly metals and organic matter contented in the fine fraction of the particulate matter.