Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-22T20:18:29Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) RAQUEL BALESTRI HELENO FERREIRA ate AGO 2021.pdf: 1629744 bytes, checksum: 7d6690d50c0536d3f7683a73db84827d (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-22T20:18:45Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) RAQUEL BALESTRI HELENO FERREIRA ate AGO 2021.pdf: 1629744 bytes, checksum: 7d6690d50c0536d3f7683a73db84827d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-22T20:18:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) RAQUEL BALESTRI HELENO FERREIRA ate AGO 2021.pdf: 1629744 bytes, checksum: 7d6690d50c0536d3f7683a73db84827d (MD5) Previous issue date: 2016 / A linagliptina (LGT) é um fármaco inibidor da DPP-4, da classe das gliptinas, utilizado para o controle glicêmico de diabetes mellitus tipo 2. Levando-se em conta que os fármacos utilizados no processo de produção das formulações farmacêuticas não são considerados totalmente puros, alguns Guias Regulatórios (ICH) descrevem a necessidade da quantificação do fármaco e suas impurezas de síntese. Diante disso, o objetivo do estudo é o desenvolvimento de um método por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para quantificação do fármaco e de suas três principais impurezas de síntese e o estudo de segurança biológica destas substâncias. O desenvolvimento e a validação do método para LGT e das três impurezas foram realizados por CLAE acoplada a um detector de arranjo de diodo (DAD), utilizando coluna C8 (5 μm - 4,6x100 mm), fase móvel eluída em modo gradiente, constituída de uma mistura de ácido fórmico 0,1% pH 3,5 e acetonitrila (ACN) eluída com uma rampa crescente de 10% na proporção de ACN de (0) zero ao 4 min (30% para 70%) e decrescente de 10% na proporção de ACN de 5 a 8 min (70% para 30%), vazão de 0,6 mL/min, volume de injeção de 20 μL e temperatura do forno de 30°C. Os comprimentos de onda de detecção utilizados foram 294, 278, 268 e 280 nm para LGT, impureza 1, 2 e 3, respectivamente. O método apresentou-se seletivo e específico para a LGT e as impurezas, pois não houve interferência dos produtos de degradação por Ultravioleta A, hidrólise básica (hidróxido de sódio 1,0 mol/L) e ácida (ácido clorídrico 1,0 mol/L), peróxido hidrogênio 30%, temperatura 60 °C e hidrólise básica e ácida em condições térmicas à 80 °C e dos excipientes na quantificação do fármaco. A resposta foi linear na faixa de 2,41-144,0 μg/mL (r = 0,9996) para a LGT e na faixa de 0,06-3,6 μg/mL para as impurezas testadas (r = 0,9963, 0,9994 e 0,9991 para impureza 1, 2 e 3, respectivamente). O método demonstrou exatidão, com teores de recuperação de 99,79, 93,12, 92,92 e 93,99% para a LGT e impureza 1, 2 e 3, respectivamente. A precisão intra e inter-dia foi satisfatória (RSD 1,36, 4,14, 3,50 e 4,08% para a LGT e impureza 1, 2 e 3, respectivamente) e a robustez não apresentou diferenças significativas com pequenas alterações nas condições analíticas (pH, fase móvel, temperatura, fluxo e detector). A cinética de degradação em condição alcalina associada a temperatura de (80 ºC), apresentou resultados de primeira ordem. A avaliação da segurança biológica foi realizada por meio da citotoxicidade, mutagenicidade e genotoxicidade através dos testes de viabilidade celular, micronúcleo e cometa, respectivamente. Nos testes de segurança biológica a LGT apresentou-se apenas citotóxica na concentração 10 vezes superior a concentração plasmática máxima, enquanto as impurezas 1 e 3 apresentaram-se citotóxica, mutagênica e genotóxica em uma concentração equivalente a 10% concentração plasmática máxima do fármaco e a impureza 2 evidenciou sua citotoxicidade e genotoxicidade na concentração equivalente a 10% da concentração plasmática máxima do fármaco. De acordo com os resultados obtidos, pode-se observar que o método proposto foi indicativo de estabilidade por CLAE para LGT e ainda demonstrou-se adequado para análise quantitativa das impurezas de síntese do fármaco. Além disso, evidenciou-se que a LGT e as impurezas de síntese estão em conformidade com os testes de segurança biológica empregados, desde que utilizadas nas concentrações adequadas. / Linagliptin (LGT) is an inhibitor of DPP4 used for glycemic control of type 2 mellitus diabetes. Since the drugs used in the production process of the pharmaceutical formulations are not considered totally pure, the Regulatory Guides describing the need of the drug quantification and impurities potentials. Therefore, the aim of this study was to develop a method by highperformance liquid chromatography to quantify the drug and three potential synthetic impurities and biological safety studies. The development and validation of the method for LGT and the three impurities were carried out by HPLC coupled to a photodiode array detector. The chromatographic separation was performed in a RP8 column (150 x 4.6 mm, 5 μm), at 30°C. The separation was performed by means of a linear gradient elution (eluent A: formic acid 0.1% pH 3.5; eluent B: acetonitrile). The gradient obeys the following sequence: 3070% of B (0 - 4 minutes) and 7030 of B (4,01 - 8 minutes) at a flowrate of 0.6 mL min1 and run time of 10 minutes. The injection volume was 20 μL and detection at 294, 278, 268 e 280 nm for LGT, impurity 1, 2 and 3, respectively. The method showed selectivity and specific for the LGT and synthetic impurities, therefore no interference of degradation products (UV-A, basic hydrolysis (sodium hydroxide 1.0 mol L1) and acid (hydrochloric acid 1.0 mol L1), peroxide (30%), temperature (60 ° C) and acidic and basic hydrolysis under thermal conditions (80° C)) and the excipients in the quantification of the drug. The response was linear from 2.41 to 144.0 μg mL1 (r = 0.9996) for the LGT and in the range of 0.06 to 3.6 μg mL1 (r = 0.9963, 0.9994 and 0.9991 for impurity 1, 2 and 3, respectively ). The method showed accuracy, with recovery levels of 99.79, 93.12, 92.92 and 93.99% for LGT and impurity 1, 2 and 3, respectively. The intra and inter-day precision was suitable (RSD 1.36, 4.14, 3.50 and 4.08% for LGT and impurity 1, 2 and 3, respectively) and the robustness showed no significant differences with small changes in the analytical conditions (pH of the mobile phase, temperature, flow-rate and detector). The kinetics of degradation in alkaline conditions associated with temperature (80° C), showed results of the first order. The evaluation of the biological was performed by cytotoxicity, mutagenicity and genotoxicity through the cell viability test, micronucleus and comet, respectively. In biological safety testing LGT had only cytotoxic activity at a concentration of 10 times the maximum plasma concentration, while the impurity 1 and 3 set out cytotoxic, mutagenic and genotoxic in a concentration equivalent to 10% maximum plasma concentration of the drug and impurity 2 showed cytotoxicity and genotoxicity in concentration equivalent to 10% of the maximum plasma concentration of the drug. According to the results, it can be seen that the proposed method by HPLC is stability-indicating and suitable for quantitative analysis of the drug and synthetic impurities. Furthermore, it was observed that the LGT and synthetic impurities are in accordance with biological safety studies, if they are used in appropriate concentration.

Submitted by Ricardo Cedraz Duque Moliterno (ricardo.moliterno@uefs.br) on 2015-08-07T01:02:49Z No. of bitstreams: 1 DISSERTA??O- LEONARDO DA CUNHA MENEZES SOUZA.pdf: 2029455 bytes, checksum: 2374a0c5996ead5ddad034150d2e36b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-08-07T01:02:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTA??O- LEONARDO DA CUNHA MENEZES SOUZA.pdf: 2029455 bytes, checksum: 2374a0c5996ead5ddad034150d2e36b7 (MD5) Previous issue date: 2013-09-30 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado da Bahia - FAPEB / The use of anabolic androgenic steroids (AAS) has grown among practitioners of recreational bodybuilding, with significant contributions of "Designer Steroids" (DS), EAA designed aiming muscle hypertrophy in healthy subjects. The abusive use of AAS in general is associated with adverse effects, one of the most worrisome is cancer development. Given that cancer is a genetic disease resulting from changes in genes critical in maintaining genomic stability and in the control of proliferation and differentiation, biomarkers able to identify these changes can take predictive value and contribute to reducing the high rates of morbidity and mortality by this disease. The aim of this study was to evaluate the effectiveness of the Cytokinesis Block Micronucleus Test (CBMN) in human lymphocytes in identifying risk groups for cancer development in users of AAS. Was collected 5ml of blood from 15 AAS users bodybuilders (G1), 20 nonusers bodybuilders (G2) and 20 nonusers sedentary (G3). Lymphocytes were cultured with blocking of cytokinesis and subsequent processing for making slides. MN analysis was performed on a minimum of 1000 binucleated lymphocytes. The occurrence of MN was significantly higher (p <0.05) in individuals of G1 compared to G2 and G3. The results indicate the sensitivity of CBMN in human lymphocytes in the identification of chromosomal damage in consequence of AAS using, however, further studies are needed to determine their potential to predict the cancer risk in users of AAS. / O uso de esteroides anabolizantes androg?nicos (EAA) tem crescido entre praticantes recreativos de muscula??o, com contribui??es significativas dos Designer Steroids (DS), EAA projetados para fins de hipertrofia muscular em indiv?duos saud?veis. O uso abusivo de EAA em geral est? associado a efeitos adversos, sendo um dos mais preocupantes o desenvolvimento de c?ncer. Tendo em vista que o c?ncer ? uma doen?a gen?tica resultante de altera??es em genes cr?ticos na manuten??o da estabilidade gen?mica e do controle da prolifera??o e diferencia??o, biomarcadores capazes de identificar estas altera??es podem assumir valor preditivo e contribuir para diminui??o das altas taxas de morbidade e mortalidade por esta doen?a. O objetivo deste estudo foi avaliar a efic?cia do Teste de Micron?cleo com Bloqueio da Citocinese (MNCtB) em linf?citos humanos na identifica??o de grupos de risco para o desenvolvimento de c?ncer em usu?rios de EAA. Foram coletados 5ml de sangue de 15 usu?rios de EAA praticantes de muscula??o (Grupo I), 20 n?o usu?rios praticantes de muscula??o (Grupo II) e 20 n?o usu?rios sedent?rios (Grupo III). Foi realizada cultura de linf?citos com o bloqueio da citocinese e posterior processamento para confec??o de l?minas. A an?lise de MN foi realizada em um m?nimo de 1000 linf?citos binucleados. A ocorr?ncia de MN foi significativamente maior (p<0,05) nos indiv?duos do Grupo I comparados aos do Grupo II e Grupo III. Os resultados apontam para a sensibilidade do MNCtB na identifica??o de danos cromoss?micos decorrentes do uso de EAA. Estudos subsequentes para determinar seu potencial preditivo para o risco de c?ncer em usu?rios de EAA s?o necess?rios.

Submitted by Verena Bastos (verena@uefs.br) on 2015-10-08T12:18:43Z No. of bitstreams: 1 Jeanderson_Disserta??o_vers?o final.pdf: 369468 bytes, checksum: 851a8492d73fc0106bfe7784166fdf98 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-08T12:18:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jeanderson_Disserta??o_vers?o final.pdf: 369468 bytes, checksum: 851a8492d73fc0106bfe7784166fdf98 (MD5) Previous issue date: 2013-03-25 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Exposure to genotoxic agents induces changes in the DNA molecule to commit that genes involved with the repair mechanisms and the control of cell proliferation and differentiation pathways or genes associated with apoptosis can lead to cancer development. Among the many chemicals that have been identified as mutagenic action, include the Androgenic Steroids (AAS), hormones widely used in the search for improved physical performance and increased muscle mass. Objective: In this context, the aim of the development of this study was to evaluate the potential of androgenic anabolic steroid nandrolone decanoate, testosterone propionate and testosterone cypionate to induce chromosome damage, apoptosis and necrosis, using the micronucleus test in exfoliated cells from the oral mucosa of users of AAS with a view to its application as a tool in cancer prevention. Method: The study sample consisted of 55 volunteers, male, divided into two (02) groups, matched for age: 25 subjects (G1) users of nandrolone decanoate, testosterone propionate and testosterone cypionate (alone or simultaneously ) and 30 subjects in the control group (G2). The collection methodology and cytological analysis followed the protocol of Tolbert et al. (1992) and Thomas et al. (2009), which includes, in addition to micronuclei, the computation of degenerative nuclear changes indicative of apoptosis (cariorr?xis, condensed chromatin and pyknosis) and necrosis (karyolysis, cariorr?xis, condensed chromatin and pyknosis). Statistical analysis of the endpoints analyzed (micronucleus, cariorr?xis, condensed chromatin, karyolysis, pyknosis and broken eggs) was performed using the conditional test to compare proportions in situations of rare events. Results: Statistical analysis revealed no significant difference in the occurrence of micronuclei, karyolysis and broken eggs between groups. The occurrence of apoptosis was significantly greater in cells from control individuals. Conclusion: The results show inhibition of apoptosis induced by EAA, suggesting that the described association between the use of these substances and the carcinogenic process can be permeated by this mechanism. / A exposi??o a agentes genot?xicos induz altera??es na mol?cula do DNA que ao comprometerem genes envolvidos com os mecanismos de reparo e com o controle da prolifera??o e diferencia??o celular ou genes associados ?s vias de apoptose, podem levar ao desenvolvimento de c?ncer. Entre os muitos agentes qu?micos que t?m sido identificados como de a??o mutag?nica, incluem-se os Ester?ides Anabolizantes Androg?nicos (EAA), horm?nios amplamente utilizados na busca da melhoria do desempenho f?sico e aumento da massa muscular. Objetivo: Neste contexto, objetivou-se com o desenvolvimento do presente estudo, avaliar o potencial dos ester?ides anabolizantes androg?nicos decanoato de nandrolona, propionato de testosterona e cipionato de testosterona em induzir danos cromoss?micos, apoptose e necrose, atrav?s do uso do Teste de Micron?cleo em c?lulas esfoliadas da mucosa oral de usu?rios de EAA com vista ? sua aplica??o como ferramenta na preven??o do c?ncer. M?todo: A amostra do estudo foi composta por 55 volunt?rios, do sexo masculino, distribu?dos em dois (02) grupos, pareados por idade: 25 indiv?duos (G1) usu?rios de decanoato de nandrolona, propionato de testosterona e cipionato de testosterona (isoladamente ou simultaneamente) e 30 indiv?duos no grupo controle (G2). A metodologia de coleta e an?lise citol?gica seguiu o protocolo de Tolbert et al. (1992) e Thomas et al. (2009), que inclui, al?m de micron?cleos, o computo de altera??es nucleares degenerativas indicadoras de apoptose (cariorr?xis, cromatina condensada e picnose) e necrose (cari?lise, cariorr?xis, cromatina condensada e picnose). A an?lise estat?stica dos endpoints analisados (micron?cleo, cariorr?xis, cromatina condensada, cari?lise, picnose e broken eggs) foi realizada com o uso do teste condicional para compara??o de propor??es em situa??es de eventos raros. Resultados: A an?lise estat?stica revelou que n?o houve diferen?a significativa na ocorr?ncia de micron?cleo, cari?lise e broken eggs entre os grupos. A ocorr?ncia de apoptose foi, significativamente, maior em c?lulas dos indiv?duos do grupo controle. Conclus?o: Os resultados obtidos mostram inibi??o da apoptose induzida pelo uso de EAA, sugerindo que a associa??o descrita entre uso destas subst?ncias e o processo carcinog?nico possa ser permeada por este mecanismo.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-03-27T13:23:50Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AlteracoesExpressaoGenica.pdf: 1521162 bytes, checksum: e7fdda9133d3f1502a75c0fa557a3a10 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-03-29T16:28:04Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AlteracoesExpressaoGenica.pdf: 1521162 bytes, checksum: e7fdda9133d3f1502a75c0fa557a3a10 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-29T16:28:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AlteracoesExpressaoGenica.pdf: 1521162 bytes, checksum: e7fdda9133d3f1502a75c0fa557a3a10 (MD5) Previous issue date: 2016-12-02 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As formas orgânicas e inorgânicas de mercúrio vem sendo apontadas como importantes contaminantes em várias regiões do mundo devido suas características toxicológicas. Diversos estudos já relataram que a intoxicação por metilmercúrio (MeHg) e cloreto de mercúrio (HgCl2) podem ocasionar danos ao SNC. Acredita-se que as células da glia são reconhecidamente importantes para os mecanismos de proteção celular frente aos danos ocasionados pelo mercúrio. No entanto, pouco se sabe a respeito da influência deste metal no genoma dessas células. Desta forma, neste trabalho nós realizamos um mapeamento completo da rede gênica de células da glia humana, da linhagem U87 após exposição mercurial, com o intuito de identificar as possíveis alterações genéticas ocasionadas pelas formas orgânicas e inorgânicas do mercúrio. Nossos resultados demonstraram que as células U87 são mais sensíveis a exposição ao MeHg quando comparado com a exposição ao HgCl2. Após análise de curvas de concentração, foi identificado uma LC50 de 28.8μM e 10,68μM após 4h e 24h de exposição a MeHg e uma LC50 de 92.25μM e 62.75μM após o mesmo tempo de exposição a HgCl2. Em relação ao conteúdo gênico, nossos resultados demonstraram que ambos os metais ocasionaram alteração na dosagem gênica, sendo a exposição ao MeHg altamente influenciada pela concentração e tempo de exposição, enquanto a exposição a HgCl2 parece ser fortemente influenciada pelo tempo de exposição. No total, foram identificados 205 genes com diminuição na dosagem gênica e 188 genes com expressão aumentada (Fold change > 5) após 4h de exposição a 5μM de MeHg e 204 genes down-regulados e 180 up-regulados após exposição na mesma concentração de HgCl2. As análises após 24h de exposição identificaram alteração em 90 genes down-regulados e 3 genes up-regulados após exposição a 1μM de MeHg, 116 genes down-regulados e 66 genes up-regulados após exposição a 10μM de MeHg. Já em relação ao HgCl2, foram identificados 98 genes down-regulados e 73 genes up-regulados nos grupos expostos a 5μM de HgCl2, 326 genes down-regulados e 66 genes up-regulados nos grupos expostos a 62,75μM de HgCl2. Nossos dados sugerem que ambas as formas mercuriais são capazes de alterar o perfil gênico das células da linhagem U87, interferindo assim em importantes vias de sinalização capazes de ocasionar alterações bioquímicas e fenotípicas nas células gliais. / The organic and inorganic forms of mercury have been pointed as important contaminants in several world regions due to its toxicological characteristics. Various studies have reported that the intoxication by methylmercury (MeHg) and mercury chloride (HgCl2) can lead to central nervous system impairment. It is generally agreed that glial cells are important for the mechanisms responsible for cellular protection against the damages caused by the mercury. However, little is known about the influence of the mercury in the cells genome. Hence, in the present study we did a complete mapping of the humam glial cells genetic network after mercury exposition with the aim to indentify the possible genetic alterations that occurred via the organic and inorganic forms of mercury. Our results demonstrated that U87 lineage cells are more sensitive to MeHg exposition when compared with HgCl2 exposition. Using an analysis of the concentration curves the LC50 was obtained from 28.8μM and 10,68μM after 4h and 24h exposition to MeHg and a LC50 of 92.25μM and 62.75μM after the same time periods exposition to HgCl2. Regarding the genic pool, our results have shown that both metal forms led to alterations in the genic dosage where the MeHg exposition was highly influenced by the concentration and time, whereas the HgCl2 exposition seemed have been strongly influenced by the exposition time. In total there were 205 indentified genes with a lower genic dosage and 188 genes with elevated expression, (Fold change > 5) after 4h exposition and 5μM of MeHg, and 204 down-regulated genes; and 180 up-regulated genes after HgCl2 exposition in the same concentration. The analysis after 24h exposition showed 90 down-regulated genes and 3 up-regulated genes after 1μM of MeHg; 116 genes were down-regulated and 66 genes were up-regulated after a 10μM exposition of MeHg. As for the HgCl2, there were 98 down-regulated genes and 73 up-regulated genes for the groups exposed to 5μM of HgCl2; 326 down-regulated genes and 66 up-regulated genes for the groups exposed to 62,75μM of HgCl2. Our dataset suggests that both mercurial forms are able to alter the cell genetic expression profile thus interfering in important signaling paths prone to gives rise to biochemical impairments and glial cells phenotypes.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-03-27T13:37:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPotencialCitotoxico.pdf: 897699 bytes, checksum: 7a4eadf723c3256711376abf0691cf05 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-03-30T12:44:24Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPotencialCitotoxico.pdf: 897699 bytes, checksum: 7a4eadf723c3256711376abf0691cf05 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-30T12:44:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPotencialCitotoxico.pdf: 897699 bytes, checksum: 7a4eadf723c3256711376abf0691cf05 (MD5) Previous issue date: 2016-08-08 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O Piroxicam é um AINE que pertence farmacologicamente a classe oxicam e é indicado para tratar diversos males como artrite reumatoide, dismenorreia primária, endometriose, entre outros. Suas propriedades anti-inflamatórias são bem conhecidas e está relacionada a sua capacidade não seletiva de inibição reversível das COXs, mas sabese pouco a respeito de sua atividade citotóxica e de sua ação no DNA. São escassos dados a respeito dos possíveis efeitos genotóxicos do Piroxicam em células de mamíferos. Esses efeitos podem ser monitorados para a prevenção e controle de algumas reações adversas e efeitos colaterais importantes. O presente estudo foi delineado para investigar os possíveis efeitos genotóxicos e citotóxicos induzidos in vitro pelo fármaco Piroxicam em linhagem de rim de macaco verde africano (VERO). A viabilidade das células expostas ao Piroxicam foi avaliada pelo ensaio MTT, a citotoxicidade do Piroxicam foi verificada pela quantificação de apoptose e necrose utilizando corantes fluorescentes (Hoechst, iodeto de propídeo e diacetato de fluoresceína) e a genotoxicidade do Piroxicam foi avaliada pelo teste do cometa. Os resultados do ensaio de viabilidade celular mostraram que o Piroxicam reduz significativamente (p<0,05) a viabilidade das células nas concentrações de 1,0 mM, 2,0 mM, 4,0 mM e 8,0 mM. Observou-se também que o Piroxicam induz morte significativa (p<0,01) por apoptose em todas concentrações testadas, tanto para tratamento de 24h quanto para 48h. No caso do ensaio cometa, não houve danos ao DNA em nenhuma concentração testada. Os dados defendem a ideia de que o Piroxicam possui atividade citotóxica, mas não apresenta potencial genotóxico nas condições testadas. / The Piroxicam is a NSAID that pharmacologically belongs to oxicam class and is indicated to treat various ailments such as rheumatoid arthritis, primary dysmenorrhea, endometriosis, among others. Its anti-inflammatory properties are well known and is related to its non-selective ability to reversible inhibition of COX, but it is known little about their cytotoxic activity and its effect on DNA. There are few data on the possible genotoxic effects of Piroxicam in mammalian cells. These effects can be monitored for the prevention and control of some adverse reactions and major side effects. This study was designed to investigate the possible genotoxic and cytotoxic induced in vitro by Piroxicam drug in kidney line of African green monkey (VERO). The viability of cells exposed to piroxicam was evaluated by MTT assay, cytotoxicity of piroxicam was verified by quantifying apoptosis and necrosis using fluorescent dyes (Hoechst, propidium iodide and fluorescein diacetate) and genotoxicity of piroxicam was evaluated by the comet assay. The results of the cell viability assay showed that Piroxicam reduces significantly (p <0.05) cell viability in the concentrations of 1.0 mM, 2.0 mM, 4.0 mM and 8.0 mM. It is also noted that piroxicam induced significant killing (p <0.01) by apoptosis in all concentrations tested, both as to 24h treatment 48h. In the case of the comet assay, there was no damage to the DNA in any concentration tested. The data support the idea that piroxicam has a cytotoxic activity, but has no genotoxic potential in the tested conditions.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-04-28Bitstream added on 2014-06-13T21:05:12Z : No. of bitstreams: 1 guerra_rc_dr_rcla.pdf: 1730338 bytes, checksum: 82956154d1c3e1fd309e6b0db1ba5492 (MD5) / Agência Nacional do Petróleo, Gás Natural e Biocombustíveis (ANP) / A atividade de recuperação do petróleo tem como característica a extração de uma parcela de água misturada ao óleo. Esta água deve ser separada do petróleo antes do processamento pelas refinarias, assim, originando um resíduo conhecido como Água de Produção. Os sistemas projetados para o tratamento deste efluente empregam diferentes métodos, visando atingir maior eficiência na separação dos contaminantes da água. Entretanto, os processos de tratamento geram subprodutos que necessitam de posterior manuseio e descarte. O presente estudo tem como objetivo avaliar o lodo produzido pela etapa de tratamento biológico da água de produção em uma estação piloto de tratamento de efluentes, instalada no Terminal Marítimo Almirante Barroso, localizado no município de São Sebastião, SP, visando a disposição final deste resíduo. Os seguintes procedimentos foram realizados para tal: classificação do resíduo de acordo com os critérios da norma técnica NBR 10.004 “Resíduos Sólidos: classificação”; avaliação da toxicidade do extrato solubilizado do lodo frente à germinação, crescimento da raiz e hipocótilo das espécies Barbarea verna Mill., Brassica. oleracea L., Cucumis. sativus L. e Eruca. sativa Mill.; avaliação da toxicidade e genotoxicidade frente ao sistema teste de Allium cepa L.; determinação da biodegradação de proporções crescentes do lodo adicionado ao solo inoculado com chorume, gerado em aterro sanitário. Os resultados indicam a classificação do lodo, de acordo com os ensaios de Lixiviação e Solubilização, como resíduo não inerte; efeito tóxico sobre a germinação de sementes nas menores concentrações de aplicação do extrato solubizado; concentração de inibição CI50 para o crescimento da raiz e hipocótilo variando entre 10,49 e 25,06% do extrato solubilizado; indução de efeitos tóxicos às células meristemáticas... / Among the oil extracted from petroleum production fields a great water volume is coproduced. This water must be eliminated prior to oil processing, the resulting wastewater is known as Produced water. Looking for greater treatment efficiency, different methods are coupled for this waste stream treatment. However, all treatment methods have its own byproducts to deal for. The present work objective is to evaluate the ultimate sludge disposal conditions from a pilot oil produced water biological treatment at Terminal Marítimo Almirante Barroso, located at São Sebastião, São Paulo State, Brazil. The following procedures wore developed in achieving this intent: NBR 10.004 waste classification procedures; germination and root/hypocotyl elongation sludge solubilization extract toxicity to Barbarea verna Mill., Brassica. oleracea L., Cucumis. sativus L. and Eruca. sativa Mill. plant species; Allium cepa L. test system toxicity and genotoxicity; sludge biodegradation at different soil application rates. Results indicate sludge waste classification as not inert; sludge solubilization extract toxic effect to seed germination at the lowest tested concentrations; root and hypocotyl elongation IC50 between 10,49 and 20,06% of sludge solubilization extract concentration; toxicity to Allium cepa meristematic cells by mitotic index reduction and cell death induction and; continuous but slow sludge biodegradation rate after microorganisms to salinity adaptation at the highest evaluated sludge application rates. These results lead to ultimate disposal need of a specific industrial landfill, with adequate environmental protection measures to harmful solubilization byproducts from this solid waste and potential toxic effects to exposed organisms.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1655231 bytes, checksum: 254c31110cb1231f1b493b372fc7eb41 (MD5) Previous issue date: 2009-06-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Lectins constitute a class of glycoproteins which are capable of binding carbohydrates selectively and reversibly, distinguishing small structural differences in complex oligosaccharides. Some studies have shown that binding of lectins to carbohydrate surface of normal and tumor cells leads to various biological effects such as, cell proliferation in normal lymphocytes and apoptosis in tumor cells. This study investigated the assessment of cytotoxic lectins of legumes Canavalia ensiformis (ConA), Canavalia brasiliensis (Conbr) and Cratylia floribunda (CFL) in normal, mouse peritoneal macrophage, and tumor cells. Initially the cytotoxic activity of the lectins was evaluated by reduction of tetrazolium (MTT) salt assay and measured the content of nucleic acids (CAN). ConA, Conbr and CFL not decreased the viability of peritoneal macrophages, but showed to be cytotoxic for J774, MCF-7, Molt-4 and HL-60 lineages. The MTT assay was more sensitive to the effects of lectins on cell viability and ConA was the most cytotoxic, followed by Conbr and CFL. The IC50 values ranged from around 10, 20 and 45μg/mL at ConA, Conbr and CFL respectively. The genotoxic potential of lectins was also evaluated using the comet assay, showing that proteins had a high rate of lesions in DNA from MCF-7, Molt-4 and H-60 cells, reaching a damage frequency exceeding 70% in concentration of 50 μg/mL for all lectins. The lectins caused morphological changes as assessed by differential staining with ethidium bromide and acridine orange, characteristic of apoptosis, and necrosis can be observed in higher lectin concentrations in tumor cell lines. In tests that evaluated the apoptosis, ConA, Conbr and CFL caused internucleossomal fragmentation, loss of membrane integrity which is characteristic of late apoptosis or necrosis, and mitochondrial depolarization. It was concluded that ConA, Conbr and CFL exhibited cytotoxicity to tumor cells causing cell death by apoptosis, therefore these proteins can be considered as a class of molecules with antitumor potential. / Lectinas constituem uma classe de glicoproteínas que ligam-se reversivelmente e seletivamente à carboidratos, sendo capazes de distinguir pequenas diferenças estruturais em oligossacarídeos complexos. Estudos têm mostrado que a ligação de lectinas a carboidratos de superfície de células normais e tumorais provoca vários efeitos biológicos, tais como, proliferação celular em linfócitos normais e apoptose em células tumorais. Neste trabalho, foi investigado a citotoxicidade das lectinas de plantas Canavalia ensiformis (ConA), Canavalia brasiliensis (Conbr) e Cratylia floribunda (CFL), sobre linhagens de células normais e tumorais. Inicialmente, a atividade citotóxica das lectinas foi avaliada pelos ensaios de redução do sal de tetrazólio (MTT) e medida do conteúdo de ácidos nucléicos (CAN). As lectinas ConA, Conbr e CFL não diminuíram a viabilidade de células normais (macrófagos peritoneais), no entanto, mostraram-se citotóxicas para as linhagens tumorais J774, MCF-7, MOLT-4 e HL-60. O ensaio de MTT foi o mais sensível aos efeitos das lectinas sobre a viabilidade celular do que o ensaio de CAN, sendo ConA a lectina mais citotóxica, seguida de Conbr e CFL. Os valores de CI50 variaram em torno de 10, 20 e 45μg/mL, para ConA, Conbr e CFL repectivamente. O potencial genotóxico das lectinas também foi avaliado usando o teste do cometa, mostrando que essas proteínas produziram alto índice de lesões do DNA nas células MCF-7, MOLT-4 e HL-60, atingindo uma freqüência de danos superior a 70% na concentração de 50μg/mL para todas as lectinas. Nessas mesmas linhagens tumorais, as lectinas também causaram alterações morfológicas, avaliadas por coloração diferencial com brometo de etídeo e laranja de acridina, características de apoptose, sendo possível observar necrose nas concentrações mais elevadas. Nos ensaios que avaliaram apoptose, as lectinas ConA, Conbr e CFL causaram fragmentação internucleossomal e perda da integridade de membrana, nas maiores concentrações testadas e despolarização mitocondrial. Concluiu-se que as lectinas ConA, Conbr e CFL são citotóxicas para as células tumorais causando morte celular por apoptose, podendo ser consideradas como uma classe de moléculas com elevado potencial antitumoral.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1623079 bytes, checksum: 1db342a9defb06c8f56de918c6d74da7 (MD5) Previous issue date: 2012-02-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir., popularly known as Jurema preta, is a plant family Mimosaceae, found mainly in the states of Piauí, Ceará, Rio Grande do Norte, Paraiba, Pernambuco, Alagoas, Sergipe and Bahia, which this species is typical of semi-arid areas of Brazil. In folk medicine, the bark of the stem is the main part of the plant used to treat various ailments such as burns and inflammations. This study aimed to investigate the cytotoxicity and genotoxicity of crude ethanolic extract (BSE) and Mimosa tenuiflora in prokaryotic and eukaryotic cells in order to encourage later, safely, its use as a source of potentially therapeutic drugs or act as pharmacological tools. To this end, we evaluated the antimicrobial activity against Gram negative and Gram positive clinical importance, investigated the potential cytotoxic utilizing the hemolytic activity and osmotic fragility (anti-hemolytic), as well as potential antioxidant and anti-oxidant in human erythrocytes, there was observed the potential mutagenic and anti-mutagenic in bacterial cells through the Ames test and also evaluated the clastogenic and aneugenic potential using the micronucleus test in peripheral blood of mice in vivo. The results showed that the EEB and the tannins of M.tenuiflora had antibacterial activity against all strains of Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli tested and this was characterized as strong with MIC ranging from 62,5 to 250 μg.mL-1. In the investigation of cytotoxic of M.tenuiflora it was observed that the extract did not induce a significant degree of hemolysis and even protected the erythrocyte membrane against hemolysis. In tests of the oxidizing activity of M.tenuiflora, this plant did not cause oxidation of hemoglobin and tests of the extract antioxidant activity behaved as a powerful antioxidant. In the investigation of genotoxicity, we observed that M.tenuiflora was not mutagenic, or in vitro tests and in vivo. Thus, the extract of M.tenuiflora has no cytotoxic or genotoxic that compromise its use as a source of potentially therapeutic drugs. / Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir., popularmente conhecida como jurema preta, é uma planta da familia Mimosaceae, encontrada principalmente nos estados do Piauí, Ceará, Rio Grande do Norte, Paraíba, Pernambuco, Alagoas, Sergipe e Bahia, sendo esta espécie típica das áreas semi-áridas do Brasil. Na medicina popular, a casca do caule é a principal parte da planta utilizada no tratamento de diversas enfermidades como infecções. O presente trabalho teve como objetivo investigar a citotoxicidade e a genotoxicidade do extrato etanólico bruto (EEB) da Mimosa tenuiflora em células procarióticas e eucarióticas com a finalidade posterior de incentivar, com segurança, a sua utilização como fonte de drogas potencialmente terapêuticas ou que atuem como ferramentas farmacológicas. Para tanto, avaliou-se a atividade antimicrobiana frente a bactérias Gram negativas e Gram positivas de importância clínica, investigou-se o potencial citotóxico utilizando como parâmetro a atividade hemolítica e a fragilidade osmótica (anti-hemolítica), assim como o potencial oxidante e antioxidante em eritrócitos humanos, observou-se o potencial mutagênico e antimutagênico em células bacterianas através do teste de Ames e também avaliou-se o potencial clastogênico e aneugênico através do teste do micronúcleo em sangue periférico de camundongos in vivo. Os resultados mostraram que o EEB e os taninos de M.tenuiflora tiveram atividade antibacteriana contra toda as linhagens de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli testadas, e esta foi caracterizada como forte com CIM variando de 62,5 a 250 μg.mL-1. Na investigação citotóxica do EEB de M.tenuiflora observamos que o extrato não induziu um grau significativo de hemólise e ainda protegeu a membrana do eritrócito contra hemólise. Nos testes de atividade oxidante o EEB de M.tenuiflora não provocou oxidação da hemoglobina e nos testes de atividade antioxidante o extrato se comportou como um poderoso agente antioxidante. Já na investigação genotóxica, observamos que o EEB da M.tenuiflora não foi mutagênico, nem nos testes in vitro nem in vivo e apresentou efeito antimutagênico em algumas linhagens ensaiadas. Sendo assim, a baixa atividade citotoxicidade e genotoxicidade de M.tenuiflora não comprometem seu uso como fonte de droga potencialmente terapêutica.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:55:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AnuskaCFSG_DISSERT.pdf: 2730570 bytes, checksum: 99e9352dede08f56c7542f82fe889d15 (MD5) Previous issue date: 2011-02-14 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The water quality of many reservoirs in the world has been reduced due to percolation of contaminants to water, which can have natural or anthropogenic origin, increasing the level of genotoxic compounds in aquatic ecosystems. This fact has contributed to the reduction of environmental quality, and commitment the health of living beings that inhabit these ecosystems, including the human population. In this backdrop of reduced water quality, is the Lucrecia dam, which is a major surface water reservoirs by volume of semi-arid region of Rio Grande do Norte, and that has shown contamination by heavy metals, cyanobacteria toxic and the natural presence of Radon. The population that use this source has been showing high rates of cancer, popularly associated with the consumption of this water, with a prevalence about three times higher compared to the whole state of Rio Grande do Norte. Based on this, the present study aimed to evaluate the mutagenic potencial of surface water from the Lucrecia dam, using the Micronucleus Test in Tradescantia pallida (Trad-MN) and in human peripheral blood lymphocytes (CBMN) assay, as well as identify the concentrations of some heavy metals in this water. Water samples were collected on a dry season and a rainy season, in two distinct points. Moreover, in order to bring a completely view about the relationship of man-health-environment in this local, through the knowledge of knowing / acting environmental from residents of Lucrecia, and the use and perceptions they have about the dam of your city, a study of Environmental Perception was carried out with local residents. The results obtained for the both micronucleus test, showed significant results for the three points analyzed. The strongest mutagenic effect was observed in the dry season for both assays. Chemical analyses detected an increase of heavy metal levels in different points and season above the maximum allowed by legislation. Regarding the study of Environmental Perception with local residents, it was observed the knowledge of the environment that the residents have, as well as the strong ties and perceptions with the dam of the city. Thus, the combination of these two aspects (the genetic toxicity tests conducted in the dam together with analysis of environmental perception with the residents of Lucrecia) allowed to draw a more complete diagnosis on the local situation / A qualidade h?drica de diversos mananciais tem sido reduzida devido ? percola??o de contaminantes, seja de origem antr?pica ou natural, aumentando consideravelmente o n?vel de compostos genot?xicos nos ecossistemas aqu?ticos. Tal fato vem contribuindo para a redu??o da qualidade ambiental, bem como para o comprometimento da sa?de dos seres vivos que habitam esses ecossistemas, inclusive o homem. Diante deste cen?rio, est? o a?ude de Lucr?cia, que ? um dos principais reservat?rios h?dricos superficiais, da regi?o Semi-?rida do Estado do RN, e que tem demonstrado contamina??o por metais pesados, cianobact?rias t?xicas e a presen?a natural do Rad?nio. Aliado a esses problemas, a popula??o deste munic?pio vem apresentando elevada incid?ncia de c?ncer associada popularmente ao consumo dessa ?gua, sendo a preval?ncia cerca de tr?s vezes maior, quando comparada a todo o Estado do Rio Grande do Norte. Visto isso, o presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial mutag?nico da ?gua superficial do a?ude de Lucr?cia por meio do teste de micron?cleo em Tradescantia pallida e em cultura de Linf?citos Humanos, assim como identificar as concentra??es de metais pesados presentes nesta ?gua. A coleta de ?gua foi realizada em dois pontos amostrais, no per?odo de seca e no per?odo chuvoso. Ademais, com o intuito de trazer um panorama mais completo da rela??o homem-sa?de-ambiente nesta localidade, atrav?s do conhecimento do saber/agir ambiental dos moradores de Lucr?cia, assim como o uso e percep??es estes t?m sobre o a?ude do seu munic?pio, foi realizado um estudo de Percep??o Ambiental com os moradores locais. Os resultados obtidos para o teste de Micron?cleo, para ambos os modelos utilizados, mostraram resultados significantes para os pontos coletados. O per?odo de seca apresentou uma m?dia maior de micron?cleos quando comparado ao per?odo chuvoso. Foi observado tamb?m concentra??es acima do permitido pela legisla??o brasileira de alguns metais pesados. Com rela??o ao estudo de Percep??o Ambiental com os moradores locais, a an?lise dos dados permitiu observar os conhecimentos sobre meio ambiente que os moradores possuem, assim como a forte liga??o e as concep??es que os mesmos possuem com o a?ude do munic?pio. Assim, a jun??o dessas duas vertentes (os testes de toxicidade gen?tica realizados no a?ude desta cidade aliado a an?lise de percep??o ambiental com os moradores de Lucr?cia) permitiu tra?ar um diagn?stico mais completo sobre a situa??o local

A homocistinúria é um erro inato do metabolismo dos aminoácidos causado principalmente pela deficiência na atividade da enzima cistationina-β-sintase (CBS), resultando em acúmulo de homocisteína (Hcy) e metionina nos fluidos biológicos. As manifestações clínicas incluem retardo mental, ectopia lentis, episódios tromboembólicos e osteoporose. Estudos realizados em modelos animais demonstram um possível papel do estresse oxidativo na fisiopatologia da homocistinúria. Mais recentemente, foram demonstradas alterações em alguns parâmetros de estresse oxidativo em pacientes homocistinúricos. Nesse trabalho, essas investigações foram ampliadas, no intuito de melhor entender os mecanismos fisiopatológicos e a terapêutica da homocistinúria por deficiência de CBS. Dessa forma, o objetivo principal desse trabalho foi avaliar os perfis lipídico, inflamatório e oxidativo, bem como a atividade das enzimas paraoxonase (PON1) e butirilcolinesterase (BuChE) em pacientes homocistinúricos tratados (dieta hipoproteica suplementada com vitamina B6, ácido fólico, betaína e vitamina B12) e não tratados, em comparação com indivíduos saudáveis, e adicionalmente avaliar a indução in vitro de mutagenicidade causada pela Hcy, através do teste de micronúcleos em leucócitos, e ainda avaliar o efeito in vitro do antioxidante N-acetil-L-cisteína na redução do dano ao DNA causado pelas altas concentrações de Hcy. No que se refere ao perfil sérico, foi verificada uma redução nos níveis de colesterol HDL, apolipoproteína A, bem como na atividade da enzima (PON1) em pacientes homocistinúricos tratados e não tratados. A atividade da enzima BuChE e os níveis de interleucina 6 (IL-6) estavam aumentados apenas nos pacientes não tratados. Correlações significativas positivas foram encontradas nos dois grupos de pacientes estudados entre a atividade da PON1 e o conteúdo de sulfidrilas; entre a atividade da PON1 e os níveis de vitamina B12; entre os níveis de HDL e apolipoproteína A1; entre os níveis de apolipoproteína A1 e vitamina B12; e entre os níveis de IL-6 e os níveis de carbonilas. Correlação significativa negativa foi encontrada entre os níveis de ácido fólico e de homocisteína total (tHcy). Em um segundo momento foram avaliados parâmetros de estresse oxidativo e níveis de nitritos na urina dos pacientes. Foram demonstrados níveis aumentados de 15-F2t-isoprostanos, di-tirosina e nitritos na urina de pacientes homocistinúricos tratados. Os níveis de 15-F2t-isoprostanos apresentaram uma correlação significativa positiva com os níveis de tHcy e os níveis de di-tirosina apresentaram correlação significativa negativa com os níveis de sulfidrilas. A atividade da enzima catalase encontrou-se aumentada no sangue de pacientes homocistinúricos tratados. Finalmente, demonstrou-se em estudo in vitro que a Hcy causa um aumento no dano cromossômico, avaliado pelo método de micronúcleos. Além disso, foi observado um efeito in vitro do antioxidante N-acetil-L-cisteína na redução do dano ao DNA causado pelas altas concentrações de Hcy. Avaliados em conjunto, nossos resultados indicam que o estresse oxidativo, acompanhado por alterações nos níveis urinários de nitritos, e por alterações nos perfis inflamatório e lipídico são fatores que possivelmente contribuam para o dano vascular encontrado na homocistinúria. Esses eventos parecem estar interconectados, e parecem ser decorrentes dos altos níveis de tHcy encontrados no sangue dos pacientes. Novas abordagens terapêuticas, além das atualmente utilizadas que incluem ácido fólico e vitamina B12, como o uso de antioxidantes, poderiam ser alternativas para atingir melhores resultados no tratamento de pacientes homocistinúricos. / Homocystinuria is an inborn error of metabolism of amino acids primarily caused by deficiency in the activity of cystathionine-β-synthase (CBS), resulting in accumulation of homocysteine (Hcy) and methionine in biological fluids. Clinical manifestations include mental retardation, ectopia lentis, thromboembolic events and osteoporosis. Studies in animal models show a possible role of oxidative stress in the pathophysiology of homocystinuria. More recently, changes in some parameters of oxidative stress have been demonstrated in homocistinuric patients. In this work, we expanded these investigations, in order to understand the mechanisms that lead to the development of clinical manifestations of disease and the therapeutic for homocystinuria due CBS deficiency. Thus, the main objective of this study was to evaluate the lipid, inflammatory and oxidative profiles as well as the activity of paraoxonase (PON1) and butyrylcholinesterase (BuChE) in treated homocistinuric patients (hypoproteic diet supplemented with vitamin B6, folic acid, betaine and vitamin B12) and untreated patients compared with healthy individuals, and to evaluate the in vitro induction of mutagenicity caused by Hcy, through the micronucleus test in leukocytes, and further, to evaluate the in vitro effect of N-acetyl-L-cysteine in reducing DNA damage caused by high concentrations of Hcy. With regard to the serum profile, was observed a reduction in HDL cholesterol, apolipoprotein A, and in enzyme activity (PON1) in both group of CBS-deficient patients. The activity of butyrylcholinesterase and levels of interleukin 6 (IL-6) were increased only in untreated patients. Positive significant correlations were found in both patients groups between PON1 activity and the content of sulfhydryl; between PON1 activity and vitamin B12 levels; between the levels of HDL and apolipoprotein A1; between the levels of apolipoprotein A1 and B12; and between IL-6 levels and levels of carbonyls. Negative significant correlation was found between folic acid levels and total homocysteine (tHcy). In a second moment were evaluated parameters of oxidative stress and the nitrite levels in the urine of patients. Increased levels of 15-F2t-isoprostanes, di-tyrosine and nitrite were demonstrated in the urine of treated homocistinuric patients. The 15-F2t-isoprostanes levels showed a significant positive correlation with tHcy levels; and di-tyrosine levels showed a significant negative correlation with the sulfhydryl levels. The catalase activity was found increased in the blood of treated homocistinuric patients. Finally, it was shown the in vitro effect of Hcy on increase of chromosomal damage assessed by micronuclei method. Furthermore, it was observed the in vitro effect of N-acetyl-L-cysteine antioxidant in reducing DNA damage caused by high concentrations of Hcy. Evaluated together, our results indicate that oxidative stress accompanied by changes in urinary nitrite levels and changes in inflammatory and lipid profiles are factors possibly contributing to vascular damage found in homocystinuria. These events appear to be interconnected, and appear to be due to the high tHcy levels found in the blood of patients. New therapeutic approaches in addition to the currently used which include folic acid and vitamin B12, as the use of antioxidants, could be alternatives to achieve best results in the treatment of homocistinuric patients. Furthermore, an early diagnosis and, consequently, an early treatment, could avoid that the patients remain for a long time subjected to exposure of high concentrations of tHcy.