Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Specific polyclonal antibodies obtained from egg yolk of the immunized chicken are named immunoglobulin Y (IgY). Although functionally related to mammal immunoglobulin G (IgG), IgY presents advantages, as follows: (i) elevated purified amounts of antibodies from one egg; (ii) the reduced of immunized animal number (iii) no interference with rheumatoid factor or mammal Complement proteins; (iv) binds only to chicken specific Fc fragment receptor. Polyclonal IgY antibodies could be employed as a primary or secondary reagent to investigate pathogen and host relationship, proteomic studies or infectious microorganisms biology. Toxoplasma gondii is a worldwide intracellular parasite which infects warm-blood hosts, including human. Toxoplasmosis causes fetal disorders in human and domestic animals. Tachyzoites and bradyzoites of T. gondii are stages related to host cell parasitism and also toxoplasmosis pathogeny. The specific IgG antibodies of mice are used to investigate virulence factors associated to T. gondii and evaluate mechanisms correlated to host immune response modulation by parasite antigens. However reduced amounts of specific IgG antibodies are obtained from a bled animal. Chickens and mice could have distinct antigenic proteins recognition profile even though using identical immunization protocols, probably this a consequence of phylogenetic distance between these two species. Specific polyclonal IgY were obtained from T. gondii soluble total antigens (STAg) immunized chickens at average of 4 mg/mL of pure yolk by a low cost and easy method. High avidity anti-STAg polyclonal IgY recognized distinct weight molecular antigenic proteins at second booster, and these antibodies were applied in standardized immunoassays with T. gondii. First, tissue cysts, parasitophorus vacuoles and also extracellular tachyzoites were detected in sections of chronically infected mice brain by a IgY-immunohistochemistry assay, complementally tachyzoites also were identified in a monolayer of infected HeLa cells by a IgY-immunocytochemistry assay, both methods used a anti-IgY FITC-conjugate secondary antibody. Additionally, STAg proteins two-dimensionally resolved were proved against T. gondii purified specific IgY and mice antiserum by a Western blot assay, the results demonstrated that egg yolk chicken antibodies identified acid antigens better than mice antisera. Finally, incubation of T. gondii tachyzoites with polyclonal anti-STAg IgY reduced intracellular parasitism in HeLa cells culture. In conclusion, polyclonal anti-STAg IgY antibodies present efficacy for application in immunoassays which investigate antigenic proteins candidates to diagnostic or vaccines and T. gondii biology. / Anticorpos policlonais específicos podem ser obtidos em grandes quantidades a partir da gema do ovo de galinhas imunizadas, denominados anticorpos IgY. Embora semelhantes funcionalmente aos anticorpos IgG de mamíferos, os anticorpos IgY apresentam vantagens: (i) extração sem estresse para o animal; (ii) menor número de animais utilizados na produção; (iii) grandes concentrações de anticorpos por gema; (iii) não sofre interferência do fator reumatóide e de proteínas do sistema complemento de mamíferos; (iv) interage apenas com receptores para Fc de galinha. Os anticorpos IgY são utilizados em estudos da relação patógeno versus hospedeiro, proteômica e biologia de agentes infecciosos. Toxoplasma gondii é um parasito amplamente distribuído e com grande número de hospedeiros, incluindo o homem, e pode ocasionar lesões em fetos humanos e de animais domésticos. A relação T. gondii versus hospedeiros, o papel dos antígenos do parasito nos processos de infecção e manutenção do parasitismo intracelular, podem ser investigados pela incubação do parasito com anticorpos específicos obtidos de mamíferos. Os anticorpos de mamíferos são obtidos em concentrações limitadas e por meio de procedimentos dolorosos. Neste estudo, galinhas foram imunizadas com antígenos solúveis de T. gondii da cepa RH. Foram extraídos, em média, 4 mg de IgY/ mL de gema de ovo. Detectaram-se anticorpos IgY anti-STAg de alta avidez após o segundo booster, também reconheceram alvos antigênicos de distintos pesos moleculares. Os anticorpos IgY anti-STAg detectaram o parasito intracelular em cultivos de células HeLa e também em cortes histológicos de tecido fixado. Diferente dos anticorpos IgG de camundongos, nos ensaios Western blot 1D e 2D, os anticorpos IgY reconheceram proteínas antigênicas de pesos moleculares e pontos isoelétricos distintos, respectivamente. Em ensaio de proliferação do parasito, observou-se que a incubação dos taquizoítos de T. gondii com os anticorpos IgY específicos reduziu parcialmente o parasitismo intracelular. Concluiu-se que anticorpos IgY policlonais são ferramentas eficazes para estudos da biologia de T. gondii e podem auxiliar na pesquisa de alvos antigênicos para utilização em diagnóstico e produção de vacinas. / Doutor em Imunologia e Parasitologia Aplicadas

As doenças infecciosas causam importantes perdas econômicas para a produção avícola e para a criação de aves domésticas de subsistência, exóticas e selvagens. No Brasil, há poucos estudos sobre as doenças infecciosas que acometem as aves, que correlacionem às lesões macroscópicas com o exame histopatológico e a identificação do agente presente nos órgãos lesionados. O objetivo desse estudo foi realizar essa tríade de diagnóstico em doenças infecciosas que acometem as aves de produção e ornamentais. O presente estudo resultou em cinco artigos. O primeiro artigo descreve dois surtos de micoplasmose em galinhas de subsistência utilizando a técnica de imuno-histoquímica (IHQ) como método de diagnóstico da infecção por Mycoplasma gallisepticum. A técnica de IHQ apresentou boa concordância com os sinais clínicos, as lesões anatomopatológicas e os resultados da reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. O segundo artigo foi realizado em frangos de corte condenados totalmente por colibacilose em um estabelecimento sob Serviço de Inspeção Federal. Em todas as aves condenados observou-se lesões macroscópicas e os órgãos mais acometidos foram fígado e sacos aéreos. Histologicamente, os diagnósticos mais frequentes foram hepatite necrosante aleatória, bronquite fibrino-heterofílica, pericardite aguda e traqueíte linfoplasmocitária. Desses casos isolou-se E. coli, Enterococcus sp., Streptococcus sp. e Staphylococcus sp. A PCR e a IHQ para Mycoplasma gallisepticum e M. synoviae foram negativas. O terceiro artigo descreve um surto de tifo aviário em codornas japonesas, através do isolamento bacteriano, da caracterização anatomopatológica e da IHQ anti-Salmonella. O quarto artigo descreve, através de um estudo retrospectivo, as características anatomopatológicas de 12 casos de clamidiose em psitacídeos e padroniza a técnica de IHQ anti-Chlamydia como método de diagnóstico dessa enfermidade. O quinto artigo relata um caso sistêmico e fatal de toxoplasmose em uma perdiz-da-Califórnia (Callipepla californica), descrevendo as lesões anatomopatológicas, a IHQ anti-Toxoplasma gondii e a genotipagem através da PCR. Portanto, o desenvolvimento de técnicas de diagnóstico que correlacionem as lesões macro e microscópicas com a identificação do agente infeccioso são fundamentais para que as enfermidades nas aves sejam corretamente estudadas e diagnosticadas. / Infectious diseases cause significant economic losses in poultry production and the breeding of domestic birds for subsistence and of exotic or wild birds. In Brazil, there have been few studies on the infectious diseases of birds in which macroscopic lesions have been correlated with histopathological examination and the identification of the agent present in the organs with lesions. The objective of this study was to apply this diagnostic triad to infectious diseases which affect poultry and ornamental birds. The study is reported in a series of five papers. The first paper describes two outbreaks of mycoplasmosis in subsistence farming chickens using the IHC technique as a diagnostic method for infection by Mycoplasma gallisepticum. The IHC technique showed good agreement with the clinical signs, the anatomopathological lesions and the results of the real-time PCR. The second paper describes a study carried out on broiler chickens which were totally condemned due to colibacillosis at an establishment under the control of the Federal Inspection Service. In all of the condemned birds macroscopic lesions were observed and the organs most affected were the liver and air sacs. Histologically, the most frequent diagnoses were random necrotizing hepatitis, fibrinous-heterophilic bronchitis, acute pericarditis and lymphoplasmocitary tracheitis. From these cases Escherichia coli, Enterococcus sp., Streptococcus sp. and Staphylococcus sp. were isolated. The polymerse chain reaction (PCR) and immunohistochemistry (IHC) tests for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae were negative. The third paper describes an outbreak of fowl typhoid in Japanese quails, investigated by bacterial isolation, anatomopathological characterization and anti- Salmonella IHC. The fourth paper describes, through a retrospective study, the anatomopathological characteristics of 12 cases of chlamydiosis in psittacidae and standardizes the anti-Chlamydia IHC technique as a diagnostic method for this disease. The fifth paper reports a systemic and fatal case of toxoplasmosis in a Californian quail (Callipepla californica), describing the anatomopathological lesions, the anti- Toxoplasma gondii IHC and the genotyping through PCR. Thus, the development of diagnostic techniques which correlate the macro and microscopic lesions with the identification of the infectious agent are fundamental for diseases in birds to be properly studied and diagnosed.

Introdução: A infecção aguda pelo Toxoplasma gondii em gestantes pode determinar infecção fetal através de passagem transplacentária. As crianças afetadas podem desenvolver coriorretinite e déficit neurológico, na ausência de tratamento adequado. Objetivos: Estimar a prevalência de toxoplasmose aguda em gestantes atendidas na maternidade do Hospital Nossa Senhora da Conceição, avaliando possíveis diferenças nas freqüências ao longo do período estudado; medir a incidência de toxoplasmose congênita (TC) e estimar a taxa de transmissão vertical em crianças nascidas neste hospital; avaliar a acurácia de testes diagnósticos em TC, aplicados no momento do nascimento, na população de crianças estudadas. Métodos: Inicialmente um estudo transversal foi desenvolvido para identificar as pacientes que apresentaram critérios de infecção aguda na gestação, atendidas na maternidade no momento do parto, entre outubro de 1998 e dezembro de 2005. Novas tecnologias foram introduzidas para detecção diagnóstica ao longo deste período. Entre outubro de 1998 e dezembro de 2001 (período 1), utilizou-se o método microparticle enzyme immunoassay – MEIA e entre janeiro de 2002 e dezembro de 2005 (período 2) foi utilizada a técnica de captura de IgM e o teste de avidez de IgG com o método enzyme linked fluorescent assay – ELFA (VIDAS). Os recém-nascidos identificados a partir deste estudo inicial foram incluídos em um estudo de coorte histórico, com tempo de acompanhamento aproximado de doze meses, para estabelecer o diagnóstico definitivo de toxoplasmose congênita, obtido em dois momentos: (1) logo após o nascimento; (2) aos 12 meses, aproximadamente. Para a definição de caso da infecção aguda na gestação e de toxoplasmose congênita foi utilizado o sistema de classificação elaborado por Lebech et al., com adaptações (quadro 1). Aqueles casos classificados como improváveis foram excluídos do cálculo da prevalência de toxoplasmose aguda em gestantes e de incidência de TC. Para avaliar a acurácia de testes diagnósticos em TC realizados no momento do nascimento utilizou-se, como padrão ouro para o diagnóstico definitivo, a concentração de anticorpos IgG em torno de 12 meses de vida. Um bebê infectado deve ter concentrações iguais ou mais elevadas de IgG nesta idade quando comparadas às encontradas no nascimento. Houve comparação independente e cega dos métodos diagnósticos avaliados em relação ao padrão ouro. A dosagem de anticorpos IgG e IgM em recém-nascidos foi processada com o método microparticle enzyme immunoassay (MEIA). Análise: Para comparar proporções foi utilizado o teste qui-quadrado com correção de Yates, teste exato de Fisher, quando necessário, e Teste t de Student para comparação entre médias de duas amostras independentes com distribuição simétrica. Na avaliação do desempenho de testes diagnósticos foram obtidos resultados de sensibilidade, especificidade, razões de verossimilhança (RV) positiva e negativa dos testes diagnósticos – hemograma, exame do líquor, ecografia transfontanelar, exame de fundo de olho (EFO) e a detecção de anticorpos IgM para toxoplasmose (MEIA) e do DNA do toxoplasma com reação em cadeia da polimerase – método Nested (RCP-Nested) séricos. Resultados: Em uma população de 41.112 gestantes, a prevalência de toxoplasmose aguda foi de 4,8 para cada 1.000 gestantes (IC95%: 4,2 a 5,6). Houve redução significativa na prevalência de toxoplasmose aguda nas gestantes deste hospital a partir do ano 2002 (P=0,008). O diagnóstico de toxoplasmose congênita foi definitivo em 37 crianças entre 40.727 nascidos vivos no período estudado, atingindo uma incidência de 0,9 para cada 1.000 nascimentos (IC95%: 0,6 a 1,3). Logo após o nascimento, entre os 200 recém-nascidos expostos ao T. gondii, resultado de 199 gestantes infectadas, 25 bebês apresentaram critérios diagnósticos de toxoplasmose congênita, atingindo taxa de transmissão vertical de 12,5% (IC 95%: 8,2% - 17,9%). Após o seguimento foram detectados mais 12 casos, aumentando esta taxa para 18,5% (IC 95%: 13,4% – 24,6%). Para avaliar a acurácia de testes diagnósticos aplicados no momento do nascimento, foram identificadas 31 crianças com TC, de acordo com o padrão ouro, entre 136 expostas ao protozoário intra-útero e que completaram seguimento até os 12 meses de vida. Os testes que apresentaram melhor desempenho isoladamente na predição do diagnóstico, foram detecção de anticorpos IgM específicos, EFO e RCPNested atingindo razões de verossimilhança positivas de 119,3 (IC95%: 7,40 – 1923,92), 49,9 (IC95%: 3,0 – 838,2) e 24,8 (IC95%: 3,22 – 190,35), respectivamente. A RV negativa para IgM foi 0,4 (IC95%: 0,3 – 0,6), mas para o EFO e RCP-Nested foi apenas 0,7 (IC95%: 0,6 – 0,9). Conclusão: A prevalência de toxoplasmose aguda em gestantes incluídas neste estudo foi inferior à encontrada na França e na Bélgica, mas foi mais elevada quando comparada às descritas na Suécia, Noruega, Dinamarca e Nova Iorque. A prevalência estimada neste estudo foi similar a de outros locais do Brasil, como Mato Grosso do Sul, mas inferior à obtida no Distrito Federal. Esta variabilidade nas estimativas pode estar relacionada com os diferentes métodos diagnósticos utilizados no rastreamento, ou ainda, com os diferentes fatores de risco envolvidos na transmissão da doença. Em nosso estudo, esta freqüência diminuiu a partir do ano de 2002, o que não pode ser atribuível à introdução do teste de avidez de IgG, uma vez que a média de idade gestacional na realização deste exame foi tardia. Entretanto, existe a possibilidade de que o teste de captura de IgM com o método ELFA tenha contribuído para diminuir os casos falso-positivos de IgM, o que poderá ser confirmado com futuros estudos. Estes resultados apontam que a introdução de novas tecnologias no laboratório deve ser acompanhada de esforços para melhorar as condições de acesso precoce das gestantes ao pré-natal de referência, com o objetivo de não perder a oportunidade para melhor discriminar as gestantes sem doença e evitar procedimentos invasivos, desnecessários e onerosos. A incidência de toxoplasmose congênita e a taxa de transmissão vertical foram elevadas. Estas freqüências podem estar subestimadas devido às perdas no seguimento. Para avaliar o efeito das perdas na validade do estudo, foram comparadas as características da população de gestantes e de recém-nascidos do grupo de bebês com seguimento completo em relação ao grupo que não retornou para o seguimento. Estas características foram semelhantes nos dois grupos, portanto, consideramos que o percentual de perdas, embora elevado, não prejudicou a validade do estudo. A identificação de 12 casos adicionais de TC com o seguimento dos bebês reforça a necessidade de monitoramento sorológico durante o primeiro ano de vida, mesmo sem evidência de infecção congênita ao nascimento. Na avaliação dos testes diagnósticos aplicados ao nascimento, a detecção de anticorpos IgM específicos no sangue do neonato, o EFO e o RCP-Nested sérico demonstraram melhor desempenho para identificar os bebês com TC. Entretanto, para afastar este diagnóstico, apenas o resultado não reagente de anticorpos IgM específicos apresentou maior utilidade, mas com efeito de pequena magnitude. / Introduction: The acute infection by Toxoplasma gondii in pregnant women may cause fetal infection by means of the transplacental transfer. Affected children may develop chorioretinitis and neurological deficit in the absence of a proper treatment. Objectives: To estimate the prevalence of acute toxoplasmosis in pregnant women cared for at the maternity ward of Hospital Nossa Senhora da Conceição, evaluating possible differences in frequencies along the period of study; to measure the incidence of congenital toxoplasmosis (CT), and estimate the rate of vertical transmission in children who were born in this hospital; to evaluate the accuracy of diagnostic tests in CT, applied at the moment of the birth, in the population of studied children. Methods: Initially a cross-sectional study was developed to identify the patients who presented criteria of acute infection in the pregnancy, cared for at the maternity ward at the moment of the labor, between October 1998 and December 2005. New technologies have been introduced for diagnostic detection along this period. Between October 1998 and December 2001 (period 1) the microparticle enzyme immunoassay – MEIA was used, while between January 2002 and December 2005 (period 2) the IgM capture technique and the IgG avidity test with the enzyme linked fluorescent assay – ELFA (VIDAS) method were used. Those newborns (NB) identified at this initial study were included in a historical cohort study, with an approximate follow-up time of twelve months, to establish the definitive diagnosis of congenital toxoplasmosis, obtained in two moments: (1) soon after birth; (2) at 12 months, approximately. For the definition of cases of acute infection in pregnancy and congenital toxoplasmosis, the classification system elaborated by Lebech et al. was used with adaptations (Picture 1). Those cases that were classified as unlikely were excluded from the prevalence calculation of acute toxoplasmosis in pregnant women and from the incidence of CT. In order to evaluate the accuracy of diagnostic tests in CT accomplished at the moment of birth, the concentration of IgG antibodies around 12 months of age was used as a gold standard for the ultimate diagnosis. An infected baby must have equal or higher concentrations of IgG at this age when compared to the ones found at birth. An independent and blind comparison of the diagnostic methods evaluated in relation to the gold standard was performed. The dosage of IgG and IgM antibodies in newborns was processed with the microparticle enzyme immunoassay (MEIA) method. Analysis: In order to compare proportions, a chi square test with Yates correction, an exact Fisher test when necessary, and a Student's t-test for comparison between means of two independent samples with symmetrical distribution were used. In the performance evaluation of diagnostic tests, results of sensitivity, specificity, positive and negative likelihood ratio (LR) of the diagnostic tests – hemogram, liquor test, transfontanellar ultrasonography brain scan, ophthalmoscopy, and detection of IgM antibodies for toxoplasmosis (MEIA) and the DNA of the toxoplasm with polymerase chain reaction – method Nested (PCR-Nested) serum were obtained. Results: In a population of 41,112 pregnant women, the prevalence of acute toxoplasmosis was 4.8 per 1,000 pregnant women (CI95%: 4.2 to 5.6). There was a significant decrease in the prevalence of acute toxoplasmosis in pregnant women of this hospital from 2002 on (P=0.008). The diagnosis of congenital toxoplasmosis was definitive in 37 children among 40,727 live births in the studied period, reaching an incidence of 0.9 per 1,000 births (CI95%: 0.6 to 1.3). Soon after the birth, among the 200 newborns exposed to the T. gondii, resulting from 199 pregnant women, 25 babies showed diagnostic criteria of congenital toxoplasmosis, reaching a vertical transmission rate of 12.5% (CI 95%: 8.2% - 17.9%). After the follow-up, another 12 cases were detected, increasing this rate to 18.5% (CI 95%: 13.4% – 24.6%). In order to evaluate the accuracy of diagnostic tests applied at the moment of birth, 31 children with CT were identified according to the gold standard, among 164 ones who were exposed to protozoan intra-uterus and who completed their follow-up until 12 months of age. The tests that showed better performance when isolate in the prediction of the diagnosis were the detection of specific IgM antibodies, ophthalmoscopy, and PCR-Nested reaching positive RV of 119.3 (CI95%: 7.40 – 1923.92), 49.9 (CI95%: 3.0 – 838.2), and 24.8 (CI95%: 3.22 – 190.35), respectively. The negative RV for IgM was 0.4 (CI95%: 0.3 – 0.6), but for ophthalmoscopy and PCR-Nested it was 0.7 (CI95%: 0.6 – 0.9) only. Conclusion: The prevalence of acute toxoplasmosis in pregnent women included in this study was lower than the one found in France and Belgium, but was higher when compared to the ones described in Sweden, Norway, Denmark, and New York. The estimated prevalence in this study was similar to the one from other locations in Brazil, such as Mato Grosso do Sul, but lower to the one obtained in Brasília. This variability in the estimates may be related to the different methods for diagnosis used in the screening or even to the different risk factors involved in the transmission of the disease. In our study, this frequency decreased from 2002 on, and this cannot be attributed to the introduction of the IgG avidity test, since the means of gestational age at the accomplishment of this test was late. However, there is a possibility that the IgM capture test with the ELFA method has contributed to decrease the frequency of false-positive cases of IgM, what can be confirmed with future studies. These results signal that the introduction of new technologies in the laboratory must be accompanied by efforts to improve conditions for an early access of pregnant women to the reference prenatal care, aiming to prevent the loss of opportunities of better discriminating pregnant women that are not sick and avoiding unnecessary and expensive invasive procedures. The incidence of congenital toxoplasmosis and the rate of vertical transmission were elevated. These frequencies may be underestimated due to the losses in the follow-up. In order to evaluate the effect of losses in the study validity, characteristics of the population of pregnant women and newborns belonging to the group of babies with full follow-up in relation to the group that did not return for the follow-up were compared. These characteristics were similar in the two groups, therefore we consider that the percentual of losses, even though high, did not endanger the validity of the study. The identification of twelve additional cases of congenital toxoplasmosis with the follow-up of the babies reinforces the need of a serological monitoring during the first year of life, even without any evidence of congenital infection at birth. In the evaluation of diagnostic tests applied at birth the detection of specific IgM antibodies in the blood of the newborn, the ophthalmoscopy, and the serum PCR-Nested showed a better performance to identify babies with CT. However, in order to discard this diagnosis, only the non-reagent IgM specific antibodies result showed higher utility, with a small magnitude effect though.

As doenças infecciosas causam importantes perdas econômicas para a produção avícola e para a criação de aves domésticas de subsistência, exóticas e selvagens. No Brasil, há poucos estudos sobre as doenças infecciosas que acometem as aves, que correlacionem às lesões macroscópicas com o exame histopatológico e a identificação do agente presente nos órgãos lesionados. O objetivo desse estudo foi realizar essa tríade de diagnóstico em doenças infecciosas que acometem as aves de produção e ornamentais. O presente estudo resultou em cinco artigos. O primeiro artigo descreve dois surtos de micoplasmose em galinhas de subsistência utilizando a técnica de imuno-histoquímica (IHQ) como método de diagnóstico da infecção por Mycoplasma gallisepticum. A técnica de IHQ apresentou boa concordância com os sinais clínicos, as lesões anatomopatológicas e os resultados da reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. O segundo artigo foi realizado em frangos de corte condenados totalmente por colibacilose em um estabelecimento sob Serviço de Inspeção Federal. Em todas as aves condenados observou-se lesões macroscópicas e os órgãos mais acometidos foram fígado e sacos aéreos. Histologicamente, os diagnósticos mais frequentes foram hepatite necrosante aleatória, bronquite fibrino-heterofílica, pericardite aguda e traqueíte linfoplasmocitária. Desses casos isolou-se E. coli, Enterococcus sp., Streptococcus sp. e Staphylococcus sp. A PCR e a IHQ para Mycoplasma gallisepticum e M. synoviae foram negativas. O terceiro artigo descreve um surto de tifo aviário em codornas japonesas, através do isolamento bacteriano, da caracterização anatomopatológica e da IHQ anti-Salmonella. O quarto artigo descreve, através de um estudo retrospectivo, as características anatomopatológicas de 12 casos de clamidiose em psitacídeos e padroniza a técnica de IHQ anti-Chlamydia como método de diagnóstico dessa enfermidade. O quinto artigo relata um caso sistêmico e fatal de toxoplasmose em uma perdiz-da-Califórnia (Callipepla californica), descrevendo as lesões anatomopatológicas, a IHQ anti-Toxoplasma gondii e a genotipagem através da PCR. Portanto, o desenvolvimento de técnicas de diagnóstico que correlacionem as lesões macro e microscópicas com a identificação do agente infeccioso são fundamentais para que as enfermidades nas aves sejam corretamente estudadas e diagnosticadas. / Infectious diseases cause significant economic losses in poultry production and the breeding of domestic birds for subsistence and of exotic or wild birds. In Brazil, there have been few studies on the infectious diseases of birds in which macroscopic lesions have been correlated with histopathological examination and the identification of the agent present in the organs with lesions. The objective of this study was to apply this diagnostic triad to infectious diseases which affect poultry and ornamental birds. The study is reported in a series of five papers. The first paper describes two outbreaks of mycoplasmosis in subsistence farming chickens using the IHC technique as a diagnostic method for infection by Mycoplasma gallisepticum. The IHC technique showed good agreement with the clinical signs, the anatomopathological lesions and the results of the real-time PCR. The second paper describes a study carried out on broiler chickens which were totally condemned due to colibacillosis at an establishment under the control of the Federal Inspection Service. In all of the condemned birds macroscopic lesions were observed and the organs most affected were the liver and air sacs. Histologically, the most frequent diagnoses were random necrotizing hepatitis, fibrinous-heterophilic bronchitis, acute pericarditis and lymphoplasmocitary tracheitis. From these cases Escherichia coli, Enterococcus sp., Streptococcus sp. and Staphylococcus sp. were isolated. The polymerse chain reaction (PCR) and immunohistochemistry (IHC) tests for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae were negative. The third paper describes an outbreak of fowl typhoid in Japanese quails, investigated by bacterial isolation, anatomopathological characterization and anti- Salmonella IHC. The fourth paper describes, through a retrospective study, the anatomopathological characteristics of 12 cases of chlamydiosis in psittacidae and standardizes the anti-Chlamydia IHC technique as a diagnostic method for this disease. The fifth paper reports a systemic and fatal case of toxoplasmosis in a Californian quail (Callipepla californica), describing the anatomopathological lesions, the anti- Toxoplasma gondii IHC and the genotyping through PCR. Thus, the development of diagnostic techniques which correlate the macro and microscopic lesions with the identification of the infectious agent are fundamental for diseases in birds to be properly studied and diagnosed.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-05-25T12:12:05Z No. of bitstreams: 1 Elizete de Oliveira.pdf: 871467 bytes, checksum: 2108221263800831d42c4abd23f82e79 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-25T12:12:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Elizete de Oliveira.pdf: 871467 bytes, checksum: 2108221263800831d42c4abd23f82e79 (MD5) Previous issue date: 2012-04-20 / The objective of this study was to investigate antibodies anti-Toxoplasma gondii in sera from donkeys and mules raised in the Northeast of Brazil. We used 483 samples (395 mules and 88 donkeys) from four states in Northeastern Brazil (Pernambuco, Rio Grande do Norte, Paraíba and Sergipe). For the detection of anti-Toxoplasma gondii was used the technique of Indirect Immunofluorescence Antibody Test (IFAT) with a cut off 64. Observed frequencies of 23.8% and 43.2% positivity for mules and donkeys, respectively. The state of Pernambuco had the highest frequency of positive samples (29.2%).There was a statistically significant difference in relation to specie (p<0.001) and state (p=0.048). This study is the pioneer in notifying the occurrence of anti-T. gondii antibodies in mules and donkeys in the studied States. And it must be considered as an essential alert to the responsible health authorities regarding the eminent risk of equine meat ingestion. / Objetivou-se com este estudo pesquisar anticorpos anti-Toxoplasma gondii em soros de muares e asininos criados na região Nordeste do Brasil. Foram utilizadas 483 amostras (395 muares e 88 asininos) procedentes de quatro estados da região Nordeste do Brasil (Pernambuco, Rio Grande do Norte, Paraíba e Sergipe). Para a pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii foi utilizada a técnica da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) com ponto de corte 64. Foram observadas frequências de 23,8% e 43,2% de positividade para muares e asininos, respectivamente. O estado de Pernambuco apresentou a maior frequência de amostras positivas (29,2%), observando-se diferença estatística significativa quanto à espécie (p<0,001) e estado (p=0,048). Este estudo é pioneiro no que se refere à pesquisa de anticorpos anti-T. gondii em muares e asininos nos estados estudados e serve de alerta às autoridades sanitárias para o risco de ingestão de carne de equídeos.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-09T13:54:47Z No. of bitstreams: 1 Erika Fernanda Torres Samico Fernandes Cavalcanti.pdf: 913952 bytes, checksum: 42901e597e56c04af84eda7eabac98a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T13:54:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erika Fernanda Torres Samico Fernandes Cavalcanti.pdf: 913952 bytes, checksum: 42901e597e56c04af84eda7eabac98a3 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Toxoplasma gondii is an obligate intracellular coccidian protozoan that causes the toxoplasmosis, an important zoonosis. The study of the prevalence of this parasite in pigs have great importance since pork is one of the main sources of infection for humans when consumed raw or undercooked. This study aimed to determine the prevalence of antibodies, isolate and genetically characterize the Toxoplasma gondii in subsistence creations of pigs in the State of Pernambuco, Brazil. In the first study it was evaluated 224 blood samples and tissues from pigs slaughtered in municipal slaughterhouses for the presence of anti-Toxoplasma gondii antibodies by Indirect Immunofluorescence Assay (IFA). There was a significant relationship regarding the age of the animals and seropositivity (p <0.001). The positive animals had their tissues analyzed by bioassay techniques in mice, Histopathology, Immunohistochemistry (IHC) and Polymerase Chain Reaction (PCR). Of animals sampled, 38.0% (85/224) were positive in the IFA with titles ranging from 64 to 1024. In the histopathology, it was not observed injuries associated to toxoplasmosis in the evaluated tissues and in the IHC it was not obtained positive immunostaining. The PCR of pig tissues showed 14.1% (12/85) positive samples and in the mouse bioassay, 28.0% (5/18) of the samples were positive. The second study was realized with the purpose of discovering the genotypes of T. gondii in the region. It was realized a screening of positive animals in the serological tests, then, the tissues of positive animals were used for bioassay. Fifteen pools of tissues were used, of which, was obtained one isolate. The isolate obtained was characterized by RFLP -PCR, using 11 genetic markers (SAG1, SAG2, altSAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c228, c292, L358, PK1 e APICO). It was used the RH, ME49 and VEG strains of T. gondii, that belong to types I, II and III respectively as standard in genetic characterization of isolated swines. After this genetic analysis, it was identified genotype #65 (ToxoDB), considered an atypical strain and also the first record of this genotype in pigs worldwide. The results of this study allow to conclude that Toxoplasma gondii is installed in pig herds in the state of Pernambuco and strategic and integrated measures should be taken around the prophylaxis of this disease, to prevent and control the infections in pigs and humans in the studied region. / Toxoplasma gondii é um protozoário coccídio intracelular obrigatório causador da toxoplasmose, uma importante zoonose. O estudo da prevalência deste parasito em suínos é de grande importância uma vez que a carne suína é uma das principais via de transmissão para os humanos, quando consumida crua ou mal cozida. Objetivou-se neste estudo determinar a soroprevalência de anticorpos, isolar e caracterizar geneticamente Toxoplasma gondii em suínos de criações de subsistência no Estado de Pernambuco, Brasil. No primeiro grupo de estudo avaliaram-se 224 amostras de sangue e tecidos de suínos abatidos em matadouros municipais para a presença de anticorpos anti- T. gondii na técnica da reação de Imunofluorescência indireta (RIFI) utilizando o ponto de corte ≥ 64. Os animais soropositivos tiveram seus tecidos analisados pelas técnicas de bioensaio em camundongos, histopatologia, imunohistoquímica (IHQ) e reação em cadeia da polimerase (PCR). Dos animais amostrados, 38,0% (85/224) foram positivos na RIFI com títulos variando de 64 a 1024. Ocorreu associação significativa em relação à idade dos animais e a soropositividade (p<0,001). Na histopatologia, não foram observadas lesões associadas à infecção por T. gondii nos tecidos avaliados e na IHQ também não foram obtidas imunomarcações positivas. A PCR dos tecidos dos suínos positivos na sorologia revelou 14,1% (12/85) amostras positivas e no bioensaio em camundongos, 28,0% (5/18) das amostras foram positivas. O segundo grupo de estudo foi realizado com o objetivo de se conhecer os genótipos circulantes do T. gondii no estado de Pernambuco. Inicialmente foi feita uma triagem dos animais positivos na prova sorológica (RIFI) em 54,3% (50/92) e os tecidos dos animais positivos seguiram para a bioprova. Foram utilizados 15 pools de tecidos onde se obteve um isolado. Este isolado obtido foi caracterizado na PCR-RFLP utilizando 11 marcadores genéticos (SAG1, SAG2, altSAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c228, c292, L358, PK1 e APICO). Foram utilizadas as cepas de T. gondii RH, ME49 e VEG que pertencem aos tipos I, II e III respectivamente, como padrão na caracterização genotípica do isolado suíno. Após a análise genética identificou-se o genótipo #65(ToxoDB) considerado uma cepa atípica, sendo este o primeiro registro desse genótipo em suínos no mundo. Os resultados obtidos nesse estudo permitiram concluir que a infecção por Toxoplasma gondii ocorre nos suínos no estado de Pernambuco e que medidas estratégicas e integradas devem ser adotadas para prevenir e controlar as infecções em suínos e humanos na região estudada.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-25T12:25:18Z No. of bitstreams: 1 Maria Cecilia Oliveira do Nascimento.pdf: 813634 bytes, checksum: 60155b6979ad376baa44a24c47ff7804 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-25T12:25:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Cecilia Oliveira do Nascimento.pdf: 813634 bytes, checksum: 60155b6979ad376baa44a24c47ff7804 (MD5) Previous issue date: 2013-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The hoary fox (Pseudalopex vetulus), in the past called Dusicyon (Lycalopex) vetulus or just Lycalopex vetulus, is a wild canid native of Brazil and commonly found in the semiarid northeastern area living in contact with cattle. Neospora caninum and Toxoplasma gondii are protozoa belonging to the phylum Apicomplexa, and despite phylogenetic differences, biological, structural, and antigenic, they are closely related to each other, and in the past considered a single species. Studies have demonstrated the occurrence of T. gondii and N. caninum in domestic and wild canids, showing that some of these animals as well as intermediate hosts stand as definitive hosts. In the present study, we used brain tissue samples from 49 hoary fox (Pseudalopex vetulus) found dead in the countryside roads of Paraíba. These samples were processed for extraction of genetic material and then subjected to polymerase chain reaction (PCR) using specific primers for T. gondii and N. caninum. Was observed in 14.3% and 12.2% of animals the presence of T. gondii and N. caninum respectively and the molecular identity of the amplified products was confirmed by sequencing. This work concluded that the hoary fox (P. vetulus) is an intermediate host of Neospora caninum and Toxoplasma gondii, but more studies are needed in this area to observe the involvement of this species in the wild and domestic cycle of these parasites. / A raposa-do-campo (Pseudalopex vetulus), no passado denominada Dusicyon (Lycalopex) vetulus ou apenas Lycalopex vetulus, é um canídeo selvagem nativo do Brasil e encontrado comumente no semiárido nordestino convivendo em contato com rebanhos. Toxoplasma gondii e Neospora caninum são protozoários pertencentes ao filo Apicomplexa, e, apesar das diferenças filogenéticas, biológicas, estruturais e antigênicas são bastante relacionados um com o outro, sendo, no passado, considerados uma única espécie. Estudos têm demonstrado a ocorrência de T. gondii e N. caninum em canídeos domésticos e selvagens, demonstrando que algumas dessas espécies são consideradas hospedeiras intermediárias e definitivas desses protozoários. Objetivou-se neste estudo pesquisar a presença do DNA de Toxoplasma gondii e Neospora caninum em amostras de tecido cerebral de 49 raposas-do-campo (Pseudalopex vetulus), encontradas mortas nas rodovias no sertão paraibano. As amostras foram processadas para a extração do material genético e em seguida submetidas à Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), utilizando iniciadores específicos para T. gondii e N. caninum. Das amostras analisadas, 14,3% e 12,2% foram positivas para T. gondii e N. caninum, respectivamente e a identidade molecular dos produtos amplificados foi confirmada por sequenciamento. Com este trabalho concluiu-se que a raposa-do-campo (P. vetulus) é hospedeira intermediária de Neospora caninum e de Toxoplasma gondii, porém mais estudos nesta área são necessários para observar a participação desta espécie no ciclo selvagem e doméstico destes parasitos.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-25T14:02:10Z No. of bitstreams: 1 ERica Paes Barreto.pdf: 2810391 bytes, checksum: c2a8c78628d4782cffb353f0779d8f36 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-25T14:02:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ERica Paes Barreto.pdf: 2810391 bytes, checksum: c2a8c78628d4782cffb353f0779d8f36 (MD5) Previous issue date: 2010-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The aim of the present study was to evaluate the clinical, epidemiological, parasitological and reproductive aspects of the T. gondii natural and experimental infection in sheep. Firstly, Toxoplasma gondii venereal transmission via experimental infection was studied 41 seronegative sheep divided in three groups: G1, where 15 females were inseminated with semen containing 6.5 X 104 tachyzoites; G2, where 15 females were inseminated with semen containing 4 X 107 tachyzoites; and G3: 11 females inseminated with tachyzoite-free semen. In order to confirm the T. gondii infection via semen, serological tests were performed as well as the DNA of the parasite was detected in the blood using nested PCR at 0, 7, 14, 21, 28, 49,63 and 123 days post-infection (p.i.). In the G1 only 5/15 (33.3%) of the females seroconverted, while in G2 15/15 (100%)seroconverted. Regarding nested PCR analysis, it was observed that 14/15 (93.3%) of the females in the G1 and 14/15 (93.3%) from G2 were positives for T. gondii. On the other hand, in G3 all samples were negative. In addition, the reproductive disturbances were diagnosed using ultrasound and it was observed that in G1,9/15 (60%) presented embryonic reabsorption and 40% kept gestation, showing normal or dystocic delivery, stillborns and uterine atony. In the G2, embryonic reabsorption was present in 15/15 (100%) of the sheep associated with other pathologies such as 2/24 (8.3%) hydrometra, 2/24 (8.3%) mucometra and 2/24(8.3%) follicular cysts. In the G3, 8/11 of females kept gestation and delivered healthy fetuses. Besides, histopathology showed toxoplasmosis-like lesions in placentas as well as nested PCR was positive for all organs from stillborn and placenta examined. In the next step of the study, 24 non-pregnant sheep (G1 and G2) were submitted to controlled mating season and 15/24 (62.5%) got pregnant while 9/24(37.5%) did not. Those who did not get pregnant presented reproductive pathologies such as anestrous (66.6%), follicular cysts (11.1%), hydrometra and mucometra (22.2%). Next, it was investigated the elimination of Toxoplasma gondii in semen from naturally infected males. In this regard, 65 males were submitted to anti-T. gondii antibody screening using Indirect Immunofluorescence (IFI). Animals serologically positive were submitted to semen collection for parasite DNA detection. In the serological test 6/65 (9.2%) of the animals were positive. In the nested PCR using semen 4/6 (66.6%) of the animals were also positive. In the third series of experiments, 245 organs from stillborns and 28 placentas from sheep with reproductive disturbances were evaluated. Following necropsy, brain, cerebellum, spinal cord, lungs, heart, spleen, liver and placenta were harvest for nested PCR and histopathology. Nested PCR confirmed three fetuses and 2 stillborns (14.3%) positive for T. gondii in fetal organs and placenta, where heart and placenta were the most affected ones. Histopathology evidenced macroscopic damage suggesting T. gondii infection in 2/35 (5.7%) of the placentas, and toxoplasmosis-like damage in placentas with non-supurative infiltration, several necrosis focuses associated to tissue cysts. In conclusion, insemination using fresh semen experimentally contaminated with different doses of tachyzoites from T. gondii is capable of infecting sheep and produce reproductive pathologies, compromising the reproductive life of females. The detection of the proliferative form of the parasite in semen from males naturally infected by nested PCR reinforces the need for intensifying studies about the possibility ofhorizontal transmission of the parasite via semen in sheep. In addition, we reported the involvement of T. gondii in aborted fetuses and placentas of sheep naturally infected in Brazil; these data have not been described earlier in the literature. / Objetivou-se com este trabalho, estudar os aspectos clínicos, epidemiológicos, patológicos e reprodutivos da infecção natural e experimental por Toxoplasma gondii em ovinos. No primeiro, estudou-se a transmissão venérea do T. gondii através da infecção experimental via sêmen em 41 ovelhas soronegativas e divididas em três grupos: G1: 15 fêmeas inseminadas com sêmen contaminado com 6,5 X 104 taquizoítos; G2: 15 com 4 X 107 taquizoítos e G3: 11 fêmeas inseminadas com sêmen sem taquizoítos. Para a confirmação da infecção pelo T. gondii foram realizados exames sorológicos e detecção do DNA parasitário no sangue, através do PCR nested aos 0, 7, 14, 21, 28, 49, 63, 123 dias pós infecção (p.i.). No G1 apenas 5/15 (33,3%) fêmeas soroconverteram, enquanto que no G2 15/15 (100%) soroconverteram. Na PCR nested observou-se que 14/15 (93,3%) das fêmeas do G1 e 14/15 (93,3%) do G2 foram positivas para T. gondii e no G3 todas as amostras foram negativas. Os transtornos reprodutivos foram diagnosticados através de exames ultra-sonográficos e observou-se que no G1, 9/15 (60%) apresentaram reabsorção embrionária e 40% delas mantiveram a gestação, observando-se partos normais e distócicos, natimortos e atonia uterina. No G2 observaram-se reabsorções embrionárias em 15/15 (100%) das ovelhas e outras patologias como 2/24 (8,3%) hidrometra, 2/24 (8,3%) mucometra e 2/24(8,3%) cistos foliculares. No G3, 8/11 fêmeas gestaram e pariram fetos viáveis. No exame histopatológico observaram-se lesões características da toxoplasmose em placentas e PCR nested positiva em todos os órgãos dos natimortos e placentas examinados. Em uma próxima etapa do estudo, as 24 ovelhas não gestantes (G1 e G2) foram submetidas à estação de monta controlada e destas 15/24 (62,5%) emprenharam. Aquelas que não emprenharam apresentaram patologias reprodutivas como:anestro (66,6%), cistos foliculares (11,1%), hidrometra e mucometra (22,2%). No segundo experimento pesquisou-se a eliminação de T. gondii no sêmen de reprodutores ovinos naturalmente infectados. Foram utilizados 65 reprodutores submetidos inicialmente à pesquisa de anticorpos anti-T. gondii por meio da técnica de Imunofluorescência Indireta (IFI). Os animais sorologicamente positivos foram submetidos à colheita de sêmen para detecção do DNA parasitário. Na sorologia observaram-se 6/65 (9,2%) animais positivos. No PCR nested de sêmen 4/6 (66,6%) animais foram positivos. No terceiro experimento foram examinados 245 órgãos de fetos abortados e natimortos, além de 28 placentas procedentes de ovelhas com distúrbios reprodutivos. À necropsia foram coletados fragmentos de cérebro, cerebelo, medula, pulmão, coração, baço, fígado e placenta para realização do PCR nested e exame histopatológico. Na PCR nested foram confirmados três fetos e dois natimortos (14,3%) positivos para T. gondii em órgãos fetais e placentas, destacando-se o coração e a placenta como órgão de predileção. No exame histopatológico foram observadas lesões macroscópicas sugestivas da infecção por T. gondii em 2/35 (5,7%) das placentas, além de lesões características da toxoplasmose nas placentas como infiltração não supurativa, múltiplos focos de necrose e mineralização, além da presença de cistos teciduais. A partir dos resultados obtidos, conclui-se que a inseminação utilizando sêmen fresco experimentalmente contaminado com diferentes doses de taquizoítos de T. gondii é capaz de infectar ovelhas e provocar patologias reprodutivas, comprometendo a vida reprodutiva das fêmeas. A detecçãoda forma proliferativa do parasito no sêmen de reprodutores naturalmente infectados por meio da técnica da PCR nested, reforça a necessidade de intensificar os estudos sobre a possibilidade da transmissão horizontal do parasito via sêmen na espécie ovina. Além disso, constatou-se envolvimento de T. gondii em fetos abortados e em placentas de ovinos naturalmente infectados no Brasil; esses dados não haviam sido descritos anteriormente na literatura.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-06T13:45:04Z No. of bitstreams: 1 Erika Fernanda Torres Samico Fernandes Cavalcanti.pdf: 636532 bytes, checksum: 2f815e6a83dda45939bd553b7269f4f7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-06T13:45:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erika Fernanda Torres Samico Fernandes Cavalcanti.pdf: 636532 bytes, checksum: 2f815e6a83dda45939bd553b7269f4f7 (MD5) Previous issue date: 2011-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this work to study the occurrence of anti-Toxoplasma gondii (T. gondii) and Leptospira spp. in pig killed in the Micro Valley Ipojuca Wasteland of Pernambuco We collected blood samples from 305 animals from 11 municipalities. Sera were submitted to the Immunofluorescence Assay (IFA) for detection of anti-T. gondii, by adopting a cutoff of 1:64. In animals positive for IFA was used the PCR technique to detect the DNA of T. gondii in fragments of heart. To search for anti Leptospira spp. used the microscopic agglutination test (MAT). Among all samples, we observed that thirty-eight 38/305 (12.46%) were positive for anti-T. gondii and 267/305 (87.54%) were negative, distributed in 11 cities. Of the animals positive serology, 21/38 (55.26%) were also positive in PCR. Results related to Leptospira spp. showed that 78/305 (25.57%) positive samples and 227/305 (74.42%) negative, distributed in 11 municipalities. The most frequent serovars were Icterohaemorrhagiae, Copenhageni, Djasiman and with frequencies of 55.12%, 17.94% and 6.41% respectively. It was concluded that pigs were beaten in the region exposed to infection by these agents and raises a discussion about the health risks of food handlers and consumers of carcasses and the need to minimize them through the implementation of surveillance programs and corrective actions in region studied. / Objetivou-se com este trabalho estudar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii (T. gondii) e Leptospira spp. em suínos abatidos na Microrregião do Vale do Ipojuca, Agreste do Estado de Pernambuco. Foram coletadas 305 amostras de sangue de animais provenientes de 11 municípios. Os soros foram submetidos à Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para pesquisa de anticorpos anti-T. gondii, adotando-se ponto de corte de 1:64. Nos animais positivos para RIFI foi utilizada a técnica da PCR para detectar o DNA do T. gondii em fragmentos de coração. Para pesquisa de anticorpos anti-Leptospira spp. utilizou-se a técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM). Das amostras analisadas, observou-se que 38/305 (12,46%) foram positivas para anticorpos anti-T. gondii e 267/305 (87,54%) foram negativas, distribuídas em 11 cidades. Dos animais positivos na sorologia, 21/38 (55,26%) também foram positivos na PCR. Os resultados referentes à infecção por Leptospira spp. demonstraram que 78/305 (25,57%) amostras foram positivas e 227/305 (74,42%) negativas, distribuídas nos 11 municípios estudados. Os sorovares mais frequentes foram Icterohaemorrhagiae, Copenhageni e Djasiman com frequências de 55,12%, 17,94% e 6,41%, respectivamente. Conclui-se que os suínos abatidos nessa região foram expostos à infecção por esses agentes e levanta uma discussão sobre os riscos à saúde dos manipuladores das carcaças e dos consumidores e a necessidade de minimizá-los por meio da implantação de programas de vigilância e ações corretivas na região estudada.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-11T14:18:48Z No. of bitstreams: 1 Gilsan Aparecida de Oliveira.pdf: 332041 bytes, checksum: fe9d03ee3bf15e812cc2de031a88a236 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T14:18:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gilsan Aparecida de Oliveira.pdf: 332041 bytes, checksum: fe9d03ee3bf15e812cc2de031a88a236 (MD5) Previous issue date: 2008-02-28 / Despite its immunological properties for the newborn, milk is also considered a potential source of transmission of pathogens, and some of them cause zoonoses. The non-pasteurized goat milk has been implicated as an important source of infection of T. Gondii in children of rural areas which are feeding habit of eating raw milk. .Serological studies carried out in the Zona da Mata of the state of Pernambuco - Brazil shown that Toxoplasma gondii is widely disseminated in the goat herd in the region. The objective of this work was to find the presence of IgG immunoglobulin against T. Gondii in milk and to conduct an epidemiological investigation of the infection in lactating goats from creations of subsistence of the municipality of Jaboatão dos Guararapes – State of Pernambuco - Brazil. Samples of blood and milk were collected of 68 lactanting goats of various ages and races, in five rural properties of the said council. An investigative questionnaire was applied to each property. Samples were processed and tested by indirect immunofluorescence test for search of IgG, adopting the cut-off of 1:16 for both, followed by dilutions in factor 2 up to the dilution of1:516 for the serum and 1:64 for milk, for samples seropositive in the previous dilution. It was obtained seropositivity of 88.23%, 77.94%, 76.47%, 70.58%, 58.82% and 50% for dilutions of 1:16, 1:32, 1:64, 1:128, 1:256 and 1:512 respectively. Positivity in the samples of milk was 39.70%, 29.41% and 7.35% for dilutions of 1:16, 1:32, 1:64, respectively. Concluding that there is a statistical correlation between the result of association found in milk and in serum and in milk goats that are capable of eliminating the class IgG antibodies through milk at different times of lactation. / Apesar de suas propriedades imunológicas para o recém-nascido, o leite também é considerado como uma via potencial de transmissão de patógenos, sendo alguns deles causadores de zoonoses. O leite caprino não pasteurizado tem sido implicado como importante via de transmissão de T. gondii em crianças das áreas rurais as quais têm hábito alimentar de ingerir leite cru. Estudos sorológicos realizados na Zona da Mata do estado de Pernambuco demonstraram que Toxoplasma gondii encontra-se amplamente disseminado no rebanho caprino dessa região. Objetivou-se, neste trabalho, pesquisar a presença de imunoglobulinas da classe IgG contra T. gondii em leite e realizar inquérito soroepidemiológico da infecção em cabras lactantes de criações de subsistência do município de Jaboatão dos Guararapes - PE - Brasil. Foram coletadas, por amostragem de conveniência, 68 amostras de sangue e leite de cabras de idade e raças variadas, em cinco propriedades rurais do referido município. Um questionário investigativo foi aplicado em cada propriedade. As amostras foram processadas e submetidas ao teste de imunofluorescência indireta para pesquisa de IgG, adotando-se o ponto de corte de 1:16 para ambas, seguindo-se com diluições em fator 2 até a diluição de 1:516 para o soro e 1:64 para o leite, nas amostras sororreagentes na diluição anterior. Obteve-se soropositividade de 88,2%, no título de 1:16. A positividade nas amostras de leite foi de 39,7%, para o ponto de corte de 1:16. Conclui-se que existe a presença de anticorpos da classe IgG no leite associada a presença de anticorpos no soro e que cabras em diferentes tempos de lactação são capazes de eliminar esses anticorpos da classe IgG pelo leite, sendo ainda a soropositividade dos animais associado a relato de aborto e filho nascido com deficiência visual.