Orientador: Satie H. Ogo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T15:47:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Torsoni_MarcioAlberto_M.pdf: 12383432 bytes, checksum: 55c7560b08c5d521c6907cc2cf9d2eaf (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: O hemolisado de Geochelone carbonaria apresentou heterogeneidade eletroforética. No hemolisado foram observados 8 componentes e o oitavo componente foi completamente reduzido quando a amostra foi tratada com agente redutor, indicando que tenha sido originado pela polimerização através da formação de pontes de dissulfeto entre as hemoglobinas. O hemolisado tratado com agente alquilante (iodoacetamida), apresentou apenas 3 frações em cromatografia de troca iônica. A determinação das cadeias que constituem estes componentes demonstrou que apenas dois componentes são estruturalmente diferentes e constituídos pelas cadeias de globina (G1G2)2 e (G1G3)2. Baixa afinidade da hemoglobina pelo oxigênio foi observada tanto para o hemolisado total como para o hemolisado "stripped". O hemolisado "stripped" na presença de ATP ou IHP, mostrou ligeira alteração com relação ao valor de P50. Em concentrações fisiológicas o efeito destes polifosfatos foi ainda menor. No entanto, o sítio para ligação de polifosfatos mostrou maior afinidade pelo IHP. Todas as formas do hemolisado apresentaram efeito Bohr e os valores de nH foram sensivelmente maiores em pH próximos de 7,5 e em presença de ATP. A polimerização iniciou-se logo após a hemólise e após 210 dias de estoque do hemolisado "stripped", 73% do hemolisado era constituído pelo polímero maior (256.000 Da) e 27% por hemoglobina tetramérica. O número de grupos -SH reativos encontrados para o hemolisado "stripped" logo após a hemólise (5,3 SH/mol de Hb), corrobora os dados eletroforéticos e de peso molecular. O hemolisado total apresentou 7,3 SH/mol de Hb, logo após a hemólise. A diferença observada entre o hemolisado "stripped" e total, pode ser devido a presença de tióis não protêicos no hemolisado total, possivelmente glutationa. A ligação de glutationa a hemoglobina pode aumentar a heterogeneidade eletroforética, originando componentes GS-SHb. As pontes de dissulfeto mistas foram menos acessíveis ao agente redutor / Abstract: G. carbonaria hemolysate shows electrophoretic heterogeneity. In hemolysate 8 components were observed. The eighth component was completely reduced when the sample was treated with a reducing agent, indicating that it originated through polymeryzation induced by dissulphide bridge formation between hemoglobins. Hemolysate treated with an alkylating agent (iodoacetamide) presented only 3 fraction in ion exchange chromatography. The determination of constituent globin chains demonstrated that only two types of structurally distinct components exist, constituted by globin chains (G1G2)2 e (G1G3)2. Low hemoglobin oxygen affinity was observed for total and stripped hemolysate and both were dependent of pH. Stripped hemolysate showed a slight alteration in P50 values in the presence of ATP or IHP. In physiological concentration, the effect of these polyphosphate was even smaller. The polyphosphate binding site demonstrated higher affinity for IHP. The nH values were considerably higher in pH dose to 7,5 and in the presence of ATP. Polymeryzation initiated soon after hemolysis, and after 210 days of stocking the stripped hemolysate showed 73% the larger polymer (256.000 Da) and 27% of tetrameric hemoglobin. The number of reactive -SH groups found for the stripped hemolysate following hemolysis (5,3 SH/moles of Hb) corroborates the electrophoretic and molecular mass data. Total hemolysate presented 7,3 SH/moles of Hb following hemolysis. The observed difference between total and stripped hemolysate may be due to non-proteic thiol, present in total hemolysate, possibly glutathione. The binding of glutathione to hemoglobin can raise electrophoretic heterogeneity, originating GS-SHb components. The mixed dissulphide bridges were less acessible to the reducing agent / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

SOBRAL JÚNIOR, P. Avaliação da eficácia da eritropoetina humana recombinante no controle de anemias em paciente hemodialisados. 2016. 70 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-06-09T13:00:38Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_psjunior.pdf: 1757047 bytes, checksum: f0e53ee286b144c180de65ad2e323cb5 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-06-09T13:00:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_psjunior.pdf: 1757047 bytes, checksum: f0e53ee286b144c180de65ad2e323cb5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T13:00:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_psjunior.pdf: 1757047 bytes, checksum: f0e53ee286b144c180de65ad2e323cb5 (MD5) Previous issue date: 2016-01-29 / Chronic kidney disease is characterized by renal impairment of glomerular function, tubular and endocrine, slow, progressive and irreversible, with anemia as a major complication, whose intensity and prevalence are related to the stage of kidney disease and disability in production erythropoietin (EPO). Treatment with erythropoietin recombinant human (rHuEPO) is now used worldwide and has satisfactory response in the regulation of hemoglobin levels. The aim of this study was to evaluate the efficacy of rHuEPO in hemodialysis patients through assessment and correlation of haematological parameters erythrocyte line (red blood cells, hematocrit and hemoglobin), and biochemical (iron and ferritin). For this proposition, we evaluated two distinct groups, one test group, with 77 patients who made use of rHuEPO for three weeks, and a second control group, with 38 patients who did not use this treatment, totaling 115 people. Data were statistically analyzed in spreadsheet Microsoft Office Excel 2010 program Epi-Info 4.1, Student's t-test, and Graph Pad Prism program, version 5.0, with Pearson's chi-square correlation through SPSS, version 10.0. The considered confidence interval was 95% and significance in * p <0.05. In the group rHuEPO employed, during three weeks, there was an increase in hemoglobin from baseline in the order of 3.3% seven days; 30.6% fourteen days; and 46.9% with twenty-one days. Hematocrit increased 3.5% seven days; 30.9% fourteen days; 47.2% with twenty-one days. Red blood cells increased by 4.5% seven days; 31.8% fourteen days; and 50% with twenty-one days. The same parameters were evaluated for the group that did not rHuEPO in this, there was no statistically significant change. As for the biochemical aspects of iron and ferritin, examined in this study, there was no relevance in the two groups and no difference between them. It follows that rHuEPO is effective for the increase of hemoglobin, hematocrit and red blood cells, and that as the level of iron and ferritin were within the reference values ​​for the two groups, an analysis of hematological parameters in the use of rHuEPO it was not compromised, reaching a variation of hemoglobin, the end of the third week of 2.92 g / dL, confirming the efficacy of treatment with rHuEPO. / A doença renal crônica é caracterizada pelo comprometimento renal da função glomerular, tubular e endócrina, de maneira lenta, progressiva e irreversível, tendo a anemia como uma importante complicação, cuja intensidade e prevalência estão relacionadas ao estágio da doença renal e à deficiência na produção de Eritropoetina (EPO). O tratamento com eritropoetina recombinante humana (rHuEPO) já é aplicado mundialmente e tem resposta satisfatória na regularização dos níveis de hemoglobina. O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia da rHuEPO em pacientes hemodialisados, por meio de avaliação e correlação de parâmetros hematológicos da linhagem eritrocitária (hemácias, hematócrito e hemoglobina), e bioquímicos (ferro e ferritina). Para tal proposição, foram avaliados dois grupos distintos, sendo um grupo teste, com 77 pacientes, que fizeram uso de rHuEPO por três semanas, e um segundo grupo controle, com 38 pacientes que não utilizaram este tratamento, totalizando 115 pessoas. Os dados foram tabulados e analisados estatisticamente em planilha do programa Microsoft Office Excel 2010, Epi-Info 4.1, Teste t-Student, e do programa Graph Pad Prism, Versão 5.0, com correlação de Pearson Qui-quadrado, por meio do programa SPSS, versão 10.0. O intervalo de confiança considerado foi de 95% e significância em *p<0,05. No grupo que empregou rHuEPO, no decorrer de três semanas, houve aumento de hemoglobina, em relação ao basal, na ordem de 3,3% com sete dias; 30,6% com catorze dias; e 46,9% com vinte e um dias. O hematócrito aumentou 3,5% com sete dias; 30,9% com catorze dias; 47,2% com vinte e um dias. As hemácias tiveram um aumento de 4,5% com sete dias; 31,8% com catorze dias; e 50% com vinte e um dias. Os mesmos parâmetros foram avaliados para o grupo que não usou rHuEPO, neste, não houve alteração estatisticamente significativa. Quanto aos aspectos bioquímicos de ferro e ferritina, examinados nesse estudo, não foi observada relevância nos dois grupos analisados e nem diferença entre eles. Conclui-se que a rHuEPO se mostrou eficaz pelo aumento da hemoglobina, hematócrito e hemácias, e que, como o nível de ferro e ferritina, estavam dentro dos valores de referência para os dois grupos avaliados, a análise dos parâmetros hematológicos no uso de rHuEPO não foi comprometida, alcançando uma variação de hemoglobina, ao final da terceira semana, de 2,92 g/dL, confirmando a eficácia de tratamento com rHuEPO.

Orientador: Aldo Focesi Jr / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T08:36:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GaldamesPortus_MariaIsabel_D.pdf: 5828884 bytes, checksum: 6a5942ec044e7226d47b55054cab8897 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Neste trabalho analisou-se e as propriedades funcionais intrínsecas de oxigenação e de oxidação das hemoglobinas, tetramérica de Clarias sp. peixe de respiração aérea, e dimérica de Liophis miliaris, serpente aquática, considerando-se a base molecular e termodinâmica de união com o ligante, efeito Bohr e cooperatividade, e a relação estruturafunção-evolução As propriedades funcionais de oxigenação da hemoglobina de Clarias sp., de um componente eletroforético de migração anódica, mostraram alta afmidade pelo oxigênio (P50 de 4,5 torr), sem efeito Bohr e cooperativa. Com valores de n = 1,5 na forma "stripped" e efeito alostérico heterotrópico do ATP, com Kd 3 x 104 M-¹ em pH 7,6. O potencial redox revelou uma baixa energia livre intrínseca, DGo° de 2,0 Kcal morl -¹, menor do que a da hemoglobina humana e Hb I de truta, compatível com a alta afinidade pelo oxigênio e com instabilidade da estrutura quaternária, provavelmente devido a substituições do contato a1b2. Os valores de DG°, em função do pH, com uma transição T®R com pK próximo a pH 7,5, independente ao efeito Bohr e de fosfatos orgânicos, sugerem a ionização de uma histidina associada ao processo alostérico. Os valores de DG° do potencial redox da hemoglobina de Clarias sp. e de Liophis miliaris na presença de A TP em função do pH não foram modificados, não devendo contribuir energeticamente na transição quaternária. O efeito Bohr aparente ou de ânion observado deve-se à mudanças de interações eletrostáticas da união do ligante induzi das pelo pH e não ao efeito Bohr intrínseco. Os estudos de óxido-redução da hemoglobina de Liophis miliaris, dimérica na forma "stripped", mostraram mudanças conformacionais da estrutura terciária e ausência da transição quatemária T®R. Observou-se a tetramerização, cooperatividade e transição com pK próximo a 7,5 na presença de ATP, com , DG° próximo a 0,4 Kcal mol-¹, envolvem a ionização de uma ou mais histidinas da cadeia beta e a estabilização tetrâmero por interações eletrostáticas e/ou pontes salinas do contato a1b2 originadas por este efetor alostérico. O modelo dímero-tetrâmero proposto para Liophis miliaris não inclui a formas quatemárias intermediárias da forma T ou R, devido à ausência do contato a a1b2 na forma desoxigenada, seguindo o comportamento do modelo de MWC que envolve só um ajuste da estrutura terciária em ambos dímeros associados à cooperatividade. Estas propriedades funcionais, estruturais e termodinâmicas das hemoglobinas de vertebrados não mamíferos, de respiração aérea, refletiriam as características moleculares dos ancestrais dos primeiros vertebrados, hemoglobinas de alta afinidade pelo oxigênio, de baixa energia livre intrínseca, provavelmente devido a substituições específicas do contato a1b2 / Abstract: The functional oxygenation and oxidation properties of tetrameric hemoglobin were analyzed for Clarias sp., an air breathing fish, and dimeric hemoglobin Liophis miliaris, a water snake, relating to the molecular and thermodynamic of the ligand binding, the Bohr effect and cooperativity. The structure-function-evolution were considered in this hemoglobin. The oxygenation properties of Clarias sp. hemoglobin with one anodic electrophoretic component and two globin chains, showed high oxygen affinity, Pso of 4.5 torr, absence of Bohr effect, cooperativity n = 1,5 , in the stripped form, and an evident heterotropic allosteric effect for ATP, with Kd 3xl04 M-², at pH 7.6. The redox potentials showed a low intrinsic free energy DG° of 2.0 Kcal mol-¹, lower in relation to trout I and human hemoglobin. Consistent with the high oxygen affmity and instability of the quatemary structure, probably due to the substitutions at a1b2 interface. The free Gibbs energy value and the T ®R transition with pK dose to pH 7.5, independent of the Bohr and organic phosphate effects, suggest a histidine ionization associated with this allosteric processo The invariability of DG° redox potential values with pH in the presence of ATP, observed for Clarias sp. and Liophis miliaris hemoglobins, seems not to energetically contribute on the quatemary transition. The apparent Bohr effect or the anion effect could be attributed to the alteration in the electrostatic association of the ligand, induced by the pH, and not to the intrinsic Bohr effect. The oxidation-reduction studies of hemoglobins of Liophis miliaris dimeric in the stripped form showed conformational change in the tertiary structure and absence of the quaternary transition T ®R. The tetramerization, cooperativity and transition with pK close, to 7.5, in the presence of A TP, with DG° 0.4 Kcal mol-¹, suggest the ionization of histidine of the beta chain and stability of the tetramer by electrostatic interaction or salt bond contact a1b2, originated by this allosteric effect. The dimer-tetramer model proposed for Liophis miliaris does not include the quaternary intermediates forms of T or R, due to the absence of the contact a1b2 in the deoxygenated form, according to the model of MWC, which would be envolve one fitting of the tertiary structure in both dimers, associated at the cooperativity. These functional, structural and thermodynamic properties of hemoglobins of air breathing non-mammals, could reflect the molecular characteristics of the ancestral primitive vertebrates hemoglobins which high oxygen affmity, low intrinsic free energy an the specific substitutions at the a1b2 contact / Doutorado / Doutor em Ciências

Orientador: Sara Terezinha Olalla Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-23T18:13:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Terra_HeloisaTerezinhaMeneghiniBichir_M.pdf: 3475163 bytes, checksum: 352c24fb1c5c45244ee98a2129f6aacd (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: O eritrócito humano contém uma tirosina quinase associada à sua membrana que fosforila a banda 3. O sítio de fosforilação tem sido identificado preferencialmente na tirosina 8, no N-terminal da banda 3, mas também na tirosina 21 e, essa região tem sítios de ligação com alta afinidade por várias proteínas periféricas incluindo hemoglobinas, hemicromos e enzimas glicolíticas. Muitas das funções das proteínas são controladas por sucessivas modificações reversíveis como seu estado de fosforilação. A fosforilação do domínio citoplasmático da banda 3 do eritrócito humano purificado, por uma proteína tirosina quinase, resultou na inibição da ligação com aldolase, G3PD, fosfofrutoquinase e hemoglobina e ativação de glicólise. No presente estudo, examinamos o grau de fosforilação da tirosina da banda 3 em 34 pacientes com hemoglobinopatias: 15 com anemia falciforme, 6 com S¿BETA¿ talassemia, 6 com hemoglobinopatia SC e 7 com p talassemia. Para esta avaliação foi utilizada a técnica de immunoblotting com anticorpo anti-fosfotirosina. No grupo de pacientes com doenças falciformes, a fosforilação aumentou de 2 a 10 vezes comparada com a fosforilação do controle normal (SS=7.8±2.7 vezes; SC=3.8±1.3 vezes; Sp= 5.2±2.0 vezes). No grupo de ß talassemia a fosforilação também aumentou ('BETA¿ tal=4.3±t3.7 vezes), mas nesse grupo 3 pacientes apresentaram fosforilação da tirosina da banda 3 próximo do nível apresentado pelo controle normal (1, 1.5 e 1.7 vezes). No entanto, não houve diferença significativa na fosforilação da tirosina da banda 3 entre os vários grupos testados, exceto quando comparamos a fosforilação em hemácias intactas de pacientes com anemia falciforme(SS) e pacientes com hemoglobinopatia SC (U=6, p<0.02). As conseqüências do aumento da fosforilação em tiro sina em hemoglobinopatias ainda não estão claras, mas além da estimulação da glicólise, é possível uma ligação inadequada da banda 3 com anquirina, com instabilidade do esqueleto. Os mecanismos desta lesão necessitam de maior investigação / Abstract: The band 3 protein is the main erythrocyte protein phosphorylated by tyrosine kinase and this phosphorylation is observed in ghost and intact cells when vanadate is present. The major phosphate acceptor site is at tyrosine residue 8 in the N-terminus of band 3. This region of the cytoplasmic domain has high affinity binding sites for several proteins including hemoglobin. With the aim to investigate the tyrosine phosphorylation of band 3, we performed immunoblotting of intact red cells using anti-phosphotyrosine antibody of 21 patients with sickle cell disorders (11 SS, 5 Sß, 5 SC), 7 patients with 'BETA¿ thalassaemias (5 'BETA¿ thal intermedia, 2 'OMEGA¿¿BETA¿ thal ), 10 normal controls and one patient with hereditary spherocytosis. They had not received transfusion for the last 4 months and all were clinically stable. Our results showed an increased tyrosine phosphorylation of two proteins, in the 100kD and 80kD regions, in sickle cell and ß-thalassaemic red cells when compared to the normal controls and to the patient with hereditary spherocytosis. Immunoprecipitation of the lysed red cells with anti-band 3 antibody and immunoblotting with anti-phosphotyrosine antibody confirm that the 100kDa tyrosine phosphorylated protein was band 3. In the sickle cell disease group, the band 3 tyrosine phosphorylation varied from 2 to 10 fold increase compared to control (SS= 7.8±2.7 fold; SC= 3.8±1.3 fold; SJ3= 5.2±2.0 fold). It was also higher in the ß-thalassaemic group ('BETA¿-thal= 4.3±3.7 fold). There was no significant difference in tyrosine phosphorylation among the various groups tested, except when we compared the phosphorylation in intact red cells of patients with sickle cell anaemia and haemoglobinopathy SC (U=6, p<0.02). The tyrosme phosphorylation of band 3 was increased in Haemoglobinopathies even in the absence of high reticulocyte count. At least two mechanisms might be involved in the increased tyrosine phosphorylation of band 3 in these haemoglobin disorders, probably related to the endogenous reactive oxygen intermediates generated by the abnormal erythrocyte: an inhibition of protein tyrosine phosphatase activity or an activation of the protein tyrosine kinase p72syk / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Orientador: Eneida de Paula / Dissertação (mestrado) - Unversidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T18:12:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Prete_PauloSergioCastilho_M.pdf: 7512602 bytes, checksum: 3cde985a4e814dabb7fb0d50b30a4d23 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Surfactantes apresentam efeito concentração dependente sobre membranas de eritrócitos, podendo proteger ou solubilizar essas membranas. Neste trabalho estudamos a interação de surfactantes não-iônicos da série Tween (Polioxietileno-sorbitol) com membranas de eritrócitos humanos. Triton X1O0 (t-octilfenoxi polietoxi etanol), foi usado como controle para os ensaios hemolíticos. Inicialmente fizemos a carActerização físico-auímicA dos surfActAntes atrAvés da determinAção da CMC, e medidAs de lH-RMN, que comprovaram a purezA e composição estruturAI dos surfactantes. Estudos hemolíticos em eritrócitos humAnos (com suspensões de Ht de 5 20%) revelaram que os surfactantes da série Tween (20, 40 e 80) têm efeito protetor e lítico Acima dAS suas respectivAs CMCs (59, 27 e 12 _), enquAnto que com o Triton Xloo estes efeitos ocorrem na faixa dA sua concentrAção micelar críticA (0,25 mM). O ensaio de proteção a hemólise foi feito em condições hipotônicAs (77 mM de NaCI) e o de lise em condições isotônicas. Em Ambos ensAios mediu-se fotometricamente A saída de hemoglobina (Hb), do eritrócito. DAS concentrAções de surfActAnte parA proteção (Cprot), início (csat) e 100% de hemólise (CSOI) determinamos AS razões molares surfActante:lipídio no eritrócito para proteção e lise (RProt, Rsat, Rso respectivamente). Nos ensaios em condições isotônicas medimos também a liberação do I( intracelular (por potenciometria) como um método alternativo de quantificar a hemólise. Assim como as medidas de liberação de Hb, os ensaios de liberação de I( mostraram-se adequados aos estudos hemolíticos. Detectou-se uma estreita correlação entre os valores de csat e esol obtidos pelas duas técnicas, embora a liberação de I( ocorra em concentrações menores de surfactante, indicando que a saída de I( precede a de Hb, na hemólise. Em concentrações muito altas esses surfactantes podem induzir a oxidação da Hb, sendo que o Tween 80 tem maior poder oxidante que os demais da série (Tween 80 > Tween 40 > Tween 20) e o Triton X100 não oxida a Hb. O efeito oxidante do Tween 80 impediu a determinação dos valores de Rso1 em Ht mais altos. O tratamento proposto por Lichtenberg (1985) para a quantificação da razão efetiva surfactante:membrana para solubilização não se mostrou adequado à análise do efeito hemolítico dos surfactantes da série Tween, cujos valores de R são muito altos, caracterizando-os como pouco hemolíticos / Abstract: Surfactants present hemolytic effects and depending on their concentration, they can either protect or solubilize erythrocyte membrane. In this work we have studied the interaction of nonionic surfactants from the Tween series (polyoxyethylenesorbitan) with human erythrocytes membranes. Triton Xl00 (t-octylphenoxypolyethoxyethanol) was used as a control, in hemolytic assays. To assure the purity and structural composition of the surfactants we employed CMC determination and lH-NMR characterization. Hemolytic studies with human erythrocytes (Ht 5 - 20%) showed that surfactants from the Tween series (20,40 and 80) have a protective and Iytic effect upon the membrane above their respective CMCs (59, 27 and 12 _), while Triton Xl00 presents those effects at its CMC range (0,25 mM). The "protection" assays were carried out in a hypotonic media (NaCI 77mM) and the Iysis experiments in isotonic conditions. In both assays Hb release from the erythrocyte was spectrophometrically measured. From the surfactant concentrations for protection (Ol'Ot), onset (csat) and 100% hemolysis (csol) we determined the surfactant:lipid molar ratios for protection and Iysis (RProt, Rsat, R$OI respectively). At isotonic condition we measured also the release of intracelular K'" (by potenciometry) as an alternative method for quantifying hemolysis. As well as Hb release measurements, the assays of K'"-release showed to be quite adequate for the study of hemolysis. There is a good correlation between csat and csol values obtained by the two techniques, although K'"-release occurs at lower surfactant concentrations than Hb-release. In extremely high concentrations, these surfactants induce Hb oxidation, being Tween 80 the one with the highest oxidative power, in comparison to the other Tweens (Tween 80 > Tween 40 > Tween 20). Triton X100 does not oxidise Hb. The oxidative effect of Tween 80 prevented the determination of Rso1 values in the highest Hts. The treatment proposed by Lichtenberg (1985) for the quantification of surfactant:membran ratios for solubilization was not found adequate for the analysis of the hemolytic effect of Tweens, which R values are very high, characterizing them as weak solubilizers / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Maria de Fatima Sonati / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:34:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Duarte_DeniseFaustino_M.pdf: 7306197 bytes, checksum: 55a6878d5149e5503cb31be7cf7a85ea (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The abstract is available with the full electronic digital document / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador : Aldo Focesi Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T00:42:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ogo_SatieHatsushika_D.pdf: 5032096 bytes, checksum: 329361bf2d7474504add3e156ab07a61 (MD5) Previous issue date: 1982 / Resumo: O estudo de hemolisados de H.modestus e L.miliaris, duas serpentes aquáticas com diferentes graus de adaptação a esse ambiente mostraram por focalização isoelétrica em gradiente de sacarose (intervalo de pH do anfólito: 7,0 - 9,0), 3 e 5 componentes de hemoglobina. A pureza dos componentes foi controlada por técnica de imunodifusão dupla em gel de agarose. As propriedades funcionais foram estudadas com solução de hemoglobina, em ausência e em presença de ligantes fisiológicos e não fisiológicos. Na ausência de moduladores, as hemoglobinas de H.modestus apresentaram maior afinidade pelo oxigênio do que de L.miliaris, tendo valores de ?P IND. 50?, 1,0mm de Hg e 1,41mm de Hg respectivamente, em pH 7,0. Em presença de fosfatos orgânicos tais como ATP, GTP, 2,3DPG e IHP, esses valores tornaram-se maiores: 8,95, 10,0, 4,16 e 25,48mm de Hg em H.modestus e 17,81, 16,98, 9,11 e 25,70mm de Hg em L.miliaris, indicando menor afinidade Hb-?O IND. 2?. O efeito Bohr passou de -0,07 na hemoglobina desionizada de H.modestus a -0,38 e a -0,55 na presença de GTP e ATP respectivamente e na L.miliaris, de -0,30 na hemoglobina desionizada a -0,60 na presença de GTP e a -0,90 na presença de ATP. Entre os ânions polifosfatos, apenas o ATP e o GTP parecem ser fisiologicamente importantes nas serpentes, visto que apenas esses nucleosídeos trifosfatos foram encontrados no sangue das serpentes, em nossas determinações por cromatografia em Dowex 1-?X IND. 8?... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The study of the hemolysate of H.modestus and L.miliaris, two water snakes with different degrees of aquatic adaptations, by isoelectric foccusing using a pH gradient between 7,0 and 9,0 showed 3 and 5 haemoglobin components respectively. The homogenity of the components was checked by double immunodifusion in agarose gel. The functional properties were studied with haemoglobin solutions either in the presence or not of physiological and non physiological ligands. Stripped haemoglobin of H.modestus presented higher oxygen affinity than that of L.miliaris, where ?P IND. 50? values found were 1,0mm Hg and 1,41mm Hg respectively, in pH 7,0. In the presence of organic phosphates such as ATP, GTP, 2,3DPG and IHP, these values increased, showing lower oxygen affinity: 8,95mm Hg, 10,0mm Hg, 4,16mm Hg and 25,48mm Hg respectively in H.modestus and 17,81mm Hg, 16,98mm Hg, 9,11mm Hg and 25,70mm Hg in L.miliaris. The Bohr effect increased from -0,07 to -0,38 and -0,55 in the presence of GTP and ATP in H.modestus and from -0,30 in stripped haemoglobin to -0,60 in the presence of GTP and to -0,90 in the presence of ATP in L.miliaris. Among polyphosphate anions studied, ATP and GTP seems to be physiologicaly important, since only these nucleotides were found by Dowex 1-?X IND. 8? chromatography determination... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Tese (livre-docencia) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T01:08:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Meirelles_NilceCorrea_LD.pdf: 2406445 bytes, checksum: 3e0b6c9144a3fef6c92c9e2215622ff3 (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: Não informado / Abstract: A review is presented about: 1) Hemoglobin structure and function. 2) Erythrocyte membrane composition. a) The effects of vasodilators drugs dipyridamole and papaverine on the equilibrium dissociation curves of human hemoglobins treated by the drugs have been studied. b) The changes in the apoprotein in the presence of the drugs were investigated. c) The possibility that the drugs promote hemoglobin oxidation or an interaction with the metahaemoglobin were examined. d) Some functional and morphological properties of the human erythrocytes exposed to different concentrations of the drugs were studied, e) Attempts were made to verify the biophysical state of the ghosts from erytrocytes treated by papaverine and dipyridamole, by using spin labels methods / Tese (livre-docencia) - Univer / Livre-Docente em Ciencias Biologicas

Orientador: Antonio Sergio Ramalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T23:55:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gomes_RaquelRibeiro_M.pdf: 1313378 bytes, checksum: 1cbaa9198f43434595775fd6ceb3f2e7 (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: A hemoglobinopatia SC é a segunda síndrome falcêmica mais importante no Brasil, devido à sua significativa prevalência entre negróides e também pelas manifestações clínicas apresentadas Apesar disso, ela tem sido pouco estudada em nosso país, não existindo na literatura nacional nenhum trabalho específico sobre essa doença. No presente trabalho, procurou-se investigar o significado médico da doença SC no Estado de são Paulo, analisando-se dois tipos de casuísticas de pacientes SC. Em um deles, a doença SC foi investigada sistematicamente em uma grande amostra de pacientes negróides, verificando-se a morbidade da doença SC em termos relativos. Para tanto, foram examinadas 1000 amostras de sangue de pacientes negróides que procuraram atendimento médico no Hospital das Clínicas da UNICAMP, as quais foram submetidas a um teste de solubilidade para a hemoglobina S e à eletroforese de hemoglobinas em pH alcalino. Já no outro tipo de casuística , a morbidade da doença SC foi avaliada em termos absolutos , analisando-se as manifestações clínicas de uma amostra de 35 portadores dessa doença. Os resultados obtidos permitiram as seguintes conclusões: l - A hemoglobinopatia SC possui significativa morbidade em negróides paulistas , sendo encontrada entre doentes que freqüentam um hospital-escola em proporção significativamente superior à esperada casualmente na população negróide da mesma área geográfica; 2 - A prevalência de heterozigotos se é particularmente importante em amostras de pacientes negróides com determinadas manifestações clínicas, como dores ósteo-articulares, anemia e úlceras de membros inferiores; 3-.As dores ósteo-articulares constituem o principal motivo de diagnóstico da doença se em nosso meio, sendo um dos sintomas mais freqüentes dessa doença em nossos pacientes 4- Cerca de 77% dos nossos heterozigotos SC manifestam anemia, que é a segunda causa de diagnóstico dessa doença em nosso meio; 5- Apesar de a doença SC ser uma causa importante de úlceras de membros inferiores entre negróides paulistas, sobretudo entre homens com menos de 30 anos de idade, apenas cerca de 3% dos nossos heterozigotos SC apresentam essa alteração clínica, que é a sexta causa de diagnótico da doença SC em nosso meio; 6-A proporção de portadores da hemoglobinopatia SC que deixam de ser diagnosticados em nosso meio deve ser realmente bastante elevada, recebendo esses pacientes tratamento meramente sintomático; 7- A confusão diagnóstica entre a doença SC e a anemia falciforme também parece ser comum em nosso meio (cerca de 17% dos casos neste estudo); 8- Alta proporção dos nossos pacientes SC (cerca de 50% neste estudo) só são diagnosticados após os 15 anos de idade ou mesmo após os 30 anos; 9- Comparando-se a frequência de algumas manifestações clínicas dos pacientes SC com a observada entre negróides paulistas com a anemia falciforme, observou-se entre os primeiros menor incidência de dores ósteo-articulares , pneumonia, hepatomegatia e úlcera de membros inferiores. Já a incidência de dores abdominais, esplenomegalia, , necrose óssea e litíase biliar não diferiu significamente entre os dois grupos de pacientes; 10- Da mesma forma, comparando-se a freqüência de algumas manifestações clínicas dos pacientes SC com a observada entre negróides paulistas com a anemia microdrepanocítica ou s/pOtalassemia, observou-se entre os primeiros menor incidência apenas de hepatomegalia. A incidência de dores ósteo-articulares , dores abdominais, esplenomegalia , necrose óssea, úlceras de membros inferiores e litíase biliar não diferiu significativamente entre os dois grupos de pacientes; 11- O perfil clínico dos nossos pacientes SC não distoa gritantemente do observado por outros autores nacionais e estrangeiros entre indivíduos com a mesma doença; 12- A alvocitose é uma das alterações do esfregaço sanguineo mais freqüentes entre os indivíduos com a doença se, favorecendo esta hipótese diagnóstica em um caso de síndrome falcêmica / Mestrado / Mestre em Ciências

Tese (livre-docencia) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T01:30:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ogo_SatieHatsushika_LD.pdf: 2059896 bytes, checksum: 647191a2a16e40bc2fc188b51087c98f (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: As serpentes aquáticas Helicops modestus e Liophis miliaris apresentaram nos hemolisados totais 3 e 5 componentes respectivamente que pareceram ser formas diferentes da mesma hemoglobina. As curvas de equilíbrio com oxigênio da hemoglobina "stripped" de ambas as serpentes mostraram alta afinidade pelo oxigênio, de cerca de 1,0 mm Hg em pH 7,0, pequeno efeito Bohr alcalino, cerca de -0,7 em H. modestus e -0,30 em L. miliaris bem como baixa cooperatividade (nH cerca de 1,0) e pronunciado efeito de fosfatos orgânicos sobre ambos, afinidade pelo oxigênio e efeito Bohr. Assim, os valores de P50 encontrados em presença de efetor alostérico como ATP foram 17,8 mm Hg e 8,93 mm Hg, os valores do efeito Bohr foram cerca de-0,90 e -0,55 em Hb de L limiaris e H. modestus, respectivamente. Os valores dos coeficientes de Hill em pHs menores que 7,5 foram cerca de 2,0, enquanto que em pHs maiores foram de cerca de 1,0 mostrando ausência de cooperatividade entre as sub-unidades nestas condições...Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The complete abstract is avaiable with the full eletronic digital theses or dissertations / Tese (livre-docencia) - Univer / Bioquimica / Livre-Docente em Ciencias Biologicas