Orientadores : Satie Hatsushika Ogo, Marcio Alberto Torsoni / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-31T21:36:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cesquini_Maristela_M.pdf: 4737338 bytes, checksum: 2952df03fdaba0efee2200574902da5b (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Espécies reativas de oxigênio (EROs) são constantemente formadas em células aeróbicas, particularmente nas mitocôndrias de células aeróbicas e nos eritrócitos. Estas EROs, em condições normais, são removidas por um eficiente sistema de detoxificação celular composto principalmente pelas enzimas antioxidantes, glutationa, vitaminas e microelementos. Entretanto, quando a produção de EROs sobrepõem a capacidade do sistema antioxidante, reações deletérias podem ocorrer caracterizando a condição conhecida como estresse oxidativo. Em algumas patologias, tais como anemia falciforme, talassemia e deficiência em glicose-6 fostato desidrogenase, o estresse oxidativo é ainda maior. A anemia falciforme é uma hemoglobinopatia genética caracterizada pelo aumento da geração de ERO, liberação anormal de ferro da Hb e atividade diminuída do sistema antioxidante gerando elevado estresse oxidativo. Diversas terapias têm sido utilizadas no intuito de minimizar os danos oxidativos sofridos por estes indivíduos portadores desta patologia, como a administração de ácido ascórbico e vitamina E. Neste trabalho o efeito de flavonóides, nos processos oxidativos do sangue de indivíduos portadores de anemia falciforme foi investigado. Os flavonóides são compostos amplamente distribuídos na natureza e por estarem presentes em grande quantidade na dieta humana podem ser ingeridos naturalmente; sua atividade antioxidante, antiosteoporótica, anticancerígena, antiinflamatória e antiviral têm sido bem descrita. O efeito dos flavonóides (quercetina e rutina) foi estudado nos processos de oxidação de Hb, ligação de Hb à membrana celular, peroxidação lipídica da membrana eritrocitária e formação de grupos carbonil de proteínas no sangue de indivíduos normais e portadores de anemia falciforme. Em geral, o nível de danos oxidativos encontrados no sangue de indivíduos falcêmicos foi maior do que no sangue de indivíduos normais, diferindo apenas nos experimentos de oxidação de Hb, nos quais os resultados foram semelhantes para ambas as Hb, este fato talvez se deva a presença de grande quantidade de Hb A, proveniente da transfusão, no sangue deStes pacientes. A quercetina mostrou maior efeito antioxidante em todos os experimentos. A rutina comportou-se como pró-oxidante na oxidação da Hb quando utilizada em concentrações inferiores a 150 _M, mostrando um efeito protetor acima desta concentração. Com base nos resultados obtidos, pode-se especificar que os flavonóides, principalmente a quercetina, apresentam um efeito benéfico na proteção contra os danos oxidativos do sangue de indivíduos portadores de anemia falciforme / Abstract: Oxygen reactive species (ROS) are constantly formed in aerobic cells, particularly in the mithocondria and erythrocytes. These ROS, under normal conditions, are removed by an efficient antioxidant system composed by antioxidant enzymes, glutathione, vitamines and microelements. However, when the ROS production is higher than the antioxidant system capacity, pathological reactions can occur characterizing the oxidative stress condition. In some pathologies, such as sickle cell anaemia, thalassemia and glucose-6-phosphate desidrogenase deficience, the oxidative stress is increased. The sickle cell anaemia is a genetic disease characterized by an increase of ROS generation, abnormal iron release and lower antioxidant activity. Several therapies have been used in order to decrease the oxidative damages of these pacients, such as the acid ascorbic and vitamine E administration. Thus, it was interesting to investigate the effect of natural antioxidant compounds, the flavonoids, in oxidative processes in the blood of sickle cell anaemia individuais and to compare the results with of normal individuais. The flavonoids are compounds widely distributed in the nature and normaly consumed by humans since they are present in great amount in the human diet; their antioxidant, antiosteoporotic, antitumor, antinflamatory and antiviral activities have been described. The effect offlavonoids (quercetin and rutin) was studied in the process of Hb oxidation, binding of Hb to celular membrane, lipid peroxidation of erythrocyte membrane and protein carbonyl groups formation in the blood of sickle anaemia and normal individuais. In general, the oxidative damage levels found in the blood of sickle individuais were higher than that found in the blood of normal individuais, differing only in the experiments of Hb oxidation. In this case, the results were similar to both Hb, perhaps because of great amount of Hb A in the blood of sickle patients. The quercetin showed higher antioxidant effect in ali experiments. The rutin behaved as pro-oxidant in the Hb oxidation, when rutin is used in concentration lower than 150 11M, however it showed protective effect in higher concentrations. Supported by these results, we can suggest beneficial effects of flavonoids, mainly of quercetin, in the protection against oxidative damage of sickle anaemia individuais blood / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador : Aldo Focesi Jr / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T08:39:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BonillaRodriguez_GustavoOrlando_D.pdf: 3394092 bytes, checksum: dc7551f8bd66cbe33cc0f1a289f744b7 (MD5) Previous issue date: 1992 / Doutorado / Genetica / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Aldo Focesi Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T12:54:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Portus_MariaIsabelGaldames_M.pdf: 1092400 bytes, checksum: 0e9fae323a3392aadead40ede4978382 (MD5) Previous issue date: 1977 / Resumo: Alguns aspectos comparativos entre hemoglobinas de duas espécies de peixes do rio Amazonas foram analisados com a finali¬dade de estabelecer as bases moleculares de suas propriedades funcionais, bem como as interações entre estas proteínas com outras moléculas e íons. As espécies estudadas possuíam diferentes características fisiológicas de respiração, atividade metabólica e meio ecológico. A hemoglobina de Osteoglossum bicirrhossum por eletroforese em poliacrilamida apresentou-se como um componente único com pronunciado efeito Bohr e efeito Root. Os valores de "n" na equação de Hill, mostraram variações apreciáveis com o pH, tanto na presença como na ausência de ATP 10-3M, com a menor afinidade a pH 7,4. As hemoglobinas de Pterygoplicthys pardalis no hemolisado total não apresentaram efeito Bohr, contudo os quatro componentes separados mostraram propriedades funcionais diferentes. O primeiro HbI, isolado por coluna DEAE-SEPHADEX mostrou pequeno efeito Bohr reverso e uma acentuada influencia de ATP 10-3M em pH baixo sobre este efeito tornando-o normal, enquanto que os três outros componentes apresentaram efeito Bohr normal e nenhuma influencia de ATP sobre ele. Dos achados foi possível estabelecer que o Osteoglossum bicirrhossum, peixe muito ativo, de águas superficiais, com respiração branquial, apresenta uma única hemoglobina com alto efeito Bohr e Root enquanto que Pterygoplicthys pardalis, peixe lento, de águas profundas, com respiração branquial e aerea facultativa, possuem duas famílias de hemoglobinas bastante diferentes em suas propriedades funcionais. Nossos resultados mostraram claramente a capacidade de adaptação molecular das hemoglobinas de peixe às condições fisiológicas e ambientais que eles estão sujeitos / Abstract: Two species of fish hemoglobin from Amazon river were ànalized in order to establish the relationship between their molecular and physiological properties as well as their interactions with others molecules and ions. The species were different regarding respiration, metabolic actívity and habitat. The polyacrylámide electrophoresis pattern of Osteoglossum bicirrhossum hemoglobin showed only one component and pronounced Bohr and Root effect and the Rill coefficient showed significant variation with the pH in the presence or not of 10-3M ATP, with the lowestaffinity at pH 7.4. The total hemolisate of Pterygoplicthys pardalis presented no Bohr effect neverthless the four isolated components showed different functional properties thus the HbI component, isolated by DEAE-SEPHADEX showed small reverse Bohr effect that normal in the presence of 10-3M ATP at low pH. The other becomes three omponents presented normal Bohr effect and ATP does not change this effect. From these findings was possible to establish that the Osteoglossum bicirrhossum, a very active fish that lives iu stream with water-breathing type of respiration exihibits only one hemoglobin with high Bohr and Root effect while Pterygoplícthys pardalis a bottom físh both air and water breathing types of respiration have two family of hemoglobins with different functional properties. These results clearly show the capacity of molecular adaptation of fish hemoglobin to adapt to both the metabolic requirements and environment variations of the animals / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Antonio Sergio Ramalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T08:31:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Calusni_AnaLuciaRoscani_M.pdf: 1715301 bytes, checksum: acd3974eacbc813ea7e1416eeec145b7 (MD5) Previous issue date: 1994 / Mestrado / Genetica / Mestre em Ciências Biológicas

O Diabetes mellitus gestacional (DMG) é uma séria condição que afeta muitas gestantes e traz muitos riscos tanto para a gestante, como para o feto. A recomendação é que se faça o rastreamento com teste oral de tolerância à glicose (TOTG) entre 24 e 28 semanas de gestação. O objetivo desse estudo é determinar a utilidade do teste de hemoglobina glicada (A1c) como teste diagnóstico de DMG, comparado com os critérios baseados na medida de glicemia. Métodos: este é um estudo de acurácia de teste diagnóstico. Nós avaliamos o metabolismo dos carboidratos através dos testes de TOTG e A1c em mulheres grávidas brasileiras atendidas nas visitas de pré-natal do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Além dos testes de TOTG e A1c, foi analisada a história clínica das pacientes. O DMG foi definido de acordo com critério da American Diabetes Association (ADA) - um ou mais pontos alterados, glicemia de jejum, 1h ou 2h com concentrações de glicose plasmática ≥5.1, 10.0, ou 8.5 mmol/L, respectivamente-, ou de acordo com os critérios da Organização Mundial da Saúde (OMS) - glicemia de jejum ou 2h com concentrações de glicose plasmática ≥7.0mmol/L ou ≥7.8mmol/L, respectivamente. Presença de anemia, hemoglobinas variantes e doença renal crônica foram excluídas. Para avaliar o desempenho do teste de A1c foi utilizada a curva ROC (receiver operating characteristic curve). Resultados: um total de 262 mulheres grávidas (média de idade de 30 anos, média de idade gestacional de 26 semanas) foram avaliadas e 82 (31,3%) tiveram diagnóstico positivo (40 pelo critério da ADA e 42 pelo critério da OMS). Baseado na análise da curva ROC, considerando os critérios da ADA e OMS juntos e o TOTG como teste de referência, o ponto de corte para obter o melhor equilíbrio entre sensibilidade e especificidade (diagonal 100% a 100%) foi o valor de A1c de 31mmol/mol (5,3%). A sensibilidade e especificidade para este ponto de corte foi de 69,9% e 65,9%, respectivamente. Os pontos de corte de 40 mmol/mol (5.8%), 41 mmol⁄mol (5.9%) e 42 mmol⁄mol (6.0%) representaram especificidades de 96,1%, 96,6% e 98,3%, respectivamente. Conclusões: o teste de A1c apresenta baixa sensibilidade e alta especificidade para o diagnóstico de DMG, quando comparado com o critério tradicional. Nossos resultados mostraram que 39% dos casos de DMG foram diagnosticados usando o ponto de corte de A1c≥ 40 mmol/mol (5.8%). O teste de A1c, sozinho ou em combinação com o TOTG, talvez seja bastante útil no diagnóstico de DMG. / BACKGROUND: Gestational diabetes mellitus (GDM) is a potentially serious condition that affects many pregnancies and it carries risk for the mother and neonate. The current recommendation is to perform screening before 24 - 28 weeks of gestation by an oral glucose tolerance test (OGTT). The aim of this study is to determine the usefulness of glycated hemoglobin (A1c) as a diagnostic tool for GDM compared with the traditional criteria based on glycemia measurements. METHODS: This is a study of diagnostic test accuracy. We evaluated the status of carbohydrate metabolism by performing OGTT and A1c in Brazilian pregnant women attending prenatal visits at Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). A1c, OGTT, and clinical history were analyzed. GDM was defined according to the American Diabetes Association (ADA) criteria (one or more fasting, 1-h, or 2-h plasma glucose concentrations ≥5.1, 10.0, or 8.5 mmol/L; respectively) or World Health Organization (WHO) criteria (fasting or 2-h plasma glucose ≥7.0mmol/L or ≥7.8mmol/L, respectively). Presence of anemia, variant hemoglobins and chronic renal disease were excluded. The receiver operating characteristic (ROC) curve was used to evaluate the diagnostic performance of A1c. RESULTS: A total of 262 pregnant women (mean age 30 years, mean gestational duration 26 weeks) were enrolled and 82 (31.3%) were diagnosed with diabetes (40 by ADA criteria and 42 by WHO criteria). Based on ROC curve analysis, and considering OGTT as the reference criterion, the cut-off point obtained by the point with the best equilibrium between sensitivity and specificity (100%-to-100% diagonal) was A1c value of 31 mmol⁄mol (5.3%). The sensitivity and specificity for this cut-off 27 point were 69.9 % and 65.9 %, respectively. The cut-off points of A1c of 40 mmol/mol (5.8%), 41 mmol⁄mol (5.9%) and 42 mmol⁄mol (6.0%) presented specificities of 96,1%, 96,6% and 98,3%, respectively. CONCLUSIONS: A1c test presented low sensitivity and very high specificity for GDM diagnosis when compared with traditional criteria. Our results show that 39% of GDM cases would be diagnosed by using the cut-off point A1c≥ 40 mmol/mol (5.8%) alone. A1c test, alone or in combination with OGTT, may be a very useful diagnostic tool in GDM.

Made available in DSpace on 2016-05-19T13:20:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 cassia_shinotsuka_ipec_dout_2014.pdf: 2018653 bytes, checksum: 03fd6183adfbaa1b4e9703e2eba9f505 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Introdução: O acidente vascular encefálico hemorrágico e a hemorragia subaracnóide são doenças de elevada morbi-mortalidade. Os produtos da degradação da hemoglobina são implicados em diversos estudos experimentais como elementoschave na fisiopatologia da lesão secundária após a hemorragia intracraniana. Entretanto, há poucos dados em humanos que possam corroborar as observações experimentais. Objetivo: Avaliar o papel dos produtos da degradação da hemoglobina e dos mecanismos de proteção contra a hemoglobina e o heme na fisiopatologia do dano secundário à hemorragia intracraniana. Métodos: Estudo prospectivo realizado nas unidades neurointensivas de três hospitais. Foi coletado sangue e líquor (pela DVE) de pacientes internados com AVEh ou HSA e hemoventrículo durante os primeiros três dias após o ictus. Foram dosadas sequencialmente as concentrações de ferro, heme, hemopexina, haptoglobina, enolase e S100-\03B2 além de um painel de citocinas. O desfecho primário era mortalidade em 7 dias Resultados: Quinze pacientes foram incluídos, 10 com HSA e 5 com AVEh. Após a hemorragia intracraniana, ocorreu o desencadeamento da resposta inflamatória no sistema nervoso central (SNC), com níveis de IL-8 e GM-CSF no líquor cerca de 20x superiores ao do plasma. Foi observada a correlação entre a concentração de ferro e IP-10 no líquor (r=0,97; p=0,03) e heme e MIP-1b no líquor (r=0,76; p=0,01). Os níveis de hemopexina e haptoglobina foram consistentemente inferiores no líquor em relação ao plasma, ao longo dos três dias de estudo. Tanto o ferro e heme plasmáticos, quanto o grau de resposta inflamatória sistêmica e no SNC foram preditores de mortalidade nos primeiros 7 dias após o evento. Conclusão: Os resultados desse estudo mostram que tanto o ferro quanto o heme estão correlacionados ao desencadeamento da lesão secundária após a hemorragia intracraniana e estão associados ao pior prognóstico neste grupo de pacientes. Além disso, os mecanismos de proteção cerebral contra a hemoglobina e o heme são insuficientes. Mais estudos são necessários para elucidar o papel dos produtos da degradação da hemoglobina na fisiopatologia da hemorragia intracraniana em humanos / Introduction: Hemorrhagic stroke and subarachnoid hemorrhage are diseases with high morbidity and mortality. Hemoglobin degradation byproducts are being increasingly implicated in the pathophysiology of secondary brain injury after intracranial bleeding. However, there is not enough data in humans to support experimental evidence. Objective: To e valuate the role of hemoglobin degradat ion byproducts and protective mechanisms against hemoglobin and heme in the pathophysiology of secondary brain injury. Methods: Prospective study was done in three neurocritical care units. Blood and cerebrospinal fluid from EVD were collected from hemorrh agic stroke and su barachnoid hemorrhage patients throughout the first three days after the ictus. Sequentially measurement of iron, heme, haptoglobine, hemopexine, enolase, s100 - β and cytokines were performed. Primary outcome was 7 - day mortality. Results: Fifteen patients were included, 10 with subarachnoid hemorrhage and 5 with hemorrhagic stroke. After intracranial bleeding, local inflammatory response was elicited, with CSF IL - 8 and GM - CSF levels 20x higher than in plasma. There is a correlation between CSF iron and IP - 10 levels (r=0.97; p=0.03) and between CSF heme and MIP - 1b concentration (r=0.76; p=0.01). Throughout the first three days after the event, CSF hemopexine and haptog lobine concentrations we re consistently lower than in plasma. Both CSF iron and heme levels and systemic a nd local inflammatory response we re predictors of early mortality. Conclusion: The results of this study demonstrate that iron and heme are related to secondary brain injury after intracranial bleeding and are predictors of p oorer prognosis. Moreover, mechanisms of protection against hemoglobin and heme are lacking. More studies are needed to clarify the role of hemoglobin metabolism byproducts in the pathophysiology of intracranial bleeding in humans.

O Diabetes mellitus gestacional (DMG) é uma séria condição que afeta muitas gestantes e traz muitos riscos tanto para a gestante, como para o feto. A recomendação é que se faça o rastreamento com teste oral de tolerância à glicose (TOTG) entre 24 e 28 semanas de gestação. O objetivo desse estudo é determinar a utilidade do teste de hemoglobina glicada (A1c) como teste diagnóstico de DMG, comparado com os critérios baseados na medida de glicemia. Métodos: este é um estudo de acurácia de teste diagnóstico. Nós avaliamos o metabolismo dos carboidratos através dos testes de TOTG e A1c em mulheres grávidas brasileiras atendidas nas visitas de pré-natal do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Além dos testes de TOTG e A1c, foi analisada a história clínica das pacientes. O DMG foi definido de acordo com critério da American Diabetes Association (ADA) - um ou mais pontos alterados, glicemia de jejum, 1h ou 2h com concentrações de glicose plasmática ≥5.1, 10.0, ou 8.5 mmol/L, respectivamente-, ou de acordo com os critérios da Organização Mundial da Saúde (OMS) - glicemia de jejum ou 2h com concentrações de glicose plasmática ≥7.0mmol/L ou ≥7.8mmol/L, respectivamente. Presença de anemia, hemoglobinas variantes e doença renal crônica foram excluídas. Para avaliar o desempenho do teste de A1c foi utilizada a curva ROC (receiver operating characteristic curve). Resultados: um total de 262 mulheres grávidas (média de idade de 30 anos, média de idade gestacional de 26 semanas) foram avaliadas e 82 (31,3%) tiveram diagnóstico positivo (40 pelo critério da ADA e 42 pelo critério da OMS). Baseado na análise da curva ROC, considerando os critérios da ADA e OMS juntos e o TOTG como teste de referência, o ponto de corte para obter o melhor equilíbrio entre sensibilidade e especificidade (diagonal 100% a 100%) foi o valor de A1c de 31mmol/mol (5,3%). A sensibilidade e especificidade para este ponto de corte foi de 69,9% e 65,9%, respectivamente. Os pontos de corte de 40 mmol/mol (5.8%), 41 mmol⁄mol (5.9%) e 42 mmol⁄mol (6.0%) representaram especificidades de 96,1%, 96,6% e 98,3%, respectivamente. Conclusões: o teste de A1c apresenta baixa sensibilidade e alta especificidade para o diagnóstico de DMG, quando comparado com o critério tradicional. Nossos resultados mostraram que 39% dos casos de DMG foram diagnosticados usando o ponto de corte de A1c≥ 40 mmol/mol (5.8%). O teste de A1c, sozinho ou em combinação com o TOTG, talvez seja bastante útil no diagnóstico de DMG. / BACKGROUND: Gestational diabetes mellitus (GDM) is a potentially serious condition that affects many pregnancies and it carries risk for the mother and neonate. The current recommendation is to perform screening before 24 - 28 weeks of gestation by an oral glucose tolerance test (OGTT). The aim of this study is to determine the usefulness of glycated hemoglobin (A1c) as a diagnostic tool for GDM compared with the traditional criteria based on glycemia measurements. METHODS: This is a study of diagnostic test accuracy. We evaluated the status of carbohydrate metabolism by performing OGTT and A1c in Brazilian pregnant women attending prenatal visits at Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). A1c, OGTT, and clinical history were analyzed. GDM was defined according to the American Diabetes Association (ADA) criteria (one or more fasting, 1-h, or 2-h plasma glucose concentrations ≥5.1, 10.0, or 8.5 mmol/L; respectively) or World Health Organization (WHO) criteria (fasting or 2-h plasma glucose ≥7.0mmol/L or ≥7.8mmol/L, respectively). Presence of anemia, variant hemoglobins and chronic renal disease were excluded. The receiver operating characteristic (ROC) curve was used to evaluate the diagnostic performance of A1c. RESULTS: A total of 262 pregnant women (mean age 30 years, mean gestational duration 26 weeks) were enrolled and 82 (31.3%) were diagnosed with diabetes (40 by ADA criteria and 42 by WHO criteria). Based on ROC curve analysis, and considering OGTT as the reference criterion, the cut-off point obtained by the point with the best equilibrium between sensitivity and specificity (100%-to-100% diagonal) was A1c value of 31 mmol⁄mol (5.3%). The sensitivity and specificity for this cut-off 27 point were 69.9 % and 65.9 %, respectively. The cut-off points of A1c of 40 mmol/mol (5.8%), 41 mmol⁄mol (5.9%) and 42 mmol⁄mol (6.0%) presented specificities of 96,1%, 96,6% and 98,3%, respectively. CONCLUSIONS: A1c test presented low sensitivity and very high specificity for GDM diagnosis when compared with traditional criteria. Our results show that 39% of GDM cases would be diagnosed by using the cut-off point A1c≥ 40 mmol/mol (5.8%) alone. A1c test, alone or in combination with OGTT, may be a very useful diagnostic tool in GDM.

O Diabetes mellitus gestacional (DMG) é uma séria condição que afeta muitas gestantes e traz muitos riscos tanto para a gestante, como para o feto. A recomendação é que se faça o rastreamento com teste oral de tolerância à glicose (TOTG) entre 24 e 28 semanas de gestação. O objetivo desse estudo é determinar a utilidade do teste de hemoglobina glicada (A1c) como teste diagnóstico de DMG, comparado com os critérios baseados na medida de glicemia. Métodos: este é um estudo de acurácia de teste diagnóstico. Nós avaliamos o metabolismo dos carboidratos através dos testes de TOTG e A1c em mulheres grávidas brasileiras atendidas nas visitas de pré-natal do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Além dos testes de TOTG e A1c, foi analisada a história clínica das pacientes. O DMG foi definido de acordo com critério da American Diabetes Association (ADA) - um ou mais pontos alterados, glicemia de jejum, 1h ou 2h com concentrações de glicose plasmática ≥5.1, 10.0, ou 8.5 mmol/L, respectivamente-, ou de acordo com os critérios da Organização Mundial da Saúde (OMS) - glicemia de jejum ou 2h com concentrações de glicose plasmática ≥7.0mmol/L ou ≥7.8mmol/L, respectivamente. Presença de anemia, hemoglobinas variantes e doença renal crônica foram excluídas. Para avaliar o desempenho do teste de A1c foi utilizada a curva ROC (receiver operating characteristic curve). Resultados: um total de 262 mulheres grávidas (média de idade de 30 anos, média de idade gestacional de 26 semanas) foram avaliadas e 82 (31,3%) tiveram diagnóstico positivo (40 pelo critério da ADA e 42 pelo critério da OMS). Baseado na análise da curva ROC, considerando os critérios da ADA e OMS juntos e o TOTG como teste de referência, o ponto de corte para obter o melhor equilíbrio entre sensibilidade e especificidade (diagonal 100% a 100%) foi o valor de A1c de 31mmol/mol (5,3%). A sensibilidade e especificidade para este ponto de corte foi de 69,9% e 65,9%, respectivamente. Os pontos de corte de 40 mmol/mol (5.8%), 41 mmol⁄mol (5.9%) e 42 mmol⁄mol (6.0%) representaram especificidades de 96,1%, 96,6% e 98,3%, respectivamente. Conclusões: o teste de A1c apresenta baixa sensibilidade e alta especificidade para o diagnóstico de DMG, quando comparado com o critério tradicional. Nossos resultados mostraram que 39% dos casos de DMG foram diagnosticados usando o ponto de corte de A1c≥ 40 mmol/mol (5.8%). O teste de A1c, sozinho ou em combinação com o TOTG, talvez seja bastante útil no diagnóstico de DMG. / BACKGROUND: Gestational diabetes mellitus (GDM) is a potentially serious condition that affects many pregnancies and it carries risk for the mother and neonate. The current recommendation is to perform screening before 24 - 28 weeks of gestation by an oral glucose tolerance test (OGTT). The aim of this study is to determine the usefulness of glycated hemoglobin (A1c) as a diagnostic tool for GDM compared with the traditional criteria based on glycemia measurements. METHODS: This is a study of diagnostic test accuracy. We evaluated the status of carbohydrate metabolism by performing OGTT and A1c in Brazilian pregnant women attending prenatal visits at Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). A1c, OGTT, and clinical history were analyzed. GDM was defined according to the American Diabetes Association (ADA) criteria (one or more fasting, 1-h, or 2-h plasma glucose concentrations ≥5.1, 10.0, or 8.5 mmol/L; respectively) or World Health Organization (WHO) criteria (fasting or 2-h plasma glucose ≥7.0mmol/L or ≥7.8mmol/L, respectively). Presence of anemia, variant hemoglobins and chronic renal disease were excluded. The receiver operating characteristic (ROC) curve was used to evaluate the diagnostic performance of A1c. RESULTS: A total of 262 pregnant women (mean age 30 years, mean gestational duration 26 weeks) were enrolled and 82 (31.3%) were diagnosed with diabetes (40 by ADA criteria and 42 by WHO criteria). Based on ROC curve analysis, and considering OGTT as the reference criterion, the cut-off point obtained by the point with the best equilibrium between sensitivity and specificity (100%-to-100% diagonal) was A1c value of 31 mmol⁄mol (5.3%). The sensitivity and specificity for this cut-off 27 point were 69.9 % and 65.9 %, respectively. The cut-off points of A1c of 40 mmol/mol (5.8%), 41 mmol⁄mol (5.9%) and 42 mmol⁄mol (6.0%) presented specificities of 96,1%, 96,6% and 98,3%, respectively. CONCLUSIONS: A1c test presented low sensitivity and very high specificity for GDM diagnosis when compared with traditional criteria. Our results show that 39% of GDM cases would be diagnosed by using the cut-off point A1c≥ 40 mmol/mol (5.8%) alone. A1c test, alone or in combination with OGTT, may be a very useful diagnostic tool in GDM.

Orientador: Sara T. O. Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-23T08:16:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hashimoto_MariaCeciliaTeori_M.pdf: 2751983 bytes, checksum: 4b4f593dd6e814b5aced3080bb2db244 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: A proposta deste estudo foi avaliar o comportamento de diferentes bolsas de coleta de sangue, utilizando parâmetros bioquímicos que interprete, in vitro, o metabolismo dos eritrócitos durante a conservação. Para este trabalho utilizamos bolsas de Poli (cloreto) de vinila (PVC) com di-octil-ftalat (DOP), tendo Citrato-fosfato-dextrose-adenina (CPDA) como anticoagulante. Utilizamos concentrados de hemácias coletados em seis diferentes bolsas: Terumo@ (TE), Baxter@ (BA), Grifols@ (GR), Hemobag@ (HE), Asem@ (AS) e Alex istar@ (AL). Estes concentrados foram obtidos por fracionamento de sangue total e foram armazenados a 4°C, por 35 dias. Os parâmetros bioquímicos avaliados foram: sódio e potássio plasmático, dosados por fotometria de chama; pressão de CO2, O2 e pH, determinada por gasômetro, a 37>C, em aparelho Stat Profile 5 Analyzer (Nova Biomedical, Waltham, MA); adenosina trifosfato (A TP), 2,3 difosfoglicerato (2,3 DPG) e hemoglobina plasmática, utilizando-se <1(it" comercial da Sigma Company, S1. Louis, MO; distribuição do tamanho dos eritrócitos (RDW), volume corpuscular médio (VCM) ,concentração de hemoglobínica corpuscular média (CHCM), hematócrito (HfOlÓ) e hemoglobina total foram obtidos pelo Cell-Dyn 1.600, Abbot Canada, EUA. As análises foram realizadas no 1°, 15°,21° e 35° dia. de armazenamento. Os resultados foram avaliados pelas médias e desvios padrões dos parâmetros analisados de cinco bolsas de cada marca. As bolsas HE apresentaram menor valor de hematócrito do que o das AL e GR. As bolsas GR e BA apresentaram, no 21° dia, níveis de hemoglobina plasmática menores do que os observados nas AL; TE, HE e AS. Quanto aos valores de A TP, observamos que as bolsas HE apresentaram níveis maiores (p=O.0020) do que o obtido nas AL e AS. Com relação ao 2,3 DPG, no 1° dia de armazenamento, as bolsas. AL apresentaram níveis superiores aos observados nas TE e HE. As bolsas HE também apresentaram níveis de 2,3 DPG inferiores aos das BA, GR e AS. No 15° dia, as GR e AS apresentaram valores superiores de 2,3 DPG, se comparados aos das bolsas TE, BA, HE. As AL apresentaram níveis maiores de 2,3 DPG, quando comparadas às bolsas BA e HE.Avaliando os valores de pH observamos que, no 15° dia, as bolsas AS e GR apresentaram um pH maior em relação às HE e BA. As AS ainda apresentaram valores superiores aos das TE. No 35° dia, as bolsas GR, AL e AS também apresentaram pH maior em relação às HE, BA e TE. As análises estatísticas de pC02 e p02, de distribuição do tamanho dos eritrócitos (RDW) e de volume corpuscular médio (VCM) não demonstraram diferenças significativas. No 35° dia de armazenamento, as bolsas HE, BA e TE tiveram valores de concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) maiores do que o das AL, GR e AS. As BA apresentaram no primeiro dia de armazenamento valores de sódio maiores do que o das AS, GR, TE e AL, entretanto, durante a preservação destas bolsas (BA) observou-se maior queda dos níveis de sódio plasmático, atingindo valores significativamente menores no 35° dia. Em relação ao potássio não observamos diferenças significativas. A análise geral de nossos resultados evidencia a presença de dois grupos de bolsas de sangue com comportamentos semelhantes entre si. No primeiro grupo (AL, AS, GR), os valores de pH; 2,3DPG; hematócrito e sódio plasmático tendem a ser maiores do que no segundo grupo (HE, BA e TE). Por outro lado, quanto aos valores de VCM, A TP e o CHCM (35° dia) ocorre o inverso, isto é, tendem a ser maiores no segundo grupo. Isto sugere que no 1° grupo, há menor entumescimento das hemácias (menor VCM e maior sódio plasmático) e menor formação de esferócitos no 35° dia ( menor CHCM). Estas diferenças podem decorrer de variadas composições do anticoagulante ou da forma de processamento do DOP, que modificariam o metabolismo das hemácias. Todos os valores obtidos estão muito próximos aos mencionados na literatura / Abstract: The aim of this study was to evaluate the behavior of different blood bags using biochemical parameters capable of interpreting, in vitro, the erythrocyte metabolism during conservation. The bags used in this study were made of polyvinyl chloride with Di (2 etilhexil) Ftalato (DEHP), and citrate - phosphate - dextrose - adenine (CPDA). The red blood cells were stored in six different bags: Terumo@ ( TE); Baxter@ (BA); Grifols@ (GR); Hemobag@ (HE); Asem@ (AS) and Halex Istar@ (AL). The red blood cells were obtained by blood separation and were stored for 35 days at 4°C. The biochemical parameters evaluated were: plasmatic dosage of sodium and potassium by means of flame photometry; CO2, O2 pressure and pH which were determined by gasometry at 370C, using the Stat Profile 5 Analyzer (Nova Biomedical, Waltham, MA) equipment; adenosine triphosphate (ATP), 2,3 diphosphoglycerate (2,3DPG) and plasmatic hemoglobin were determined by the Sigma Company commercial kit (St.Louis, MO). Distribution of erythrocyte size (RDW), corpuscular volume means (CVM), corpuscular hemoglobin concentration means (CHCM), hematocrit (Ht%) and hemoglobin percentage were determined using the Cell-Dyn 1.600 kit (Abbot Canada, V.S.A). The analysis were performed on the 1st, 15th, 21st and 35th day of storage. In order to evaluate the results, the mean and the stándard deviation of five bags of each bred were calculated. The HE bags presented a lower hematocrit value than the AL and GR bags. On the 21st day, the GR and BA bags presented higher plasmatic hemoglobin levels (p=O.OO20) than those obtained using AL and AS. On the 1st day of stored, the AL bags presented higher 2,3 DPG leves than those observed using TE and HE bags. The HE bags also presented lower 2,3 DPG levels than the BA, GR and AS bags. On the 15th day, the GR and AS bags presented higher 2,3 DPG values when compared to those of the BA. and HE bags. On the 15th day, the AS and GR bags presented a higher pH than the HE and BA bags. On the 35th day the GR, AL and AS bags also presented a higher pB! than the HE, BA and TE bags. There was no significant difference between the bags in relation to pC02 and p02, RDW and CVM. On the 35th day of stored, the HE, BA and TE bags presented higher corpuscular hemoglobin mean concentrations than the AJL, GR and AS. On the first day, the plasmatic sodium values were higher in the BA compared to the AS, GR, TE e AL. However, on the 35 th, the levels were higher in the FIE bags. No significant difference were observed related to the potassium values. The general ana1ysis of the results points to the presence of two groups of blood bags presenting similar behavior. In the first group (AL, AS, GR), pH; 2,3 DPG and hematocrit tend to behigher than in the second group (HE, BA and FE). The opposite occurs with CVM , CHCM and ATP values, that is, they tend to be higher in second group. This last observation suggests that, in the first group, the swelling of the red cells is lower than in tlie second group (lower MCV and higher to plasmatic sodium levels) as well as ther is lower spherocytic formation on the 35 th day (lower MCHC), despite the lower levels of ATP, probably related to the higher pH and 2.3 DPG also observed inthis grov-P. These differences may occur due to the various compositions of the anticoagulant or the DOP processing form, which could modify the red cell metabolismo All the values obtained are very near to those reported in literature / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Fernando Ferreira Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T02:23:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_RaimundoNonatoPereirada_M.pdf: 3164333 bytes, checksum: 78a508da9ba2db4ac569d31a75b1ec47 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Anemia falciforme (AF) é uma doença monogênica, mas com uma apresentação clínica variável, devido a possível associação com outros genes. Especula-se que nesta doença genes envolvidos com a resposta inflamatória tenham efeito epistático. A mieloperoxidase (MPO) é uma enzima com atividade antimicrobicida, sendo encontrada nos grânulos azurofilicos dos neutrófilos. O polimorfismo A-463MPO diminui a expressão desta enzima, podendo este alelo ser possível marcador para eventos infecciosos em pacientes com defesa imune já comprometida. Neste estudo 97 pacientes com AF acompanhado pelo ambulatório de hematologia-Unicamp foram inicialmente divididos em dois grupos, conforme o número de internamentos hospitalares para antibioticoterapia: pacientes que não apresentaram infecção com necessidade de intemação (64 pacientes) e um segundo grupo onde ocorreu pelo menos 1 episódio de hospitalização devido a infecção (33 pacientes). O grupo controle foi composto por 48 indivíduos sadios negros da Babia-BrasiL Pacientes e controles foram genotipados para o polimorfismo G/A-463MPO, através da técnica de "Conformation Sensitive Gel Eletrophoresis" (CSGE) e sequenciamento automatizado. Observou-se que a presença do genótipo AA ou AG está associado a maior número de eventos infecciosos (P=O.005 OR=3.8). Esta correlação também foi observada na análise quanto à presença do alelo A-463MPO (P=0.004 OR=2.7). Este achado sugere que deficiência de MPO em pacientes com AF provavelmente favorece a ocorrência de eventos infecciosos. Vaso oclusão é o principal evento nas crises dolorosas dos pacientes com anemia falciforme (AF) e marcadores genéticos de risco para eventos vaso oclusivos ainda são desconhecidos. Polimorfismos em genes envolvidos na adesão celular PSGL-l (VNTR no exon 2), ICAM-1 G241R e K461E) e CD18 (V441V) foram genotipados em 103 pacientes com AF. Os pacientes foram inicialmente divididos em dois grupos: pacientes em que ocorre acidente vascular cerebral (AF+A VC,16 pacientes) e pacientes sem ocorrência de A VC (AF-A VC, 87 pacientes). Posteriormente, os pacientes foram divididos em outros dois grupos: pacientes em que foi detectado um dos seguintes eventos: A VC, síndrome torácica aguda (STA), necrose asséptica de cólo de fêmur (NACF) e priapismo (AF+FVO, 35 pacientes) e pacientes em que não ocorrem essas complicações (AF-FVO, 70 pacientes). PSGL-l é um receptor nas células mielóides e linfócitos T estimulados de alta afinidade para P-selectinas, tendo fundamental papel na adesão dos leucócitos às plaquetas e ao endotélio. O gene contém 3 variantes alélicas (A, B, C) de um número variável de repetição "in tandem" (VNTR). A análise das freqüências dos genótipos e alelos revelou associação da variante B com o grupo AF+FVO [p=O.04, IC 95% OR=2 (1-4)] e quase significante com os casos de A VC [p=0.09, IC 95% OR=2 (0.8-4.9)], enquanto que o alelo A revelou nível significativo de associação com o grupo AF+FVO [p=O.Ol IC 95% OR=O.5 (0.2 0.9)]. O gene da molécula de adesão leucócitário CD-I8 é a beta-2 subunidade das integrinas a_heterodímeros. O polimorfismo C1323T foi recentemente implicado como fator de risco para fenômenos vaso oc1usivos. O estudo deste polimorfismo em pacientes portadores de anemia falciforme não revelou associação significativa com FVO ou A VC. ICAM-l é uma molécula da superfamília das imunoglobulinas com importante papel na adesão das células endotelial-leucócitos durante a resposta inflamatória. No mínimo dois sítios polimórficos são conhecidos R241E e K469E. Ambos sítios estão envolvidos na ligação aos contrareceptores Mac-I e LF A-I. A análise destes polimorfismos através da técnica de CSGE e seqüenciamento, revelou uma associação significativa do heterozigoto K469E para risco a A VC [P=0.02 IC 95% OR=3.6 (1.1-12.3)]. No entanto, o estudo falhou em demonstrar associação alélica com os casos de A VC ou FVO. Como não se conhece bem a relação funcional deste polimorfismo, maiores estudos são necessários incluindo análise funcional, para se esclarecer o real papel deste polimorfismo ao risco a AVC / Abstract: Not informed / Mestrado / Genetica Medica / Mestre em Genética e Biologia Molecular