Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2008. / Submitted by Fernanda Weschenfelder (nandaweschenfelder@gmail.com) on 2009-09-23T20:54:12Z No. of bitstreams: 1 2008_ValiaBravoEgana.pdf: 2065608 bytes, checksum: 94fcce433a53fcc9451190300b2bdd0b (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2009-12-12T12:48:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_ValiaBravoEgana.pdf: 2065608 bytes, checksum: 94fcce433a53fcc9451190300b2bdd0b (MD5) / Made available in DSpace on 2009-12-12T12:48:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_ValiaBravoEgana.pdf: 2065608 bytes, checksum: 94fcce433a53fcc9451190300b2bdd0b (MD5) Previous issue date: 2008 / MicroRNAs (miRNAs) são os produtos gênicos não-codantes (~19-22 nucleotídeos) com um papel chave no regulamento pós-transcricional inibindo a expressão gênica através da união seletiva a seqüências complementares de RNA mensageiro. Nossos resultados indicam que os miRNAs isolados com métodos atualmente usados para preparação de RNA são instáveis assim como também seus cDNAs correspondentes. Estas observações têm grande importância em estudos de análise de expressão de miRNAs. Além, nosso laboratório é pioneiro em determinar perfis específicos de miRNA em ilhotas pancreáticas humanas e de roedores normais assim como em ilhotas expostas à ação de citocinas diabetogênicas pró-inflamatórias. O miR-7 resultou ser o miRNA mais abundante da porção endócrina das ilhota e o miR-375 o mais abundante no pâncreas. Ambos os miRNAs aumentaram sua expressão durante o desenvolvimento pancreático, assim como também, em ilhotas tratadas com citocinas pró-inflamatórias por 6 horas. Estas observações sugerem que o miR-7 e o miR-375 desempenham um papel importante não apenas durante o processo de desenvolvimento e de manutenção do fenótipo das ilhotas mas também nos sinais de sobrevivência nos primeiros estágios da resposta inflamatória. A pesquisa dos miRNAs e de seus mRNAs alvos pode tornar-se uma ferramenta valiosa para o diagnóstico e tratamento de doenças tais como o diabetes. ___________________________________________________________________________________ ABSTRACT / MicroRNAs (miRNAs) are non-coding gene products (~19–22 nucleotides) that play a key role in post-transcriptional regulation by inhibiting gene expression through selective binding to complementary messenger RNA sequences. Our early results indicated that miRNAs isolated with currently used methods for RNA preparation are unstable and so are their corresponding cDNAs. These observations should be of great interest to all researches that outsource RNA samples for miRNA gene array analysis. We are first to determine specific miRNA signatures in normal pancreatic islets as well as in islets exposed to pro-inflammatory (diabetogenic) cytokines. MiR-7 emerged as the most abundant endocrine islet miRNA and miR-375 as the most abundant intra-islet miRNA. Both miRNAs increased their expression during pancreatic development as well as in islets treated with pro-inflammatory cytokines for 6 hours. This suggests that miR-7 and miR-375 play an important role not only in development and islet phenotype maintenance but also in the survival signaling at the early inflammatory response. The research of miRNAs and their target mRNAs could be a valuable tool in diagnostics by indicating the early onset of diseases such as diabetes and by finding new therapeutic targets to treat them.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias da Saude / Made available in DSpace on 2012-10-16T05:04:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-08T18:29:39Z : No. of bitstreams: 1 93218.pdf: 7462395 bytes, checksum: 971da2c790908df3d2087a693694e7d6 (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-23T07:07:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 247678.pdf: 550059 bytes, checksum: 17d0cf486d5582c5c5a23c37a36fdbe3 (MD5)

LIMA, Neila Maria Rocha de. Efeito protetor da boldina no dano neuronal, déficit de memória e resposta inflamatória em camundongos submetidos à isquemia cerebral focal permanente. 2015. 110 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-12-07T11:17:30Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_nmrlima.pdf: 1627187 bytes, checksum: cbc877939a3659dbcb6f2cf4f9387bdd (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-12-07T12:28:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_nmrlima.pdf: 1627187 bytes, checksum: cbc877939a3659dbcb6f2cf4f9387bdd (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-07T12:28:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_nmrlima.pdf: 1627187 bytes, checksum: cbc877939a3659dbcb6f2cf4f9387bdd (MD5) Previous issue date: 2015 / Stroke is the second largest cause of death and the leading cause of disability worldwide. The ischemic process causes oxygen and glucose depletion and leads to a cascade of events including inflammation, apoptosis and oxidative stress. Substances having anti-inflammatory and antioxidant properties are being considered a new therapeutic approach for the pharmacological treatment of cerebrovascular diseases, in particular the stroke. Boldine is an alkaloid of the aporphine group found in the leaves and bark of Peumus boldus, with anti-inflammatory and anti-oxidants properties. The objective of this study was to investigate the neuroprotective effect of boldine in neuroinflammation and memory deficits induced by permanent middle cerebral artery occlusion (pMCAO) in mice. Thirty minutes before and for 5 days after pMCAO, animals received vehicle (0,025M HCl solution) or boldine (8, 16 and 25 mg / kg, ip). The quantification of cerebral infarction area, neurological scores and myeloperoxidase activity (MPO) were assessed 24 hours after pMCAO. Locomotor activity, working memory and aversive memory were assessed 72 hours after pMCAO. Episodic memory was assessed 96 hours after pMCAO and spatial memory was assessed 120 hours after pMCAO. Cresyl violet and Fluoro Jade C staining was performed 120h after pMCAO to display neuronal viability was carried out. Immunohistochemistry were made for GFAP (glial fibrillary Acid Protein), TNF-α and iNOS as inflammatory markers. Treatment with boldine (25mg / kg) significantly reduced infarct size and improved scores on neurological evaluation 24 hours after the ischemic insult. O TTC showed that the mean percentage of infarct volume was 8% in mice treated with vehicle hemispheres undergoing pMCAO. When mice were treated with boldine (25mg / kg), a significant decrease in the infarct volume to 3%. It was found also observed this treatment with boldine attenuated cell death in the cortex and striatum of mice 120 hours after the pMCAO evaluated by staining Cresil violet and Fluoro-Jade C. Ischemic injury did not alter the horizontal exploratory activity of the animals, but decreased the vertical exploration activity. Boldine at a dose of 25 mg / kg decreased this motor deficits in ischemic animals. Boldine also decreased deficits of aversive memory, spatial, episodic and working. Furthermore, pMCAO promoted increases in myeloperoxidase activity (MPO), treatment with boldine was able to reduce the increase MPO activity in the cortex. Furthermore, immunohistochemical analysis showed that TNF-α expression and iNOS, that are related to inflammation, increased after the ischemic insult and boldine reduces the increase of the expression. The pMCAO showed an increase in the immunoreactivity of GFAP, and treatment with boldine reduced this increase of activity. These results suggest that the neuroprotective effect of boldine may be related, at least in part, to its anti-inflammatory properties, however, other mechanisms, such as its antioxidant property cannot be ruled out. / O Acidente Vascular Encefálico (AVE) é a terceira maior causa de mortalidade e a primeira causa de incapacidade física em todo o mundo. O processo isquêmico ocasiona depleção de oxigênio e glicose, levando a uma cascata de eventos, incluindo, inflamação, apoptose e estresse oxidativo. Substâncias com propriedade anti-inflamatória e antioxidante vêm sendo consideradas como uma nova abordagem terapêutica para o tratamento farmacológico das doenças cerebrovasculares, em especial, o AVE. A boldina é um alcaloide do grupo da aporfina, encontrado nas folhas e casca do Peumus boldus Molina, e tem propriedades anti-inflamatórias e anti-oxidantes. O objetivo deste trabalho foi investigar o efeito neuroprotetor da boldina na neuroinflamação e déficit de memória induzidas pela oclusão permanente da artéria cerebral média (pMCAO) em camundongos. Trinta minutos antes da pMCAO e durante cinco dias após, os animais receberam veículo (solução de HCl 0,025M) ou boldina (8, 16 e 25 mg / kg, ip). A quantificação da área de infarto cerebral, escores neurológicos e atividade da mieloperoxidase (MPO) foram avaliados 24 horas após a pMCAO. Atividade locomotora, memória de trabalho e memória aversiva foram avaliados 72 horas após a pMCAO. A memória episódica e espacial foram avaliadas 96 e 120 horas após a pMCAO respectivamente. Foi realizada a coloração de cresil violeta e Fluoro Jade C 120h após a isquêmia para visualizar a viabilidade neuronal. Finalmente, 120h após a isquemia foi feito imunohistoquímica para GFAP (proteína ácida glial fibrilar) com objetivo de avaliar a atividade astrocitária, TNF-α e iNOS como marcadores inflamatórios. O tratamento com boldina (25mg/kg) reduziu, significativamente, a área de infarto e melhorou os escores na avaliação neurológica 24h após o insulto isquêmico. O TTC indicou que a percentagem média de volumes de infarto foi de 8% em hemisférios de camundongos tratados com veículo submetidos à pMCAO. Quando os camundongos foram tratados com boldina (25mg/kg), ocorreu uma diminuição significativa do volume de infarto para 3%. O tratamento com a boldina atenuou a morte celular no córtex e estriado de camundongos 120 horas após à pMCAO avaliados pela coloração de Cresil violeta e fluoro-jade C. A pMCAO não alterou a atividade exploratória horizontal dos animais, mas diminuiu a atividade exploratória vertical. A boldina na dose de 25mg/kg diminuiu esse déficit motor nos animais isquemiados. A boldina diminuiu déficits de memória aversiva, espacial, episódica e de trabalho. Além disso, a pMCAO promoveu aumento da atividade da mieloperoxidase (MPO), sendo o tratamento com a boldina capaz de impedir o aumento da atividade no córtex. Além disso, as análises de imunohistoquímica mostraram que a expressão de TNF-α e de iNOS, que estão relacionadas com o processo inflamatório, aumentaram após o insulto isquêmico e que a boldina preveniu o aumento dessa expressão. Em relação a atividade astrocitária, a pMCAO mostrou um aumento da imunoreatividade do GFAP, e o tratamento com a boldina preveniu esse aumento. Estes resultados sugerem que o efeito neuroprotetor da boldina pode est ar relacionado , pelo menos em parte, às suas propriedades anti - inflamatórias; porém, outros mecanismos, como a sua propriedade anti oxidante nã o pode ser descartada

BARBOSA, Thayanne Brasil. Efeito do 5-Fluorouracil na reabsorção óssea alveolar induzida por ligadura em ratos. 2015. 84 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-12-10T12:37:25Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_tbbarbosa.pdf: 15807034 bytes, checksum: 1345037625f988e70d8b4691598a6b58 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-12-10T12:38:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_tbbarbosa.pdf: 15807034 bytes, checksum: 1345037625f988e70d8b4691598a6b58 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-10T12:38:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_tbbarbosa.pdf: 15807034 bytes, checksum: 1345037625f988e70d8b4691598a6b58 (MD5) Previous issue date: 2015 / Introduction: 5-fluorouracil (5-FU) is a highly used anticancer drug. Its administration causes several side effects and. its role in bone loss has been recently studied, since 5-FU showed a decrease in bone mineral density and growth inhibition in young rats. The aim of our study was to investigate the effect of 5-FU on the in ligature-induced bone resorption in rats. Methods and results: 146 Wistar rats (180-220 g) were divided in four groups that received distilled water (2 ml/kg, IP) or 5-FU (37.5, 75 or 150 mg/kg, IP 1 hour before the ligature placement. Sacrifice was performed at 11th day. Hemiarcades were submitted to macroscopic (mm²), histologic or histometric (mm²) analyses. In addition, cytokines (TNF-α and IL-1β; pg/mg) were dosed and the assessment of MPO activity (U/mg) and total and bone-specific alkaline phosphatase (U/ml) was performed. Survival, leukogram, body mass variation and liver, kidney and spleen conditions were also evaluated. p<0.05 was considered significant. The study was approved by the ethics committee in animal research. Ligature placement caused an important alveolar area bone loss, including the furcation area. It also caused an increase in the MPO activity, in the concentrations of TNF-α e IL-1β, and diminished bone-specific alkaline phosphatase. It was observed greater furcation lesions, alveolar bone destruction and an increase in the inflammatory infiltrate when compared to normal (p<0.05). Although 5-FU did not increase MPO activity when compared with NT, it promoted an exacerbation of the periodontal destruction, with a severe alveolar bone loss, including the furcation area when compared with NT (p<0.05). Another finding was the increased concentration of TNF-α e IL-1β. In addition, 5-FU groups presented lower values of bone-specific alkaline phosphatase when compared to normal (p<0.05). It was also observed a severe destruction of the periodontum and a marked inflammatory infiltrate. Systemically, 5-FU (150 mg/kg) caused neutropenia, diminished rate of survival and loss of weight. Finally, it was not observed alterations in the hepatic, renal, or splenic conditions. Conclusion: Briefly, 5-FU increased ligature-induced bone resorption and the concentration of TNF-α and IL-1β, cytokines that are involved in the bone resorption process. Neutropenia was caused by the administration of the drug and contributed to exacerbate the destruction of the periodontium. / Introdução: O 5-fluorouracil (5-FU) é uma pirimidina utilizada em diversos protocolos para o tratamento do câncer e sua administração causa diversos efeitos adversos. Recentemente, seu papel na perda óssea tem sido estudado, já que o 5-FU mostrou diminuição da densidade mineral óssea e inibição do crescimento em ratos jovens. Assim, objetivou-se investigar se o efeito do 5-FU na reabsorção óssea alveolar induzida por ligadura em ratos. Métodos e resultados: 146 Ratos Wistar (180-220 g; n=6-10) foram divididos em quatro grupos em que receberam água destilada (2 ml/kg; IP) ou 5-FU (37,5, 75 ou 150 mg/kg; IP), 1 hora antes da colocação da ligadura, sendo sacrificados no 11° dia. As hemiarcadas foram direcionadas análises morfométrica (mm2), histopatológica e histométrica (mm2). Adicionalmente, foram realizadas dosagens de citocinas (TNF-α e IL- 1β; pg/mg), MPO (U/mg) e fosfatase alcalina total e óssea (U/ml) Sobrevida, leucograma, variação de massa corpórea e condições hepáticas, renais e esplênicas também foram avaliadas. p<0,05 foi considerado estatisticamente significante. O trabalho foi aprovado no comitê de ética em pesquisa. Observou-se que a ligadura causou uma importante perda óssea alveolar e na região de furca, aumento na atividade de MPO, nas concentrações de TNF-α e IL-1β, além de diminuição da FAO. Em relação ao histopatológico, foram observadas maiores lesões de furca, destruição de osso alveolar e infiltrado inflamatório em hemiarcadas do grupo NT em comparação ao normal (p<0,05). Embora o 5-FU não tenha sido capaz de aumentar a atividade de MPO em relação ao grupo NT, ele promoveu uma exacerbação da destruição periodontal, evidenciando uma maior perda óssea alveolar e na região de furca (p<0,05). Outro aspecto observado foi o aumento nas concentrações de TNF-α e IL-1β. Ainda, o fármaco promoveu diminuição nos valores de FAO em relação ao gruo normal (p<0,05). Os animais que receberam 5-FU também mostraram intensa destruição das estruturas periodontais e presença de infiltrado inflamatório no histopatológico. Sistemicamente, o 5-FU na dose de 150 mg/kg causou neutropenia, diminuição na sobrevida e da massa corpórea dos animais. Não foram observadas alterações nas condições hepáticas, renais ou esplênicas avaliadas. Conclusão: Em suma, a administração de 5-FU exacerbou a reabsorção óssea induzida por ligadura e induziu o aumento de TNF-α e IL-1β, citocinas envolvidas no processo de reabsorção óssea. A neutropenia causada pela administração do fármaco pode ter contribuído para exacerbar a destruição das estruturas de suporte do dente.

BANDEIRA, I. C. J. Estudo dos marcadores de inflamação: associação com os haplótipos do cluster da β-globina na anemia falciforme. 2013. 87 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, 2013. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-07-19T13:13:59Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_icjbandeira.pdf: 2138054 bytes, checksum: 16abdc3bcd1ea1d1c334877620c01618 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-07-19T13:14:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_icjbandeira.pdf: 2138054 bytes, checksum: 16abdc3bcd1ea1d1c334877620c01618 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-19T13:14:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_icjbandeira.pdf: 2138054 bytes, checksum: 16abdc3bcd1ea1d1c334877620c01618 (MD5) Previous issue date: 2013-02-20 / The Sickle Cell Anemia (SCA) is an inherited disease characterized by homozygous severe hemolytic anemia and clinical variables, considered a chronic inflammatory disease. SCA results from a mutation in a nitrogenous base in the sixth codon of the beta globin gene, leading to substitution of adenine for thymine nucleotide (GAG → GTG), which results in the production of the amino acid valine in place of glutamic acid. The inflammatory pathophysiology of SCA is centered on the ability of HbS polymerization that leads to chronic hemolysis and vaso-occlusion. SCA patients are a chronic inflammatory state of multifactorial origin that involves endothelial cells, erythrocytes, leukocytes and platelets by increasing the interactions between cell-cell and cell-endothelium starting an endothelial injury. The study was a cross-sectional prospective in order to investigate the association of haplotypes with the inflammatory profile of patients with AF. Was performed to confirm the HbSS and then study the haplotypes BS mutation in the gene for beta globin chain. We measured markers IL-6, IL-8, TNF-α, IL-17, CRP, IL-10 and TGF-β on 67 patients with SCA and 26 healthy subjects. We observed the prevalence of Bantu haplotype (67.1%) in the patient population studied, followed by the Benin haplotype (28.3%). The study confirms that SCA patients are in a chronic inflammatory state, as had elevated markers of proinflammatory and anti-inflammatory when compared to healthy subjects. The Bantu achieved higher levels of proinflammatory cytokines and CRP compared to the values for Haplotype Benin. For the anti-inflammatory profile, Bantu haplotype also showed high levels of the markers when compared to patients Benin haplotype. Then, the inflammatory profile of patients with SCA is associated with genetic polymorphisms. / A Anemia Falciforme (AF) é uma doença hereditária homozigótica caracterizada por anemia hemolítica grave e manifestações clínicas variáveis, considerada uma doença inflamatória crônica. A AF resulta de uma mutação pontual em uma base nitrogenada no sexto códon do gene da beta globina, levando a substituição do nucleotídeo adenina por timina (GAG → GTG), o que resulta na produção do aminoácido valina no lugar do ácido glutâmico. A fisiopatologia inflamatória da AF está centralizada na capacidade de polimerização da HbS que leva à hemólise crônica e à vaso-oclusão. Os pacientes com AF encontram-se em um estado inflamatório crônico de origem multifatorial, que envolve células endoteliais, eritrócitos, leucócitos e plaquetas através do aumento nas interações entre célula-célula e célula-endotélio iniciando uma lesão endotelial. O estudo foi do tipo transversal prospectivo com a finalidade de investigar a associação dos haplótipos com o perfil inflamatório de pacientes com AF. Foi realizada a confirmação da HbSS e em seguida o estudo dos haplótipos da mutação BS no gene da cadeia beta globínica. Foram dosados os marcadores IL-6, IL-8, TNF-α, IL-17, PCR-us, IL-10 e TGF-β em 67 pacientes com AF e em 26 indivíduos saudáveis. Observou-se a prevalência do haplótipo Bantu (67,1%) na população de pacientes estudada, seguido do haplótipo Benin (28,3%). O estudo confirma que os pacientes com AF encontram-se em um estado inflamatório crônico, pois apresentaram valores elevados de marcadores pró-inflamatórios e antiinflamatório, quando comparadas à indivíduos saudáveis. O haplótipo Bantu obteve mais elevados índices das citocinas pró-inflamatórias e da PCR-us quando comparados aos valores para o Haplótipo Benin. Para o perfil antiinflamatório, o haplótipo Bantu também apresentou valores elevados dos marcadores, quando comparados aos pacientes de haplótipo Benin. Então, o perfil inflamatório dos pacientes com AF está associado à polimorfismos genéticos.

SOUSA, P. C. V. Efeito neuroprotetor da troxerrutina no Parkinsonismo experimental induzido por 6-OHDA em ratos. 2016. 119 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-08-26T12:21:17Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_pcvsousa.pdf: 1483433 bytes, checksum: a426d93b7868d093599b528fb801656b (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-08-26T12:21:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_pcvsousa.pdf: 1483433 bytes, checksum: a426d93b7868d093599b528fb801656b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-26T12:21:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_pcvsousa.pdf: 1483433 bytes, checksum: a426d93b7868d093599b528fb801656b (MD5) Previous issue date: 2016-07-22 / Parkinson’s disease (PD) is characterized by a progressive degeneration of dopaminergic neurons in the substantia nigra (SN) being the second most common form of neurodegenerative disease among the elderly. The clinical aspects of PD shows an intersection between motor symptoms, cognitive, behavioral and neuropsychiatric changes and symptoms related to failure in the autonomic nervous system, these symptoms are associated mainly to deficiency of dopamine (DA). The administration of 6-OHDA mimics the decrease of dopamine content in the striatum, inflammation, apoptosis and oxidative stress present in PD to test neuroprotective agents in animal models. The troxirutin, naturally occurring substance, has strong anti-inflammatory activity, with a potential agent neuroprotetore the toxicity of 6-OHDA in mice. The aim of this study was to to investigate the effects of troxirutin on neurotoxicity induced by 6-OHDA. So, male Wistar rats was divided (220-250 g) into four groups: false-operated (FO), FO + T200 (troxirutin treated with 200 mg/kg, for 18 days v.o), 6-OHDA (received stereotaxic injections of 6-OHDA 18 g/3μl the right striatum) + 6-OHDA T200 (received stereotaxic injections of 6-OHDA 18 g/3μl the right striatum treated with troxerutin). The results shows that treatment with troxerutin decreased the number of contralateral rotations in the test of apomorphine. The troxirutin also improved vertical exploratory activity of animals in the open field test (rearing), the depressive-like state in the forced swimming test, as well as the recent memory of the animals in the test of passive avoidance and procedure memory in the cued version of the Morris Water maze. The troxirutin has also prevented the reduction of dopamine content in the SN as well as the microgliosis and astrogliosis in the striatum. Troxirrutin treatment also decreased the neuro-inflammation by reducing expression of TNF-α, NF-κBp 65 and p-Akt in the striatum. The results obtained in this study suggest that troxerutin reduces inflammation caused by the injection of 6-OHDA, highlighting the adjunct therapeutic potential of anti-inflammatory disease. / A doença de Parkinson (DP) é caracterizada pela perda progressiva dos neurônios dopaminérgicos da substância negra (SN) sendo a segunda forma mais comum de doença neurodegenerativa entre idosos. Os aspectos clínicos da DP apresentam uma interseção entre sintomas motores, mudanças cognitivas, mudanças comportamentais/ neuropsiquiátrica e sintomas relacionados a falhas no sistema nervoso autônomo (SNA), esses sintomas estão associados, principalmente, à deficiência de dopamina (DA). A administração de 6-OHDA mimetiza a diminuição do conteúdo de dopamina no estriado, a inflamação, a apoptose e o estresse oxidativo presentes na DP, para testar agentes neuroprotetores em modelos animais. A troxerrutina, substância de origem natural, apresenta forte atividade anti-inflamatória, sendo um possível agente neuroprotetore frente à toxicidade da 6-OHDA em ratos. O objetivo do presente trabalho foi estudar os efeitos da troxerrutina sobre a neurotoxicidade induzida por 6-OHDA. Para isso, dividiram-se ratos machos Wistar (220-250 g) em quatro grupos: falso-operado (FO), FO + T200 (tratados com troxerrutina 200 mg/kg, v.o durante 18 dias), 6-OHDA (parkinsonianos- receberam injeções estereotáxicas de 6-OHDA 18 μg/3μl no estriado direito), 6-OHDA + T200 (parkinsonianos tratados com troxerrutina). Os resultados mostram que o tratamento com troxerrutina diminuiu o número de rotações contralaterais no teste da apomorfina. A troxerrutina também melhorou a atividade exploratória vertical dos animais no teste do campo aberto (rearing), o estado depressivo-símile no teste do nado forçado, assim como a memória recente dos animais no teste da esquiva passiva e a memória de procedimento na versão com plataforma sinalizada do labirinto aquático. A troxerrutina preveniu ainda a redução do conteúdo de dopamina na SN, assim como a microgliose e astrogliose no estriado. O tratamento com troxerrutina também diminuiu a neuro-inflamação por reduzir a expressão de TNF-α, NF-ḵB e p-Akt no estriado. Os resultados obtidos no presente estudo sugerem que a troxerrutina reduz a inflamação causada pela injeção por 6-OHDA, ressaltando o potencial terapêutico co-adjuvante dos anti-inflamatórios na doença.

SOUSA, P. C. V. S. Efeito neuroprotetor da troxerrutina no Parkinsonismo experimental induzido por 6-OHDA em ratos. 2016. 119 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-09-01T15:26:23Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_pcvsousa.pdf: 1483433 bytes, checksum: a426d93b7868d093599b528fb801656b (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-09-01T15:26:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_pcvsousa.pdf: 1483433 bytes, checksum: a426d93b7868d093599b528fb801656b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-01T15:26:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_pcvsousa.pdf: 1483433 bytes, checksum: a426d93b7868d093599b528fb801656b (MD5) Previous issue date: 2016-07-22 / Parkinson’s disease (PD) is characterized by a progressive degeneration of dopaminergic neurons in the substantia nigra (SN) being the second most common form of neurodegenerative disease among the elderly. The clinical aspects of PD shows an intersection between motor symptoms, cognitive, behavioral and neuropsychiatric changes and symptoms related to failure in the autonomic nervous system, these symptoms are associated mainly to deficiency of dopamine (DA). The administration of 6-OHDA mimics the decrease of dopamine content in the striatum, inflammation, apoptosis and oxidative stress present in PD to test neuroprotective agents in animal models. The troxirutin, naturally occurring substance, has strong anti-inflammatory activity, with a potential agent neuroprotetore the toxicity of 6-OHDA in mice. The aim of this study was to to investigate the effects of troxirutin on neurotoxicity induced by 6-OHDA. So, male Wistar rats was divided (220-250 g) into four groups: false-operated (FO), FO + T200 (troxirutin treated with 200 mg/kg, for 18 days v.o), 6-OHDA (received stereotaxic injections of 6-OHDA 18 g/3μl the right striatum) + 6-OHDA T200 (received stereotaxic injections of 6-OHDA 18 g/3μl the right striatum treated with troxerutin). The results shows that treatment with troxerutin decreased the number of contralateral rotations in the test of apomorphine. The troxirutin also improved vertical exploratory activity of animals in the open field test (rearing), the depressive-like state in the forced swimming test, as well as the recent memory of the animals in the test of passive avoidance and procedure memory in the cued version of the Morris Water maze. The troxirutin has also prevented the reduction of dopamine content in the SN as well as the microgliosis and astrogliosis in the striatum. Troxirrutin treatment also decreased the neuro-inflammation by reducing expression of TNF-α, NF-κBp 65 and p-Akt in the striatum. The results obtained in this study suggest that troxerutin reduces inflammation caused by the injection of 6-OHDA, highlighting the adjunct therapeutic potential of anti-inflammatory disease. / A doença de Parkinson (DP) é caracterizada pela perda progressiva dos neurônios dopaminérgicos da substância negra (SN) sendo a segunda forma mais comum de doença neurodegenerativa entre idosos. Os aspectos clínicos da DP apresentam uma interseção entre sintomas motores, mudanças cognitivas, mudanças comportamentais/ neuropsiquiátrica e sintomas relacionados a falhas no sistema nervoso autônomo (SNA), esses sintomas estão associados, principalmente, à deficiência de dopamina (DA). A administração de 6-OHDA mimetiza a diminuição do conteúdo de dopamina no estriado, a inflamação, a apoptose e o estresse oxidativo presentes na DP, para testar agentes neuroprotetores em modelos animais. A troxerrutina, substância de origem natural, apresenta forte atividade anti-inflamatória, sendo um possível agente neuroprotetore frente à toxicidade da 6-OHDA em ratos. O objetivo do presente trabalho foi estudar os efeitos da troxerrutina sobre a neurotoxicidade induzida por 6-OHDA. Para isso, dividiram-se ratos machos Wistar (220-250 g) em quatro grupos: falso-operado (FO), FO + T200 (tratados com troxerrutina 200 mg/kg, v.o durante 18 dias), 6-OHDA (parkinsonianos- receberam injeções estereotáxicas de 6-OHDA 18 μg/3μl no estriado direito), 6-OHDA + T200 (parkinsonianos tratados com troxerrutina). Os resultados mostram que o tratamento com troxerrutina diminuiu o número de rotações contralaterais no teste da apomorfina. A troxerrutina também melhorou a atividade exploratória vertical dos animais no teste do campo aberto (rearing), o estado depressivo-símile no teste do nado forçado, assim como a memória recente dos animais no teste da esquiva passiva e a memória de procedimento na versão com plataforma sinalizada do labirinto aquático. A troxerrutina preveniu ainda a redução do conteúdo de dopamina na SN, assim como a microgliose e astrogliose no estriado. O tratamento com troxerrutina também diminuiu a neuro-inflamação por reduzir a expressão de TNF-α, NF-ḵB e p-Akt no estriado. Os resultados obtidos no presente estudo sugerem que a troxerrutina reduz a inflamação causada pela injeção por 6-OHDA, ressaltando o potencial terapêutico co-adjuvante dos anti-inflamatórios na doença.

LÓSSIO, Cláudia Figueirêdo. Purificação e caracterização parcial de uma lectina lactose-específica com ação pro-inflamatória de sementes de Dioclea reflexa. 2016. 60 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia de Recursos Naturais)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Anderson Silva Pereira (anderson.pereiraaa@gmail.com) on 2017-01-18T21:33:57Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_cflóssio.pdf: 981683 bytes, checksum: c1e6a8a162f87ba8b8a4df93a7c4bbf4 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-01-19T11:55:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_cflóssio.pdf: 981683 bytes, checksum: c1e6a8a162f87ba8b8a4df93a7c4bbf4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-19T11:55:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_cflóssio.pdf: 981683 bytes, checksum: c1e6a8a162f87ba8b8a4df93a7c4bbf4 (MD5) Previous issue date: 2016 / Lectins with lactose binding specificity isolated from seeds of phylogenetically close plant species of Diocleinae sub-tribe present different characteristics when compared to the extensively studied mannose/glucose-specific lectins. In this study, a new lactose-specific lectin from Dioclea reflexa seeds (DrfL II) was isolated by a two-step chromatography in Sephadex® G-50 and lactose-Sepharose columns. The SDS-PAGE showed that the pure lectin is composed of a single band, slightly lower than 30 kDa, presenting a different profile from ConA-like mannose/glucose specific lectins. Partial sequence of the protein was obtained by electrospray ionization mass spectrometry covering 30% of the total sequence. DrfL II presented sugar specificity to α-lactose, and high stability at wide range of pH. DrfL II showed no toxicity against Artemia nauplii and induced acute inflammation (paw edema and hipernociception) in mice with the participation of the lectin domain and nitric oxide. Thus, it is important to further determine the complete sequence and tridimensional structure of this new type of lactose-binding lectin in order to be able to compare it with mannose/glucose lectins and their biotechnological applications. / Lectinas específicas a lactose isoladas de sementes de espécies filogeneticamente próximas da sub-tribo Diocleinae apresentam diferentes características das extensivamente estudadas lectinas específicas a glicose-manose. Nesse estudo, uma nova lectina específica a lactose extraída a partir de sementes de Dioclea reflexa (DrfL II) foi isolada por dois passos cromatográficos em colunas de Sephadex G-50 e sepharose-lactose. A SDS-PAGE apresentou a lectina como uma banda única em torno de 29 kDa, resultado que difere do perfil já conhecido de lectinas ConA-like específicas a glicose/manose. A sequencia parcial da lectina foi obtida por espectrometria de massa com fonte ionizadora eletrospray cobrindo cerca de 30% da sequencia total da proteína. DrfL II apresentou especificidade à L-lactose e alta estabilidade a um vasto intervalo de pH. DrfL II mostrou não ser toxica em teste de toxicidade contra Artemia nauplii e induziu inflamação aguda (edema de pata e hipernocicepção) em camundongos com a participação do domínio da lectina e oxido nítrico. Poucas informações, no entanto, foram publicadas a respeito de lectinas lactose específicas de Diocleinae, se fazendo necessário, portanto, que o estudo seja continuado com a determinação completa da estrutura primaria e tridimensional da lectina, visando sua comparação com os dados existentes de lectinas ConA-like e lactose específicas.

FREITAS, A. P. F. Efeito de subtrações da proteína do látex da Calotropis procera na mucosite oral induzida por 5-fluorouracil. 2016. 116 f. Tese (Doutorado em Ciências Médicas) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-06-20T17:03:19Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_apffreitas.pdf: 3403371 bytes, checksum: 6a7649e4a7b9d1373aa22ffd5a268f2e (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-06-21T11:21:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_apffreitas.pdf: 3403371 bytes, checksum: 6a7649e4a7b9d1373aa22ffd5a268f2e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-21T11:21:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_apffreitas.pdf: 3403371 bytes, checksum: 6a7649e4a7b9d1373aa22ffd5a268f2e (MD5) Previous issue date: 2016-12-20 / Oral mucositis is one of the most common collateral effects in patients undergoing treatment with 5-fluorouracil (5-FU). In this context, It has been previously shown that with only two doses of the protein from the latex fraction of Calotropis procera it was possible to prevent damage caused by 5-FU in the oral mucosa. Thus, the aim of this study was investigate the effect of subfractions of the latex protein (PL) of Calotropis procera in the prevention of oral mucositis induced by 5-FU in hamsters. At first, the subfractions (PI, PII and PIII) of the PL of Calotropis procera were identified by chromatography. Hamsters received 0.9% saline, i.p., (Control) or Mechanical Trauma (TM) or 5-FU (60mg / kg and 40mg / kg, i.p., respectively, on the 1st and 2nd day of the experimental protocol). 24h and 72h after of the last dose of the chemotherapeutic, PL 5mg / kg (PL + 5-FU) or its subfractions were administered: PI 5mg / kg (PI + 5-FU); PII 5mg / kg (PII + 5-FU); PIII 5mg / kg (PIII + 5-FU) and PII IAA 5mg / kg (PII IAA + 5-FU). On the 4th day, all experimental groups, except the control, were submitted to TM. The animals were observed daily until the tenth day of the experimental protocol to evaluate survival and weight loss. Then, the animals were anesthetized and their jugal mucosas were exposed for the mascroscopic analysis. Hamsters were euthanized and their jugal mucosa were collected to evaluate the following parameters: histopathological analysis, neutrophil recruitment (myeloperoxidase dosage, MPO), oxidative stress (GSH and MDA levels), inflammation (levels of TNFα and IL- ELISA, including protein expression of IL-1β, ICAM-1 and Iba-1 by immunohistochemistry) and integrity of collagen fibers (PicroSirius Red staining). From the PL fraction of Calotropis procera, the subfractions PI, PII and PIII were identified and showed to be quite distinct. In addition, PII and PIII showed intense proteolytic activity. The proteolytic activity of PII was inhibited with iodoacetamide, leading to PII IAA. 5-FU reduced survival, caused intense weight loss, caused extensive ulcer formation, development of abscesses, marked erythema, haemorrhage and edema. In addition, it also promoted formation of ulcers, characterized by loss of integrity of the jugal epithelium and intense infiltration of inflammatory cells. In addition, 5-FU increased the levels of MPO, MDA, IL-1β and TNF-α, including the expression of ICAM-1 and Iba-1, as well as decreased GSH levels and reduced collagen fibers in the oral mucosa compared to the control group. Whereas only PL or IAA PII were able to prevent these 5-FU promoted alterations. It is concluded that PII with its proteolytic activity inhibited by IAA is the subfraction responsible for the previously observed beneficial effects of PL on oral mucositis induced by 5-FU. Therefore, PII IAA attenuates 5-FU induced oral mucositis by reducing oxidative stress, inflammation (by decreasing the expression of adhesion molecules, neutrophil recruitment and macrophage activation with consequent decrease of IL-1β and TNF- Α). Thus, it prevents degradation of collagen fibers, including weight loss and increased survival in animals submitted to experimental oral mucositis. / A mucosite oral é um dos efeitos colaterais mais comuns em pacientes submetidos ao tratamento com 5-fluorouracil (5-FU). Nesse contexto, foi demonstrado que a fração Proteica do Látex (PL) da Calotropis procera, com apenas duas doses, preveniu os danos causados pelo 5-FU na mucosa oral. Devido a isso, o objetivo deste estudo foi investigar o efeito de subfrações da proteína do látex (PL) da Calotropis procera na prevenção da mucosite oral induzida por 5-FU em hamsters. As subfrações (PI, PII e PIII) da PL da Calostropis Procera foram obtidas por cromatografia. Hamsters receberam salina 0,9%, i.p., (Controle ou Trauma Mecânico, TM) ou 5-FU (60mg/kg e 40mg/kg, i.p., respectivamente) no 1º e 2º dia do protocolo experimental. Após 24h e 72h da última dose do quimioterápico, administrou-se PL 5mg/kg (PL+5-FU) ou suas subfrações: PI 5mg/kg (PI+ 5-FU); PII 5mg/kg (PII + 5-FU); PIII 5mg/kg (PIII +5-FU) e PII IAA 5mg/kg (PII IAA+ 5-FU). No 4º dia, todos os grupos, exceto o grupo controle, foram submetidos ao TM. Os animais foram observados diariamente até o 10º dia do protocolo experimental para avaliar a sobrevida e a perda ponderal. Após a última análise, os animais foram anestesiados e suas mucosas jugais foram expostas para a análise macroscópica e em seguida, foram eutanasiados e suas mucosas jugais foram coletadas para avaliar os seguintes parâmetros: análise histopatológica, recrutamento de neutrófilos (dosagem de mieloperoxidase, MPO), estresse oxidativo (níveis de GSH e MDA), inflamação (níveis de TNFα e IL-1β por ELISA, incluindo expressão proteica de IL-1β, ICAM-1 e Iba-1 por imunohistoquímica) e integridade das fibras colágenas (coloração de PicroSirius Red). A partir da fração PL da Calotropis procera, foram identificadas 3 subfrações PI, PII e PIII bem distintas. Foi realizado um Zimograma e as frações PII e PIII demonstraram intensa atividade proteolítica. Devido a porcentagem de sobrevida, a atividade proteolítica de PII foi inibida com iodoacetamida, originando PII IAA. 5-FU reduziu a sobrevida, causou intensa perda ponderal, ocasionou formação de úlceras extensas, desenvolvimento de abscessos, de eritema acentuado, de hemorragia e de edema. Além disso, também promoveu formação de úlceras, caracterizado pela perda da integridade do epitélio da mucosa jugal e intenso infiltrado de células inflamatórias. Adicionalmente, 5-FU aumentou os níveis de MPO, MDA, IL-1β e TNF-α, incluindo a expressão de ICAM-1 e Iba-1, bem como, diminuiu os níveis de GSH e reduziu as fibras colágenas nas mucosas jugais comparado ao grupo controle. Por outro lado, apenas PL ou PII IAA foram capazes de prevenir essas alterações promovidas por 5-FU. Conclui-se que PII com sua atividade proteolítica inibida pelo IAA é a subfração responsável pelos efeitos benéficos observados anteriormente da PL na mucosite oral induzida por 5-FU. Adicionalmente, PII IAA atenua a mucosite oral induzida por 5-FU por reduzir o estresse oxidativo, a inflamação (por diminuir a expressão de moléculas de adesão, o recrutamento de neutrófilos e a ativação de macrófagos com consequente diminuição de IL-1β e TNF-α). Além disso, a subfração PII IAA possui efeito antioxidante e anti-inflamatório, previne a degradação das fibras colágenas, incluindo a perda de peso, e aumento da sobrevida em animais submetidos à mucosite oral experimental.