Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-06-21T12:20:46Z No. of bitstreams: 1 elainedefreitascastroreis.pdf: 9019680 bytes, checksum: bdfd7990bb38d93c9a610109ce09ec5a (MD5) / Rejected by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br), reason: on 2017-06-21T12:44:20Z (GMT) / Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-06-21T12:44:55Z No. of bitstreams: 1 elainedefreitascastroreis.pdf: 9019680 bytes, checksum: bdfd7990bb38d93c9a610109ce09ec5a (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-07T19:05:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 elainedefreitascastroreis.pdf: 9019680 bytes, checksum: bdfd7990bb38d93c9a610109ce09ec5a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-07T19:05:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 elainedefreitascastroreis.pdf: 9019680 bytes, checksum: bdfd7990bb38d93c9a610109ce09ec5a (MD5) Previous issue date: 2014-06-06 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O processo inflamatório é urna resposta coordenada do organismo a infecções e lesões teciduais, ativando a resposta imune e levando à liberação de substâncias pró- inflamatórias, como o óxido nítrico, TNF-α e IL-1β. Neste trabalho uma série de aminoálcoois lipofílicos de cadeia alifática longa foi avaliada na linhagem de macrófagos RAW 264.7 e macrófagos peritoneais inflamados de camundongos BALB/c, para verificar a viabilidade celular pelo Método do MTT, a produção de óxido nítrico pelo Método de Griess, assim como a dosagem de TNF-α e IL-1β por Elisa. Os aminoálcoois lipofilicos que apresentaram bons resultados in vitro, foram utilizados in vivo no tratamento de camundongos nos modelos de indução de edema em patas de camundongos pela carragenina, na dosagem de TNF-a e IL-1β no sobrenadante do macerado de coxins plantares de patas de camundongos, assim como no modelo de reação de hipersensibilidade tardia (RHT) à ovalbumina. Foram realizadas culturas com macrófagos da linhagem RAW 264.7 na presença de aminoálcoois com diferentes concentrações (1, 0,5 , 0,05 e 0,005 µg/mL). Os aminoálcoois testados não alteraram a viabilidade celular e inibiram a produção de NO e de TNF-α, na maioria das concentrações testadas, porém sem alterar a produção de IL-1β. Nas culturas de macrófagos primários foram testados os aminoálcoois 4a e 413, que alteraram a viabilidade celular, e não induziram a diminuição da produção de NO e das citocinas pro-inflamatórias TNF-α e IL-1β. Os aminoálcoois 4a e 4h foram escolhidos para os testes in vivo. A dexametasona foi escolhida como referência, por ser um dos fármacos de escolha para o tratamento das desordens inflamatórias, porém apresenta efeitos secundários indesejados dêvido à supressão total da resposta imune. O aminoálcool 413 mostrou redução do edema induzido em pata de camundongo pela carragenina, e diminuição de TNF-α e IL-1β tão eficiente quanto o tratamento com dexametasona. Na reação de hipersensibilidade tardia à OVA os aminoálcoois 4a e 4b apresentaram redução no edema em pata de camundongo similar a dexametasona. Em função dos resultados observados in vitro e in vivo o composto 4b mostrou propriedades anti-inflamatórias promissoras. / The inflammatory process is a coordinated response to infections and tissue damage by activating the immune response and leading to the release of pro-inflammatory substances, such as nitric oxide, TNF-a and IL-1β. In this study a series of lipophilic long chain aliphatic aminoalcohols was evaluated in RAW 264.7 macrophage lineage and inflamed peritoneal macrophages of mice BALB/c, to verify cell viability by the MTT method, the production of nitric oxide by Griess method, as well as dosage TNF-a and IL-1β by ELISA. Lipophilic amino alcohols that presented good results in vitro, were used in vivo treatment of mice in models of the carrageenan- induced paw edema in mouse and measure the levels of TNF-a and IL-1β in the supernatant of macerated of footpad mice as well as in the delayed hypersensitivity reaction (RHT) to ovalbumin model. Cultures of RAW 264.7 macrophage lineage with aminoalcohols in the presence of different concentrations (1, 0.5, 0.05 and 0.005 mg / mL) were evaluated. The aminoalcohols tested did not affect cell viability and inhibit the production of NO and TNF-a, most of the concentrations tested, but without altering the production of IL-1β. In cultures of primary macrophages the amino alcohols 4a and 4b, which altered cell viability and did not induce a decrease in NO production and pro-inflammatory cytokines TNF-a and IL-1β were tested. The amino alcohols 4a and 4b were chosen for testing in vivo. Dexamethasone is chosen as the reference drug for treating various inflammatory diseases, but have unwanted side effects due to the complete suppression of immune response. The amino alcohol 4b showed reduced edema induced in mouse paw by carrageenan, and decreased TNF-a and IL-1β as effective as treatment with dexamethasone. In the anti-ovalbumin delayed hypersensitivity reaction the aminoalcohols 4a and 4b showed reduction in paw edema mice similar dexamethasone. In function of the results observed in vitro and in vivo compound 4b showed promissory anti-inflammatory properties.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2018-06-26T10:52:38Z No. of bitstreams: 0 / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2018-06-27T15:27:12Z (GMT) No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2018-06-27T15:27:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2018-05-25 / Introdução: A doença inflamatória intestinal (DII) é um grupo de doenças caracterizado por inflamação de natureza crônica e etiologia multifatorial, constituído principalmente pela doença de Crohn e pela retocolite ulcerativa. Tais doenças comprometem preferencialmente indivíduos jovens em fase produtiva, tem curso flutuante com fases de remissão e atividade, e frequentemente apresentam comportamento clínico agressivo, com impacto na qualidade de vida. O Clostridium difficile é um bastonete gram positivo, produtor de esporos, ubíquo na natureza e representa causa importante de diarreia associada ao uso de antimicrobianos, através da produção das toxinas A e B. A literatura tem relatado maior ocorrência da infecção por C. difficile (ICD) em pacientes com DII, o que aumenta o risco de recorrência da DII e pior evolução. Objetivo: Avaliar a prevalência, os aspectos epidemiológicos, os fatores associados e a evolução clínica da infecção por C. difficile em pacientes ambulatoriais com DII. Métodos: Neste estudo prospectivo longitudinal, realizado entre outubro de 2013 a julho de 2016, com 120 pacientes com DII (55% apresentando colite) e 40 controles não-DII foram avaliados para ICD, através de análise de amostras fecais para pesquisa de toxinas do C. difficile, através do teste de ELISA. Foi avaliado fatores de riscos associados a ICD. A regressão multivariada foi realizada para identificar preditores de ICD. Resultados: A proporção de pacientes com ICD foi significativamente maior em pacientes com DII em atividade que DII em remissão (28,8% vs. 5,6% vs. 0%, respectivamente, p = 0,001). Feminino (OR = 1,39, IC 95%, 1,13-17,18), idade mais jovem (OR = 0,77, IC 95%, 0,65-0,92), tratamento com esteróides (OR = 7,42, IC 95%, 5,17-40,20) e terapia com infliximabe (OR = 2,97, IC 95%, 1,99-24,63) foram independentemente associados com ICD. Houve aumento nas probabilidades de ter ICD em pacientes com prednisona. Conclusões: A ICD é uma condição altamente concorrente em pacientes com DII apresentando exacerbação de colite a nível ambulatorial. O sexo feminino, a idade mais jovem, a terapia com infliximabe e o uso de esteróides foram associados de forma independente à co-ocorrência de ICD. A maioria dos pacientes com ICD apresentaram doença leve a moderada e o tratamento com vancomicina foi muito efetivo, parecendo reduzir o risco de complicações graves relacionadas à ICD. / Introduction: Inflammatory bowel disease (IBD) comprises a group of diseases of multifactorial etiology, characterized by chronic and progressive inflammation of the gastrointestinal tract, consisting mainly of Crohn's disease and ulcerative colitis. Clostridium difficile is a gram-positive, spore-producing rod that is ubiquitous in nature and is an important cause of diarrhea associated with the use of antimicrobials and in immunocompromised patients. The literature has reported a higher occurrence of Clostridium difficile infection (CDI) in patients with IBD, leading to significant morbidity and mortality. Objective: To evaluate the prevalence, epidemiological aspects and clinical evolution of CDI in outpatients with recurrent IBD. Methods: In this prospective longitudinal study, conducted between October 2013 and July 2016, 120 patients with IBD (55% with colitis flare) and 40 non-IBD controls were evaluated for CDI by searching for toxins A and B in feces fresh by ELISA. All patients with CDI were treated with oral vancomycin and followed up for an additional six months. Multivariate regression was performed to identify predictors of CDI. Results: The proportion of patients with CDI was significantly higher in patients with active IBD than in those with IBD in remission or in non-IBD controls (28.8% vs. 5.6% vs. 0%, respectively, p = 0.001). Females (OR = 1.39, 95% CI, 1.13-17.18), younger age (OR = 0.77, 95% CI, 0.65-0.92), steroid treatment (OR = 7.42, 95% CI, 5.17-40.20) and infliximab therapy (OR = 2.97, 95% CI, 1.99-24.63) were independently associated with CDI. There was a dose-related increase in odds of having CDI in patients using prednisone. All patients treated with vancomycin responded to therapy, but 21% had recurrent CDI and 16% were hospitalized. Neither colectomy nor mortality was noticed.Conclusions: CDI is a highly concurrent condition in outpatients IBD with colitis flare. Females, younger age, infliximab therapy, and steroid use were independently associated with the cooccurrence of IBD. Most patients with CDI had mild to moderate disease and vancomycin treatment was very effective, seeming to reduce the risk of serious complications related to CDI.

As Doenças inflamatórias intestinais (DII) são multifatoriais e sua etiologia envolve susceptibilidade genética, fatores ambientais, disbiose e ativação exacerbada do sistema imunológico no intestino. Essas doenças também tem sido relacionadas a baixos níveis de dehidroepiandrosterona (DHEA), um hormônio precursor de diversos esteroides e relacionado à modulação das respostas imunes. Porém, os mecanismos precisos que relacionam as ações deste hormônio com a proteção ou susceptibilidade à doença de Crohn ou colite ulcerativa ainda não são totalmente conhecidos. Sendo assim, este projeto buscou entender o papel imunomodulador do DHEA exógeno in vitro e in vivo durante a inflamação intestinal experimental induzida por dextran sulfato de sódio (DSS) em camundongos C57BL/6. Inicialmente, in vitro, DHEA inibiu a proliferação de células do baço de forma dose dependente nas concentrações de 5?M, 50?M ou 100?M, com diminuição da produção de IFN-?. Este hormônio não foi tóxico para células de linhagem mieloide, embora tenha causado necrose em leucócitos nas doses mais elevada (50 ?M e 100?M), o que pode ter influenciado a diminuição das citocinas in vitro. Nos ensaios in vivo, os camundongos tratados com DHEA (40 mg/Kg) foram avaliados na fase de indução da doença (dia 6) e durante o reparo tecidual, quando os animais expostos ao DSS e ao DHEA por 9 dias foram mantidos na ausência destas drogas até o dia 15. Houve diminuição do escore pós-morte, melhora no peso e nos sinais clínicos da inflamação intestinal, com redução de monócitos no sangue periférico com 6 dias e aumento de neutrófilos circulantes na fase de reparo tecidual (15 dias). Ainda, a suplementação com DHEA levou à redução da celularidade da lâmina própria (LP) e ao restabelecimento do comprimento normal do intestino. O uso deste hormônio também diminuiu a expressão do RNAm de IL-6 e TGF-?, enquanto aumentou a expressão de IL-13 no colón dos animais durante a fase de indução da doença, o que provavelmente ajudou na atenuação da inflamação intestinal. Além disso, houve acúmulo de linfócitos CD4+ e CD8+ no baço e diminuição apenas de linfócitos CD4+ nos linfonodos mesentéricos (LNM), indicando retenção das células CD4+ no baço após uso do DHEA. O tratamento foi também capaz de aumentar a frequência de células CD4 produtoras de IL-4 e diminuir CD4+IFN-?+ no baço, além de reduzir a frequência de CD4+IL-17+ nos LNM, sugerindo efeito do DHEA no balanço das respostas Th1/Th2/Th17 relacionadas à colite. Em adição, as células de baço dos animais tratados com DHEA e expostos ao DSS se tornaram hiporresponsivas, como visto pela diminuição da proliferação após re-estímulos in vitro. Finalmente, DHEA foi capaz de atuar no metabolismo dos camundongos tratados, levando à diminuição de colesterol total e da fração LDL no soro durante a fase de indução da doença, sem gerar quaisquer disfunções hepáticas. Com isso, podemos concluir que o DHEA atua por meio do balanço das respostas imunes exacerbadas, minimizando os danos locais e sistêmicos causados pela inflamação intestinal induzida por DSS. / Inflammatory bowel diseases (IBD) are multifactorial diseases whose etiology involves genetic susceptibility, environmental factors, dysbiosis and exacerbated activation of the immune system in the gut. These diseases have also been associated to lower levels of dehydroepiandrosterone (DHEA), a precursor of various steroid hormones, related to modulation of immune responses. However, the precise mechanisms that link the actions of this hormone with protection or susceptibility to Crohn\'s disease or ulcerative colitis are still not fully understood. Thus, this project aimed to understand the immunomodulatory role of exogenous DHEA in vitro and in vivo in experimental intestinal inflammation induced by dextran sodium sulfate (DSS) in C57BL/6 mice. Initially, in vitro, DHEA inhibited the proliferation of spleen cells in a dose dependent way on the concentrations of 5?M, 50?M and 100?M, with decreased production of IFN-?. This hormone was not toxic to myeloid lineage cells, although it caused necrosis of leukocytes at the highest doses (50?M and 100?M), which may have influenced the decrease of the cytokines in vitro. Mice treated with DHEA (40 mg / kg) were evaluated at the induction phase of the disease (day 6) and during tissue repair, when animals exposed to DSS and DHEA for 9 days were maintained in the absence these drugs until the day 15. There was decrease of postmortem score, improved weight and clinical signs of intestinal inflammation, besides reduced peripheral blood monocytes on day 6, together with an increase in circulating neutrophils in tissue repair phase (15 days). Supplementation with DHEA also led to a reduction in cellularity of the lamina propria (LP) and to the restoration of normal length of the gut. The use of this hormone also decreased the expression of of IL-6 and TGF-? mRNA, while IL-13 was augmented in the colon of mice during the induction phase of the disease, a fact probably related to attenuation of intestinal inflammation. Furthermore, there was accumulation of CD4+ and CD8+ cells in the spleen along with decreased CD4+ leukocytes in mesenteric lymph nodes (MLN), indicating retention of CD4+ cells in the spleen after use of DHEA. The treatment was also able to increase the frequency of CD4+ cells producing IL-4 and decrease CD4+IFN-?+ in spleen, with reduced frequency of CD4+IL-17+ in the MLN, suggesting a role for DHEA on the balance of Th1/Th2/Th17 responses related colitis. In addition, splenocytes of mice treated with DHEA and exposed to DSS became hiporresponsives as seen by decreased proliferation after re-stimulation in vitro. Finally, DHEA was able to act on the metabolism of treated mice, leading to decreased total cholesterol and LDL cholesterol in serum during the induction phase of the disease, without generating any liver dysfunction. Thus, we concluded that DHEA acts by balancing the exacerbated immune responses, minimizing local and systemic damages caused by intestinal inflammation induced by DSS.

Visando a produção de um alimento que possua elevados teores de compostos bioativos, a piramidação de genes é uma técnica capaz de estimular o acúmulo e a expressão de novas classes de flavonoides em tecidos vegetais, como por exemplo, o tomate roxo, rico em antocianinas. As antocianinas podem atenuar o processo inflamatório através da modulação da cascata de sinalização e da expressão de enzimas, sendo este um dos possíveis mecanismos de ação que leva a promoção da saúde, atribuído a esta classe de compostos. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a ação anti-inflamatória do extrato de tomate roxo, obtido por piramidação dos genes Anthocyanin Fruit (Aft), Aubergine (Abg) e atroviolaceum (atv), em camundongos submetidos ao modelo de peritonite induzida por lipopolissacarídeo (LPS). O fruto tomate vermelho - Micro Tom (MT) e o transformado foram caracterizados quanto ao seu perfil de compostos fenólicos. A casca do tomate roxo, rica em antocianinas, apresentou conteúdo de fenólicos totais dez vezes maior quando comparado à casca do MT, apresentando também maiores quantidades de ácido ascórbico e capacidade antioxidante avaliado nos métodos DPPH e ORAC; em relação à polpa e casca do tomate vermelho e a polpa do tomate roxo. Os principais flavonoides identificados na casca do tomate roxo, por CLAE-DAD, foram: as antocianidinas petunidina (86,5 mg/100 g b.u.), delfinidina (6,85 mg/100 g b.u.), principalmente na forma acilada, e o flavonol rutina (106,26 mg/100 g b.u.). A propriedade anti-inflamatória dos compostos fenólicos foi avaliada através de um modelo de peritonite, em camundongos, induzida por LPS. O extrato aquoso do tomate roxo, rico em antocianinas (2 e 4 mg petunidina eq./100 g peso corpóreo) foi administrado, por via oral, 30 minutos antes do estímulo inflamatório. No exsudato peritoneal, coletado após 3h do estímulo, foi observada, no grupo que recebeu 4 mg quando comparado ao grupo estimulado com LPS, uma redução significativa (p<0,05) de cerca de 37% no número de leucócitos totais e de 64% na expressão gênica de mRNA de COX-2 e na produção de citocinas pró-inflamatórias (TNF-&#945;, IL-1&#946;, IL-2, IL-6 e MCP-1), assim como um aumento significativo da citocina anti-inflamatória IL-10. Em estudo de absorção, os metabólitos: delfinidina aglicona (m/z 303) e malvidina aglicona (m/z 331) foram detectados, por cromatografia líquida ESI-MS/MS, nas amostras de fígado dos animais eutanasiados após 30 minutos de administração do extrato do tomate roxo. Portanto, os resultados demonstram que as antocianinas presentes no tomate roxo, por meio dos metabólitos encontrados no fígado dos animais, apresentam atividade anti-inflamatória através do controle do influxo leucocitário, da modulação da expressão gênica de COX-2 e da produção citocinas. / Aiming to produce a food having high contents of bioactive compounds, the gene pyramiding is a technique capable of stimulating the expression and accumulation of new classes of flavonoids in plant tissues, such as purple tomato, rich in anthocyanins. Anthocyanins may attenuate the inflammatory process by modulating the signaling cascade and expression of enzymes, which is one of the possible mechanisms of action that leads to health promotion, assigned to this class of compounds. The objective of this study was to evaluate the anti-inflammatory action of the purple tomato paste, obtained by pyramiding of genes Fruit Anthocyanin (Aft), Aubergine (Abg) and atroviolaceum (atv) in mice submitted to peritonitis model induced by lipopolysaccharide (LPS). The tomato fruit - Micro Tom (MT) and the transformed were characterized according to their profile of phenolic compounds. The purple tomato peel, rich in anthocyanins, phenolics content presented ten times higher compared to the shell of the MT, and also provides increased amounts of ascorbic acid and antioxidant activity in the DPPH rated and the ORAC methods; than the pulp and peel the tomato pulp and purple tomatoes. The main flavonoids identified in tomato peel purple, by HPLC-DAD were: petunidin the anthocyanidins (86.5 mg / 100 g wb), delphinidin (6.85 mg / 100 g wb), especially in the acylated form, and flavonol rutin (106.26 mg / 100 g bu). The anti-inflammatory properties of the phenolic compounds was evaluated through a model of peritonitis in mice induced by LPS. The extract of purple tomato, rich in anthocyanins (2 and 4 petunidin mg eq. / 100 g body weight) was administered orally 30 minutes before the inflammatory stimulus. In the peritoneal exudate collected after 3 h of stimulation was observed in the group receiving 4 mg as compared to the LPS stimulated group, a significant reduction (p <0.05) of about 37% in the number of total leukocytes and 64 % mRNA gene expression of COX-2 and production of proinflammatory cytokines (TNF-&#945;, IL-1&#946;, IL-2, IL-6 and MCP-1), as well as a significant increase of the anti-inflammatory cytokine IL-10. In a study of absorption, the metabolites: aglycone delphinidin (m / z 303) and malvidin aglycone (m / z 331) were detected by HPLC - ESI-MS / MS, in liver samples from animals euthanized 30 minutes after administration the purple tomato extract. Therefore, the results show that anthocyanins present in the purple tomato, through the metabolites found in animal liver, exhibit anti-inflammatory activity by controlling the leukocyte influx, the modulation of gene expression of COX-2 and production cytokines.

Os mosquitos representam o grupo mais importante de vetores de doenças infecciosas para o homem. Para que possam ter sucesso no repasto sanguíneo e sejam capazes de adquirir os nutrientes necessários para a maturação dos ovos, a saliva desses vetores possui atividades anti-hemostáticas e imunomoduladoras. Sabendo-se da importância da saliva dos artrópodes hematófagos para sua alimentação e para a transmissão de patógenos causadores de doenças o objetivo deste estudo foi caracterizar as atividades imunomoduladoras de um peptídeo descrito no salivoma de A. aegypti, presente somente em glândulas salivares de mosquitos fêmeas e cujo papel biológico ainda é desconhecido. Observou-se que o peptídeo denominado AeMOPE-1 inibiu a produção de mediadores pró-inflamatórios por macrófagos ativados, assim como induziu a resposta imune para o perfil Th2. O tratamento com o AeMOPE-1 reduziu os sintomas clínicos da colite experimental. Essa é a primeira descrição de um peptídeo salivar de A. aegypti com atividade imunomoduladora em macrófagos e com potencial ação terapêutica. / Mosquitoes are the most important vectors of pathogens that causing infectious to humans. To female succeed in their hematophagous habit and thus acquire the nutrients necessary for the maturation of their eggs, their saliva has components with anti-hemostatic and immunomodulatory activities. Thus, the aim of this project was to study the role of a novel salivary peptide described in the A. aegypti sialome, present only in female salivay glands, whose biological functions are still unknown. It was observed that the peptide named AeMOPE-1 inhibited the production of pro-inflammatory mediators by activated macrophages, as well as induced the immune response to the Th2 profile. Treatment with AeMOPE-1 reduced the clinical symptoms of experimental colitis. This works presents the first salivary peptide from A. aegypti with potent activity on macrophage biology and potential clinical application.

Corticosteróides injetáveis têm sido usados em fonocirurgia com o intuito de se prevenir fibrose da prega vocal pelos seus efeitos na cicatrização e assegurar uma melhor qualidade vocal. O objetivo deste estudo é avaliar histologicamente os efeitos da infiltração de dexametasona no processo agudo de cicatrização, 3 e 7 dias após uma lesão induzida cirurgicamente na prega vocal de coelhos, através da análise quantitativa da reação inflamatória e da deposição de colágeno. Uma incisão cirúrgica foi realizada nas pregas vocais de 12 coelhos, seguido da injeção de 0,1ml de dexametasona na prega vocal esquerda. A prega vocal direita não recebeu nenhuma injeção e serviu como grupo controle. As laringes foram coletadas 3 e 7 dias após a cirurgia. As pregas vocais foram histologicamente analisadas com hematoxilina-eosina para quantificar a resposta inflamatória e picrossírius-red para quantificar a deposição de colágeno. Quantitativamente, não houve diferença significativa na resposta inflamatória das pregas vocais com corticosteróide em relação ao controle. A deposição de colágeno no grupo com corticóide foi estatisticamente menor em 3 dias e permaneceu menor em 7 dias após a lesão cirúrgica (p=0,002). Esses resultados sugerem que os corticosteróides diminuem a deposição do colágeno no processo agudo da cicatrização / Injectable corticosteroids have been used in phonosurgery to prevent scarring of the vocal fold due to their effects on wound healing, and to assure better voice quality. The aim of this study is to evaluate histologically the effects of dexamethasone infiltration on acute vocal fold wound healing in rabbits 3 and 7 days after surgically-induced injury, by quantification of the inflammatory reaction and collagen deposition. A standardized surgical incision was made in the vocal folds of 12 rabbits, and 0.1 ml dexamethasone (4 mg/ml) was injected into the left vocal fold. The right vocal fold was not injected and served as the control. The larynges were collected 3 and 7 days after surgery. For histological analysis, the vocal folds were stained with hematoxylin-eosin for quantification of the inflammatory response and with picrosirius red for quantification of collagen deposition. There was no quantitative difference in the inflammatory response between vocal folds injected with the corticosteroid and the control folds. However, collagen deposition was significantly lower in the corticosteroid-treated group at 3 and 7 days after the injury (p = 0.002). The present results suggest that dexamethasone reduces collagen deposition during acute vocal fold wound healing

Este estudo teve como objetivo avaliar, in vivo, por um período de 24h, a resposta tecidual inflamatória subcutânea após a utilização de cimentos endodônticos. Realizouse a seleção de 75 ratos, machos, da linhagem Wistar, de aproximadamente 90 dias (de vida) e com cerca de 350g (de peso), que foram aleatoriamente distribuídos em 5 grupos (n=20), como se segue: G1 - ActiV GPTM, G2 - Biosealer, G3 - RealSeal®, G4 - RoekoSeal® e G5 - AH Plus®. A resposta inflamatória foi observada pelo teste edemogênico, nos tempos 6, 12 e 24 horas. Como protocolo de aplicação da metodologia, os animais depois de anestesiados, receberam uma injeção do corante vital Azul de Evans na veia lateral caudal. Em seguida, foram tricotomizados em seu dorso e, doses iguais dos materiais estudados foram inseridas subcutaneamente. Ao final de cada período de tempo, realizou-se a remoção da pele dorsal em fragmentos de 15 mm de diâmetro. Os fragmentos foram imersos em solução de formamida P.A., armazenados em estufa a 37ºC, por 48 horas. Nesse momento, os índices de absorbância do corante extraído pelo solvente foram quantificados por meio de espectrofotometria, os resultados convertidos em microgramas (?g) e a concentração de cada substância no infiltrado inflamatório obtida. Os dados obtidos foram submetidos a ANOVA e teste de Tukey (p<0,05). E, de acordo com os resultados obtidos, observou-se que houve diferenças estatisticamente significativas para os fatores em estudo material (p<0,0001) e tempo (p<0,0001), entretanto não houve interação material*tempo (p=0,128). Sendo assim, nas primeiras 6h, a ordem decrescente de irritabilidade dos materiais analisados foi: G3 ? G5 > G1 > G2 > G4. Entretanto, os materiais desempenharam-se de forma semelhante, tanto no tempo de 12h quanto no de 24h, como se segue: G1 ? G3 ? G5 > G2 ? G4. Desta forma, pôde-se concluir que: 1 - o cimento RoekoSeal demonstrou o menor grau de irritabilidade no tempo experimental de 6 horas; 2 - Os cimentos RealSeal e AH Plus apresentaram resposta inflamatória mais intensa no período experimental de 6 horas e 3 - o índice de irritabilidade nas primeiras 6 horas é significativamente superior quando comparado ao período de 24h, independente do material testado. / The aim of this study was evaluate in vivo the earliest 24 hours tissue inflammatory response to five endodontic sealers. In order to this, 75 male rats Wistar with 90 days of age and approximately 350g of weight were divided in 5 experimental groups (n=20): G1 - ActiV GPTM, G2 - Biosealer, G3 - RealSeal®, G4 - RoekoSeal® e G5 - AH Plus®. The inflammatory response was evaluated using the edemogenic test in the experimental periods of 06, 12 and 24 hours. Anesthetized mice received an Evan´s blue dye injection in the lateral caudal vein and were tricotomized in the dorsum where equal amounts of each sealer were subcutaneously inoculated. After experimental period, the mice were sacrified, the dorsal skin was excised and pieces with 15mm of diameter around each inoculated sealer were removed. Each tissue piece was reduced to fragments, immersed in formamide solution and stored at 37ºC during 48 hours. At this moment, the absorbance index of the dye extracted by the solvent was quantified using light absorption spectrometry, the results were converted to micrograms (?g) and their concentration in the inflammatory infiltrated was obtained. The data was submitted to statistical analysis using the ANOVA followed by the Tukey test (p<0.05) and the results showed statistical significant difference for analyzed factors, the material and the time (p<0.001); without interaction between both (p=0.128). Thus, in decrescent order inflammatory response, the groups were scaled: G3 ? G5 > G1 > G2 > G4 for 6 hours, and G1 ? G3 ? G5 > G2 ? G4 for 12 hours and 24 hours. Our findings indicated that: 1 - The RoekoSeal presented the minor inflammatory response value in the 6 hours experimental period; 2 - The RealSeal and AH Plus sealers showed intense inflammatory response in the experimental period of 6 hours; 3 - The inflammatory values at 6 hours were significantly higher compared with results in the period of 24 hours independently of the tested material.

Modulação da resposta imune no local do tumor é um mecanismo crítico envolvido com evasão dos tumores. Sinais de PD-1 e PD-L1/PD-L2 podem estar envolvidos com o escape tumoral. Entretanto, pouco se sabe a respeito destas moléculas no desenvolvimento de carcinoma de células escamosas. No presente estudo, nós investigamos a expressão de PD-1 sobre células T das lesões e linfonodos de carcinomas de células escamosas. A carcinogênese de pele foi induzida quimicamente com DMBA/PMA em camundongos. A caracterização da expressão de PD-1, PD-L1 e PD-L2 na lesão e linfonodos foram analisados por citometria de fluxo. A produção IL-10, IL-12, TGF- e IFN- foi determinada por ELISA. Camundongos tratados com DMBA/PMA apresentaram maior taxa de papilomas e progressão para carcinoma de células escamosas. Nós encontramos também que células T CD4+PD-1+ migraram para o local do tumor e que maior nível de CD4+PD-1+, CD8+PD-1+, CD14+PD-1+ e CD4+PD-L1+ foram detectados nos linfonodos quando comparados com o grupo controle. Além disso, as produções de IL-12, IFN- e TGF-, mas não IL-10, foram altamente detectadas nas lesões comparada com do grupo controle. Estes dados indicam que a expressão de PD-1 está regulada positivamente sobre linfócitos infiltrados nos tumores e linfonodos. Este fato e os altos níveis de TGF- e IL-10 podem contribuir para supressão da resposta imune antitumor. / Modulation of immune response in tumor site is a critical mechanism involved with tumor evasion. PD-1 and PD-L1/PD-L2 signals could be involved in tumor escape. However, little is known about the role of these molecules in squamous cell carcinoma development. In the present study, we investigated the expression of PD-1 on T cells from squamous cell carcinoma lesions and lymph nodes. Skin carcinogenesis was chemically induced with DMBA/PMA in mice. Characterization of PD-1, PD-L1 and PD-L2 expression in the lesion and lymph nodes were analysed by flow cytometry. IL-10, IL-12, TGF- and IFN- production was determined by ELISA. DMBA/PMA-treated mice showed higher rate of papillomas and progression to squamous cell carcinoma. We also found that CD4+PD-1+ T cells migrated to the tumor site and that higher level of CD4+PD-1+, CD8+PD-1+, CD14+PD-1+ and CD4+PD-L1+ were detected in the lymph nodes when compared with the control group. Besides, IL-12, IFN- and TGF-, but not IL-10, productions were higher detected in the lesions compared with the control group. These data indicate that PD-1 expression is up-regulated on tumor infiltrating lymphocytes and lymph nodes. This fact and high levels of TGF- and IL-10 may contribute to suppression of anti-tumor immune response.

Hidroquinona (HQ) é um dos metabólitos do benzeno responsáveis pelos efeitos tóxicos da exposição ao solvente, além de ser componente da dieta, medicamentos, cigarro e poluente do meio ambiente. Considerando a imunotoxicidade desta substância, o grupo de pesquisa do laboratório investiga o papel da exposição à HQ por período prolongado de tempo sobre respostas inflamatórias agudas (RIA). Neste contexto, o presente trabalho avaliou os efeitos desta exposição sobre os mecanismos vasculares e celulares da RIA de diferentes doses diárias de HQ (5, 10 ou 50 mg/kg) em ratos Wistar machos, via i.p., por 17 ou 22 dias, uma vez ao dia, com intervalos de 2 dias a cada 5 doses. Animais controles receberam o veículo (salina com 5% etanol). A resposta inflamatória aguda inata foi induzida pela administração de glicogênio de ostra (1% em PBS, 5 mL) na bolsa subcutânea dorsal ou pela instilação de lipopolissacarídeo de Salmonella abortus (LPS; 100 &#181;L de solução 100 &#181;g/mL); A resposta inflamatória aguda adquirida foi provocada pela inalação de ovalbumina (10 mL de solução de OA 1% PBS, 15 min) em animais previamente sensibilizados (10 &#181;/100mg AI(OH)3 no décimo dia de exposição). Os resultados obtidos mostraram que: 1) o aumento do número de leucócitos na bolsa dorsal de animais expostos a 50 mg/kg de HQ é dependente, pelo menos em parte, da maior interação de leucócitos circulantes à parede vascular da microcirculação, mas não é decorrente de alterações na reatividade microvascular; o aumento de expressão de moléculas de adesão (&#946;2 integrina), que pode ser a responsável pelo aumento de interaçãoleucócito-endotélio e migração celular; 2) a redução da migração de leucócitos para o pulmão inflamado pelo LPS em animais expostos a HQ, nas menores doses, não foi decorrente de modificações na interação leucócito-endotélio, nem da expressão de moléculas de adesão nos leucócitos circulantes ou na célula endotelial do tecido pulmonar; 3) a redução da migração celular para o pulmão durante a RIA alérgica em animais expostos a 5, 10 ou 50 mglkg de HQ é dependente, pelo menos em parte, da menor concentração de anticorpos anafiláticos circulantes e conseqüentemente da desgranulação reduzida de mastócitos teciduais, visualizados no leito mesentérico após desafio in situ pela OA. A menor produção de anticorpos anafiláticos pode ser decorrente da ação da HQ em diferentes tipos celulares, uma vez que foi observada expressão reduzida de moléculas co-estimulatórias em linfócitos do baço (CD45R e CD6), menor atividade microbicida de macrófagos peritoniais frente a Candida albicans e menor secreção de interferon-&#947; por células do peritônio. Em conjunto, os resultados apresentados mostram os mecanismos da HQ sobre a resposta do organismo ao trauma de diferentes origens, interferindo com tipos celulares distintos envolvidos nas reações. / Hydroquinone (HQ) is one of the metabolites of benzene responsible for the toxic effects of exposure to solvent, as well as being part of the diet, medicines, tobacco and polluting the environment. Considering the immunotoxicity of this substance, our laboratory has investigated the role of exposure to HQ by prolonged period of time on acute inflammatory responses (AIR). In this context, this study evaluated the effects of this exposure on the vascular and cellular mechanisms of AIR of different daily doses of HQ (5, 10 or 50 mg/kg) in male rats, via ip, for 17 or 22 days, a once a day, with intervals of 2 days every 5 doses. Control animais received the vehicle (saline with 5% ethanol). Innate AIR was induced by the administration of oysters glycogen (1% in PBS, 5 mL) into subcutaneous back pouch or by instillation of lipopolysaccharide of Salmonella aborius (LPS, 100 &#181;L of solução100 &#181;g/mL); Allergic AIR gained was caused by inhalation of ovalbumin (10 mL solution of 1% OA in PBS, 15 min) in previously sensitized animal (10 &#181;/100mg AI (OH)3 on the tenth day of exposure). Results showed that: 1) the increased number of white blood cells back into the pouch of animais exposed to 50 mg/kg of HQ is dependent, at least in part, of higher interaction of circulating leukocytes to the vascular wall of the microcirculation, but is not due to changes in microvascular reactivity; an increase of expression of molecules of accession (&#946;2 integrin), which may be responsible for the enhanced interaction of leukocyteendothelial and cell migration 2) the reduced migration of leukocytes into the lung inflamed by LPS in animals exposed to 5 or 10 mg/kg was not due to changes in the interactions of leukocyte to endothelium, either the expression of adhesion molecules in circulating white blood cells or in cell endothelial lung tissue, 3) the reduced cell migration to the lungs during the AIR allergic to animais exposed to HQ, in lower doses, is dependent on lower concentration of· circulating anaphylactics antibodies which may be responsible for the mast cell desgranulation. The lower amount of anaphylatic antibodies in the circulation may be due to action of HQ in different cells, as reduced expression of co-stimulatory molecules by Iymphocytes (CD45R and CD6), lower microbicide activity of macrophages and reduced secretion of interferon-&#947; by peritoneal cells were detected. Together, the results show the toxicity of HQ on the body\'s response to trauma from different sources, interfering with different cell types involved in the reactions.

A exposição à radiação ultravioleta (UV) pode provocar um desequilíbrio no balanço oxidante/antioxidante da pele, prejudicando sua integridade e causando diversas alterações moleculares que conduzem ao fotoenvelhecimento e ao câncer de pele. Considerando a estreita relação entre o estresse oxidativo e os efeitos danosos causados por esta radiação na pele, aliado ao fato de que estudos demonstram que o uso de protetores solares não é completamente efetivo na prevenção destes danos, a fotoquimioproteção, que consiste no uso de substâncias naturais com diversas propriedades biológicas em formulações tópicas, aparece como uma importante alternativa nas terapias de fotoproteção. A administração tópica de substancias naturais com propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias poderia prevenir ou reverter as alterações moleculares desencadeadas pela radiação UV, bem como os danos clínicos resultantes das mesmas. Diante disto, a fração purificada de Inga edulis foi avaliada in vitro quanto ao seu potencial antioxidante e fotoprotetor, e ainda, incorporada a uma formulação tópica para a liberação cutânea de seus compostos, foi avaliada in vivo quanto ao seu potencial fotoquimioprotetor. Os resultados obtidos demonstraram uma elevada capacidade antioxidante e um efeito fotoprotetor da fração purificada in vitro e a hidrossolubilidade de seus compostos antioxidantes. A formulação permitiu a penetração dos compostos da fração purificada na pele dos animais, proporcionando um aumento da atividade antioxidante e anti-inflamatória da pele, diminuindo a atividade da enzima mieloperoxidase e os níveis da citocina TNF-? (fator de necrose tumoral alfa) e da quimiocina derivada de queratinócitos, KC/CXCL1, após radiação UVB, porém não impediu a depleção da glutationa redutase, o aumento da atividade da metaloproteinase 9, e o aumento dos níveis da interleucina-1?. A formulação adicionada da fração purificada não foi capaz de absorver a radiação UVB. / Exposure to ultraviolet (UV) radiation can cause imbalance in the oxidant balance/antioxidant skin, causing damage to its integrity and leading to several changes, conducting to premature aging and skin cancer. Considering the close relationship between oxidative stress and the damaging effects caused by this radiation in the skin, coupled with the fact that studies show that the use of sunscreens is not completely effective in preventing such damage, photochemoprotector, that is the use of natural substances with diverse biological properties in topical formulations, appears as an important alternative therapy in photoprotection. Topical administration of natural substances with antioxidant and anti-inflammatory properties could prevent or reverse molecular changes triggered by UV radiation, as well as the clinical resulting therefrom. Thus, purified fraction of Inga edulis was evaluated in vitro for the antioxidant potential and photoprotector, and also incorporated into a topical formulation for skin release of its compounds, was evaluated in vivo for their photochemoprotector potential. The results showed a high antioxidant capacity and photoprotective effect of fraction purified in vitro and water solubility of their antioxidant compounds. The formulation allowed penetration the compound purified fraction on the skin of animals, resulting in an increase the antioxidant activity and anti-inflammatory skin by decreasing the activity the myeloperoxidase enzyme and levels of cytokine TNF-? (tumor necrosis factor alpha) and chemokine-derived keratinocytes, KC / CXCL1, after UVB radiation, but not prevented depletion of glutathione reductase, increased activity of metalloproteinase 9, and increased levels the interleukin-1?. Formulation added to the purified fraction was not able to absorb UVB radiation.