SAMPAIO, I. C. Avaliação do transporte transmembrânico de glicose, glutamina e alanil-glutamina em íleo de camundongos nutridos e desnutridos infectados por Escherichia coli enteropatogênica. 2013. 94 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-06-27T13:12:05Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_icsampaio.pdf: 2023722 bytes, checksum: 5a90dfd95b7f17ad24c74e2d9e2301a5 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-06-27T13:12:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_icsampaio.pdf: 2023722 bytes, checksum: 5a90dfd95b7f17ad24c74e2d9e2301a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-27T13:12:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_icsampaio.pdf: 2023722 bytes, checksum: 5a90dfd95b7f17ad24c74e2d9e2301a5 (MD5) Previous issue date: 2013-08-29 / Enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) and malnutrition are a major cause of morbidity and mortality in developing countries. The purpose of this study was to evaluate the transport of Na+-glucose, Na+-glutamine and H+-alanyl-glutamine by measurement of short circuit current (Isc) and transepithelial resistance (TR) in the ileum of nourished and malnourished mice infected with EPEC. Albino mice of approximately 35 days of age were subjected to a standard diet or a diet deficient in proteins, lipids and minerals, the Regional Basic Diet (RBD). Of these animals was submitted to acute infection for 3 hours of direct contact with bacteria in isolated intestinal loop. For comparison, the same was done using the commensal bacterium Escherichia coli HS. They were anesthetized with ketamine and xylazine intramuscularly. The ileum was removed, dissected the serous membrane, open with a scalpel, segmented and mounted in Üssing chambers. The total mRNA was extracted and, from this, cDNA was done to analyze if malnutrition caused alterations in gene transcription of transporters as SGLT-1, SN-2, CAT-1, PEPT-1 and CFTR and related proteins to cell junctions such as ZO-1, Claudin-1 and Claudin-2 and occludin. At the same time, immunofluorescence analysis of proteins SGLT-1, SN-1, SN-2 and PEPT-1 were performed. The results showed that EPEC reduced the area of the villi only during malnutrition (1,339 ± 0,1 mm²). But, the basal CCC did not alter (67,41 ± 2,0 μA/ cm²), while EPEC, E. coli HS and malnutrition, when isolated, reduced the basal CCC (65,96 ± 5,1 μA/ cm ², 72,51 ± 7,7 μA/ cm ² and 74,23 ± 5,7 μA/ cm²). However, malnutrition did not change the transport systems of glucose (ΔCCC = 324,7 ± 45,42 µA/cm²), glutamine (ΔCCC = 236.7 ± 43.32 μA/ cm²) and alanyl-glutamine (ΔCCC = 282,6 ± 39,10 μA/ cm²), because occured an increase in gene expression of SGLT-1 and PEPT-1 and increased synthesis of SGLT-1, SN-1, SN-2 and PEPT-1. Already EPEC altered glucose transport (ΔCCC = 102,6 ± 38,3 μA/ cm²), and E. coli HS decreased transport of glucose (ΔCCC = 103,5 ± 106,6 μA/ cm²) and glutamine (ΔCCC = 123,4 ± 106,5 μA/ cm²), whereas in undernourished animals EPEC reduced transport of glutamine (ΔCCC = 62,10 ± 42,7 μA/ cm²), and E. coli HS reduced levels of glucose absorption (ΔCCC = 84,40 ± 178,3 μA/ cm²). Therefore, these substrates may facilitate the recovery of the membrane and alleviate the vicious cycle of malnutrition, infection and diarrhea by increasing absorption (CCC) and the maintenance of normal intestinal permeability (Rt), but before using them for the treatment it is essential to evaluate the nutritional status of the host and the presence of pathogens in their intestinal epithelium. / A Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) e a desnutrição são uma das maiores causadoras de morbidade e mortalidade infantil em países subdesenvolvidos. Este estudo propõe avaliar o transporte de Na+-glicose, Na+-glutamina e H+-alanil-glutamina através da medida da corrente de curto circuito (CCC) e da resistência transepitelial (Rt) no íleo de camundongos nutridos e desnutridos infectados com EPEC. Camundongos albinos de 28 a 35 dias de idade foram submetidos a uma dieta padrão ou a uma dieta multideficiente em proteínas, lipídeos e minerais, a DBR. Parte desses animais foi submetida à infecção aguda por 3 horas de contato direto com a bactéria em alça ligada. Para comparações, o mesmo foi feito utilizando a bactéria comensal Escherichia coli HS. Foram anestesiados com ketamina e xilazina por via intramuscular. O íleo foi removido, dissecado da membrana serosa, aberto com bisturi, segmentado e montado em câmaras de Üssing. O mRNA total foi extraído e, a partir deste, foi feito o cDNA a fim de observar, por PCR em tempo real, se a desnutrição causou alteração na transcrição dos genes SGLT-1, SN-2, CAT-1, PEPT-1, CFTR, ZO-1, Claudina-1 e Claudina-2 e Ocludina. Em paralelo, análise por microscopia confocal das proteínas SGLT-1, SN-1, SN-2 e PEPT-1 foi realizada. Os resultados mostraram que a EPEC reduziu a área dos vilos apenas durante a desnutrição (1,339 ± 0,1 mm²). Mesmo assim, não alterou a CCC basal (67,41 ± 2,0 µA/cm²), enquanto que a EPEC, a E. coli HS e a desnutrição, quando isoladas, reduziram a CCC basal (65,96 ± 5,1 µA/cm², 72,51 ± 7,7 µA/cm² e 74,23 ± 5,7 µA/cm²). Porém, a desnutrição não alterou os sistemas de transporte de glicose (ΔCCC = 324,7 ± 45,42 µA/cm²), glutamina (ΔCCC = 236,7 ± 43,32 µA/cm²) e alanil-glutamina (ΔCCC = 282,6 ± 39,10 µA/cm²) devido ao aumento na expressão da transcrição gênica de SGLT-1 e PEPT-1 e ao aumento da síntese de SGLT-1, SN-1, SN-2 e PEPT-1. Já a EPEC alterou o transporte de glicose (ΔCCC = 102,6 ± 38,3 µA/cm²), e a E. Coli HS diminuiu o transporte de glicose (ΔCCC = 103,5 ± 106,6 µA/cm²) e de glutamina (ΔCCC = 123,4 ± 106,5 µA/cm²), enquanto que, nos animais desnutridos, a EPEC reduziu o transporte de glutamina (ΔCCC = 62,10 ± 42,7 µA/cm²), e E. Coli HS reduziu os níveis de absorção de glicose (ΔCCC = 84,40 ± 178,3 µA/cm²). Portanto, é possível que esses substratos favoreçam a recuperação da membrana e aliviem o ciclo vicioso de desnutrição, infecção e diarreia através do aumento da absorção (CCC) e recuperação da normalidade da permeabilidade intestinal (Rt). Porém, deve-se avaliar o estado nutricional do hospedeiro e se há presença de patógenos associados, a fim de eleger o melhor substrato para cada caso.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-11-01T18:55:25Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4472828 bytes, checksum: d2fd2fd1046d39d3ef7808a44e343110 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-01T18:55:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4472828 bytes, checksum: d2fd2fd1046d39d3ef7808a44e343110 (MD5) Previous issue date: 2003-03-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente trabalho teve como objetivos verificar o efeito de prebiótico (Raftilose® P95 - FOS), (1 e 5%), probiótico (Bifidobacterium longum - 108 UFC/dia) e simbiótico (5% FOS + B. longum) na biodisponibilidade de ferro, cálcio e magnésio em ratos e na modulação da microbiota murina (aeróbios totais, anaeróbios totais, bifidobactérias e coliformes); o efeito de cálcio (2,5, 5,0 e 10,0g/kg) sobre a biodisponibilidade de ferro e magnésio, em 2 estudos in vivo: biodisponibilidade de ferro (12 grupos experimentais, n=8) com duração de 35 dias, sendo um período de repleção de 14 dias (AOAC, 1994, modificado) e biodisponibilidade de minerais (7 grupos experimentais, n=10). Foram verificados os efeitos in vitro (culturas em série e modelos intestinais) de diferentes níveis de sulfato ferroso (11, 22 e 33 mg/Kg, correspondentes a 50, 100 e 150% dos níveis utilizados na composição do meio de cultura) sobre a microbiota colônica humana e sua utilização de FOS, por meio de análise da contagem celular total, bacteróides, bifidobactérias, clostridios e bactérias sulfato redutoras pela técnica de hibridização fluorescente in situ (FISH), e contagem microbiológica de enterobactérias, lactobacilos, anaeróbios totais e bifidobactérias; a produção de ácidos orgânicos de cadeia curta: acético, propiônico, isobutírico, n-butírico, isovalérico, n-valérico, capróico, D- e L-lactato, determinados por meio de cromatografia gasosa. Os resultados indicaram que a suplementação com FOS (1%) não afetou a biodisponibilidade de ferro em animais submetidos a dietas deficientes em ferro, porém aumentou a absorção de magnésio (p<0,05) e cálcio (p<0,05). Foi demonstrada interação negativa entre cálcio e ferro (p<0,01) e entre cálcio e magnésio (p<0,05). Doses de 5% de FOS resultaram em diarréia nos animais e não aumentaram (p>0,05) a biodisponibilidade de ferro de animais anêmicos. A suplementação com B. longum tampouco influenciou (p>0,05) a recuperação da anemia dos animais nem alterou (p>0,05) as contagens dos diferentes grupos bacterianos intestinais. Em dietas controle verificou-se diminuição do grupo dos coliformes cecais com aumento do teor de ferro da dieta (p<0,01). O efeito de FOS sobre a microbiota humana e produção de ácidos orgânicos depende do teor de ferro e do segmento intestinal estudado. Baixo teor de sulfato ferroso (11 mg/L) resultou em diminuição (p<0,01) de enterobactérias, em experimentos em modelo intestinal. A incorporação de FOS estimulou esse grupo bacteriano (p<0,01) em dietas com baixo teor de ferro, bem como bifidobactérias e lactobacilos em todos os segmentos e dietas. Dietas com alto teor de sulfato ferroso (33 mg/kg) e FOS estimularam o grupo dos clostrídios. A incorporação de FOS a dietas com 11mg FeSO4/L resultou em aumento da produção de acetato (p<0,01), isobutirato (p<0,05), n-butirato (p<0,05) e isovalerato (p<0,01) no recipiente que simula o cólon ascendente; acetato (p<0,05) no cólon transverso e isobutirato (p<0,05) e caproato (p<0,01) no cólon descendente. A incorporação de FOS a dietas com 33mg FeSO4/L resultou na diminuição de n-valerato (p<0,05) no cólon ascendente; aumento de propionato (p<0,05) e isobutirato (p<0,05) no cólon transverso e diminuição de acetato (p<0,05), propionato (p<0,05), n-butirato (p<0,01), isovalerato (p<0,05) e n-valerato (p<0,05) no cólon descendente. Dietas com baixo teor de sulfato ferroso + FOS resultaram em maior produção de n-valerato (p<0,05) no cólon ascendente; menor produção de propionato (p<0,05), isovalerato (p<0,05) e n-valerato (p<0,05) no cólon transverso; e maiores concentrações de acetato (p<0,05), isobutirato (p<0,05), n-butirato (p<0,05), n-valerato (p<0,01) e caproato (p<0,05) no cólon descendente, quando comparadas com dietas com alto teor de sulfato ferroso + FOS. Os experimentos indicam que a concentração mineral presente em uma dieta pode vir a influenciar a saúde do hospedeiro, não apenas devido à biodisponibilidade per si, mas por também influenciar a ecologia microbiana. Sugere-se um cuidadoso estudo das doses de prebióticos a serem utilizadas, para evitar efeitos colaterais, como diarréia, que possam vir a influenciar nos resultados fisiológicos e novos estudos na área, com outros microorganismos probióticos, como Lactobacillus sp. ou outras espécies de bifidobactérias, devido a diferenças de metabolismo e adaptação dos mesmos à condições experimentais, outras substâncias prebióticas, que possam influenciar diferentes grupos microbianos e,ou, fontes dietéticas de minerais, como dietas baseadas em arroz/feijão, multimisturas, mais próximas da realidade populacional, em vez de suplementação com minerais inorgânicos. / The aim of this work is to verify prebiotic (Raftilose® P95 - FOS), (1 e 5%), probiotic (Bifidobacterium longum - 108 UFC/day) and synbiotic (5% FOS + B. longum) effects on rats ́ iron, calcium and magnesium bioavailability and on their microflora modulation (total aerobes, anaerobes, bifidbacteria and coliforms); calcium effect (2,5, 5,0 and10,0g/kg) on iron and magnesium bioavailability, through 2 in vivo studies: iron bioavailability (12 experimental groups, n=8) during 35 days, with repletion period of 14 days (AOAC, 1994, modified) and mineral bioavailability (7 experimental groups, n=10). The effects of In vitro experiments (batch cultures and gut models) using different iron sulphate levels (11, 22 and 33 mg/Kg, corresponding to 50, 100 and 150% of levels used in composition of culture medium) on human colonic microflora and its FOS supplementation were evaluated. Microflora modulation was analysed through total cellular count analysis, bacteroides, bifid bacteria, clostridia and reducing sulphate bacteria through fluorescent in situ hybridization (FISH), and microbiological count of enterobacteria, lactobacilli, total anaerobes and bifid bacteria. Short-chain fatty acids production – SCFA (acetic, propionic, isobutyric, n-butyric, isovaleric, n-valeric, caproic, D- and L-lactate) was determined through gas-chromatography. Results have shown that FOS supplementation (1%) did not affect iron bioavailability in animals on low iron content diets, but magnesium (p<0.05) and calcium (p<0.05) absorption increased. Negative interaction between calcium and iron (p<0.01) and between calcium and magnesium (p<0.05) was proved. FOS (5%) resulted in diarrhoea in anaemic animals and did not increase (p>0.05) iron bioavailability. B. longum supplementation (p>0.05) did not influence anaemia recovery of animals nor changed (p>0.05) counts of different intestinal bacterial groups. On control diets coliforms group was reduced with increase of dietetic iron level (p<0.01). FOS effect on human microbiota and SCFA production depends on iron content and on gut segment analysed. Low content of iron sulphate (11 mg/L) resulted in enterobacteria decrease (p<0.01), in gut model experiments. FOS addition stimulated this bacterial group (p<0.01) on low iron content diets as well as bifid bacteria and lactobacilli on all segments and diets. High iron sulphate diets (33 mg/kg) and FOS stimulated clostridia group. FOS addition to 11mg FeSO4/L diets resulted in increase in acetate (p<0.01), isobutyrate (p<0.05), n-butyrate (p<0.05) and isovalerate (p<0.01) productions in recipients that simulate ascendant colon; acetate (p<0.05) in transversal colon and isobutyrate (p<0.05) and caproate (p<0.01) in descendant no colon. FOS addition to 33mg FeSO4/L diets resulted in n-valerate (p<0.05) decrease in ascendant colon; propionate (p<0.05) and isobutyrate (p<0.05) increase in transversal colon and acetate (p<0.05), propionate (p<0.05), n-butyrate (p<0.01), isovalerate (p<0.05) and n- valerato (p<0.05) decrease in descendant colon. Low iron sulphate content diets supplemented with FOS resulted in higher n-valerate production (p<0.05) in ascendant colon; lower propionate (p<0.05), isovalerate (p<0.05) and n-valerate (p<0.05) production in transversal colon; higher acetate (p<0.05), isobutyrate (p<0.05), n-butyrate (p<0.05), n- valerate (p<0.01) and caproate (p<0.05) concentration in descendant colon, when compared to high iron sulphate content supplemented with FOS diets. Experiences have shown that dietetic mineral can not only influence host’s health because of their bioavailability but that they can also influence microbial ecology. We suggest detailed studies of prebiotic doses to avoid collateral effects such as diarrhoea, which could influence physiologic results. We also suggest new studies on this area with other probiotic microorganisms, such as Lactobacillus sp or with other species of bifidbacteria, due to strains ́ metabolic differences and adaptation’s to experimental conditions; other prebiotic substances, that could influence different microbial groups and/ or mineral sources such as rice/beans, multi mixtures that could be closer to population dietetic base instead of such inorganic minerals. / Não foi localizado o cpf do autor.

INTRODUÇÃO: Estudos que avaliaram a concordância diagnóstica entre patologistas entre pólipos hiperplásicos (PH) e pólipos sésseis serrilhados (PSS) demonstraram uma grande variabilidade interobservador mesmo entre especialistas em patologia gastrointestinal. O protocolo de acompanhamento dos PSS não é modificado conforme a localização da lesão e isto pode ser determinado por eventuais diferenças na expressão das proteínas MLH1 e MSH2. OBJETIVOS: Identificar diferenças na concordância diagnóstica que podem reforçar a necessidade de estratégias específicas para melhorar a uniformidade dos diagnósticos. Avaliar a expressão imuno-histoquímica das proteínas MLH1 e MSH2 entre lesões dos hemicólons direito e esquerdo. MÉTODOS: Foram revisados 132 exames anatomopatológicos com diagnóstico de pólipo séssil serrilhado ou pólipo hiperplásico por dois patologistas com ênfase em gastroenterologia e um terceiro sem ênfase em gastroenterologia. Foram realizados exames imuno-histoquímicos para avaliação da expressão das proteínas MLH1 e MSH2 em 108 lesões. RESULTADOS: Foram realizadas duas avaliações por um dos patologistas com ênfase em gastroenterologia para determinar a concordância intraobservador. Dos 64 PH, 2 (3,1%) foram reclassificadas como mucosa colônica normal e 4 (6,2%) foram rediagnosticados como PSS. Das 60 lesões inicialmente diagnosticadas como PSS, 1 (1,7%) foi reclassificada como PH. O teste de Kappa para concordância resultou no valor de 0,89. Os 117 pólipos que apresentaram concordância foram revisados pelo segundo patologista com ênfase em gastroenterologia. Dos 58 PH, 1 (1,7 %) foi readiagnosticado como mucosa colônica normal e 4 (6,9%), foram readiagnosticados como PSS. Dos 59 PSS, 4 (6,8%) foram rediagnosticadas como PH pelo segundo patologista. A variabilidade interobservador resultou em um valor de Kappa de 0,85. Os 108 pólipos que apresentaram concordância nas avaliações anteriores foram também analisados por um terceiro patologista sem ênfase em gastroenterologia. Dos 55 PSS, 25 (45,4%) foram diagnosticadas como PH pelo patologista geral. Todos os PH diagnosticados pelo patologista geral foram diagnosticados como pólipo hiperplásico pelos dois primeiros patologistas. O valor do teste Kappa para concordância entre os três patologistas foi de 0,54. O estudo imuno-histoquímico mostrou-se positivo em todas as lesões tanto para expressão da proteína MLH1 quanto para MSH2. CONCLUSÃO: O valor de Kappa encontrado de 0,89 para concordância intraobservador e 0,85 para interobservador entre os patologistas com ênfase em gastroenterologia mostra uma concordância classificada como alta. O valor de Kappa de 0,55 resultante da comparação entre os patologistas com e sem interesse especial em gastroenterologia, mostra uma concordância moderada. É importante considerar que nenhum pólipo hiperplásico diagnosticado pelo patologista geral recebeu o diagnóstico de pólipo séssil serrilhado nas avaliações anteriores. Com isso, podemos observar que a dificuldade diagnóstica está relacionada estritamente aos PSS e isso pode ser explicado pela subjetividade no diagnóstico destas lesões. / INTRODUCTION: Studies of interobserver agreement among pathologists for the diagnosis of hyperplastic polyps (HPPs) and sessile serrated polyps (SSPs) have demonstrated substantial interobserver variability, even amidst experts in gastrointestinal pathology. There is no difference in the SSP follow-up protocol according to its location however it may change as a consequence of MLH1 and MSH2 protein expression variation. OBJECTIVES: To identify differences in diagnostic concordance that could justify specific strategies to improve diagnostic uniformity. To study the immunohistochemical analysis for the expression of MLH1 and MSH2 proteins in the right and left hemicolons. METHODS: One hundred twenty-four anatomic pathology specimens with a diagnosis of SSP or HPP were examined by two pathologists with a special interest in gastroenterology (specialists) and one general pathologist. Immunohistochemical analysis for the expression of MLH1 and MSH2 protein was conducted in 108 lesions. RESULTS: Two assessments were conducted by one of the specialist pathologists to determine intraobserver agreement. Of the 64 HPP specimens, 2 of the entire sample (3.1%) were reclassified as normal colonic mucosa and 4 (6.2%) were reassessed as SSPs. Of the 60 lesions initially diagnosed as SSPs, 1 (1.7%) was reclassified as HPPs. The kappa statistic for agreement was 0.89. The 117 specimens in which there were no diagnostic disagreements were then reassessed by the second specialist pathologist. Of 58 HPPs, 1 (1.7%) was reclassified as normal colonic mucosa and 4 (6.9%) were reclassified as SSPs. Of 59 the SSPs, 4 (6.8%) were reclassified as HPPs by the second pathologist. This interobserver variability yielded a kappa value of 0.85. Finally, the 108 specimens in which there were no diagnostic disagreements in the preceding assessments were reviewed by a third pathologist with no special interest in gastroenterology. Of 55 SSPs, 25 (45.4%) were diagnosed as HPPs by the general pathologist. All HPPs diagnosed by the general pathologist had been diagnosed as such by the two specialist pathologists. The kappa value for agreement among the three pathologists was 0.54. The immunohistochemical analysis was positive for both MLH1 and MSH2 protein in all the lesions studied. CONCLUSION: The kappa values of 0.89 for intraobserver agreement and 0.85 for interobserver agreement between the gastrointestinal pathologists are indicative of substantial agreement. The kappa value of 0.55 for comparison among pathologists with and without a special interest in gastroenterology indicates moderate agreement. It is worth noting that no hyperplastic polyps diagnosed by the general pathologist had been diagnosed as sessile serrated adenoma on previous assessments. Therefore, we conclude that diagnostic difficulty is strictly associated with SSPs, which may be explained by the subjective nature of diagnosis of these lesions.

The properties of factors present in boiled yeast juice which stimulate the oxidative breakdown of citrate in baker's yeast have been investigated. The activity has been shown to reside predominantly in the nucleotide fractions (i.e., pyridine codehydrogenases) and to a lesser extent in the ammonium salts present in whole yeast cells. The activity of the Citrate Oxidation Factor (COF) concentrated from yeast extracts and described by Foulkes (Biochem. J. 54 323 (1953)) was attributable entirely to the ammonium content of COF preparations. This activating effect of ammonium ions is accompanied by their removal from the assay system and the simultaneous production of glutamic acid. Correlation of the uptake of ammonium ion with the increased citrate metabolism indicates that the activity of the ammonium salts lies in their ability to promote the reductive amination of &alpha;-oxoglutarate. The mechanism(s) whereby this serves to stimulate the further breakdown of citrate to oxoglutarate involves the mediation of the pyridine codehydrogenases (DPN, TPN). These findings are discussed in relation to the known functioning of individual stains of the tricarboxylic acid cycle and to possible alternative pathways for the oxidation of citrate in yeast.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-25 / Objetivos: Avaliar o hábito intestinal de pacientes com câncer que utilizam morfina. Analisar a efetividade de um programa terapêutico no controle da constipação secundária aos opioides. Método: Estudo de série de casos, prospectivo, não randomizado. Os pacientes admitidos no estudo eram portadores de câncer, idade superior a quatro anos, e utilizavam morfina para o controle de dor. Após 24 horas do início do uso da morfina, os pacientes receberam lactulose e, nos casos refratários, bisacodil. A avaliação do hábito intestinal foi realizada através de um questionário estruturado. Quando necessário, foi realizada a desimpactação das fezes por via anal ou oral. Resultados: Foram admitidos no estudo 22 pacientes, com idade entre cinco e 35 anos (média 16,7 anos). 27% (6/22) dos pacientes eram constipados antes da admissão no estudo. Na primeira semana do uso de morfina e lactulose, 40% (9/22) dos pacientes ficaram constipados. Na segunda e terceira semanas, a constipação ocorreu em 38,8% (7/18) e 16% (2/12), respectivamente. Com o protocolo terapêutico adotado foi possível controlar o quadro de constipação em 57% (11/22) dos casos. Conclusões: A constipação intestinal foi frequente nos pacientes que utilizaram morfina, 40%, 38,8% e 16%, respectivamente, na primeira, segunda e terceira semana, apesar do tratamento profilático com laxantes. Entretanto, o protocolo com atenção específica à constipação intestinal pode aumentar a adesão dos pacientes aos laxantes e minimizar as complicações da constipação, como a formação do fecaloma. São necessários estudos controlados com maior número de casos para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas eficazes, multiprofissionais, que reduzam o sofrimento dos pacientes com câncer que necessitem utilizar a morfina. / Objective: Evaluate bowel habit in cancer patients using morphine. Analyze the effectiveness of a therapeutic program in controlling constipation secondary to opioid. Method: case study series, non-randomized, prospective. Patients admitted in the study were bearers of cancer, aged over four years, and using morphine for pain control. After 24 hours from the beginning of the use of morphine, patients were given lactulose and in refractory cases, bisacodyl. Evaluation of bowel habit was achieved through a structured questionnaire. When necessary, fecal desimpaction was performed by via anal or oral. Results: 22 patients were admitted to the study, aged between five and 15 years (average 16.7 years). 27% (6/22) patients had constipation before admission in the study. In the first week of use of morphine and lactulose, 40% (9/22) patients had constipation. In the second and third weeks, constipation occurred in 38.8% (7/18) and 16% (2/12), respectively. The therapeutic protocol adopted was able to control the constipation in 57% (11/22) of cases. Conclusions: constipation has been frequent in patients who have used morphine, 40%, 38.8% and 16% respectively in the first, second and third weeks despite the prophylactic treatment with laxatives. However, the protocol with specific attention to constipation can increase adherence to laxatives and minimize the complications of constipation, such as the appearing of fecaloma. Controlled studies are needed with largest number of cases for the development of effective therapeutic strategies, such multi-professional approach, which reduce the suffering of cancer patients who need to use morphine. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

CUNHA, Gilmara Holanda da. Avaliação da eficácia terapêutica da tintura de jalapa no tratamento da constipação intestinal funcional. 2009. 161 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-27T16:38:29Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_ghcunha.pdf: 890642 bytes, checksum: 8b6be8f0607ee55a1d3d60868705b896 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-27T16:48:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_ghcunha.pdf: 890642 bytes, checksum: 8b6be8f0607ee55a1d3d60868705b896 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-27T16:48:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_ghcunha.pdf: 890642 bytes, checksum: 8b6be8f0607ee55a1d3d60868705b896 (MD5) Previous issue date: 2009 / The Operculina alata, known as Jalapa, is a plant whose root is used by the population because of its laxative effect. A double-blind clinical trial, placebo controlled, randomized, parallel evaluated the therapeutic efficacy of tincture of Jalapa in the treatment of functional constipation in the Unit of Clinical Pharmacology, Ceará, Brazil. There were two treatment groups, the Jalapa group and the Placebo group, both consisting of 38 volunteers with functional constipation. The study had 3 phases, seven days in each phase, in which the volunteer data recorded in a diary of bowel movements. During the pre-treatment there was the selection of volunteers. In the treatment occurred the randomization and administration of tincture of Jalapa or placebo. The post-treatment were observed after the voluntary suspension of tincture of Jalapa or placebo. The effectiveness was evaluated through the primary variables: average frequency of evacuations (AFE), average consistency of faeces (ACF) and global improvement of constipation (GIC). Secondary variables were the proportion of evacuations with pain (PED), proportion of effort evacuations (PEE), number of consecutive days without evacuation (DWE) and degree of improvement in constipation. All volunteer participants were female. In the placebo group there was lost segment of 5 volunteers and in the Jalapa group, only two were removed. Most volunteers came from the city of Fortaleza. The lower level of education found the primary school was represented by 10.5% of the sample. There was use of laxative agents by 69.8% of volunteers. In the pre-treatment, Jalapa and Placebo groups showed statistically similar in age, BMI and ACF, but differed in the AFE, where the Placebo group (0321 ± 0108) showed that the largest group Jalapa (0262 ± 0132). In the treatment and post-treatment, the AFE and ACF were significantly higher in Jalapa group than in the Placebo group, with 55.26% of volunteers of the Jalapa group showing increased values of AFE and ACF, which was represented by the GIC with 3.5 times more likely to improve the constipation with the tincture of Jalapa that with placebo. The values of the PED, the PEE and the DWE in Jalapa group were lower and statistically significant than those in the placebo group during treatment and post-treatment. The proportion of volunteers reported that the Jalapa group reasonable and complete relief of symptoms of constipation during treatment and after treatment was significantly higher than in the placebo group. There were changes in systolic blood pressure, diastolic and heart rate, but were without clinical relevance. There were no changes in body mass and serious adverse events, but highlighted to dizziness, headache and abdominal pain. This study found that the tincture of Jalapa is effective in the acute treatment of functional constipation in volunteers studied. / A Operculina alata, conhecida como jalapa, é uma planta cuja raiz é utilizada pela população em virtude do seu efeito laxante. Um ensaio clínico duplo cego, controlado por placebo, randomizado e paralelo avaliou a eficácia terapêutica da tintura de jalapa no tratamento da constipação intestinal funcional, na Unidade de Farmacologia Clínica, Ceará, Brasil. Foram dois grupos de tratamento, o grupo Jalapa e o grupo Placebo, ambos compostos por 38 voluntários com constipação intestinal funcional. O estudo teve 3 fases, cada uma com duração de 7 dias, em que o voluntário registrava num diário dados das evacuações. No pré-tratamento houve a seleção de voluntários. No tratamento ocorreu a randomização e administração da tintura de jalapa ou placebo. No pós-tratamento os voluntários foram observados após suspensão da tintura de jalapa ou placebo. A eficácia foi avaliada através das variáveis primárias: frequência média de evacuações (FME), consistência média das fezes (CMF) e melhora global da constipação (MGC). As variáveis secundárias foram proporção de evacuações com dor (PED), proporção de evacuações com esforço (PEE), número de dias seguidos sem evacuar (DSE) e grau de melhora da constipação. Todos os voluntários participantes foram do sexo feminino. No grupo Placebo houve perda de segmento de 5 voluntárias e no grupo Jalapa, apenas duas desistiram. A maioria das voluntárias procedia da cidade de Fortaleza. O menor grau de escolaridade encontrado foi o ensino fundamental incompleto representado por 10,5% da amostra. Havia uso de agentes laxativos por 69,8% das voluntárias. No pré-tratamento, os grupos Jalapa e Placebo mostraram semelhança estatística quanto à idade, IMC e CMF, mas diferiram quanto a FME, onde o grupo Placebo (0321 ± 0,108) apresentou valores maiores que os grupo Jalapa (0,262 ± 0,132). No tratamento e pós-tratamento, a FME e a CMF foram significantemente maiores no grupo Jalapa que no grupo Placebo, com 55,26% dos voluntários do grupo Jalapa apresentando aumento simultâneo dos valores da FME e CMF, o que foi representado pela MGC, com probabilidade 3,5 vezes maior de melhorar da constipação com a tintura de jalapa que com o placebo. Os valores da PED, da PEE e do DSE no grupo Jalapa foram menores e estatisticamente significantes que os do grupo Placebo nas fases de tratamento e pós-tratamento. A proporção de voluntários do grupo Jalapa que relataram alívio razoável e total dos sintomas da constipação nas fases de tratamento e pós-tratamento foram significantemente maiores que no grupo Placebo. Houve alterações da pressão arterial sistólica, diastólica e frequência cardíaca, mas foram consideradas sem relevância clínica. Não ocorreram alterações de massa corporal e eventos adversos graves, mas destacaram-se a tontura, cefaléia e dor abdominal. Este estudo concluiu que a tintura de jalapa é eficaz no tratamento agudo da constipação intestinal funcional nos voluntários estudados.

SOARES, Aline Kércia Alves. Avaliação de segurança e eficácia terapêutica da associação de Cassia fistula L, Cassia angustifólia Vahl, Tamarindus indica L, Coriandrum sativum L e Glycyrrhiza glabra L em pacientes com constipação intestinal. 2008. 184 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-24T12:26:53Z No. of bitstreams: 1 2008_tese_akasoares.pdf: 1080364 bytes, checksum: d56278224795b476210ac767c85583cb (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-05-30T14:17:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_tese_akasoares.pdf: 1080364 bytes, checksum: d56278224795b476210ac767c85583cb (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-30T14:17:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_tese_akasoares.pdf: 1080364 bytes, checksum: d56278224795b476210ac767c85583cb (MD5) Previous issue date: 2008 / Constipation is a common clinical problem that comprises a constellation of symptoms that include excessive straining, hard stools, feeling of incomplete evacuation, use of digital maneuvers, or infrequent defecation. The treatment is composed by behavioral measures and a therapeutic approach. Initial intervention should include dietary measures and fiber supplements; however, if fiber supplement action is ineffective, substances that increase the fecal bolus, lubricants, osmotic agents and laxatives can be used. The aim of the present study was to establish the efficacy, safety and validate an analytical method. Tamarine® jelly, a phytotherapic product from Barrenne Indústria Farmacêutica Ltda. a phytomedicine used as laxative. The research project with the experimental protocol and informed consent, were submitted to and approved by the Research Ethics Committee of UFC. The chromatographic profiles of Tamarine® jelly was done for confirmation of their constituents and stability analysis using high performance liquid chromatography (HPLC). The method showed the quality of the samples tested and its stability after 2 years of storage. The toxicology clinical trial consisted of an open study with 24 healthy volunteers of both sexes, with a mean age of 26.8 7.8 years, who orally received a daily dose of 5g Tamarine® for 28 uninterrupted days. The volunteers were included in the study only when considered healthy after clinical evaluation, physical examination and laboratory tests which preceded the study. The laboratory tests included: heamatologic, biochemical and serologic analysis. This evaluation was repeated after the first, second, third and fourth week of treatment and at post-study. The jelly was well tolerated, however, some adverse gastrointestinal events were observed. Twenty volunteers (83.3%) reported episodes of light intestinal colic followed by hyperdefecation, five (20.8%) reported diarrhea and three (12.5%) flatulence and nausea. The clinical, electrocardiographic and laboratory tests did not show evidence of toxicity in the various organs and systems evaluated. The efficacy was evaluated in 124 constipated patients selected by Rome II criteria. The investigation was designed as a controlled, parallel and opened. After the selection period, Tamarine® (TAM) or Metamucil® (MET) was administered. Patients were provided with diary sheets to record each bowel movement and associated subjective symptoms rating stool consistency, abdominal pain and flatus. The efficacy and safety analyzed after each 14 days of treatment by the information recorded on diary and a global assessment of efficacy. Volunteers continuing with their routine activities and maintaining their normal general diets even showing a low consumption of fiber and liquids. The nutritional guidelines were implemented at the end of the study not to interfere in the results. TAM increased bowel frequency after 14 and 28 days when compared with no treatment period and on 7o, 14 o, 21o and 28o days was higher the MET (p<0,001). The stool consistency was changed and became softer in both groups. The alterations improved by TAM was observed in all treatment period (p<0,001) and MET changed only on the third week (p<0,05) . The patient’s global efficacy score (p=0,01 e 0,0367) and investigator’s (p=0,0083 e 0,0193) realized that on 14º and 28º days of treatment was superior for the TAM group compared with MET. No signs of clinical or laboratory toxicity was observed throughout the treatment period. Confirming their traditional use, the administration of 5g of jelly Tamarine ® phytotherapic proved to be safe and effective in the treatment of constipation. / Constipação é um problema clínico comum que compreende uma constelação de sintomas como excessivo esforço, fezes duras, sensação de evacuação incompleta, uso de manobras digitais, ou defecação infreqüente. Seu tratamento emprega medicamentos que aumentem a freqüência e facilitem as evacuações, bem como mudanças nos hábitos de vida. O objetivo desse estudo foi avaliar segurança, eficácia terapêutica e validar um método analítico para a geléia Tamarine®, um fitoterápico largamente utilizado como laxante, em pacientes com constipação intestinal funcional. Foi realizado o perfil cromatográfico da geléia Tamarine® para confirmação dos seus constituintes e análise de estabilidade empregando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), onde seus principais constituintes foram identificados através dos tempos de retenção característicos. A análise de estabilidade da formulação foi executada comparando os cromatogramas de lotes recém-fabricados com lotes após 2 anos de fabricação. O método desenvolvido comprovou a qualidade das amostras testadas e sua estabilidade após 2 anos de armazenamento. O estudo de toxicologia clínica foi do tipo aberto, realizado em 24 voluntários saudáveis de ambos os sexos que receberam diariamente a administração de 5g da geléia Tamarine® por 28 dias consecutivos. Os voluntários foram avaliados antes, durante e ao final do período de administração através de história médica, exame físicos e laboratoriais. A formulação foi bem tolerada e foram observados feitos adversos como cólicas (83,3%), aumento de evacuações (58,3%), diarréia (20,8%), flatulência e náuseas (12,5%). Os parâmetros hematológicos, metabólicos, função renal e hepática sofreram variações pontuais ao longo do estudo, entretanto, consideradas sem significado clínico. O estudo de eficácia terapêutica foi do tipo controlado, paralelo, aberto e randomizado empregando 124 voluntários com constipação intestinal funcional, selecionados de acordo com os critérios de Roma II e distribuídos aleatoriamente entre os grupos de tratamento com a geléia Tamarine® (TAM) ou Metamucil® (MET). Os pacientes em tratamento eram avaliados quinzenalmente para levantamento de efeitos adversos e avaliação da eficácia feita pelo registro das evacuações diárias, consistência das fezes e pela melhora global referida pelos mesmos. A maioria dos pacientes apresentou dieta pobre em fibras e baixa ingestão de líquidos, entretanto, suas dietas não foram alteradas durante o tratamento, as orientações nutricionais foram realizadas ao final do estudo para não interferir nos resultados. O uso do TAM aumentou o número de evacuações nos pacientes após 14 e 28 dias de tratamento, quando comparado com o período inicial de seleção. No 7o, 14 o, 21 o e 28 o dias a resposta dos pacientes que faziam seu uso foi maior do que o grupo tratado com MET (p0,001), bem como a taxa de melhora 166,7% (p=0,003). A consistência das fezes também melhorou, tornando-se mais amolecidas nos dois grupos. Tratamento com TAM reduziu a consistência das fezes em todo o período de tratamento (p<0,001) enquanto que o controle teve redução apenas na terceira semana (p<0,05). A avaliação global dos pacientes (p=0,01 e 0,0367) e do investigador (p=0,0083 e 0,0193) realizadas no 14º e 28º dias de tratamento mostrou melhor aceitação para o grupo tratado com TAM nos dois períodos de avaliação. Nenhum sinal de toxicidade clínica ou laboratorial foi observado em todo o período de tratamento. O presente ensaio clínico conclui que a administração de 5g da geléia Tamarine® é segura e eficaz no tratamento da constipação intestinal.

AUGUSTO, Kathiane Lustosa. Relação entre prolapso de parede vaginal posterior, a presença de disfunções defecatórias e sexuais e qualidade de vida : estudo caso-controle. 2015. 123 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T12:35:33Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_klaugusto.pdf: 462240 bytes, checksum: 49ce7da01768714c1646938ba611a414 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T13:06:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_klaugusto.pdf: 462240 bytes, checksum: 49ce7da01768714c1646938ba611a414 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-07T13:06:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_klaugusto.pdf: 462240 bytes, checksum: 49ce7da01768714c1646938ba611a414 (MD5) Previous issue date: 2015 / Pelvic organ prolapse, urinary and fecal incontinence , sexual and defecatory dysfunction are a group of medical conditions known as pelvic floor di sorders. The aim of the study was to evaluate the relationship between measures of the posterior compartment prolapse through the quantification system of pelvic organ prolapse (POP - Q) and the presence of constipation, fecal incontinence symptoms, quality of life and sexuality, as well other data from history and physical examination. It is case - control study conducted in urogynecology outpatient tertiary hospitals in Fortaleza. Adult patients reported symptoms of pelvic floor dysfunction were eligible. All were assessed for severity of defecat ó rias disorders using the Wexner System of constipation and fecal incontinence scores. They were also asked about the quality of life (QOL) and sexuality using the SF - 36 and IPCS - 12 questionnaires, respectively. The 26 5 patients were divided into two groups according to the extent Bp point (posterior vaginal wall prolapse - POP - Q): Group case: Bp> 0 and Control Group: Bp ≤ 0). It compared the groups for the presence of constipation, the presence of fecal incontinence, the QV and sexuality and the data of the clinical history and physical examination. The groups were similar in the following variables: Wexner score of constipation; Wexner score of fecal incontinence, number of caesarean sections and IPCS - 12 deliveries. Ther e was no correlation between the severity of posterior prolapse with the severity of constipation complaints by the Wexner score. In assessing the quality of life by SF - 36 was no significant difference between groups in only one domain, the general percept ion of health. The severity of posterior vaginal wall prolapse does not seem to increase the complaints of constipation and not of fecal incontin ence, but it seems to get worse qualit y / O objetivo do estudo foi avaliar a relação entre as medidas do prolapso de compartimento posterior através do sistema de quantificação dos prolapsos de órgãos pélvicos (POP-Q) e a presença de constipação, sintomas de incontinência fecal, qualidade de vida e de sexualidade, além de outros dados da anamnese e exame físico. Trata-se de estudo caso-controle realizado em ambulatórios de uroginecologia de hospitais terciários de Fortaleza. Pacientes adultas que relataram sintomas de disfunções do assoalho pélvico foram elegíveis. Todas foram avaliadas em relação à gravidade das disfunções defecatórias usando o Sistema Wexner de escores de constipação e incontinência fecal. Elas também foram questionadas sobre a qualidade de vida (QV) e de sexualidade usando os questionários SF-36 e PISQ-12, respectivamente. As 265 pacientes foram divididas em dois grupos de acordo com a medida do ponto Bp (prolapso de parede vaginal posterior - POP-Q): Grupo caso: Bp>0 e Grupo Controle: Bp≤0). Comparou-se os grupos em relação à presença de constipação, à presença de incontinência fecal, à QV e de sexualidade e aos dados da anamnese e exame físico. Os grupos foram semelhantes nas seguintes variáveis: escore de Wexner de constipação; escore de Wexner de incontinência fecal, número de partos cesarianas e PISQ-12. Não houve correlação da gravidade do prolapso posterior com a gravidade das queixas de constipação pelo escore de Wexner. Na avaliação da qualidade de vida pelo SF-36 foi encontrada diferença estatisticamente significativa entre os grupos em somente um domínio, o da percepção geral de saúde. A gravidade do prolapso de parede vaginal posterior parece não aumentar as queixas de constipação e nem de incontinência fecal, mas parece piorar à qualidade de vida.

A análise quantitativa da excreção fecal de gordura (método de van de Kamer) permanece como o melhor e mais utilizado método de avaliação de pacientes suspeitos de alterações na digestão elou absorção de gorduras. No entanto, esta técnica é pouco aceita por todos os envolvidos na sua realização. Vários métodos foram propostos tentando solucionar questões como a manipulação de grandes quantidades de fezes. Uma destas técnicas é o esteatócrito, um método semiquantitativo de determinação da excreção fecal de gordura, descrito por PHUAPRADIT, NARANG, MENDONÇA et alli (1981). O método também sofreu críticas e, a partir destas, foram propostas modificações. Um dos objetivos deste trabalho foi o de estudar a técnica original e 5 modificações da mesma. Obtivemos 6 diferentes formas de realização do esteatócrito, a saber: 1) técnica clássica ( homogeneização por 1 minuto à temperatura ambiente); 2) homogeneização por 2 minutos à temperatura ambiente; 3) homogeneização por 1 minuto e material em banho-maria a 370 C por 24 horas; 4) homogeneização por 2 minutos nas mesmas condições de temperatura da técnica 3; 5} homogeneização por 2 minutos à temperatura ambiente com adição de ácido e corante lipídico e 6) como a técnica 5 mas em banho-maria a 750 C durante 10 minutos. Testes de correlação demonstraram que a técnica 2 é a mais adequada das 6 diferentes formas de realizar-se o esteatócrito. Seu coeficiente de correlação foi de 0,94. Para as demais, obtivemos os seguintes valores: técnica 1= 0,65; técnica 3= 0,65; técnica 4= 0,87; técnica 5= 0,74 e técnica 6= 0,73. Testes de variação intra e interensaio confirmaram a técnica 2 como a de melhor desempenho. Como mais uma alternativa ao método de van de Kamer, estudamos a determinação da concentração fecal de colesterol e triglicerídeos. Nosso objetivo era avaliar o desempenho da técnica. Obtivemos recuperação de 82,80 ± 14,200/0 para o colesterol e 113,24 ± 87,67% para os triglícerídeos. A variação nos resultados da determinação de colesterol não invíabilíza o seu uso na prática diária, o mesmo não é válido para os triglicerídeos (talvez sejam necessárias modificações na técnica para melhor desempenho). / The quantitative analysis of fecal fat excretion ( van de Kamer method) is still the best and most widely used method of evalutation of patients suspected of having alteration in their digestion and/or absorption of fats. However, this technique in not much accepted by everybody involved in its execution . Many methods have been proposed, trying to solve matters such as the manipulation of large quantities of feces. One of these techniques is the steatocrit, a semiquantitative method of determining the fecal fat excretion, described by PHUAPRADIT, NARANG, MENDONÇA et alii (1981). This method has also been criticized and, based on these critics, modofocations have been proposed. One of the objectives of this work was to study the original technique and five of its modifications. We obtained 6 different ways of executing the steatocrit, which are: 1) classic technique ( homogenization during 1 minute at environmental temperature); 2) homogenization during 2 minutes at environmental temperature; 3) homogenization during 1 minute and material in waterbath at 37° C for 24 hours; 4) homogenization during 2 minutes in the same temperature conditions as in technique 3; 5) homogenization during 2 minutes at environmental temperature with addition of acid and Iipid dyeing and 6) as in technique 5 but in water-bath at 75° C during 10 minutes. Correlation tests demonstrated that technique 2 is the most adequate of the 6 different forms of executing the steatocrit. tts coefficient of correlation was 0.94. For the others, we obtained the following values: techique 1= 0.65; technique 3= 0.65; technique 4= 0.87; technique 5= 0.74 and technique 6= 0.73. Intra and interexperiment variation tests confirmed technique 2 as being the one with the best performance. As an additional alternative to the van de Kamer method, we studied the determination of fecal concentration of cholesterol and triglycerides. Our objective was to evaluate the performance of the technique. We obtained a recuperation of 82.80±14.20% for cholesterol and 113.24±87.67°J'o for triglycerides. The variation in the results for the cholesterol determination does not render this technique unviable in daily practice. The same does not apply to triglycerides (maybe modifications in the technique are necessary for a better performance).

The study was aimed to obtain basic information about the distribution of intestinal parasites of mammals and birds in Svalbard. Faeces of different species were used to detect intestinal parasites. All samples were collected during two seasons and examined by microscopic methods and molecular diagnostic was used for detection of microsporidia, cryptosporidia, coccidia and giardiae.